Oi 12
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Tema: EXPRESION GENICA Subtema: Duplicacin del ADN Orientador: Pedro Patio
RESULTA ESENCIAL LA REPLICACIN EXACTA DEL ADN GENOMICO PARA LA VIDA DE TODAS LAS CELULAS Y LOS ORGANISMOS
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GENERALIDADES DE LA REPLICACIN Sucede cada vez que la clula se divide Durante la fase ? del Ciclo Cellr. Es un proceso Semiconservativo Se lleva a cabo en el Ncleo y la mitocondria Necesita de desoxirribonucleotidos 5 trifosfato Proceso cataltico: ADN POLIMERASA
ADN POLIMERASA
1956 : Arthur Kornberg : Identifico ADN Poli en lisados de E. coli. TIPOS: A) En procariotas (Poli I, II y III) B) En eucariotas (Poli , , , y ) : Replicacin del ADN mt , , y : Replicacin ADN nuclear , y : Replicacin en levaduras
ESPECIFICIDAD DE LA POLIMERASA Sintetizan en direccin 5 3 aadiendo dNTPs al grupo 3 OH Solo aaden dNTPs si hay cebadores unidos previamente a la hebra molde por el extremo 3 OH El antiparalelismo de las hebras de DNA hace que las polimerasas hagan sntesis de una cadena en forma continua y la otra retrazada.
TERMINOLOGA IMPORTANTE
REPLICON : Cada uno de los segmentos de DNA que sufren replicacin BURBUJA (OJO) DE REPLICACIN: Parte del replicn en la que ya se han separado las 2 cadenas de DNA y se estn replicando UNIDAD DE REPLICACIN: Conjunto de 20 a 80 replicones. En el ncleo pueden haber 20.000 replicones pero no todos ellos se activan a la vez, la activacin es secuencial por Unidad de replicacin durante la fase S del ciclo celular
comienza la replicacin y un final donde esta se detiene y contiene todos los elementos de control necesarios para la replicacin. En el genoma de procariotas existe un nico replicn, aqu la unidad de replicacin y de segregacin coinciden. FRAGMENTO DE OKASAKI: Pequeos fragmentos de ADN de aprox. 200 pb (2000 pb en procariotas)
PRIMOSOMA: Conjunto de protenas (enzimas) necesarias para la iniciacin de la replicacin del DNA (girasa y helicasa) REPLISOMA : Conjunto de protenas (enzimas)necesarias para la sntesis de las nuevas cadenas durante la replicacin del DNA (DNA Polimerasa) CEBADOR (PRIMER): Secuencia de RNA de aproximadamente 15 bp sintetizada a partir de la cadena molde
molculas de ADN, cada una de ellas compuesta de una hebra de el ADN original y de una hebra complementaria nueva. Es decir que las hebras existentes sirven de molde complementario a las nuevas
La replicacin del ADN, ocurre una sola vez en cada generacin celular Necesita de muchas enzimas (helicasa, girasa II, ADN Polimerasa, RNA Primasa, DNA Ligasa, etc.) Necesita de gran cantidad de energa en forma de ATP (recuerde que luego de la fase S del ciclo cellr las clulas pasan a una
Origen de la replicacin
En la clula eucaritica el En la clula proceso de replicacin procaritica la del replicacin parte ADN no empieza por los de un nico extremos de la molcula punto y progresa sino que parte de varios puntos a la vez y en ambas progresa en ambas direcciones direcciones hasta formando los llamados completarse. ojos de replicacin.
Replicacin en Procariotas
El origen de replicacin en E. coli es una secuencia de 245 pb que contiene una secuencia de 13 pb repetidas tres veces en tndem. Adems esta regin contiene cuatro zonas de unin a la protena DNA A que se encarga de separar las hlices para comenzar la replicacin. Cuando las molculas de ADN circular se replican se observan lo que se denominan "ojos o burbujas" de replicacin. La forma que adoptan los intermediarios de la replicacin se parece a de la letra griega
virus y bacterias con la replicacin de eucariontes radica en que los eucariontes poseen muchos orgenes de replicacin, probablemente debido a la enorme cantidad de ADN que poseen y a que su material hereditario en la inmensa mayora de los casos esta repartido en varias molculas de ADN distintas o varios cromosomas. Por tanto, los eucariontes tienen en cada cromosoma muchos orgenes de replicacin, y como consecuencia, muchos replicones
Replicacin en Eucariotas
ENZIMAS DE LA REPLICACIN
HELICASA: Rompe los puentes de hidrgeno que mantiene unidas las dos cadenas de DNA GIRASAS II (Topoisomerasas en procariotas): desenrrollan cada fibra de ADN parental delante de los puntos de bifurcacin de las orquillas de replicacin (cortan y vuelven a unir) PRIMASA (RNA PRIMASA): Sintetiza un ARN (Cebador o PRIMER) complementario al ADN molde de unos 30 nucleotidos en eucariotas (10 en procariotas)
ENZIMAS DE LA REPLICACIN
ADN POLIMERASA y (I, II y III en procariotas):Sintetiza la nueva cadena de DNA, uniendo nucletidos complementarios por el extremo 3 OH ADN LIGASA Une mediante enlaces fosfato los fragmentos de okasaki
Proceso de replicacin
1. La sntesis de ADN comienza sintetizando un corto segmento de ARN denominado cebador o primer, dicho cebador lo sintetiza un enzima denominado Primasa. La Primasa es una ARN polimerasa que utiliza como molde ADN. Todos los fragmentos de Okazaki comienzan por un Cebador. 2. Posteriormente, la Holoenzima de ADN polimerasa III lleva a cabo la sntesis del fragmento de ADN correspondiente hasta llegar al siguiente cebador.
Proceso de replicacin
3. La ADN polimerasa I sustituye a la Holoenzima de ADN polimerasa III. La ADN polimerasa I se encarga de retirar el ARN cebador mediante su actividad exonueotdica 5'P - 3' OH y al mismo tiempo rellena el hueco sintetizando ADN 4. Por ltimo, los dos fragmentos de Okazaki tienen que unirse, es necesario enlazar el extremo 3'OH de un fragmento con el 5'P del siguiente fragmento. Dicha labor de sellado y unin de los sucesivos fragmentos la realiza la Ligasa.
P R R E O P C L E I S C
PROTENAS ACCESORIAS
PROTEINAS DE ENGANCHE DE CARGA
Reconocen y se unen al ADN de la zona de unin entre el cebador y el molde: Complejo en E. coli y Factor de replicacin C en Eucariotas (RFC)
PROTEINAS DE ENGANCHE DESLIZANTES
Mantiene la unin ADN polimerasa con su molde durante la replicacin : sntesis ininterrumpida Protena en E. coli