HMATOLOGIE Revue du frottis sanguin

Revue microscopique
du frottis sanguin :
propositions du Groupe Francophone
dHmatologie Cellulaire (GFHC)
F. GENEVIVE1, A.C. GALOISY2, D. MERCIER-BATAILLE3,
O. WAGNER-BALLON4, F. TRIMOREAU5, O. FENNETEAU6,
F. SCHILLINGER7, V. LEYMARIE5,8, S. GIRARD9, C. SETTEGRANA10,
S. DALIPHARD11, V. SOENEN-CORNU12, M. CIVIDIN13, J.F. LESESVE14,
B. CHTELAIN15, X. TROUSSARD16, V. BARDET17
pour le Groupe Francophone dHmatologie Cellulaire

rsum

Malgr le perfectionnement des analyseurs automatiss dhmatologie destins la ralisation des hmogrammes, l'examen du frottis sanguin au microscope reste indispensable lorsque les donnes fournies par les appareils sont qualitativement ou quantitativement anormales ou demandent une confirmation. Si la plupart des critres conduisant lexamen
du frottis sanguin sont largement reconnus et utiliss, les pratiques de laboratoires restent cependant trs htrognes,
comme nous avons pu le constater lors dune enqute multicentrique. Dans le but de participer lharmonisation et
la standardisation des pratiques dhmatologie cellulaire indispensables dans le cadre de la dmarche daccrditation,
le Groupe Francophone dHmatologie Cellulaire (GFHC) a souhait revoir en dtail les critres de lhmogramme
requrant une analyse cytomorphologique du frottis sanguin et les encadrer par des recommandations minimales. Les
conclusions du GFHC prsentes dans cet article relvent dun accord professionnel fort et sont exposes avec leur
rationnel, dfinissant les seuils et les situations pour lesquels la revue du frottis sanguin est souhaitable. Elles sont proposes comme des recommandations minimales du GFHC, formules pour la vrification technique et la validation
biologique, chaque biologiste restant libre dutiliser des seuils plus restrictifs en fonction de son recrutement.

Laboratoire dHmatologie, CHU dAngers.

Laboratoire dHmatologie, CHU de Strasbourg.
3 Laboratoire dHmatologie, CHU Nord, Marseille.
4 Laboratoire dHmatologie, CHU H. Mondor, Crteil.
5 Laboratoire dHmatologie, CHU Dupuytren, Limoges.
6 Laboratoire dHmatologie, CHU R. Debr, Paris.
7 Laboratoire dHmatologie, EFS Franche-Comt, Besanon.
8 LABM, Brive la Gaillarde.
9 Laboratoire dHmatologie, Hospices Civils de Lyon / CH
Lyon Sud - Centre de Biologie Sud - Service d'hmatologie
cellulaire.
10 Laboratoire dHmatologie, CHU Piti-Salptrire.

Laboratoire dHmatologie, CHU de Reims.

Laboratoire dHmatologie, CHU de Lille.
13 Laboratoire dHmatologie, CH dAix-en-Provence.
14 Service dHmatologie biologique, CHU de Nancy, Vanduvre-ls-Nancy.
15 Laboratoire dHmatologie, CHU Mont-Godinne, Yvoir,
Belgique.
16 Laboratoire dHmatologie, CHU Cte de Nacre, Caen.
17 Service dHmatologie biologique, Hpitaux universitaires Paris Centre, INSERM U1016 UMR8104, Universit
Paris Descartes, Paris.

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VOL LV N 317 - MARS 2014

HMATOLOGIE Revue du frottis sanguin

mots-cls : frottis sanguin, critres dtalement, revue au microscope, formule optique.

I. - OBJECTIF ET MTHODOLOGIE

et propositions du groupe se sont bases sur une analyse

critique des recommandations dj diffuses dans la littrature (1-7), ainsi que sur un tat des lieux des pratiques
de laboratoire dress partir d'un panel de 39 laboratoires
ralisant quotidiennement un grand nombre d'hmogrammes et ayant accept de rpondre un questionnaire
sur les seuils et critres d'talement utiliss (http://
www.gfhc.fr/fr/actualites/theme-4-etudes-en-cours/id-69recommandations-sur-les-criteres-de-revue-des-frottissanguins). Ces laboratoires regroupaient 3 laboratoires
d'exercice libral, 7 laboratoires polyvalents de CHG et 29
laboratoires d'hmatologie de CHU. L'ensemble du parc
des principaux analyseurs d'hmatologie prsents sur le
march tait reprsent.

Malgr le perfectionnement des analyseurs automatiss

dhmatologie destins la ralisation des hmogrammes,
l'examen du frottis sanguin au microscope reste indispensable lorsque les donnes fournies par les appareils sont
qualitativement ou quantitativement anormales, ou demandent une confirmation. Il apporte alors des informations que lanalyseur dhmatologie seul ne peut pas
fournir, permettant dans nombre de cas la validation technique du rsultat, par exemple lorsque des alarmes de lautomate signalent des difficults didentification cellulaire
ou lexistence d'une possible interfrence. En outre, cest
de lanalyse morphologique que dcoule le plus souvent
un conseil au clinicien quant linterprtation et
la conduite tenir devant le rsultat anormal : certaines
hypothses diagnostiques peuvent ainsi tre cartes ou
bien la mise vidence danomalies morphologiques peut
parfois conduire un diagnostic plus prcis.

Les donnes de l'hmogramme automatis ont t reprises une une, prenant en compte les informations lies
au patient et la prescription de l'hmogramme, les valeurs normales de rfrences publies chez l'enfant et
l'adulte (8-13), les valeurs reconnues comme seuils probablement pathologiques de la numration globulaire et de
la formule leucocytaire, et les alarmes qualitatives communes aux diffrents analyseurs (dclenches avec le
rglage fournisseur ). Les situations initiales et les situations de suivi ont chaque fois t considres et l'utilit
d'un delta-check discute. En outre, le groupe bnficiant de l'exprience de plusieurs centres d'hmatologie
pdiatrique, les particularits concernant les enfants ont
t examines. Enfin, des valuations prospectives et rtrospectives ont permis de valider certains critres prtant
le plus discussion, soit du fait de leur impact sur le nombre de frottis gnrs, soit du fait dun consensus non
atteint au sein du groupe.

HMATOLOGIE Revue du frottis sanguin

Si la plupart des critres conduisant lexamen du frottis

sanguin sont largement reconnus et utiliss, les pratiques
des laboratoires restent cependant trs htrognes. Les
attitudes et les seuils de dcision peuvent en effet varier en
fonction de nombreuses raisons : nombre d'hmogrammes
raliss, profils de recrutement des patients, exprience et
habitudes des biologistes, type d'analyseur dhmatologie,
ressources humaines disponibles, attentes des cliniciens,
etc. Les efforts de rationalisation et de standardisation des
pratiques de laboratoire, impulss par les contraintes mdico-conomiques et la mdicalisation de plus en plus reconnue du rle des biologistes, ont donn lieu ces
dernires annes la publication de recommandations
dans la littrature internationale (1-7). Si des diffrences
persistent, toutes les attitudes prconises tendent vers la
pertinence clinique de la revue du frottis sanguin et un
message hmato-cytologique ayant pour objectif la prise
en charge optimale des patients. De fait, les seuils utiliss
peuvent scarter parfois trs nettement des valeurs reconnues comme normales (8-13).

Les conclusions du groupe relvent dun accord professionnel fort et sont exposes ci-aprs avec leur rationnel, dfinissant les seuils et les situations pour lesquelles la
revue du frottis sanguin est souhaitable. Elles sont proposes comme recommandations minimales du GFHC, formules pour la vrification technique et la validation
biologique, et se veulent applicables par tous les laboratoires d'exercice libral, de CHG ou de CHU, sans prjuger du type ou de la marque de lanalyseur dhmatologie
utilis. Elles tiennent pour pralablement acquis le strict
respect des recommandations en vigueur concernant la
phase pranalytique de l'hmogramme (15, 16), ainsi
qu'une bonne connaissance de l'automate et de sa qualification selon la norme ISO15189 (17) par le biologiste
pour adapter au mieux les recommandations sa pratique
quotidienne.

Dans le but de participer cette harmonisation/standardisation des pratiques dhmatologie cellulaire et d'aider les biologistes dans leur dmarche daccrditation, le
Groupe Francophone dHmatologie Cellulaire (GFHC)
a souhait revoir en dtail les critres de lhmogramme
requrant une analyse cytomorphologique du frottis sanguin et les encadrer par des recommandations minimales.
Dans l'esprit du travail initi en 2002 par Berend Houwen
et ayant abouti en 2005 aux recommandations du groupe
de consensus de l'International Society of Laboratory of
Hematology (ISLH)(1), un groupe de travail constitu de
17 experts francophones en hmatologie cellulaire adulte
et/ou pdiatrique manant de centres hospitaliers universitaires (CHU), de centres hospitaliers gnraux (CHG)
et de centres avec activit librale, s'est runi lors de trois
journes en mai et juin 2013 pour rexaminer les critres
de l'hmogramme automatis justifiant ou ncessitant
l'examen microscopique du frottis sanguin. Les rflexions

II. - DFINITIONS
DES TERMES UTILISS ET CONVENTIONS
A) Notions de situation initiale et de suivi
Les termes de premire fois ( initial , first time )
et de suivi ( follow up ) souvent utiliss dans les
recommandations publies dans la littrature peuvent
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Revue du frottis sanguin

de situation. Selon lventuelle association de plusieurs

types danomalies ou de lexistence dautres indicateurs
donns par les automates dhmatologie, elles peuvent
tre modules et adaptes par les biologistes dans la mesure o ces renseignements complmentaires rendent
plus sensible et plus spcifique la recherche des anomalies
morphologiques.

prsenter des nuances qu'il faut veiller prendre en

compte pour lcriture des procdures standardises de
laboratoire. Concernant le processus de vrification technique ou de validation biologique conduisant lexamen
du frottis sanguin, nous considrons une situation ou une
anomalie de lhmogramme comme initiale dans trois
cas : a) absence dantriorit dhmogramme disponible
pour le patient ; b) anomalie non prsente sur lhmogramme prcdent ; c) hmogramme ralis au-del dun
certain dlai coul depuis le dernier examen cytomorphologique (> 90 jours pour un adulte, > 30 jours pour un
enfant). Dans les trois cas, le rsultat anormal peut tre
observ pour la premire fois chez le patient, traduisant
une situation clinique nouvelle ou volutive, que lexamen
du frottis pourra aider diagnostiquer ou prciser. Dans
le troisime cas, lanomalie observe peut aussi tre dj
connue, au cours dune pathologie chronique par exemple : un nouvel examen cytomorphologique se justifie
alors au-del dun certain dlai pour dtecter une possible
modification de la situation hmatologique du patient
(par exemple, lapparition au cours du temps danomalies
morphologiques ou dun petit nombre de blastes circulants dans le cadre dun syndrome mylodysplasique). Par
convention, nous retenons donc comme repre la dernire antriorit comportant un examen microscopique
du frottis sanguin et non le dernier hmogramme du
patient.

A) Recommandations relatives aux informations

concernant le patient
1) Faut-il revoir systmatiquement les frottis sanguins en
fonction de la classe d'ge des patients ?
Lge du patient n'apparat pas un critre en soi chez
l'adulte. Au cours de la premire semaine de vie aprs la
naissance, l'examen du frottis est prconis au moins lors
dun premier hmogramme, en raison de la frquente
rythroblastmie (voir plus loin Indications relatives la
formule leucocytaire ). Chez lenfant de moins dun an
hospitalis en service de pdiatrie spcialise, le frottis systmatique lors du premier hmogramme est conseill, la
plupart des pathologies hmatologiques constitutionnelles
se dclarant lors de la premire anne de vie et ne se
traduisant pas toujours par un hmogramme automatis
anormal (par exemple : sphrocytose hrditaire, elliptocytose hrditaire, maladie de surcharge...). En dehors de
ce contexte, un rsultat rendu par lautomate ne prsentant pas danomalie quantitative ou qualitative peut tre
valid. Cependant, en pratique cet ge, les alarmes qualitatives des automates sont trs frquentes et ncessitent
presque systmatiquement la revue du frottis sanguin.

Une mme anomalie constate sur des hmogrammes

conscutifs chez un patient adulte tant trs souvent lie
une pathologie chronique, peut justifier de ne pas ritrer trop souvent et inutilement lexamen du frottis, tout
en nignorant pas cependant la survenue dune situation
nouvelle. Au vu des diffrentes anomalies considres, un
dlai maximal de 90 jours entre deux examens du frottis
nous apparat comme un bon compromis pour valider les
rsultats de lhmogramme. Chez lenfant, le dlai retenu
est de 30 jours, les anomalies de lhmogramme traduisant
des situations cliniques beaucoup plus souvent aigus que
chroniques.

B) Enfant / adulte

En analysant les rponses lenqute concernant les

pratiques locales dtalement, la question de revoir systmatiquement les frottis pour les chantillons provenant
de prescripteurs particuliers sest pose (par exemple :
hmogrammes d'onco-hmatologie, de pdiatrie...). Une
relecture systmatique du frottis est retenue comme ncessaire pour les patients d'onco-hmatologie pdiatrique,
non connus ou sans examen cytomorphologique rcent
disponible, du fait notamment de la mauvaise sensibilit
des automates dtecter les lymphoblastes quand ceux-ci
sont prsents en faible nombre (18). Hormis ce cas particulier, le critre nest pas retenu comme devant justifier
lui seul l'examen du frottis : le biologiste peut faire
confiance son automate, la condition de respecter les
autres critres dtalement et davoir pralablement qualifi lautomate.

Un sujet adulte est dfini par un ge suprieur ou gal

15 ans, un enfant par un ge infrieur 15 ans.

3) Renseignement permanent associ aux informations

concernant le patient

En dehors de ces situations dcrites, le patient est considr en suivi et le contexte clinico-biologique est
suppos suffisamment bien identifi par le biologiste : en
labsence de tout lment nouveau ou de critre imposant
lexamen systmatique du frottis, le rsultat pourra tre
valid sans recourir un nouvel talement, celui-ci ne prsentant a priori pas de relle valeur ajoute.

Chez un patient prsentant une anomalie identifie

une premire fois, lenregistrement dun commentaire
permanent associ aux informations le concernant peut
tre utile pour traiter et valider de faon plus scurise et
plus rapide les hmogrammes raliss ultrieurement. Par
exemple, la prsence de cryoglobuline ou encore un ph-

III. - RECOMMANDATIONS GFHC DE REVUE

MICROSCOPIQUE DU FROTTIS SANGUIN
Les indications proposes ci-aprs ont t tablies en
considrant individuellement chaque type danomalie ou
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2) Mdecin prescripteur ou service d'hospitalisation

Tableau I - Indications d'examen du frottis sanguin relatives aux informations concernant le patient.
Adulte

Sans objet

Enfant

< 8 jours, situation initiale ; < 12 mois, pdiatrie spcialise, situation initiale

Mdecin prescripteur
ou service d'hospitalisation

Adulte

Sans objet

Enfant

Onco-hmatologie pdiatrique, premire analyse

Information patient

Adulte/Enfant

Message permanent (ex. : cryoglobulinmie connue, leucoagglutination connue, etc.)

Prescription spcifique

Adulte/Enfant

Prescription spcifique danalyse morphologique

Prescription associe de mylogramme ou d'immunophnotypage
Recherche de schizocytes : mode opratoire spcifique du laboratoire

ge

nomne de leuco-agglutination, peut constituer un pige

de la numration globulaire, parfois mme sans quaucune anomalie quantitative ou qualitative ne soit associe
et ne permette de dceler lerreur analytique. Un message
permanent signalant le fait chez le patient peut tre utilis
comme critre pour dclencher une action spcifique
comme une analyse 37C de lchantillon ou la revue du
frottis sanguin.

4) Prescription spcifique danalyse morphologique

Elle implique ncessairement un examen du frottis et
le rendu d'un commentaire explicite l'attention du mdecin prescripteur. En absence de cellules anormales
(ractionnelles ou tumorales), la formule automatise,
plus prcise, est rendue prfrentiellement la formule
microscopique. La demande de recherche de schizocytes
peut tre gre diffremment, le biologiste responsable
pouvant dcider de la ncessit ou non d'un talement
selon qu'il utilise et a qualifi pour cela un automate
dtectant et quantifiant les fragments rythrocytaires (19).
En cas de dnombrement requis, les schizocytes seront
compts selon les recommandations rcemment publies
(20).

5) Prescription associe l'hmogramme

d'un mylogramme ou d'un immunophnotypage

HMATOLOGIE Revue du frottis sanguin

L'examen du frottis sanguin est de bonne pratique,

sinon indispensable pour guider ou complter l'interprtation de ces examens.
La synthse des critres dtalement lis une information relative au patient est prsente dans le tableau I.

B) Indications d'examen du frottis sanguin relatives

aux rsultats de la numration globulaire
1) Numration leucocytaire
a) Anomalies quantitatives
En situation initiale, la valeur de la leucocytose napparat
pas en soi un bon critre dcisionnel pour la ralisation
d'un frottis, les donnes quantitatives et/ou qualitatives de
la formule automatise semblant plus utiles. En cas de leucopnie ou dhyperleucocytose, il est recommand danalyser l'chantillon en mode formule automatise si cette
dernire n'est pas systmatiquement ralise d'emble.

En situation de suivi, dans le cas particulier des patients

recevant ou ayant reu une chimiothrapie mylo-suppressive,
il est recevable de ne pas raliser de formule leucocytaire
en cas de leucopnie < 1,0 G/l, si un accord pass entre le
prescripteur et le laboratoire le prvoit. En dessous de ce
seuil, si le suivi clinique requiert imprativement la numration des polynuclaires neutrophiles, le rsultat de l'automate peut tre dlivr, le compte rendu mentionnant
que la formule leucocytaire est celle de lautomate. Pour
les patients atteints dhmopathie, la rcupration dun
taux de leucocytes 1 G/l est une indication lexamen
du frottis sanguin, celui-ci devant sattacher rechercher
des cellules anormales tmoignant dune mauvaise rponse
au traitement reu. Le biologiste rend alors la formule la
plus adapte, du microscope ou de lautomate, selon quil
a ou non observ la prsence de cellules pathologiques.

b) Alarmes qualitatives
Tout message de lanalyseur traduisant un manque de
fiabilit du compte des leucocytes doit faire interprter et
valider le rsultat avec une grande vigilance et selon les
directives prconises par le fabricant. Une revue microscopique du frottis sanguin est utile pour identifier certains types dinterfrences et pour guider la validation
technique du rsultat (21, 22).

2) Numration plaquettaire et indices plaquettaires

a) Anomalies quantitatives
Thrombocytose
En cas de thrombocytose (plaquettes > 450 G/l) observe en situation initiale, un examen du frottis peut tre
utile pour mettre en vidence certaines causes dinterfrences l'origine d'un compte faussement lev des
plaquettes (cryoglobulines, fragments dhmaties, dbris
cellulaires...) (20). Une fois le rsultat des plaquettes considr comme exact, le frottis sanguin peut orienter mais
ne revt pas de caractre impratif, napportant gnralement pas dargument formel pour affirmer lexistence
dun syndrome myloprolifratif (fragments de mgacaryocytes circulants possibles au cours de la thrombocytmie essentielle, ou encore excs de basophiles, mal
identifis par certains types dautomates, pouvant rvler
une exceptionnelle leucmie mylode chronique dans
une forme thrombocytmique pure). Les rsultats avec

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feuillets de Biologie
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Revue du frottis sanguin

Thrombopnie
Dans le cadre d'une thrombopnie (plaquettes < 150 G/l),
observe soit en situation initiale, soit au cours dun suivi
mais avec un rsultat hors delta-check, la recherche d'une
interfrence l'origine d'un compte faussement diminu
des plaquettes est la premire tape systmatiquement
mene (recherche de caillot, d'amas, de fibrine, de macroplaquettes...) (20). Sur la base des courbes publies par
Berend Houwen (23), le delta-check retenu est de
50 %, avec un calcul se basant sur le rsultat antrieur. En
labsence d'interfrence identifie, l'examen cytomorphologique du frottis sanguin est imprativement ralis chez
l'adulte si la thrombopnie est infrieure 100 G/l, seuil
en dessous duquel la mise en vidence d'anomalies dintrt clinique devient plus frquente. Libert est bien entendu laisse aux biologistes le dsirant d'utiliser un seuil
plus contraignant , compris entre 100 et 150 G/l, ce
dautant quil existe dautres anomalies/cytopnies associes. L'examen se concentrera sur la recherche d'anomalies leucocytaires (cellules anormales malignes ou
ractionnelles, signes de dysmylopose), rythrocytaires
(schizocytes, parasites intra-rythrocytaires...), et plaquettaires. Chez l'enfant de moins de 15 ans, la possibilit
d'une anomalie constitutionnelle des plaquettes fait prfrer le seuil de 150 G/l pour dcider de lexamen microscopique.
Anomalie du volume plaquettaire moyen
Le volume plaquettaire moyen (VPM) ne fait pas partie
des paramtres rendre systmatiquement sur le compte
rendu de lhmogramme (14), mais est dtermin par la
plupart des analyseurs dhmatologie. Sa valeur est sujette
une grande variabilit selon le type ou la marque de lautomate utilis (24), mais les valeurs de 6 ou 7 fl semblent
cependant correspondre la valeur infrieure la normale pour les tous les types dappareils actuellement sur
le march. Chez un patient non connu prsentant une
thrombopnie < 150 G/L, un examen cytomorphologique
des plaquettes en cas de VPM < 7 fl est potentiellement
utile, de mme en cas de VPM retrouv au-del de la valeur
normale haute indique par le fournisseur, ou en cas dautre paramtre ventuellement rendu tmoignant de la
prsence de grandes plaquettes.

b) Alarmes qualitatives et anomalies des graphes

de lanalyseur
Suspicion d'amas plaquettaires
Quel que soit le rsultat de numration plaquettaire
rendu par lanalyseur, loprateur doit en situation initiale
contrler labsence de coagulum dans lchantillon puis
rechercher des agrgats plaquettaires, soit par examen du
frottis sanguin color, soit par examen au microscope en
contraste de phase dune goutte de sang ltat frais entre
lame et lamelle.

En cas de prsence damas plaquettaires, le rsultat de

la numration plaquettaire est remplac sur le compte
rendu par le terme amas ou agglutinats . Si, pour indication au mdecin clinicien, le biologiste souhaite dlivrer le rsultat par dfaut rendu par lautomate, il doit le
rendre sous forme d'un commentaire, afin que le rsultat
mentionn ne soit pas pris tort comme un rsultat exact.
La conduite tenir sera la mme en cas de rptition de
lalarme sur les prlvements ultrieurs.
En absence damas plaquettaires ou autre interfrence
diminuant artificiellement le nombre des plaquettes, le rsultat de la numration plaquettaire peut tre rendu et la
vrification ralise doit tre trace. Si lalarme se rpte
lors de lanalyse des chantillons suivants, la recherche
damas peut ne pas tre ralise de nouveau et le rsultat
des plaquettes peut tre rendu.
Autres alarmes ou anomalies des graphes
ddis aux plaquettes
Elles sont pour la plupart redondantes avec celles lies
la numration et la rpartition des globules rouges pour
lesquelles les recommandations de revue du frottis sont
exposes ci-aprs.

3) Numration rythrocytaire, taux d'hmoglobine

et indices rythrocytaires, rticulocytes
a) Anomalies quantitatives
Polyglobulie
Devant un rsultat montrant une polyglobulie (taux
d'hmoglobine > normale pour l'ge et le sexe), l'examen
du frottis sanguin n'apporte pas de valeur ajoute en situation initiale comme dans le suivi.
Anmie
La constatation dune anmie peut dans certaines situations permettre de dtecter un problme pranalytique
ou analytique, ou une pathologie chez le patient. Lorientation, aprs vrification de l'absence de coagulation dans
le tube, est souvent guide par la variation associe dautres
paramtres (volume globulaire moyen, leucocytes, plaquettes, rticulocytes...).
Chez ladulte, en dehors de tout contexte vident
dhmorragie, devant une anmie normo- ou macrocytaire < 10 g/dl observe, soit initialement, soit au cours
du suivi avec une diffrence > 25 % par rapport au rsultat
prcdent, il est conseill de raliser en premier lieu une
numration des rticulocytes. Cette dmarche vise essentiellement dtecter rapidement les situations danmie
hmolytique et lexamen du frottis est alors prconis en
cas d'hyperrticulocytose. Bien que la Socit Franaise
d'Hmatologie retienne un nombre de rticulocytes > 150 G/l
pour qualifier une anmie de nettement rgnrative
(25), le groupe prconise d'utiliser un nombre > 120 G/l
pour dcider de l'talement sanguin.
En cas danmie svre non connue (< 8 g/dl, seuil clinique de discussion transfusionnelle), lexamen du frottis

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feuillets de Biologie
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HMATOLOGIE Revue du frottis sanguin

thrombocytose observs ultrieurement ne ncessitent pas

de nouvel talement.

sanguin est indispensable, la recherche danomalies morphologiques ou de cellules anormales. Si lanomalie est
nouveau constate ultrieurement, la revue du frottis
sanguin n'offre pas de valeur ajoute si l'anciennet du
dernier examen morphologique ne dpasse pas 90 jours.
Chez lenfant, une numration des rticulocytes est
conseille devant la dcouverte dune anmie normo- ou
macrocytaire < 9 g/dl. Un examen morphologique du
frottis sanguin est prconis devant toute anmie < 9 g/dl
observe, soit en premire analyse, soit avec une diffrence
> 25 % par rapport au rsultat prcdent. La revue du frottis n'offre pas de valeur ajoute si l'anciennet du dernier
examen morphologique ne dpasse pas 30 jours.
Anomalie du volume globulaire moyen (VGM)
Chez les enfants gs de moins de 6 mois, le VGM nest
pas un paramtre suffisamment informatif pour dcider
dun talement.

HMATOLOGIE Revue du frottis sanguin

Au-del de cet ge, en premire visite et aprs avoir limin une situation artfactuelle, une macrocytose (> 85 fl
de 6 mois 2 ans ; > 95 fl de 2 15 ans ; > 105 fl chez
l'adulte) justifie la recherche d'une tiologie par la ralisation d'une numration des rticulocytes et l'examen
cytomorphologique du frottis sanguin. Lors des hmogrammes ultrieurs, tant que le dernier rsultat n'excde
pas 90 jours chez l'adulte et 30 jours chez l'enfant, la revue
du frottis sur la base de ce seul critre n'offre pas de rel
intrt. On tiendra compte cependant dventuelles variations importantes du VGM (> 5 %) pour dpister les
erreurs didentit ou les prlvements effectus sur voies
de perfusion (macrocytose hypochrome).
En cas de microcytose (VGM < 70 fl entre 6 mois et 2 ans ;
< 72 fl entre 2 ans et 6 ans ; < 75 fl au-del de 6 ans), l'tude
de la morphologie rythrocytaire est ventuellement utile
lors d'un premier prlvement pour dpister et orienter
le diagnostic dune anomalie constitutionnelle de lhmoglobine. Une prestation de conseil formule partir de
linterprtation des valeurs de l'hmoglobine et des autres
paramtres rythrocytaires sera souvent d'un meilleur rapport, signalant l'existence d'une probable carence martiale
et l'intrt dun bilan martial et inflammatoire, ou la possible existence d'une hmoglobinopathie pouvant justifier
la ralisation dune lectrophorse de l'hmoglobine.

tose avec macrocytose, et/ou anisocytose avec microcytose

peut tre associ au rsultat. Il napparat pas utile de renouveler lexamen pour ce seul critre dans la priode de
suivi.
Anomalie de la concentration corpusculaire moyenne
en hmoglobine (CCMH)
Une valeur anormalement leve de la CCMH (> 36 ou
37 g/dl selon lautomate) ncessite en premier lieu de rechercher une interfrence (22). En labsence de celle-ci,
lexamen du frottis est prconis la recherche dune anomalie corpusculaire (sphrocytes, hmaties en cibles vocatrices dhmoglobinose C). Il apparat redondant de
dclencher ltalement du frottis en raison dune valeur
basse de la CCMH, celui-ci tant gnr par ailleurs selon
la valeur de lhmoglobine et/ou du VGM.
Anomalie de la numration des rticulocytes
Un nombre de rticulocytes > 120 G/l (anomalie initiale)
correspond une augmentation de l'rythropose mdullaire et justifie une analyse morphologique des hmaties
la recherche danomalies en rapport avec une hmolyse.
Cette recommandation est indpendante du taux dhmoglobine associ, celui-ci pouvant tre normal ou subnormal en cas danmie hmolytique bien compense.

b) Alarmes qualitatives et anomalies des graphes

des analyseurs
Alarme Fragments rythrocytaires
La revue du frottis est prconise en cas dassociation
de cette alarme avec une anmie et/ou une thrombopnie.
Double population rythrocytaire
Alarme gnralement associe une anisocytose importante (voir plus haut), justifiant lexamen du frottis en
situation initiale et hors contexte connu de transfusion.
Rsistance la lyse des globules rouges
La revue du frottis est ncessaire pour une analyse morphologique des hmaties et la ralisation de la formule
leucocytaire, celle rendue par lautomate tant potentiellement errone.
Rejet de la numration des rticulocytes ou anomalie
du graphe des rticulocytes

Anisocytose rythrocytaire
En situation initiale et en dehors dun contexte connu
de transfusion avec double population rythrocytaire, le
groupe recommande comme lISLH lexamen du frottis en cas danomalie importante de la rpartition volumtrique des hmaties (IDR, indice de distribution des
globules rouges ou CVGR, coefficient de variation du
volume des globules rouges > 22 %). Outre la recherche
danomalies morphologiques, le rsultat est interprter
avec le graphe de distribution des hmaties et l'existence
ou non d'une anmie associe. Le VGM perdant dans ce
cas son caractre informatif, un commentaire anisocy-

Lanalyse critique du graphe en cas danomalie ou

dalarme gnre par lautomate est importante pour
dcider dune numration des rticulocytes au microscope
sur frottis color au bleu de Crsyl. Sur les automates fournissant linformation, il est important de vrifier la cohrence entre la valeur absolue des rticulocytes et leur
niveau de fluorescence. En cas dhyperrticulocytose > 120
G/l, il est conseill de raliser un frottis sanguin pour
rechercher des anomalies morphologiques des hmaties.
La synthse des critres dtalement lis une anomalie
de la numration est prsente dans le tableau II.

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Tableau II - Indications d'examen du frottis sanguin relatives aux rsultats de la numration globulaire.
Adulte/Enfant

Patients atteints d'hmopathie maligne, en sortie d'aplasie

(leucocytes 1,0 G/l sur le rsultat actuel et < 1,0 sur le rsultat prcdent)

Adulte

< 100, en situation initiale

> 450, en situation initiale

Enfant

< 150, en situation initiale

Adulte/Enfant

< 7, en situation initiale avec plaquettes < 150 G/l

> valeur limite suprieure (fournisseur), en situation initiale avec plaquettes < 150 G/l

Adulte

< 8, en situation initiale

< 10, en situation initiale avec rticulocytes > 120 G/l

Enfant

< 9, en situation initiale

Adulte

> 105, en situation initiale

< 75, en situation initiale

Enfant

> 85 (6 mois 2 ans), > 95 (2 15 ans), en situation initiale

< 70 (6 mois 2 ans), < 72 (2 6 ans), < 75 (au-del de 6 ans), en situation initiale

Plaquettes (G/l)

Volume plaquettaire moyen

(fl)

Hmoglobine (g/dl)

Volume globulaire moyen

(fl)

Concentration corpusculaire
Adulte/Enfant
moyenne en hmoglobine
(g/dl)

> limite normale suprieure, en absence d'interfrence

Index de distribution
volumtrique des globules
rouges (CV %)

Adulte/Enfant

> 22 %, en situation initiale, hors contexte connu de transfusion de globules rouges

Rticulocytes (G/l)

Adulte/Enfant

> 120, en situation initiale

C) Indications relatives la formule leucocytaire

1) Prsence de cellules anormales sur lantriorit
Chez un patient prsentant des cellules malignes dtectes lors de la formule leucocytaire immdiatement
prcdente, il nest pas licite de rendre la formule automatise sans examen pralable du frottis sanguin (mme
si le rsultat est assorti d'un commentaire mentionnant
que le patient est connu avec des cellules pathologiques).
Si lexamen montre la persistance des cellules malignes,
la formule est raliser au microscope. Dans le cas particulier du suivi de la leucmie lymphode chronique, c'est
la formule automatise qui est prfrentiellement rendue,
en raison du risque de surestimation des populations non
lymphocytaires au microscope. Dans le cadre des autres
hmopathies lymphodes chroniques petites cellules
matures, les cellules lymphodes normales et anormales
peuvent tre regroupes dans le compte lymphocytaire, le
compte rendu signalant par un commentaire la persistance de cellules lymphodes pathologiques.

2) Prsence drythroblastes
Quils soient ou non comptabiliss par lautomate, la
premire dtection drythroblastes circulants chez un
patient (en dehors de la priode nonatale) revt un
caractre pathologique et justifie la ralisation dun frottis
sanguin la recherche danomalies associes des autres
lignes. Sils nont pas t quantifis par lautomate, les
rythroblastes seront dcompts en parallle des leucocytes afin de corriger le nombre de ceux-ci. La prsence
drythroblastes sur lantriorit dun patient justifie le
passage sur lautomate dans un mode permettant la dtec-

tion des rythroblastes (formule ou canal spcifique). Le

frottis nest pas ncessaire pour le suivi en dehors du cas
o lautomate ne quantifie pas les rythroblastes, justifiant
alors la ralisation dune formule microscopique.

3) Prsence dune anomalie quantitative dune

sous-population leucocytaire
a) Neutropnie
En cas de neutropnie < 1,5 G/l observe en situation
initiale, l'examen microscopique du frottis sanguin est
impratif, afin de dtecter les fausses neutropnies par
agglutination (26), de rechercher la prsence de cellules
pathologiques ou de dtecter des anomalies morphologiques. Une technique de leucoconcentration ou le paramtrage spcifique d'un microscope automatis le cas
chant, peut ventuellement tre mis en uvre pour rendre plus sensible la recherche des cellules anormales. En
labsence danomalie sur le frottis, il est prfrable de rendre la formule de lautomate en raison des imprcisions
lies au dcompte sur 100 lments pour des lments peu
reprsents (27). Pour les hmogrammes raliss ultrieurement chez un adulte, le frottis sanguin est conseill si
lexamen microscopique prcdent date de plus de 90
jours, a fortiori si la neutropnie se majore (une diffrence
de 30 % est propose). Il sera refait au-del de 30 jours sil
sagit dun enfant.

b) Polynuclose neutrophile
Contrairement ce que prconise lISLH, la ralisation
d'un frottis ne nous parat pas devoir tre motive par une
polynuclose neutrophile, quelle que soit son importance,

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Leucocytes (G/l)

si elle reste isole. L'examen microscopique n'offre dans

cette situation pas de vritable valeur ajoute au rsultat
de l'automate et il n'existe pas notre connaissance d'interfrence analytique morphologiquement identifiable
pouvant se traduire isolment par ce type d'anomalie (28).

c) Hyperosinophilie
En situation initiale, la revue du frottis est prconise
en cas de nombre de polynuclaires osinophiles > 1,5 G/L.
Lexamen permettra parfois la mise en vidence de microfilaires, ou de cellules lymphomateuses, certains lymphomes (surtout de la ligne T) pouvant tre associs
une hyperosinophilie (29). En situation de suivi, la revue
du frottis napporte pas dinformation supplmentaire.

d) Hyperbasocytose
En situation initiale, un nombre de polynuclaires basophiles > 0,3 G/L et/ou reprsentant > 3 % des leucocytes justifie lexamen microscopique afin de rechercher
des anomalies en faveur dun syndrome myloprolifratif
ou la prsence de leucocytes anormaux parfois classs en
polynuclaires basophiles par certains automates (cellules
lymphomateuses, cellules de surcharge dans le cadre des
mucopolysaccharidoses) (30). En cours de suivi, la revue
du frottis nest pas ncessaire.
e) Hyperlymphocytose
En situation initiale chez ladulte et lenfant de plus de
12 ans, la revue du frottis sanguin est recommande pour
la recherche de cellules anormales (ractionnelles ou malignes) en cas de lymphocytose > 5 G/L. Chez lenfant de
moins de 12 ans, les seuils proposs sont de 11 G/l (ge
< 2 ans), 9 G/L (ge 2 ans et < 6 ans), et 6 G/l (ge
6 ans et < 12 ans). En labsence de cellules anormales, la
formule de lautomate est prfrable la formule microscopique. Pour une hyperlymphocytose nouveau observe sur les hmogrammes ultrieurs, la ralisation dun

frottis sanguin est recommande si le dernier examen

microscopique remonte plus de 90 jours chez un adulte
et plus de 30 jours chez un enfant.

f) Lymphopnie
La constatation dune lymphopnie sur un rsultat
dhmogramme est une situation relativement frquente,
mais en identifier la cause par lexamen du frottis sanguin
est en revanche une occurrence trop rare pour retenir
cette anomalie comme critre dtalement. Les lymphoagglutinations in vitro EDTA-dpendantes sont exceptionnelles et restent sans consquences cliniques (31).
g) Monocytose
La revue du frottis sanguin est prconise devant une
monocytose > 1.5 G/l dcouverte sur un premier hmogramme, quel que soit lge du patient. Elle permet de vrifier la ralit de la monocytose, diverses situations
pouvant rendre malaise l'identification des monocytes
par les automates d'hmatologie (dficit en myloperoxydase, prsence de cellules anormales localises prs du
nuage monocytaire, activation des monocytes au cours des
tats infectieux svres...) (28). Elle permet galement
de rechercher des anomalies morphologiques et/ou des
cellules malignes pouvant orienter vers une pathologie
monocytaire aigu ou chronique.
Au cours du suivi, une monocytose > 1,5 G/l persistant
plus de 30 jours fait recommander un nouvel examen du
frottis, particulirement orient vers la recherche danomalies en faveur dune leucmie mylo-monocytaire chronique ou dune leucmie mylo-monocytaire juvnile.
Une monocytose apparaissant en cours dhospitalisation
est le plus souvent ractionnelle et transitoire (dans un
contexte chirurgical par exemple) ; elle justifie un contrle
morphologique si elle est importante (seuil dfinir par
chaque laboratoire).

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Tableau III - Indications d'examen du frottis sanguin relatives aux rsultats de la formule leucocytaire.
Rsultat prcdent

Adulte/Enfant

Prsence de cellules malignes sur le rsultat prcdent

Prsence d'rythroblastes sur le rsultat prcdent
(si non numrs automatiquement par l'analyseur)

rythroblastes

Adulte/Enfant

Prsence d'rythroblastes dtecte par l'analyseur, en situation initiale ou chaque

fois si non numrs automatiquement par l'analyseur

Polynuclaires neutrophiles

Adulte/Enfant

< 1,5 G/l, en situation initiale

Polynuclaires osinophiles

Adulte/Enfant

> 1,5 G/l, en situation initiale

Polynuclaires basophiles

Adulte/Enfant

> 0,3 G/l et/ou > 3 %, en situation initiale

Adulte

> 5 G/l, en situation initiale

Enfant

> 9 G/l (2 6 ans), > 6 G/l (6 12 ans), > 4 G/l (> 12 ans), en situation initiale

Adulte/Enfant

> 1,5 G/l, en situation initiale

> 1,5 G/l, persistant plus de 30 jours
> seuil dfinir par chaque laboratoire en cas de monocytose survenant
en cours d'hospitalisation

Lymphocytes

Monocytes

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h) Monocytopnie
Une monocytopnie sanguine absolue est presque toujours observe au cours de la leucmie tricholeucocytes
et sa constatation sur lhmogramme automatis devrait
en thorie reprsenter un bon critre pour dclencher la
recherche microscopique de ces lments pathologiques.
En pratique cependant, les tricholeucocytes sont dans la
plupart des cas compts tort comme des monocytes par
les analyseurs et la formule automatise ne montre alors
pas de monocytopnie... De ce fait, cest bien davantage la
constatation dune neutropnie chez un adulte dge mr
qui doit notre sens inciter le biologiste rechercher des
tricholeucocytes sur le frottis sanguin.
4) Alarmes qualitatives et anomalies des graphes
leucocytaires
Alarme Dviation gauche
La revue du frottis et la ralisation dune formule
optique ne sont pas ncessaires dans ce cas. Les indices de
diffraction permettant de dtecter une hyposegmentation
ou une hypogranularit semblent plus intressants utiliser lorsquils sont disponibles, afin de dtecter la dysplasie
granulocytaire.
Alarme Granulocytes immatures
En situation initiale ou en suivi, cette alarme ncessite
la ralisation dune formule optique si lautomate neffectue pas la quantification de cette population. Avec les
automates qualifis pour ce type de numration et en fonction des recommandations du fabricant, il est prconis
de revoir le frottis en situation initiale, mais celui-ci napparat pas indispensable au cours du suivi.
Alarmes Lymphocytes anormaux ? et Blastes ?
Ces alarmes imposent, chaque fois, la ralisation du
frottis sanguin. En labsence de cellules anormales (ractionnelles ou malignes), la formule de lautomate est prfrentiellement rendue.
Graphe leucocytaire anormal, sans alarme gnre
par lautomate

blies en reprenant une une les anomalies quantitatives

et qualitatives de lhmogramme, guids par le double objectif de conserver une bonne sensibilit diagnostique tout
en gardant une matrise du nombre des talements. Lajustement consensuel des seuils proposs devrait permettre
dviter la ralisation dun nombre insuffisant dtalements, situation pouvant conduire ignorer des erreurs
analytiques ou des situations pathologiques, et a contrario
la ralisation dun nombre excessif de frottis, source dune
drive des cots (ractifs, temps technicien, temps biologiste)
et potentielle source derreur (baisse du niveau danalyse
critique et du seuil de vigilance de lobservateur).
La publication de recommandations suscite toujours
la fois frustrations et polmiques, mais il ne faut pas perdre
de vue qu'elles doivent reprsenter une base applicable
pour la majorit. Ces recommandations pratiques traduisent notre sens lattitude minimaliste que doit adopter
le biologiste face des rsultats trs anormaux de lhmogramme, considrs chacun isolment, et au-del desquels
labsence de contrle microscopique reprsente un risque
plus important dignorer une information critique pour
la validation biologique ou pour le clinicien prescripteur.
Si ce risque nest pas nul pour des rsultats compris entre
les valeurs reconnues comme normales et les seuils que
nous avons retenus, les valuations menes la fois au
niveau du groupe mais aussi par dautres quipes pour des
rgles communment admises, permettent de le considrer comme acceptable si le taux de faux ngatifs reste
< 5 %. Libert est laisse aux biologistes qui le souhaitent
de contrler de faon plus stricte leurs rsultats en utilisant
des seuils moins pathologiques que ceux proposs. Ces
recommandations peuvent reprsenter une base susceptible dadaptations en fonction des structures dexercice,
des spcificits de recrutement de chacun, ou de lutilisation de systmes experts, ces derniers autorisant maintenant lassociation de rgles multiples permettant une
dtection plus sensible des situations anormales avec une
meilleure gestion des talements.

En cas de mauvaise sparation des sous-populations leucocytaires et chaque fois que lanomalie se prsente, une
formule microscopique doit tre ralise.
La synthse des critres dtalement lis une anomalie
de la formule leucocytaire est prsente dans le tableau
III.

IV. - DISCUSSION
Les recommandations prsentes ci-dessus pour la
revue du frottis sanguin ou la ralisation dune formule
leucocytaire sont issues dune rflexion mene au sein du
GFHC et coordonne par ses experts. Nous les avons ta-

Remerciements
Les auteurs tiennent remercier pour leur participation active lenqute sur les pratiques dtalement : B.
Berdin (Laval), A. Bouvier (Le Mans), E. Bichier (Saumur),
C. Brumpt (Paris), M.P. Callat (Rouen) A. Clab (La Runion), C. Fossat (Marseille), F. Dubois-Galopin (Toulouse),
E. Duchayne (Toulouse), P. Felman (Lyon), J. Guy (Dijon),
J.P. Hurst (Le Havre), M. Imbert (Crteil), F. Le Baron
(Valenciennes), P. Lemaire (Paris), P. Lepelley (Lille),
M. Mallet (Caen), K. Maloum (Paris), V. Marion (Brest),
J.M. Martelli (Meulan), C. Mayeur-Rousse (Strasbourg),
B. Perez (Le Mans), C. Rapatel (Clermont-Ferrand),
S. Wuilleme (Nantes), M. Zandecki (Angers).

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feuillets de Biologie
VOL LV N 317 - MARS 2014

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Conflit d'intrt : aucun

Rfrences Bibliographiques
(1) Barnes PW, McFadden SL, Machin SJ, Simson E. The
international consensus group for hematology review:
suggested criteria for action following automated
CBC and WBC differential analysis. Lab Hematol 2005 ;
11 : 83-90.
(2) Galloway MJ, Osgerby JC. An audit of the indications
for the reporting of blood films: results from the
National Pathology Benchmarking Study. J Clin Pathol
2006 ; 59 : 479-81.
(3) Bain BJ. Diagnosis from the blood smear. N Engl J Med
2005 ; 353 : 498-507.
(4) Gulati G, Song J, Florea AD, Gong J. Purpose and
criteria for blood smear scan, blood smear examination,
and blood smear review. Ann Lab Med 2013 ; 33 : 1-7.
(5) Peterson P, Blomberg D, Rabinovitch A, Cornbleet P.
Physician review of the peripheral blood review: when
and why. Lab Hematol 2001 ; 7 : 175-9.
(6) Woo HY, Shin SY, Park H, Kim YJ, Kim HJ, Lee YK,
Chae SL, Chang YH, Choi JR, Han K, Cho SR, Kwon
KC. Current status and proposal of a guideline for
manual slide review of automated complete blood
cell count and white blood cell differential. Korean J
Lab Med 2010 ; 30 : 559-66.
(7) Bain BJ. The peripheral blood smear. Cecil Medicine,
24th edition. Philadelphia : Saunders Elsevier ; 2011 :
chap. 160.
(8) Troussard X, Vol S, Cornet E, Bardet V, Couaillac JP,
Fossat C, Luce JC, Maldonado E, Siguret V, Tichet J,
Lantieri O, Corberand J, for the French-Speaking
Cellular Hematology Group (Groupe Francophone
d'Hmatologie Cellulaire, GFHC). Full blood count
normal reference values for adults in France. J Clin
Pathol 2013 Oct 29 (sous presse).
(9) Bates I, Lewis SM. Reference ranges and normal
values, Dacie and Lewis Practical Haematology,
eleventh edition. Edinburgh : Churchill Livingstone
Elsevier ; 2012 : p. 11.

HMATOLOGIE Revue du frottis sanguin

(10) Simpkin PS, Hinchliffe RF. Reference values. Pediatric

Hematology, third edition. Oxford : Blackwell Publishing ; 2006 : p. 792.
(11) Skubitz KM. Wintrobe's Clinical Hematology, twelfth
edition, volume 1. Edited by Greer JP, Foerster J,
Lukens JN, Rodgers GM, Paraskevas F, Glader B.
Philadelphia : Lippincott Williams & Wilkins ;
Normal Blood leukocyte concentration (95 % confidence limits) ; 2009 : p.186.

(12) Brugnara C. Reference Values in Infancy and Childhood. Nathan and Oski's Hematatology of Infancy
and Childhood, seventh edition. Philadelphia :
Saunders Elsevier ; 2009 : p. 1769.
(13) Herklotz R, Lthi U, Ottiger C, Huber AR. Metaanalysis of reference values in hematology. Ther
Umsch 2006 ; 63 : 5-24.
(14) Agence Nationale d'Accrditation et d'valuation en
Sant (ANAES). Lecture critique de l'hmogramme:
valeurs seuils reconnatre comme probablement
pathologiques et principales variations non pathologiques. Paris : Service des Rfrences Mdicales ; 1997 ;
http://has.sante.fr/portail/upload/docs/application
/pdf/Hemogram.pdf
(15) COFRAC. Guide technique d'accrditation en
biologie mdicale. Document SH GTA 01. Paris :
COFRAC ; 2011 ;
http://wwww.cofrac.fr/documentation/SH-GTA-01

(23) Houwen B. Random errors in haematology tests: a

process control approach. Clin Lab Haem 1989 ; 12 :
157-70.
(24) Latger-Cannard V, Hoarau M, Salignac S, Baumgart
D, Nurden P, Lecompte T. Mean platelet volume:
comparison of three analysers towards standardization
of platelet morphological phenotype. Int J Lab
Hematol 2012 ; 34 : 300-10.
(25) Lvy JP, Varet B, Clauvel JP, Lefrre F, Bezeaud A,
Guillin MC. Hmatologie et transfusion, 2me dition. Paris : Elsevier Masson ; 2008 : p. 127.
(26) Lesesve JF, Haristoy X, Lecompte T. EDTA-dependent
leukoagglutination. Clin Lab Haem 2002 ; 24 : 67-9.
(27) Rmke C. The statistically expected variability in differential leukocyte counting. Differential leukocyte
countings. Sokie, Illinois: College of American Pathologists ; 1979 : p. 39-45.

(16) Trimoreau F, Gachard N, Leymarie V, Frbet E,

Perroud P, Feuillard J. tapes pranalytiques pour la
numration et cytologie sanguine. EMC-Biologie
mdicale. Paris : Elsevier Masson ; 2011 : p. 1-10.

(28) Genevieve F, Godon A, Marteau-Tessier A, Zandecki

M. Anomalies et erreurs de dtermination de l'hmogramme avec les automates d'hmatologie cellulaire Partie 2. Numration et formule leucocytaires.
Ann Biol Clin (Paris) 2012 ; 70 : 141-54.

(17) Buttarello M. Quality specification in haematology:

the automated blood cell count. Clin Chim Acta 2004 ;
346 : 45-54.

(29) Kahn JE, Legrand F, Capron M, Prin L. Hyperosinophilies et syndromes hyperosinophiliques. EMCHmatologie. Paris : Elsevier Masson ; 2011 : p. 1-16.

(18) Bain BJ. Blood cells: a practical guide, 4th edition

Oxford : Wiley-Blackwell ; 2006.

(30) Lesesve JF, Benbih M, Lecompte T. Accurate basophils counting: not an easy goal! Clin Lab Haem 2005 ;
27 : 143-4.

(19) Lesesve JF, Asnafi V, Braun F, Zini G. Fragmented

red blood cells automated measurement is a useful
parameter to exclude schistocytes on the blood film.
Int J Lab Hematol 2012 ; 34 : 566-76.
(20) Zini G, d'Onofrio G, Briggs C, Erber W, Jou JM, Lee
SH, McFadden S, Vives-Corrons JL, Yutaka N,
Lesesve JF. International Council for Standardization
in Haematology (ICSH). ICSH recommendations
for identification, diagnostic value,and quantitation
of schistocytes. Int J Lab Hematol 2012 ; 34 : 107-16.
(21) Zandecki M, Genevieve F, Gerard J, Godon A. Spurious
counts and spurious results on haematology analysers:
a review. Part I: platelets. Int J Lab Hematol 2007 ; 29 :
4-20.
(22) Zandecki M, Genevieve F, Gerard J, Godon A. Spurious
counts and spurious results on haematology analysers:
a review. Part II: white blood cells, red blood cells,
haemoglobin, red cell indices and reticulocytes. Int
J Lab Hematol 2007 ; 29 : 21-41.

- 16 -

feuillets de Biologie
VOL LV N 317 - MARS 2014

(31) Lesesve JF, Haristoy X, Fischer B, Goupil JJ,

Lecompte T. Agglutination in vitro EDTA-dpendante
des lymphocytes. Ann Biol Clin (Paris) 2001 ; 59 : 497501.