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    tp2 Microbiologie Du Sol Mme Ghanem

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    Le document décrit les techniques utilisées pour l'étude des micro-organismes du sol, notamment la préparation de suspensions dilutions à partir d'un échantillon de sol en vue de dénombrement et identification. Il explique les étapes de préparation d'une série de tubes contenant des suspensions à différentes dilutions à partir d'un gramme d'échantillon de sol.

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    TP2 Microbiologie du sol Dr Ghanem N.

    M1 EDP

    Protocol 2 Techniques générales d’une suspension-


    dilution à partir d’un échantillon de sol

    1- Introduction
    Les organismes vivants du sol sont des bactéries, des champignons, des algues, les parties
    souterraines des plantes ainsi que des animaux très variés. Tous participent d'une manière ou d'une
    autre à la formation et à l'évolution de sol (Gobat et al, 2003).
    Bactéries, actinomycètes, champignons et algues, sont les micro-organismes qui entrent dans la
    composition des microbiocénoses de presque la plupart des sols.
    Les techniques utilisées aux laboratoires pour l’étude de des micro-organismes du sol
    sont globalement dans le but
     du dénombrement
     d’identification et taxonomie des groupements fonctionnels

    L'estimation de la masse microbienne est indispensable pour étudier les flux dans le sol de
    certains éléments tels que le carbone et l'azote. Or, la plupart des techniques actuellement
    disponibles ne peuvent donner des valeurs absolues et des résultats fiables.

    Les dynamiques microbiennes peuvent aussi être appréhendées par dénombrement des
    bactéries par deux grands types de méthodes.
     La première consiste en un comptage indirect sur des milieux de culture.
     La seconde méthode consiste en un comptage direct par observation au microscope.

    Parmi les méthodes de dénombrement indirectes, les deux méthodes les plus utilisées sont
    la méthode standard de culture sur boîte de pétri est la technique de dénombrement dite
    «Technique du nombre le plus probable» (MPN). Cette dernière est très utilisée car elle permet
    l'estimation des populations bactériennes ayant des fonctionnalités données comme la
    dénitrification.
    La technique utilisée pour la numération des germes tellurique comprend plusieurs étapes allant de
    la préparation de la suspension dilutions jusqu'à l'interprétation des résultats.

    1
    TP2 Microbiologie du sol Dr Ghanem N. M1 EDP

    2- Préparation des suspensions dilutions


    Les préparations des suspensions dilutions consistent
    1- disposer sur un portoir une série de 9 tubes stérilisés, numérotés de 1 à 9, et contenant chacun
    (9ml) d'eau distillée,
    2- peser 1g du sol préalablement tamisé et homogénéisé, le verser dans le tube 1, agiter
    vigoureusement, c'est la suspension dilution 10
    3- le transférer dans le tube 2 contenant déjà de l'eau distillée (9ml), il s'agit de la suspension
    dilution 10-1
    4- agiter vigoureusement et recommencer l'opération pour le restant des tubes en transférant 1ml
    de solution d'un tube à l'autre, afin de préparer les suspensions dilutions 10 -2 les suspensions
    dilutions doivent être utilisées aussitôt après leur préparation 10-3,10-4, 10-5, 10-6, 10-7,10-8, 10-9 .

    Figure 1 : Préparation d’une suspension dilution

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