Viabilitas

BADAN PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN KEHUTANAN
BALAI PENELITIAN TEKNOLOGI PERBENIHAN TANAMAN HUTAN

Jl. Pakuan Ciheuleut, PO Box 105 Bogor, Telp/Fax : 0251-8327768,
E-mail : btpbogor@dephut.go.id
KATA PENGANTAR
Kegiatan pengujian benih merupakan hal yang penting dalam produksi semai
dan transaksi bibit komersil. Standarisasi metode pengujian dan mutu benih
yang telah dihasilkan oleh Balai Litbang Teknologi Perbenihan hanya memuat
uji perkecambahan (langsung). Sehingga untuk penyempurnaannya perlu
dilengkapi dengan teknologi uji cepat viabilitas, agar para pengguna memiliki
alternatif lain dalam melakukan pengujian benih.
Buku ini merupakan kelanjutan dari buku I yang berisi standar prosedur uji
cepat viabilitas benih berdasarkan uji tetrazolium topografis, uji hidrogen
peroksida, uji eksisi embrio dan uji belah untuk 5 jenis benih tanaman hutan (Acacia
crassicarpa, Enterolobium cyclocarpum, Tectona grandis, Dalbergia
latifolia dan Agathis loranthifolia) serta kunci interpretasi benih hidup dan
benih mati berdasarkan uji cepat yang digunakan.
Diharapkan informasi ini dapat membantu dan mempermudah para peneliti,
akademisi dan laboran dalam melakukan aktivitas pengujian benih, serta
pengguna lainnya dalam rangka memperoleh kepastian informasi kualitas benih
dengan cepat.
Ucapan terima kasih disampaikan kepada semua pihak yang telah membantu,
baik tenaga maupun pikirannya sehingga buku ini dapat tersusun.
Bogor, Desember 2003

Kepala Balai Litbang Teknologi Perbenihan
Ir. Darmawan Budiantho, MP

NIP. 080052517
KATA PENGANTAR CETAKAN KEDUA

Dalam rangka penyebarluasan hasil penelitian dalam bentuk yang lebih praktis,
Balai Penelitian Teknologi Perbenihan Tanaman Hutan (BPTPTH) telah
menerbitkan buku Pedoman Uji Cepat Viabilitas Benih Tanaman Hutan yang
memuat informasi tentang standar prosedur uji cepat viabilitas benih
berdasarkan Uji Tetrazolium Topografis; Uji Hidrogen Peroksida; Uji Eksisi
Embrio dan Uji Belah untuk 5 jenis benih tanaman hutan, serta kunci
interpretasi benih hidup dan benih mati berdasarkan uji cepat yang digunakan.
Teknologi uji cepat viabilitas benih merupakan alternatif lain dalam melakukan
pengujian benih. Informasi tersebut dikemas dalam bentuk praktis, lengkap,
informatif dan mudah diaplikasikan untuk mengetahui kualitas benih secara
cepat.
Buku Pedoman Uji Cepat Viabilitas Benih Tanaman Hutan memperoleh respon
yang positif dari: instansi pemerintah; swasta; maupun masyarakat umum.
Berkaitan dengan hal tersebut mengakibatkan banyaknya permintaan
terhadap buku ini. BPTPTH secara bertahap melakukan pencetakan ulang buku
Pedoman Uji Cepat Viabilitas Benih Tanaman Hutan, yang di dalam buku
cetakan ke dua tersebut telah dilakukan penyempurnaan antara lain nama
Balai Litbang Teknologi Perbenihan diubah menjadi Balai Penelitian Teknologi
Perbenihan Tanaman Hutan; perbaikan redaksional sebagaimana tercantum
pada ralat cetakan sebelumnya; serta penyempurnaan lainnya.
Ucapan terimakasih disampaikan kepada semua pihak yang telah berperan
dalam penyusunan Buku Pedoman Uji Cepat Viabilitas Benih Tanaman Hutan
cetakan ke dua ini, sehingga buku ini dapat disusun dan dicetak ulang kembali.
Semoga buku ini bermanfaat.
Bogor,
Desember 2014
Kepala Balai,
iii
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR .......................................................................
KATA PENGANTAR CETAKAN KE 2 ...............................................
iii
DAFTAR ISI ...................................................................................
DAFTAR TABEL..............................................................................
ix
DAFTAR GAMBAR ........................................................................
xi
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................
xiii
PENDAHULUAN ..................................................................
1.1.
1.2.
1.3.
1.4.
1.5.
Mutu Benih ..................................................................

Viabilitas ......................................................................
Pengujian Viabilitas ......................................................
Uji Cepat Viabilitas .......................................................
Standarisasi Uji Cepat Viabilitas .....................................
1
1
1
2
2
METODE UJI CEPAT VIABILITAS .......................................
I.
II
2.1.
2.2.
2.3.
2.4.
III.
Tetrazolium Topografis .............................................

Hidrogen Peroksida .................................................
Eksisi Embrio ..........................................................
Belah ......................................................................
UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Acacia crassicarpa ........

3.1.
3.2.
Umum .........................................................................
Uji Tetrazolium Topografis .............................................
3.2.1. Standardisasi prosedur ........................................
3.2.2. Kunci Interpretasi ................................................
Uji Hidrogen Peroksida .................................................
Uji Eksisi Embrio ..........................................................
3.4.1. Standardisasi Prosedur ........................................
Uji Belah ......................................................................
3.5.2. Kunci Interpretasi ...............................................
9
9
9
11
12
12
12
13
13
14
15
15
16
UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Enterolobium cyclocarpum
19
4.1.
19
3.3.
3.4.
3.5.
IV.
Uji
Uji
Uji
Uji
Umum .........................................................................
4.2.

Uji Belah ......................................................................
19
19
21
23
23
24
24
24
25
26
26
26
UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Tectona grandis ............
29
5.1.
5.2.
Umum .........................................................................
Uji Belah ......................................................................
29
29
29
30
31
31
32
UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Dalbergia latifolia .........
35
6.1.
6.2.
Umum .........................................................................
6.3. Uji Hidrogen Peroksida ....................................................
6.4. Uji Eksisi Embrio ..........................................................
6.5. Uji Belah ......................................................................
35
35
35
35
39
39
40
40
40
41
41
41
42
VII. UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Agathis loranthifolia .. ....
45
4.3.
4.4.
4.5.
V.
5.3.
VI.
7.1.
7.2.
7.3.
vi
Umum .........................................................................
45
45
45
47
48
48

Uji Belah ......................................................................
49
49
49
50
51
51
51
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................
55
LAMPIRAN ....................................................................................
56
7.4.
7.5.
vii
DAFTAR TABEL
No.
Teks
Hal.
1.
Kunci Interpretasi Uji Tetrazolium untuk Benih A. crassicarpa .....
11
2.
Kunci Interpretasi Uji Eksisi Embrio untuk Benih A. crassicarpa ...
15
3.
Kunci Interpretasi Uji Belah untuk Benih A. crassicarpa..............
16
4.
Kunci Interpretasi Uji Tetrazolium untuk Benih E. cyclocarpum ..
21
5.
Kunci Interpretasi Uji Eksisi Embrio untuk Benih E. cyclocarpum.
25
6.
Kunci Interpretasi Uji Belah untuk Benih E. cyclocarpum..........
27
7.
Kunci Interpretasi Uji Eksisi Embrio untuk Benih T. grandis .........
31
8.
Kunci Interpretasi Uji Belah untuk Benih T. grandis .................
32
9.
Kunci Interpretasi Uji Tetrazolium untuk Benih D. latifolia ...........
37
10.
Kunci Interpretasi Uji Eksisi Embrio untuk Benih D. latifolia .........
41
11.
Kunci Interpretasi Uji Belah untuk Benih D. latifolia ....................
42
12.
Kunci Interpretasi Uji Tetrazolium untuk Benih A. loranthifolia ....
47
13.
Kunci Interpretasi Uji Eksisi Embrio untuk Benih A. loranthifolia ..
50
14.
Kunci Interpretasi Uji Belah untuk Benih A. loranthifolia ............
52
ix
DAFTAR GAMBAR
No.
Teks
Hal.
1.
Sketsa Struktur Benih A. crassicarpa ....................................
2.
Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Benih

A. crassicarpa .....................................................................
11
Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Tetrazolium
untuk Benih A. crassicarpa ..................................................
17
Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Hidrogen Peroksida
17
Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Eksisi Embrio
17
Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Belah untuk
Benih A. crassicarpa ............................................................
17
7.
Sketsa Struktur Benih E. cyclocarpum ..................................
19
8.

E. cyclocarpum ...................................................................
22
untuk Benih E. cyclocarpum ................................................
28
untuk Benih E. cyclocarpum ................................................
28
Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Eksisi Embrio untuk
Benih E. cyclocarpum ..........................................................
28
Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Belah untuk Benih
E. cyclocarpum ...................................................................
28
13.
Sketsa Struktur Benih T. grandis ...........................................
29
14.
Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Eksisi Embrio
untuk Benih T. grandis ........................................................
33
Benih T. grandis ..................................................................
33
3.
4.
5.
6.
9.
10.
11.
12.
15.
xi
16.
Sketsa Struktur Benih D. latifolia............................................
35
17.

D. latifolia ...........................................................................
38
untuk Benih D. latifolia .........................................................
43
untuk Benih D. latifolia .........................................................
43
Benih D. latifolia ..................................................................
43
Benih D. latifolia ...................................................................
43
22.
Sketsa Struktur Benih A. loranthifolia ...................................
45
23.

A. loranthifolia ....................................................................
48
untuk Benih A. loranthifolia .................................................
52
untuk Benih A. loranthifolia .................................................
52
Benih A. loranthifolia ...........................................................
52
Benih A. loranthifolia ...........................................................
52
18.
19.
20.
21.
24.
25.
26.
27.
xii
DAFTAR LAMPIRAN
No.
1.
Teks
Hal.
Bahan dan Alat yang Digunakan untuk Uji Cepat Viabilitas Benih
(a). Uji Tetrazolium,
(b). Uji Hidrogen Peroksida (c). Uji Eksisi Embrio dan
(d). Uji Belah .........................................................................
57
Prosedur Pengambilan Contoh Benih untuk

Pengujian (BTP, 2000) .............................................................
58
3.
Cara Pembuatan Larutan Tetrazolium .......................................
59
4.
Cara Pembuatan Larutan Hidrogen Peroksida ............................
60
5.
Glosari ..................................................................................
61
2.
xiii
I. PENDAHULUAN
1.1. Mutu Benih
Keberhasilan penanaman terutama dalam skala yang besar sangat dipengaruhi
oleh interaksi antara faktor-faktor biotik, klimatik, edafik, teknik maupun
manajemen. Secara tidak langsung faktor teknik seringkali dinyatakan sebagai
penyebab utama kegagalan, misalnya karena rendahnya mutu benih. Untuk
membedakan suatu benih bermutu atau tidak, secara visual sangat sukar.
Apabila benih ditanam tanpa melalui proses pengujian mutu, maka perbedaan
baru akan terlihat setelah benih tumbuh di lapangan atau setelah tanaman
berproduksi, sehingga konsumen benih akan dirugikan karena kehilangan waktu,
biaya dan kemungkinan harus melakukan penanaman ulang (Sadjad, 1980).
Informasi yang diperoleh dari pengujian benih akan bermanfaat bagi produsen,
penjual maupun konsumen benih, karena mendapat keterangan yang dapat
dipercaya tentang mutu atau kualitas dari suatu benih. Pengujian benih adalah
penilaian secara objektif tentang mutu benih yang diproduksi atau diedarkan.
Pengujian benih terdiri dari: Pengujian karakteristik fisik benih dan pengujian
karakteristik biologis benih. Pengujian karakteristik benih meliputi: Kemurnian
benih, kadar air benih dan berat 1000 butir. Sedangkan karakteristik biologis
benih meliputi: Pendugaan viabilitas dan vigor benih. Secara Garis besar
pengujian kualitas suatu kelompok benih dapat dilakukan berdasarkan metode
indikasi viabilitas benih.
1.2. Viabilitas
Viabilitas benih merupakan refleksi dari mutu benih, yang dapat didefinisikan
sebagai daya hidup benih yang ditunjukkan oleh fenomena pertumbuhan benih
atau gejala metabolismenya dan dapat pula ditunjukkan oleh keadaan organel
sitoplasma atau kromosom. Sementara Gordon (1992), menyatakan bahwa
viabilitas adalah kemampuan yang dimiliki oleh benih untuk berkecambah,
sedangkan perkecambahan adalah keberhasilan proses di dalam benih untuk
menghasilkan semai yang baik di persemaian.
1.3. Pengujian Viabilitas
Viabilitas benih dapat dideteksi melalui beberapa pendekatan, pendekatan yang
paling lazim dilakukan adalam melalui pendekatan fisiologis. Metode pendekatan
fisiologis ini dibagi menjadi metode langsung dan tidak langsung. Metode
langsung yaitu apabila pengamatan dilakukan pada setiap individu, sedangkan
metode tidak langsung jika deteksi viabilitas tersebut dilakukan terhadap
sejumlah benih sekaligus. Deteksi viabilitas benih dari gejala pertumbuhannya
disebut penilaian dengan indikasi langsung, sedangkan penilaian viabilitas benih
dari gejala metabolisme, bentuk fisik yang kesemuanya tanpa memperlihatkan
gejala pertumbuhan disebut pendekatan dengan indikasi tidak langsung.
Pada pengujian viabilitas benih dengan menggunakan indikator pertumbuhan
kecambahnya langsung sering disebut dengan indikasi langsung, di mana
yang dinilai adalah kenormalan pertumbuhan kecambah dan dilakukan dalam
jangka waktu tertentu. Sedangkan metode pengujian yang didasarkan pada

proses metabolisme benih yang merupakan indikasi tak langsung atau sering
disebut juga dengan uji cepat.
1.4. Uji Cepat Viabilitas
Pendugaan potensial perkecambahan dari suatu kelompok benih dengan
mengecambahkannya langsung merupakan suatu metode yang hampir relevan
dalam praktek bidang kehutanan. Tetapi pengujian tersebut akan membutuhkan
waktu yang lama, seperti yang diungkapkan oleh Zanzibar (1996), bahwa
pelaksanaan pengujian viabilitas benih dengan menggunakan indikator gejala
pertumbuhan kecambah biasanya memerlukan waktu yang relatif lama. Untuk
jenis pohon hutan, waktu yang diperlukan berkisar antara 7-30 hari tergantung
pada jenis benihnya. Dalam beberapa keadaan, jenis-jenis tertentu secara
normal akan berkecambah secara lambat atau menunjukan gejala dormansi
sehingga informasi mengenai viabilitas benih tidak dapat segera diperoleh.
Keadaan ini akan berpengaruh terhadap benih yang diuji dan keputusan tentang
pengadaan benih untuk keperluan yang bersangkutan misalnya untuk
penanaman. Sehingga diperlukan metode pengujian viabilitas benih yang dapat
menduga secara akurat namun lebih cepat dari pada pengujian perkecambahan
secara langsung. Dalam hal ini maka dikembangkan uji cepat viabilitas benih.
Tujuan dari uji cepat viabilitas benih menurut Manan (1976) dan Willan (1985),
adalah:
(a). Untuk menentukan secara cepat viabilitas benih suatu spesies yang
berkecambah normal secara lambat atau menunjukkan dormansi di
bawah perkecambahan normal.
(B). Untuk menentukan viabilitas dari suatu sampel yang pada akhir uji
perkecambahan menyatakan suatu persentase yang tinggi dari yang
tidak berkecambah (hard seed).
Beberapa metode uji cepat yang dapat digunakan dalam menduga viabilitas
benih, antara lain: uji belah (cutting test), uji tetrazolium, uji hidrogen
peroksida, metode radiografi, uji eksisi embrio, uji daya hantar listrik dan uji
indigo carmine.
1.5. Standardisasi Uji Cepat Viabilitas
Penilaian secara objektif dapat dilaksanakan dengan baik dalam melakukan
uji cepat viabilitas bila ditetapkan adanya pembakuan dalam segala segi, mulai
dari benih yang diuji, metode pengujian, alat pengujian, skill atau keahlian
tenaga penguji sampai dengan parameter yang digunakan untuk menilai hasil
pengujian tersebut.
Standardisasi uji cepat viabilitas benih tanaman hutan mencakup standar
prosedur pengujuan dan kunci interpretasi. Pedoman standardisasi uji cepat
viabilitas ini diharapkan dapat membantu mempermudah aktivitas berbagai
pihak yang berkepentingan dalam pengujian benih. Dengan adanya pedoman
standar ini maka hasil pengujian lot benih akan seragam jika dikerjakan oleh
pihak lain, informasi data hasil pengujian diharapkan mempunyai keakuratan
yang cukup baik dan dapat digunakan sebagai acuan dalam rangka penerapan
aspek legalitas perbenihan.
Metode uji cepat viabilitas benih tanaman hutan yang terdapat dalam pedoman
ini meliputi : (1). Uji Tetrazolium Topografis (Tetrazolium Topography Test),
(2). Uji Hidrogen Peroksida (Hidrogen Peroxida Test), (3). Uji Eksisi Embrio
(Exicion Embryo Test) dan (4). Uji Belah (Cutting Test). Sedangkan jenis
benih tanaman hutan yang diuji meliputi :(1). Krasikarpa (Acacia crassicarpa),
(2). Sengon Buto (Enterolobium cyclocarpum), (3). Jati (Tectona grandis),
(4). Sonobrit (Dalbergia latifolia) dan (5). Damar (Agathis lorathifolia).
II. METODE UJI CEPAT VIABILITAS

2.1. Uji Tetrazolium Topografis
Metode ini merupakan salah satu dari sejumlah metode uji secara biokimia
yang telah dikembangkan dan merupakan teknik pengujian yang cukup tepat
untuk menduga viabilitas benih. Dengan mengunakan metode ini, dalam waktu
kurang lebih 24 jam viabilitas dari suatu kelompok benih telah dapat diduga.
Walaupun metode uji tetrazolium telah dinyatakan oleh ISTA sebagai metode
resmi untuk beberapa jenis kayu daun lebar dan konifer pada tahun 1976,
tetapi sampai saat ini metode dan standar pengujian dengan cara tetrazolium
untuk benih tanaman hutan masih sangat sedikit yang telah dibakukan dalam
peraturan pengujian internasional/ISTA.
Metode uji tetrazolium menggunakan prinsip bahwa setiap sel hidup akan
berwarna merah oleh reduksi dari suatu pewarnaan garam tetrazolium dan
membentuk endapan formazan merah sedangkan sel-sel yang mati menunjukan
warna putih. Dengan merendamnya terlebih dahulu selama semalam, kemudian
dibelah dan direndam dalam larutan garam selama beberapa jam, telah dapat
menunjukan reaksi yang jelas dan dapat membedakan antara sel yang masih
hidup dengan yang sudah mati.
Reaksi tesebut diringkas sebagai berikut:
N N C6H5
N N C6H5
+ 2H+
C6H5 C
N N C6H5
C6H5 C
HCl
N = N C6H5
Cl
2, 3, 5 trifenil tetrazolium chlorida
2, 3, 5 triferiil formazan
Enzim yang mendorong terjadinya proses ini adalah dehidrogenase dan kegiatan
ini berkaitan dengan respirasi. Faktor-faktor yang mempengaruhi reaksi tetrazolium menurut Byrd (1983) adalah suhu, pH larutan, perlakuan terhadap
benih, konsentrasi larutan dan tekanan udara tempat pengujian dilakukan.
Menurut Sutopo (1998), beberapa kelebihan dan kekurangan uji tetrazolium
antara lain:
(a).
Jika diperlukan keterangan segera tentang viabilitas dari suatu kelompok

benih tertentu, maka uji tetrazoiium akan dapat memberikan keterangan
lebih cepat dibanding uji perkecambahan secara langsung. Tetapi untuk
pelaksanaan uji tetrazolium diperlukan waktu yang lebih lama dari pada
uji perkecambahan secara langsung.
(b).
Untuk benih-benih yang sangat dorman atau yang lambat berkecambah

lebih menguntungkan bila menggunakan uji tetrazolium.
(c).
Kadangkala suatu kelompok benih gagal berkecambah atau mungkin

berkecambah lebih lambat dari biasanya disebabkan oleh tipe dormansi
after ripening. Untuk menentukan viabilitas benih tersebut secara cepat
maka dapat digunakan uji tetrazolium.
(d).
Efek phytotoxic dari fungisida, insektisida atau fumigasi dengan metyl

bromide yang telah diperlakukan pada benih tidak dapat diketahui
dengan uji tetrazolium.
(e ).
Uji tetrazolium tidak selalu dapat memberikan keterangan tentang

kerusakan pada benih yang disebabkan oleh proses pengeringan.
(f).
Uji tetrazolium memerlukan lebih banyak kecakapan dan keputusan dari

pada yang biasa diperlukan dalam uji perkecambahan secara langsung.
Seringkali diperlukan beberapa kali pembesaran untuk dapat mempelajari
dengan seksama pola noda dan lokasi daerah nekrotik yang tidak ternoda.
2.2. Uji Hidrogen Peroksida

Hidrogen peroksida (H202) merupakan suatu larutan yang dapat merangsang
perkecambahan benih, sehingga dapat digunakan untuk uji perkecambahan
terhadap beberapa benih jenis konifer di Amerika Barat (Willan, 1985). Menurut
Leadem (1984), metode pengujian benih dengan menggunakan hidrogen
peroksida merupakan satu-satunya uji cepat viabilitas benih yang dapat
merangsang perkecambahan benih dan dapat digunakan untuk mempercepat
perkecambahan. Namun uji ini memerlukan waktu selama satu minggu penuh
dan pengujiannya agak sulit untuk benih-benih yang berukuran kecil.
Keuntungan penggunaan metode hidrogen peroksida sebagai uji cepat viabilitas
benih antara lain: tidak mahal dan alat-alat yang dibutuhkan cukup sederhana,
bersifat objektif dan sederhana dalam penyiapannya. Sedangkan kekurangan
dari metode pengujian ini antara lain: Tidak praktis untuk benih yang berukuran
kecil, pengujiannya bersifat merusak dan relatif lambat (memerlukan waktu 7 8 hari sampai memberikan hasil pengujian yang memuaskan).
2.3. Uji Eksisi Embrio
Merupakan uji viabilitas benih yang mempunyai nilai yang khusus karena
digunakan terutama untuk mendeterminasi viabilitas benih yang bisanya
berkecambah lambat atau memperlihatkan dormansi karena kulit benih dan/
atau embrio. Viabilitas benih tersebut dapat dideterminasi secara cepat 5 - 14
hari melalui pengamatan terhadap perilaku embrio dalam kondisi jaringan setelah
pemotongan dan inkubasi selanjutnya. Embrio yang viabel akan memperlihatkan
warna hijau, tumbuh atau tetap segar sementara embrio yang non viabel akan
rusak. Meskipun uji ini bersifat labour intensif dan memerlukan keterampilan
serta kesabaran dalam memotong embrio benih secara utuh, tapi merupakan
alternatif yang dapat diterima untuk uji viabilitas benih, terutama untuk benihbenih yang memerlukan waktu yang lama jika diuji dengan metode pengujian
yang umum, biasanya mencapai 60 hari.
Menurut Bonner et al. (1994), keuntungan penggunaan metode eksisi embrio

sebagai uji cepat viabilitas benih antara lain: peralatan yang dibutuhkan untuk
pengujian cukup sederhana, yang diuji merupakan kondisi benih sebenarnya
dan mudah untuk dievaluasi. Sedangkan kekurangan dari metode ini antara
lain: bersifat labour intensive dan memerlukan waktu yang panjang dalam
mempersiapkan benih sebelum diuji, pengujiannya bersifat merusak dan relatif
lambat (memerlukan waktu 10 - 14 hari sampai memberikan hasil pengujian
yang memuaskan).
2.4. Uji Belah
Uji belah (cutting test) merupakan suatu metode uji cepat yang biasanya
digunakan untuk menguji viabilitas benih dalam jumlah yang banyak. Uji ini
dapat digunakan di lapangan untuk memperkirakan benih yang telah masak
atau kualitas kumpulan benih (seed lot) dalam kegiatan pengumpulan benih.
Metode ini merupakan salah satu metode pengujian viabilitas benih yang paling
sederhana, yang dilakukan dengan cara melihat secara langsung dengan mata
terhadap benih yang telah dibelah dengan pisau atau skapel. Jika endospermnya
mempunyai warna normal dengan embrio yang baik, maka benih tersebut
mempunyai kemungkinan untuk berkecambah, sehingga pengujian ini bersifat
sangat subjektif. Dengan hanya melihat penampilannya secara langsung, benih
tersebut seperti hidup padahal kalau dikecambahkan mungkin tidak akan
berkecambah. Sehingga hasil dari pengujian ini akan memberikan nilai
perkecambahan yang lebih besar dibanding keadaan sebenarnya.
Menurut Boner et al. ( 1994), keuntungan uji cepat viabilitas benih dengan
metode belah antara lain: merupakan metode uji viabilitas benih yang cepat
dan murah, dapat digunakan di lapangan untuk memeriksa kualitas benih yang
dikumpulkan pada saat pemanenan dan hasil pengujian cukup akurat untuk
benih-benih yang masih segar. Sedangkan kekurangan dari metode pengujian
ini antara lain: sulit dilakukan untuk benih-benih yang berukuran kecil,
memberikan hasil pengujian yang tidak tepat untuk benih-benih yang telah
mengalami penyimpanan dan merupakan uji yang merusak.
III. UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Acacia crassicarpa

3.1. UMUM
Benih A. crassicarpa memiliki kulit benih yang keras dan sulit ditembus air.
Bila benih tersebut dikecambahkan secara konvensional dengan metode uji di
atas kertas (UDK) maupun di rumah kaca diperlukan waktu lebih dari 21 hari.
A. crassicarpa, termasuk ke dalam famili Leguminosae, umumnya memiliki 3
bagian dasar benih yaitu embrio, jaringan penyimpan cadangan makanan dan
pelindung biji. Jaringan penyimpan cadangan makanan berupa kotiledon,
sedangkan embrio terdiri dari radikel dan plumula. Pengamatan terhadap
benih yang akan diuji dengan menggunakan metode uji cepat viabilitas
difokuskan pada struktur tumbuh benihnya berupa radikel, plumula dan kotiledon
(Gambar 1).
Gambar 1. Sketsa Struktur Benih A. crassicarpa

3.2. UJI TETRAZOLIUM TOPOGRAFIS
3.2.1. Standardisasi Prosedur
3.2.1.1. Bahan dan Alat
Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, garam tetrazolium (2,3,5triphenil tetrazolium klorida), Na2HPO4.2H2O, KH2PO4, etanol 70%, kertas
merang dan aluminium foil.
Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset,
silet, oven, alat pengaduk, saringan, semprotan tangan, timbangan dan alat
pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji tetrazolium
dapat dilihat pada Lampiran 1.
3.2.1.2. Pengambilan Contoh Benih
Pengambilan contoh benih dimaksudkan agar mutu benih yang diperoleh benarbenar mewakili kelompok benih (seed lot) yang hendak diuji. Prosedur
pengambilan contoh dilakukan menggunakan pendekatan yang terdapat pada

Pedoman Standarisasi Pengujian Mutu Fisik dan Fisiologis Benih Tanaman Hutan
(BTP, 2000), yang selengkapnya disajikan pada Lampiran 2. Jumlah benih yang
diperlukan untuk pengujian ini adalah 4 x 100 butir benih.
3.2.1.3. Sterilisasi Bahan dan Alat
Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, alat pengaduk, saringan,
kertas merang dan aluminium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 C
selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol
70 % secara merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan
semprotan tangan.
3.2.1.4. Pembuatan Larutan Tetrazolium
Cara pembuatan larutan tetrazolium disajikan pada Lampiran 3
3.2.1.5. Pengkondisian, Perendaman dan Pengujian
Pengkondisian, perendaman dalam larutan tetrazolium dan pengujian dilakukan
dengan cara sebagai berikut :
(1)
Lubangi ujung kulit benih (berlawanan arah dengan radikel) dengan

gunting kuku. Pada saat melubangi kulit, jangan sampai terkena
kotiledon, karena akan mempengaruhi pola pewarnaan yang terbentuk.
(2)
Rendam benih tersebut dalam aquades selama 24 jam di dalam gelas

piala.
(3)
Kupas kulit dan belah benih menjadi keping benih dengan silet.
Pengupasan dan pembelahan benih harus dilakukan secara hati-hati,
jangan sampai terjadi cacat. Pada saat membelah, kondisi radikel,
plumula, dan kotiledon harus terbagi dua.
(4)
Rendam salah satu keping benih dalam larutan tetrazolium 0,5 % yang
ditempatkan dalam gelas piala yang telah ditutup dan dilapisi seluruhnya
dengan aluminium foil (volume larutan tetrazolium = 3 x volume benih).
(5)
Masukkan gelas piala tersebut ke dalam oven dengan suhu 40 C selama

4 jam.
(6)
Tempatkan benih dalam saringan, lalu bilas benih dengan aquades

selama 30 - 60 detik.
(7)
Tempatkan benih pada cawan petri yang berisi 2 lembar kertas merang
lembab untuk dianalisis pola pewarnaan yang terbentuk pada radikel,
plumula dan kotiledon.
(8)
Amati intensitas dan luas pewarnaan yang terbentuk. Intensitas

pewarnaan dibagi menjadi warna merah (M), merah muda (Mm) dan
putih (P), sedangkan penghitungan luas pewarnaan (%) dilakukan dengan
membandingkan masing-masing warna yang terbentuk terhadap luas
keseluruhan permukaan bagian dalam keping benih. Pola pewarnaan
yang terbentuk dicocokkan dengan kunci interpretasi.
10
3.2.2. Kunci Interpretasi

Viabilitas benih A. crassicarpa yang diuji dapat diketahui dengan melihat
persentase pola pewarnaan yang terbentuk dan mencocokkannya dengan
kunci interpretasi pada Tabel 1 dan Gambar 2, sedangkan contoh benih viabel
dan non viabel hasil uji tetrazolium dapat dilihat pada Gambar 3.
Tabel 1. Kunci Interpretasi Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih A. crassicarpa
Benih Viabel
Benih Non Viabel
Gambar 2.

A. crassicarpa
11
Berdasarkan Tabel 1 dan Gambar 2, secara umum kunci interpretasi uji tetrazolium untuk benih A. crassicarpa adalah sebagai berikut:
(1).
(2).
Benih viabel :
a. Radikel 100 % merah sampai 100 % merah muda tanpa bercak pun
dan plumula berwarna merah maupun merah muda tanpa putih.
b. Kotiledon minimal 50 % merah atau merah muda.
Benih non viabel :
a. Adanya bagian radikel dan plumula yang berwarna putih/bercak putih.
b. Radikel berwarna merah muda lebih dari 50 %.
3.3. UJI HIDROGEN PEROKSIDA

3.3.1. Standardisasi prosedur
Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, larutan hidrogen peroksida,
benomil, etanol 70%, kertas merang dan aluminium foil.
penggaris, oven, alat pengaduk, inkubator dan alat pembagi benih. Gambar
bahan dan alat yang digunakan untuk uji hidrogen peroksida dapat dilihat
pada Lampiran 1.
(BTP, 2000), yang selengkapnya disajikan pada Lampiran 2. Jumlah benih
yang diperlukan untuk pengujian ini adalah 4 x 100 butir benih.
3.3.1.3.1. Sterilisasi dengan Oven/Etanol
Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, alat pengaduk, kertas merang
dan aluminium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 C selama 24 jam.
Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70 % secara
merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan
tangan.
3.3.1.3.2. Sterilisasi dengan Benomil
Benih yang akan diuji disterilkan dengan cara merendamnya di dalam benomil
selama 1 jam, kemudian dibilas dengan aquades dan benih siap untuk diuji.
3.3.1.4. Pembuatan Larutan Hidrogen Peroksida
Cara pembuatan larutan hidrogen peroksida disajikan pada Lampiran 4.
12

Pengkondisian, perendaman dalam larutan hidrogen peroksida dan pengujian
dilakukan dengan cara sebagai berikut :
(1)
Sterilkan benih A. crassicarpa dengan benomil (lihat 3.3.1.3.2.).
(2)
Potong ujung kulit benih (berlawanan arah dengan radikel) dengan gunting
kuku.
(3)
Rendam benih tersebut dalam larutan H2O2 1 % (volume larutan H2O2 =

3 x volume benih) dalam gelas piala yang ditutup dengan aluminium foil.
(4)
Masukkan gelas piala tersebut ke dalam inkubator atau ruangan gelap

pada suhu 20 - 30 C. Pengujian dilakukan selama 4 hari.
(5)
Ganti larutan H2O2 dengan larutan H2O2 yang baru pada hari ke-1 dan
ke-3.
(6)
Bilas benih dengan aquades, kemudian tempatkan benih tersebut dalam

cawan petri yang berisi 2 lembar kertas merang lembab.
(7)
Ukur panjang radikel yang muncul dengan penggaris, kemudian hasil

pengukuran tersebut dicocokkan dengan kunci interpretasi.

Kunci interpretasi untuk benih viabel dan non viabel hasil uji hidrogen peroksida
didasarkan pada panjang radikel yang muncul pada akhir periode pengamatan.
Benih viabel memiliki panjang radikel > 0,2 mm, sedangkan benih non viabel
memiliki panjang radikel < 0,2 mm atau tidak terjadi pemunculan radikel. Contoh
benih viabel dan non viabel hasil uji hidrogen peroksida dapat dilihat pada
Gambar 4.
3.4. UJI EKSISI EMBRIO
Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, benomil, etanol 70% dan kertas
saring. Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, gunting
kuku, pinset, silet, lup, semprotan tangan, oven, inkubator, laminar flow dan
alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji eksisi
embrio dapat dilihat pada Lampiran 1.
3.4.1.2. Pengambilan Cantoh Benih
13

Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet dan kertas saring dipanaskan
dalam oven pada suhu 105 C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan
dengan menyemprotkan etanol 70 % secara merata ke seluruh bagian alat
tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.
Benih yang akan diuji disterilkan dengan cara merendamnya di dalam benomil
selama 1 jam, kemudian dibilas dengan aquades dan benih siap untuk diuji
3.4.1.4. Pengkondisian, Pemotongan Embrio dan Pengujian
Pengkondisian, pemotongan embrio dan pengujian dilakukan dengan cara
sebagai berikut :
(1)
Sterilkan benih A. crassicarpa dengan benomil (lihat 3.4.1.3.2.).
(2)

gunting kuku.
(3)
Rendam benih tersebut dalam aquades selama 24 jam dengan suhu

perendaman 25 C.
(4)
Ganti air perendam 2 x sehari guna mencegah terakumulasinya eksudat

yang dikeluarkan oleh benih.
(5)
Belah benih dan keluarkan embrionya dengan menggunakan silet. Ketika

membelah, kondisi plumula dan radikel harus utuh (tidak boleh ikut
terbelah atau cacat). Untuk menjamin kondisi aseptik selama kegiatan
pemotongan, lakukan kegiatan di dalam laminar flow atau di tempat
yang steril. Peralatan yang digunakan harus selalu dalam keadaan steril.
(6)
Letakkan embrio pada cawan petri yang berisi media berupa 2 lembar
kertas saring lembab.
(7)
Masukkan cawan petri tersebut ke dalam inkubator atau ruang kamar

pada suhu konstan (20-25 C) selama 5 hari dengan periode
pencahayaan minimal 8 jam per hari.
(8)
Amati setiap hari kondisi embrio dan buang embrio yang busuk dan
berjamur. Apabila media mulai kering, semprotkan aquades secukupnya.
(9)
Kondisi radikel dan plumula yang diperoleh pada akhir pengamatan

dicocokkan dengan kunci interpretasi.

Kunci interpretasi hasil uji eksisi embrio untuk embrio benih A. crassicarpa
dapat dilihat pada Tabel 2, sedangkan contoh embrio viabel dan non viabel
hasil uji eksisi embrio dapat dilihat pada Gambar 5
14
Tabel 2. Kunci Interpretasi Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih A. crassicarpa
3.5. UJI BELAH

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, etanol 70% dan kertas merang.
silet, semprotan tangan, lup, oven dan alat pembagi benih. Gambar bahan
dan alat yang digunakan untuk uji belah dapat dilihat pada Lampiran 1.
Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet dan kertas merang
dipanaskan dalam oven pada suhu 105 C selama 24 jam. Sterilisasi dapat
juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70 % secara merata ke seluruh
bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.
3.5.1.4. Pengkondisian, Pembelahan dan Pengujian Benih
Pengkondisian, pembelahan dan pengujian benih dilakukan dengan cara sebagai
berikut :
(1)
Lubangi ujung kulit benih (berlawanan dengan arah radikel) dengan
gunting kuku.
(2)
Rendam benih tersebut dalam aquades selama 24 jam dalam gelas piala.
(3)
Kupas kulit dan belah benih searah keping (memanjang) dengan
menggunakan silet. Radikel, plumula dan kotiledon harus terbagi dua.
(4)
Amati warna dan penampakan radikel, plumula dan kotiledon dengan

mata telanjang atau menggunakan kaca pembesar (lup), sehingga dapat
ditentukan benih tersebut viabel atau non viabel, sesuai dengan kunci
interpretasi.
15

Kunci interpretasi hasil uji belah untuk benih A. crassicarpa dapat dilihat pada
Tabel 3, sedangkan contoh benih viabel dan non viabel hasil uji belah dapat
dilihat pada Gambar 6.
Tabel 3. Kunci Interpretasi Hasil Uji Belah untuk Benih A. crassicarpa
16
17
Gambar 5. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b)

Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih
A. Crassicarpa

Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih
A. Crassicarpa

Hasil Uji Belah untuk Benih
A. Crassicarpa

Hasil Uji Hidrogen Peroksida untuk
Benih A. Crassicarpa
IV. UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Enterolobium cyclocarpum

4.1. UMUM
E. cyclocarpum yang dikenal dengan nama sengon buto, termasuk ke dalam
famili Leguminosae. Uji viabilitas benih E. cyclocarpum secara konvensional
yang dilakukan dengan perkecambahan langsung menggunkan media pasir
tanah di rumah kaca memerlukan waktu lebih dari 20 hari.
Seperti benih-benih yang tergolong ke dalam famili Leguminosae lainnya, benih
E. cyclocarpum juga memiliki 3 bagian dasar benih yaitu embrio, jaringan
penyimpan cadangan makanan dan pelindung biji. Pengamatan terhadap benih
yang akan diuji dengan menggunakan metode uji cepat viabilitas difokuskan
pada struktur tumbuh benihnya berupa radikel, plumula dan kotiledon (Gambar
7).
Gambar 7. Sketsa Struktur Benih E. cyclocarpum

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, garam tetrazolium (2,3,5triphenil tetrazolium klorida), Na2HPO4.2H2O, KH2PO4, etanol 70 %, kertas
merang, lembaran plastik dan aluminium foil.
pengambilan contoh dilakukan berdasarkan Pedoman Standarisasi Pengujian
Mutu Fisik dan Fisiologis Benih Tanaman Hutan (BTP, 2000), yang selengkapnya
19
disajikan pada Lampiran 2. Jumlah benih yang diperlukan untuk pengujian ini
adalah 4 x 50 butir benih.
Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, alat pengaduk, saringan
kertas merang dan alumunium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 C
selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga diiakukan dengan menyemprotkan etanol
70, % secara merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan
semprotan tangan.
4.2.1.4. Pembuatan Larutan Tetrazoiium
Cara pembuatan larutan tetrazolium disajikan pada Lampiran 3.
(1).

gunting kuku. Pada saat melubangi kulit, jangan sampai terkena kotiledon,
karena akan mempengaruhi pola pewarnaan yang terbentuk.
(2).
Rendam benih dalam air dingin selama 48 jam.
(3).
Kupas kulit dan belah benih menjadi keping benih dengan menggunakan
silet. Pengupasan dan pembelahan benih harus dilakukan secara hatihati, jangan sampai terjadi cacat. Pada saat membelah, kondisi radikel,
plumula dan kotiledon harus terbagi dua.
(4).
Rendam salah satu keping benih dalam larutan tetrazolium 0,5 % yang
ditempatkan dalam gelas piala yang telah ditutup dan dilapisi seluruhnya
dengan aluminium foil (volume larutan tetrazolium = 3 x volume benih).
(5).

4 jam.
(6).
Tempatkan benih dalam saringan, lalu bilas benih dengan aquades selama
30 - 60 detik.
(7).
lembab untuk dianalisis pola pewarnaan yang terbentuk pada radikel
plumula dan kotiledon.
(8).

20

Viabilitas benih E. cyclocarpum yang diuji dapat diketahui dengan melihat
persentase pola pewarnaan yang terbentuk dan mencocokkannya dengan kunci
interpretasi pada Tabel 4 dan Gambar 8, sedangkan contoh benih viabel dan
non viabel hasil uji tetrazolium dapat dilihat pada Gambar 9.
Tabel 4. Kunci Interpretasi Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih E. cyclocarpum
21
Gambar 8. Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Benih E.

cyclocarpum
Berdasarkan Tabel 4 dan Gambar 8, secara umum kunci interpretasi uji tetrazolium untuk benih E. cyclocarpum adalah sebagai berikut:
(1) Benih viabel :
a.
Radikel dan plumula berwarna merah dan merah muda.
b.
Kotiledon minimal mempunyai pola pewarnaan 40 % merah atau

maksimal 15 % tidak berwarna (putih).
(2) Benih non viabel:
22
a.
Benih mempunyai pola pewarnaan merah, merah muda sampai

dengan putih
b.
Kotiledon maksimal mempunyai pola pewarnaan 40 % merah atau

minimal 15 % putih.

natrium hipoklorit, etanol 70 %, kertas merang dan aluminium foil.
bahan dan alat yang digunakan untuk uji hidrogen peroksida dapat dilihat
pada Lampiran 1.
merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan
tangan.
4.3.1.3.2. Sterilisasi dengan Larutan Natrium Hipoklorit
Benih yang akan diuji disterilkan dengan cara merendamnya di dalam larutan
natrium hipoklorit (pengenceran 1 : 5) selama 15 menit, kemudian dibilas
dengan aquades dan benih siap untuk diuji.
Sterilkan benih E. cyclocarpum dengan natrium hipoklorit (lihat 5.3.1.3.2.).
(1)
Potong ujung kulit benih (berlawanan arah dengan radikel) dengan gunting
(2)
kuku.
(3)
Rendam benih tersebut dalam larutan H2O2 0,5 % (volume larutan H2O2
= 3 x volume benih) dalam gelas piala yang ditutup dengan aluminium
foil.
(4)
23
(5)
(6)
(7)
ke-3.
pengukuran dicocokkan dengan kunci interpretasi.

Benih viabel memiliki panjang radikel > 1 mm, sedangkan benih non viabel
memiliki panjang radikel < 1 mm atau tidak terjadi pemunculan radikel. Contoh
Gambar 10.
Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, natrium hipoklorit, etanol 70 %
dan kertas saring. Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala,
gunting kuku, pinset, silet, alat pengaduk, lup, semprotan tangan, oven,
inkubator, laminar flow dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang
digunakan untuk uji eksisi embrio dapat dilihat pada Lampiran 1.
Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet dan kertas saring dipanaskan
natrium hipoklorit (pengenceran 1: 5) selama 5 menit, kemudian dibilas dengan
aquades dan benih siap untuk diuji.
Pengkondisian. pemotongan embrio dan pengujian dilakukan dengan cara
24
sebagai berikut :
(1)
Sterilkan benih E. cyclacarpum dengan natrium hipoklorit (lihat 5.4.1.3.2.).
(2)

gunting kuku.
(3)
Rendam benih tersebut dalam aquades selama 48 jam dengan suhu

perendaman 25 C.
(4)
Ganti air perendam 2 x sehari guna mencegah terakumulasinya eksudat

yang dikeluarkan oleh benih.
(5)
Belah benih dan keluarkan embrionya dengan menggunakan silet. Ketika

membelah, kondisi plumula dan radikel harus utuh (tidak boleh ikut
(6)
Letakkan embrio pada cawan petri yang berisi media berupa 2 lembar
kertas saring lembab.
(7)

pada suhu konstan (20 - 25 C) selama 5 hari dengan periode
(8)
(9)
Kondisi radikel dan plumula yang diperoleh pada akhir pengamatan,


Kunci interpretasi hasil uji eksisi embrio untuk embrio benih E. cyclocarpum
hasil uji eksisi embrio dapat dilihat pada Gambar 11.
Tabel 5. Kunci Interpretasi Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih E. cyclocarpum
25
4.5. UJI BELAH

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, etanol 70 % dan kertas merang
silet, lup, semprotan tangan, oven dan alat pembagi benih. Gambar bahan
dan alat yang digunakan untuk uji belah dapat dilihat pada Lampiran 1.
juga dilakukan dengan cara menyemprotkan etanol 70 % secara merata ke
seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.
berikut :
(1)
Lubangi ujung kulit benih (berlawanan dengan arah radikel) dengan

gunting kuku.
(2)
Rendam benih tersebut dalam aquades selama 48 jam dalam gelas piala,
(3)
Kupas kulit benih dan belah benih searah keping (memanjang) dengan
menggunakan silet. Radikel, plumula dan kotiledon harus terbagi dua.
(4)
Amati warna dan penampakan radikel, plumula dan kotiledon dengan

interpretasi.

Kunci interpretasi hasil uji belah untuk benih E. cyclocarpum dapat dilihat
pada Tabel 6, sedangkan contoh benih viabel dan non viabel hasil uji belah
dapat dilihat pada Gambar 12.
26
Tabel 6. Kunci Interpretasi Hasil Uji Belah untuk Benih E. cyclocarpum
27
28
Gambar 10. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji
Hidrogen Peroksida untuk B enih E.
cyclocarpun
Belah untuk Benih E. cyclocarpun
Tetrazolium untuk Benih E. cyclocarpun
Eksisi Embrio untuk Benih
E. cyclocarpun
V. UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Teotona grandis

5.1. UMUM
T. grandis yang lebih dikenal dengan nama jati, termasuk ke dalam famili
Verbenaceae. Jenis ini merupakan salah satu jenis komersil yang banyak ditanam
dan telah dikembangkan sejak lama terutama di pulau jawa (perhutani). Untuk
mengetahui viabilitas benih T. grandis secara konvensional dengan
mengecambahkannya di persemaian pada media campuran tanah dan pasir
(1 : 1) memerlukan waktu lebih kurang 90 hari.
Buah T. grandis memiliki kulit luar yang lunak, di dalamnya terdapat kulit
buah yang keras berwarna hitam, sekitar 3 - 4 butir benih berada di dalam
buah ini. Benih T. grandis memiliki struktur tumbuh yang terdiri dari embrio,
jaringan penyimpan cadangan makanan dan pelindung. Embrio terdiri dari
kotiledon dan radikel (calon akar). Struktur tumbuh benih T. grandis dapat
Gambar 13. Sketsa Struktur Benih T. grandis

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, natrium hipoklorit, etanol 70 %,
kertas saring, kertas merang dan lembaran plastik. Alat-alat yang digunakan
adalah cawan petri, gelas piala, ragum, martil, pinset, silet, lup, semprotan
tangan, oven, inkubator, laminar flow dan alat pembagi benih. Gambar bahan
dan alat yang digunakan untuk uji eksisi embrio dapat dilihat pada Lampiran 1.
29

Cawan petri, gelas piala, pinset, silet, kertas saring dan kertas merang
juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70 % secara merata ke seluruh
Benih-benih yang akan diuji dan telah dikeluarkan dari endocarp-nya, disterilkan
dengan cara merendamnya dalam larutan natrium hipoklorit (pengenceran
1: 5) selama 5 menit, kemudian dibilas dengan aquades dan benih siap untuk
diuji.
sebagai berikut:
(1)
Keluarkan benih T. grandis dari endocarpnya dengan menggunakan
ragum dan martil secara hati-hati. Kondisi benih jangan sampai retak,
cacat atau rusak, karena benih akan mudah terkontaminasi oleh jamur.
(2)
Ambil salah satu benih dalam satu endocarp untuk mewakili satu biji
T. grandis.
(3)
Kupas kulit benih dan potong bagian kotiledon yang berada di sekitar
embrio dengan menggunakan silet membentuk potongan segitiga,
Pengupasan kulit benih dan pemotongan embrio harus dilakukan secara
hati-hati, kondisi embrio harus utuh (tidak boleh terpotong atau cacat).
Untuk menjamin kondisi aseptik selama kegiatan pemotongan, lakukan
kegiatan di dalam laminar flow di tempat yang steril. Peralatan yang
digunakan harus selalu dalam keadaan steril.
(4)
Letakkan embrio yang telah dipisahkan tersebut pada cawan petri yang
berisi media berupa 2 lembar kertas saring lembab.
(5)
pada suhu konstan (20 - 25 C) selama 8 - 9 hari dengan periode
(6)
Amati setiap hari kondisi embrio dan buang bila busuk dan berjamur.
Apabila media mulai kering, semprotkan aquades secukupnya.
(7)
Kondisi embrio yang diperoleh pada akhir pengamatan, dicocokkan dengan
kunci interpretasi.
Kunci interpretasi hasil uji eksisi embrio untuk embrio benih T. grandis dapat
dilihat pada Tabel 7, sedangkan contoh embrio viabel dan non viabel hasil uji
eksisi embrio dapat dilihat pada Gambar 14.
30
Tabel 7. Kunci Interpretasi Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih T. grandis
5.3. UJI BELAH

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, etanol 70 %, natrium hipoklorit,
kertas merang dan lembaran plastik. Alat-alat yang digunakan adalah cawan
petri, gelas piala, ragum, martil, pinset, silet, lup, semprotan tangan, oven dan
alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji belah
Cawan petri, gelas piala, pinset, silet dan kertas merang dipanaskan dalam
oven pada suhu 105 C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan
menyemprotkan etanol 70 % secara merata ke seluruh bagian alat tersebut
dengan menggunakan semprotan tangan.
berikut :
(1)
Keluarkan benih T. grandis dari endocarp-nya dengan menggunakan
ragum dan martil secara hati-hati. Kondisi benih jangan sampai retak,
cacat atau rusak, karena akan mempengaruhi hasil evaluasi pengujian.
(2)
Ambil salah satu benih dalam satu endocarp untuk mewakili satu biji
T. grandis.
(3)
Kupas kulit benih dan belah benih searah keping (memanjang) dengan
menggunakan silet. Embrio (hipokotil dan radikel) serta kotiledon harus
terbagi dua.
(4)
Amati warna dan penampakan embrio (hipokotil dan radikel) serta
kotiledon dengan mata telanjang atau menggunakan kaca pembesar (lup),
sehingga dapat ditentukan benih tersebut viabel atau non viabel, sesuai
dengan kunci interpretasi.
31

Kunci interpretasi hasil uji belah untuk benih T. grandis dapat dilihat pada
Tabel 8. Kunci Interpretasi Hasil Uji Belah untuk Benih T. grandis
32
Gambar 14. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Eksisi Embrio untuk
Benih T. Grandis
Gambar 15. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Belah untuk Benih
T. Grandis
33
VI. UJI CEPAT VIABILITAS JENlS Dalbergia latifolia

6.1. UMUM
D. latifolia yang dikenal dengan nama sonobritz, termasuk ke dalam famili
Leguminosae. Uji viabilitas benih D. latifolia secara konvensional yang dilakukan
di persemaian pada media pasir tanah (1 : 1) memerlukan waktu lebih kurang
20 hari.
Struktur tumbuh benih D. latifolia seperti halnya benih ieguminosae terdiri
atas kulit benih (testa), dua keping kotiledon serta poros embrio. Poros embrio
terdiri dari dua bagian utama, yaitu radikel dan plumula. Radikel terletak
di bagian luar kotiledon. Karena ukuran plumula benih ini yang sangat kecil
(tidak jelas) maka fokus pengamatan pada uji cepat viabilitas benih D. latifolia
dilakukan terhadap struktur tumbuh radikel dan kotiledon (Gambar 16).
Gambar 16. Sketsa Struktur Benih D. latifolia

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, garam tetrazolium (2,3,5triphenil tetrazolium chlorida), Na2HPO4.2H2O, KH2PO4, etanol 70 %, kertas
Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, pinset, silet atau
pisau tajam, oven, alat pengaduk, saringan, semprotan tangan, timbangan
dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji
tetrazolium dapat dilihat pada Lampiran 1.
35

Cawan petri, gelas piala, pinset, silet atau pisau tajam, alat pengaduk, saringan,
kertas merang dan aluminium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 OC
semprotan tangan.
(1)
Ujung kulit benih yang berlawanan arah dengan radikel dipotong dengan
menggunakan gunting kuku.
(2)
Lembabkan benih tersebut pada 6 lembar kertas merang basah selama
16 jam. Kertas merang basah yang berisi benih tersebut dimasukkan
ke dalam plastik untuk mencegah penguapan.
(3)
Kupas kulit benih secara hati-hati dengan menggunakan silet. Pada saat
mengupas kulit benih, silet tidak boleh mengenai benih, karena akan
mempengaruhi pola pewarnaan yang terbentuk.
(4)
Rendam benih dalam larutan tetrazolium 1 % yang ditempatkan dalam
gelas piala yang telah ditutup dan dilapisi seluruhnya dengan aluminiun
foil (volume larutan tetrazolium = 3 x volume benih).
(5)
2 jam.
(6)
30 - 60 detik.
(7)
lembab dan benih dibelah memanjang untuk dianalisis pola pewarnaan
yang terbentuk pada radikel dan kotiledon.
(8)
Viabilitas benih D. latifolia yang diuji dapat diketahui dengan melihat persentase
pola pewarnaan yang terbentuk dan mencocokkannya dengan kunci interpretasi
pada Tabel 9 dan Gambar 17, sedangkan contoh benih viabel dan non viabel
hasil uji tetrazolium dapat dilihat pada Gambar 18.
36
Tabel 9. Kunci Interpretasi Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih D. latifolia
Berdasarkan Tabel 9 dan Gambar 17, secara umum kunci interpretasi uji
tetrazolium untuk benih D. latifolia adalah sebagai berikut:
(1).
Benih viabel
a. Radikel 100 % merah sampai merah muda atau minimal 60 % merah
atau merah muda.
b. kotiledon minimal 40 merah dan maksimal 10 % putih yang terletak
jauh di atas poros embrio.
(2).
Benih non viabel :

a. Radikel maksimal 60 % putih dan terletak di dekat poros embrio.
b. Kotiledon kurang dari 40 % merah dan terdapat P disekitar poros
embrio.
37
Gambar 17. Sketsa Pola Pewarnaan Hasil uji Tetrazilium pada Benih D. latifolia
38

Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, pinset, silet, penggaris,
oven, alat pengaduk, inkubator dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan
alat yang digunakan untuk uji hidrogen peroksida dapat dilihat pada Lampiran
1.
Cawan petri, gelas piala, pinset, silet, alat pengaduk, kertas merang dan aluminium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 C selama 24 jam. Sterilisasi
dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70 % secara merata ke
Benomil selama 1 jam, kemudian dibilas dengan aquades dan benih siap untuk
diuji.
Pengkondisian, perendaman, dalam larutan hidrogen peroksida dan pengujian
(1)
(2)
(3)
(4)
Sterilkan benih tersebut dengan benomil (lihat 7.3.1.3.2.).

Ujung kulit benih yang berlawanan dengan radikel dipotong dengan
foil.
39
(5)
(6)
(7)
ke-5.

Benih viabel memiliki panjang radikel > 3 mm, sedangkan benih non viabel
memiliki panjang radikel < 3 mm atau tidak terjadi pemunculan radikel. Contoh
Gambar 19.
kertas saring, kertas merang dan lembaran plastik.
Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, pinset, silet, lup,
semprotan tangan, oven, inkubator, laminar flow dan alat pembagi benih.
Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji eksisi embrio dapat dilihat
pada Lampiran 1.
Cawan petri, gelas piala, pinset, siiet, kertas saring dan kertas merang
dipanaskan dalam oven pada suhu 105 C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga
dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70 % secara merata ke seluruh
Benomil selama 1 jam, kemudian dibilas dengan aquades dan benih siap untuk
diuji.
40

Pegkondisian, pemotongan embrio dan pengujian dilakukan dengan cara sebagai
berikut :
(1)
Sterilkan benih tersebut dengan benomil (lihat 7.3.1.3.2.).
(2)

(3)

(4)
Kupas kulit benih dengan menggunakan silet, kemudian dibelah embrionya

dikeluarkan. Pada saat pembelahan radikel harus utuh (tidak boleh ikut
(5)
Letakkan embrio (titik tumbuh) pada cawan petri yang berisi media 2
lembar kertas saring lembab.
(6)

(7)
(8)
Kondisi embrio (titik tumbuh) yang diperoleh pada akhir pengamatan,


Kunci interpretasi hasil uji eksisi embrio untuk embrio benih D. latifolia dapat
dilihat pada Tabel 10, sedangkan contoh embrio viabel dan non viabel hasil uji
eksisi embrio dapat dilihat pada Gambar 20.
Tabel 10. Kunci Interpretasi Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih D. latifolia
6.5. UJI BELAH

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, etanol 70 % dan kertas merang.
Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, silet atau pisau tajam, lup,
semprotan tangan, oven dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat
yang digunakan untuk uji belah dapat dilihat pada Lampiran 1.
41

pengambilan contoh dilakukan berdasarkan Pedoman Standardisasi Pengujian
6.5.1.3. Sterilisasi Bahan dan Mat
Cawan petri, pinset, silet atau pisau tajam dan kertas merang dipanaskan
berikut :
(1)

(2)

(3)
Kupas kulit benih dan dibelah searah keping (memanjang) dengan

menggunakan silet radikel dan kotiledon terbagi dua.
(4)
Amati warna dan penampakan radikel tumbuh dan kotiledon dengan

ditentukan benih tersebut hidup atau mati, sesuai dengan kunci
interpretasi.

Kunci interpretasi hasil uji belah untuk benih D. latifolia dapat dilihat pada
Tabel 11. Kunci Interpretasi Hasil Uji Belah untuk Benih D. latifolia
42
43

Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih
D. latifolia
Gambar 18. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil
Uji Tetrazolium untuk Benih D. latifolia

Hasil Uji Belah untuk Benih D. latifolia

Benih D. latifolia
VII. UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Agathis loranthifolia

7.1. UMUM
A. loranthifolia yang dikenal dengan nama damar, termasuk ke dalam famili

Pinaceae. Uji viabilitas secara konvensional dengan mengecambahkan benih
A. loranthifolia melalui metode uji di atas kertas (UDK) memerlukan waktu
lebih kurang 24 hari. Jenis ini termasuk benih rekalsitran dengan penurunan
viabilitas yang sangat tinggi, sehingga untuk mengetahui nilai viabilitasnya
harus diuji secepat mungkin sebelum viabilitas benih semakin turun.
Fokus pengamatan pada uji cepat viabilitas benih A. loranthifolia dilakukan
terhadap embrio dan endosperma (Gambar 22).
Gambar 22. Sketsa Struktur Benih A. loranthifolia

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, garam tetrazolium (2,3,5triphenil tetrazolium chlorida), Na2HPO4.2H2O, KH2PO4, etanol 70 %, kertas
45
7.2.1.3. Steriiisasi Bahan dan Alat

Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, alat pengaduk, saringan,
kertas merang dan aluminium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 C
semprotan tangan.
Pengkondisian, perendaman dalam larutan tetrazolium dan pengujian
(1)
Kupas kulit benih A. loranthifolia dengan cara menggunting ujung kulit

benih dengan gunting kuku atau pinset. Pengupasan kulit benih dilakukan
secara hati-hati, jangan sampai endosperma cacat atau rusak.
(2)

24 jam. Tebarkan benih pada kertas merang basah, kemudian kertas
digulung dan dimasukkan ke dalam plastik agar benih tidak kering.
(3)
Kupas kulit ari yang melekat pada benih dengan pinset. Selama kegiatan
pengupasan kulit ari tersebut, benih harus selalu dalam keadaan lembab.
(4)
Belah sebagian keping benih secara memanjang untuk membantu

penyerapan larutan tetrazolium, kemudian rendam benih tersebut dalam
larutan tetrazolium 1% yang ditempatkan dalam gelas piala yang telah
ditutup dan dilapisi seluruhnya dengan aluminium foil (volume larutan
tetrazolium = 3 x volume benih).
(5)

4 jam.
(6)
30 - 60 detik.
(7)
Belah benih tersebut dengan menggunakan silet. Pada saat membelah,

kondisi embrio (radikel dan kotiledon) dan endosperma harus terbagi
dua.
(8)
lembab untuk dianalisis pola pewarnaan yang terbentuk pada embrio
(radikel dan kotiledon) dan endosperma.
(9)

46

Viabilitas benih A. loranthifolia yang diuji dapat diketahui dengan melihat
persentase pola pewarnaan yang terbentuk dan mencocokkannya dengan kunci
interpretasi pada Tabel 12 dan Gambar 23, sedangkan contoh benih viabel dan
non viabel hasil uji tetrazolium dapat dilihat pada Gambar 24.
Tabel 12. Kunci Interpretasi Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih A. loranthifolia
Berdasarkan Tabel 12 dan Gambar 23, secara umum kunci interpretasi uji
tetrazolium untuk benih A. loranthifolia adalah sebagai berikut:
(1).
(2).
Benih viabel
a.
Radikel dan kotiledon berwarna merah sampai merah muda tanpa

putih
b.
Endosperm berwarna merah sampai putih (< 20% putih dengan >
50 merah)
Benih non viabel :

a.
Terdapat warna putih pada radikel dan kotiledon atau overstain
b.
Pada endosperm terdapat > 20% putih dengan warna merah < 50
atau overstain
47
Benih Viabel
2a
2b
Benih Non Viabel
Gambar 23.

A. loranthifolia

bahan dan alat yang digunakan untuk uji tetrazolium dapat dilihat pada
Lampiran 1.
merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.
48

(1)
Kupas kulit benih secara hati-hati jangan sampai menimbulkan luka
mekanis.
(2)
foil.
(3)
(4)
Ganti larutan H2O2 dengan larutan H2O2 yang baru pada hari ke-1, ke- 3
dan ke-6 (tergantung kekeruhan rendaman).
(5)
(6)
Kunci interpretasi hasil uji hidrogen peroksida didasarkan pada panjang radikel
yang muncul pada akhir periode pengamatan. Benih viabel memiliki panjang
radikel > 2 mm, sedangkan benih non viabel memiliki panjang radikel < 2 mm
atau tidak terjadi pemunculan radikel. Contoh benih viabel dan non viabel hasil
uji hidrogen peroksida dapat dilihat pada Gambar 25.
kertas saring, kertas merang dan lembaran plastik. Alat-alat yang digunakan
adalah cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, alat pengaduk, lup,
semprotan tangan, oven, inkubator, laminar flow dan alat pembagi benih.
Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji eksisi embrio dapat dilihat
pada Lampiran 1.
49

Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, kertas saring dan kertas
merang dipanaskan dalam oven pada suhu 105 C selama 24 jam. Sterilisasi
dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70 % secara merata ke
7.4.1.4. Pengkondisian, Pemotongan Embrio dan Penyujian
sebagai berikut :
(1)
Potong ujung benih, kemudian rendam selama 24 jam.
(2)
Kupas kulit ari yang melekat pada benih dengan pinset. Selama kegiatan
pengupasan kulit ari tersebut, benih harus selalu dalam keadaan lembab.
(3)
Belah sedikit bagian endosperma dengan menggunakan silet dan

keluarkan embrionya secara hati-hati. Ketika membelah, kondisi embrio
harus utuh (tidak boleh ikut terbelah atau cacat). Untuk menjamin kondisi
aseptik selama kegiatan pemotongan, lakukan kegiatan di dalam laminar
flow atau di tempat yang steril. Peralatan yang digunakan harus selalu
dalam keadaan steril.
(4)
Letakkan embrio pada cawan petri yang berisi media 3 lembar kertas
saring lembab.
(5)

(6)
(7)
Kondisi embrio (radikel dan kotiledon) yang diperoleh pada akhir

pengamatan, dicocokkan dengan kunci interpretasi.

Kunci interpretasi hasil uji eksisi embrio untuk embrio benih A. loranthifolia
hasil uji eksisi embrio dapat dilihat pada Gambar 26.
Tabel 13. Kunci Interpretasi Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih A. loranthifolia
50
7.5. UJI BELAH

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, etanol 70 %, natrium hipoklorit,
kertas merang dan lembaran plastik. Alat-alat yang digunakan adalah cawan
petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, lup, semprotan tangan, oven dan
alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji belah
juga dilakukan dengan cara menyemprotkan etanol 70 % secara merata ke
Pengkondisian, pembelahan dan pengujian benih dilakukan dengan cara
sebagai berikut :
(1)
Kupas kulit benih dengan pinset atau gunting kuku.
(2)

ke dalam plastik atau cawan petri agar benih tidak kering/mencegah
penguapan.
(3)
Kupas kulit ari benih dengan pinset dan belah benih dengan
menggunakan silet. Embrio dan endosperma harus terbagi dua.
(4)
Amati warna dan penampakan embrio dan endosperma dengan mata

telanjang atau menggunakan kaca pembesar (lup), sehingga dapat
interpretasi.

Kunci interpretasi hasil uji belah untuk benih A. loranthifolia dapat dilihat
pada Tabel 14, sedangkan contoh benih viabel dan non viabel hasil uji belah
dapat dilihat pada Gambar 27.
51
Tabel 14. Kunci Interpretasi Hasil Uji Belah untuk Benih A. loranthifolia
52
53

Benih A. loranthifolia

Hasil Uji Belah untuk Benih
A. loranthifolia
Uji Tetrazolium untuk Benih A.
loranthifolia
Uji Eksisi Embrio untuk B enih
A. loranthifolia
DAFTAR PUSTAKA
Bhodthipuks, J., P. Pukkitayacame, B. P. S. Wang, S. Saelim and S. L. Yu. 1994.
Rapid Viability Testing of Tropical Tree Seed. Training Course Proceeding No. 4.
ASEAN Forest Tree Seed Centre Project. Thailand.
Bonner, F. T, J. A. Vozzo, W. W. Elam and S. B. Land Jr. 1994. Tree Seed Technology
Training Course: Instructor's Manual. United State Departemen of Agriculture,
Forest Service, Southern Forest Experiment Station. New Orleans.
BTP. 2000. Pedoman Standarisasi Pengujian Mutu Fisik dan Fisiologis Benih Tanaman
Hutan, Buku I. Publikasi Khusus Vol. 2 No. 4. Balai Teknologi Perbenihan.
Bogor.
Byrd, H. W. 1988. Pedoman Teknologi Benih (Terjemahan). State College. Mississipi.
Gordon, A. G. 1992. Seed Testing in Seed Manual for Forest Trees. Forestry
Commision. London.
ISTA. 1985. Seed Science and Technology. International Seed Testing Association.
Zurich, Switzerland.
_________. 1991. Buku Pegangan Benih Pohon dan Belukar, Terjemahan dari Tree
and Shrub Seed Hand Book. Indonesia Forest Seed Project, Directorate of
Forest Seed Ministry of Forestry and Estate Crops, Danish International
Development Assistance. Indonesia - Denmark.
Laloup, M. 1955. Seed Testing. FAO of United Nation. Rome.
Leadem, C. L. 1984. Quick Test for Tree Seed Viability. Management Report No.
18 ISSN. 0702 - 9861. B. C. Ministry Forest Land Research Branch.
Manan, S. 1976. Silvikultur. Proyek Pengembangan Peningkatan Mutu Perguruan
Tinggi IPB. Bogor.
Mugnisjah, W. Q, dan A. setiawan. 1990. Pengantar Produksi benih. Rajawali
Press. Jakarta.
Sadjad, S. 1980. Panduan Pembinaan Mutu Benih Tanaman Hutan. Kerjasama
Proyek Pusat Perbenihan Kehutanan Direktorat Reboisasi dan Rehabilitasi
Direktorat Jenderal Kehutanan dengan Lembaga Afiliasi Institut Pertanian Bogor.
Bogor.
_______. 1993. Dari Benih Kepada Benih. PT Gramedia Widiasarana Indonesia.
Jakarta.
Sutopo, L. 1993. Teknologi Benih. CV Rajawali Pers. Jakarta.
Willan, R. L. 1985. A Guide to Fjrest Seed Handling. DANIDA Forest Seed Centre
Hunlebaek Denmark - FAO.
Zanzibar, M. 1996. Aplikasi Uji Cepat Viabilitas pada Benih Tanaman Hutan, Prosiding
Ekpose Program dan Hasil-Hasil Penelitian Perbenihan Kehutanan. Balai
Teknologi Perbenihan, Badan Penelitian dan Pengembangan Departemen
Kehutanan. Bogor.
_______ et al. 2001. Standar Prosedur dan Kunci Interpretasi Uji Cepat Viabilitas Benih
Tanaman Hutan (Acacia mangium, Gmelina arborea, Paraserianthes
falcataria, Pinus merkusii, Swietenia macrophylla). Laporan Uji Coba. Balai
Teknologi Perbenihan. Bogor.
55
Lampiran 1. Bahan dan Alat yang Digunakan untuk Uji Cepat Viabilitas Benih
(a). Uji Tetrazolium, (b). Uji Hidrogen Peroksida, (c). Uji Eksisi
Embrio dan (d). Uji Belah
(a)
(b)
(c)
(d)
57
Lampiran 2. Prosedur Pengambiian Contoh Benih Untuk Pengujian

(BTP, 2000)
1.
Contoh kirim dan komposit dihamparkan, kemudian dibagi menjadi 4

bagian, yaitu 1, 2, 3 dan 4.
2.
Bagian 1 dan 3 dicampur, kemudian dihamparkan dan selanjutnya

dibagi menjadi 4 bagian yaitu 5, 6, 7 dan 8.
3.
Langkah 2 selanjutnya hingga diperoleh contoh kerja sesuai dengan

ketentuan
58
Lampiran 3. Cara Pembuatan Larutan Tetrazoiium

Pembuatan larutan tetrazolium dilakukan dengan cara sebagai berikut :
(1)
Larutan I
Larutkan 9,078 gram KH2PO4 dalam

aquades 1000 ml
(2)
Larutan II
Larutkan 11,876 gram Na2HPO4.2H2O

dalam aquades 1000 ml
(3)
Larutan Penyangga
Campurkan 400 ml Larutan I dengan

600 ml Larutan II (2 : 3)
(4)
Larutan Tetrazolium 1%
Masukkan 10 gram garam tetrazolium

(2,3,5 triphenil tetrazolium chlorida)
ke dalam 1000 ml Larutan Penyangga
(5)
Larutan Tetrazolium 0,5% :
Masukkan 5 gram garam tetrazolium

(2,3,5 triphenil tetrazolium chlorida)
ke dalam 1000 ml Larutan Penyangga
(6)
Larutan Tetrazolium harus dihindarkan dari cahaya langsung, yaitu

dengan cara menempatkan larutan tersebut ke dalam gelas piala yang
telah dilapisi aluminium foil. Pencampuran benih dengan larutan tersebut
dilakukan dalam kamar gelap. Selain itu, apabila tidak digunakan,
larutan tersebut disimpan dalam lemari es.
(7)
Khusus untuk pengujian benih Agathis loranthifolia, larutan tetrazolium

ditambah garam dapur sebanyak garam tetrazolium yang dimasukan,
hal ini bertujuan agar pola pewarnaan yang terbentuk lebih baik.
59
Lampiran 4. Cara Pembuatan Larutan Hidrogen Peroksida
Larutan H2O2 yang dijual di pasaran umumnya memiliki konsentrasi yang masih
tinggi, yaitu 35%, sedangkan yang digunakan untuk uji H2O2 ini berkisar antara
0,5 - 2 %. Oleh karena itu, larutan H2O2 35% harus diencerkan terlebih
dahulu. Rumus yang digunakan untuk reaksi pengenceran adalah sebagai
berikut :
C1 x V1 = C2 x VZ
dimana :
C1
C2
V1
=
=
=
V2
Konsentrasi larutan asli

Konsentrasi larutan yang diinginkan
Volume larutan asli yang diperlukan untuk memperoleh
larutan yang diinginkan
Volume larutan yang diinginkan
Pembuatan larutan hidrogen peroksida dilakukan dengan cara sebagai berikut:

(1) Larutan H2O2 0,5%
Campurkan 14,29 ml larutan H2O2 35% ke dalam

985,71 ml aquades sehingga diperoleh 1000 ml
larutan H2O2 0,5%.
(2) Larutan H2O2 1%

larutan H2O2 1%.
(3) Larutan H2O2 2%

larutan H2O2 2%.
60
Lampiran 5. Glosari
Benih (botanis)
Biji tumbuhan yang digunakan manusia untuk tujuan

pertanaman.
Benih
: Semua bahan tanaman baik yang dihasilkan secara
(perundang-undangan) generatif maupun vegetatif.
Benih ortodok
Watak/sifat dapat disimpan lama (tidak cepat menurun

viabilitasnya) pada kondisi kadar air benih yang rendah
(4 - 8 %) dalam penyimpanan.
Benih rekalsitran
Watak/sifat benih benih cepat menurun viabilitasnya

dan memerlukan kadar air yang tinggi (20 - 50 %) dalam
penyimpanannya yang mendekati atau sama dengan
kadar air benih segar.
Contoh benih
Sejumlah benih, baik dalam ukuran volume atau berat

yang ditarik dari masing-masing lot benih dengan cara
acak, untuk kepentingan pengujian benih.
Contoh kerja
Sebagian contoh kiriman yang akan diuji
Contoh kiriman
Sebagian atau seluruh contoh komposit yang dikirim

ke laboratorium pengujian.
Contoh komposit
Campuran semua contoh primer yang diambil dari lot

benih.
Contoh primer
Sejumlah benih yang diambil dari satu titik di dalam lot

benih.
Dormansi
Proses beristirahatnya suatu tanaman, bagian tanaman

atau jaringan yang dalam kondisi petumbuhan yang
optimum tidak menunjukan pertumbuhan sewajarnya.
Embrio
Satu tanaman baru yang terjadi dari bersatunya gamet

jantan dan gamet betina pada proses pembuahan.
Garam tetrazolium :
Merupakan suatu senyawa kimia dengan rumus 2,3,5

triphenyl tetrazolium clorida atau bromida yang
digunakan sebagai pewarna untuk menbedakan sel
hidup dengan sel mati pada uji tetrazolium.
Germinator
Alat pengecambah yang memenuhi syarat optimum

dalam faktor tumbuh, yaitu kelembaban udara, suhu
dan cahaya yang optimum.
Hidrogen
peroksida (H2O2)
suatu larutan yang tidak stabil dan tidak berwarna,

larutan ini dapat larut dalam air dan alkohol serta
mudah didekomposisikan dalam air dan oksigen bila
disimpan pada suhu yang terlalu tinggi/rendah atau di
bawah cahaya langsung.
61
Kecambah normal :
Kecambah benih yang tumbuh normal sesuai ketentuan

baku dalam pengujian viabilitas benih, untuk mensimulasikan pertumbuhan normal tanaman di lapangan.
Kotiledon
Bagian dari struktur tumbuh benih yang berfungsi

sebagai jaringan cadangan makanan.
Lot
Sejumlah benih yang akan diuji mutunya.
Plumula
Bagian dari struktur tumbuh benih yang akan membentuk organ batang.
Radikel
Bagian dari struktur tumbuh benih yang akan membentuk organ akar.
Ragum
Uji daya berkecambah benih, di mana contoh kerja

diletakan di antara substrat kertas yang telah dilembabkan.
Sterilisasi
Kegiatan pembebasan/pembersihan suatu objek (alat,

bahan atau media) dari organisme yang tidak diinginkan,
seperti fungi, bakteri, virus atau yang lainnya.
UAK (uji antar

kertas)

diletakan di antara substrat kertas yang telah dilembabkan.
UDK (uji di atas

kertas)

diletakan di atas substrat kertas yang telah dilembabkan.
Uji belah
(cutting test)
Merupakan salah satu uji cepat viabilitas benih dengan

cara melihat langsung penampakan struktur tumbuhnya
yang menunjukan kondisi yang baik (hidup).
Uji cepat viabilitas :
Metode pengujian viabilitas benih yang didasarkan pada

proses metabolisme benih yang merupakan indikasi tak
langsung.
Uji eksisi embrio
Merupakan salah satu uji cepat viabilitas benih yang

dilakukan dengan mengamati perilaku embrio dalam
kondisi jaringan setelah pemotongan dan inkubasi
selanjutnya, di mana embrio yang viabel akan
memperlihatkan warna hijau, tumbuh atau tetap segar
sementara embrio yang non viabel akan rusak.
Uji hidrogen
peroksida
Merupakan salah satu uji cepat viabilitas benih dengan

memanfaatkan sifat larutan hidrogen peroksida yang
dapat merangsang perkecambahan benih dan dapat
digunakan untuk mempercepat perkecambahan.
Uji tetrazolium
Merupakan salah satu uji cepat viabilitas benih secara

biokimia yang didasarkan kepada pewarnaan yang
dihasilkan setiap sel hidup dengan garam tetrazolium
yang membentuk endapan formazan merah sedangkan
sel-sel yang mati menunjukan warna putih.
62
Viabel
Hidup
Viabilitas benih
Kemampuan benih untuk hidup, yang ditunjukan oleh

gejala pertumbuhan atau gejala metabolismenya dan
dapat pula ditunjukkan oleh keadaan organel
sitoplasma atau kromosom.
Viablitas potensiai :
Viabilitas benih yang menunjukkan kemampuan benih

tumbuh normal dalam kondisi optimim menghasilkan
tanaman normal yang berproduksi normal.
Viabilitas total
Mencerminkan daya hidup benih yang hanya

ditunjukkan oleh sekedar gejala hidup benih melalui
metabolisme benih, misalnya kemampuan benih
mengambil oksigen pada saat tertentu.
Vigor benih
Viabilitas benih yang menunjukkan kemampuan benih

tumbuh normal dalam kondisi sub optimum,
menghasilkan tanaman normal yang berproduksi
normal atau berproduksi di atas normal dalam kondisi
sub optimum.
63

Viabilitas

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Viabilitas

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Deskripsi Asli:

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Viabilitas

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

BADAN PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN KEHUTANAN

BALAI PENELITIAN TEKNOLOGI PERBENIHAN TANAMAN HUTAN

Bogor, Desember 2003

Ir. Darmawan Budiantho, MP

KATA PENGANTAR CETAKAN KEDUA

KATA PENGANTAR CETAKAN KE 2 ...............................................

DAFTAR ISI ...................................................................................

DAFTAR GAMBAR ........................................................................

DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................

Mutu Benih ..................................................................

METODE UJI CEPAT VIABILITAS .......................................

Tetrazolium Topografis .............................................

UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Acacia crassicarpa ........

UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Enterolobium cyclocarpum

Uji Tetrazolium Topografis .............................................

UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Tectona grandis ............

UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Dalbergia latifolia .........

VII. UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Agathis loranthifolia .. ....

7.3.2. Kunci Interpretasi ...............................................

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................

Kunci Interpretasi Uji Tetrazolium untuk Benih A. crassicarpa .....

Kunci Interpretasi Uji Eksisi Embrio untuk Benih A. crassicarpa ...

Kunci Interpretasi Uji Belah untuk Benih A. crassicarpa..............

Kunci Interpretasi Uji Tetrazolium untuk Benih E. cyclocarpum ..

Kunci Interpretasi Uji Eksisi Embrio untuk Benih E. cyclocarpum.

Kunci Interpretasi Uji Belah untuk Benih E. cyclocarpum..........

Kunci Interpretasi Uji Eksisi Embrio untuk Benih T. grandis .........

Kunci Interpretasi Uji Belah untuk Benih T. grandis .................

Kunci Interpretasi Uji Tetrazolium untuk Benih D. latifolia ...........

Kunci Interpretasi Uji Eksisi Embrio untuk Benih D. latifolia .........

Kunci Interpretasi Uji Belah untuk Benih D. latifolia ....................

Kunci Interpretasi Uji Tetrazolium untuk Benih A. loranthifolia ....

Kunci Interpretasi Uji Eksisi Embrio untuk Benih A. loranthifolia ..

Kunci Interpretasi Uji Belah untuk Benih A. loranthifolia ............

Sketsa Struktur Benih A. crassicarpa ....................................

Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Benih

Sketsa Struktur Benih E. cyclocarpum ..................................

Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Benih

Sketsa Struktur Benih T. grandis ...........................................

Sketsa Struktur Benih D. latifolia............................................

Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Benih

Sketsa Struktur Benih A. loranthifolia ...................................

Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Benih

Prosedur Pengambilan Contoh Benih untuk

Cara Pembuatan Larutan Tetrazolium .......................................

Cara Pembuatan Larutan Hidrogen Peroksida ............................

jangka waktu tertentu. Sedangkan metode pengujian yang didasarkan pada

II. METODE UJI CEPAT VIABILITAS

Jika diperlukan keterangan segera tentang viabilitas dari suatu kelompok

Untuk benih-benih yang sangat dorman atau yang lambat berkecambah

Kadangkala suatu kelompok benih gagal berkecambah atau mungkin

Efek phytotoxic dari fungisida, insektisida atau fumigasi dengan metyl

Uji tetrazolium tidak selalu dapat memberikan keterangan tentang

Uji tetrazolium memerlukan lebih banyak kecakapan dan keputusan dari

2.2. Uji Hidrogen Peroksida

Menurut Bonner et al. (1994), keuntungan penggunaan metode eksisi embrio

III. UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Acacia crassicarpa

Gambar 1. Sketsa Struktur Benih A. crassicarpa