Analisis Obat

ANALISIS OBAT DALAM CAIRAN HAYATI (DARAH)
KELOMPOK II (DUA)
Anggota Kelompok
1. Nama: Fadilah Ayu Lestari
2. Nama: La Lio
3. Nama: Lili Handayani
14 022
4. Nama: Nurlela Sundari Z
5. Nama : Rezky Nahdiati Rianda
14 039
NIM: O1A1 14 013

NIM: O1A1 14 019
NIM: O1A1
NIM: O1A1 14 034
NIM: O1A1
LABORATORIUM FARMAKOLOGI & FARMASI KLINIK

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS HALU OLEO
2016
LAPORAN RESMI PRAKTIKUM FARMAKOKINETIKA

FAKULTAS FARMASI
Laboratorium Farmakologi & Farmasi
Klinik
Kampus Hijau Bumi Tridharma Anduonohu Jl. H.E.A. Mokodompit
Telp. (0401) 3194163, Fax (0401) 3190006 Kendari 93232, Website: uho.ac.id
Nama/NIM
: Fadilah Ayu Lestari
/ O1A114013
La Lio
/ O1A114019
Lili Handayani
/ O1A114022
Nurlela Sundari Z.
/ O1A114034
Rezky Nahdiati RiandA
/ O1A114039
Kelompok
: II (Dua)
Tanggal
: 28 Mei 2016
Judul Percobaan : ANALISIS OBAT DALAM CAIRAN HAYATI

(DARAH)
I. Pendahuluan
1. Tujuan Percobaan
Tujuan dilakukannya percobaan ini adalah untuk mengetahui
langkah-langkah analisis obat dalam cairan hayati (darah).
2. Latar Belakang
Ilmu biofarmasetika dan farmakokinetika obat dan produk obat
bermanfaat dalam memahami hubungan antara sifat fisiko kimia obat
maupun
efek
farmakologi
dan
klinik
dari
obat
tersebut.
Studi
biofarmasetika memerlukan penyelidikan berbagai faktor yang mungkin

mempengaruhi laju serta jumlah obat yang juga mempengaruhi pelepasan
obat dari suatu produk obat (sediaan). Sedangkan farmakokinetika
mempelajari tentang absorbsi obat, distribusi serta eliminasinya ( proses
ekskresi dan metabolisme). Ketersediaan
diukur
pada
keadaan
dengan menentukan
pasien
kadar
hayati
suatu
yang bersangkutan
dalam
plasma
obat
dapat
(secara in vivo)
darah setelah mencapai
keseimbangan antara serum cairan tubuh (keadaan tunak). Ada kolerasi

yang baik antara kadar obat dalam plasma dengan efek terapi. Ketersediaan
hayati digunakan untuk memberikan gambaran mengenai keadaan dan
kecepatan obat diabsorbsi dari bentuk sediaan dan digambarkan dengan

FAKULTAS FARMASI
Klinik
kurva kadar waktu setelah obat diminum dan berada pada jaringan
biologik atau larutan seperti darah dan urin. Data ketersediaan hayati dapat
pula digunakan untuk menentukan jumlah atau bagian obat yang diabsorbsi
dari bentuk sediaan, kecepatan obat diabsorbsi, masa kerja obat berada
didalam cairan biologik atau jaringan bila dihubungkan dengan respon
pasien dan hubungan antara kadar obat dalam darah dengan efektivitas
terapi/efek toksik (Firdaus, 2009 )
Profil farmakokinetik obat
dalam
jaringan
atau
profil
farmakokinetik fisiologi (physiologically based pharmacokinetic) suatu

senyawa obat adalah distribusi senyawa tersebut di dalam jaringan atau
organ tertentu yang diterangkan berdasarkan model fisiologi. Model ini
mampu menerangkan distribusi obat di dalam jaringan, namun belum
banyak digunakan karena memerlukan data-data fisiologi jaringan, sehingga
memerlukan banyak studi pendukung. Farmakokinetik fisiologis senyawasenyawa tetrasiklin dapat menerangkan sifat-sifat absorpsi, distribusi,
metabolisme, dan ekskresi senyawa-senyawa tersebut dalam jaringan atau
organ tertentu dalam tubuh. Dengan mengetahui profil farmakokinetik obat
di dalam jaringan atau organ akan diperoleh banyak informasi yang
bermanfaat terutama untuk terapi penyakit tertentu, menentukan drug of
choice, managemen terapi dan analisis residu. Interaksi suatu molekul obat
pada reseptor menginisiasi suatu rangkaian proses yang menyebabkan
respon farmakologi. Menurut Shargel dan Yu (1993), farmakodinamik
merupakan hubungan antara kadar obat di tempat aksinya (reseptor) dan
respon farmakologi, dengan melibatkan efek fisiologi dan biokimia dari
struktur molekul obat. Menurut Rowland and Tozer (1989), dalam hal
pemberian obat, terdapat dua fase yaitu fase farmakokinetik yaitu hubungan
antara dosis, bentuk dosis, frekuensi dan cara pemberian dengan konsentrasi
dan waktu dalam tubuh, serta fase farmakodinamik yaitu mengenai efek dari

FAKULTAS FARMASI
Klinik
sejumlah konsentrasi obat pada tempat aksinya. Interaksi suatu molekul obat
pada reseptor menginisiasi suatu rangkaian proses yang menyebabkan
respon farmakologi. Menurut Shargel dan Yu (1993), farmakodinamik
merupakan hubungan antara kadar obat di tempat aksinya (reseptor) dan
respon farmakologi, dengan melibatkan efek fisiologi dan biokimia dari
struktur molekul obat. Menurut Rowland and Tozer (1989), dalam hal
pemberian obat, terdapat dua fase yaitu fase farmakokinetik yaitu hubungan
antara dosis, bentuk dosis, frekuensi dan cara pemberian dengan konsentrasi
dan waktu dalam tubuh, serta fase farmakodinamik yaitu mengenai efek dari
sejumlah konsentrasi obat pada tempat aksinya. ( Wijayanti, 2010).
Sejak beberapa tahun yang lalu, pola pengontrolan kualitas dan
pemakaian klinik obat dipengaruhi oleh suatu disiplin ilmu yang
mempelajari nasib obat dalam tubuh. Model-model kompartemen hanyalah
suatu representasi matematika yang tidak bisa dihubungkan dengan keadaan
fungsi- fungsi tubuh secara tegas. Oleh karena itu " volume distribusi" tadi
disebut " volume distribusi yang timbul" (apparent volume of distribution).
Manfaat lain dari farmakokinetika adalah mempelajari faktor-faktor yang
dapat menipengaruhi proses -proses biologik yang dialami oleh obat dalam
tubuh mulai dari absorpsi, distribusi, metabolisme maupun ekskresi.
Termasuk di sini misalnya faktor-faktor genetik maupun lingkungan baik
lingkungan internal maupun eksternal tubuh. Misalnya dengan mengukur
parameter kinetika eliminasi (khusus untuk metabolisme) suatu obat dalam
satu populasi, dapat diidentifikasi kemungkinan adanya sub populasi yang
lain dari umumnya anggota populasi dalam hal kemampuan metabolisme
obat tertentu (Sriwidodo, 1985).
Obat yang masuk ke dalam tubuh
pemberian
umumnya
mengalami
proses
melalui berbagai rute
absorpsi,
distribusi,
dan
pengikatan untuk sampai di tempat kerja dan menimbulkan efek.

Kemudian, dengan atau tanpa proses biotransformasi, obat diekskresi dari

FAKULTAS FARMASI
Klinik
dalam tubuh. Seluruh proses ini disebut proses farmakokinetik dan berjalan
serentak. Farmakokinetika menujukkan kinetika absorpsi obat, distribusi
dan
eliminasi,
yakni ekskresi dan metabolisme. untuk menentukan
parameter farmakokinetika dimana pada umumnya penentuan parameter

farmakokinetika suatu obat dilakukan menggunakan data kadar obat
tersebut dalam darah atau saluran sistemik Sihabuddin dkk., 2011).
II.
Cara Kerja
1. Bahan dan Alat
Alat
Bahan
1. Batang pengaduk
2. Gelas kimia
3. Gelas ukur
4. Kuvet
5. Labu ukur 100 mL
6. Lumpang dan alu
7. Pipet tetes
8. Rak tabung
9. Sendok tanduk
10. Sentrifuge
11. Spektrometer
12. Spoit dan jarum suntik
13. Tabung Effendorf
14. Tabung Reaksi
15. Timbangan analitik
16. Vortex
2.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
Akuades
Alkohol
Antalgin
Aluminium foil
Darah
Larutan EDTA
Larutan TCA
Metampiron murni
Tisu
Cara Kerja
a) Pembuatan Larutan Induk Metampiron Murni
- Ditimbang 0,05 g metampiron murni
- Dimasukkan dalam gelas kimia 100 mL
METAMPIRON
- Ditambahkan sedikit akuades
- Diaduk sampai homogen
- Dimasukkan dalam labu ukur 100 mL
- Diadkan sampai tanda tera
- Digojok sampai homogen
- Disimpan dalam gelas kimia dan dilabeli
-

FAKULTAS FARMASI
Klinik
Larutan Induk
b) Pembuatan larutan standar
LARUTAN INDUK METAMPIRON
- Diambil 1 mL larutan induk
- Diadkan dengan akuades sampai tanda
tera
- Disimpan dalam gelas kimia dan
dilabeli (5 ppm)
- Diulangi untuk konsentrasi 10 ppm, 15
ppm, 20 ppm dan 25 ppm.

c) Pembuatan Larutan Stok Antalgin
- Digerus
2 tablet sampai halus dan homogen
ANTALGIN
Larutan Sampel
menggunakan lumpang dan alu
- Ditimbang 0,125 g
- Dimasukkan dalam gelas kimia 100 mL
- Ditambahkan sedikit akuades
- Diadkan sampai tanda tera
- Dimasukkan dalam gelas kimia dan dilabeli

FAKULTAS FARMASI
Klinik
Larutan stok antalgin

d) Pembuatan Larutan Seri Konsentrasi Antalgin
LARUTAN STOK ANTALGIN
-
Diambil 20 mL
Dimasukkan dalam labu ukur 100 mL
Diadkan akuades sampai tanda tera
Digojok sampai homogen
Disimpan dalam gelas kimia kemudian
dilabeli (100 ppm)

- Diulangi prosedur untuk konsentrasi 200
ppm, 300 ppm dan 400 ppm.
-
Larutan antalgin
- Diikat lengan atas probandus

e) Pengambilan Sampel -Darah
Diikat lengan atas probandus
- Diusapkan bagian lengan yang akan diambil
PROBANDUS
darahnya dengan kapas yang mengandung
alkohol 70%
- Diambil darah probandus dengan spoit
sebanyak 1 ml
- Diusapkan kembali dengan alkohol
-

FAKULTAS FARMASI
Klinik
Sampel darah
f) Preparasi Larutan Blanko
DARAH
-
Diambil dari probandus sebanyak 1 mL

Dimasukkan dalam tabung reaksi
Ditambahkan 5 tetes EDTA
Diaduk sampai homogen
Ditambahkan 4 mL larutan stok dengan
konsentrasi 4 ppm
- Diulangi prosedur untuk konsentrasi 200, 300
dan 400 ppm.
Larutan sampel

FAKULTAS FARMASI
Klinik
I. HASIL PERCOBAAN
1. Tabel Pengamatan
a) Larutan Baku
Kosentrasi (ppm)
Absorbansi
5 ppm
0,1736
10 ppm
0,3032
15 ppm
0,4303
20 ppm
0,5788
25 ppm
0,6354
b) Kurva Larutan Baku
Hubungan Antara Kadar vs Absorbansi

0.7
f(x) = 0.12x + 0.06

R = 0.99
0.6
0.5
0.4
Axis Title
absorbansi
0.3
Linear (absorbansi)
0.2
0.1
0
0
Axis Title
c) Larutan Sampel/Blanko

FAKULTAS FARMASI
Klinik
Sampel Darah
Sampel Darah
Absorbansi
Konsentrasi
100 ppm
1,4834
11,834
200 ppm
1,9259
15,525
300 ppm
2,3118
18,743
400 ppm
2,7855
22,694
Kurva Sampel Darah

ABSORBANSI
3
2.5
f(x) = 0x + 0.06
R = 1
2
1.5
absorbansi
Absorbansi
Linear (absorbansi)
1
0.5
0
20,000
10,000
30,000
Kadar
2. Perhitungan
a) Perhitungan Analisis Kadar
Y = 0,1199x + 0,0645

FAKULTAS FARMASI
Klinik
Jadi,
- C1
Y
= 0,1199x + 0,0645
1,4834 = 0,1199x + 0,0645
1,4189
X
= 0,1199
-
X
= 11,834 ppm
C2
Y
= 0,1199x + 0,0645
1,9259 = 0,1199x + 0,0645
1,8614
X = 0,1199
X = 15,525 ppm
C3
Y
= 0,1199x + 0,0645
2,3118 = 0,1199x + 0,0645
2,2473
X = 0,1199
X = 18,743 ppm
C4
Y
= 0,1199x + 0,0645
2,7855= 0,1199x + 0,0645
2,721
X = 0,1199
X
= 22,694 ppm
b) Analisa Data
1. Perhitungan perolehan kembali (recovery)
Diketahui : Sampel 1 = 100 ppm
Sampel 2 = 200 ppm
Sampel 3 = 300 ppm
Sampel 4 = 400 ppm
Kadar terukursampel 1 = 11,834

FAKULTAS FARMASI
Klinik
Ditanyakan :
Penyelesaian:

Kadar diketahuisampel 1 = 10
P% =.......?
Perolehan kembali =
N
o
1
Sampel
100 ppm
kadar terukur
kadar d iketa h ui
x 100 %
Hasil
Perhitungan
Perolehan kembali =
11,834
10
15,525
15
18,743
20
22,694
25
118,34 %
100 %
2
200 ppm
Perolehan kembali =
103,5 %
100 %
3
300 ppm
Perolehan kembali =
93,71 %
100 %
4
400 ppm
Perolehan kembali =
100 %
2. Kesalahan Sistemik
Diketahui
: P%sampel 1 = 118,34 %
90,77 %

FAKULTAS FARMASI
Klinik
P%sampel 2 = 103,5 %
P%sampel 3 = 93,71 %
P%sampel 4 = 90,77 %
Ditanyakan
: Kesalahan sistemik = . . . .?
Penyelesaian :
Kesalahan sistematik = 100 - % recovery
No
Sampel
Perhitungan
Hasil
100 ppm
Kesalahan sistematik = 100118,34 %
-18,34 %
200 ppm
Kesalahan sistematik = 100 103,5 %
-3,5 %
300 ppm
Kesalahan sistematik = 100 93,71%
6,29 %
400 ppm
Kesalahan sistematik = 100 90,77%
9,23 %
3. Kesalahan acak
SD
x 100
CV = kadar ratarata
SD =
( xix )
n1
SD =
(11,83417,199) + ( 15,52517,199 ) + ( 18,74317,199 ) +(22,69417,199)

41
SD =
(5,365 ) + (1,674 ) + (1,544 ) +(5,495)2

3
SD =
( 28,783 ) + ( 2,802 ) + ( 2,383 ) +(30,195)

3

FAKULTAS FARMASI
Klinik
SD =
SD =
21,387
64,163
3
SD = 4,624
Kadar rata-rata =
11,834 +15,525+18,743+22,694
4
Kadar rata-rata =
68,796
4
Kadar rata-rata = 17,199

SD
x 100
CV = kadar ratarata
CV =
4,624
x 100
17,199
CV = 26,88%
III.
Pembahasan
Parameter farmakokinetika suatu obat diperoleh berdasarkan hasil
pengukuran
kadar
utuh
dan
atau
metabolitnya
didalam
cairan
hayati(darah,urin,saliva,atau cairan tubuh lainnya). Oleh karena itu agar nilai-nilai

parameter kinetik obat dapat dipercaya metode penetapan kadar harus memenuhi
berbagai kriteria yaitu meliputi perolehan kembali(recovery), presisi dan akurasi.
Kepekaan dan selektivitas merupakan kriteria lain yang penting hal mana lainnya
tergantung dari alat ukur yang dipakai.
Selektivitas metode menempati prioritas karena bentuk obat yang akan
ditetapkan dalamcuplikan hayati adalah bentuk tak berubah atau metabolitnya.
Artinya metode analisis yang digunakan harus memiliki spesifitas yang tinggi
terhadap salah satu bentuk obat
yang akanditetapkan tersebut. Bahkan lebih
memperluas lagi pengertian selektivitas metode ini yakni kemampuan suatu

metode penetapan kadar untuk membedakan suatu obat dari metabolitnya.

FAKULTAS FARMASI
Klinik
Pemilihan metode yang memiliki selektivitas tinggi ini perlu mendapatkan

perhatian khusus.Mengapa?karena hal ini berkaitan dengan rumus-rumus
matematik yang akan diterapkan dalam
menghitung
farmakokinetika.
diturunkan berdasarkan data
Rumus
matematika
yang
parameter
pengukuran kadar obat tak berubah dalam cuplikan hayati berlainan dengan yang
diturunkan dari data kadar metabolitnya. Sensitivitas merupakan metode
berkaitan dengan kadar terendah yang dapat diukur oleh metode yang digunakan.
Dalam penelitian farmakokinetika pilihan metode analisis juga tergantung
pada
tingkat
sensitivitas
yang
dimiliki
oleh
metode.
Ini
dapat
dimengerti mengingat dalam menghitung parameter farmakokinetik suatu obat

diperlukan sederetan data kadar obat dari waktu kewaktu
tertinggi sampai
kadar
atau dari kadar
terendah dalam cuplikan hayati yang digunakan.
Ketelitian (akurasi) merupakan ketelitian metode analisis atau kedekatan antara

nilai terukur dengan nilai yang diterima baik nilai konvensi, nilai sebenarnya, atau
nilai rujukan. Akurasi diukur sebagai banyaknya analit yang diperoleh kembali
pada suatu pengukuran dengan
Untuk
pengujian
senyawa
melakukan
obat
spiking
pada
suatu
sampel.
akurasi diperoleh dengan membandingkan
hasil pengukuran dengan bahan rujukan standar. Suatu metode dikatakan tepat
jika ia menghasilka hasil yang sama dalam sederet penentuan ulangan (replikasi ).
Akurasi minimal dihitung minimal pada 5 kali konsentrasi. Hasil akurasi untuk
metode bioanalisis tidak boleh lebih besar dari 15%, kecuali untuk konsentrasi
rendah tidak boleh lebih besar dari 20%. Pada nilai akurasi dihitung kesalahan
sistemik yang merupakantolak ukur inakurasi penetapan kadar berupa kesalahan
konstan atau proposional. Persyaratanyang dituntut bagi suatu metode analisa
adalah jika kesalahan sistemik kurang dari 10%. Ketelitian
diketahui
dari
harga
perolehan
kembalinya
(recovery)
(akurasi) dapat
yang dinyatakan
sebagai % eror (harga sesungguhnya-harga uji, dibagi harga sesungguhnya, dikali

100%). Perolehan kembali adalah suatu tolak ukur efisiensi analisis dan dapat

FAKULTAS FARMASI
Klinik
bernilai positifdan negative.
Ketepatan
(presisi)
merupakan
ukuran
keterulangan metode analisis dan biasanya diekspresikan sebagai simpangan

bakurelatif dari sejumlah sampel yang berbeda signifikan secara statistic.
Sesuai dengan ICH (International Conference on Harmonization), presisi
harus dilakukan dengan tingkatan yang berbeda, yaitu:
Keterulangan yaitu
ketepatan pada kondisi percobaan yang sama (berulang) baikorangnya

,peralatan,tempat maupun waktunya. Presisi
kondisi
antara
yaitu ketepatan
pada
percobaan yang berbeda baik orangnya,peralatan, tempat maupun
waktunya. Ketertiruan merujuk pada hasil-hasildari labolatorium yang lain.

Dokumentasi presisi seharusnya mencakup: simpangan baku, simpangan baku
relativeatau koefisien variasi dan kisaran kepercayaan. Pengujian presisi pada saat
awal validasimetode seringkali hanya menggunakan 2 parameter yang pertama
yaitu keterulanagn danpresisi antara. Reprodusibilitas biasanya dilakukan ketika
akan melakukan uji banding antarlabolatorium .presisi seringkali diekspresikan
dengan SD atau standart deviasi relative danserangkaian data. Data untuk uji
menguji presisi seringkali dikumpulkan sebagai bagiankajian-kajian lain berkaitan
dengan presisi seperti linearitas atau akurasi.Biasanya replikasi 6-15 dilakuakan
pada sampel tunggal untuk tiap konsentrasi. Pada pengujian KCKT nilai RSD
antara 1-2% biasanya dipersyaratkan untuk senyawa-senyawa aktif dalam
jumlah yangbanyak, sedangkan untuk senyawa dengan kadar kecil RSD berkisar
antara 5-15%. Pada nilaipresisi dihitung kesalahan acak yang merupakan tolak
impresicion suatu analisis. Persyaratanyang dituntut bagi suatu metode analisa
adalah jika kesalahan acak kurang dari 10%.
Percobaan ini bertujuan agar mahasiswa dapat memahami langkahlangkah analisis obatdalam cairan hayati. Obat yang dianalisis dalam praktikum
kali ini adalah sulfametoksazoldengan menggunakan metode Bratton-Marshall.
Metode Bratton-marshall merupakan caraumum untuk penetapan kadar senyawa
yang mempunyai amina aromatis primer.Analisis dalam percobaan ini bertujuan

FAKULTAS FARMASI
Klinik
untuk menguji seberapa besar ketepatan danketelitian metode yang digunakan.

Beberapa parameter farmakokinetik yang digunakan adalahrecovery,kesalahan
sistematik sebagai parameter ketelitian (presisi) serta perhitungan standar deviasi
(SD), dan kesalahan acak (CV) sebagai parameter ketepatan (akurasi). Parameter
farmakokinetik ini merupakan besaran yang diturunkan secara metematis dari
hasil pengukuran kadar obat atau metabolitnya dalam darah. Analisis ini dilakukan
dengan membuat seri kadar obat tertentu dalam darah yang kemudian diproses
lebih lanjut sehingga dapat dibaca absorbansinya dan dibuat kurva bakunya.
Langkah pertama yang dilakukan di ambil darah dari probandus. Darah
yang diambil kemudian ditampung dalam tabung reaksi yang kemudian
ditambahkan 4 mL larutan stok dengan konsentrasi 4 ppm yang sebelumnya telah
ditambahkan 5 tetes anti koagulan (EDTA). Tujuan dari penambahan anti
koagulan ini adalah untuk untuk mencegah darah agar tidak menggumpal. Jika
sampel darah yang diambil mengalami koagulasi/menggumpal maka yang akan
keluara dalah serumnya, sedangkan yang digunakan untuk pemeriksaan adalah
plasma darah karena obat akan berinteraksi dengan protein plasma untuk
membentuk suatu
kompleks
obat-makromolekul
yang
sering
disebut
ikatan obat-protein,dengan kata lain maka percobaan tidak dapat dilakukan bila
darah mengalami penggumpalan. Setelah selanjutnya di masukan dalam efendorf.
Tambahkan TCA
sebanyak
ml.
TCA
(Tri
Kloro
Asetat)
merupakan suatu asam organik yang cukup kuat. Dalam percobaan ini TCA
berfungsi untuk memberikan suasana asam bagi reaksi diazotasi; sebagai donor
proton untuk reaksi selanjutnya, serta merupakan senyawa yang dapat
menghentikan
kerja
akanmenyebabkan
protein
enzim yang
denaturasi
danmengendapkannya
dapat
protein
saat
me-metabolisme
plasma.
sentrifugasi
TCA
obat
akan
sehingga
protein tidakmengganggu pembacaan absorbansi nantinya.
sekaligus
mengikat
keberadaan

FAKULTAS FARMASI
Klinik
Setelah pemberian TCA, kemudian dilakukan vortex selama untuk

meng-homogenkan campuran dan disentrifugasi selama
kecepatan
2000
rpm
untuk
menyempurnakan
menit dengan
pengendapan.
Endapan
akan terpisah pada bagian bawah dan pada supernatan terdapat cairan bening yaitu
plasma darah. Kemudian supernatannya diambil
tanpa endapannya. Hal ini
dilakukan dengan tujuan untuk mengambil obat yang bebas dari protein plasma
karena obat yang terikat pada protein plasma tidak akan aktif secara
farmakologiksehingga tidak memiliki efek terapeutik atau dengan kata
lain akan dapat menyebabkan data hasil pengamatan tidak valid.
Pada sampel darah dibuat blanko. Pada blanko tidak dilakukan
penambahan
larutan antalgin sehingga
untuk
menyamakan
volume
ditambahkan aquadest sebanyak volume larutan antalgin yang ditambahkan.

Blanko tersebut digunakan sebagai faktor koreksi terhadap hasil pembacaan
absorbansi larutan yang mengandung larutan obat, sehingga nantinya hasil
pembacaan absorbansi terhadap supernatan yang mengandung larutan obat harus
dikurangi terlebih dahulu dengan nilai absorbansi blanko-nya.
Dari data penetapan kadar dengan metode Bratton-marshall, maka
dapat
diperoleh perolehan kembali (recovery), kesalahan acak, dan kesalahan
sistematik. Perolehan kembali ataurecovery merupakan tolak ukur efisiensi

analisis, sedangkan kesalahan sistemik merupakan tolakukur penetapan kadar.
Dan keslahan acak merupakan tolak ukur inprecision suatu analisis, dandapat
bersifat
positif
negative. Kesalahan
acak
identik
dengan variabilitas
pengukuran dan dicerminkan oleh tetapan variasi. Untuk menilai farmakokinetik

obat di dalam tubuh, pendekatan langsung
yang paling baik adalah dengan
mengukur obat di dalam darah, serum atau plasma. Biasanya serum atau plasma
diambil dari supernatan darah yang disentrifugasi dengan ditambahkan
antikoagulan. Ada 3 jenis parameter farmakokinetik, yaitu parameter primer,
sekunder, dan turunan. Parameter farmakokinetik primer meliputi kecepatan

FAKULTAS FARMASI
Klinik
absorbsi, volume distribusi, dan klirens. Parameter farmakokinetik sekunder di

antaranya waktu paro eliminasi dan kecepatan konstanta eliminasi, sedangkan
parameter farmakokinetik turunan harganya tergantung dari dosis dan kecepatan
pemberian obat.
Untuk mendapatkan nilai nilai parameter farmakokinetik obat yang dapat
dipercaya, metode penetapan kadar harus memenuhi berbagai kriteria, yaitu
meliputi recovery (perolehan kembali), presisi, dan akurasi. Harga dari perolehan
kembali didapat dari perhitungan:
Recovery=
hargauji
x 100 =P
harga sesungguhnya
Perolehan kembali ini merupakan tolok ukur efisiensi analisis. Sedangkan

inpresisi penetapan kadar obat dapat dilihat dari kesalahan acak ( random
analytical error ). Kesalahan acak atau disebut juga kesalahan tidak tergantung
merupakan kesalahan yang nilainya tidak dapat diramalkan dan tidak ada aturan
yang mengaturnya serta nilainya berfluktuasi. Nilai dari kesalahan acak dapat
dicari dengan menggunakan rumus :
Kesalahan acak ( CV )=
simpangan baku
x 100
purata
Presisi menyatakan seberapa dekat nilai hasil dua kali atau lebih pengulangan
pengukuran. Semakin dekat nilainilai hasil pengulangan pengukuran maka
semakin presisi pengukuran tersebut. Sedangkan inakurasi penetapan kadar
dapat dilihat dari kesalahan sistematiknya yang dapat dihitung menggunakan
rumus:
Kesalahan sistemik =
harga sesungguhnyaharga uji

x 100
harga sesungguhnya
Kesalahan sistematik =100 P

FAKULTAS FARMASI
Klinik
Kesalahan ini bisa berupa kesalahan konstan atau proporsional karena

mempunyai nilai definitif ( nilai tertentu ) yang mana dapat menyebabkan hasil
dari analisis tersebut mengarah ke arah yang lebih kecil atau ke arah yang lebih
besar dari rata-rata. (Gholib, I.G., dan Rohman, A., 2012). Akurasi atau bisa
disebut dengan ketelitian sendiri dapat diartikan sebagai nilai kedekatan hasil
pengukuran dengan true value (nilai sesungguhnya).
Dari hasil analisis diharapkan mendapat hasil perolehan kembali/recovery
yang tinggi (75-90 % atau lebih). Maka dari itu, metode analisis kadar obat
merupakan kunci utama kesahihan data farmakokinetik yang diperoleh. Sehingga
sebelum melakukan studi, langkah awal yang harus dilakukan adalah menguji
suatu metode analisis. Ada 4 parameter yang digunakan untuk menilai validitas
metode
analisis,
yaitu
selektivitas,
sensitivitas,
akurasi
dan
presisi.
Akan tetapi ada yang menyebutkan bahwa parameter yang digunakan untuk
menguji validitas suatu metode ada 6, yaitu selektivitas, sensitivitas, akurasi,
presisi, kekasaran dan efisiensitas (praktis).
Sementara
itu,
kesalahan
sistematik
merupakan
kesalahan
yangmempunyai nilai definitif (nilai tertentu). Hasil percobaan dapat mengarahke

arah
yang
.Kesalahn
lebih
kecil
sistematis
atau
bersifat
arah
yang
konstan
lebih
dan
besar
dari
rata-rata
berhubungan
dengan
ketelitian(akurasi) . Kesalahan jenis ini mengakibatkan penyimpangan tertentu

darimean . Ada beberapa faktor yang mempengaruhi kesalahan sistematik,antara
lain :1. Kesalahan personil dan operasi2. Kesalahan alat dan bahan3. Kesalahan
metodeAdanya kesalahan sistematik, kadang kadang menyebabkan rata-rata
yang didapat menyimpang agak besar dari nilai sebenarnya. Walaupunkesalahan
ini tidak mungkin dihindari secara mutlak, tetapi dengan caratertentu
dapat

FAKULTAS FARMASI
Klinik
diperkecil
sehingga
hasil
yang
diperoleh
tidak
terlalumenyimpang dari
nilai sebenarnya .
Dalam percobaan ini akan dilakukan langkah langkah yang perlu dikerjakan untuk
optimasi analisis, yang meliputi:
1. Penentuan waktu jangka larutan obat yang memberi resapan tetap (khusus
untuk reaksi warna)
2. Penetapan panjang gelombang larutan obat yang memberikanresapan
maksimum atau penetapan eksitasi atau emisi
3. Pembuatan kurva baku
4. Perhitungan
nilai
perolehan
kembali,
kesalahan
acak
dan
kesalahan sistematik.
Ada 3 macam kesalahan yang dapat dilakukan selama praktikum :
1. Kesalahan gamblang ( gross eror )
2. Kesalahan acak ( random error )
3. Kesalahan sistematis (systematic error )
Kesalahan
gamblang
karenamelibatkan
merupakan
kesalahan
yang
kesalahan
besar,
yang
akibatnaya,
sudah
jelas
kita
harus
memutuskanuntuk mengabaikan percobaan yang telah kita lakukan dan

memuainyadari
awal
lagi
secara
menyeluruh. Contoh kesalahan gamblang
adalah sampel cuplikan hayati tumpah, pengambilan kadar obat salah, dan lain
lain
Kesalahan
acak
atau
disebut
juga
kesalahan
yang
tidak
tergantung(indeterminate error) merupakan kesalahan yang nilainya tidak

dapat diramalakan
dan
nilainyaberfluktuasi.
selaluterjadi
sebagai
tidak
Kesalahan
akibat
ada
aturan
acak
merupakan
adanaya
sedikit
yang
mengaturnya,
jenis
variasi
kesalahan
yang
tidak
serta
yang
dapat
dikontroldalam pelaksanaan prosedur. Kesalahan acak dapat digambarkan

sebagaikurva normal ( Gaussian curve ) (Gandjar, Rohman, 2010)Dari kurva,

FAKULTAS FARMASI
Klinik
dapat dikemukakan :1. Kesalahan yang kecil lebih sering terjadi2. Kesalahan yang
besar dapat dikatakan jarang terjadi3. Besarnya kesalahan positif dan negatif
sama.
IV.
V.
Kesimpulan
Daftar Pustaka
Firdaus, M.I. 2009. analisis kualitatif parasetamol pada sediaan jamu
serbuk pegal linu yang beredar di purwokerto. Pharmacy. Vol 6
(2)
Sihabuddin, M., dkk. 2011. Pharmacokinetic Parameters Determination of
Gendarusin A in Men Subject Urine after Administration of Ethanol
Extract of JusticiagendarussaBurm. f. Leaf. JurnalMedikaPlanta.
Vol. 1(4).
Sriwidodo. 1985. Cermin Dunia Kedokteran. Pusat Penelitian dan
Pengembangan PT. Kalbe Farma : Jakarta.
Wijayanti, A.D., Lukman H., Irkham W. 2010. Penentuan Efektifitas
Oksitetrasiklin Melalui Parameter Farmakokinetik/farmakodinamik
pada Plasma dan Jaringan Ayam Broiler. Jurnal Veteriner Volume
11(2).

FAKULTAS FARMASI
Klinik

Analisis Obat

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

Analisis Obat

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Deskripsi Asli:

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Analisis Obat

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

ANALISIS OBAT DALAM CAIRAN HAYATI (DARAH)

NIM: O1A1 14 013

LABORATORIUM FARMAKOLOGI & FARMASI KLINIK

LAPORAN RESMI PRAKTIKUM FARMAKOKINETIKA

UNIVERSITAS HALU OLEO

: Fadilah Ayu Lestari

Rezky Nahdiati RiandA

Judul Percobaan : ANALISIS OBAT DALAM CAIRAN HAYATI

biofarmasetika memerlukan penyelidikan berbagai faktor yang mungkin

darah setelah mencapai

keseimbangan antara serum cairan tubuh (keadaan tunak). Ada kolerasi

UNIVERSITAS HALU OLEO

farmakokinetik fisiologi (physiologically based pharmacokinetic) suatu

UNIVERSITAS HALU OLEO

melalui berbagai rute

pengikatan untuk sampai di tempat kerja dan menimbulkan efek.

UNIVERSITAS HALU OLEO

yakni ekskresi dan metabolisme. untuk menentukan

parameter farmakokinetika dimana pada umumnya penentuan parameter

UNIVERSITAS HALU OLEO

ppm, 20 ppm dan 25 ppm.

UNIVERSITAS HALU OLEO

Larutan stok antalgin

dilabeli (100 ppm)

- Diikat lengan atas probandus

UNIVERSITAS HALU OLEO

Diambil dari probandus sebanyak 1 mL

- Diulangi prosedur untuk konsentrasi 200, 300

dan 400 ppm.

UNIVERSITAS HALU OLEO

b) Kurva Larutan Baku

Hubungan Antara Kadar vs Absorbansi

f(x) = 0.12x + 0.06

UNIVERSITAS HALU OLEO

Kurva Sampel Darah

UNIVERSITAS HALU OLEO

UNIVERSITAS HALU OLEO

Kadar terukursampel 3 = 18,743

UNIVERSITAS HALU OLEO

Kesalahan sistematik = 100118,34 %

Kesalahan sistematik = 100 103,5 %

Kesalahan sistematik = 100 93,71%

Kesalahan sistematik = 100 90,77%

(11,83417,199) + ( 15,52517,199 ) + ( 18,74317,199 ) +(22,69417,199)

(5,365 ) + (1,674 ) + (1,544 ) +(5,495)2

( 28,783 ) + ( 2,802 ) + ( 2,383 ) +(30,195)

UNIVERSITAS HALU OLEO

Kadar rata-rata = 17,199

hayati(darah,urin,saliva,atau cairan tubuh lainnya). Oleh karena itu agar nilai-nilai

yang akanditetapkan tersebut. Bahkan lebih

memperluas lagi pengertian selektivitas metode ini yakni kemampuan suatu

UNIVERSITAS HALU OLEO

Pemilihan metode yang memiliki selektivitas tinggi ini perlu mendapatkan

diturunkan berdasarkan data

dimengerti mengingat dalam menghitung parameter farmakokinetik suatu obat

atau dari kadar

terendah dalam cuplikan hayati yang digunakan.

Ketelitian (akurasi) merupakan ketelitian metode analisis atau kedekatan antara