Hemoglobina, Eritrograma, Alterações Morfológicas Dos Eritrócitos
Hemoglobina, Eritrograma, Alterações Morfológicas Dos Eritrócitos
Hemoglobina, Eritrograma, Alterações Morfológicas Dos Eritrócitos
SNTESE DE HEMOGLOBINA
Hemoglobina
Sntese da Hemoglobina
Incio: Proeritroblastos
maior quantidade: eritroblastos basfilos; eritroblastos policromticos; eritroblastos ortocromticos
reticulcitos: 10 - 20 %
hemcia madura - no h sntese
heme e globina sintetizados separadamente
Produo de Eritrcitos
Estrutura do HEME
Sntese da Hemoglobina
Processa-se no citoplasma do eritroblasto, aps ter lugar
formao do heme e das cadeias de globina;
O heme sintetizado ao nvel da mitocndria, enquanto as
cadeias de globina se formam em ribossomos especficos do
citoplasma.
Degradao da Hb
Esgotamento metablico e diminuio da oxigenao da Hb;
Alteraes degenerativas;
So removidos pelo sistema monoctico-macrofgico (bao, fgado e MO)
2,3 Difosfoglicerato
A reao entre Hemoglobina e o 2,3 DPG pode ser considerada como se segue:
Hb O2 +2,3-DPG Hb DPG + O2
Um aumento no nvel de 2,3 DPG na hemcia aumenta a quantidade de oxignio liberada
pela hemoglobina em uma dada presso parcial de oxignio, isto , o 2,3 DPG desvia a curva
de dissociao do oxignio para a direita.
DETERMINAO DO HEMATCRITO
Hematcrito (Ht ou Hct) o volume da massa eritrocitria expressa em porcentagem (ou em
frao decimal). O hematcrito pode ser determinado por tecnologia automtica ou manual.
3 - Colocar o capilar na microcentrifuga e centrifugar por 5-10 min a 10.000 -12.000 rpm.
Causas de Erro
Excesso de EDTA.
Coagulao da amostra ou sangue hemolisado.
Microcentrfugas com rotaes alteradas.
Leitura incorreta dos resultados
Contadores Eletrnicos
Nos contadores eletrnicos o Hematcrito obtido pelo aparelho atravs da
multiplicao dos eritrcitos pelo VCM (Volume Corpuscular Mdio).
o
Como o hematcrito foi originado por tcnicas tradicionais para permitir o clculo do VCM;
nestas circunstncias (atravs de contadores eletrnicos), ele preciso e contextual, porm
intil para o tradicional objetivo.
Valores de Referncia
Ht abaixo dos valores referenciais encontra-se
nas anemias, hemorragias agudas, gravidez
Ht acima dos valores referenciais encontra-se
nas poliglobulias, queimaduras, desidratao.
Alberto Galdino - Biomedicina
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DOSAGEM DE HEMOGLOBINA
A determinao da concentrao de Hb pelos mtodos manual e automatizado baseia-se no
mesmo princpio:
- As clulas so lisadas e todas as formas de Hb so convertidas em cianometahemoglobina,
que um componente estvel e mensurvel pela determinao da absorbncia a 540nm.
- Diferente da medida do Ht, que calculado na maioria dos equipamentos, a [ ] de Hb
feita diretamente, tornando essa medida o parmentro de escolha para o diagnstico de
anemia.
Princpio: determinao colorimtrica pelo mtodo da Cianometahemoglobina
Mtodo Manual
Princpio: Utiliza-se uma soluo de ferricianeto (lquido de Drabkin), que converte o ferro da
hemoglobina (ferroso) em frrico, formando metahemoglobina, que se combina com o
cianeto de potssio para formar cianometahemoglobina, medida em espectrofot: 540 nm.
Obs.: Utiliza-se sempre um padro cuja concentrao de hemoglobina conhecida
Drabkin: soluo de cianeto de potssio e ferrocianeto de potssio.
Procedimento
Colocar 20 l de amostra de sangue total em 5 ml do lquido de Drabkin em tubo de ensaio
(utilizar micropipeta e ponteira).
Limpar a parte externa da ponteira com papel absorvente: lavar trs vezes o interior da
ponteira, por aspirao e expulso.
Agitar, aguardar pelo menos 5 minutos e determinar a absorbncia em 540 nm, zerando o
aparelho com o prprio lquido de Drabkin (branco).
Clculos
Tcnicas automatizadas
- Grande capital
- Rpida execuo de amostras
- Corpo tcnico pequeno
- Aumento da reprodutibilidade, preciso e exatido
- Maior segurana para o operador
Lquido de Turk
Lquido de Turk cido actico glacial.....30ml
FM = PC x PD
CC
PC = Profundidade da cmara (que passa ser uma constante igual a 10);
PD = Proporo da diluio (este parmetro varia com a diluio utilizada que em geralmente
de 1:20 ou 1:40 por satisfazer as contagens leucocitrias rotineiramente obtidas);
CC = Campos contados (aqui tambm temos uma constante igual a 4, referente aos 4 campos
laterais da cmara de Neubauer, contendo cada um 16 quadradinhos)
Procedimento
1) 4 ml de lquido diluidor (lquido de Hayem)
2) 20 L de amostra (limpar cuidadosamente a parte externa da ponteira com papel absorvente)
3) Transferir a amostra para o tubo com o lquido diluidor lavando a ponteira no lquido por
sucessivas aspirao e expulso da amostra. (diluio 1:200).
4) Homogeneizar a amostra do tubo por inverso (cuidadosamente para no romper as
hemcias).
Diluentes
5) Encher a cmara de contagem e realizar a contagem;
Lquido de Dacie : citrato trissdico
rea de contagem : 1/5 do quadrado
Lquido de Gower : sulfato de sdio
Central Aumento : 400x
Lquido de Hayen : bicloreto de mercrio
Fator de diluio: 1:200
Clculo da Contagem
Mtodo Automatizado
Impedncia Eltrica
Mtodo baseado na determinao de mudanas na resistncia
eltrica que produzem pulsos eltricos mensurveis.
O nmero de pulsos gerado indicativo do nmero de partculas.
A amplitude de cada pulso eletricamente proporcional ao
volume da partcula.
Contagem de Hemcias
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HEMOGRAMA: ERITROGRAMA
Doenas hematolgicas
Processos Infecciosos e Inflamatrios
Emergncias mdicas e cirrgicas
Quimioterapia e Radioterapia
Doenas crnicas em geral
Eritrograma
Consiste dos mtodos laboratoriais que determinam os parmetros hematolgicos da srie
vermelha no sangue perifrico: contagem de eritrcitos, dosagem de hemoglobina,
determinao do hematcrito, clculo dos ndices hematimtricos e anlise da morfologia
eritrocitria.
O eritrograma o conjunto das anlises que incluem
contagem de eritrcitos,
dosagem da hemoglobina,
determinao do hematcrito (ou micro-hematcrito).
Dessas anlises obtm-se os ndices hematimtricos que so importantes na classificao
laboratorial das anemias.
Os ndices hematimtricos so trs:
VCM:
Ht(%) x 10
RBC (milhes/L)
Valores normais: 80 96 fL
HCM:
Hb (g/dL) x 10
RBC (milhes/L)
CHCM:
Hb (g/dL) x 100
Ht(%)
VCM:
Ht(%) x 10
RBC (milhes/L)
HCM:
Hb (g/dL) x 10
RBC (milhes/L)
CHCM:
Hb (g/dL) x 100
Ht(%)
Hemcias (milhes/uL)
Hemoglobina (g/dL)
Hematcrito (%)
Indices Hematimtricos:
Volume corpuscular mdio VCM (fL)
Hemoglobina corpuscular mdia HCM (pg)
Concentrao de hemoglobina corpuscular mdia CHCM (%
RDW (%)
Morfologia Eritrocitria
-Tamanho
-Colorao
-Forma
-Incluses
Contagem de Eritrcitos
Eritrcitos
Dosagem de Hemoglobina
Considera-se portador de anemia o indivduo cuja
dosagem de hemoglobina inferior a:
13 g/dl no homem adulto
12 g/dl na mulher adulta
11 g/dl na mulher grvida
11 g/dl em crianas entre 6 meses e 6 anos
12 g/dl em crianas entre 6 anos e 14 anos
Policitemia
Aumento no volume corporal de eritrcitos circulantes
Eritrocitose
Aumento da concentrao de eritrcitos determinada pela
contagem do nmero de clulas, do hematcrito ou da
hemoglobina.
Alberto Galdino - Biomedicina
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Contagem de Reticulcitos
Os reticulcitos so eritrcitos jovens, recm-liberados pela MO e que ainda contm RNA
ribossmico.
Pela exposio das clulas no fixadas a certos corantes, como a azul de cresil brilhante ou o
novo azul de metileno, os ribossomos so precipitados e corados, aparecendo como um
retculo. Como as clulas ainda estavam vivas quando foram expostas ao corante, essa
colorao chamada de supravital.
A contagem de reticulcitos uma tcnica relativamente simples
servindo para averiguar a velocidade de produo dos eritrcitos
em resposta a anemias, sendo um parmetro importante, servindo
os valores relativos (expressos em percentagem) tambm de base
para converso em valores absolutos (expressos por milmetro
cbico) o qual reflete com mais fidedignidade a atividade
eritropotica, em funo de que nas anemias de um modo geral, a
contagem em percentagem no um parmetro inteiramente
confivel para averiguar a adequada resposta da MO.
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IPR =
Reticulcitos (%) x
tempo de maturao
Leucograma
Leuccitos circulantes no sangue perifrico:
Neutrfilos, eosinfilos, basfilos,
moncitos e linfcitos
Leucocitose: nmero total de leuccitos acima do
limite superior normal (> 11.000 mm3)
Leucopenia: nmero total de leuccitos abaixo do
limite inferior normal (< 4.000 mm3)
Neutrofilia, neutropenia, eosinofilia, eosinopenia,
basofilia, basopenia, monocitose, monocitopenia,
linfocitose e linfocitopenia.
Hematcrito (%)
45 (%)
Contagem de Plaquetas
Plaquetas: 150.000 450.000 mm3
Trombofilia (trombocitose ou plaquetose): nmero de plaquetas
aumentado.
Aumento da produo: aps hemorragias ou doena
mieloproliferativa crnica (trombocitemia essencial; LMC)
Diminuio da destruio: aps a esplenectomia
Trombocitopenia: diminuio das plaquetas circulantes
Menor produo: Hipofuno ou insuficincia da MO
Maior destruio: Prpura trombocitopnica imunolgica
Maior utilizao: Prpura trombocitopnica trombtica
Eritrograma
Eritrograma consiste dos mtodos laboratoriais
que determinam os parmetros hematolgicos da
srie vermelha no sangue perifrico: contagem de
eritrcitos, dosagem de hemoglobina, determinao
Alberto
Galdino - Biomedicina
do hematcrito, clculo dos ndices hematimtricos
e anlise da morfologia eritrocitria.
A Hgb o dado bsico do eritrograma, pois anemia
a sua deficincia abaixo dos limites de referncia
para a populao
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MORFOLOGIA ERITROCITRIA
Tamanho e Colorao
ANISOCITOSE
o aumento da variabilidade do tamanho eritrocitrio que excede a observada em um
individuo normal e sadio. Ela uma anormalidade inespecfica, comumente
encontrada nas desordens hematolgicas. Nas contagens fornecidas por instrumentos
automatizados, um aumento do RDW indicativo de anisocitose.
Histograma e RDW
So subprodutos da medida eletrnica do volume dos eritrcitos. Como os
eritrcitos so medidos um a um, o computador do aparelho gera uma curva de
frequncia, com o volume em fentolitros na abscissa, e a frequncia respectiva, na
ordenada.
A curva, denominada histograma (do volume eritride), elucidativa das
caractersticas da populao examinada, nos sangues normais, aproximadamente
gaussiana e de abertura estreita.
Quando na abcissa a curva situa-se mais esquerda h uma MICROCITOSE,
e direita uma MACROCITOSE.
Alberto Galdino - Biomedicina
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Anisocitose
Normocitose
Macrocitose
Microcitose
ANISOCROMIA
Descreve uma variabilidade excessiva no grau de colorao ou hemoglobinizao do eritrcito.
Na prtica significa um espectro que se estende desde a hipocromia at a normocromia.
A anisocromia indica, comumente, uma situao de mudana, como a progresso de uma
anemia ferropnica, ou sua resposta ao tratamento, ou, ainda, o desenvolvimento ou a
regresso da anemia de doena crnica.
A anisocromasia reflete-se no aumento do HDW medido por instrumentos automticos.
Normocromia
Hipocromia
Hipercromia
Policromatofilia ou Policromasia
Descreve os eritrcitos que tm colorao rseo-azulada, em conseqncia da captao
simultnea da eosina (pela Hb) e dos corantes bsicos (pelo RNA ribossmico). Uma vez que os
reticulcitos so clulas cujo RNA ribossmico absorve corantes supravitais, formando retculo
visvel, h um relacionamento entre os reticulcitos e as clulas policromticas.
Normcitos
A maioria dos eritrcitos normais tem a forma de disco bicncavo. Na distenso corada
apresentam um contorno aproximadamente circular, mostrando apenas pequenas
variaes quanto forma e ao tamanho.
O dimetro mdio de 7,5m. Na rea da distenso onde as clulas formam uma
camada nica, uma rea central mais plida ocupa aproximadamente um tero da clula.
Dacricitos
Queratcitos
Estomatcitos
Esquizcitos
Equincitos
Eliptcitos
Queratcitos
Incluses de HbH
Grnulos de precipitado de HbH (4) desnaturada.
Incluses Parasitrias
Pontilhado Basfilo
Grumos de material de RNA endoplasmtico,
formam-se durante a secagem do
esfregao, coram-se como minsculos e numerosos
grnulos dispersos pelo citoplasma.
Corpos de Heinz
Grnulos azuis corados pelo violeta de metila em eritrcitos
contendo Hb precipitada por desnaturao oxidativa.
Eritroblastos
Anis de Cabot
Cristal de HbC
Aglutinao de Eritrcitos
Agregados irregulares de eritrcitos aglutinados no
sangue resfriado TA,
indicam presena crioaglutininas a frio.