REGULAÇÃO

Ciclo Celular
DO CICLO CELULAR e mitose
DOS EUCARIOTOS

Célula de rim de rato em metáfase. Cromossomos

condensandos (azul), microtúbulos (vermelho) e uma
proteína do envelope nuclear – POM121 (verde).
Burke & Elenberger – Nature Rev. Mol.Cell.Biol. 3:487,
2002
As células se reproduzem pela duplicação de seus conteúdos e, então,
dividem-se em duas. Este ciclo de divisão celular é a maneira fundamental
pela qual todos os seres vivos são reproduzidos

Finalidade: divisão
celular

Fases do ciclo celular

Mecanismos de divisão
celular

Regulação do ciclo
celular
Mitose é o processo mais vísivel do ciclo celular embora
seja a etapa mais curta.
Intérfase : etapa de preparação para a mitose
-Interfase: duplicação do DNA e dos centríolos
-Fase M: segregação dos cromossomos e divisão celular
DURAÇÃO DO CICLO CELULAR

CÉLULAS MAMÍFEROS - 24 HORAS

CÉLULAS LEVEDURAS - 2 HORAS

 Duração do Ciclo Celular
Fase G0 curta Fase G0 longa

intestino folículo miócito neurônio

piloso
Divisão celular rápida Divisão celular lenta
 Fatores estimulantes
PROTEÍNAS SINALIZADORAS
PDGF (Platelet-derived growth factor)
EGF (epidermal growth factor)

RECEPTORES DE
MEMBRANA
 Proteínas regulam o Ciclo Celular

-o sistema de controle
do ciclo celular
compreende um
conjunto distinto de
proteínas

-checkpoints:
pontos de parada no
qual o ciclo celular
pode ser interrompido

-participação de sinais
extra e intracelulares
 Fases regulatórias - G1 e G2

Fase G1
Fase G2 aumento do volume
crescimento celular e celular e biossíntese
preparação para divisão
de enzimas e
componentes
estruturais

A célula
cresce em
tamanho
Fases mecânicas - S e M
Mitose
segregação dos
cromossomos e
citocinese

Síntese de DNA
duplicação do material 4C
genético
TEMPO REGULADO. Cada evento acontece a uma etapa específica,
providenciando um tempo fixo para completar cada evento.

START. Um mecanismo para iniciar eventos na ordem correta, por

exemplo entrada em MITOSE, deve sempre vir depois da replicação do
DNA.
Um mecanismo que assegure que cada evento aconteça uma única vez por
ciclo.

SISTEMAS BINÁRIOS (ligado/desligado) que dipare eventos de forma

que eles sejam completos e irreversíveis. Seria claramente desastroso se
eventos como condensação dos cromossomos ou quebra do envelope
nuclear fossem iniciados mas não completados.

ROBUSTO. Mecanismos para assegurar que o ciclo possa trabalhar

apropriadamente mesmo que partes do sistema não estejam funcionando
bem.

ADAPTABILIDADE tal que o comportamento do sistema possa ser

modificado para tipos específicos de células ou condições ambientais
 Proteínas regulam o Ciclo Celular

-fator de crescimento
PDGF
EGF

Ciclinas-Cdks

Rb (Retinoblastoma)
p53

-checkpoints:
pontos de parada no
qual o ciclo celular
pode ser interrompido

-participação de sinais
extra e intracelulares
 CICLINAS - Cdks

Acúmulo e degradação das ciclinas em embrião de ouriço do mar.

As ciclinas foram identificadas como proteínas que acumulam na interfase e são rápidamente
degradadas ao final da mitose.
O coração do sistema de controle do ciclo celular é uma família
de proteína quinases conhecidas como quinases dependentes de
ciclinas (Cdks).
As quinases somente são ativas quando ligadas a ciclinas.
A atividade dessas quinases aumentam e diminuem conforme o
ciclo celular progride . As ocilações são diretamente ligadas a
mudanças cíclicas na fosforilação de proteínas intracelulares que
iniciam ou regulam os maiores eventos da divisão celular.
- Replicação do DNA
- Mitose
- Citocinese
Proteinas quinases dependentes de ciclinas determinam a progressão do ciclo
celular

Ciclinas mitóticas (G2 e M)

Ciclinas G1 (G1 e S)
A degradação das ciclinas determina a inativação das Cdks.
 Combinação de ciclinas e proteínas quinases (Cdk) controlam a
passagem através de fases distintas do ciclo celular.

Em mamíferos estágio Proteinas alvos

Ciclina D – Cdk4/6 Progressão na fase G1 Reguladoras da
proliferação celular
Ciclina E – Cdk2 Entrada na fase S Proteínas envolvidas
na replicação do DNA
Ciclina A – Cdk2 Progressão na fase S
Ciclina A – Cdk1 Progressão na fase G2 Ciclina B, CDK
fosfatase
Ciclina B – Cdk1 Fase M Proteína do envelope
nuclear

Em leveduras existe apenas um membro da famílias de Cdks (Cdc2), o que varia são as ciclinas
Mecanismos de regulação no complexo ciclina-Cdk

Quatro mecanismos moleculares regulam a atividade das quinases dependentes

de ciclina (CdK)

1. Associação com
ciclinas

4. Associação com
Inibidores de Cdks (Chk)
2. Ativação por
fosforilação em
Thr-160.
3. Inibição da fosforilação
em Thr-14 e Tyr-15
Fases G1 e G2 do ciclo celular

Fase G 1
Cdk4/6-ciclina D
Rb
E2F
p53

Ponto de restrição ou
Start
 A proteína RB: guardiã do ciclo celular - G1

Regulação da fase G1-S

Regulação do ciclo celular por Rb e E2F

Rb na sua forma não fosforilada liga-se a E2F reprimindo a transcrição de genes regulados por E2F.
Rb é fosforilado por ciclina-Cdk e como resultado dissocia-se de E2F no final de G1.
E2F estimula a expressão de seus genes que codificam proteínas necessárias para a progressão do
ciclo celular.
Checkpoint em G1 - Papel da proteína p53
(codificada por gene supressor de tumor)

DNA danificado aumenta os níveis intracelular de p53 o

qual ativa um fator de transcrição chamado p21.

A proteína p21 inibe vários complexos ciclinas-Cdks.

Essa inibição provoca parada no ciclo celular em final

de G1.

O ciclo celular continua parado neste ponto até que a

maquinária de reparo de DNA repare o DNA.

Se DNA não pode ser reparado, a célula entra em apoptose

(morte celular programada)
CONTROLE DE G2 CHECKPOINT - Papel da fosfatase Cdc25.
Um complexo de proteínas checkpoints reconhecem DNA não replicado ou danificado e ativa proteína
quinase Chk1 que fosforila e inibe a proteína fosfatase Cdc25.
A inibição de Cdc25 previne a de-fosforilação de Cdc2 (quinase dependente de ciclina) e ativação da
mesma, impedindo o ciclo de continuar.
 FASE MITÓSE

G0
Fases M do ciclo celular

Mitose
Cdk1-ciclina B (MPF)
maturation promoting
fator

APC
Anaphase promoting
complex
 O complexo APC (Anaphase promoting complex) saída da mitose
O complexo APC apresenta duas funções:
1) Auxilia na ubiquitinilação de ciclina B (degradação pelo proteassomo) e saída da
mitose
2) Ativa a separase que promove a clivagem de coesinas propiciando a separação das
cromatides irmãs.

Parte ainda não bem esclarecida do

ciclo celular, mas enquanto as
PPas cromátides não são alinhadas
e P corretamente o complexo APC fica
inativo.

APC ativa a degradação de Ciclina-

Cdk (proteassomo) e ativa enzima
separase que promove a degradação
das coesinas
 Ubiquitina-proteassomo

Proteínas são marcadas para degradação rápida por ligação covalente de várias moléculas da proteína
chamada ubiquitina.
Múltiplas ubiquitinas são adicionadas e as proteínas poli-ubiquitiniladas são degradadas por um complexo
de proteases (proteassomo)
Após exercer seu papel durante entrada e saída da fase M, ciclina B é ubiquitinilada para ser degradada.
 RESUMO
Cdks são ativas somente quando complexada com ciclinas

O complexo ciclina-Cdk pode ser inibido por outras

proteínas.

O complexo ciclina-Cdk pode ser inativado pela marcação de

ciclinas para degradação proteolítica através de
ubiquitinilação-proteassomo ao final do ciclo celular.

Importante: o controle da ação de ciclina-Cdks é

fundamental para coordenar as diversas funções
exercidas por este complexo durante a divisão
celular.
Resumo das etapas de checkpoints do ciclo celular
Mcb130.mov
-DNA replicado e
cromátides irmãs
associadas,
cromossomos
condensados

-no citoplasma os
centrossomos já
replicados e
separados dando
início à montagem
do fuso

-quebra do
envelope nuclear

-cinetócoros dos
cromossomos
podem associar-se
aos microtúbulos
do fuso
-alinhamento dos
cromossomos no equador
do fuso

-as cromátides irmãs ficam

associadas à pólos opostos
do fuso via cinetócoros

-separação sincrônica dos

cromossomos filhos, cada um
dos cromossomos é levado
para um dos pólos

-microtúbulos associados aos

cinetócoros encurtam e os
pólos do fuso afastam-se,
ambos mecanismos
contribuem para a separação
dos cromossomos
-os cromossomos filhos
chegam aos pólos e
descondensam

-novo envelope nuclear é

montado

-início da divisão do
citoplasma (anel contrátil)

-anel contrátil de actina e

miosina divide o citoplasma
em dois, originando duas
células filhas, cada uma com
um núcleo
VISUALIZAÇÃO DO NÚCLEO DURANTE MITOSE
A mitose em célula animal

Mcb18-2
 A atividade de Cdk1-ciclina B coordena eventos nucleares e
citoplasmáticos durante a entrada e a saída da fase M (mitose)

MPF

Condensação Quebra do Fragmentação Formação dos

da cromatina envelope de Golgi e ER fusos
fosforilação das nuclear fosforilação de instabilidade dos
condensinas fosforilação da Gm130 microtubulos
lamina
Cdk-ciclina B : Papel na dissolução do envelope nuclear
FORMAÇÃO DOS FUSOS MITÓTICOS

Os centríolos e centrossomos se duplicam

durante a interfase.

Durante prófase os centrossomos

duplicados movem-se em direção oposta
ao núcleo.

O envelope nuclear é quebrado e os

microtubulos reorganizam-se para formar
os fusos mitóticos.

Na metáfase os cromossomos
condensados são alinhados no centro dos
fusos.
Microtubulos

Dímeros de alfa e beta-

tubulinas polimerizam
para formar
Como actina, microtubulos também tem uma polaridade. Extremidade mais (+)
microtubulos, os quais
cresce mais rápido, enquanto a extremidade menos (-) cresce lentamente.
são compostos por 13
protofilamentos Tubulina-GTP é adicionado a + e rápidamente GTP é hidrolisado a GDP.
montandos em núcleo
A hidrólise para GDP enfraquece a interação da tubulina-GDP com moléculas
cilindríco
adjacentes e então despolimerização acontece
O processo leva a elongação e encurtamento de microtubulos (instabilidade
dinâmica dos microtubulos) que é importante para a função destes elementos
na célula, principalmente durante divisão celular.
 Mcb1902.mov

Movimento dos cromossomos durante a anáfase

A anáfase consiste de movimento dos cromossomos em direção aos cinetocoro através do auxílio de uma proteína
motora (dineína) em direção ao lado menos dos microtubulos e também encurtamento desses microtubulos por
despolimerização de tubulinas. Também outra família de proteínas motoras as quinesinas (em direção ao lado mais)
agem sobre os microtubulos puxando os cromossomos agora separados para os polos em direção aos centrossomos.
Reconstrução da
membrana nuclear durante
telófase.

A primeira etapa na reconstrução do

envelope nuclear é a ligação de
membrana de vesículas (formadas
durante a dissolução do envelope) com
os cromossomos auxiliadas por
proteínas de membrana e lamina

A fusão das vesículas reconstrói o

envelope nuclear e os cromossomos
sofrem descondensação.
 Resumo dos eventos da Fase M
Mitose é convencionalmente dividida em quatro estágios:
•  PRÓFASE - O começo desta fase é marcada pelo aparecimento dos
cromossomos condensados
–  Duas cromátides irmãs (DNA produzido durante a fase S)
–  As cromátides são mantidas juntas pelo centrômero, o qual contém uma sequência
de DNA na qual proteínas se ligam para forma o cinetocóro - local de ligação dos
microtubulos.
–  O centrossomo duplicado na interfase separam-se e movem-se em direção aos polos
opostos em relação ao núcleo e servem como origem dos fusos mitóticos, os quais
começam a se formarem no final da prófase.
–  Quebra do envelope nuclear.
•  PROMETÁFASE - As cromátides irmãs estão anexadas ao cinetocoro, e em
processo de elongação e encurtamento dos fusos mitóticos, os cromossomos
condensados encaminham-se para uma posiçãoi equatorial da célula.
•  METÁFASE - Muitas células permanecem brevemente nesta fase. A transição para
ANÁFASE é marcada pela quebra e separação das cromátides e migração para os polos.
•  ANÁFASE - Checkpoint dos cromossomos (se não houver anexação e separação
correta, o ciclo celular permanece parado)
•  TELÓFASE. Término da mitose durante essa fase o núcleo se re-forma e os
cromossomos sofrem descondensação.
 CITOCINÉSE

•  Citocinése inicia-se no final de anáfase e termina ao final da telófase

•  Formação de um anél contráctil de filamentos de actina e miosina II.

•  A clivagem acontece com a contração dos filamentos de actina e miosina

puxando a membrana plasmática para dentro, formando um estrangulamento
até que as duas células filhas se separam e a suas membranas plamáticas são re-
seladas.

•  Células filhas idênticas são agora disponíveis para um novo

ciclo de divisão celular ou entram G0
 Molecular Cell Biology
Harvey Lodish
Arnold Berk
Lawrence S. Zipursky
Paul Matsudaira
David Baltimore
James Darnell
Fourth EditionW. H. FREEMAN

Molecular Biology of the Cell

Fourth Edition
Bruce Alberts, Alexander Johnson, Julian
Lewis, Martin Raff, Keith Roberts, Peter
Walter

The Cell
A Molecular Approach

Geoffrey M. Cooper
Boston University