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    Genetica de Levaduras

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    Mirian Zoria
    Este documento trata sobre la genética de levaduras. Describe las formas de división y reproducción de Saccharomyces cerevisiae y Schizosaccharomyces pombe, incluyendo la esporulación y formación de ascasporas y basidiosporas. También discute la morfología, ciclo de vida, fermentación y composición celular de S. cerevisiae, así como su genoma, cromosomas y análisis genético.

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    Attribution Non-Commercial (BY-NC)
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    Genetica de Levaduras

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    Mirian Zoria
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    Este documento trata sobre la genética de levaduras. Describe las formas de división y reproducción de Saccharomyces cerevisiae y Schizosaccharomyces pombe, incluyendo la esporulación y formación de ascasporas y basidiosporas. También discute la morfología, ciclo de vida, fermentación y composición celular de S. cerevisiae, así como su genoma, cromosomas y análisis genético.

    Descripción original:

    estudio de levaduras para el uso de la ingenieria industrial

    Título original

    genetica de levaduras

    Derechos de autor

    © Attribution Non-Commercial (BY-NC)

    Formatos disponibles

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    Este documento trata sobre la genética de levaduras. Describe las formas de división y reproducción de Saccharomyces cerevisiae y Schizosaccharomyces pombe, incluyendo la esporulación y formación de ascasporas y basidiosporas. También discute la morfología, ciclo de vida, fermentación y composición celular de S. cerevisiae, así como su genoma, cromosomas y análisis genético.

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    Este documento trata sobre la genética de levaduras. Describe las formas de división y reproducción de Saccharomyces cerevisiae y Schizosaccharomyces pombe, incluyendo la esporulación y formación de ascasporas y basidiosporas. También discute la morfología, ciclo de vida, fermentación y composición celular de S. cerevisiae, así como su genoma, cromosomas y análisis genético.

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    Tema 14.

    Gentica de levaduras

    Saccharomyces cerevisiae

    Formas de divisin

    Saccharomyces cerevisiae

    Schizosaccharomyces pombe

    Esporulacin
    Ascosporas

    Formacin de basidiosporas

    Esporulacin
    Ascosporas

    Saccharomyces cerevisiae

    Schizosaccharomyces pombe

    Pseudohifas e hifas

    Saccharomyces cerevisiae

    Saccharomyces cerevisiae

    Saccharomyces cerevisiae, ciclo de vida a apareamiento a/ cigoto esporulacin -C -N Asca con 4 esporas germinacin a a +C +N

    Clulas haploides

    Saccharomyces cerevisiae
    Morfognesis y diferenciacin en un organimos unicelular

    Schizosaccharomyces pombe

    Saccharomyces cerevisiae
    Fermentacin de la glucosa

    Saccharomyces cerevisiae

    Tamao y composicin de las clulas de S. cerevisiae Clula haploide Volumen (m3) 70 Composicin (10-12 g) Peso hmedo 60 Peso seco 15 DNA 0,017 RNA 1,2 Protena 6 Clula diploide 120 80 20 0,034 1,9 8

    S. Cerevisiae: genoma

    S. cerevisiae cromosomas

    S. cerevisiae Electroforesis de campo pulsante

    Centromeros

    Plsmidos artificiales

    S. cerevisiae, genoma

    Nmero de intrones
    100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0

    Yeast Fungi Mammal

    >1

    Tamao de los intrones


    70 60 50 40 30 20 10 0 <100 <200 <1 kbp 1 to 5 >5 Fungi Verterbrate

    Gentica de levaduras

    Gentica de levaduras
    Prueba de dominancia
    X

    ts

    TS+

    ts / TS+

    Cruce del mutante con el silvestre y examen del fenotipo del diploide

    Prueba de complementacin
    X ts 1

    ts 2

    ts 1 / ts 2

    Cruce de dos mutantes con el mismo fenotipo y examen del fenotipo del diploide

    Gentica de levaduras
    Prueba de complementacin

    Gentica de levaduras
    Prueba de fenotipos no seleccionados

    Gentica de levaduras
    1 2 3 4 5 6 7 8 a b c d

    Anlisis de ttradas

    Se debe un fenotipo a la mutacin de un solo gen? Mapeo de los genes entre s y respecto al centrmero Creacin de dobles mutantes Test de reversin Comprobacin de que dos fenotipos se deben a la misma mutacin

    Anlisis de ttradas por micromanipulacin

    Anlisis de ttradas por micromanipulacin

    Gentica de levaduras
    Anlisis de ttradas
    Segrega el fenotipo 2:2 tras la meiosis? S: el fenotipo se debe a la mutacin de un solo gen NO: algo ms ha ocurrido (ms de una mutacin no ligadas, mutacin en plsmido o en el genoma mitocondrial)

    Segregacin 2:2

    Otro tipo de segregacin

    Anlisis de ttradas

    Gentica de levaduras
    R = Resistente a una droga r = sensible
    B = Blanco b = azul

    Terminologa de ligamiento: Ejemplo: Rb x rB


    Tres posibles tipos de ttradas Rb Rb rB rB genotipos RB RB rb rb RB Rb rB rb

    espora a b c d

    PD
    Ditipo parental

    NPD
    Ditipo No parental

    T
    Tetratipo

    Gentica de levaduras

    Gentica de levaduras
    Segregacin durante la meiosis
    Ditipos parentales Ditipos no parentales Tetratipos rB rb RB rB rb Rb Rb RB rb Rb RB rB No ligados 1: 1: 4 Ligados >1 : <1 Ligado al centrmero 1 : 1: <4

    Algunos escrutinios

    Supresores extragnicos
    GEN2 gen1

    No crece
    mutagnesis

    gen2 gen1

    Crece

    Supresores multicopia
    un ejemplo
    supresor silvestre mutante

    X
    10 1 1

    X
    10x 1

    Supresores multicopia
    GEN2 gen1

    No crece
    genoteca 2

    GEN2 gen1

    Crece

    Suprimidos multicopia
    GEN2 GEN1 GEN2

    El plsmido puede perderse


    Mutagnesis

    GEN2 gen1

    El plsmido no puede perderse

    Fenotipo por dosis alta

    No crece en galactosa

    Ausencia de complementacin

    Suele indicar genes que codifican subunidades de un complejo heteromultimtico

    Mutantes letales sintticos

    Mutante viable

    Segunda mutacin Mutante inviable

    Mutantes letales sintticos


    GEN2 gen1
    posible la segregacin mutagnesis
    GEN1

    gen2
    GEN1

    gen1
    NO es posible la segregacin

    Mutantes letales sintticos


    mutX
    ade2

    mutX ura3
    ade2

    mutY
    ura3

    ade3 ADE3 URA3

    ade3 ADE3 URA3

    GEN X

    GEN X

    UV
    Colonias blancas Crecimiento en 5-FOA Colonias rojas sin sectores Sensibles a 5-FOA

    Gentica molecular de levaduras


    Aislamiento de alelos por gap repair

    Gentica molecular de levaduras


    Reemplazamiento de genes

    Gentica molecular de levaduras


    Delecin

    Gentica molecular de levaduras


    Barajado de plsmidos

    Saccharomyces cerevisiae

    Saccharomyces cerevisiae

    Tipo sexual

    Interconversin del tipo sexual


    HML 200 kb CEN III E
    W X Y ZL

    MAT HO
    X

    150 kb HMRa

    Y Z

    Ya ZR

    W Ya Y ZL ZR

    ~700 bp ~600 bp ~750 bp ~300 bp ~250 bp

    HO corta en una secuencia de ~18 bp (-inc)

    Evento no recproco. Se pierde el casette Conversin gnica, va reparacin de corte de doble cadena

    Interconversin del tipo sexual

    mother daughter

    mother

    daughter

    HO est: a o pero no a/ cambian Apagado en a/ Slo las madres cambian Apagado en hijas Encendido al final de G1
    Nasmyth (1983)

    Un linaje de clula madre controlado por los genes SWI

    Aislamiento del mutante ash1

    Gentica del ciclo celular


    Mutantes cdc Aislamiento de ciclinas de G1 como supresores de cdc28 por sobrexpresin

    Regulacin del ciclo celular

    Regulacin del ciclo celular

    Regulacin del ciclo celular

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