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Informe 4 Lipasa

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INTRODUCCIN

Los lpidos suelen ingerirse como grandes masas de triacilgliceroles y son


digeridos principalmente en el duodeno por la lipasa pancretica. Como muchas
otras protenas, la lipasa es hidrosoluble, pero sus sustratos no lo son. Por ello,
solo en la superficie de una masa de lpido puede la enzima atacar las molculas
de grasa. Las sales biliares son detergentes que reducen la tensin superficial de
las grasas, de manera que separan las grandes masas de lpidos en gotas ms
pequeas. Esto incrementa en gran medida el rea superficial de grasa expuesta
a la accin de la lipasa y, de este modo, eleva la rapidez de digestin de los
lpidos
OBJETIVOS

Determinar la importancia de la bilis en la degradacin de las grasas
Identificar la degradacin de lpidos de origen animal y vegetal
Observar la presencia de pigmentos biliares
MATERIALES Y REACTIVOS

Tubos de ensayo
Leche
Aceite de cerdo
Aceite de pollo
Aceite de oliva
Solucin de NaOH
Acido ntrico
Pancreoflat (pancreatina)
Rojo de fenol
Agua destilada
Bilis





MARCO TEORICO


FISIOLOGIA DEL HIGADO

El hgado es un rgano o vscera presente en los vertebrados y en algunos otros
animales; y es, a la vez, la glndula ms voluminosa de la anatoma y una de las
ms importantes en cuanto a la actividad metablica del organismo. Desempea
funciones nicas y vitales como la sntesis de protenas plasmticas, funcin
desintoxicante, almacena vitaminas, glucgeno, entre otros para el buen
funcionamiento de las defensas, etc. Adems, es el responsable de eliminar de la
sangre las sustancias que pueden resultar nocivas para el organismo,
transformndolas en otras inocuas.

El hgado desempea mltiples funciones en el organismo como son:
Produccin de bilis: el hgado excreta la bilis hacia la va biliar, y de all
al duodeno. La bilis es necesaria para la digestin de los alimentos;
Metabolismo de los carbohidratos
Metabolismo de los lpidos; Sntesis de colesterol; Produccin de triglicridos.
Sntesis de protenas, como la albmina y las lipoprotenas;
Sntesis de factores de coagulacin
Desintoxicacin de la sangre: neutralizacin de toxinas, la mayor parte de los
frmacos y de la hemoglobina; transformacin del amonio en urea
Depsito de mltiples sustancias, como: glucosa en forma de glucgeno,
vitamina B12, hierro, cobre.
En el primer trimestre del embarazo, el hgado es el principal rgano de
produccin de glbulos rojos en el feto. A partir de la semana 12 de la
gestacin, la mdula sea asume esta funcin.

LA BILIS

La bilis es un jugo de color amarillento que es segregado por el hgado de los
vertebrados. Se trata de una sustancia lquida que acta en la digestin, actuando
como emulsionante de los cidos grasos. La bilis est formada en
un 97% por agua, con el 3% restante compuesto por sales biliares (como el
taurocolato de sodio y el glicocolato de sodio), protenas, colesterol y hormonas. El
hgado se encarga de segregar la bilis de manera continua: dicha bilis se utiliza en
el proceso digestivo o se almacena en la vescula biliar. La produccin de bilis en
el caso de los seres humanos es de un litro diario aproximadamente.


La bilis consiste en agua, sales biliares, pigmentos biliares, colesterol, sales y
lecitina (un fosfolipido); la producida en el higado se almacena en la vescula biliar
que tiene forma de pera, la cual concentra la bilis y la libera en el duodeno
conforme sea necesario. La bilis digiere mecanicamente las grasas por una accion
similiar a la de un detergente: esto es, reduce la tension superficial de las
particulas de lipidos. Tal proceso, llamado emulsificacion, dispersa las moleculas
de grasa, que pueden entonces ser atacadas por lipasas (enzimas que digieren
lipidos). El lquido biliar no contiene enzimas digestivas; de modo que no digiere
enzimaticamente los alimentos.

La bilis tiene numerosas funciones importantes para la digestion. En primer lugar,
su elevada alcalinidad es importante en las etapas terminales de la digestion ya
que tampona la elevada acidez proporcionada por el jugo gastrico secretado
anteriormente en el proceso digestivo.
En segundo lugar, las sales biliares facilitan la digestion enzimatica de las grasas
rompiendolas en gotitas microscopicas que, en conjunto tienen un rea superficial
mucho mayor. La capacidad de las sales biliares para dispensar las sutancias
grasas insolibres en agua deriva de su naturaleza anfipatica. Es decir, la molecula
de sal biliar contiene un cido biliar liposoluble junto con un aminoacido
hidrosoluble. As, actua como un detergente para la emulsificacion de las fotas de
grasa, dispersandolas en la solucion acuosa para un ataque mas efectivo por
parte de las enzimas digestivas. Finalmente las sales son eliminadas del intestino
grueso mediante un transporte activo muy eficaz y devueltas al torrente
circulatorio. Las sales biliares tambien sirven para dispersar las vitaminas
liposolubles para su transporte a la sangre. En tercer lugar, el fluido biliar contiene
sustancias de desecho eliminadas de la sangre por el higado como los pigmentos
heminicos, colesterol, esteroides y farmacos. Estas sustancias son digeridas o
excretadas en las heces.

SISTEMA BILIAR
La bilis que excreta el hgado es recolectada por finos por canalculos bilferos que van
confluyendo en los canales bilferos y otros de mayor calibre hasta la porta heptica.
Cada porcin heptica tiene su ducto biliar (derecho e izquierdo); ambos se funden en
un ducto heptico comn, que se une al ducto cstico procedente de la vescula biliar para
formar el ducto coldoco encargado de llevar la bilis hasta la porcin descendente del
duodeno por el contrario.
La vescula biliar est alojada en la fosa de la vescula biliar, en la cara visceral del hgado.
Consta de un fondo, cuerpo, infundbulo y cuello que se contina con el ducto cstico. La
tnica mucosa es sumamente irregular, en forma de panal de abeja, antes de continuarse con
el ducto cstico. En la vescula la secrecin biliar se almacena hasta que un estmulo
adecuado causa su liberacin por la contraccin de su pared muscular sin embargo
La bilis, a partir de la unin entre el ducto cstico y el ducto heptico comn, sigue por el ducto
coldoco que discurre por el borde libre del omento menor (ligamento hepatoduodenal). Luego
se coloca por detrs de la porcin superior del duodeno, atraviesa la cabeza
del pncreas para drenar finalmente en la porcin descendente del duodeno en la papila
duodenal unido al ducto pancretico. La arteria heptica derecha emite la arteria cstica
destinada a la irrigacin de la vescula biliar. Las relaciones entre la arteria cstica y el ducto
cstico son de importancia quirrgica en la extirpacin de la vescula biliar (colecistectoma).

EL PANCREAS

El pncreas es un rgano retroperitoneal mixto, exocrino (segrega enzimas
digestivas que pasan al intestino delgado) y endocrino (produce hormonas, como
la insulina, glucagn, polipptido pancretico y somatostatina, entre otros, que
pasan a la sangre).

1. Tripsina y Quimotripsina: digieren polipptidos a dipptidos
2. Lipasa Pancreatica: que degrada grasas neutras.
3. Amilasa Pancretica: degrada casi todos los tipos de carbohidratos,
expecto celulosa, a disacaridos
4. Ribonucleasa y desozirribonucleasa: escinden los cidos nucleicos
(RNA) y (DNA) en nucletidos libres.


LIPASAS
La lipasa es una enzima que se usa en el organismo para disgregar las grasas de
los alimentos de manera que se puedan absorber. Su funcin principal es catalizar
la hidrlisis de triacilglicerol a glicerol y cidos grasos libres. Las lipasas se
encuentran en gran variedad de seres vivos. Esta enzima en humanos se
encuentra en la leche materna y, segn estudios bioqumicos, es idntica a la
enzima colesterol esterasa (o lipasa pancretica no especfica), por lo que se
supone que el origen es pancretico y llega a las glndulas mamarias a travs de
la circulacin sangunea. La funcin principal de esta lipasa gstrica es ayudar a la
absorcin de grasas.
PROCEDIMIENTO
A) ACCION LIPASA PANCRETICA SOBRE LA LECHE
TUBO SUSTRATO ROJO
FENOL
NaOH BILIS PANCREATINA
1 0.5 ml de leche 20
gotas
10 gotas 0.5 ml
2 0.5 ml de leche 20
gotas
10 gotas 1 ml
3 0.5 ml de leche 20
gotas
10 gotas 0.5 ml 1 ml

TUBO TIEMPO
1 25 Min.
2 17:37 Min.
3 16:49 Min.
PREGUNTAS
Cul de los tubos de ensayo podra considerarse como tubo control?
El tubo nmero uno seria el tubo control, ya que no presentar
pancreatina y por lo tanto no podra ocurrir reaccin enzimtica.

La presencia de las sales biliares acelera la reaccin de la lipasa
pancretica?
La digestin de la lipasa se lleva a cabo en interfaces lpido-agua, las
sales biliares, colipasas y fosfolipidos son fundamentales, para el
funcionamiento de la lipasa pancretica, y es esto lo que las sales
biliares generan. (Cortez, 2010)

Se produce la digestin de la grasa si las sales biliares no estn
presentes?

Cuando los triglicridos son convertidos en cidos grasos y 2-
monoglicridos las partes grasas de estas molculas se disuelven en la
parte central de la micela ( gotas esfricas y cilndricas compuestas de
20 a 40 molculas de sales biliares) siendo esta la funcin principal de
las sales biliares, el proceso se la digestin se llevara a cabo ya que no
solo las sales biliares hacen parte de este sin embargo seria con un
poco ms lento.

Qu clase de cido produce la accin enzimtica sobre la grasa? Qu
clase de molculas adems de cido, esperara encontrar en esta
etapa? Se puede observar en el experimento?

Al generar una degradacin de cidos grasos y glicerina, se obtienen
energa suficiente para el metabolismo de los triacilgicridos,
Bsicamente podemos encontrar lpidos siendo llevados a estados
menos complejos, donde puedan ser asimilados por el organismo, En
teora si se observ ya que hubo degradacin de grasas.

A) DEGRADACION DE ACEITES DE ORIGEN ANIMAL Y POR LA LIPASA
PANCREATICA.

TUBO SUSTRATO INDICADOR ENZIMA BILIS
1 0.5 ml de aceite de
cerdo
6 gotas de
rojo de fenol
1 ml de
pancreatina
0.5 ml
2 0.5 ml de aceite de 6 gotas de 1 ml de 0.5 ml
pollo rojo de fenol pancreatina
3 0.5 ml de aceite de
soya
6 gotas de
rojo de fenol
1 ml de
pancreatina
0.5 ml

TUBO TIEMPO
1 25:10 Min.
2 18:53 Min.
3 16:39 Min.

Identifique las capas que se forman y diga cul de los productos de la
degradacin de lpidos es ms denso.




Monoglicerol
Acidos grasos


B) IDENTIFICACION DE PIGMENTOS BILIARES. PRUEBA DE GMELIN.
En un tubo de ensayo deposite 0.5 ml de agua destilada, 0.5 ml de bilis (evitar que
las soluciones entren en contacto con las paredes del tubo), 1 ml de cido ntrico
(este debe resbalar lentamente por las paredes del tubo) y mezcle con un suave
movimiento aleatorio.
Para la identificacin de pigmentos biliares la Prueba de Gmelin dio resultado
positivo ya que la solucin de ensayo se mezcl con cido ntrico que contiene
cido nitroso y se observ la reaccin en el cambio de color al unirse el cido con
la solucin
RESULTADOS
A) ACCION LIPASA PANCRETICA SOBRE LA LECHE


B) DEGRADACION DE ACEITES DE ORIGEN ANIMAL Y POR LA LIPASA
PANCREATICA.


C) IDENTIFICACION DE PIGMENTOS BILIARES. PRUEBA DE GMELIN.


DISCUSIN DE RESULTADOS
A. La sales biliares las cuales en una concentracin suficiente las sales biliares
tienen la propiedad de formar las micelas las cuales tiene como funcin disolver
los cidos grasos en la parte central de esta.
B. En los tres tipos de grasas empleadas en el laboratorio, la emulsificacin tom
mayor tiempo en las grasas animales (cerno y pollo). Las grasas vegetales
tomaron menor tiempo, esto se deben a las diferencias presentes en los tipos de
grasas animales y vegetales o saturadas e insaturadas, respectivamente.
Las diferencias entre las grasas saturadas e insaturadas son la estructura de la
cadena carbonada. Los lpidos que tienen en su composicin muchos cidos
grasos saturados son lpidos slidos (tocinos) pues los cidos grasos se
"empaquetan" unindose muy bien entre ellos al ser lineales, por lo que poseen
alto punto de fusin. (Iglesias-Garrote, 2013) La saturada cada carbono est unido
a un hidrgeno, haciendo que presente contextura slida y estable. Las grasas
vegetales, de los peces y las aviares tienen mayor grado de instauracin que las
de los mamferos. (Uruea, 2009) Las grasas insaturadas presentan cadenas
carbonadas sin uniones a hidrgenos, por lo que se establecen enlaces dobles en
los carbonos, haciendo que la textura de dicha molcula sea lquida y menos
estable que las saturadas.
El tiempo que demore en provocar emulsiones en los compuestos depende de la
estructura que presenta estas molculas. Al presentar las grasas insaturadas una
estabilidad menor que las saturadas hace que la enzima pueda emulsionarla, por
otro lado las grasas saturadas al presentar mayor estabilidad y rigidez presentan
dificultades para que sean emulsionadas por la lipasa pancretica. .
C. En la prueba Gmelin se identificaron los pigmentos biliares, se observ el
cambio en la coloracin que consista en una serie de tonalidades dependiendo de
la etapa de oxidacin de la bilirrubina que pasaron de verde, azul, violeta y
finalmente a rojizo debido a la presencia de cido ntrico.
CONCLUSIONES

Las caractersticas fsico-qumicas influyen ampliamente en la
metabolizacin de cidos grasos.
Se evidencio la accin de las sales como detergentes en el intestino
delgado, al disminuir la tensin superficial de las grasas, que se
degradarn posteriormente por la accin de las lipasas.
La identificacin de pigmentos biliares depende del hecho de que
durante las etapas de oxidacin de la bilirrubina esta sufre una serie de
cambios en el color, que siguen la secuencia del espectro solar
familiarizado.

Las diferencias estructurales de los cidos grasos saturados e
insaturados determinan la eficacia con la que la lipasa pancretica acta
sobre estos.
BIBLIOGRAFA
- Tratado de Anatoma Humana L. Testut IV Tomo
Ville, Biologa, Capitulo 45, pgina 968.
Prez-Barnes, S. (02 de Junio de 2006). Cuidado! que no te suba la
bilirrubina. Hoy.
Kerchak. (s.f.). Kerchak. Recuperado el 03 de Noviembre de 2013, de
Kerchak:
Iglesias-Garrote, J. (25 de Febrero de 2013). Curiosidades cinetficas.
Recuperado el 04 de Noviembre de 2013, de Curiosidades cinetficas:
Uruea, F. (2009). Universidad de Crdoba. Recuperado el 04 de
Noviembre de 2013, de Universidad de Crdoba:
Becerril, A. C. (2009). fitness. Obtenido de fitness:
http://www.fitness.com.mx/medicina185.htm
Cortez, A. (15 de Junio de 2010). Bioquimicafacil. Obtenido de
Bioquimicafacil:
Salamanca. (2010). rincon del vago. Obtenido de rincon del vago:










TALLER

1. Qu es la bilis y cules son sus funciones?

La bilis es un jugo de color amarillento que es segregado por el hgado de los
vertebrados. Se trata de una sustancia lquida que acta en la digestin, actuando
como emulsionante de los cidos grasos. La bilis est formada en
un 97% por agua, con el 3% restante compuesto por sales biliares (como el
taurocolato de sodio y el glicocolato de sodio), protenas, colesterol y hormonas. El
hgado se encarga de segregar la bilis de manera continua: dicha bilis se utiliza en
el proceso digestivo o se almacena en la vescula biliar. La produccin de bilis en
el caso de los seres humanos es de un litro diario aproximadamente.
La pared de la vescula biliar tiene tres capas principales de tejido.
Capa de mucosa (interna).
Capa muscularis (media, muscular).
Capa Serosa (externa).
Entre estas capas se encuentra tejido conjuntivo de sostn. El cncer de vescula
biliar primariocomienza en la capa interna y se disemina a travs de las capas
externas mientras crece.
2. Haga un diagrama del sistema biliar e indique la fisiologa del mismo.


Anatoma de la vescula biliar. La vescula biliar est justo debajo del
hgado. La vescula biliar est justo debajo del hgado. La bilis de almacene
en la vescula biliar y fluye a travs el conducto cstico y el conducto biliar
comn hacia el instestino delgado cuando se estn dirigiendo los alimentos

SINGNIFICADO FISIOLOGICO DE LA SECRECION DE SALES BILIARES:

Su sntesis y excrecin fecal representa una va muy relevante de excrecin
de colesterol corporal en exceso.

Sales biliares y Lecitina en la bilis solubilizan el colesterol biliar, evitando que
precipite el colesterol en la va biliar.

Facilita la digestin de lpidos dietticos (triglicridos) junto al jugo
pancretico.

Facilitan la absorcin de vitaminas liposolubles.


3. Cul es la importancia de la vescula biliar?

Un papel significativo en la digestin y absorcin de las grasas. Los cidos biliares
ayudan a emulsionar las grandes partculas de grasa de los alimentos y ayudan al
transporte y a la absorcin de los productos finales de la digestin de las grasas a
travs de la membrana intestinal.

Es un medio de transporte para la excrecin de varios productos de deseche
procedentes de la sangre (bilirrubina, colesterol).

4. Puede un animal vivir sin su vescula biliar? Justifique su respuesta.

Si, Se puede vivir sin la vescula por que cuando se ha extirpado la vescula biliar,
la bilis fluye directamente del hgado al intestino delgado, donde interviene en la
digestin de las grasas exactamente igual que lo haca antes, cuando se
almacenaba en la vescula. Eso quiere decir que se puede perfectamente vivir sin
vescula biliar.

Vale la pena aclarar que sin embargo, algunos individuos pueden tener problemas
digestivos, como diarrea, luego de una colecistectoma. Ya que la vescula no est
disponible para almacenar bilis extra, la bilis se excreta a veces en
el intestino delgado cuando no es necesaria para la digestin. El exceso de bilis en
el intestino delgado puede causar diarrea

5. Diga cul es la importancia del hgado dentro del sistema biliar?

El hgado es el rgano interno ms grande. Tiene forma de cua y se encuentra
dividido en dos lbulos.

Su funcin es la de producir colesterol y bilis a partir de la descomposicin de
los productos de la grasa diettica.

Usa aminocidos, produce protenas y almacena glucgeno, hierro y algunas
vitaminas.

Adems, es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias que
pueden ser txicas para el organismo, transformndolas en elementos ms
seguros, por ejemplo alcohol y frmacos.

Una de las funciones del hgado es secretar entre 600 y1200 ml de bilis al
da.

6. Que sucede cuando hay altas tasas de bilirrubina en la sangre? A
qu se debe eso?

La bilis es un complejo lquido amarillo-verdoso que contiene una mezcla de sales
biliares, lpidos, colesterol y pigmentos variados, protenas y sales minerales. El
color amarillo se lo da la bilirrubina, formada principalmente por la descomposicin
de los glbulos rojos que han llegado al final de sus cuatro meses de vida.

Un aumento de la bilirrubina en la sangre en vez de su excrecin en la bilis,
es la causa de la ictericia (pigmentacin amarilla de la piel y mucosas, y de la
esclertica de los ojos).

El ser humano produce 1,5 litros de bilis al da. Esta bilis es recogida en los
conductos hepticos y llega a la vescula biliar, donde espera a que se
presente una comida. Se libera gracias a la accin de una hormona llamada
colecistoquinina, que a su vez es liberada por el duodeno cuando hay comida
en el estmago.

7. Como se forma el cido litocolico y cul es la importancia?

Los cidos biliares son sintetizados exclusivamente en el hepatocito a partir del
colesterol produciendo los dos cidos primarios, el cido clico (tri-hidroxilado) y el
quendesoxiclico ( di-hidroxilado).
Fundamentalmente dos mecanismos regulan su sntesis:

1.- La sntesis de colesterol.
2.- La actividad de la enzima 7a hidroxilasa.
Las funciones principales de los cidos biliares son:
Absorcin y digestin de grasas.
Induccin a la secrecin de lquidos por el intestino delgado.

Quenodesoxiclico Litoclico


La funcin de este cido biliar es principalmente actuar como detergente para
solubilizar grasas para la absorcin y la participacin en la degradacin de
grandes molculas lipdicas.

Adems estudios actuales atribuyen a dicho cido poderes cancergenos, puesto
que, demostraron que estos podan destruir selectivamente las clulas
cancerosas, sin hacer dao a las clulas normales. (Kerchak)

8. Que sustancias componen las sales biliares?

Las sales biliares son anfipticas tienen un grupo polar hidroflico y uno apolar
hidrofbico, de una mlcula lipdica insoluble como el colesterol se pasa a una
molcula anfiptica hidrosoluble. Al pasar cierta nivel crtico de concentracin las
sales biliares se asocian para forman micelas con su polo hidroflico hacia fuera y
el hidrofbico hacia adentro. Estas micelas interactna con los lpidos digeridos
presentes en la luz intestinal y forman micelas mixtas con los fosfolpidos hacia
fuera y llevando en el interior hidrofbico el colesterol insoluble. Las miceles de
sales biliares mantiene los lpidos en solucin y los transportan al borde en cepillo
de los enterocitos para su absorcin.



Las sales biliares vertidas al duodeno con la bilis se absorben en un 90-85% en el
leon por cotransporte con sodio, van va porta al hgado y de all vuelven al
intestino con la bilis, recirculando varias veces al da, El 5-10% restante pasa al
colon y por accin bacteriana se deconjugan y dehidroxilan y se convierten en
cidos biliares secundarios. Los cidos biliares secundarios vuelven al hgado
para conjugarse y volver con la bilis al intestino, lo que no se absorbe se pierde
por heces.

9. Cules son los cidos biliares y cuales sus funciones?

ACIDOS BILIARES PRIMARIOS Y SECUNDARIOS: Los cidos biliares primarios
se sintetizan en el hgado y all se conjugan y se forman las sales biliares.

Las sales biliares se reabsorben el 95% en el leon (circulacin enteroheptica)
pero un 5% pasa al colon y all por accin bacteriana se deconjugan y sufren una
7-dehidroxilacin y se forman cidos biliares secundarios que una parte se
reabsorbe y vuelve al hgado para conjugarse y regresar con la bilis al intestino.
Pero otra parte se pierde en las heces. El hgado sintetiza cidos biliares nuevos
solo para reponer las prdidas por las heces. La mayor parte de sales biliares son
con cidos biliares primarios.



En el hgado se sintetizan los cidos biliares a partir del colesterol por una 7 alfa
hidroxilacin que es el paso limitante de la sntesis. Los cidos biliares primarios
son el clico con tres OH y el quenodesoxiclico con dos OH. Los cidos biliares
se conjugan en el hgado con glicina o taurina y se forma glicocolato y taurocolato,
glicoquenodesoxicolato y tauroquenodesoxicolato. Las sales biliares son sales de
sodio y potasio de estos cidos conjugados. Las sales biliares son las que se
secretan en la bilis y se vierten al intestino.

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