El documento describe los procedimientos para identificar bacterias a través de su acción en diferentes sustratos. Explica las reacciones bioquímicas de bacterias como E. coli, Proteus y Salmonella en sustratos como TSI, LIA, citrato de Simmons y urea. El documento también analiza los resultados e interpretaciones de las pruebas.
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El documento describe los procedimientos para identificar bacterias a través de su acción en diferentes sustratos. Explica las reacciones bioquímicas de bacterias como E. coli, Proteus y Salmonella en sustratos como TSI, LIA, citrato de Simmons y urea. El documento también analiza los resultados e interpretaciones de las pruebas.
El documento describe los procedimientos para identificar bacterias a través de su acción en diferentes sustratos. Explica las reacciones bioquímicas de bacterias como E. coli, Proteus y Salmonella en sustratos como TSI, LIA, citrato de Simmons y urea. El documento también analiza los resultados e interpretaciones de las pruebas.
El documento describe los procedimientos para identificar bacterias a través de su acción en diferentes sustratos. Explica las reacciones bioquímicas de bacterias como E. coli, Proteus y Salmonella en sustratos como TSI, LIA, citrato de Simmons y urea. El documento también analiza los resultados e interpretaciones de las pruebas.
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I.
GENERALIDADES La degradacin de los nutrientes: Las protenas, los lpidos y los carbohidratos son degradados mediante reacciones enzimticas que ocurren una despus de la otra. Este proceso de degradacin est dividido en tres etapas que a grandes rasgos son las siguientes: La primera consiste en la conversin de molculas complejas a molculas ms simples; esto quiere decir que una protena, que no es ms que una cadena de aminocidos, tiene que ser convertida de nuevo en sus constituyentes, que son los aminocidos, para que stos puedan ser debidamente aprovechados en la segunda etapa de degradacin. Estos procesos degradativos no requieren de energa y ocurren en el interior del microorganismo. La segunda etapa consiste en la conversin de estas molculas, ya bastante simples, en una an ms simple y comn, independientemente del origen de las molculas. Es decir, que tanto los carbohidratos como las protenas o los lpidos son convertidos en una molcula mucho ms simple llamada "acetil coenzima A". Es a partir de esta molcula que la tercera etapa del metabolismo se lleva a cabo y consiste en generar la energa que necesita la clula para realizar procesos vitales, como desplazarse o dividirse, entre otros. En esta etapa ocurre uno de los ciclos metablicos ms importantes de la biologa: el ciclo de los cidos tricarboxlicos o ciclo de Krebs. As pues, todas las molculas que sirven a un organismo como fuente de subsistencia son llevadas, por medio de diversos caminos de degradacin, a un camino metablico comn. Esta va
metablica comn degrada una sola molcula en una serie de
pasos y como resultado se obtiene energa principalmente en forma de ATP.
II. OBJETIVOS
Observar y comprender la accin de los microorganismos en los
diferentes sustratos en los procedimientos de identificacin bacteriana. Adquirir conocimientos bsicos tericos sobre el proceso de identificacin de bacterias a travs de su accin en diferentes sustratos.
III. EQUIPOS y MATERIALES
-
Tubos de ensayo conteniendo cultivos bacterianos en diferentes sustratos de
identificacin.
IV. MTODO Observacin macroscpica V. PROCEDIMIENTO -
Observamos los sustratos de identificacin bacteriana.
Observamos la accin diferente que tiene cada bacteria en cada sustrato. Anotamos las observaciones.
VI. RESULTADOS
SUSTRATOS INDICADORES: SIMMONS, UREA, SIM
TSI,
LIA,
CITRATO
1. REACCIN BIOQUMICA DE LA BACTERIA: Escherichia coli
2. REACCIN BIOQUMICA DE LA BACTERIA: Proteus
DE
3. REACCIN BIOQUMICA DE LA BACTERIA: Salmonella
VII.
CONCLUSIONES
Para E. coli
Observamos que utiliza los hidratos de carbono del Agar TSI al
virar al color amarillo, adems de producir burbujas de gas. En Agar LIA Se observa la produccin de lisina descarboxilasa en el viraje de color amarillo a violeta. En Agar CITRATO DE SIMMONS, Se observa que no utiliza el citrato para su metabolismo, por lo que no hay cambio de color. En Agar UREA, Se observa que no degrada la urea, por lo tanto no hay cambio de color. En Agar SIM + PRUEBA DE INDOL, Se observa que el control es positivo.
Para Proteus
Observamos que utiliza algunos hidratos de carbono del Agar
TSI, adems de producir H2S. En Agar LIA Se observa la produccin de lisina descarboxilasa en el viraje de color amarillo a rojo parduzco. En Agar CITRATO DE SIMMONS, Se observa que utiliza el citrato como nica fuente de carbono para su metabolismo, por lo que hay cambio de color verde al azul. En Agar UREA, Se observa que degrada la urea, por lo tanto hay cambio de color. En Agar SIM + PRUEBA DE INDOL, Se observa que el control es positivo para Agar SIM al producirse H2s al ennegrecerse el medio e Indol negativo.
Para Salmonella
Observamos que utiliza algunos hidratos de carbono del Agar
TSI, adems de producir H2S. En Agar LIA Se observa la produccin de lisina descarboxilasa en el viraje de color amarillo a rojo parduzco. En Agar CITRATO DE SIMMONS, Se observa que no utiliza el citrato para su metabolismo, por lo que no hay cambio de color. En Agar UREA, Se observa que no degrada la urea, por lo tanto no hay cambio de color. En Agar SIM + PRUEBA DE INDOL, Se observa que el control es positivo.
VIII. DISCUSIN 1. AGAR TRIPLE AZUCAR HIERRO: TSI
Determina la capacidad de un organismo de atacar un
hidrato de carbono especfico incorporado en un medio de crecimiento bsico, con produccin o no de gases, junto con la determinacin de posible cido sulfhdrico. El agar TSI es un medio diferencial que determina tanto la fermentacin de los hidratos de carbono y la produccin de cido sulfhdrico. Reaccione s Pico de flauta alcalino / profundidad alcalina (K/K). No fermentacin de hidratos de carbono. Caracterstico de bacterias no fermentadoras como Pseudomonas aeruginosa. Pico de flauta alcalino / profundidad cida (K/A). Glucosa fermentada, lactosa no fermentada. Caracterstico de bacterias no fermentadoras de lactosa como especies de Shigella. Pico de flauta alcalino / profundidad cida (negra) (K/A/H2S). Glucosa fermentada, lactosa no fermentada; produccin de H2S. Caracterstico de bacterias no fermentadoras de lactosa y productoras de H2S como: Salmonella, Arizona, Citrobacter y algunas especies de Proteus. Pico de flauta cido / profundidad cida (A/A). Glucosa y lactosa fermentadas. Caracterstico de coliformes que fermentan lactosa como: E. coli y grupo Klebsiella- Enterobacter.
2. ASIMILACION DEL CITRATO. Medio de cultivo: Citrato de
Simmons Determina si un microorganismo es capaz de utilizar citrato como nica fuente de carbono para el metabolismo y crecimiento, provocando alcalinidad. Resultados
Medio no inoculado
Positivo
negativo
Positivo
Interpretacin
Positivo: Crecimiento aunque no exista cambio de
color. Crecimiento y el medio de color azul intenso en pico de flauta.
Negativo: No se observa crecimiento y medio de color
verde.
3. HIDRLISIS DE LA UREA. Medio de cultivo: Agar urea de
Christensen Determina la capacidad de un organismo de desdoblar la urea formando dos molculas de amoniaco por la accin de la enzima ureasa produciendo un cambio de color rojo en el medio. La hidrlisis de la urea es catalizada por la ureasa, para dar dos molculas de amoniaco. La ureasa es una importante enzima microbiana vinculada con la descomposicin de los compuestos orgnicos.
4. Prueba de la produccin de Indol
La prueba de indol se bas en la formacin de un complejo de color rojo cuando el indol reacciona con el grupo aldehdo de p-dimetilaminobenzaldehdo (sustancia activa del reactivo de Kovacs). La formacin de indol se produce solamente en aquellos organismos capaces de fermentar los hidratos de carbono. La elevada acidez producida por la fermentacin de la glucosa puede impedir el crecimiento del organismo o inhibir la enzima. El agregado de triptfano estimula la produccin de indol mientras que la glucosa la inhibe. Reactivo de Kovacs
Adicionar 5 gotas suavemente el tubo
agitar
Interpretar inmediatamente
Reporte resultados PRUEBA
POSITIVO
NEGATIVO
Sulfuro
Indol
Resultados
positivo
Medio sin inocular Indol negativo
Indol
Interpretacin - cido sulfhdrico Positivo: Ennegrecimiento del medio Negativo: Sin ennegrecimiento - Indol Positivo: Anillo rojo en la superficie del medio. Negativa: No se produce color Negativa: Color naranja en la superficie del medio. Indica desarrollo de escatol, un compuesto metilado que puede ser el precursor de la formacin de indol.
IX.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS -
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS BACTERIOLOGICOS EN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS. MINISTERIO DE SALUD.
INSITUTO NACIONAL DE SALUD. SERIE DE NORMAS TECNICAS
N 28. Lima, 2005. ATLAS DE PRUEBAS BIOQUIMICAS PARA IDENNTIFICAR BACTERIAS. UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO. FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA. 2003. Ambron S. y Hooper K, 2002. http://dis.unal.edu.co/eidos/node47.html
