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Toxicologa - Extraccin alcalina de txicos revelado por
cromatografa de capa fina
UNIVERSIDAD MARIA AUXILIADORA - UMA
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA
Prctica numero N 6
Extraccin alcalina de txicos revelada por cromatografa de capa fina
CURSO: TOXICOLOGA
INTEGRANTE: ALCEDO MORA, CARLOS
LIMA- PER 2016
I. INTRODUCCIN
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En esta prctica se hizo la cromatografa de capa fina con las muestras
biolgicas de hgado (metaminofox), sangre (carbofurano), estas muestras ya estaban extradas anteriormente con cloroformo. Se trabaj con el medio 19 de acetona) sali los resultados esperados. No se hall el Rf porque el bombeador se malogro, no sala el fast blue para revelarla muestra.
II. OBJETIVOS
Identificar con el reactivo de cloruro de paladio manchas amarilla
Identificar con el reactivo fax blue manchas fucsia.
Identificar los txicos cidos por el mtodo de cromatografa d
capa fina.
III. MARCO TERICO
La cromatografa
Es una tcnica para separacin de los distintos componentes de una
mezcla, permite la separacin de trozos de impurezas o bien de las fracciones importantes. El fundamento de la cromatografa es la separacin de diferentes tipos de molculas cuando desciende por una columna o atraviesa una delgada capa de material inerte. En ambos casos, existe una sustancia que proporciona una superficie elevada y que interacciona fsicamente con el compuesto a analizar. Si las molculas son adsorbidas por la superficie, el fenmeno se llama cromatografa de adsorcin, y si se disuelven en una delgada superficie lquida, cromatografa de reparto. El nacimiento de la cromatografa de absorcin se remonta a 1903, cuando el botnico ruso Mikhail S. Tswett estableci los primeros fundamentos. Este cientfico observ que filtrando soluciones que contenan pigmentos vegetales a travs de una columna de carbono de calcio en polvo fino, los pigmentos quedaban retenidos. Haciendo pasar por la columna otro disolvente puro se consegua la separacin de los pigmentos, los cuales aparecan en la columna en varias zonas de diferente color que se distanciaban cada vez ms una
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de la otra, mientras el disolvente atravesaba la columna, la vistosa
cromatografa, que realmente ha sido poco afortunada, ya que en la actualidad se emplea esta tcnica para separar fraccin es incoloras en la mayora de los casos.
Es un procedimiento fsico-qumico que consiste en separar los
componentes o sustancias integrantes de una mezcla en movimiento por medio de reparto o adsorcin sobre una superficie estacionaria o inmvil. La razn por la que es posible conseguir separaciones difciles de lograr por otros mtodos estriba en que, pequeas diferencias en el coeficiente de reparto o en la adsorcin desorcin de cada uno de los componentes se va multiplicado a lo largo del sistema.
Se pueden establecer dos mecanismos:
1. Reparto o participacin: Es la distribucin de una sustancia o mezcla de sustancias entre la fase mvil y la fase estacionaria soportada sobre un slido adecuado. 2. Adsorcin: Fenmeno de superficie que consiste en el aumento de concentracin de una sustancia en la superficie de un slido. El proceso inverso, o sea la separacin de las molculas adsorbidas en la superficie del slido, se denomina desorcin. La fuerza con que se adsorbe un compuesto aislado depende de la polaridad de la molcula, de la actividad del adsorberte y de la polaridad del solvente.
PARTES DE UN SISTEMA CROMATOGRAFICO
1. Fase mvil: Lo constituyen los solventes, que son sustancias fluidas
de diferente polaridad, ejemplo: metanol, cloroformo, etanol, etc. La polaridad de la fase mvil est relacionada con su capacidad de elucin o desorcin. Los solventes deben tener elevado grado de pureza. 2. Fase estacionaria o soporte: Lo constituyen las sustancias adsorbentes que generalmente se depositan sobre la placa de vidrio o columna de vidrio, en el caso de la C. en papel, el papel Whatman. Debe ser insoluble en el disolvente que se va a utilizar para la separacin y no debe reaccionar con las sustancias que se van a separar. 3. Cmara de saturacin: que es un recipiente con una tapa que cierra hermticamente donde se realiza el cromatograma. 4. Reveladores: Si todos los compuestos son coloreados, bastar la inspeccin ocular para distinguir las manchas, pero en la mayora de los casos, los compuestos son incoloros y por ello no visibles en el cromatograma, siendo necesario utilizar mtodos
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fsicos (Luz UV) o qumicos, como los vapores de Iodo, u otros reactivos especiales que permitan hacer visible. 5. Aplicadores: son micropipetas utilizadas en la aplicacin o sembrado de las sustancias o cromatografiar.
Rf: emplea el Rf (Retention factor), el cual se define como el cociente de
dividir el recorrido de la sustancia por el disolvente, esto es, la distancia media desde el origen hasta el centro de la mancha (X) dividida por la distancia que media desde el origen hasta el frente del disolvente.
IV. MATERIALES
Cmara de saturacin
Reactivos
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Plancha de slice gel
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V. METODOLGIA DE PROCEDIMIENTO
1 Se hizo la seleccin de las muestras quienes son del grupo
carbofurano (muestra biolgica sangre, metaminofox (muestra biolgica de hgado).
2 Se sembr en la placa de la slice gel las muestras, estndar de
carbofurano, muestra de rgano fosforado, muestra rgano de carbofurano, estndar de rgano fosforado.
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3 Se prepar el medio 19
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4 Se introdujo la plancha de slice gel ya sembrado
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5 Se esper un tiempo hasta que la fase estacionario suba una
distancia adecuada para revelarlo en la cmara de aluminio.
6 Revelamos primero con el reactivo de cloruro de paladio.
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7 Luego seguimos con el reactivo fast blue, y finalmente le
agregamos vainillina luego lo llevamos a una cocina elctrica para secarlo y observar un color fucsia.
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VI. OBSERVACIONES
se tuvo los reactivos adecuados para trabajar en la prctica.
El medio 19 fue de gran ayuda para solucionar estos problemas de reactivos en la prctica anterior.
VII. CONCLUSIONES
Si se observ las manchas amarillas con el reactivo de cloruro de
paladio, tambin mancha con el reactivo fax blue (manchas fucsia) pero por goteo ya se malogro el bombeador. Nos falta hallar el Rf por el inconveniente de la ltima etapa de revelado por el reactivo fast blue.
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VIII. BIBLIOGRAFA
A. Khoo SH, Bond J, Denning DW. Administering arnphotericin B-a
