INÓCULOS
INÓCULOS
INÓCULOS
I. DEFINICIÓN
El tamaño del inóculo generalmente es de 10% del volumen total del medio.2
II. CARACTERISTICAS
La cepa o cultivo a utilizar deber ser genéticamente estable,
La cepa o cultivo debe estar libre de contaminantes,
El microorganismo a usar deber ser de fácil conservación sin pérdidas de
sus características,
El inóculo puede ser un consorcio de diversas especies microbianas,
como las que se encuentran en lodos aerobios (aguas residuales),
Un inoculo debe tener la capacidad de crecer e invadir rápidamente el
sustrato (velocidad de crecimiento alto),
El inoculo implica obtener una suspensión de microorganismos viables y
aptos para reproducirse y producir metabolitos a escala industrial,
Si el objetivo es obtener un producto, este debe ser obtenido en altas
concentraciones3.
III. TIPOS
IV. MEDIOS DE CULTIVO
La recuperación de la cepa
La forma de recuperar la cepa depende del método de
conservación utilizado.
Crecimiento
- En un medio de cultivo liquido
- En un medio de cultivo solido
V. DESARROLLO DE INÓCULO
La preparación del inóculo implica el desarrollo de una población de
microorganismos, desde su estado de conservación hasta obtener una
suspensión de microorganismos viables y aptos para reproducirse y producir
metabolitos a escala industrial.
Los métodos para la preparación del inóculo tienen dos finalidades:
Obtener el máximo de viabilidad de los microorganismos.
Evitar que pierdan las características para producir los metabolitos de
interés.
Etapas para preparar el inóculo.
El procedimiento para preparar el inóculo incluye tres etapas:
A) Recuperación de la cepa
La forma de recuperar la cepa depende del método de conservación utilizado;
por ejemplo:
Si el cultivo está liofilizado, se le adiciona agua destilada estéril para
rehidratar las células.
Si el cultivo está congelado, se recomienda poner el recipiente que lo
contiene en un baño de agua a 37°C para que la descongelación se lo más
rápida posible.
Si el cultivo está en una botella de Roux, se le adiciona agua destilada estéril
y unas perlitas de vidrio estériles y se agita suavemente con el fin de
suspender los microorganismos.
Si el cultivo está desecado, se le adiciona agua destilada estéril para
rehidratar las células.
VI. EJEMPLOS
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Z. Alejandra Mora; Carlos H. Chávez; Gladys Fonseca, Jorge A. Cabra,
Yezid Carmona Salgado. Desarrollo de un inóculo microbiano empleando
lodos activados para la remoción de ácido sulfhídrico mediante
biofiltración. Rev. Colomb. Biotecnol. 2005; 2: 26-34
2. Dr. Pedro F. Mateos. Reparación Y Propagación de Inóculo. 2014; 1: 7-9
3. Taroco F. SSF: Fermentación en estado sólido. Ecopráctica. 2015; 1(2):
1-5.
4. Hernández, A. (2003). Microbiología industrial (No. 660.62 H557m). San
José, CR: EUNED.
5. Díaz-Plascencia, D., Rodríguez-Muela, C., Mancillas-Flores, P., Angulo,
C., Salvador, F., Ruíz, O., ... & Elías, A. (2011). Desarrollo de un inoculo
con diferentes sustratos mediante fermentación sólida sumergida.
REDVET. Revista Electrónica de Veterinaria, 12(1).
I. DEFINICIÓN
Se define como un proceso fermentativo que ocurre en ausencia de agua
libre en el sistema, empleando como soporte sólido un sustrato natural o un
soporte inerte, para promover el crecimiento microbiano y la producción de
metabolitos de interés. Sin embargo, el sustrato debe poseer suficiente
humedad para apoyar el crecimiento y el metabolismo del microrganismo 1.
II. CARACTERISTICAS
En SSF, el material sólido no es soluble.
Presenta alta porosidad capaz de absorber agua.
Actúa tanto como soporte físico y fuente de nutrientes.
El material sólido, podría ser un sustrato sólido de origen natural tales
como cultivos agrícolas y residuos agroindustriales o soportes inertes que
son embebidos con una solución de nutrientes de forma tal que se
conserve la baja actividad acuosa y la alta transferencia de oxígeno.
Este bioproceso presenta una escasa probabilidad de contaminación por
bacterias o levaduras dada su reducida actividad de agua y ofrece
condiciones similares al hábitat natural de los hongos.
El diseño de los reactores es fácil y económico, aunque no es fácil de
controlarla.
Las altas humedades producen una disminución de la porosidad del
sustrato, impidiendo la penetración de oxígeno.
El bajo contenido de humedad puede conducirá la mala accesibilidad de
nutrientes produciendo un crecimiento microbiano malo.
En relación a la selección de sustrato, podría haber dos principales
consideraciones (la primera es actuar obre un sustrato específico para
agregarle valor o aprovechar un residuo contaminante) el fin puede ser
eliminar este sustrato. La segunda podría estar relacionado con el objetivo
de producir un determinado producto de un sustrato adecuado)
seleccionar el sustrato adecuado2.
1. Biorreactor en Columna
Figura 2: Biorreactor Estéril. (1) tapa de calefacción, (2) termómetro, (3) tamiz de acero, (4) medidor de
temperatura del aire en la entrada, (5) medidor de humedad relativa, (6) resistencia, (7) medidor de
temperatura de agua, (8) medidor de flujo másico, (9) medidor de nivel, (10) chaqueta aislante.
3. Tambor horizontal
Uno de los biorreactores en estado sólido más utilizado son los llamados
tambor horizontal, el cual se ha diseñado de varias formas: como un
contenedor rotatorio, perforado o con paletas, con el fin de obtener una
agitación continua del sustrato sólido para incrementar el contacto entre
las paredes del biorreactor y el sustrato, así como, proveer mayor oxígeno
al microorganismo. Los equipos rotatorios, desarrollados por el grupo
Several, consisten de un cilindro, con o sin chaqueta con agua para el
control de temperatura, el cual gira lentamente volteando al medio de
cultivo ayudado de pestañas que se encuentran adheridas a la pared (Fig.
3a). Este tipo de biorreactor presenta dificultades en el control de
temperatura y humedad debido a problemas de aglomeramientos de
células por ruptura micelial. En cambio, los biorreactores de tipo tambor
con paletas, vuelve más eficiente la trasferencia de oxígeno y disminuye
la aglomeración de partículas de sustrato durante el crecimiento
microbiano (Fig. 3b). Sin embargo, generalmente, un biorreactor de
fermentación sólida con agitación permanente, aunque sea suave, puede
modificar la estructura del medio sólido. Además, dependiendo de la
naturaleza de la partícula del soporte sólido, esta agitación puede llegar a
ser abrasiva causando daños al micelio. Se han diseñado sistemas
continuos de tambor rotatorio con el fin de mejorar los sistemas de control
de temperatura y humedad, sin embargo, a medida que aumenta el
volumen del sistema fermentativo la remoción de calor por las paredes del
biorreactor se vuelve más ineficiente.
Figura 3: Biorreactor Tambor horizontal: (a) Rotatorio. (1) Entrada de aire, (2) embalaje
rotatorio, (3) conector, (4) boquillas de entrada de aire, (5) línea de aire, (6) rodillos, (7)
tambor rotatorio, (8) medio sólido, (9) aro; (b) Con paletas. (1) entrada de aire, (2) medidor
de temperatura, (3) chaqueta de agua, (4) paletas, (5) salida de aire, (6) motor para
agitación, (7) reactor, (8) medio sólido, (9) árbol de agitación.
4. Biorreactor Zymotis
Figura 4: Biorreactor Zymotis. (1) Platos verticales intercambiadores de calor, (2) cama de
sustrato, (3) entrada de agua, (4) salida de agua, (5) termostato.
5. Biorreactor Growtek.
7. Biorreactor Columna-Charola
VI. APLICACIONES
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Julián M, Ramos L. Fermentación en estado sólido (i). producción de
alimento animal. Tecnología Química. 2007; 27(3): 17-22.
2. Plascencia D, Rodríguez C, Mancillas P, Angulo C Salvador F, Ruíz O,
Rubio H, Mena H, Elías A. Desarrollo de un inoculo con diferentes
sustratos mediante fermentación sólida sumergida. REDVET. 2010; 11
(10): 1-12.
3. Revista tecnocientifica URU, fermentación en estado sólido: Una alternativa
biotecnológica para el aprovechamiento de desechos agroindustriales. N°7 Julio-
Diciembre 2014(11-22)
4. Ruíz-Leza, HA, Rodríguez-Jasso, RM, Rodríguez-Herrera, R, Contreras-
Esquivel, JC, Aguilar, CN. Diseño de biorreactores para fermentación en
medio sólido. Revista Mexicana de Ingeniería Química. 2007;6(1):33-40.