Evaluacion de Metodologia para Medicion de Tritio en Agua

UNIVERSIDAD DE EL SALVADOR
FACULTAD DE INGENIERIA Y ARQUITECTURA

ESCUELA DE INGENIERIA QUIMICA
“EVALUACION DE METODOLOGIA PARA

MEDICION DE TRITIO EN AGUA”
PRESENTADO POR:
RONAL FRANCISCO UMAÑA HERNANDEZ
PARA OPTAR AL TITULO DE:
INGENIERO QUIMICO
CIUDAD UNIVERSITARIA, ABRIL DE 2008

RECTOR :
MSC. RUFINO ANTONIO QUEZADA SÁNCHEZ
SECRETARIO GENERAL :
LIC. DOUGLAS VLADIMIR ALFARO CHÁVEZ
DECANO :
ING. MARIO ROBERTO NIETO LOVO
SECRETARIO :
ING. OSCAR EDUARDO MARROQUÍN HERNÁNDEZ
DIRECTOR :
ING. FERNANDO TEODORO RAMÍREZ ZELAYA

Trabajo de Graduación previo a la opción al Grado de:
INGENIERO QUIMICO
Título :
“EVALUACION DE METODOLOGIA PARA

MEDICION DE TRITIO EN AGUA”
Presentado por :
RONAL FRANCISCO UMAÑA HERNANDEZ
Trabajo de Graduación Aprobado por :
Docentes Directores :
ING. ANA CECILIA DIAZ DE FLAMENCO

LIC. JULIO ERNESTO PAYES HERNANDEZ
San Salvador, Abril de 2008

Trabajo de Graduación Aprobado por:
Docentes Directores :
ING. ANA CECILIA DIAZ DE FLAMENCO
LIC. JULIO ERNESTO PAYES HERNANDEZ

AGRADECIMIENTOS
Al personal del Centro de Investigación y Aplicaciones Nucleares (CIAN) de la

Facultad de Ingeniería y Arquitectura (FIA) de la Universidad de El Salvador (UES), por
haberme permitido realizar el presente trabajo de graduación en las instalaciones de sus
laboratorios, proporcionando la mayoría de los reactivos y cristalería, requeridos por el
método a evaluar, desarrollado por el Organismo Internacional de Energía Atómica
(OIEA). Así como también, por permitirme el uso del equipo principal para la evaluación
del método (Contador de Centelleo Líquido), sin el cual no se habría realizado este trabajo
Escuela de Ingeniería Química (EIQ), por proporcionarme a través de la Planta

Piloto (PP), parte de los reactivos y cristalería, utilizados en la etapa de análisis de
muestras, así como también por facilitarme el equipo de destilación, que es básico para el
desarrollo del método de medición de Tritio. Y a todos los docentes por su apoyo
brindado en el momento oportuno en que fue necesitado.
Instituto de Geocronología y Geología Isotópica (INGEIS), Buenos Aires,

Argentina; Instituto de Radioprotección y Dosimetría (IRD), Río de Janeiro, Brasil;
quienes proporcionaron de manera individual y desinteresada un Material de Referencia
de Tritio para la evaluación del método desarrollado en el presente trabajo.
Docentes directores: Ing. Ana Cecilia Díaz de Flamenco de la EIQ y Lic. Julio
Ernesto Payes Hernández del CIAN, por su tiempo, ayuda, apoyo y confianza durante
todo el proceso de desarrollo del presente trabajo de graduación. Sin ellos, no hubiera
sido posible la realización del mismo.
Lic. Víctor Manuel Segura Lemus (experto en validación de métodos químicos),

por su disponibilidad para la asesoría incondicional durante todo el proceso de desarrollo
del presente trabajo.
“A todos aquellos que siempre están atentos y disponibles”

DEDICATORIA
Al gran Maestro de maestros, Jesús el hombre Cristificado, que vino a este mundo
a entregar su vida por la humanidad y a enseñarnos a vencer los obstáculos que se nos
presentan en cada etapa de nuestra vida. El mismo, dijo:
“Ustedes conocerán la verdad y la verdad los hará libres”
A mi mamá Luisa Hernández y mi papá Hilario Humberto Umaña, que han estado
conmigo, en estos treinta años de mi vida. Mis Hermanos: Mario Antonio, Lilian, Sara,
Abel, Adán, Juan José, María Inés, Humberto y Rosa Mélida; que me han dado parte de
sí mismos. Mis compañeros de vivienda, cómo olvidarlos; Carlos Eduardo, Edwin Adiel
y Virginia Marisela, por su amistad. Para ellos y sus seres queridos, pido bendiciones.
A la Humanidad en petición a los hombres de ciencia dedicados al desarrollo de

aplicaciones nucleares, para que antes de ejecutar sus proyectos examinen
cuidadosamente el volumen de residuos radioactivos que generarán y desecharán al
medio ambiente, recordándoles que los residuos de baja y media actividad podrían
permanecer en el ambiente entre cientos y miles de años.
A ti, para recordarte que el momento más feliz de tu vida es éste, el que estás
viviendo ahora. El pasado y el futuro, solo son ilusiones del tiempo y de la mente, ellos
ocultan a Dios de nuestra mirada. Por eso, no pongas en el olvido lo que en la vida es
más cierto, y es que el ayer ya está muerto y el mañana no ha nacido. Por esto, Jesús dijo
“Miren los lirios, cómo crecen; ni se afanan ni se enredan”
Por último, te pido medites la siguiente pregunta y te ruego le des tu respuesta:

¿Qué podría acomodarse más adecuadamente a tus necesidades? Aceptar lo que venga
tejido en el diseño de tu destino tal como es, y tratar de mejorarlo, pero no cambiarlo.
“Todos reciban el amor que habita dentro de mi”

INDICE GENERAL
INTRODUCCION............................................................................................. i
INTRODUCCIÓN A LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS QUÍMICOS................1
1.1 DEFINICIÓN Y GENERALIDADES ............................................................................ 2
1.2 TIPOS DE VALIDACIÓN ............................................................................................ 4

1.2.1 Validación Retrospectiva................................................................................. 5
1.2.2 Validación Prospectiva.................................................................................... 6
1.3 ¿PORQUE ES NECESARIO VALIDAR UN MÉTODO?.............................................. 6
1.4 ¿CUANDO SE DEBEN VALIDAR LOS MÉTODOS?.................................................. 9
1.5 ¿COMO SE DEBEN VALIDAR LOS MÉTODOS? .................................................... 10
1.6 ¿QUIÉN DEBE VALIDAR LOS MÉTODOS? ............................................................ 12
1.7 CUAL ES EL GRADO DE VALIDACIÓN REQUERIDO PARA LOS MÉTODOS....... 13
1.8 REQUISITOS ANALÍTICOS PARA LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS ...................... 15
1.9 DESARROLLO DEL MÉTODO................................................................................. 19
1.10 NORMAS BASICAS PARA LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS .................................. 19
1.11 CONSIDERACIONES EN LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS .............. 20
CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO PARA VALIDACIÓN DE

MÉTODOS QUÍMICOS ................................................................................22
2.1 TIPOS DE MÉTODOS QUÍMICOS ........................................................................... 23
2.1.1 Métodos Normalizados ................................................................................. 23
2.1.2 Métodos no Normalizados............................................................................. 23
2.1.3 Métodos desarrollados por el laboratorio ...................................................... 25
2.2 CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO................................................................... 25

2.2.1 Características de desempeño por tipo de método ....................................... 25
2.2.2 Características de desempeño por tipo de análisis ....................................... 27
2.3 CONFIRMACIÓN DE IDENTIDAD Y SELECTIVIDAD/ESPECIFICIDAD.................. 30

2.3.1 Análisis por potencia, disolución y uniformidad de contenido ........................ 32
2.3.2 Pruebas cuantitativas para la determinación del contenido de impurezas..... 33
2.3.3 Análisis por pruebas de identificación ........................................................... 33
2.4 LIMITE DE DETECCIÓN .......................................................................................... 34

2.4.1 Comparación de blanco con blanco enriquecido a una sola concentración... 35
2.4.2 Blanco enriquecido a una sola concentración ............................................... 36
2.4.3 Comparación del comportamiento de blanco con blanco enriquecido a
diferentes concentraciones ........................................................................... 36
2.4.4 Método de comparación Señal/Ruido ........................................................... 37
2.5 LIMITE DE CUANTIFICACIÓN................................................................................. 38

2.5.1 Blanco enriquecido a una sola concentración ............................................... 38
2.5.2 Método de comparación de Señal / Ruido..................................................... 39
2.5.3 Método de respuesta de línea base (cromatografía líquida o gaseosa) ........ 39
2.5.4 Método de la inyección doble de la muestra de analito ................................. 40
2.6 LINEALIDAD Y RANGO ........................................................................................... 40

2.6.1 Determinación de la Linealidad e Intervalo del Sistema ................................ 42
2.6.2 Determinación de la Linealidad e Intervalo del Método ................................. 43
2.6.3 Criterios de aceptación ................................................................................. 43
2.7 EXACTITUD ............................................................................................................. 43
2.8 VERACIDAD ............................................................................................................ 44

2.8.1 Comparación con un método oficial, validado o estandarizado ..................... 45
2.8.2 Métodos de curvas de respuesta relativa ...................................................... 46
2.8.3 Comparación de los resultados obtenidos de un estándar o MRC ................ 46
2.8.4 Condiciones para las pruebas de veracidad.................................................. 46
2.8.5 Valores de referencia para las pruebas de veracidad.................................... 47
2.9 PRECISIÓN.............................................................................................................. 49
2.9.1 Evaluación de la precisión............................................................................. 51
2.10 INTERCOMPARACIONES ....................................................................................... 51
2.11 ROBUSTEZ.............................................................................................................. 52
2.11.1 Prueba de robustez de Youden y Steiner...................................................... 53
2.12 FIDELIDAD............................................................................................................... 55
2.13 FACTOR DE RECUPERACIÓN ............................................................................... 57

2.13.1 Blanco enriquecido ....................................................................................... 59
2.13.2 Muestra enriquecida...................................................................................... 60
TRAZABILIDAD E INCERTIDUMBRE..........................................................61
3.1 TRAZABILIDAD........................................................................................................ 62
3.1.1 Calibración del equipo de medición............................................................... 63
3.1.2 Mediciones Usando Métodos Principales...................................................... 63
3.1.3 Mediciones usando un Material de Referencia de una sustancia pura .......... 64
3.1.4 Medición de un Material de Referencia Certificado (MRC) ............................ 64
3.1.5 Medición usando un procedimiento aceptado ............................................... 64
3.1.6 Materiales de referencia en la cadena de trazabilidad................................... 65
3.1.7 Caracterización de la trazabilidad ................................................................. 67
3.2 DEFINICIÓN DE INCERTIDUMBRE ........................................................................ 69
3.3 ERROR E INCERTIDUMBRE................................................................................... 71

3.3.1 Errores sistemáticos y errores accidentales .................................................. 71
3.3.2 Incertidumbre absoluta e incertidumbre relativa ............................................ 72
3.3.3 Diferencia entre error e incertidumbre ........................................................... 73
3.4 MODELOS FÍSICO Y MATEMÁTICO....................................................................... 74
3.5 FUENTES DE LA INCERTIDUMBRE ....................................................................... 76
3.6 CALCULO DE LA INCERTIDUMBRE....................................................................... 77

3.6.1 Evaluación tipo A .......................................................................................... 78
3.6.2 Evaluación tipo B .......................................................................................... 81
3.6.3 Consideraciones en el cálculo de la incertidumbre........................................ 82
3.7 DETERMINACIÓN DE LA INCERTIDUMBRE .......................................................... 83

3.7.1 Incertidumbre estándar ................................................................................. 83
3.7.2 Incertidumbre estándar combinada ............................................................... 85
3.7.3 Incertidumbre expandida............................................................................... 89
3.8 ETAPAS PARA LA EVALUACIÓN DE LA INCERTIDUMBRE .................................. 93
TECNICAS Y METODOS PARA MUESTREO Y ANALISIS DE

MUESTRAS ..................................................................................................94
4.1 TECNICA PARA MUESTREO DE AGUA LLUVIA .................................................... 95

4.1.1 Red Global de los Isótopos de la Precipitación, GNIP................................... 96
4.1.2 Prácticas de campo generales ...................................................................... 96
4.1.3 Estrategia de muestreo de agua lluvia .......................................................... 97
4.1.4 Envases para el muestreo............................................................................. 98
4.2 METODO PARA EL MUESTREO DE AGUA LLUVIA............................................... 99

4.2.1 Programa OIEA/OMM sobre la composición isotópica de la precipitación..... 99
4.3 TECNICAS PARA ANALISIS DE TRITIO EN MUESTRAS DE AGUA .................... 102

4.3.1 Contadores de Gas..................................................................................... 103
4.3.2 Espectrometría de Centelleo Líquido .......................................................... 107
4.3.3 Espectrometría de masa del 3H mediante 3He ............................................ 108
4.3.4 Purificación del agua................................................................................... 110
4.3.5 Enriquecimiento de 3H................................................................................. 110
4.4 METODO PARA LA PURIFICACIÓN DE AGUA..................................................... 112
4.4.1 Equipos....................................................................................................... 112
4.4.2 Reactivos .................................................................................................... 112
4.4.3 Materiales ................................................................................................... 112
4.4.4 Desarrollo del método ................................................................................. 113
4.5 METODO PARA LA MEDICIÓN DE TRITIO EN MUESTRAS DE AGUA ............... 114

4.5.1 Requisitos previos....................................................................................... 114
4.5.2 Reactivos .................................................................................................... 115
4.5.3 Materiales ................................................................................................... 115
4.5.4 Equipos....................................................................................................... 116
4.5.5 Descripción de actividades.......................................................................... 116
4.5.6 Conteo de Tritio por Centelleo Líquido........................................................ 117
4.5.7 Cálculos ...................................................................................................... 117
4.5.8 Determinación del factor de recuperación ................................................... 119
IDENTIFICACION Y CALIFICACION DE EQUIPOS..................................120
5.1 CONTADOR DE CENTELLEO LÍQUIDO................................................................ 121

5.1.1 ¿Qué es el contador de Centelleo Líquido? ................................................ 121
5.1.2 Principio de funcionamiento ........................................................................ 122
5.1.3 Interferente ó Quench ................................................................................. 124
5.1.4 Eficiencia del sistema de medición.............................................................. 125
5.1.5 Nivel de confianza y radiación de fondo ...................................................... 126
5.1.6 Factores que afectan la sensibilidad del equipo .......................................... 127
5.1.7 Calibración del contador ............................................................................. 129
5.1.8 Verificación del comportamiento estadístico del contador ........................... 129
5.1.9 Precauciones operacionales y Limitaciones................................................ 133
5.1.10 Riesgos del equipo ..................................................................................... 134
5.1.11 Mantenimiento del equipo ........................................................................... 135
5.1.12 Especificaciones del tipo de viales para el análisis ..................................... 138
5.1.13 Datos Generales y Requerimientos............................................................. 139
5.1.14 Datos típicos de rendimiento ...................................................................... 139
5.2 REGULADOR CON REÓSTATO VARIABLE Y AGITADOR MAGNÉTICO ........... 141

5.2.1 Datos Generales ......................................................................................... 141
5.2.2 Medidas de seguridad................................................................................. 141
5.2.3 Precauciones .............................................................................................. 142
5.2.4 Agitación ..................................................................................................... 143
5.2.5 Calentamiento............................................................................................. 143
5.2.6 Limpieza ..................................................................................................... 143
5.2.7 Normas y regulaciones ............................................................................... 144
5.3 BALANZA ANALÍTICA ........................................................................................... 145

5.3.1 Datos Generales ......................................................................................... 145
5.3.2 Elementos de indicación, mando y conexión de la balanza......................... 145
5.3.3 Medidas de Seguridad ................................................................................ 147
5.3.4 Uso del Menú.............................................................................................. 148
5.3.5 Nivelación de la balanza ............................................................................. 149
5.3.6 Ajustes de la balanza .................................................................................. 149
5.3.7 Prueba de la balanza con pesa interna o externa ....................................... 151
5.3.8 Acondicionamiento apropiado de la balanza ............................................... 152
5.3.9 Precauciones para un funcionamiento apropiado........................................ 153
5.3.10 Mantenimiento y Limpieza........................................................................... 154
5.3.11 Características técnicas y accesorios ......................................................... 155
5.4 BOMBA PARA RECIRCULACIÓN DE REFRIGERANTE ...................................... 157

5.4.1 Generalidades y especificaciones ............................................................... 157
5.4.2 Rendimiento de la bomba ........................................................................... 158
5.4.3 Identificación de la bomba........................................................................... 159
5.4.4 Características de la bomba........................................................................ 159
5.4.5 Normas de seguridad.................................................................................. 160
5.4.6 Conexiones eléctricas ................................................................................. 161
5.4.7 Funcionamiento .......................................................................................... 161
5.4.8 Instrucciones de servicio............................................................................. 162
IDENTIFICACION DE MATERIALES Y REACTIVOS................................163
6.1 ULTIMA GOLD LLT (COCTEL DE CENTELLEO LÍQUIDO) ................................... 164

6.1.1 Características de funcionamiento .............................................................. 164
6.1.2 Capacidad de carga de agua ...................................................................... 164
6.1.3 Tipos de agua y orina.................................................................................. 165
6.1.4 Figura de mérito.......................................................................................... 165
6.1.5 Propiedades de seguridad para la muestra y el usuario.............................. 165
6.1.6 Preparación del cóctel................................................................................. 166
6.1.7 Rendimiento de Ultima Gold LLT ................................................................ 166
6.2 PERMANGANATO DE POTASIO........................................................................... 169

6.2.1 Generalidades............................................................................................. 169
6.2.2 Propiedades químicas................................................................................. 169
6.2.3 Propiedades físicas y Termoquímicas......................................................... 170
6.2.4 Niveles de toxicidad .................................................................................... 171
6.2.5 Manejo y equipo de protección personal ..................................................... 171
6.2.6 Riesgos....................................................................................................... 171
6.2.7 Acciones de emergencia............................................................................. 172
6.2.8 Almacenamiento ......................................................................................... 173
6.2.9 Usos y utilidades......................................................................................... 173
6.2.10 Precauciones .............................................................................................. 174
6.3 HIDROXIDO DE SODIO......................................................................................... 175

6.3.1 Generalidades............................................................................................. 175
6.3.2 Propiedades físicas y termodinámicas ........................................................ 175
6.3.3 Propiedades químicas................................................................................. 177
6.3.4 Niveles de toxicidad .................................................................................... 177
6.3.5 Manejo y equipo de protección personal ..................................................... 177
6.3.6 Riesgos....................................................................................................... 178
6.3.7 Acciones de emergencia............................................................................. 179
6.3.8 Almacenamiento ......................................................................................... 180
NORMAS DE TRABAJO Y RADIOPROTECCION.....................................181
7.1 RADIOPROTECCIÓN ............................................................................................ 182

7.1.1 Tipos de fuentes radiactivas........................................................................ 182
7.1.2 Tipos de riesgos.......................................................................................... 183
7.1.3 Bases de protección.................................................................................... 184
7.1.4 Protección frente a radiaciones................................................................... 184
7.1.5 Dosimetría .................................................................................................. 187
7.1.6 Clasificación y delimitación de zonas .......................................................... 191
7.2 NORMAS DE TRABAJO EN LABORATORIOS RADIOISÓTOPICOS.................... 193

7.2.1 Normas generales de trabajo ...................................................................... 193
7.2.2 Normas generales de manipulación ............................................................ 194
7.2.3 Vigilancia y control de la radiación .............................................................. 196
7.2.4 Vigilancia y control de la contaminación...................................................... 197
7.2.5 Niveles de registro ...................................................................................... 198
7.2.6 Monitores de contaminación y radiación ..................................................... 199
7.2.7 Vigilancia y control de material radiactivo.................................................... 201
7.2.8 Incidentes con material radiactivo ............................................................... 202
7.2.9 Métodos para la descontaminación............................................................. 204
7.2.10 Gestión de los residuos radiactivos............................................................. 206
EVALUACIÓN DE RENDIMIENTO Y ANALISIS DE RESULTADOS ........211
8.1 CONDICIONES AMBIENTALES DE OPERACIÓN ................................................ 212
8.2 RENDIMIENTO DEL CONTADOR ......................................................................... 214
8.3 DETERMINACIÓN DEL TIEMPO DE CONTEO ..................................................... 222
8.4 ESTABLECIENDO CONCENTRACIÓN DE BLANCO ............................................ 223
8.5 NIVELES DE RADIACIÓN DE FONDO .................................................................. 224

8.5.1 Análisis estadístico ..................................................................................... 226
8.5.2 Incertidumbre de la radiación de fondo ....................................................... 228
8.5.3 Distribución de la radiación de fondo .......................................................... 231
8.6 EFICIENCIA DEL MÉTODO DE MEDICIÓN .......................................................... 234

8.6.1 Incertidumbre de la eficiencia del método de medición ............................... 238
8.7 EFICIENCIA DEL MÉTODO DE DESTILACIÓN..................................................... 241

8.7.1 Incertidumbre de la eficiencia del método de destilación............................. 243
8.8 LIMITE DE DETECCIÓN DEL METODO DE MEDICIÓN ....................................... 245

8.8.1 Incertidumbre del Límite de Detección ........................................................ 246
8.9 ACTIVIDAD DE TRITIO EN AGUA LLUVIA............................................................ 247
8.10 RESUMEN DE RESULTADOS............................................................................... 249
CONCLUSIONES .......................................................................................250
RECOMENDACIONES...............................................................................251
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ...........................................................254
ANEXOS .....................................................................................................257
A. UNIDADES DE RADIOACTIVIDAD ........................................................................ 258
B. RAPIDEZ DE DESTILACIÓN ................................................................................. 260
C. EQUIPOS DE LABORATORIO............................................................................... 262
D. ESPECTROS DE MEDICIONES ............................................................................ 265
E. CERTIFICADOS DE MATERIALES DE REFERENCIA .......................................... 266

E.1 Orden de recibo del Contador de Centelleo Líquido.................................... 266
E.2 Certificación del Material de Referencia de Tritio ........................................ 267
E.3 Certificado de Estándares Sellados ............................................................ 268
INDICE DE TABLAS
Tabla 1.8.1 Requisitos analíticos relacionados a características de desempeño ......... 17

Tabla 1.8.2 Parámetros de calidad de un método........................................................ 18
Tabla 2.2.1 Características de desempeño según tipo de método ............................... 26
Tabla 2.2.2 Características de desempeño Según la FAO........................................... 28
Tabla 2.2.3 Características de desempeño Según la O.M.S. ....................................... 29
Tabla 2.2.4 Características de desempeño Según la C.E.E......................................... 29
Tabla 2.6.1 Rango de trabajo por tipo de análisis ........................................................ 42
Tabla 2.11.1 Test de Robustez de Youden para un método analítico ............................ 54
Tabla 2.13.1 Determinación del Factor de Recuperación............................................... 58
Tabla 2.13.2 Criterios de aceptación a nivel de trazas ................................................... 60
Tabla 3.7.1 Factores de cobertura para diferentes niveles de confianza...................... 89
Tabla 3.7.2 Determinación de t de Student a partir de ν ............................................. 91
Tabla 5.1.1 Actividad requerida para un nivel de confianza y un error relativo dados.127
Tabla 5.1.2 Nivel de fondo permitido.......................................................................... 127
Tabla 5.1.3 Control de calidad rutinario del contador de Centelleo ............................ 132
Tabla 5.1.4 Procedimientos de Mantenimiento Correctivo ......................................... 136
Tabla 5.1.5 Dimensiones requeridas para definir el tamaño de viales grandes.......... 138
Tabla 5.1.6 Dimensiones requeridas para definir el tamaño de viales pequeños ....... 138
Tabla 5.1.7 Dimensiones requeridas para definir el tamaño de viales de 4 mL.......... 138
Tabla 5.1.8 Fondo observado en modo de conteo normal (NCM) .............................. 139
Tabla 5.1.9 Eficiencia mínima aceptable en NCM...................................................... 140
Tabla 5.1.10 Figura de mérito (E2/B) en NCM.............................................................. 140
Tabla 5.1.11 E2/B, Modo de conteo de alta sensibilidad .............................................. 140
Tabla 5.1.12 E2/B, Modo de conteo en niveles muy bajos............................................ 140
Tabla 5.2.1 Datos técnicos......................................................................................... 144
Tabla 5.2.2 Condiciones ambientales de operación ................................................... 144
Tabla 5.3.1 Alimentación eléctrica ............................................................................. 155
Tabla 5.3.2 Condiciones ambientales para la balanza ............................................... 155
Tabla 5.3.3 Características técnicas .......................................................................... 156
Tabla 5.3.4 Ajuste...................................................................................................... 156
Tabla 5.3.5 Sensibilidad............................................................................................. 156
Tabla 5.4.1 Especificaciones de la bomba ................................................................. 157
Tabla 5.4.2 Rendimiento............................................................................................ 158
Tabla 5.4.3 Partes de la Bomba................................................................................. 159
Tabla 6.1.1 Agua requerida para diferentes temperaturas. ........................................ 166
Tabla 6.1.2 Rendimiento de Ultima Gold LLT para bajos niveles de Tritio ................. 167
Tabla 6.1.3 Rendimiento de Ultima Gold LLT con respecto al tiempo de conteo........ 168
Tabla 6.2.1 Propiedades físicas y termodinámicas del KMnO4 .................................. 170
Tabla 6.2.2 Niveles de toxicidad del Permanganato de Potasio................................. 171
Tabla 6.3.1 Propiedades de disoluciones acuosas del NaOH .................................... 175
Tabla 6.3.2 Propiedades físicas y termodinámicas .................................................... 176
Tabla 7.1.1 Límites máximos de dosis para el personal profesionalmente expuesto . 189
Tabla 7.1.2 Límites de dosis para usuarios de zonas vigiladas.................................. 189
Tabla 7.1.3 Límites de dosis para los miembros del público ...................................... 189
Tabla 7.1.4 Uso de dosímetros .................................................................................. 191
Tabla 7.2.1 Radiactividad máxima permisible en laboratorio ordinarios ..................... 196
Tabla 8.1.1 Temperatura y humedad ambiental......................................................... 212
Tabla 8.2.1 Datos de Rendimiento del Contador........................................................ 214
Tabla 8.2.2 Datos para la prueba de Chi_Cuadrado. ................................................. 221
Tabla 8.5.1 Niveles de radiación de fondo con agua cristal como blanco................... 224
Tabla 8.5.2 Niveles de radiación de fondo con agua alpina como blanco ................. 225
Tabla 8.5.3 Niveles de radiación de fondo con Agua Potable como blanco ............... 225
Tabla 8.5.4 Valores promedio para niveles de fondo con diferentes matrices............ 226
Tabla 8.5.5 Dispersión para niveles de fondo con diferentes Matrices....................... 227
Tabla 8.5.6 Datos estadísticos para niveles de fondo con diferentes Matrices........... 228
Tabla 8.5.7 Niveles de Radiación de Fondo en CPM con agua alpina como blanco .. 231
Tabla 8.5.8 Frecuencias de radiación de fondo con agua alpina como blanco.......... 232
Tabla 8.5.9 Niveles de radiación de fondo (cpm) ....................................................... 233
Tabla 8.5.10 Frecuencias de medidas de radiación de fondo ...................................... 233
Tabla 8.6.1 Actividad de Tritio en 1 mL de MR........................................................... 235
Tabla 8.6.2 Datos estadísticos de la eficiencia del método de medición .................... 237
Tabla 8.6.3 Eficiencias del método de medición ........................................................ 238
Tabla 8.6.4 Estadísticos de mediciones para la eficiencia del método ....................... 239
Tabla 8.7.1 Actividad de Tritio en 0.1 mL de MR........................................................ 241
Tabla 8.7.2 Eficiencias del Método de Destilación ..................................................... 242
Tabla 8.7.3 Datos estadísticos de la eficiencia del método de destilación.................. 242
Tabla 8.7.4 Estadísticos de mediciones para la eficiencia del método de destilación 243
Tabla 8.9.1 Análisis de Tritio en Agua Lluvia ............................................................. 247
Tabla 8.10.1 Condiciones de ambientales de operación .............................................. 249
Tabla 8.10.2 Rendimiento del Contador....................................................................... 249
Tabla 8.10.3 Características de desempeño del método ............................................. 249
Tabla A.1 Prefijos para el SI de unidades................................................................ 258
Tabla A.2 Relaciones entre el SI de unidades y otras unidades .............................. 259
Tabla B.1 Volumen (mL) destilado para un tiempo de 35 minutos........................... 260
Tabla B.2 Volumen (mL) destilado para un tiempo de 45 minutos........................... 260
Tabla B.3 Media aritmética de Volúmenes de destilado para cada tiempo. ............. 261
Tabla B.4 Rapidez de destilación para cada tiempo ................................................ 261
INDICE DE FIGURAS
Figura 5.1.1 Esquema del montaje del detector de centelleo líquido........................... 122
Figura 5.1.2 Ilustración del Proceso de la Colisión...................................................... 123
Figura 5.3.1 Partes de la balanza ............................................................................... 146
Figura 5.3.2 Cargas electrostáticas............................................................................. 153
Figura 5.4.1 Rendimiento de la Bomba con respecto a la altura ................................. 158
Figura 5.4.2 Bomba NK-2 ........................................................................................... 159
Figura 6.1.1 Relación Temperatura Vrs. Volumen de agua para Ultima Gold LLT. ..... 167
Figura 6.1.2 Rendimiento de Ultima Gold LLT con respecto al tiempo de conteo........ 168
Figura 7.1.1 Penetración de los diferentes tipos de radiación. .................................... 186
Figura 7.1.2 Señalización de zonas radiactivas........................................................... 192
Figura 7.2.1 Minimonitores para detección de radiactividad. ....................................... 200
Figura 8.1.1 Carta de Control de Temperatura............................................................ 213
Figura 8.1.2 Carta de Control de Humedad Relativa................................................... 213
Figura 8.2.1 Carta de Control de Fondos a 2S ............................................................ 217
Figura 8.2.2 Carta de Control de Fondos .................................................................... 217
Figura 8.2.3 Carta de Control de Eficiencias a 2S....................................................... 218
Figura 8.2.4 Carta de Control de Eficiencias ............................................................... 218
Figura 8.2.5 Carta de Control de Figuras de Mérito a 2S ............................................ 219
Figura 8.2.6 Carta de Control de Figuras de Mérito .................................................... 219
Figura 8.2.7 Carta de Control de Chi-Cuadrado.......................................................... 220
Figura 8.5.1 Curva de Probabilidad Normal ................................................................ 231
Figura 8.5.2 Histograma de radiación de fondo con agua alpina como blanco............ 232
Figura 8.5.3 Histograma de radiación de fondo........................................................... 233
Figura 8.5.4 Distribución de datos para radiación de fondo......................................... 234
Figura C.1 Balanza Analítica .................................................................................... 262
Figura C.2 Bomba para recirculación de Refrigerante .............................................. 262
Figura C.3 Regulador con reóstato variable y agitador magnético ............................ 263
Figura C.4 Equipo de Destilación.............................................................................. 263
Figura C.5 Medidor de Temperatura y Humedad...................................................... 264
Figura C.6 Contador de Centelleo Líquido................................................................ 264
Figura D.1 Espectro de medición de niveles de fondo .............................................. 265
Figura D.2 Espectro de medición de Estándar.......................................................... 265
INTRODUCCION
La validación de métodos químicos en la mayoría de los casos está muy atada al

desarrollo de los mismos, y a menudo es complicado establecer donde termina el
desarrollo del método y donde inicia la validación del mismo. La mayoría de los
parámetros del método que están vinculados a la validación, normalmente son evaluados
como parte su desarrollo.
Para iniciar el proceso de validación de un método, antes es necesario que el
analista sepa responder cada una de las siguientes interrogantes, las cuales le ayudarán
en todo el proceso de validación:
1. Porqué es necesario validar.
2. Cuando y como se debe validar.
3. Quién debe validar los métodos.
4. Cuál es el grado de validación requerido.
5. Cuales son los requisitos analíticos necesarios.
6. Cual es el proceso de desarrollo.
7. Cuales son las normas básicas que deben cumplirse para la validación.
8. Cuales son las consideraciones que se deben tomar en cuenta para la validación.
Cuando se realiza una validación, es necesario evaluar una serie de características,

que confirmarán el buen desempeño del método para las condiciones locales de trabajo.
Las características que deben ser evaluadas se determinan de acuerdo a las necesidades
del laboratorio, al tipo de método y al tipo de análisis químico requerido para la muestra.
Cuando sea necesaria la validación de un método químico en un determinado
laboratorio, este debe incluir las formas de la estimación de la incertidumbre, ya que esta
juega un papel muy valioso en cualquier tipo de análisis y además deben tomarse los
factores determinantes de la desviación de los datos, ya que esta, se vincula muy de
cerca a la incertidumbre. Esta estimación debe tomar en cuenta muchos factores, de entre
los cuales los más importantes son la homogeneidad y la estabilidad de la muestra.
En el análisis químico, uno de los factores que debe tomarse muy en cuenta es la
cadena de trazabilidad correspondiente a los estándares de medición, impulsada por
patrones nacionales e internacionales principales, idealmente por el Sistema Internacional
de unidades de medición por su estabilidad. La trazabilidad está íntimamente ligada a la
i
incertidumbre y proporciona los medios para colocar las mediciones relacionadas sobre
una escala de medición consistente; aquí, la incertidumbre caracteriza la fuerza de unión
de la cadena.
La radiación natural y artificial, pueden actuar sobre nuestro organismo desde
fuera o internamente, este último caso ocurre cuando se incorporan elementos radiactivos
por la respiración o cuando se ingieren alimentos o bebidas contaminadas. La radiación
artificial surge como producto del incremento constante y continuo de las aplicaciones
nucleares, contribuyendo a incrementar las fuentes de radiación ionizante, aumentando
con ello el riesgo de sobrepasar los limites de las tasas de dosis radiológica, establecidas
y aceptadas internacionalmente para la población, por la liberación de radionúclidos al
ambiente, lo cual contamina tierra, agua (H2O) y aire.
El Hidrógeno existente en la naturaleza corresponde a tres formas isotópicas, una
de ellas es la forma radiactiva, llamada tritio (3H ó T), correspondiente a un porcentaje de
abundancia promedio en la naturaleza de (7E-16) % con respecto al hidrógeno total.
Para la determinación del contenido de Tritio en muestras de agua hay varios
métodos que facilitan su medición, y éstas son aplicables de acuerdo a la concentración
radiactiva presente en la muestra y a la precisión que se requiera en la medición, los
procedimientos más aplicables son:
1. Medir la actividad del 3H por medio del Contador Proporcional de Gas, CPG
(Proportional Gas Counting, PGC).
2. Medir mediante Espectrometría de Masa la cantidad de 3He que se forma después
de almacenar la muestra en el laboratorio durante un tiempo específico.
3. Medir la actividad del 3H por medio de Espectrometría de Centelleo Líquido, ECL
(Liquid Scintillation Spectrometry, LSS).
Para los propósitos de medición del contenido de Tritio en niveles que estén por
arriba de 1 UT, la técnica más aplicable es la de Centelleo Líquido (que es la utilizada
para la evaluación del método en este documento), aunque en algunos casos sea
necesario incrementar artificialmente su contenido original. Para esto hay varias formas
que dependen del contenido de Tritio y de la precisión requerida en la medición, de las
cuales, las dos más utilizadas son:
1. El Enriquecimiento Electrolítico.
2. La Difusión Térmica del Hidrógeno.
ii
Este documento consiste principalmente en la evaluación de la metodología
desarrollada por el Organismo Internacional de Energía Atómica (OIEA), cuyo objetivo es
determinar mediante un proceso radioquímico la concentración de Actividad de Tritio en
muestras de agua; en las instalaciones de los laboratorios del Centro de Investigación y
Aplicaciones Nucleares (CIAN) de la Facultad de Ingeniería y Arquitectura (FIA) de la
Universidad de El Salvador (UES). Para el que se han evaluado las condiciones
ambientales de operación más relevantes, como lo son: la Temperatura y Humedad
Relativa; obteniendo resultados muy positivos presentados en la Tabla 1, de acuerdo a las
condiciones establecidas por el fabricante del Contador de Centelleo. Así mismo, se han
evaluado las principales características de rendimiento, como lo son: Radiación de Fondo,
Eficiencia, Figura de Mérito y la prueba Chi-cuadrado, de las cuales se han obtenido
resultados excelentes, los cuales son presentados en la Tabla 2. Por último, se han
evaluado las más importantes características de funcionamiento del método, las cuales
son: Radiación de Fondo, Eficiencia, Factor de Recuperación y Límite de Detección,
cuyos resultados son presentados en la Tabla 3; las que indican que el método funciona
correctamente y puede ser utilizado en las instalaciones de los laboratorios del CIAN.
Tabla 1. Condiciones de ambientales de operación
Característica Valor encontrado en Limites aceptables

Evaluada las instalaciones
Temperatura (ºC) 19-22 15-35
Humedad Relativa (%) 35-68 30-85
iii
Tabla 2. Rendimiento del Contador
Característica Evaluada Valor encontrado en las Limites aceptables

instalaciones
Fondo (cpm) 14.5-16.6 10-30
Eficiencia (%) 64.3-65.5 60
Figura de Mérito 252-292 180
Tiempo de conteo 500 min. (Error Relativo de 3.5%)
Tabla 3. Características de desempeño del método
Característica Evaluada Valor encontrado en las

instalaciones
Radiación de Fondo (cpm) 7.19 +/- 0.26
Eficiencia (%) 29.7 +/- 1.2
Factor de Recuperación (%) 91.3 +/- 11.0
Concentración Mínima Detectable (UT) 29.1 +/- 3.4
De acuerdo a estos resultados, el método es aplicable para el monitoreo ambiental

en el cumplimiento de las normas internacionales, donde la concentración límite de Tritio
en aguas bebibles establecida por la EPA (Agencia de Protección Ambiental), es de 740
Bq/L, que comparándola con la CMD encontrada para el método (3.43 Bq/L), existe una
diferencia bien marcada; por lo cual, el método evaluado puede aplicarse de manera
confiable, en un plan de monitoreo continuo de las aguas ambientales.
iv
1
INTRODUCCIÓN A LA VALIDACIÓN DE
MÉTODOS QUÍMICOS
1
INTRODUCCIÓN A LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS QUÍMICOS
1.1 DEFINICIÓN Y GENERALIDADES
Validación es la confirmación por verificación, y la presentación de la evidencia

objetiva de que los requisitos particulares para un uso específico previsto son cumplidos.
(CONACYT, 1999).
Validar un método de análisis consiste en verificar y documentar su validez, esto es,
su adecuación a determinados requisitos previamente establecidos. (Rovira, s.f.).
Según EURACHEM (1998) la validación puede ser interpretada como el proceso de
definir un requisito analítico, y de confirmar que el método bajo consideración tiene
capacidades de funcionamiento consistentes con la aplicación requerida. Implícito en
esto, está que es necesario evaluar las capacidades de funcionamiento del método. El
juicio de conveniencia del método es importante; en el pasado la validación del método
tendió a concentrarse en el proceso de evaluar los parámetros de funcionamiento.
Está implícito en el proceso de validación del método que los estudios para
determinar el rendimiento de los parámetros del método, son realizados en utilización del
equipo que está dentro de la especificación, calibrado adecuadamente y trabajando
correctamente. De la misma manera el operador que realiza los estudios debe ser
competente en el campo de trabajo en estudio y tener el conocimiento suficiente
relacionado al trabajo para ser capaz de tomar decisiones apropiadas de las
observaciones hechas del progreso del estudio.
La validación del método se considera generalmente estar atada muy de cerca al
desarrollo del método, a menudo no es posible determinar exactamente dónde termina el
desarrollo del método y donde comienza la validación. Muchos de los parámetros de
funcionamiento del método que se asocian a la validación del método de hecho por lo
general son evaluados, como parte del desarrollo del método.
Según OGA (2005), la validación de un método analítico es el proceso de establecer
los parámetros y las limitaciones de desempeño del método, así como de identificar los
factores que pueden influir en el cambio de dichos parámetros y limitaciones; permite
demostrar que el método es adecuado para el propósito, esto es, para resolver un
problema analítico particular.
En el diseño y desarrollo de métodos, la etapa de validación consiste en el proceso
de examinar el método para determinar su conformidad con el uso previsto.
La validación normalmente se lleva a cabo sobre la versión final del método
desarrollado, bajo condiciones de operación definidas; también puede ser necesario
realizarla en etapas previas del proceso de desarrollo. Si existen diferentes usos previstos
2
para el método, se deben llevar a cabo múltiples validaciones. Los parámetros de

desempeño que se recomienda incluir en la validación y verificación de diferentes
métodos de ensayo pueden ser, según el caso: exactitud, exactitud relativa, desviación,
desviación positiva, desviación negativa, efecto matricial, repetibilidad, precisión
intermedia, reproducibilidad, especificidad, límite de detección, límite de cuantificación,
linealidad, rango, sensibilidad, robustez y fortaleza entre otras.
La validación de los métodos de ensayo debe reflejar las condiciones reales de la
aplicación de los mismos. Esto puede conseguirse utilizando, por ejemplo, muestras
comerciales o preparadas en el laboratorio con un nivel conocido de la especie o analito
de interés. El analista debe estar consciente que una muestra preparada en la matriz de
interés sólo imita parcialmente a una muestra real; no obstante, en muchos casos, ésta es
la mejor y la única opción disponible. La extensión de la validación depende del propósito
del ensayo y de las propiedades del método analítico en cuestión.
Cuando aplique, la validación de un método debe incluir la estimación de la
incertidumbre, y además abarcar factores que determinan la desviación (error sistemático)
y la recuperación imperfecta (medición de la recuperación del analito con el que se haya
enriquecido la muestra, medición de blancos, estudio de interferencias y efectos de
matriz). Esta estimación también debe considerar aspectos como la homogeneidad y
estabilidad de la muestra.
Los laboratorios deben conservar los datos sobre la validación de los sistemas de
ensayo comerciales que utilicen, de preferencia remitidos por los fabricantes. Al
presentarse el caso de no contar con los datos del fabricante, éstos pueden obtenerse de
ejercicios de intercomparación. Si no se dispone de datos sobre validación o si éstos no
son plenamente aplicables, el laboratorio deberá desarrollar un procedimiento para
calcular y evaluar los parámetros de desempeño que considere necesarios para asegurar
la confiabilidad del sistema de ensayo comercial.
El laboratorio que desarrolla o modifica un método analítico, o la entidad que lo
publica, es responsable de su validación, para con ello demostrar que se adecua al
propósito para el cual fue diseñado. El laboratorio que implementa un método analítico es
responsable de verificar su desempeño contra las especificaciones de la validación, tanto
antes de ponerlo en uso como durante su utilización rutinaria, para demostrar que lo
domina y usa correctamente.
La FAO (2005) fundamenta que validación es el proceso para establecer las
características de funcionamiento y limitaciones del método y la identificación de
3
influencias que pueden cambiar estas características y hasta que punto; cuando el
método se desarrolla sin un problema particular previsto. ¿Que sustancias se pueden
determinar en qué matrices en la presencia de qué interferencias? Dentro de esas
condiciones ¿qué niveles de precisión y exactitud se pueden lograr?
También es el proceso para verificar que un método es apto para ese propósito, es
decir, para usarlo para resolver un problema analítico particular; cuando el método se
desarrolla con un fin específico.
En química analítica el otro uso del término de validación es en el contexto de
instrumental. La validación de instrumental se usa para describir el proceso de establecer
que un instrumento en un momento dado se pueda operar de acuerdo con la
especificación de diseño. Este proceso se podría lograr, por ejemplo, por medio de la
calibración o control del funcionamiento.
Según CONACYT (2003), Validación es la obtención de pruebas que demuestren
que un método de análisis es lo suficientemente fiable para asegurar que el resultado
obtenido corresponde a la realidad. Todas estas pruebas deben estar, además,
convenientemente documentadas.
Se ha hablado mucho de este “nuevo” concepto, pero realmente lo único nuevo es
el nombre, el cual es una traducción directa del inglés “validate”. Sin embargo, la
problemática siempre ha estado presente en el analista que debía asegurar que el
resultado obtenido con su análisis era el correcto y no un simple número producido por un
instrumento.
Lo que realmente es nuevo de la validación de los métodos analíticos, es que
ahora es un requisito imprescindible para la inclusión de un nuevo método en cualquier
Laboratorio de análisis.
1.2 TIPOS DE VALIDACIÓN
Cualquier método analítico debe ser validado, aunque se acepta de forma general
que un método que aparece descrito en algún libro oficial, Formulario Nacional, etc.,
solamente necesita una comprobación de que el método sigue siendo válido en las
condiciones particulares de nuestro laboratorio.
Dicha validación puede realizarse siguiendo dos tipos de procedimientos distintos:
4
1.2.1 Validación Retrospectiva
Sólo puede ser utilizada en métodos analíticos que hayan sido usados durante
bastante tiempo en el análisis de muchos lotes de un producto, ya que se basa en la
historia de los análisis realizados.
Se asume que, si no ha habido problemas en fabricación, y se ha producido con
procesos validados, la media de todos los lotes producidos, debe definir el valor teórico de
la característica que se está determinando y coincidirá con la media de esta característica
que se ha obtenido siguiendo el método analítico que queremos validar. Es decir, se
consideran los lotes de fabricación como blancos a los que se ha añadido una cantidad
controlada de analito y, si los resultados analíticos obtenidos en ellos están dentro de
unos límites estadísticos permitidos, podemos afirmar que el método analítico está
validado, ya que estamos relacionando el resultado analítico con el resultado verdadero.
Para un ejemplo particular supongamos un producto en el que queremos
determinar el contenido de analito que se encuentra en una concentración de 100
mg/comprimido. El método analítico puede considerarse validado restrospectivamente, si
el estudio estadístico de los resultados obtenidos, siguiendo el citado método, proporciona
un valor próximo a 100 mg/comprimido, dentro de un rango estadísticamente válido y si se
ha podido comprobar que el proceso de fabricación proporciona un producto homogéneo.
Normalmente cuando se intenta validar un método analítico retrospectivamente, se
suelen representar los resultados obtenidos con ese método en función del tiempo.
Es muy importante en este tipo de representación mantener el orden de
antigüedad de los lotes, ya que una clara falta de oscilación alrededor de la media podría
indicar un error sistemático en el método o una tendencia en el mismo que quedaría
enmascarada si los lotes representados no están ubicados en forma cronológica.
Sin embargo, la validación retrospectiva no puede utilizarse en muchas ocasiones,
debido a cambios en el proceso de fabricación, a que el número de resultados de que se
dispone no es estadísticamente significativo o a que se obtienen resultados muy
dispersos.
5
1.2.2 Validación Prospectiva
La validación prospectiva es el caso más frecuente de validación de métodos de

análisis y debe realizarse cada vez que se adopten métodos analíticos nuevos o se hagan
revisiones importantes a los ya existentes.
En la mayoría de los casos, la adopción de un nuevo método analítico, debe
incluir:
a-) Justificación
En esta sección se debe incluir la necesidad del método, describir su capacidad y el
porqué se le prefiere a otro tipo de determinaciones. Si el método no es nuevo, sino que
ha sufrido una revisión, se deben justificar las limitaciones del método antiguo y las
ventajas del nuevo.
b-) Método Analítico Propuesto

Esta sección incluirá una descripción completa y paso a paso del método analítico,
con el detalle suficiente para que pueda ser reproducido por cualquier persona con una
preparación mínima.
El detalle del método debe incluir todos los parámetros de la operación que puedan
influir en él, y las instrucciones específicas de operación, como por ejemplo, preparación
de reactivos, de soluciones problemas y estándares, ensayos de idoneidad del sistema,
precauciones, tiempos máximos de análisis, etc., y aquellas medidas de seguridad, tanto
para el producto como para el analista, que sean necesarias, como uso de guantes,
mascarillas, procedimiento de eliminación de residuos, etc. Deben incluirse también las
fórmulas que se empleen para la obtención de resultados. (CONACYT, 2003).
1.3 ¿PORQUE ES NECESARIO VALIDAR UN MÉTODO?
Infinidad de mediciones analíticas son realizadas todos los días en miles de

laboratorios alrededor del mundo. Son innumerables las razones para la realización de
estas mediciones, por ejemplo: como un camino de valorar bienes para propósitos
comerciales; apoyo a la atención de la salud; comprobación de la calidad del agua
potable; análisis de la composición elemental de una aleación para confirmar su
6
conveniencia para empleo en construcción de aviones; análisis forense de fluidos del

cuerpo en investigaciones criminales, análisis de productos manufacturados, análisis
medioambientales, análisis clínicos, forenses, químico y físicos, etc. Prácticamente cada
aspecto de la sociedad es apoyado de algún modo por la medida analítica. En todos ellos
se requiere una confianza en los resultados obtenidos. La validación de las metodologías
analíticas, junto con otras actividades englobadas en la gran área del aseguramiento de la
calidad, permiten conseguir calidad, otorgando la confianza necesaria a la vez que
confieren un grado elevado de comparabilidad entre los resultados de los análisis
químicos. (Ver Figura 1.3.1). (Rovira, s.f.).
El costo de realizar estas medidas es alto y los costos adicionales se presentan de
las decisiones tomadas en base de los resultados. Por ejemplo, las pruebas que
demuestran que los alimentos no son propios para el consumo pueden dar lugar a
demandas de remuneración; las pruebas que confirmaban la presencia de drogas
prohibidas podían dar lugar a multas, al encarcelamiento o aún, en algunos países, a
ejecución. Es claramente importante determinar el resultado correcto y ser capaz de
mostrar que lo es.
Figura 1.3.1 Pilares fundamentales para conseguir la calidad en los

análisis químicos
Validación de Ejercicios de
metodologías intercomparación
Calidad
Comparabilidad
Confianza
Control de Acreditación
calidad interno de laboratorios
Fuente: Rovira (s.f.)
7
El laboratorio y su personal tienen una responsabilidad clara de justificar la

confianza del cliente proporcionando la respuesta correcta a la parte analítica del
problema, en otras palabras el resultado demuestra “la finalidad del propósito”. Implícito
en esto es que las pruebas realizadas son apropiadas para la parte analítica del
problema, las necesidades del cliente son satisfechas, y el informe final presenta los datos
analíticos de una manera tal que el cliente pueda entenderlo fácilmente y sacar
conclusiones apropiadas. La validación del método permite a químicos demostrar que un
método es “apto para el propósito”.
Para que un resultado analítico sea apto para su propósito intencionado debe ser
suficientemente fiable para que cualquier decisión basada en ello pueda ser tomada con
confianza. Así el funcionamiento de un método debe ser validado y la estimación de la
incertidumbre en el resultado, para un nivel de confianza dado. La incertidumbre debería
ser evaluada de una manera extensamente reconocida, internamente consistente y fácil
de interpretar. La mayor parte de la información requerida para evaluar la incertidumbre
puede ser obtenida durante la validación del método.
Independientemente de que tan bueno sea un método y como hábilmente se use,
un problema analítico puede ser solucionado por medio del análisis de muestras sólo si
aquellas muestras son apropiadas al problema. La toma de muestras apropiadas es un
trabajo experto, requiriendo un entendimiento del problema y su química relacionada. En
un laboratorio, como parte del cuidado al cliente, en cualquier parte donde sea posible,
debería ofrecer consejo al cliente sobre la toma de muestras. Claramente habrá ocasión
cuando el laboratorio no pueda tomar o influir en la toma de las muestras. En estas
ocasiones estos resultados de análisis tendrán que ser reportados sobre la base de la
recepción de muestras, y el informe debería aclarar esta distinción. (EURACHEM, 1998).
8
1.4 ¿CUANDO SE DEBEN VALIDAR LOS MÉTODOS?
Muchos analistas consideran que un método estándar o de referencia, que ha sido

validado por algún organismo que posee una cierta reputación, puede aplicarse
directamente en un nuevo laboratorio. La validación del método ya realizada se considera,
erróneamente, una garantía suficiente para obtener resultados de calidad. (Rovira, s.f.).
Cuando un método analítico a sido desarrollado por un organismo de altamente
conocido a nivel mundial, ciertamente que se puede confiar en que el método funciona
correctamente en el lugar donde fue desarrollado, pero es claro que las condiciones bajo
las cuales fue desarrollado el método no son las mismas que las condiciones en las
cuales se requiere implementar o utilizar este mismo método para cualquier otro
laboratorio. Sin duda alguna, con el método desarrollado por el organismo podemos
alcanzar buenos resultados, pero hace falta demostrar que funcionan en nuestro ámbito
de trabajo. Por tanto, un método siempre debe validarse cuando es necesario verificar
que sus parámetros de calidad se adecuan al problema analítico particular que debemos
resolver en nuestro laboratorio.
Un método debería ser validado cuando es necesario verificar que sus parámetros
de funcionamiento son adecuados para el empleo en un problema analítico particular. Por
ejemplo:
• Desarrollo de un nuevo métodos para un problema particular;
• Establecimiento de un método revisado para incorporar mejoras o ampliado a un
problema nuevo;
• Cuando control de calidad indica que un método establecido se cambia con el tiempo;
• Método usado establecido en un laboratorio diferente, o con analistas diferentes o
instrumentación diferente;
• Demostrar la equivalencia entre dos métodos, por ejemplo un método nuevo y un
estándar.
El grado de la validación o de revalidación requerido dependerá de la naturaleza de

los cambios realizados en reaplicar un método a diversos laboratorios, a la
instrumentación, a los operadores, y a las circunstancias en las cuales el método va a ser
utilizado. Un cierto grado de la validación es siempre apropiado incluso al usar métodos
estándares o publicados al parecer bien caracterizados (más explicado en sección 1.7).
(EURACHEM, 1998).
9
1.5 ¿COMO SE DEBEN VALIDAR LOS MÉTODOS?
Si un método ha sido desarrollado teniendo un amplio empleo, quizás como un

procedimiento publicado estándar, entonces el estudio de colaboración que implica un
grupo de laboratorios es probablemente la manera preferida de realizar la validación. Sin
embargo, esto no es siempre una opción conveniente para laboratorios industriales. El
uso para el cual el método es requerido puede ser esotérico al grado que ningún otro
laboratorio estaría interesado en colaborar y quienes podrían estar interesados es la
competencia. Donde esto es inoportuno o imposible para un laboratorio para establecer el
estudio de colaboración, se plantean un número de preguntas:
• ¿Pueden los laboratorios validar sus propios métodos, y si es así cómo?
• ¿Los métodos validados de esta manera serán reconocidos por otros laboratorios?
• ¿Qué clase de reconocimiento se puede esperar para los métodos internos usados en
un ambiente regulado?
El trabajo en el aislamiento reduce de manera inevitable la cantidad de datos de la

validación que se puedan recopilar para un método. Restringe principalmente el tipo de
información sobre comparabilidad interlaboratorio. Esta información no se requiere
siempre, así que esto puede no ser un problema. Si fuera necesario, puede ser factible
conseguir una cierta idea de la comparabilidad de los resultados de medida de cualquier
método dado con otros obtenidos en otro sitio midiendo los materiales de referencia
certificados o comparando el método contra uno para el cual se ha realizado la validación.
Si realmente los métodos validados en un laboratorio solo serán aceptables para
propósitos reguladores depende de cualquier pauta que cubre el área de medida
afectada. Normalmente debería ser posible conseguir una declaración clara de la política
del cuerpo regulador apropiado. Se esperará que un laboratorio que usa un método
analítico que no es referido a un método totalmente validado autoritario de demostrar que
el método ha sido documentado y probado al estándar actualmente esperado de un
método de referencia autoritario.
Esto debería demostrar que lo siguiente ha sido establecido:
a-) Las tolerancias requeridas de todas las medidas emprendidas dentro del método (el
volumen, temperaturas, masas, etc.);
b-) Las formas de determinación de la medición incluyendo sus especificaciones;
c-) El efecto de interferencias se ha investigado y se ha cuantificado extensamente;
10
d-) Las fuentes significativas de error han sido identificadas y al igual que su medio
adecuado de control.
La asociación oficial de químicos analíticos (AOAC internacional), ha sido siempre

un fuerte partidario del ensayo entre laboratorios como la manera preferida de validar
métodos. Ha introducido más recientemente su método verificado “por programa”, para la
validación de métodos por los laboratorios que trabajan con solamente un o dos.
(EURACHEM, 1998).
Es esencial que los estudios de validación sean representativos. Esto significa
que, en la medida de lo posible, deberían realizarse los estudios necesarios para obtener
una estimación realista del número y la gama de efectos que se producen durante el uso
normal del método, al tiempo que deben analizar la gama de concentraciones y de tipos
de muestra que abarca el método. Por ejemplo, si un factor (la temperatura ambiente)
varía sustancialmente durante la realización de un experimento de fidelidad, los efectos
de dicho factor aparecen directamente en la varianza observada y no precisan de un
estudio adicional, a menos que se desee mejorar todavía más el método.
En el contexto de la validación de métodos, una “variación representativa” significa
que el factor debe tomar una distribución de valores adecuada para el rango previsto del
parámetro en cuestión. Para los parámetros continuos medibles, puede ser un rango
permitido, una incertidumbre determinada o un rango esperado; para los factores
discontinuos, o factores con efectos impredecibles, como la matriz de la muestra, un
rango representativo corresponde a los diferentes tipos o “niveles de factor” permitidos o
hallados durante el uso normal del método. Idealmente, la representatividad abarca el
rango de valores y también su distribución. Por desgracia, a menudo no es
económicamente viable disponer de la variación completa de muchos factores a muchos
niveles. No obstante, para propósitos prácticos los ensayos basados en extremos del
rango esperado o en cambios mayores de lo previsto son un mínimo aceptable.
Al seleccionar los factores de la variación, es importante asegurarse de "ejercer" al
máximo los mayores efectos. Por ejemplo, si la variación diaria (quizás a causa de los
efectos del recalibrado) es sustancial comparada con la repetibilidad, dos determinaciones
de cada una durante cinco días ofrecerá una mejor estimación de la fidelidad intermedia
que cinco determinaciones de cada una durante dos días. Diez determinaciones
individuales en días separados serían todavía mejor, aunque no ofrecería información
adicional sobre la repetibilidad día a día.
11
Al planificar comprobaciones de significación, los estudios deben tener suficiente

potencia para detectar estos efectos antes de que lleguen a revestir una fuerte
importancia práctica (comparable al mayor componente de incertidumbre). (OIV, 2005).
Además, cabe tener en cuenta las siguientes consideraciones:
• Si se sabe o se sospecha que los factores interactúan, es importante tener en cuenta
el efecto de interacción. Esto puede lograrse realizando una selección aleatoria desde
diferentes niveles de interacción de los parámetros o mediante un meticuloso diseño
sistemático para obtener información de los efectos de ‘interacción’ o de la covarianza.
• Al realizar estudios del sesgo global, es importante que los materiales y los valores de
referencia sean relevantes para los materiales objeto de los ensayos rutinarios.
1.6 ¿QUIÉN DEBE VALIDAR LOS MÉTODOS?
El laboratorio que usa un método es responsable de asegurarse de que está

validado adecuadamente, y en casos necesarios de realizar trabajos adicionales para
suplir datos existentes. Por ejemplo, cuando un método ha sido validado por los
estándares aprobados la organización, tal como AOAC internacional, el usuario necesitará
normalmente establecer solamente los datos del funcionamiento para su propio uso del
método. (EURACHEM, 1998).
La validación constituye la última etapa del desarrollo de un nuevo método
analítico. Si el método se presenta como novedad científica, es decir, cuando
normalmente se publica en una revista de resultados de investigación, no suele ir
acompañado de esta última etapa o ésta es muy sucinta. Si el método se desarrolla por
una empresa para su uso interno, debe llevarse a cabo un cierto grado de validación para
asegurar que funciona correctamente. Sin embargo, cuando alguna organización (como
por ejemplo AOAC, ASTM, etc.) desea adoptar un método como método de referencia, y
va a ser utilizado por un cierto número de laboratorios, se requiere un proceso de
validación completo. La organización debe asegurar la calidad del método llevando a cabo
una serie de ensayos dentro del laboratorio y entre distintos laboratorios.
Sin embargo, desde la visión del usuario, es importante remarcar que el laboratorio
que desea utilizar para el análisis de rutina un método analítico previamente validado es el
responsable de asegurar que dicho método es válido para el uso propuesto en las
12
condiciones de análisis rutinario. Por tanto, se precisa una cierta verificación del método
en las condiciones en las que va a utilizarse. Ahora bien, como se describe a
continuación, el grado de verificación puede ser muy distinto según la situación en la que
nos encontremos. (Rovira, s.f.).
1.7 CUAL ES EL GRADO DE VALIDACIÓN REQUERIDO PARA LOS

MÉTODOS
El laboratorio que va a utilizar el método tiene que decidir qué parámetros de

funcionamiento del método necesitan ser caracterizados, para validarlo. La
caracterización del funcionamiento del método es un proceso caro e inevitablemente esto
puede ser obligado a consideraciones de costo y tiempo. Comenzando con una
especificación analítica cuidadosamente considerada, la cual proporciona una buena base
sobre la cual planear el proceso de validación, pero esto en la práctica no es siempre
posible. El laboratorio debería hacer lo mejor que pueda dentro de las coacciones
impuestas, teniendo en cuenta las exigencias del cliente, existiendo la experiencia del
método, y la necesidad de la compatibilidad con otros métodos similares ya en el empleo
dentro del laboratorio o usado por otros laboratorios. Algunos de los parámetros podrían
ser determinados aproximadamente durante la etapa de desarrollo del método. A menudo
un juego particular de experimentos cederá la información sobre varios parámetros, así
que con el planeamiento cuidadoso el esfuerzo requerido para conseguir la información
necesaria puede ser reducido al mínimo.
Las implicaciones de las coacciones discutidas arriba, son en particular críticas
donde el método no va a ser usado sobre una base rutinaria. La validación de los
métodos que van a ser usados sobre una base rutinaria es un proceso relativamente
directo. ¿Sin embargo, los mismos procesos de validación deberían ser aplicados al
análisis ad hoc?. Claramente los mismos principios se aplican en cuanto a pruebas
rutinarias. Es necesario ser capaz de tener un nivel adecuado de confianza en los
resultados producidos, si no, el trabajo no merece realizarse. Lograr el equilibrio entre el
tiempo y coacciones de gastos y la necesidad de validar el método es difícil y en algunas
circunstancias puede ser más apropiado para subcontratar el trabajo a otro laboratorio
donde esto puede ser realizado sobre una base rutinaria.
13
Las exigencias de validación pueden ser especificadas en directrices dentro de un

sector particular de medida relevante al método y recomiendan que donde estén
disponibles sean seguidos. Por ejemplo la validación de un método para el análisis de
alimentos debería ser compatible con la estrategia de validación usada por AOAC
Internacional. Esto asegurará que la terminología particular de la validación junto con la
estadística usada es interpretada en una manera constante dentro del sector relevante. El
reconocimiento oficial de un método puede requerir la caracterización usando un estudio
de colaboración. Exigencias reguladoras pueden requerir que sea seguido un método
particular al pie de la letra aunque el laboratorio lo considere poco sólido o inexacto. La
validación adicional será necesaria para confirmar el rendimiento satisfactorio del analista.
(EURACHEM, 1998).
La validación interna de un método es el proceso de verificar, dentro de un
laboratorio, que un método previamente validado en otro ámbito conduce a resultados
fiables. Existen distintas posibilidades.
Los ensayos de adecuación se aplican cuando se quiere transferir un método
desde un laboratorio (donde se ha validado de forma completa) a otro que quiere
adoptarlo como método de rutina. En estos ensayos, relativamente sencillos, dado que
previamente se ha validado la ausencia de sesgo, en el método de análisis, debe
verificarse solamente que no se introduce sesgo por parte del laboratorio. Así mismo el
laboratorio debe estimar sus propios valores de precisión (repetibilidad, precisión
intermedia) para poder asignar la incertidumbre correspondiente al resultado. En caso de
realizar determinaciones que se encuentran cerca del límite de detección, dado que éste
depende, entre otros factores, también de la instrumentación y de la pericia del analista, el
laboratorio debe verificar también este parámetro.
Otros ensayos de verificación se realizan rutinariamente para comprobar que todo
el procedimiento analítico funciona correctamente antes de empezar una nueva serie de
determinaciones. Comprobar la sensibilidad del método (pendiente de la recta de
calibrado), o la selectividad en algunos ensayos cromatográficos, son algunos ejemplos
de estos ensayos que normalmente se especifican en los procedimientos normalizados de
trabajo. (Rovira, s.f.).
14
1.8 REQUISITOS ANALÍTICOS PARA LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS
En realidad un requisito analítico en muy raras ocasiones se acepta de antemano

de una manera tan formal. Más a menudo, si en la mayoría de las ocasiones se realiza
de manera retrospectiva. Los clientes definen generalmente sus requisitos en términos
del costo ó el tiempo y rara vez saben que los métodos necesitan realizarse, aunque los
requisitos de funcionamiento para los métodos pueden ser especificados donde los
métodos apoyan un requisito o una conformidad regulada con una especificación. Será
dejada generalmente a la discreción del analista para decidir qué se requiere del método y
esto significará muy a menudo fijar un requisito analítico en línea con la capacidad
conocida del método. Los apremios financieros pueden dictar el desarrollo de un método
que satisfaga un requisito analítico particular que no sea económicamente factible, en el
caso de que la decisión se debe tomar si hay que suavizar el requisito a un nivel más
realizable o repensar la justificación para el análisis.
Un proceso iterativo de desarrollo y evaluación continúa, hasta que el método sea
considerado capaz de llenar las expectativas, hace que el desarrollo adicional sea
innecesario y permite que el trabajo analítico pueda continuar. Este proceso de evaluación
de criterios de rendimiento y confirmación que el método es conveniente, es ilustrado en
la Figura 1.8.1. La Tabla 1.8.1, presenta el tipo de preguntas que podrían ser planteadas
en la formalización de una exigencia analítica y los parámetros de rendimiento
correspondientes al método que necesita ser caracterizado. (EURACHEM, 1998).
Delante de un problema analítico determinado, idealmente el laboratorio debería
acordar con el usuario de los resultados los requisitos analíticos que se precisan. Por
ejemplo, si el laboratorio de una empresa realiza el control de un parámetro de un
producto, dado que la compañía está bajo las normas de la serie ISO 9000, existe un nivel
mínimo permitido. El responsable de la expedición debe exigir que el resultado sea
trazable y con un nivel de precisión suficientemente elevado para asegurar que el
parámetro cumple con la normativa. El responsable del laboratorio sabe, a su vez, que
deberá utilizar un método analítico que tenga un límite de cuantificación por debajo del
valor mínimo permitido. Así mismo, el responsable sabe la rapidez con la que debe dar el
análisis y el coste que representa. (Rovira, s.f.).
Los requisitos analíticos para un uso determinado, dan las características de
desempeño o criterios de calidad del método a utilizar para resolver el problema. Estos
criterios de calidad, pueden ser de tipo estadístico o de tipo operativo/económico (ver
Tabla 1.8.2).
15
Figura 1.8.1 Elección, Desarrollo y Evaluación de Métodos
Problema que
requiere análisis
químico: conjunto de
requerimientos Desarrolle
el método
Si
Si
¿Se evalúa el No No
Identifique un método método adecuado ¿Es factible ¿Requerimi
existente o desarrolle al propósito, como desarrollar ento
uno nuevo usado en el uno nuevo? controlado?
laboratorio?
No
Notas: Si
La validación del método consiste Incapaz de hacer
en una etapa de la evaluación, Realice trabajo el trabajo:
donde algunos parámetros analítico ¿subcontratar?
escogidos son evaluados bajo las
condiciones del método.
Sea cual sea la calidad de los
datos disponibles para el método,
la adecuación a la finalidad o al
propósito perseguido, será Replantee los
determinada por el funcionamiento requisitos analíticos
del método cuando se usa por el en función de los Fin
analista designado con el material resultados
disponible.
Fuente: EURACHEM (1998)

Tabla 1.8.1 Requisitos analíticos relacionados a características de desempeño
Características relacionadas al
Requerimientos analíticos de elementos
rendimiento
¿Qué clase de respuesta se requiere, Confirmación de la identidad, límite de
cualitativa o cuantitativa? selectividad/especificidad del límite de
detección de la cuantificación
¿El análisis es disperso o localizado? Nota a
¿Es presentado el analito en más de una Confirmación de la identidad
forma, está interesado en un analito extraible, Recuperación
libre o total?
¿Cuál es el analito de interés y los niveles de Confirmación del límite de la identidad,
probabilidad de que se encuentre presente (%, límite de detección, funcionamiento de la
µgg-1, ηgg-1, etc.)? cuantificación y rangos lineares
¿Qué tan exacta y precisa debe ser la Recuperación, Exactitud/Veracidad
respuesta? / ¿Qué grado de incertidumbre es Reproducibilidad y Repetibilidad de la
permitido y como debe ser expresado? precisión. Nota b
¿Cuál es la naturaleza química, biológica y Nota b
física de la matriz?
¿Cuáles son las interferencias probables del Selectividad / especificidad
analito?
¿Se requiere muestreo y submuestreo (esto Nota a
será hecho por el laboratorio)?
¿Qué pasa si hay restricciones en cuanto al Nota a
tamaño / disponibilidad de la muestra?
¿Las coacciones de recurso aplican y cómo - a Nota a
la gente, el tiempo, el dinero, el equipo,
reactivo e instalaciones de laboratorio?
¿Los resultados necesitan ser comparados Reproducibilidad de la precisión
con resultados de otros laboratorios? aspereza / robustez
¿Los resultados necesitan ser comparados Exactitud
con especificaciones externas? Reproducibilidad de la precisión
17
Notas:
a) No todos los elementos del requisito analítico se ligarán directamente a los requisitos
de la validación del método. Algunos de ellos dictarán más generalmente si las
técnicas particulares son aplicables. Por ejemplo, diversas técnicas serán aplicables
según la dispersión del analito a través de la muestra o aislado sobre la superficie.
b) Un elemento esencial del requisito analítico es que debe ser posible juzgar si o no un
método es conveniente para su propósito previsto y debe incluir así la incertidumbre
requerida expresada como una incertidumbre estándar o incertidumbre expandida.
Tabla 1.8.2 Parámetros de calidad de un método
Matemático-Estadístico Operatorio-Económico
Exactitud, Trazabilidad Inversión
Precisión, incertidumbre Mantenimiento
Representatividad Rapidez
Sensibilidad Facilidad de uso
Selectividad Simplicidad
Límites Gastos directos
Robustez Gastos indirectos
Fuente: Rovira (s.f.)
En la realidad, muchas veces no está bien definido quién es el usuario de los

resultados analíticos. El usuario puede ser un cliente externo, personal de la misma
empresa que requiere resultados, la administración que se guía por la legislación vigente,
una cierta normativa de cumplimiento voluntario o algún otro ente no definido. En otras
ocasiones, el usuario no está capacitado para definir los requisitos analíticos. Sabe que
quiere el resultado lo más rápidamente posible y a bajo coste pero difícilmente puede
definir un cierto nivel de precisión o trazabilidad. El responsable del laboratorio, en
numerosas ocasiones debe suplir al usuario en estas funciones a la vez que debe realizar
cierta labor pedagógica para asignar el valor que tienen sus resultados.
18
1.9 DESARROLLO DEL MÉTODO
El desarrollo del método puede tomar numerosas formas. En un extremo, puede

implicar adaptar un método existente, realizando cambios de menor importancia de modo
que sea conveniente para un nuevo uso. Por ejemplo, un método requerido para
determinar el tolueno en agua se pudo adaptar de un método establecido para el benceno
en agua. La matriz es igual, y los dos analitos tienen ampliamente características
similares. Es probable que los mismos principios del aislamiento, de la identificación, y de
la cuantificación que se aplican al benceno se puedan también aplicar al tolueno. Si, por
otra parte, un método se requiere para determinar el benceno en suelo, la adaptación del
benceno en el método del agua puede no ser la mejor opción. La adaptación de algunos
otros métodos de determinación de orgánicos en suelo puede ser un punto de partida
mejor.
En el otro extremo el químico analítico puede iniciar con unas ideas incompletas y
aplicar la experiencia de inventar un método conveniente. Esto puede implicar la
innovación significativa basada en la explotación novedosa de las propiedades conocidas
del analito o medida. Esto claramente implica mucho más trabajo, y al principio al menos
un grado de duda en cuanto a si el método final será exitoso. No es frecuente que el
desarrollo del método implique trabajar en un número de diversas ideas simultáneamente
y eventualmente se elige una. (EURACHEM, 1998).
1.10 NORMAS BASICAS PARA LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS
Según EURACHEM (1998), existen tres normas básicas que deben cumplirse
cuando se ha de validar un método en nuestro laboratorio:
1. Debe validarse el procedimiento completo. A menudo se tiene la tendencia a
considerar la etapa de medida instrumental como la más importante. En realidad,
debido al avance de la instrumentación analítica, esta etapa es la que suele introducir
menos error. Por el contrario las etapas previas, que requieren frecuentemente una
intervención humana más elevada, son susceptibles de incorporar mayor sesgo o
componentes de la incertidumbre mayores.
2. Debe validarse todo el intervalo de concentraciones. Todo analista experimentado
conoce, por ejemplo, que la precisión del método varía con la concentración del
19
analito. No es lo mismo analizar un componente que se encuentra a niveles de traza o

subtraza que a niveles de componente mayoritario o minoritario.
3. Debe validarse teniendo en cuenta la variedad de matrices. Parece evidente que un
laboratorio que domina la determinación de cloruros en agua de consumo puede
cometer errores al analizar aguas residuales. Este ejemplo sencillo ilustra sobre la
importancia de considerar durante la validación las distintas matrices que nos
encontraremos en las muestras de rutina.
1.11 CONSIDERACIONES EN LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS

ANALÍTICOS
La validación de un método para análisis químico cuantitativo debería incluir las

siguientes actividades y parámetros de desempeño:
1. La evaluación de la Selectividad y la Especificidad, para asegurar que el método
responde a la especie particular de interés y no a especies similares a ella. (Esto
también aplica al análisis químico cualitativo).
2. La evaluación por medio de un Material de Referencia Certificado (MRC), para
demostrar que el método no da lugar a desviaciones significativas en comparación con
resultados trazables obtenidos de manera independiente.
3. Evaluaciones de posibles efectos particulares, adicionales a los considerados en las
especificaciones del método, para justificar que no es necesario incluir otros efectos.
4. Estudios de precisión dentro de un intervalo de tiempo y un set de condiciones tan
amplios como sea razonablemente posible, para demostrar que no existen otros
efectos significativos no sospechados. (Esto también aplica al análisis químico
cualitativo).
5. Estudios adicionales sobre posibles fuentes específicas de desviación, incluyendo
estudios de enriquecimiento y recuperación, posibles interferencias y reactividad
cruzada, para demostrar que no existen efectos adicionales importantes. Nota: El
comportamiento del analito agregado puede no ser equivalente al del analito nativo;
por lo tanto, el resultado del estudio de enriquecimiento y recuperación puede dar una
indicación equivocada de lo que sería la recuperación del analito nativo.
20
6. La evaluación de la linealidad, para demostrar que el resultado coincide con el valor

calculado a partir de la relación entre respuesta y concentración dada por la curva de
calibración.
7. Frecuentemente se evalúan otros parámetros de desempeño, tales como los límites
de detección y cuantificación, para demostrar que el método es adecuado para el
propósito. (El límite de detección también aplica al análisis químico cualitativo).
8. Las comparaciones entre analistas y entre laboratorios, o con otros métodos, también
pueden demostrar posibles deficiencias en el método. Además, éstas pueden aportar
evidencia adicional de que los efectos considerados son suficientes para establecer
las especificaciones del método.
Es importante considerar que todos los Materiales de Referencia a utilizar durante

la validación, para la calibración, el control y las pruebas, deben ser trazables. Esto
asegura que los estudios de validación sean directamente relevantes para los resultados
obtenidos durante el uso rutinario del método.
A la vez, la validación juega un papel clave para poder establecer la trazabilidad de
los resultados y, por ello, no es un proceso optativo. Aún cuando se está adoptando un
método normalizado, que se sabe fue validado y ampliamente probado, es necesario que
en el laboratorio se empiece por verificar que éste funciona acorde a sus especificaciones.
Es debido a que los métodos analíticos implican procesos complejos, y que por ello son
susceptibles al error humano, que siempre es necesario verificar que el laboratorio puede
ejecutarlos correctamente.
La mejor manera de hacer esta verificación es usando un Material de Referencia
Certificado. Otra evidencia del funcionamiento correcto del método es la que se puede
obtener de los ensayos de aptitud y otros estudios realizados con ese objetivo.
Se debe reconocer que las evaluaciones a realizar para la validación de un método
analítico no pueden ser exhaustivas y que existe la posibilidad de que las limitaciones
prácticas sean considerables. (OGA, 2005).
21
2
CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO PARA
VALIDACIÓN DE MÉTODOS QUÍMICOS
22
CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO PARA VALIDACIÓN DE MÉTODOS QUÍMICOS
2.1 TIPOS DE MÉTODOS QUÍMICOS
2.1.1 Métodos Normalizados
Las normas de calidad y regulaciones frecuentemente requieren el uso de

métodos normalizados. A la vez, el uso de métodos normalizados es deseable en
situaciones en las que el método será ampliamente utilizado; sin embargo, algunas veces
el laboratorio puede contar con un método propio más adecuado para el propósito. Los
métodos normalizados deben:
• Incluir en su documentación las especificaciones principales resultantes de la etapa de
validación dentro de su desarrollo, así como los requisitos indicados en la sección
2.1.2 de este documento.
• Ser utilizados por el laboratorio exactamente como están descritos.
El laboratorio que va a utilizar un método normalizado debe verificarlo contra sus

especificaciones de validación, atendiendo los requisitos para el aseguramiento de la
calidad, y no necesita validarlo. Esta verificación permite demostrar que el laboratorio
domina el ensayo y lo utiliza correctamente (el uso corresponde al propósito para el que
fue desarrollado, con respecto a propiedad medida, matriz, rango, equipos utilizados,
repetibilidad, etc.).
En la mayoría de los casos se puede considerar que en el desarrollo de los
métodos normalizados se han tenido en cuenta todos los aspectos necesarios relativos a
la validación. Al presentarse el caso de no haber evidencia suficiente para deducir que se
ha llevado a cabo una correcta validación, el laboratorio usuario deberá definir un
procedimiento para calcular y evaluar los parámetros de desempeño que considere
necesarios para asegurar la confiabilidad del método. (OGA, 2005).
2.1.2 Métodos no Normalizados
Los métodos no normalizados deben estar apropiadamente validados para poder

utilizarlos, ya sean éstos desarrollados por un tercero o resultado de la modificación de un
método normalizado. En el caso de modificaciones, es necesario demostrar que éstas no
tienen una repercusión sobre la calidad de los resultados.
23
El CONACYT (1999), de acuerdo a la norma ISO/IEC 17025:1999, como un

criterio de acreditación para laboratorios de ensayo y calibración, establece que el
laboratorio debe desarrollar un procedimiento de ensayo que incluya al menos la siguiente
información, previo a la utilización de un nuevo método:
a-) Identificación apropiada.
b-) Alcance.
c-) Descripción del tipo de objeto ha ser ensayado o calibrado.
d-) Parámetros ó cantidades y rangos ha ser determinados.
e-) Aparatos y equipos, incluyendo requisitos técnicos del desempeño.
f-) Normas y materiales de referencia requeridos.
g-) Condiciones ambientales requeridas y cualquier período de estabilización necesario.
h-) Descripción de los procedimiento, incluyendo:
• Colocación de marcas de identificación, manejo, transporte, almacenamiento y
preparación de objetos;
• Verificación de que el equipo está trabajando apropiadamente y donde sea
requerido, calibración y ajuste del equipo antes de cada uso;
• Método de registro de observaciones y resultados;
• Cualquier medida de seguridad a ser observada
i-) Criterios y/o requisitos para aprobación/rechazo.
j-) Datos para ser registrados y método de análisis y presentación.
k-) La incertidumbre o el procedimiento de estimación de la incertidumbre.
El laboratorio que va a modificar un método normalizado debe revalidarlo para

demostrar que las especificaciones del método original no se ven afectadas por la
modificación introducida. El nivel de revalidación requerido aumenta conforme la magnitud
de los cambios realizados. Se consideran cambios menores, por ejemplo, la modificación
del tamaño de la muestra y sustitución de reactivos. Se considera cambio mayor, por
ejemplo, el cambio de procedimiento o equipo y cambios en el alcance (aplicación a
matrices que no se especifican). Para demostrar que una versión modificada de un
método cumple las mismas especificaciones que el método original, se deben realizar
comparaciones utilizando réplicas. El diseño experimental y el análisis de los resultados
deben ser estadísticamente válidos. El laboratorio usuario de un método normalizado
modificado debe verificarlo contra sus especificaciones originales, o de revalidación, y así
demostrar que domina el ensayo y lo utiliza correctamente.
24
En el caso de métodos no normalizados, los terceros que los desarrollan son

responsables de incluir en dicho proceso la etapa de validación, para demostrar que el
método cumple con los criterios de aceptación adecuados para el propósito de aplicación;
el laboratorio usuario debe verificar el desempeño del método contra sus especificaciones
de validación y así demostrar que domina el ensayo y lo realiza correctamente.
2.1.3 Métodos desarrollados por el laboratorio
Cuando sea el caso, el laboratorio debe demostrar que tiene un plan en el que se
incluye la evaluación de su capacidad en cuanto a personal, equipo y demás recursos que
le permitan desarrollar métodos propios.
Los métodos desarrollados por el laboratorio deben estar adecuadamente
validados, documentados y autorizados antes de su uso. Cuando sea posible, se debe
emplear material de referencia con una matriz equivalente a la de la muestra, o bien debe
utilizarse un método de ensayo normalizado alterno, preferiblemente de diferente principio
de medición, para comparar los resultados. Estos métodos deben cumplir al menos los
mismos requisitos de documentación indicados en la sección 2.1.2.
El laboratorio que desarrolla y utiliza sus propios métodos debe validarlos, para
demostrar que cumplen con los criterios de aceptación adecuados para el propósito de
aplicación. Una vez está en uso el método, el laboratorio debe verificar su desempeño
contra los parámetros de validación, para demostrar que sigue dominando el ensayo y lo
realiza correctamente. (OGA, 2005).
2.2 CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO
2.2.1 Características de desempeño por tipo de método
Cuando se realiza una validación de acuerdo al tipo de método, las características

de desempeño que deben ser evaluadas, además de los pasos que se deben seguir
durante el proceso de validación, son presentadas en la Tabla 2.2.1 de acuerdo a los
criterios de validación tomados por la FAO.
25
Tabla 2.2.1 Características de desempeño según tipo de método
MÉTODO NO
MÉTODO NORMALIZADO MÉTODO INTERNO
NORMALIZADO
Comprobar que el Laboratorio domina el ensayo y lo utiliza correctamente.
- Exactitud. - Exactitud. - Exactitud.

- Repetibilidad. - Repetibilidad. - Repetibilidad.
- Incertidumbre. - Reproducibilidad. - Reproducibilidad.
Límite de Detección (si la No difieren del método Son suficientes para el
Norma lo indica) original. objetivo de aplicación.
Determinar, según corresponda:
- Intervalo de trabajo - Intervalo de trabajo - Selectividad

- Linealidad - Linealidad - Linealidad
- Recuperación - Recuperación - Exactitud
- Robustez - Robustez - Intervalo de trabajo
- Selectividad - Selectividad/Estabilidad - Repetibilidad
- Estabilidad - Reproducibilidad - Reproducibilidad
- Reproducibilidad - Estabilidad
- Límite de detección
- Límite de cuantificación
- Recuperación
- Robustez
- Sensibilidad
- Incertidumbre
Para cada uno de los métodos se debe:
a-) Realizar carta de control con los resultados de materiales de referencia.
b-) Controles Intralaboratorio
c-) Participar en interlaboratorios
Fuente: FAO (2005)
26
2.2.2 Características de desempeño por tipo de análisis
2.2.2.1 Tipos de análisis químicos
De acuerdo al CONACYT (2003), los procedimientos analíticos pueden estar

desarrollados para determinar con una gran exactitud un analito, o simplemente para
evaluar uno de sus atributos. Dependiendo de la finalidad a la que hayan sido destinados,
pueden clasificarse en los siguientes tipos de análisis:
1. Análisis tipo I
Son aquellos métodos analíticos diseñados para establecer la identidad, bien sea
la de una materia prima, o la de un componente dentro de una matriz más compleja.
2. Análisis tipo II
A este grupo pertenecen los métodos analíticos diseñados para la cuantificación

de los componentes mayoritarios o propios como son los principios activos y los
conservantes.
3. Análisis tipo III
Este tipo, que puede subidividirse a su vez en dos subtipos, análisis cuantitativos y
análisis límite, está diseñado para la determinación de impurezas de síntesis, productos
relacionados y productos de degradación, tanto en materias primas como en productos
terminados.
4. Análisis tipo VI
Pertenecen a este grupo los métodos analíticos diseñados para la evaluación de

las características de funcionamiento, como pueden ser los ensayos de disolución o de
liberación retardada (de drogas), etc.
La validez de un método analítico sólo puede verificarse con ensayos de

laboratorio, por lo que un requisito básico para determinar si un método analítico es
27
adecuado para lo que ha sido diseñado, es la documentación de todas las pruebas

realizadas y la comprobación de si han dado resultados aceptables según los criterios
establecidos.
De acuerdo a la FAO (2005) y al CONACYT (2003), las características de
desempeño obligatorias para la validación de métodos analíticos son presentadas de la
Tabla 2.2.2 a la Tabla 2.2.4.
Tabla 2.2.2 Características de desempeño Según la FAO
Tipo III
Característica de Desempeño Tipo II Tipo IV
Cuantitativo Análisis
Límite
Estabilidad Si Si Si *
Selectividad Si Si Si Si
Linealidad Si Si No *
Rango Si Si * *
Exactitud Si Si No *
Precisión Si Si * Si
Límite de Detección No Si Si *
Límite de Cuantificación No Si Si *
Estudio comparativo Si * * *
Robustez Si Si Si Si
* Indefinido
Fuente: FAO (2005)
28
Tabla 2.2.3 Características de desempeño Según la O.M.S.
Característica de Desempeño Tipo I Tipo II Tipo III Tipo IV
Precisión No Si Si Si
Exactitud No Si Si Si
Límite de detección Si No Si No
Límite de cuantificación No No Si No
Selectividad Si Si Si No
Rango No Si Si Si
Linealidad No Si Si Si
Reproducibilidad Si Si Si Si
Fuente: CONACYT (2003)
Tabla 2.2.4 Características de desempeño Según la C.E.E.
Característica de Desempeño Tipo I Tipo II Tipo III Tipo IV
Precisión No Si No No
Exactitud No Si No No
Límite de detección No No Si No
Límite de cuantificación No No Si No
Selectividad Si Si Si No
Rango No No Si No
Linealidad No No Si No
Reproducibilidad No No Si No
Fuente: CONACYT (2003)
29
2.3 CONFIRMACIÓN DE IDENTIDAD Y

SELECTIVIDAD/ESPECIFICIDAD
En métodos analíticos generales se puede decir que consiste en una etapa de

medida que pueda o no ser precedida por una etapa de aislamiento. Es necesario
establecer que la señal producida en la etapa de medición, u otra característica de la
medida, que se ha atribuido al analito, es solamente debido al analito y no a la presencia
de algo, química o físicamente similar o que se presenta como coincidencia. Esto es la
confirmación de la identidad. Si realmente otros compuestos interfieren con la medida del
analito esto dependerá de la eficacia de la etapa del aislamiento y de la selectividad/
especificidad de la etapa de la medición.
La selectividad y la especificidad son las medidas que determinan la confiabilidad
de medición en presencia de interferencias. La especificidad se considera generalmente
como la selectividad al 100% pero el acuerdo no es universal. Donde la etapa de
medición no es específica, es posible indicar que no interfieren ciertos analitos, primero
comprobando que éste es el caso. Es más difícil indicar que nada interfiere puesto que
existe siempre la posibilidad de encontrar una cierta interferencia hasta ahora
desconocida. Existirán los casos donde interferencias químicas se pueden identificar para
un método particular pero la posibilidad de encontrarlas en la vida real pueden ser
improbable. El analista tiene que decidir en qué punto es razonable parar la búsqueda de
interferencias. Estos parámetros son aplicables al análisis cualitativo y cuantitativo.
Si las interferencias están presentes o sea que no pueden ser separadas del
analito de interés, que son las interferencias de las que el analista no es consciente que
están presentes, entonces aquellas interferencias tendrán un número de efectos. Según
como se establezca la interferencia, así la identidad del analito puede inhibir la
confirmación, por ejemplo deformando la señal que proviene del analito. Ellos también
pueden tener el efecto al parecer de realzar la concentración del analito contribuyendo a
incrementar la señal del analito, (o a la inversa suprimiendo la concentración del analito si
ellos contribuyen con una señal negativa). Las interferencias por lo general afectarán la
pendiente de la curva de calibración de manera diferente que los analitos de interés,
entonces la pendiente de la curva de calibración en el método de adiciones puede afectar
la linealidad de la curva. Este efecto tiene el potencial para indicar la presencia posible de
una interferencia oculta, pero no es práctico si la curva de recuperación es
intrínsecamente no lineal.
30
La selectividad de un método por lo general es investigada estudiando su

capacidad de medir el analito de interés a partes de pruebas a las que interferencias
específicas deliberadamente han sido introducidas (las que se pensaron podrían estar
presentes en las muestras). Donde es confuso si realmente las interferencias están ya
presentes, la selectividad del método puede ser investigada estudiando su capacidad de
medir el analito comparado a otros métodos / técnicas independientes.
El empleo de técnicas confirmativas puede ser útil como el medio de verificar
identidades y cuantificar el analito. Cuanta mayor cantidad de evidencia pueda juntarse
será mejor. Inevitablemente hay una compensación entre los costos y el tiempo tomado
para la identificación del analito y la confianza con la que se puede decidir que la
identificación ha sido realizada correctamente.
Mientras que la evaluación de la repetibilidad requiere que la medida sea
realizada varias veces por una técnica, la confirmación de la identidad del analito requiere
que la medida sea realizada por varias técnicas preferiblemente independientes. La
confirmación aumenta la confianza en la técnica bajo examinación y es especialmente útil
cuando las técnicas confirmativas funcionan bajo principios perceptiblemente diferentes.
En algunos usos, por ejemplo, el análisis de orgánicos desconocidos por cromatografía de
gas, el uso de técnicas confirmativas es esencial. Cuando la técnica bajo evaluación es
específica, el uso de otras técnicas confirmativas puede no ser necesario. (EURACHEM,
1998).
La selectividad es el grado en que un método puede cuantificar el analito con
precisión en presencia de interferentes. Idealmente, la selectividad debería evaluarse para
todos los interferentes importantes susceptibles de estar presentes. Es de especial
importancia comprobar los interferentes susceptibles de responder a la prueba de acuerdo
con los principios químicos. Puede no ser viable considerar o probar cada uno de los
interferentes potenciales; en tal caso, se recomienda comprobar los casos probablemente
peores. Como principio general, la selectividad debe ser suficientemente buena para
poder descartar cualquier interferencia.
En muchos tipos de análisis, la selectividad es esencialmente un estudio cualitativo
basado en la significación, o bien un conjunto de pruebas pertinentes de interferencia. Sin
embargo, existen mediciones cuantitativas que pueden resultar útiles. (OIV, 2005).
La especificidad puede verificarse de diferentes maneras, dependiendo del tipo de
análisis a realizar. Es importante tomar en cuenta, que en aquellos casos en que la matriz
de la muestra es variable, tanto en términos de su composición (productos biológicos o de
31
origen natural), así como en la fuente de las materias primas que las componen
(diferentes proveedores, diferentes orígenes), se recomienda que la especificidad se
establezca para las diferentes composiciones o fuentes en forma independiente.
Existen tres tipos de análisis de la especificidad, los cuales son mencionados de
manera continua en la sección 2.3.1. (GVMA, s.f.).
2.3.1 Análisis por potencia, disolución y uniformidad de contenido
2.3.1.1 Comparación del comportamiento de la matriz o impurezas con respecto al

comportamiento del estándar
Se prepara una solución estándar del analito a la concentración esperada en el

procedimiento de ensayo, y una solución de matriz a la misma concentración relativa. Se
lleva a cabo una comparación de las mediciones de ambas soluciones.
Como criterio de aceptación se toma, que la matriz no debe presentar ningún tipo
de señal que interfiera con la señal que se encuentra para el estándar.
2.3.1.2 Comparación del comportamiento de muestra enriquecida con matriz con

respecto al comportamiento de estándar enriquecido con matriz
Se prepara una solución estándar del analito a la concentración esperada en el

procedimiento de ensayo, y una solución de muestra a la misma concentración. Ambas
soluciones son enriquecidas con una cantidad equivalente de matriz. Se lleva a cabo una
comparación de las mediciones de ambas soluciones enriquecidas.
El criterio de aceptación es que el comportamiento de las muestras enriquecidas y
del patrón enriquecido, debe ser los más cercano posible, en aquel punto en que se lleva
a cabo la medición del analito. Lo cual es indicativo de que la matriz, no aporta ningún tipo
de señal que interfiera con la medición.
Algunos autores recomiendan enriquecer tanto las muestras como el patrón con
cinco niveles de concentración del analito, y llevar a cabo la comparación del
comportamiento de las soluciones a los diferentes niveles. Esto permitiría determinar el
grado de interferencia, dependiendo de la concentración del analito a determinar. Estos
datos pueden obtenerse del estudio de linealidad del método utilizando la adición
estándar.
32
2.3.2 Pruebas cuantitativas para la determinación del contenido de

impurezas
2.3.2.1 Adición estándar de impurezas a la muestra
Este método se utiliza, si se encuentran disponibles en el mercado los patrones

correspondientes a las impurezas. Se agrega a la muestra, diferentes concentraciones de
impurezas, a la concentración normal de trabajo.
Como criterio de aceptación, se debe demostrar que el contenido de impurezas
determinado en el ensayo tiene una exactitud y precisión apropiadas para el método al
límite de cuantificación.
2.3.2.2 Comparación de métodos
En los casos en que los patrones de impurezas no están disponibles, la

especificidad puede ser demostrada por comparación de los resultados del ensayo con el
método propuesto, con resultados obtenidos por un segundo método bien caracterizado u
oficial.
La comparación debe incluir muestras almacenadas bajo condiciones extremas
relevantes (luz, calor, humedad, hidrólisis ácida o básica, oxidación). Estas condiciones
deben ser escogidas de acuerdo a la estructura química del analito, que determinará la
susceptibilidad del mismo a la descomposición.
Como criterios de aceptación en el caso de la determinación cuantitativa de
impurezas, se deben comparar los resultados obtenidos por ambos métodos. En el caso
de pruebas de impurezas cromatográficas, se deben comparar los perfiles de impurezas.
2.3.3 Análisis por pruebas de identificación
Para este análisis, deben prepararse:

1 Muestras que contengan el analito a identificar.
2 Muestras que no contengan el analito (matriz).
3 Muestras sin analito pero contaminadas con una sustancia de estructura similar.
4 Solución de patrón de la sustancia a identificar, preparado a una concentración
equivalente a las anteriores.
33
Las tres primeras soluciones se comparan con la cuarta solución.

Como criterios de aceptación, deben obtenerse los siguientes resultados para
cada solución:
1. Solución 1, Identificación positiva.
2. Solución 2, Identificación negativa.
3. Solución 3, Identificación negativa.
2.4 LIMITE DE DETECCIÓN
Es necesario solamente cuando deben tomarse decisiones cualitativas, es decir, si

la sustancia está presente o no. (FAO, 2005).
Donde las medidas se hacen en los niveles bajos del analito o de la característica;
por ejemplo, en el análisis del rastro, es importante saber cuál es la concentración más
baja del analito o el valor de la propiedad que se puede detectar con confianza por el
método. Para propósitos de validación es normalmente suficiente proporcionar una
indicación del nivel en el que la detección se hace problemática. Por esta razón "el blanco
+ 3s" por lo general da un acercamiento normalmente satisfactorio. (EURACHEM, 1998).
En sentido amplio, el límite de detección es la cantidad o concentración de analito
más pequeña en la muestra de prueba que puede distinguirse fiablemente de cero. En los
sistemas analíticos donde el rango de validación no lo incluye o no se le aproxima, no es
preciso que el límite de detección forme parte de la validación.
Pese a la aparente simplicidad de la idea, el conjunto del tema del límite de
detección topa con los problemas señalados a continuación:
• Existen varias aproximaciones conceptuales posibles al tema, cada una de las cuales
ofrece una definición del límite diferente. Los intentos de clarificar esta cuestión no han
hecho sino aumentar la confusión.
• Aunque cada aproximación depende de una fidelidad estimada a una concentración
igual o próxima a cero, no está claro si debe tomarse en condiciones de repetibilidad o
en otras condiciones para la estimación.
• A menos que se recabe una enorme cantidad de datos, las estimaciones del límite de
detección están sujetas a una variación aleatoria bastante grande.
34
• Las estimaciones del límite de detección suelen estar sesgadas por la parte inferior a
causa de los factores operativos.
• Las deducciones estadísticas relativas al límite de detección requieren que se
establezca la hipótesis de la normalidad, algo por lo menos cuestionable a bajas
concentraciones.
En términos prácticos para la validación de métodos, parece mejor optar por una
definición simple que permita realizar rápidamente una estimación, que sólo se utilizará
como indicador sobre la utilidad del método. Sin embargo, debe admitirse que, tal como
se estima en el desarrollo de métodos, el límite de detección puede no ser idéntico como
concepto o como valor numérico al que se utiliza para caracterizar un método analítico
completo. Por ejemplo, el “límite de detección instrumental”, tal como se denomina en la
literatura o en los manuales de los instrumentos, y que seguidamente se ajusta para la
dilución, suele ser más pequeño que el límite de detección "práctico" y es inadecuado
para la validación de métodos. (OIV, 2005).
En el caso de métodos establecidos como oficiales casi nunca es necesario
determinar el límite actual de detección. Preferiblemente el límite de detección de trabajo
debe ser más bajo del nivel de detección requerido por la especificación. Por ejemplo, si
se requiere detectar una impureza al nivel del 0.1%, se debe demostrar que el
procedimiento realmente detecta la impureza a este nivel.
Existen diferentes formas de determinar el límite de detección, cualquiera que sea
el método utilizado, se requiere del análisis de un número adecuado de muestras
conocidas que deben estar cercanas o preparadas a la concentración del límite de
detección requerido para el tipo de ensayo a realizar. (GVMA, s.f.).
2.4.1 Comparación de blanco con blanco enriquecido a una sola

concentración
Se utiliza cuando la desviación estándar del blanco es diferente de 0. Se preparan

no menos de 10 blancos independientes y 10 blancos enriquecidos a la concentración
más baja aceptada. Una vez preparadas las soluciones, se llevan a cabo las mediciones
de cada una y posteriormente se calcula la desviación estándar de cada grupo de datos.
Con estos datos se puede calcular el límite de detección, así:
35
LD = X bl + 3·S 2.4.1
Donde:
X bl : Es la concentración promedia del analito en el blanco.
S : Es la desviación estándar de la muestra enriquecida.
2.4.2 Blanco enriquecido a una sola concentración
En este caso se analizan y cuantifican no menos de 10 soluciones de blanco

enriquecidas o muestras enriquecidas preparadas a la concentración menor para la que
se puede obtener un grado aceptable de incertidumbre. Se lleva a cabo la cuantificación
para cada una de las soluciones, se calcula el valor promedio de las concentraciones
obtenidas y la desviación estándar.
LD = X be + 4.65·S Ó LD = X me + 4.65·S 2.4.2
Donde:
X be : Concentración promedia del analito en el blanco enriquecido.
X me : Concentración promedia del analito en la muestra enriquecida.
2.4.3 Comparación del comportamiento de blanco con blanco

enriquecido a diferentes concentraciones
Se preparan soluciones independientes de blanco y de blanco enriquecido a

diferentes niveles de concentración bajos, cercanos al límite de detección esperado. Se
determina aquella concentración a la cual la señal del analito es igual a la señal del blanco
( Ca ). Se calcula el límite de detección. Puede calcularse de dos maneras.
LD = Ca + 2·S 2.4.3
Donde:
Ca : Es la concentración del analito determinada.
36
S : Es la desviación estándar del blanco.
Se debe construir la regresión lineal de los blancos enriquecidos para determinar

el valor de la pendiente ( m ), también debe calcularse el valor promedio de la señal del
blanco y su desviación estándar. Con estos datos se calcula el límite de detección de la
siguiente manera.
S m − Sbl
LD =
m 2.4.4
Siendo:
S m = Sbl + K ·Sbl 2.4.5
Donde:
S m : Se puede determinar realizando de 20 a 30 medidas del blanco,
preferiblemente a lo largo de un período de tiempo extenso.
Sbl : Es la señal media del blanco.
S m : Es la señal analítica mínima distinguible.
Sbl : Es la desviación estándar del blanco.

m : Es la pendiente de la regresión lineal.
K : Es el múltiplo de la desviación estándar del blanco. Los valores recomendados
son 2 ó 3.
2.4.4 Método de comparación Señal/Ruido
En el caso de procedimientos analíticos instrumentales que están sujetos a ruido

de fondo, los documentos de la International Conference Harmonization (ICH) describen
una aproximación común que consiste en comparar las señales de muestras con
concentraciones bajas (conocidas) del analito, contra las señales del blanco.
37
Se preparan muestras de concentración baja conocida a diferentes niveles de

concentración, de acuerdo con el método en estudio. Se prepara un blanco, y se miden
las señales de las soluciones preparadas.
El Límite de detección corresponde a la concentración mínima a la cual el analito
es detectado con una relación señal ruido de 2:1 ó 3:1.
2.5 LIMITE DE CUANTIFICACIÓN
Se emplea cuando se realizan determinaciones de sustancias a nivel de residuos.

En ocasiones es útil establecer una concentración por debajo de la cual el método
analítico no puede funcionar con una fidelidad aceptable. Aunque hasta un cierto grado es
seguro operar por encima de ese límite, hemos de admitir que constituye una dicotomía
bastante artificial de la escala de concentración: las mediciones inferiores a ese límite no
están desprovistas de información y pueden ser adecuadas para el propósito. (OIV, 2005).
El límite de cuantificación es estrictamente la concentración más baja del analito
que puede ser determinada con un nivel aceptable de repetibilidad de precisión y
exactitud. También se conoce a veces como ‘límite de determinación’.
Observe que ni el Límite de Detección ni el Límite de Cuantificación representan
los niveles en los cuales la cuantificación es imposible. Es simplemente el tamaño de las
incertidumbres asociadas que se acerca a la comparabilidad con el resultado real en la
región del Límite de Detección.
A continuación se presentan los diferentes métodos por los cuales puede ser
determinado el Límite de cuantificación. (GVMA, s.f.).
2.5.1 Blanco enriquecido a una sola concentración
El límite de cuantificación es definido según varias convenciones como la

concentración de analito que corresponde al valor en blanco del analito, más 5, 6 o 10
desviaciones estándar de la media del analito en el blanco (Seguir procedimiento de
sección 2.4.2), lo que se expresa en la siguiente ecuación.
LC = X bl + 10 ∗ S 2.5.1
38
Donde:
X bl : Es la concentración promedia del analito en el blanco.
S : Es la desviación estándar de la muestra enriquecida.
2.5.2 Método de comparación de Señal / Ruido
Se preparan muestras de concentración conocida a bajos niveles, de acuerdo al

método en estudio. Se prepara un blanco, y se mide la señal de las soluciones
preparadas.
El límite de cuantificación es la concentración de analito en la que se pueden dar
cualquiera de las siguientes situaciones:
- Relación señal/ruido es 10:1.
- Relación señal/ruido es al menos 10 y la precisión menor al 10% de la Desviación
estándar relativa.
- Relación señal/ruido es mayor de 20 y la precisión menor al 5% de la Desviación
estándar relativa.
2.5.3 Método de respuesta de línea base (cromatografía líquida o

gaseosa)
Se debe preparar una solución de blanco y se corre el cromatograma por un

tiempo igual a 20 veces el ancho del pico obtenido para el analito.
Se obtiene la medida de ruido como:
• La más grande fluctuación pico a pico.
• La desviación más grande (positiva o negativa) de la respuesta media.
Se calcula el límite de cuantificación, utilizando la siguiente fórmula:
LC = 10 x Desviación mínima x m 2.5.2
Donde ‘m’ es la pendiente de la curva de calibración y se obtiene del estudio de

linealidad del método.
39
2.5.4 Método de la inyección doble de la muestra de analito
Se preparan muestras del analito a bajas concentraciones. Se llevan a cabo dos

corridas para cada una de las soluciones.
Se calcula el Límite de cuantificación como la concentración más baja del analito a
la cual la desviación estándar relativa de las dos mediciones es ≤ 2%.
2.6 LINEALIDAD Y RANGO
Para cualquier método cuantitativo, es necesario determinar el rango de

concentración del analito o los valores característicos sobre los que el método puede ser
aplicado. El extremo inferior del rango de concentración está limitado por los factores que
son los valores de los límites de detección y/o cuantificación. El límite superior del rango
de concentración será impuesto por varios efectos según el sistema de respuesta del
instrumento.
Dentro del rango de trabajo puede existir un rango de respuesta lineal. Dentro de
la señal lineal de respuesta el rango tendrá una relación lineal con la concentración del
analito o el valor característico.
La evaluación del funcionamiento y rangos lineales también será útil para la
planificación del grado de calibración requerido, usando el método sobre una base
cotidiana. Es aconsejable investigar la discrepancia a través del rango de trabajo. Dentro
del rango lineal, un punto de calibración puede ser suficiente para establecer la pendiente
de la línea de calibración. Por otro lado en el rango de trabajo, puntos múltiples de
calibración serán necesarios (preferiblemente > 6). La relación del instrumento respuesta/
concentración no tiene que ser perfectamente lineal para que un método sea eficaz pero
la curva debería ser repetible día a día. Note que el funcionamiento y el rango de
linealidad pueden ser diferentes para matrices diferente según el efecto de interferencias
que provienen de la matriz. (EURACHEM, 1998).
La linealidad puede probarse informalmente examinando un gráfico de los residuos
producidos por regresión lineal de las respuestas a las concentraciones en un equipo de
calibrado adecuado. Los modelos curvados sugieren una falta de adecuación al no ser
lineal la función de calibrado. Puede realizarse una prueba de significación comparando la
varianza de la inadecuación con la del error puro. No obstante, existen otras causas de
40
inadecuación a parte de la no linealidad que pueden aparecer en algunos tipos de

calibrado analítico, de manera que la prueba de significación debe utilizarse junto con un
grafico residual. Pese a su uso actualmente extendido como indicador de la calidad de la
adecuación, el coeficiente de correlación es engañoso e inapropiado para demostrar la
linealidad y no debe utilizarse.
El diseño es un elemento esencial en las pruebas de falta de adecuación, dado
que es fácil confundir la no linealidad con desviaciones. Las mediciones replicadas son
necesarias para ofrecer una estimación del error puro si no existen estimaciones
independientes. En ausencia de directrices específicas, debe aplicarse lo siguiente:
• Debe haber seis o más calibradores;
• Los calibradores deben espaciarse de forma uniforme a lo largo del rango de
concentración de interés;
• El rango debe abarcar del 0 al 150% o del 50 al 150% de la concentración susceptible
de ser hallada, según cuál sea más adecuado;
• Los calibradores deben ejecutarse al menos por duplicado y, preferiblemente, por
triplicado o más, en orden aleatorio.
Después de extrapolar la adecuación mediante la regresión lineal simple, deben

examinarse los residuos para hallar modelos obvios. La heterocedasticidad es bastante
común en el calibrado analítico y un modelo que la sugiera significa que la mejor manera
de tratar los datos calibrados es por regresión ponderada. La imposibilidad de utilizar una
regresión ponderada en estas circunstancias podría dar origen a errores exagerados en la
parte baja de la función de calibrado.
La prueba de falta de adecuación puede llevarse a cabo con una regresión simple
o ponderada. También puede realizarse una prueba de intercepto significativamente
diferente de cero con estos datos si no hay una falta de adecuación significativa. (OIV,
2005).
El comportamiento lineal de un método, debe ser demostrado dentro del intervalo
en el cual es probable que se trabaje. Este intervalo varía dependiendo del tipo de
determinación a realizar. Por esta razón se establece los intervalos dentro de los cuales
deben llevarse a cabo las pruebas para cada tipo de análisis (Tabla 2.6.1).
41
Tabla 2.6.1 Rango de trabajo por tipo de análisis
Tipo de Análisis Intervalo de trabajo
Ensayo del analito 80 -120 % de la concentración de trabajo.
Determinación de impurezas 50 -120% de la especificación.
Ensayo de Uniformidad de 70 - 130% de la concentración de trabajo, o alguna

contenido modificación del mismo, dependiendo de la naturaleza de
la forma dosificada.
Prueba de disolución ± 20 % sobre la especificación, en el caso de la liberación

controlada, en que existe una especificación mínima al
inicio de la prueba y una máxima al finalizar, el intervalo
debe ser menos un 20% de la especificación mínima y
más 20% de la especificación máxima.
Fuente: GVMA, s.f.
2.6.1 Determinación de la Linealidad e Intervalo del Sistema
1. Preparar soluciones de estándar al menos a cinco niveles de concentración, las cuales

deben encontrarse dentro de los intervalos establecidos para cada tipo de análisis.
2. Este procedimiento debe repetirse en forma independiente por lo menos 3 veces, para
evaluar estadísticamente la regresión lineal del método.
3. Con estos datos se grafica la respuesta de la medición, contra la concentración del
analito. Se verifican datos con comportamiento atípico mediante mediciones
adicionales.
4. Realizar un análisis de varianza de la regresión lineal.
5. Calcular el coeficiente de regresión con la totalidad de los datos (por lo menos tres
curvas independientes).
6. Calcular y graficar los residuos (valor real de la concentración – el calculado por la
ecuación de regresión para cada valor de X).
42
2.6.2 Determinación de la Linealidad e Intervalo del Método
Seguir el procedimiento establecido en la sección 2.6.1, sustituyendo únicamente

en el numeral 1, soluciones de estándar por soluciones de muestra o blanco enriquecidos.
2.6.3 Criterios de aceptación
Se confirma linealidad si se cumplen los siguientes criterios:

1. Homocedasticidad (la varianza es constante para todas las concentraciones).
2. El Análisis de varianza de la regresión lineal debe demostrar:
2.1. Paso del intercepto por cero, mediante una prueba de t o mediante el intervalo de
confianza con un α de 0.05.
2.2. Desviación no significativa con respecto a la regresión.
3. Distribución aleatoria de los residuos (Tendencias sistemáticas son indicativas de no
linealidad).
4. El coeficiente de correlación de la regresión lineal debe encontrarse entre 0.98 y 1.00,
el coeficiente de correlación al cuadrado debe ser mayor de 0.995.
2.7 EXACTITUD
‘La exactitud’ expresa la cercanía de un resultado a un valor. La validación de

métodos procura cuantificar la exactitud probable de resultados determinando efectos
sistemáticos y aleatorios sobre resultados. La exactitud es, por lo tanto, normalmente
estudiada como dos componentes: ‘Veracidad’ y ‘Precisión’. ‘La veracidad’ (de un método)
es una expresión de que tan cerca están los resultados (producidos por el método) al
verdadero valor. La veracidad normalmente es expresada en términos de la tendencia. ‘La
precisión’ es una medida de que tan cerca están los resultados los unos a los otros, y por
lo general es expresado por medidas como la desviación estándar, que describe la
extensión de los resultados. Además, una expresión cada vez más común de exactitud es
‘la incertidumbre de la medida’, que proporciona una expresión de número de exactitud.
(EURACHEM, 1998).
43
2.8 VERACIDAD
La evaluación práctica de la veracidad consiste en la comparación de los

resultados medios de un método con los valores conocidos, es decir la veracidad es
evaluada contra un valor de referencia (esto es el verdadero valor o el verdadero valor
convencional). Dos técnicas básicas están disponibles: comprobación contra los valores
de referencia para un material caracterizado o de otro método caracterizado. Los valores
de referencia son idealmente detectables a estándares internacionales. Los materiales de
referencia Certificados (MRC) son generalmente aceptados como el suministro de valores
detectables; el valor de referencia es entonces el valor certificado del MRC. Los valores
de referencia, certificados o no, pueden ser absolutos (detectables al SI) o
convencionales, es decir generalmente convenidos para un objetivo particular.
La veracidad es el grado de coincidencia entre el resultado de una prueba y el
valor de referencia aceptado de la propiedad objeto de la medición. La veracidad se
expresa cuantitativamente en términos de “sesgo”; cuanto más pequeño es el sesgo,
mayor veracidad indica. El sesgo suele determinarse comparando la respuesta del
método a un material de referencia con el valor conocido asignado a ese material. Se
recomienda realizar pruebas de significación. Si la incertidumbre del valor de referencia
no es despreciable, la evaluación de los resultados debe tener en cuenta la incertidumbre
del material de referencia y la variabilidad estadística.
La Figura 2.8.1 muestra dos componentes de tendencia, designados aquí como
componentes del método y del laboratorio. La tendencia del método proviene de errores
sistemáticos inherentes al método para cualquier laboratorio que los utiliza. La tendencia
del laboratorio proviene de errores adicionales sistemáticos peculiares al laboratorio y su
interpretación del método. En el aislamiento, un laboratorio sólo puede estimar la
tendencia combinada. Sin embargo, en la comprobación de la tendencia, es importante
estar consciente de las convenciones vigentes para el propósito actual. Por ejemplo en
una regulación de alimentos, los límites reguladores son puestos en términos de los
resultados obtenidos por el método estándar. La tendencia que surge únicamente del
método particular por lo tanto es compensada, y la comparabilidad con otros laboratorios
que usan el mismo método es el interés principal. La tendencia total decidida por un
laboratorio particular durante la validación entonces debería ser comparada con cualquier
tendencia divulgada para el método regulador.
44
Valor Medido Valor Verdadero

(Media Intralaboratorio)
Sesgo Total
Media Interlaboratorio
Sesgo del Laboratorio Sesgo del Método
Nota: La desviación del laboratorio y el método son mostradas aquí actuando

en la misma dirección. En realidad este no siempre será el caso.
Figura 2.8.1 Tipos de Sesgo Fuente: EURACHEM (1998)
Existen diferentes maneras de determinar la veracidad, las siguientes son las más
frecuentes, y pueden ser utilizados en todos los tipos de análisis. (GVMA, s.f.):
1. Comparación de un método oficial.
2. Porcentaje o factor de recuperación1.
3. Métodos de curva de respuestas relativas.
4. Comparación de resultados con un estándar.
2.8.1 Comparación con un método oficial, validado o estandarizado
La muestra debe ser analizada, utilizando el método a validar y un segundo

método bien caracterizado, el cual debe tener una exactitud bien definida y establecida.
Se analizan 6 muestras por replicado a la concentración normal de trabajo por ambos
métodos.
Se lleva a cabo un análisis de varianza (ANOVA), del porcentaje de recuperación o
del error relativo en porcentaje, para determinar si hay o no diferencia significativa entre la
exactitud de los métodos comparados.
1 Para más detalles revisar sección 2.13.
45
2.8.2 Métodos de curvas de respuesta relativa
También conocido como método de comparación de las curvas de regresión lineal

de estándares con curvas de regresión lineal de blancos enriquecidos. Este método es
una modificación del método de adición de estándar a blanco. Se preparan soluciones a
diferentes niveles de concentración de blanco enriquecido (80, 100, 120%) y soluciones
de estándares a los mismos niveles de concentración. Separadamente se evalúa la
regresión lineal de ambos grupos y se lleva a cabo la comparación de las pendientes y los
interceptos.
Como criterio de aceptación se debe verificar que los efectos de la interacción
entre la matriz y el analito, se encuentran ausentes si los interceptos del blanco
enriquecido y los estándares son estadísticamente iguales a cero, (información que a la
vez permite establecer la especificidad del método respecto a la matriz). El error
sistemático proporcional se encuentra ausente si la razón de las pendientes de las curvas
de respuesta para el blanco y los estándares es estadísticamente equivalente a 1.
2.8.3 Comparación de los resultados obtenidos de un estándar o MRC
El material de referencia puede ser obtenido en el mercado por algún suplidor o

puede ser preparado internamente en el laboratorio. Se analiza por replicado el material,
por el método a validar y se compara el resultado obtenido con el valor verdadero
declarado, este método se encuentra limitado por la disponibilidad y la estabilidad del
material de referencia, así como por el grado de certidumbre que se tenga del valor
verdadero de la concentración del material de referencia.
Como criterio de aceptación debe obtenerse un 98% -102% de recuperación ó 2%
de error relativo.
2.8.4 Condiciones para las pruebas de veracidad
El sesgo puede aparecer a diferentes niveles de la organización de un sistema

analítico; por ejemplo, el sesgo de ejecución, el sesgo del laboratorio y el sesgo del
método (Ver Figura 2.8.1). Es importante recordar cuál se está analizando mediante los
diferentes métodos de estudio del sesgo. En particular:
46
• La media de una serie de análisis de un material de referencia, realizados en su

totalidad en una única ejecución, ofrece información sobre la suma del efecto del
método, del laboratorio y de la ejecución en esa ejecución particular. Dado que se
supone que el efecto de ejecución es aleatorio entre diferentes ejecuciones, el
resultado variará de una ejecución a otra más de lo esperado a partir de la dispersión
observable de los resultados, lo que debe tenerse en cuenta al evaluar los resultados
(por ejemplo, realizando una prueba del sesgo medido respecto a la desviación
estándar entre las ejecuciones, investigada por separado).
• La media de análisis repetidos de un material de referencia en varias ejecuciones
mide el efecto combinado del método y del laboratorio en un laboratorio particular
(salvo si se asigna el valor utilizando un método particular).
2.8.5 Valores de referencia para las pruebas de veracidad
2.8.5.1 Materiales de referencia certificados (MRC)
Los MRC están sujetos a normas internacionales y tienen incertidumbres

conocidas, de manera que pueden emplearse para estudiar simultáneamente todos los
aspectos del sesgo (del método, del laboratorio y dentro del laboratorio), suponiendo que
no hay desemparejamiento de la matriz. Los MRC deben utilizarse para validar la
veracidad siempre que sea posible. Es importante asegurarse de que las incertidumbres
del valor certificado sean suficientemente pequeñas para permitir la detección de un
sesgo de magnitud importante. De lo contrario, sigue siendo recomendable utilizar MRC,
aunque deben realizarse comprobaciones adicionales.
Un experimento de veracidad típico genera una respuesta media en un material de
referencia. Al interpretar el resultado, debe tenerse en cuenta la incertidumbre asociada al
valor certificado, junto con la incertidumbre que genera la variación estadística en el
laboratorio. Esta última puede basarse en la desviación estándar de la ejecución, entre
ejecuciones o en la estimación de la desviación estándar entre laboratorios, en función de
la finalidad del experimento. Estadística o materiales. Si la incertidumbre del valor
certificado es pequeña, normalmente se realiza un test de la t de Student utilizando la
fidelidad adecuada.
Si es preciso y factible, deben examinarse varios MRC adecuados, con las
correspondientes matrices y concentraciones de analito. Si tras hacer esto las
47
incertidumbres de los valores certificados son más pequeñas que las de los resultados
analíticos, por precaución conviene utilizar una regresión simple para evaluar los
resultados. De esta forma, el sesgo puede expresarse como una función de la
concentración, que puede tener un intercepto distinto a cero (sesgo “transicional” o
constante) o una pendiente diferente a la unidad (sesgo “rotativo” o proporcional). Los
resultados deben interpretarse con cautela si el rango de matrices es grande.
2.8.5.2 Materiales de referencia
Si no hay Materiales de Referencia Certificados (MRC) disponibles, o como adición

a MRC, puede emplearse cualquier material suficientemente bien caracterizado para el
propósito (material de referencia), teniendo siempre en cuenta que, sabiendo que un
sesgo no significativo no implica que sea nulo, debe investigarse el sesgo significativo de
cualquier material.
Como ejemplos de materiales de referencia se mencionan los siguientes:
1. Materiales caracterizados por un fabricante de materiales de referencia, pero cuyos
valores carecen de una declaración de incertidumbre o de otras cualificaciones
2. Materiales caracterizados por un fabricante de material
3. Materiales caracterizados en el laboratorio para ser usados como materiales de
referencia
4. Materiales sujetos a una prueba por turnos rotatorios restringidos o distribuidos en un
ensayo de aptitud.
Aunque la trazabilidad de estos materiales puede ser cuestionable, sigue siendo
mucho mejor usarlos que no realizar ningún estudio del sesgo.
Los materiales se utilizarán del mismo modo que los MRC, aunque al carecer de
declaración de incertidumbre todas las pruebas de significación se basan únicamente en
la fidelidad observable de los resultados.
2.8.5.3 Uso de los métodos de referencia
En principio, los métodos de referencia pueden emplearse para valorar el sesgo de

otro método objeto de una validación. Es una opción útil cuando se comprueba una
alternativa, o una modificación de un método estándar establecido previamente validado y
que se utiliza en el laboratorio. Ambos métodos se utilizan para analizar varios materiales
de prueba típicos, preferiblemente tratando un rango de concentraciones útil y de forma
48
uniforme. La comparación de los resultados en todo el rango mediante un método

estadístico adecuado (por ejemplo, un test de t por parejas, con las debidas
comprobaciones de la homogeneidad de la varianza y la normalidad) pondrá de
manifiesto cualquier sesgo existente entre los métodos.
2.8.5.4 Uso de la adición/recuperación
En ausencia de materiales de referencia, o para complementar estudios de

materiales de referencia, el sesgo puede investigarse por adición y recuperación. Se
analiza un material de prueba típico por el método objeto de la validación en su estado
original y tras la adición de una masa conocida del analito a la porción de prueba. La
diferencia entre ambos resultados como proporción de la masa añadida se denomina la
recuperación sustituta o, en ocasiones, la recuperación marginal. Las recuperaciones
significativamente diferentes de la unidad indican que el sesgo afecta al método. De forma
estricta, los estudios de la recuperación aquí descritos sólo estudian el sesgo debido a los
efectos que se producen en el analito añadido; dichos efectos no son necesariamente
aplicables en la misma medida al analito nativo, en el que puede haber efectos
adicionales. Los estudios de adición/recuperación están fuertemente sujetos a la siguiente
regla: “aunque una buena recuperación no constituye una garantía de veracidad, una
recuperación pobre indica claramente una falta de veracidad”. (OIV, 2005).
2.9 PRECISIÓN
La precisión, se determina normalmente para las circunstancias específicas que en

la práctica pueden ser muy variadas. Las dos medidas más comunes de la precisión son
repetibilidad y reproducibilidad. Representan las dos medidas extremas de precisión que
pueden ser obtenidas. La capacidad de repetición (la precisión prevista más pequeña)
dará una idea de la clase de variabilidad a esperar cuando un método es realizado por un
solo analista en un solo equipo en un periodo de tiempo corto, es decir la clase de
variabilidad que se esperará entre los resultados cuando una muestra se analiza por
duplicado. Si una muestra va a ser analizada por un número de laboratorios para los
propósitos comparativos entonces una medida más significativa de utilizar es la
reproducibilidad (ésta es la medida más grande de precisión encontrada normalmente,
49
aunque excluye formalmente la variación con respecto al tiempo). Puede ser que una
cierta medida intermedia sea la más útil en casos particulares; por ejemplo la precisión
medida entre diversos analistas en amplios periodos de tiempo dentro de un solo
laboratorio. Esto se conoce a veces como precisión intermedia, pero las condiciones
exactas deben ser indicadas. La precisión se indica generalmente en términos de la
desviación estándar o por medio de la desviación estándar relativa. La capacidad de
repetición y la reproducibilidad son generalmente dependientes de la concentración del
analito, y así que se deben determinar en un número de concentraciones si es relevante,
la relación entre la precisión y la concentración del analito debe ser establecida. La
desviación estándar relativa puede ser más útil en este caso porque la concentración se
ha descompuesto en factores hacia fuera y así que es en gran parte constante, cuando el
rango de interés proporcionado no es demasiado grande.
Estas declaraciones de la precisión se relacionan con el análisis cuantitativo. El
análisis cualitativo se puede tratar de una manera ligeramente diferente. El análisis
cualitativo es con eficacia una medida de si existe o no determinado analito, en un umbral
dado de la concentración del mismo. Para los métodos cualitativos la precisión no se
puede expresar como una desviación estándar o desviación estándar relativa, pero puede
ser expresada como cifras verdaderas (positivas) y falsas (negativas). Estas cifras se
deben determinar en un número de concentraciones debajo y sobre el límite de alarma.
Los datos de una comparación confirmativa del método deben ser utilizados si un método
apropiado está disponible. (EURACHEM, 1998).
La repetibilidad puede determinarse de una manera interna, para ello:
• Deben determinarse suficientes resultados.
• Todos los pasos del método (incluidos la toma y preparación de la muestra, así como
la calibración) deben realizarse n-veces.
La determinación la reproducibilidad es posible por ensayo de intercomparación o

cuando se cuenta con distintos analistas, distintos equipos, etc. Se determina
Recuperación Porcentual (R%) para cada MR y CV% para cada nivel de concentración.
Se grafica Concentración Hallada en función de la Concentración de Referencia. Se
efectúa el tratamiento estadístico de los datos, determinando ordenada al origen
pendiente (recuperación promedio) y coeficiente de correlación.
50
2.9.1 Evaluación de la precisión
Existen diferentes formas de evaluar la precisión: repetibilidad, precisión

intermedia, reproducibilidad. En términos generales la precisión, debe determinarse,
analizando un número suficiente de alícuotas, que permitan calcular estadísticamente la
desviación estándar y la desviación estándar relativa. La ICH, recomienda llevar a cabo
un total de nueve determinaciones, que cubran el intervalo especificado en el
procedimiento. Para ello se pueden trabajar tres niveles diferentes de concentración (80,
100, 120 %), con tres muestras independientes de cada nivel. Datos con los que se
cuenta si al evaluar la exactitud, se llevó a cabo por el método de Adición estándar. Otra
forma de evaluarlo es, analizando por lo menos seis muestras independientes a la
concentración normal de trabajo.
Existen diferentes criterios de aceptación, sin embargo se puede generalizar que
en el caso de la repetibilidad y la precisión intermedia la desviación estándar relativa, para
evaluar la precisión del sistema o del método debe ser ≤ 2 %, y en algunos casos puede
ser ≤ 3%, la reproducibilidad, puede ser 2 o 3 veces la repetibilidad. (GVMA, s.f.).
2.10 INTERCOMPARACIONES
• Las intercomparaciones dan información valiosa solamente cuando las muestras se

manejan de la misma manera que las muestras de un análisis normal.
• Las intercomparaciones se realizan en intervalos de tiempo largos. De ahí que no
sean suficientes para el aseguramiento de calidad rutinario, sino que funcionan como
complemento de las cartas de control.
• Entre más distintas sean las matrices de las muestras de intercomparación y las del
análisis, menos información dan las intercomparaciones para el análisis rutinario.
• La interpretación de los resultados de intercomparaciones debe realizarse con el
mayor cuidado, especialmente en el caso de resultados aberrantes o desviaciones,
para obtener la mayor posibilidad de mejora.
• Si no se organizan intercomparaciones oficiales o provenientes de proveedores
reconocidos, se puede realizar en su lugar comparación con otros laboratorios (n ≥ 7).
• Para la realización y el tratamiento estadístico de las intercomparaciones debe
acatarse la Norma ISO 5725-1.
51
2.11 ROBUSTEZ
La robustez de un método analítico es la resistencia al cambio en los resultados

obtenidos por un método analítico cuando se realizan desviaciones menores a partir de
las condiciones experimentales descritas en el procedimiento. Los límites de los
parámetros experimentales deben especificarse en el protocolo del método (aunque en el
pasado no se solía hacer siempre), y dichas desviaciones permisibles, por separado o en
combinación, no deben producir cambios significativos en los resultados obtenidos (un
“cambio significativo” implica que el método no puede funcionar dentro de los límites de
incertidumbre que definen la adecuación al propósito). Deben identificarse los aspectos
del método susceptibles de afectar a los resultados y debe evaluarse su influencia en el
rendimiento del método mediante pruebas de robustez.
La robustez de un método se demuestra introduciendo deliberadamente pequeños
cambios en el procedimiento y examinando su efecto en los resultados. Puede ser preciso
considerar varios aspectos del método, pero dado que la mayoría de ellos tienen un
efecto despreciable, normalmente será posible modificar varios de ellos al mismo tiempo.
Algunos ejemplos de factores que puede analizar un estudio de robustez son:
cambios de instrumento, operario o marca de reactivo, concentración de un reactivo, pH
de una solución, temperatura de una reacción, tiempo transcurrido hasta la finalización de
un proceso, etc. (OIV, 2005).
El objetivo de la prueba de robustez es optimizar el método analítico y describir
que bajo las condiciones establecidas (incluidas sus tolerancias) se pueden obtener
resultados suficientemente exactos con una alta seguridad, de manera que el
procedimiento funcione confiablemente si se utiliza en otros laboratorios o después de
intervalos largos de tiempo.
Un método es más robusto entre menos dependan los resultados del ensayo de
una modificación en las condiciones de éste. Al desarrollar un nuevo método analítico
debe determinarse la modificación de los resultados por el cambio en las condiciones del
ensayo. Las condiciones que afectan el método de medición son por ejemplo: Laboratorio,
lugar de la medición, Personal, Aparatos Reactivos, disolventes, estándares, Caudal de la
fase móvil, pH de la fase móvil, Gradiente de temperatura.
Modificaciones pequeñas a estas condiciones deben afectar muy poco o nada al
resultado del análisis. Pueden modificarse algunas condiciones del análisis y seguir las
afectaciones a los resultados o a los parámetros estadísticos.
52
Un aspecto importante de la robustez es la estabilidad de todas las muestras,

estándares y reactivos, tanto en el almacenamiento como durante las condiciones de
ensayo. En este caso pueden ser parámetros a probar:
• Sensibilidad a la temperatura.
• Sensibilidad a la luz.
• Hidrólisis. Ej. por la humedad del aire.
• Facilidad de oxidación.
• Descomposición química.
• Efectos catalíticos, Ej. por las paredes del contenedor.
• Adsorción, Ej. durante la filtración de disoluciones con trazas.
• Precipitación, Ej. al dejar mucho tiempo una disolución.
2.11.1 Prueba de robustez de Youden y Steiner
Para determinar la robustez de un método analítico se utiliza el procedimiento de

Youden y Steiner, que permite evaluar siete variables con el análisis de sólo ocho
muestras, este procedimiento es el siguiente:
• Las variables deben ser elegidas estratégicamente.
• Cada variable se estudia mediante un valor (o cualidad cuando esto no es posible) alto
(A, B,...G) y otro bajo (a, b,...g) y se diseñan ocho pruebas según el ejemplo de la
Tabla 2.11.1. Los resultados se representan con letras desde s hasta z.
• A partir de los resultados puede calcularse el efecto de cada una de las variables
haciendo la media de los cuatro análisis que contienen la variable en su valor más alto
(mayúsculas) y aquellos que corresponden al valor más bajo (minúsculas). Así, el
efecto de cambio del Factor “A” a “a” se mide por la diferencia:
(s+t+u+v)/4 - (w+x+y+z)/4
• Es decir, la media de los resultados (s+t+u+v) equivale a “A” porque las seis variables
restantes presentes en estos cuatro resultados se anulan entre sí como consecuencia
de que existen siempre dos mayúsculas y dos minúsculas de cada variable.
Análogamente, la media de los resultados (w+x+y+z) equivale a “a”.
• Se calcula el efecto de cada uno de los factores. Finalmente el efecto de cambio de
"G" a "g" se mide por la diferencia (s+v+x+y)/4 - (t+u+w+z)/4.
53
• Al comparar los dos valores medios se conoce la influencia de la variable en estudio.

• Para cualquier otra variable se puede proceder de manera similar, con la Tabla 2.11.1.
• Estableciendo las siete comparaciones posibles (A-a,...G-g) puede conocerse el efecto
de cada variable; cuanto mayor sea la diferencia, mayor influencia tendrá dicha
variable en el método analítico. Si cualquiera de estas diferencias entre los promedios
de subgrupos de cuatro es mayor que (2)1/2 DS entre los replicados llevados a cabo en
las mismas condiciones, es indicación de que el método es sensible a los cambios del
factor involucrado.
Estas variables recibirán especial atención al redactar el método, remarcando la

necesidad de un estricto control para obtener resultados de calidad. (FAO, 2005).
Tabla 2.11.1 Test de Robustez de Youden para un método analítico1
Valor de Análisis
las
variables 1 2 3 4 5 6 7 8
A, a A A A A a a a a
B, b B B b B B B b b
C, c C c C C C c C c
D, d D D d D d d D D
E, e E e E E e E e E
F, f F f f F F f f F
G, g G g g G g G G g
Resultados s t u v w x y z
Fuente: FAO (2005)
1 Los factores a estudiar no deben ser necesariamente siete; puede considerarse un número menor de
variables. Esto no afectará el balance del diseño del experimento siempre que se lleven a cabo los ocho
ensayos indicados.
Una información adicional de este test de Youden es que la desviación estándar de los resultados s a z
constituye una medida excelente de la imprecisión previsible del método cuando se utiliza para el análisis
de rutina, ya que este procedimiento introduce deliberadamente el tipo de variación en las variables que
puede esperarse que ocurra durante el empleo normal del método.
54
2.12 FIDELIDAD
La fidelidad es el grado de coincidencia entre los resultados de pruebas

independientes obtenidos en condiciones estipuladas. Suele expresarse en términos de
desviación estándar o de coeficiente de variación. La distinción entre la fidelidad y el
sesgo es fundamental, pero depende del nivel al que se considere el sistema analítico.
Así, desde el punto de vista de una determinación individual, cualquier desviación que
afecte al calibrado para la ejecución se considerará un sesgo. Desde el punto de vista de
un analista que revisa el trabajo realizado durante un año, el sesgo de ejecución será
diferente cada día y actuará como una variable aleatoria, con una fidelidad asociada. Las
condiciones estipuladas para la estimación de la fidelidad tienen en cuenta este cambio
en el punto de vista.
Para la validación en un solo laboratorio, cabe tener en cuenta dos conjuntos de
condiciones:
a. La fidelidad en condiciones de repetibilidad, que describe las variaciones observadas
durante una ejecución individual como expectativa 0 y desviación estándar σr , y
b. La fidelidad de ejecución a ejecución, que describe las variaciones en el sesgo de
ejecución δrun como expectativa 0 y desviación estándar σrun.
Normalmente, ambas fuentes de error actúan en los resultados analíticos

individuales, que por tanto tienen una fidelidad combinada.
σ tot
2 σ 2
= r + σ run
2
2.12.1
n
Donde ‘ n ’ es el promedio de resultados repetidos dentro de una ejecución para el

resultado obtenido.
Ambas estimaciones de la fidelidad pueden obtenerse más simplemente
analizando por duplicado el material de prueba seleccionado en varias ejecuciones
sucesivas. A continuación, los componentes independientes de la varianza pueden
calcularse aplicando un análisis de varianza de un factor. Cada análisis duplicado debe
ser una ejecución independiente del procedimiento aplicado a una porción de prueba
independiente. Alternativamente, la fidelidad combinada σtot puede estimarse
directamente analizando una vez el material de prueba en sucesivas ejecuciones y
estimando la desviación estándar a partir de la ecuación habitual (las desviaciones
55
estándar observadas suelen designarse con el símbolo ‘s’ para distinguirlas de las
desviaciones estándar σ).
Es importante que los valores de la fidelidad sean representativos de las
condiciones en las que probablemente se realizaría la prueba. En primer lugar, la
variación en las condiciones entre las ejecuciones debe representar lo que normalmente
sucedería utilizando el método de la forma habitual en el laboratorio. Por ejemplo, deben
representarse los cambios de lotes de reactivos, de analistas y de instrumentos. En
segundo lugar, el material de prueba utilizado debe ser el habitual en términos de matriz
e, idealmente, el estado de fragmentación de los materiales debe ser el que
probablemente existe en las aplicaciones habituales. Por tanto, serán adecuados los
materiales de prueba o, en menor grado, los materiales de referencia ajustados a la
matriz, pero no lo serán las soluciones estándar del analito. Nótese que los MRC y los
materiales de referencia preparados suelen homogeneizarse más que los materiales de
prueba habituales, y, por tanto, la fidelidad obtenida de su análisis puede subestimar la
variación que se observaría con los materiales de prueba. Muy a menudo la fidelidad varía
con la concentración del analito. Las hipótesis típicas son:
1. La fidelidad no varía en función del nivel de analito.
2. La desviación estándar es proporcional o linealmente dependiente del nivel de analito.
En ambos casos, la hipótesis debe comprobarse si se espera que el nivel de

analito varíe sustancialmente (en más del 30% de su valor central). Probablemente, el
experimento más económico es un simple estudio de la fidelidad en o cerca de los
extremos del rango de funcionamiento, junto con una prueba estadística adecuada de la
diferencia en la varianza. Los tests F son pertinentes para el error distribuido
normalmente. (OIV, 2005).
Pueden obtenerse datos de fidelidad para una gran variedad de conjuntos de
condiciones. Además de la repetibilidad mínima y las condiciones entre ejecuciones aquí
indicadas, puede ser conveniente disponer de información adicional. Por ejemplo, para el
estudio de los resultados o para mejorar la medición, puede resultar útil tener una
indicación de los efectos de los cambios de operario y de ejecución, de los efectos entre
diferentes días y dentro del mismo día o de la fidelidad alcanzable utilizando uno o varios
instrumentos. Pueden utilizarse diferentes diseños y técnicas de análisis estadístico. Se
recomienda vivamente realizar un diseño experimental minucioso en estos estudios.
56
2.13 FACTOR DE RECUPERACIÓN
Los Métodos analíticos no miden siempre todo el analito de interés presente en la

muestra. Los analitos pueden estar presentes en una variedad de formas en la muestra y
no todas del interés del analista. El método se puede diseñar así deliberadamente para
determinar solamente una forma particular del analito. Sin embargo un fracaso en la
determinación de todo el analito presente puede reflejar un problema inherente en el
método. De cualquier manera, es necesario determinar la eficacia del método en la
detección de todo el analito presente.
Porque generalmente no se sabe cuánto de un analito particular está presente en
una porción de prueba le es difícil estar seguro que tan acertado es el método en extraerlo
de la matriz. Una forma para determinar la eficacia de la extracción es leer porciones de
muestra de prueba con el analito a varias concentraciones, después de extraer las
porciones de muestra fortificadas y de medir la concentración del analito. El problema
inherente con este analito introducido es que no será sostenido probablemente tan
fuertemente como el que esté naturalmente presente en la matriz de la porción de prueba
y así que la técnica dará una impresión poco realista de la alta eficacia de la extracción.
Es sin embargo la manera más común de determinar eficacia de la recuperación, y se
reconoce como manera aceptable de hacerlo. Sin embargo la desventaja de la técnica
debe ser considerada. Alternativamente puede ser posible realizar estudios de la
recuperación en los materiales de referencia, si los materiales convenientes están
disponibles. Con tal que éstos hayan sido producidos por la caracterización de materiales
naturales más bien que por la caracterización de los materiales sintéticos en los cuales el
analito ha sido introducido, entonces el estudio de la recuperación debe representar
exactamente la extracción de las porciones de prueba verdaderas. (EURACHEM, 1998).
El porcentaje de recuperación es el cociente entre la cantidad de analito medida y
el contenido en la muestra. En el caso ideal, se obtiene un 100%. En mediciones
experimentales puede perderse analito especialmente en el caso de tratamientos
complejos de muestras con analito en cantidades de traza, dando lugar a porcentajes de
recuperación menores (importante especialmente en el caso de procedimientos
cromatográficos).
57
Tabla 2.13.1 Determinación del Factor de Recuperación
La matriz de los blancos o muestras no fortificadas con el analito de

Análisis
interés dentro del rango de concentraciones
Materiales de referencia certificados
Repeticiones 6
Cálculos a Determinación de la recuperación del analito a varias concentraciones.

realizar
%R =
(C1 − C2 ) ∗ 100 2.13.1
C3
Donde:
% R : Es el porcentaje de recuperación.
C1 : Es la concentración determinada en la muestra fortificada.
C2 : Es la concentración determinada en la muestra no fortificada.
C3 : Es la concentración de la fortificación.
Determine la recuperación del analito relativo al valor certificado
Comentarios Las muestras fortificadas podrán ser comparadas con las mismas
muestras no fortificadas para valorar la recuperación neta de la
recuperación de la fortificación.
La recuperación desde las muestras fortificadas o de la matriz del blanco

usualmente serán mejores que en las muestras reales en la cual el analito
esta mas cerca de sus delimitaciones.
Dependiendo de cuanto pueda producir el MRC y sus características,

podría ser posible obtener un valor >100% de recuperación.
58
Para calcular la recuperación se determina la función de recuperación. Para lo cual

se agregan a la muestra antes del tratamiento cantidades sucesivas del analito y se
determinan contra una calibración base. Las cantidades encontradas se grafican contra
las agregadas.
En el caso ideal los valores caen en la bisectriz de la incertidumbre de los
resultados. En este caso la recuperación es del 100% y es suficiente una calibración
base. Si los valores se salen de este marco, debe hacerse una calibración a partir de
matriz y analito en un disolvente para eliminar el efecto de la matriz.
Variando el tiempo de adición del analito (por ejemplo, antes y después de un paso
de concentración) puede determinarse la recuperación para pasos aislados de un
procedimiento.
En caso de que la matriz introduzca muchas variaciones debe utilizarse en lugar
de una calibración con la matriz de la muestra el método del agregado patrón (o de las
adiciones estándar), el cual consiste en agregar concentraciones sucesivas de analito a la
muestra. Al graficar el aumento de la señal contra la cantidad adicionada se obtiene una
función de calibración, a partir de la cual puede obtenerse la cantidad de analito presente
en la muestra original.
Este método conduce a un aumento claro en la concentración del analito. Para
mantener el error lo más pequeño posible, las cantidades añadidas deben ser tales que
no sobrepasen el intervalo de trabajo. (OAA, 2003).
2.13.1 Blanco enriquecido
Se utiliza una mezcla preparada en el laboratorio de todos los componentes de la

matriz de la muestra sin el analito a determinar, luego el blanco se enriquece con
estándar. Como criterios de aceptación pueden ser tomados los siguientes:
1. El porcentaje de recuperación esperado debe encontrarse entre el 98%-102%. Lo cual
es equivalente a ± 2 % de error relativo.
2. Al graficar la cantidad recuperada contra la cantidad adicionada, debe obtenerse un
coeficiente de correlación de 1.00, una pendiente de 1.00 y el intercepto debe ser
0.00. Lo cual puede ser corroborado estadísticamente.
3. Cuando el análisis es a nivel de trazas, debe aceptarse lo descrito en la Tabla 2.13.2:
59
Tabla 2.13.2 Criterios de aceptación a nivel de trazas
Traza (ppb ó ng/L) Porcentaje de Recuperación
Sobre 100 80 - 100
Entre 1 y 100 70 - 110
Menos 1 60 - 120
Fuente: GVMA, s.f.
2.13.2 Muestra enriquecida
Cuando no es posible contar con un blanco, se determina por replicado el

contenido promedio del analito en la muestra con el método a validar; una vez conocido el
contenido promedio se procede a enriquecer las muestras con estándar. Para preparar las
soluciones, en este caso se mantiene constante la cantidad de muestra tomada y se
agregan cantidades variables del estándar.
En ambos casos se preparan soluciones de blanco o de muestras enriquecidas a
tres niveles de concentración diferentes, valores sugeridos en la literatura son 80, 100 y
120 % de la concentración normal de trabajo del método. ICH (International Conference
Harmonization), recomienda preparar muestras independientes por triplicado a cada nivel
de concentración. En el caso en que se trabaje con muestra enriquecida, para llevar a
cabo el cálculo del porcentaje de recuperación, se requiere contar con los datos de
contenido del analito en la muestra antes de la adición del estándar.
Los criterios de aceptación son los siguientes:
1. Los porcentajes de recuperación obtenidos, deben encontrarse dentro del 100% ± 4S,
donde S es la mayor desviación estándar obtenida en la determinación de la precisión
del método o del sistema.
2. Al graficar la respuesta del ensayo (cantidad total encontrada), contra la cantidad de
analito adicionada, la pendiente debe ser mayor o igual a 0.95 y el intercepto debe ser
igual a la concentración inicial.
60
3
TRAZABILIDAD E INCERTIDUMBRE
61
3.1 TRAZABILIDAD
“Trazabilidad es la propiedad de los resultados de una medición o el valor de un

patrón por medio del cual, la trazabilidad puede ser relacionada a referencias
establecidas, usualmente a patrones nacionales o internacionales, a través de una
cadena irrompible de comparaciones con incertidumbres expresadas”.
“De acuerdo a la VIM la trazabilidad se define como la propiedad del resultado de
una medición o del valor de un patrón, tal que éste puede ser relacionado a referencias
establecidas, generalmente patrones nacionales o internacionales, por medio de una
cadena ininterrumpida de comparaciones teniendo todas las incertidumbres
determinadas”.
Es importante poder comparar los resultados de diferentes laboratorios, o del
mismo laboratorio en diferentes momentos, con confianza. Esto es alcanzado al asegurar
que todos los laboratorios están usando la misma escala de medición para los mismos
“puntos de referencia”. En muchos casos, esto se logra al establecer una cadena de
calibraciones impulsada por los patrones nacionales e internacionales principales,
idealmente, por el Sistema Internacional (SI) de unidades de medición por su estabilidad a
largo plazo. Un ejemplo familiar es el caso de las balanzas analíticas: cada balanza es
calibrada usando masas de referencia las cuales son chequeadas a si misma con los
patrones nacionales y así al Kilogramo de referencia principal. Esta cadena irrompible de
comparaciones que nos lleva a un valor de referencia común conocido nos proporciona la
trazabilidad a un punto de referencia común, asegurando que operadores diferentes están
usando las mismas unidades de medición. En la medición de rutina, la estabilidad de las
mediciones entre un laboratorio y otro es de mucha ayuda para establecer la trazabilidad
para todas las mediciones intermedias pertinentes usadas para obtener o controlar el
resultado de la medición.
La trazabilidad, esta íntimamente ligada a la incertidumbre. La trazabilidad
proporciona los medios de colocar todas las mediciones relacionadas sobre una escala de
medición consistente, mientras la incertidumbre caracteriza la “fuerza” de las uniones en
la cadena y el acuerdo a convenir entre los laboratorios que hacen mediciones similares.
La incertidumbre de un resultado, el cual es fácil de trazar siguiendo una referencia
particular, será la incertidumbre de acuerdo a esta referencia junto con la incertidumbre al
hacer que la medición se relacione a esta referencia.
La trazabilidad del resultado del procedimiento analítico completo debería ser
establecida por una combinación de los siguientes procedimientos:
62
1. Uso de patrones trazables para calibrar el equipo de medición;

2. Uso o comparación de los resultados a un método principal;
3. Uso de un MR de una sustancia pura;
4. Uso apropiado de un Material de Referencia Certificado (MRC) de la matriz apropiada;
5. Uso de un procedimiento fielmente definido y aceptado.
3.1.1 Calibración del equipo de medición
En todos los casos, la calibración del equipo de medición usado debe ser trazable
a patrones apropiados. La etapa de cuantificación del proceso analítico es algunas veces
calibrada usando un material de referencia de una sustancia pura, cuyo valor es trazable
al SI. Esta práctica provee la trazabilidad de los resultados al SI para esta parte del
procedimiento. No obstante, es también necesario establecer la trazabilidad a los
resultados de operaciones anteriores a la etapa de la cuantificación, como por ejemplo,
extracción, y limpieza de muestra, usando procedimientos adicionales.
3.1.2 Mediciones Usando Métodos Principales
“Un método principal de medición es un método que tiene las más altas cualidades
metrológicas, cuya operación está completamente descrita y entendida en términos de
unidades del SI y cuyos resultados son aceptados sin referencia a un patrón de la misma
cantidad”.
El resultado de un método principal es normalmente trazable directamente al SI, y
es la incertidumbre alcanzable más pequeña con respecto a esta referencia. Los métodos
principales son normalmente implementados por los Institutos Nacionales de Medición y
son raramente aplicados a la calibración o prueba de rutina. Donde sea aplicable, la
trazabilidad a los resultados de un método principal es factible por comparación directa de
los resultados de la medición: el método principal y la prueba o el método principal y el
método de calibración.
63
3.1.3 Mediciones usando un Material de Referencia de una sustancia

pura
La trazabilidad puede ser demostrada con la medición de una muestra compuesta

o de una muestra que contenga una cantidad conocida de una sustancia pura del RM.
Esto puede ser alcanzado, por eliminación o por sumas de patrones. No obstante,
siempre es necesario evaluar la diferencia en respuesta al sistema de medición del patrón
utilizado y de la muestra a prueba. Desafortunadamente, para muchos análisis químicos y
en el caso particular de eliminación o sumas de patrones, tanto la corrección por la
diferencia en respuesta y su incertidumbre pueden ser grandes. Así, aunque la
trazabilidad del resultado a las unidades del SI puede, en principio, ser establecida, en la
práctica, en todos los casos más simples, la incertidumbre del resultado puede ser
inaceptablemente grande o igualmente incuantificable. Si la incertidumbre es
incuantificable entonces la trazabilidad no ha sido establecida.
3.1.4 Medición de un Material de Referencia Certificado (MRC)
La trazabilidad puede ser demostrada a través de la comparación de los resultados

de la medición de un MRC de la matriz certificada con los valores certificados. Este
procedimiento puede reducir la incertidumbre comparada con el uso de una sustancia
pura del MR donde hay un MRC disponible de la matriz apropiada. Si el valor del MRC es
trazable al SI, entonces estas mediciones proporcionan trazabilidad a las unidades del SI.
Sin embargo, igualmente en este caso, la incertidumbre en el resultado puede ser
inaceptable o igualmente incuantificable, particularmente si no hay una buena
combinación entre la composición de la muestra y el material de referencia.
3.1.5 Medición usando un procedimiento aceptado
Una adecuada comparación puede, a menudo, solamente ser alcanzada a través

de un procedimiento claramente definido y generalmente aceptado. Este procedimiento
será normalmente definido en términos de parámetros de entrada; por ejemplo, una serie
especifica de tiempos de extracción, tamaños de las partículas, etc. Los resultados de
aplicar tal procedimiento son considerados trazables cuando los valores de estos
parámetros de entrada son trazables a las referencias expresadas de la manera usual. La
incertidumbre en los resultados surge por las incertidumbres en los parámetros de entrada
64
especificados y por los efectos de una especificación incompleta y una variabilidad en la

ejecución. Cuando los resultados de un método alternativo o procedimiento cuentan con
ser comparados con los resultados de tal procedimiento aceptado, la trazabilidad de los
valores aceptados es alcanzada al comparar los resultados obtenidos con los
procedimientos alternos y aceptados. (EURACHEM/CITAC, 2000).
3.1.6 Materiales de referencia en la cadena de trazabilidad
“Una cadena de trazabilidad es una cadena de valores enlazados por mediciones,

la cual consiste de comparaciones de un valor con otro valor, terminando en la
comparación con el valor de la unidad que se ha elegido para expresar el resultado de
una medición”
La cadena de trazabilidad, se considera que esta constituida por valores
correspondientes al contenido de cantidad de sustancia (CCS), enlazados por
mediciones. Como ejemplo; la cadena valor-medición, la cual proporciona la cadena de
trazabilidad del valor del resultado de una medición hacia un valor conocido, el cual
corresponde al de la unidad que se eligió para expresar el resultado de la medición.
Generalmente se tiene el valor desconocido de una magnitud, el cual se conocerá
comparándolo con otro valor conocido de la misma magnitud, es decir, se mide la relación
(razón o cociente) de un valor desconocido a un valor conocido.
Esto traslada el problema de “establecer la trazabilidad de un valor” a “establecer
la trazabilidad a otro valor conocido”, el cual a su vez se vuelve a comparar con otro valor
conocido, y así sucesivamente. Este proceso es aceptable siempre y cuando termine en
algún lugar. Este proceso termina cuando se llega al valor el cual se conoce porque se ha
definido (y consecuentemente tiene una incertidumbre de cero). Este valor es el de la
unidad en la cual se quiere expresar el resultado de la medición.
Los elementos clave de la cadena de trazabilidad son los valores y eslabones (o
enlaces), estos valores son obtenidos como resultado de una medición.
Cada vez que se lleva a cabo una medición del contenido de cantidad de sustancia
y se emplea un material de referencia, dos cadenas de trazabilidad están involucradas,
una para el resultado de medición obtenido sobre la muestra desconocida y otra para el
valor portado por el material de referencia, estos materiales de referencia deben ser por
su naturaleza muy similares a la muestra.
65
3.1.6.1 Estándar interno
El analista busca un material de referencia (portando un valor), el cual puede

adicionar a su muestra cuyo CCS se desconoce, con el fin de realizar una comparación
(medición) del valor desconocido contra el valor portado por el material de referencia
adicionado como “estándar interno". A este material de referencia se le puede llamar
patrón de cantidad de sustancia debido a que tiene la función esencial de servir como
comparación para determinar el valor del CCS en la cadena de trazabilidad.
El papel del productor de materiales de referencia, es reducir la carga de trabajo
del analista, suministrando la cadena de trazabilidad del valor conocido del material de
referencia, contra el cual el analista debe medir para determinar el valor desconocido de
la muestra. Es decir, se libera al analista de establecer la cadena de trazabilidad por sí
mismo.
El acceso a patrones de medición nacionales apropiados es más complicado en
los países cuyas instituciones nacionales de metrología no poseen los patrones
pertinentes ni las mejores capacidades de medición necesarias para apoyar las
actividades de calibración y ensayo de todos los laboratorios acreditados.
3.1.6.2 Factor de corrección en la cadena de trazabilidad para un MR
El analista busca un MR que le permita establecer el valor del contenido de

cantidad de sustancia en la muestra desconocida (contenida en una matriz específica),
con la mayor exactitud y menor incertidumbre posible. Es decir, si la muestra antes de la
medición se somete a procesos de separación como digestión y extracción, el analista
tendrá la sospecha de que el valor del contenido de cantidad de sustancia en la muestra
original pudiera sufrir algún cambio de una forma tal que la cadena de trazabilidad no sea
confiable y se rompa. De manera que existe una duda, entre el valor que el analista
calcula al final de la medición y el valor que realmente midió. Para este caso, se requiere
un factor de “corrección” K ( a E , X ) , según la ecuación siguiente:
b( a E , X )muestra = K ( a E , X ) · b( a E , X )obs · muestra 3.1.1
66
Para obtener un valor estimado de este factor de corrección, el analista emplea un

material de referencia de matriz ‘ Z ’, similar pero no idéntico, al del material ‘ X ’, el cual
debe medir. El analista realizará las mismas operaciones sobre una muestra del material
de referencia de matriz ‘ Z ’, que en la muestra de matriz ‘ X ’. Se conoce el valor del
contenido de cantidad de sustancia b( a E , Z )MRC proporcionado por el proveedor del
material de referencia. El valor b( a E , Z )obs· MRC lo determina el analista, por consiguiente,
se puede calcular un valor del factor de corrección K ( a E , Z ) para las pérdidas durante las
operaciones químicas como digestión y extracción.

Este proceso se puede describir de acuerdo a la ecuación siguiente:
b( a E , Z )MRC
K ( a E, Z ) =
b( a E , Z )MRC ·obs
3.1.2
El analista, ahora puede sustituir el factor de corrección desconocido K ( a E , X ) de
la ecuación 3.1.1, por el factor de la ecuación 3.1.2. El analista únicamente sustituye

K ( a E , X ) por K ( a E , Z ) . Sin embargo, la incertidumbre asociada a esta sustitución debe
ser evaluada en virtud de que la matriz de ambas muestras es diferente y las mediciones
se realizaron en condiciones no idénticas. En este caso la función del material de
referencia no se ubica dentro de la cadena de trazabilidad, sino fuera de ésta, permitiendo
al analista hacer un aseguramiento independiente de la magnitud del valor de corrección
K , y dando la posibilidad de reducir la incertidumbre de medición, al emplear ésta. Sin
embargo, el realizar o no la corrección es un asunto que se encuentra en debate debido a
las implicaciones técnicas del resultado corregido de las mediciones. Por tal motivo,
puede ser empleado de acuerdo a la experiencia y juicio del usuario, proporcionando un
soporte o indicación de la magnitud de las perdidas sufridas por la muestra. (CENAM,
2004).
3.1.7 Caracterización de la trazabilidad
El propósito de exigir la incertidumbre es asegurar que las mediciones sean

representaciones adecuadas de la cantidad específica sujeta a medición, dentro de la
incertidumbre de la medición. (ONA, 2004).
67
La trazabilidad se caracteriza por cinco elementos esenciales:

1. Una cadena ininterrumpida de comparaciones: La cadena debe de tener origen en
patrones de medición nacionales o internacionales, que realicen las unidades del SI.
Incertidumbre de la medición. La incertidumbre de la medición para cada eslabón en la
cadena de trazabilidad debe ser calculado de acuerdo a métodos definidos y debe ser
declarado en cada eslabón de la cadena, de tal forma que se pueda calcular la
incertidumbre global para toda la cadena.
2. Documentación: Cada eslabón en la cadena debe ser ejecutado de acuerdo a
procedimientos documentados y generalmente reconocidos y los resultados deben ser
registrados, por ejemplo, en un informe de ensayo o certificado de calibración.
3. Competencia: Los laboratorios que ejecutan uno o más eslabones en la cadena
deben proveer evidencia de su competencia técnica, por ejemplo, demostrando que
están acreditados por un organismo de acreditación.
4. Referencia a unidades del SI: cuando sea posible, los patrones nacionales,
internacionales o intrínsecos deben ser patrones primarios para la realización de las
unidades del SI;
5. Recalibraciones: las calibraciones deben ser repetidas a intervalos apropiados, de tal
forma que se preserve la trazabilidad del patrón. La amplitud de estos intervalos
depende de un gran número de variables (por ejemplo: incertidumbre requerida,
frecuencia de uso, forma de uso, estabilidad del equipo).
a. Todas las calibraciones en equipos de ensayo y medición, patrones de
referencia y materiales de referencia sean llevadas a cabo por laboratorios de
calibración acreditados (en algunos casos, un laboratorio de ensayo acreditado
también puede ser capaz de satisfacer los requisitos de trazabilidad) o por un
instituto nacional de metrología reconocido.
b. Estas calibraciones deben estar documentadas en un certificado de calibración
o informe que contenga el logotipo del organismo de acreditación, o hacer
referencia de otra manera a la condición de acreditado.
c. Todos los laboratorios deben definir su política para alcanzar la trazabilidad de
las mediciones y, si se aplica, para alcanzar también la trazabilidad de
materiales de referencia. La política debe estar de acuerdo con este
documento.
68
3.2 DEFINICIÓN DE INCERTIDUMBRE
En concordancia con el Vocabulario Internacional de Términos Fundamentales y

Generales de Metrología (VIM), la incertidumbre se define como el parámetro que
caracteriza la dispersión de los valores atribuidos a un mensurando, con base en la
información usada en determinadas pruebas de laboratorio.
Para esta definición se debe considerara que:
• La incertidumbre de una medida incluye componentes provenientes de efectos
sistemáticos, tales como componentes asociadas a correcciones y a los valores
asignados de patrones de medida, así como a la incertidumbre intrínseca. Algunas
veces no se corrigen los efectos sistemáticos y en su lugar se tratan como
componentes de la incertidumbre.
• El parámetro puede ser por ejemplo, una desviación estándar en cuyo caso se
denomina incertidumbre estándar de medición (o un múltiplo de ella), o el semiancho
de un intervalo a un nivel de confianza determinado.
• En general la incertidumbre de medida comprende muchos componentes. Algunos de
éstos pueden ser evaluados por una evaluación tipo A de la incertidumbre de medida
a partir de la distribución estadística de valores que provienen de series de mediciones
y pueden caracterizarse por desviaciones estándar experimentales. Las otras
componentes, que pueden ser evaluadas por evaluación tipo B de la incertidumbre de
medida, pueden caracterizarse también por desviaciones estándar, evaluadas a partir
de funciones de densidad de probabilidad con base en la experiencia o en otra
información.
Incertidumbre es la duda que se tiene del resultado de una medición por los
errores aleatorios de causas comunes presentes en el momento en que se lleva a cabo la
medición más todos aquellos que se heredan por otras causas. Tales como los siguientes:
trazabilidad de los materiales de referencia, errores instrumentales, correcciones, etc.
La incertidumbre de la medición no implica una duda acerca de la validación de
una medición; por el contrario, el conocimiento de la incertidumbre implica confianza
creciente en la validación del resultado de una medición.
Incertidumbre es la estimación que caracteriza el intervalo de valores dentro de los
cuales se puede encontrar el valor verdadero de la magnitud medida.
69
La incertidumbre del resultado de una medición está formada por varios

componentes. Algunos de los componentes pueden ser evaluados a partir de
distribuciones estadísticas del resultado de series de mediciones y caracterizado por
desviaciones normales experimentales. Otros componentes son evaluados asumiendo
distribuciones de probabilidad basadas sobre la experiencia u otra información y
caracterizados también como desviaciones normales. El resultado de una medición refleja
el grado exacto de conocimiento del valor verdadero del mensurando.
El resultado de una medición, después de ser corregido por efectos sistemáticos
conocidos, es considerado como un estimado del valor del mensurando ya que existe una
incertidumbre por los errores aleatorios y los efectos de imperfecciones en las
correcciones aplicadas. (FAO, 2006).
Todas las medidas experimentales vienen afectadas de cierta imprecisión
inevitable, y uno de los objetivos del cálculo de incertidumbres consiste, precisamente, en
acotar el valor de dichas imprecisiones: las incertidumbres experimentales.
Dado que el valor de las magnitudes físicas se obtiene experimentalmente como
resultado de medidas, debe admitirse como un postulado físico el hecho de que resulta
imposible llegar a conocer el valor exacto de una magnitud, ya que los procesos
experimentales de comparación con el patrón correspondiente en las medidas directas
vienen siempre afectados de imprecisiones inevitables.
La estimación de la incertidumbre que acompaña a una medida, o al resultado de
un experimento, no siempre es sencilla. Ello es debido a que en el proceso de medida
intervienen un gran número de factores externos que no podemos controlar, los cuales
afectan de forma imprevisible al resultado de aquél.
Si las mediciones se hacen directamente, la incertidumbre dependerá, tanto de la
sensibilidad del aparato utilizado, como de la habilidad y cuidado empleados por el
experimentador. Pero si la magnitud a determinar proviene de otras magnitudes a través
de una dependencia funcional, el problema de la precisión del resultado se complica y
debe ser tratado mediante criterios estadísticos.
70
3.3 ERROR E INCERTIDUMBRE
3.3.1 Errores sistemáticos y errores accidentales
Ningún experimento en el que se mide una cierta magnitud es absolutamente

preciso, es decir, el resultado de la medida no coincide exactamente con el valor real de la
magnitud. Si queremos utilizar el experimento para comprobar una teoría es necesario
estimar la desviación del valor medido con respecto al valor real. La teoría de errores
estudia cómo estimar esta desviación.
Los errores de medida pueden clasificarse en errores sistemáticos y errores
accidentales. Los errores sistemáticos son aquellos que se producen, bien por un defecto
de los aparatos de medida utilizados, bien por su empleo erróneo por el observador
(incorrecta calibración, posición del cero, etc.). Estos errores pueden eliminarse
modificando el instrumento de medida o el método de trabajo, según el caso. En lo que
sigue, no nos ocuparemos de este tipo de errores que con frecuencia son difíciles de
detectar.
Los errores accidentales son aquellos que se deben a causas imponderables y,
por tanto, imposibles de controlar. Por ejemplo, pequeñas vibraciones producidas por
algún agente externo al experimento, fluctuaciones de las variables termodinámicas de
estado, o la imperfección del método aplicado. Estos errores pueden afectar, en cualquier
sentido, al valor final de la medida. Para controlar el efecto pernicioso que introducen en
la medida, debemos repetir la medida de la magnitud física en estudio y tomar como valor
de ésta la media de los valores medidos. Este valor medio tenderá, estadísticamente, al
valor de dicha magnitud.
En un procedimiento experimental que nos proporciona el valor de una magnitud
X, el resultado no coincide exactamente con el valor real de dicha magnitud. La diferencia
entre el valor real y el valor medido se llama error de la medida:
ε = X med − X real 3.3.1
El error es siempre desconocido, pero puede estimarse una cota superior para su
valor absoluto. Esta cota se denomina incertidumbre de la medida y se denota por ∆X. De
la definición de error y de incertidumbre deducimos que el valor real de la medida se
encuentra en el intervalo:
71
X real ε [X med − ∆X , X med + ∆X ] 3.3.2
Gráficamente podemos representar esta situación de la siguiente forma:
X real
X med − ∆X X med + ∆X
Figura 3.3.1 Representación del error
X med : Se encuentra en el punto medio del intervalo. Por ello, el resultado de una
medida se escribe siempre en la forma:
X = X medida ± ∆X 3.3.3
A veces es útil comparar el error de una medida con el valor de la misma. Se

define para ello el error relativo de una medida como el cociente:
∆X
δ= 3.3.4
X med
3.3.2 Incertidumbre absoluta e incertidumbre relativa
Como consecuencia de la imprecisión inevitable de la medida de una magnitud,

resulta imposible conocer el verdadero valor de la misma. Así pues, el resultado de
cualquier medida, x, no deberá ser nunca un simple valor, sino que éste irá acompañado
de su correspondiente cota de incertidumbre, denominada sensibilidad o incertidumbre
absoluta, s(x).
Ahora bien, la incertidumbre absoluta no siempre es significativa. Una
incertidumbre de 1 cm. en la medida del diámetro de un balón de fútbol es inadmisible,
mientras que la misma incertidumbre en la medida de un campo de fútbol carece de
72
importancia. Por ello, es preciso recurrir a la incertidumbre relativa que se define como el
cociente entre la incertidumbre absoluta y el correspondiente valor de la magnitud:
σ (x )
σ r (x ) = 3.3.5
x
Es evidente que cuanto menor sea la incertidumbre relativa, más precisa habrá
sido la medida realizada. Las incertidumbres relativas se suelen expresar en porcentaje,
es decir, la relación anterior se utiliza en la práctica en la forma:
σ (x )
σ r (x ) = * 100% 3.3.6
x
3.3.3 Diferencia entre error e incertidumbre
El error es definido como la diferencia entre un resultado individual y el valor

verdadero de la medición. Como tal, el error es un valor único. En principio, el valor de un
error conocido puede ser aplicado como una corrección para el resultado. El error es un
concepto idealizado y los errores no pueden ser conocidos exactamente.
La incertidumbre, por otro lado, toma la forma de un rango y, si es estimada para
un procedimiento analítico y un tipo de muestra definida puede aplicarse a todas las
determinaciones así descritas. En general, el valor de la incertidumbre no puede ser
usado para corregir un resultado de la medición.
Para ilustrar más la diferencia, el resultado de un análisis después de la corrección
puede, por casualidad, estar muy cerca del valor del “mesurando”, y por consiguiente
tener un error insignificante. Sin embargo, la incertidumbre puede todavía ser muy grande,
simplemente porque el analista está muy inseguro de qué tan cerca está el resultado del
valor.
La incertidumbre del resultado de una medición nunca debería ser interpretada
como la representación del error por si mismo, ni como la permanencia del error después
de la corrección. (EURACHEM, 2000).
73
Error
Error sistemático Error aleatorio
Error sistemático Error sistemático

conocido desconocido
Corrección Error remanente Incertidumbre
Resultado
X ± Incertidumbre
Figura 3.3.2 Deducción de la incertidumbre de una medida
3.4 MODELOS FÍSICO Y MATEMÁTICO
Pretender estudiar el proceso de medición de manera exacta y completa está

usualmente fuera de las actividades rutinarias del analista, más aún, es el propósito de la
investigación científica, cuya solución pocas veces se vislumbra. Por lo tanto, es
necesaria la simplificación del fenómeno o de la situación real conservando las
características más relevantes para el propósito pretendido, mediante la construcción de
un modelo para la medición.
Un modelo físico de la medición consiste en el conjunto de suposiciones sobre el
propio mensurando y las variables físicas o químicas relevantes para la medición. Estas
suposiciones usualmente incluyen:
a. Relaciones fenomenológicas entre variables;
b. Consideraciones sobre el fenómeno como conservación de cantidades,
comportamiento temporal, comportamiento espacial, simetrías;
c. Consideraciones sobre propiedades de la sustancia como homogeneidad e isotropía.
74
Una medición física, por simple que sea, tiene asociado un modelo que sólo
aproxima el proceso real.
El modelo físico se representa por un modelo descrito con lenguaje matemático. El
modelo matemático supone aproximaciones originadas por la representación imperfecta o
limitada de las relaciones entre las variables involucradas.
Considerando a la medición como un proceso, se identifican magnitudes de
entrada denotadas por el conjunto {X i } . Expresión en la cual el índice ‘ i ’ toma valores
entre 1 y el número de magnitudes de entrada ‘ N ’.

La relación entre las magnitudes de entrada y el mensurando Y como la magnitud
de salida se representa como una función:
Y = f ({X i }) = f ( X 1 , X 2 ,L, X N ) 3.4.1
Representada por una tabla de valores correspondientes, una gráfica o una

ecuación. Por ejemplo, la viscosidad es proporcional al tiempo de flujo por un viscosímetro
capilar como relación funcional, en contraste al desconocimiento de su relación funcional
con la temperatura.
Aunque para el propósito de este trabajo se considerará Y como un escalar, puede
aplicarse el mismo formalismo para elementos matemáticos más complejos como
vectores o matrices.
Aquí se denota con ‘ xi ’ al mejor estimado de las magnitudes de entrada ‘ X i ’.
Los valores de las magnitudes de entrada pueden ser resultados de mediciones

recientes realizadas por el usuario o tomados de fuentes como certificados, literatura, etc.
El mejor estimado y del valor del mensurando es el resultado de calcular el valor
de la función ‘ f ’ evaluada en el mejor estimado de cada magnitud de entrada ‘ xi ’,
y = f ( x1 , x2 ,L, xN ) 3.4.2
En algunas ocasiones se toma el mejor estimado de Y como el promedio de varios

valores ‘ yi ’ del mensurando obtenidos a partir de diversos conjuntos de valores {X i }j de
las magnitudes de entrada. (CENAM, 2004).
75
3.5 FUENTES DE LA INCERTIDUMBRE
Éstas provienen de los diversos factores involucrados en la medición, entre estos

se mencionan:
1. Los resultados de la calibración del instrumento;
2. La incertidumbre del patrón o del material de referencia;
3. La repetibilidad de las lecturas;
4. La reproducibilidad de las mediciones por cambio de observadores, instrumentos u
otros elementos;
5. Características del propio instrumento, como resolución, histéresis, deriva, etc.;
6. Variaciones de las condiciones ambientales;
7. La definición del propio mensurando;
8. El modelo particular de la medición;
9. Variaciones en las magnitudes de influencia.
No es recomendable desechar alguna de las fuentes de incertidumbre por la

suposición de que es poco significativa sin una cuantificación previa de su contribución,
comparada con las demás y apoyada en mediciones. Es preferible la inclusión de un
exceso de fuentes que ignorar algunas entre las cuales pudiera descartarse alguna
importante. No obstante, siempre estarán presentes efectos que la experiencia,
conocimientos y actitud crítica del metrólogo permitirán calificar como irrelevantes
después de las debidas consideraciones.
Por ejemplo, en la calibración de termómetros de mercurio en vidrio aparece una
pequeña contribución de la temperatura ambiente, pero se considera despreciable aquella
contribución debida a la radiación electromagnética en el ambiente. (CENAM, 2004).
Las fuentes de incertidumbre identificadas en la determinación de cualquier analito
mediante cualquier método analítico pueden agruparse en cuatro componentes:
1. Incertidumbre debida a la precisión;
2. Incertidumbre debida a la verificación de la trazabilidad;
3. Incertidumbre debida a la heterogeneidad de la muestra; y
4. Incertidumbre debida a otros términos.
En la siguiente ecuación se muestran las componentes de incertidumbre con

estrategia basada en utilizar información generada durante la verificación de la
trazabilidad.
76
U = k ∗ u 2precisión + utrazabilid
2
ad + u heterogeneidad + uotros
2 2
3.5.1
Los dos primeros términos de la expresión se pueden obtener utilizando la

información generada durante el proceso de verificación de la trazabilidad. La
incertidumbre debida a la precisión corresponde a la variabilidad experimental del método
analítico, y en ella se incluyen las fuentes de incertidumbre asociadas a todas las etapas
del método analítico, pero consideradas de una forma global. En este caso en concreto se
incluye la precisión de la balanza, las etapas de extracción, la recta de calibrado, la
recuperación y la precisión del material volumétrico. El segundo término, u2trazabilidad, es
considerado como la incertidumbre asociada a asegurar que el método proporciona
resultados trazables. Para asegurar esto se debe analizar el CRM, con los consiguientes
componentes de error asociados (incertidumbre del propio material y los mismos términos
de incertidumbre asociados a la precisión del método, u2precisión). El tercer término de la
expresión considera la incertidumbre asociada a la heterogeneidad de las muestras. Esto
es debido a que como el CRM es una muestra homogénea, la u2trazabilidad no tiene en
cuenta las etapas de homogeneización que se tendrán que aplicar a las futuras muestras
de rutina. Por último, el cuarto término, podría incorporar la incertidumbre asociada a la
variabilidad de las matrices de las muestras de rutina. (Maroto, s.f.).
3.6 CALCULO DE LA INCERTIDUMBRE
Según el método de evaluación utilizado para estimar su valor numérico, la

incertidumbre estándar del resultado de una medición puede agruparse en una de las
siguientes categorías:
1. Tipo A: la incertidumbre estándar se obtiene de una función de densidad de
probabilidad derivada de una distribución de frecuencias observadas, lo que implica la
elaboración estadística de series de mediciones.
2. Tipo B: la incertidumbre estándar se obtiene de una función de densidad de
probabilidad asumida, basada en un grado de confianza de que el evento ocurrirá
(frecuentemente llamado probabilidad subjetiva). La evaluación Tipo B de una
componente de la incertidumbre generalmente se basa en un conjunto de información
confiable.
77
Ambos tipos de clasificaciones de las componentes de la incertidumbre de la

medición se basan:
a. En distribuciones de probabilidades,
b. En el uso de las varianzas y las desviaciones estándares para su cuantificación.
Estas categorías aplicadas a la evaluación de la incertidumbre de los componentes

de la medición no sustituyen a los términos “aleatorio” y “sistemático”.
3.6.1 Evaluación tipo A
Una incertidumbre estándar de tipo A puede obtenerse por cualquier método

estadístico que ofrezca un estimado válido de la dispersión de los datos.
3.6.1.1 Primer caso
La magnitud de entrada ‘ X ’ se estima a partir de ‘ n ’ mediciones independientes

‘ xi ’, bajo condiciones de repetibilidad.
En la mayoría de las mediciones, el mejor estimado disponible de la esperanza

‘ µ X ’ de una magnitud ‘ X ’ que varía aleatoriamente en ‘ n ’ observaciones independientes
xi (i = 1,2,3L, n ) , bajo condiciones de repetibilidad, es la media aritmética o promedio x :
1 n
x= ∑ xi
n i =1
3.6.1
()
La varianza del promedio s 2 x es un estimador insesgado de la varianza de la
( )
media de las muestras σ 2 X , y se determina según la siguiente ecuación:
s 2 (x )
s 2 (x ) = 3.6.2
n
Donde:
78
s 2 ( x ) : Es la varianza experimental de las observaciones y se determina, según:
∑ (x − xi )
1 n
s (x ) =
2
3.6.3
n − 1 i =1
La desviación estándar del promedio es la raíz cuadrada positiva de la varianza del

promedio, que se expresa como:
s( x )
s (x ) = 3.6.4
n
()
La desviación estándar experimental del promedio s x es la estadística utilizada
para la cuantificación de la incertidumbre estándar de la medición:
u ( X ) = s(x ) 3.6.5
Donde:
u ( X ) : es llamada incertidumbre estándar de tipo A.
En este simple caso, los grados de libertad ‘ν ’ de la variable aleatoria continua
‘ X ’, se determinan a partir de ‘ n ’ observaciones independientes, según:
ν = n −1 3.6.6
Los grados de libertad siempre deben estar disponibles cuando se documentan las
evaluaciones de las componentes de incertidumbre de tipo A.
Si las variaciones aleatorias en las observaciones de una magnitud de entrada
están correlacionadas, por ejemplo, con el tiempo, entonces el promedio y la desviación
estándar experimental del promedio pueden ser estimadores inapropiados de los
estadísticos deseados.
En estos casos, las observaciones no se distribuyen según la distribución normal y
deben analizarse mediante métodos estadísticos especialmente diseñados para el
tratamiento de series de mediciones correlacionadas que varían aleatoriamente.
79
3.6.1.2 Segundo caso: Evaluación de la incertidumbre de la medición mediante el

análisis estadístico de los datos obtenidos de un diseño experimental
Este es el caso, más complejo que el primero, del llamado Análisis de Varianza
(ANOVA), que si bien persigue otros objetivos también permite las evaluaciones Tipo A de
las componentes de la incertidumbre mediante el diseño de secuencias anidadas de
mediciones del mensurando variando los valores de las magnitudes de entrada de las que
depende.
Existen diferentes modelos incluidos bajo el nombre general de ANOVA y son
utilizados exitosamente en muchas situaciones de mediciones encontradas en la práctica,
sin embargo, es poco probable lograr la variación de todas las magnitudes de entrada
debido a las limitaciones en tiempo y recursos por lo que normalmente se evalúan solo
algunas componentes de incertidumbre utilizando estos métodos.
3.6.1.3 Tercer caso: la incertidumbre estándar mancomunada o histórica
En el caso de mediciones que se realicen bajo control estadístico en el cual está

determinada una desviación estándar del comportamiento de las mediciones
( )
mancomunadas o históricas s p , como incertidumbre de la medición realizada podría
utilizarse:
sp
u (x ) = 3.6.7
n
Donde:
n : es el número de réplicas de mediciones en el caso particular.
La incertidumbre estándar mancomunada tiene una especial importancia en los

niveles más bajos de la cadena de calibración, donde los patrones de referencia
constituyen prácticamente “valores verdaderos” al ser calibrados en Laboratorios
Nacionales o Primarios, de manera que la incertidumbre del resultado de la calibración
comprende una sola componente y es la incertidumbre estándar de tipo A calculada a
partir de la desviación estándar mancomunada del procedimiento de medición s p . (ECA,
2004).
80
3.6.2 Evaluación tipo B
La evaluación Tipo B de la incertidumbre típica es la evaluación de la

incertidumbre asociada a un estimado xi de una magnitud de entrada X i por otros
medios distintos al análisis estadístico de una serie de observaciones. La incertidumbre

típica u ( xi ) se evalúa aplicando un juicio científico basado en toda la información
disponible sobre la posible variabilidad de X i . Los valores que caigan dentro de esta
categoría pueden derivarse de:

• Datos obtenidos de mediciones anteriores;
• Experiencia o conocimientos generales sobre el comportamiento y las propiedades de
los materiales e instrumentos relevantes;
• Especificaciones de los fabricantes;
• Datos obtenidos de calibraciones y de otros certificados;
• Incertidumbres asignadas a los datos de referencia obtenidos de manuales.
El uso apropiado de la información disponible para una evaluación Tipo B de la

incertidumbre típica de medición exige un juicio basado en la experiencia y en
conocimientos generales. Es una destreza que puede adquirirse con la práctica. Una
evaluación Tipo B de la incertidumbre típica que tenga una base sólida puede ser tan
fiable como una evaluación Tipo A, especialmente cuando ésta se basa sólo en un
número comparativamente pequeño de observaciones estadísticamente independientes.
Deben distinguirse los siguientes casos:
1. Cuando sólo se conoce un valor único de la magnitud X i , por ejemplo, el valor de una
única medición, el valor resultante de una medición previa, un valor de referencia

obtenido de la literatura o el valor de una corrección, este valor debe utilizarse como
xi . La incertidumbre típica u (xi ) asociada a xi debe adoptarse siempre que se
conozca. En caso contrario, debe calcularse a partir de datos inequívocos sobre la
incertidumbre. Si no se dispone de este tipo de datos, la incertidumbre tendrá que
estimarse sobre la base de la experiencia.
2. Cuando se pueda suponer una distribución de probabilidad para la magnitud X i , ya
sea basándose en la teoría o en la experiencia, la expectativa o valor esperado y la
81
raíz cuadrada de la varianza de su distribución deben tomarse como el estimado xi y
la incertidumbre típica asociada u ( xi ) , respectivamente.
3. Si sólo pueden estimarse unos límites superior e inferior a+ y a− para el valor de la
magnitud X i (por ejemplo, especificaciones del fabricante de un instrumento de
medición, intervalo de temperaturas, error de redondeo o de truncamiento resultante

de la reducción automatizada de los datos), puede suponerse una distribución de
probabilidad con una densidad de probabilidad constante entre dichos límites
(distribución de probabilidad rectangular) para la variabilidad de la magnitud de
entrada X i . Según el anterior caso (2), se obtiene de acuerdo a la sección 3.7.1.2:
La distribución rectangular es una descripción razonable en términos de

probabilidad del conocimiento que se tenga sobre la magnitud de entrada X i cuando no
existe ninguna otra información más que sus límites de variabilidad. Pero si se sabe que
los valores de la magnitud en cuestión próximos al centro del intervalo de variabilidad son
más probables que los valores próximos a los extremos, un modelo más adecuado sería
una distribución triangular o normal. Por otro lado, cuando los valores cercanos a los
extremos son más probables que los valores cercanos al centro, es más apropiada una
distribución con forma de U. (CEA, 1998).
3.6.3 Consideraciones en el cálculo de la incertidumbre
1. Como el tiempo y los recursos necesarios para la evaluación de la incertidumbre de la

medición mediante métodos estadísticos son escasos en la práctica, la incertidumbre
del resultado de la medición se evalúa generalmente mediante el desarrollo de un
modelo matemático de la medición y la Ley de propagación de la incertidumbre.
2. El alcance de la modelación matemática de la medición lo definirá la exactitud
requerida por la propia medición.
3. Como el modelo matemático de la medición puede estar incompleto, todas las
magnitudes influyentes deben variarse tanto como la práctica lo permita, de manera
que la evaluación de la incertidumbre esté basada en lo posible, en datos observados.
4. Siempre que sea posible, el uso de los modelos matemáticos empíricos de la medición
deben basarse en:
82
a. Datos obtenidos a largo plazo,

b. El uso de los patrones de comprobación y las Cartas de Control que indiquen si
una medición está bajo control estadístico,
c. En experimentos bien diseñados.
5. La incertidumbre estándar asociada a una corrección se desprecia si su contribución a
la incertidumbre del resultado de la medición es insignificante.
6. Si el valor de la corrección es insignificante con respecto a la incertidumbre del
resultado de la medición, también se desprecia.
7. Los errores groseros en el registro o análisis de datos pueden introducir un error
desconocido significativo en el resultado de una medición. Los errores grandes se
pueden identificar generalmente durante la revisión de los datos, sin embargo, los
pequeños pueden no ser detectados o confundirse con variaciones aleatorias. La
medición de la incertidumbre no considera tales errores.
3.7 DETERMINACIÓN DE LA INCERTIDUMBRE
3.7.1 Incertidumbre estándar
Con el fin de combinar contribuciones de la incertidumbre que tienen distribuciones

diferentes, es necesario representar los valores de las incertidumbres originales como
incertidumbres estándar. Para ello se determina la desviación estándar de la distribución
asignada a cada fuente.
3.7.1.1 Distribución normal
La desviación estándar experimental de la media calculada a partir de los

resultados de una medición repetida según la ecuación 3.6.4, ya representa la
incertidumbre estándar.
Cuando se dispone de valores de una incertidumbre expandida ‘ U ’ y la
distribución del mensurando es o se supone normal, como los presentados por ejemplo en
certificados de calibración, se divide ‘ U ’ entre el factor de cobertura ‘ k ’, obtenido ya sea
83
directamente o a partir de un nivel de confianza ‘ p ’ dado, para obtener la incertidumbre

estándar:
u ( xi ) =
U
3.7.1
k
3.7.1.2 Distribución rectangular
Si la magnitud de entrada ‘ X i ’ tiene una distribución rectangular con el límite
superior ‘ a+ ’ y el límite inferior ‘ a− ’, el mejor estimado para el valor de ‘ X i ’ está dado por:
a+ + a−
xi = 3.7.2
2
Y la incertidumbre estándar se calcula por:
a+ − a−
u ( xi ) = u ( xi ) =
a
Ó 3.7.3
12 2 3
Donde a es el semiancho del intervalo a con:

2
a = a+ − a− 3.7.4
Una aplicación típica es la resolución de un instrumento digital. También la

incertidumbre relacionada con el número finito de cifras significativas de datos tomados de
la literatura puede ser tratada con esta distribución (siempre y cuando no haya indicios
que la incertidumbre en realidad es mayor que la incertidumbre relacionada con la última
cifra significativa). Si se aplica a la resolución o a datos tomados de la literatura, ‘ a ’
corresponde al último dígito significativo o a la última cifra significativa respectivamente.
84
3.7.1.3 Distribución triangular
Como en una distribución rectangular, para una magnitud de entrada ‘ X i ’ que
tiene una distribución triangular con los límites ‘ a+ ’ y ‘ a− ’, el mejor estimado para el valor
de ‘ X i ’ está dado por la ecuación 3.7.2.
La incertidumbre estándar se calcula en este caso por:
a+ − a−
u ( xi ) = u ( xi ) =
a
Ó 3.7.5
24 2 6
Con a definido por la ecuación 3.7.4. (CENAM, 2004).
3.7.2 Incertidumbre estándar combinada
Hay muchos casos en donde las magnitudes de los componentes de la

incertidumbre varían con el del analito. Por ejemplo, las incertidumbres en recuperación
pueden ser más pequeñas para los niveles altos del material, o las señales
espectroscópicas pueden variar al azar en una escala aproximadamente proporcional a la
intensidad (coeficiente constante de variación). En tales casos, es importante tomar en
cuenta los cambios en la incertidumbre estándar combinada con el nivel del análisis. Los
planteamientos incluyen:
• Restricción del procedimiento especificado o del estimado de la incertidumbre a un
rango más pequeño de concentraciones del analito.
• Entrega de un estimado de la incertidumbre en la forma de una desviación estándar
relativa.
• Cálculo explícito de la dependencia y recálculo de la incertidumbre de un resultado en
particular.
3.7.2.1 Combinación de incertidumbres cuando las variables son independientes
La relación general entre la incertidumbre estándar combinada uC ( y ) de un valor
‘ y ’, y la incertidumbre de los parámetros independientes x1 , x2 K xn , sobre los que
depende, es:
85
n
uC2 ( y ( x1 , x2 K xn )) = ∑ (ciu ( xi ))
2
3.7.6
i =1
n
uC2 ( y ( x1 , x2 K xn )) = ∑ u 2 ( y, xi ) 3.7.7
i =1
Donde:
y ( x1 , x2 K xn ) : Es una función de los parámetros x1 , x2 K xn .
ci : Es un coeficiente de sensibilidad evaluado como:
∂y
ci = 3.7.8
∂xi
u ( y, xi ) : Denota la incertidumbre de ‘ y ’ originada de la incertidumbre en xi .
Cada contribución de la variable u ( y , xi ) es justamente el cuadrado de la
incertidumbre asociada y expresada como una desviación estándar multiplicada por el

cuadrado del coeficiente de sensibilidad pertinente. Estos coeficientes de sensibilidad
describen cómo el valor de ‘ y ’ varía con los cambios en los parámetros x1 , x2 K xn .
Los coeficientes de precisión pueden también ser evaluados directamente por un

experimento; esto es particularmente valioso donde no existe una descripción matemática
fidedigna de la relación. (EURACHEM/CITAC, 2000).
3.7.2.2 Combinación de incertidumbres cuando las variables son dependientes
Cuando las variables son dependientes, la relación es más compleja, y es

expresada como:
n −1
u 2 ( y (xi , jK )) = ∑ (ci u ( xi )) + ∑ ∑ ci c j u (xi , x j )
n n
2
3.7.9
i =1 i =1 j = i +1
Donde:
86
ci , c j : Son coeficientes de sensibilidad, descritos y evaluados en la sección

3.7.2.1.
u (xi , x j ) : Es la covarianza entre ‘ xi ’ y ‘ x j ’ y está relacionada con el coeficiente
de correlación rij , y es evaluada como:
u (xi , x j ) = u (xi ) · u (x j )· rij

3.7.10
Donde: − 1 ≤ rij ≤ 1
Estos procedimientos generales se aplican sea que las incertidumbres están

relacionadas a parámetros aislados, a parámetros agrupados o al método como un todo.
Sin embargo, cuando la contribución de una incertidumbre está asociada al procedimiento
completo, es usualmente expresada como un efecto sobre el resultado final. En tales
casos, o cuando la incertidumbre de un parámetro es expresada directamente en términos
de su efecto sobre
∂y , el coeficiente de sensibilidad es igual a 1.0.
∂x
Excepto para los casos anteriores, cuando el coeficiente de sensibilidad es igual a
uno y para los casos especiales dados en el apartado 3.7.2.3, el procedimiento general,
requiere que deba ser empleada la generación de la diferenciación parcial ó el equivalente
numérico.
3.7.2.3 Reglas particulares para el cálculo de la incertidumbre
En algunos casos, las expresiones para la combinación de las incertidumbres se

reducen a formas más simples. Dos reglas simples para la combinación de
incertidumbres estándares son dadas a continuación.
1. Regla 1
Para modelos involucrados solamente en una suma o diferencia de cantidades, la

incertidumbre estándar combinada es dada por:
87
n
u c2 ( y ) = ∑ u 2 (xi ) 3.7.11
i =1
2. Regla 2
Para modelos que involucren solamente un producto o cociente, la incertidumbre

estándar combinada es dada por:
 uc ( y )   u ( xi ) 
2 2
n
  = ∑   3.7.12
 y  i =1  xi 
u ( xi )
Donde los cocientes son las incertidumbres en los parámetros,
xi
expresadas como desviaciones estándares relativas.
3. Caso combinado de Reglas 1 y 2
Para propósitos de componentes de incertidumbres combinadas, es más

conveniente romper el modelo matemático original para expresiones, las cuales consisten
solamente de operaciones cubiertas por una de las reglas anteriores. Por ejemplo, la
expresión:
o+ p
q+r
Debe estropearse a los dos elementos (o+p) y (q+r). La incertidumbre provisional

para cada uno de estos, puede entonces ser calculada usando la regla 1; estas
incertidumbres provisionales pueden ser combinadas usando la regla 2 para dar la
incertidumbre estándar combinada.
88
3.7.3 Incertidumbre expandida
3.7.3.1 Factor de cobertura y nivel de confianza
La incertidumbre estándar ‘ uc ’ tiene un valor igual a la desviación estándar de la
función de distribución del mensurando. El intervalo centrado en el mejor estimado del

mensurando contiene el valor verdadero con una probabilidad ‘ p ’ de 68%
aproximadamente, bajo la suposición de que los posibles valores del mensurando siguen
una distribución normal.
Generalmente se desea una probabilidad mayor de 68%, lo que se obtiene
expandiendo este intervalo por un factor ‘ k ’, llamado factor de cobertura. El resultado se
llama incertidumbre expandida ‘ U ’.
U = k · uc 3.7.13
La incertidumbre expandida ‘ U ’ indica entonces un intervalo, llamado intervalo de

confianza, que representa una fracción ‘ p ’ de los valores que puede probablemente
tomar el mensurando. El valor de ‘ p ’ es llamado el nivel de confianza y puede ser elegido
a conveniencia.
Tabla 3.7.1 Factores de cobertura para diferentes niveles de confianza
Distribución Normal Distribución Rectangular
Factor de cobertura Nivel de confianza Factor de cobertura Nivel de confianza

(k ) ( p ) (%) (k ) ( p ) (%)
1 68.27 1 57.74
2 95.45 1.65 95.45
3 99.73
Fuente: CENAM (2004)
89
En el medio industrial, a menudo se elige el nivel de confianza de manera tal que

corresponda a un factor de cobertura como un número entero de desviaciones estándar
en una distribución normal. La relación entre el factor de cobertura ‘ k ’ y el nivel de
confianza ‘ p ’ depende de la distribución de probabilidad del mensurando (Tabla 3.7.1).
3.7.3.2 Distribución t de Student
Frecuentemente, los valores del mensurando siguen una distribución normal. Sin
embargo, el mejor estimado del mensurando, la media (obtenida por muestreos de ‘ n ’
mediciones repetidas) dividida entre su desviación estándar, sigue una distribución
llamada ‘t’ de Student, la cual refleja las limitaciones de la información disponible debidas
al número finito de mediciones. Esta distribución coincide con la distribución normal en el
límite cuando ‘ n ’ tiende al infinito, pero difiere considerablemente de ella cuando ‘ n ’ es
pequeño.
La distribución ‘t’ de Student, es caracterizada por un parámetro ‘ν ’ llamado
número de grados de libertad.
Si la función de distribución de probabilidad del mensurando ‘ y ’ es normal, de
manera rigurosa la incertidumbre expandida se calcula de acuerdo ha:
U = uc · t p (ν ef )
3.7.14
( )
Donde t p ν ef : es un factor derivado de la distribución ‘t’ de Student a un nivel de
confianza ‘ p ’, para ‘ν ef ’ grados de libertad obtenidos de acuerdo a la sección 3.7.3.3, el
cual está dado en la Tabla 3.7.2.

Frecuentemente, cuando ‘ν ef ’ es suficientemente grande, no se encuentra
diferencia significativa en los resultados numéricos obtenidos con la ecuación 3.7.11,

donde se sustituye ‘ k ’ por t p ν ef ( ) para una distribución normal dado ‘ p ’.
Cuando se combinan las fuentes de incertidumbre con sus respectivas
distribuciones para obtener la incertidumbre combinada ‘ uc ’ del mensurando, el Teorema
del Límite Central (TLC) permite aproximar la distribución resultante por una distribución
normal. La aproximación será mejor mientras más grande sea el número de fuentes de
90
incertidumbre y sus contribuciones sean similares, independientemente de la forma

particular de sus distribuciones.
Tabla 3.7.2 Determinación de t de Student a partir de ν
t p (ν ef ) ν t p (ν ef ) ν t p (ν ef ) ν
13.97 1 2.52 6 2.13 20
4.53 2 2.43 7 2.05 30
3.31 3 2.37 8 2.025 50
2.87 4 2.32 9 2.000 ∞
2.65 5 3.28 10
Fuente: CENAM (2004)
Cuando sólo es relevante la contribución de una fuente cuya distribución no es

normal, lo más conveniente es estimar la incertidumbre expandida directamente de los
parámetros de la distribución.
3.7.3.3 Determinación del número efectivo de Grados de libertad (ν ef )
De cierta manera el número de grados de libertad ‘ν ’ asociado a una distribución

de una magnitud X ó Y, puede considerarse una medida de la incertidumbre de esa
magnitud. Entre mayor sea ‘ν ’, la estimación de la incertidumbre será más confiable.
El número efectivo de grados de libertad ‘ν ef ’ del mensurando considera el número
de grados de libertad ‘ν i ’ de cada fuente de incertidumbre.
En la estimación de incertidumbres por el método tipo A, ‘ν i ’ depende
directamente del número de datos considerados y disminuye conforme el número de

parámetros estimados a partir de los mismos datos. La repetibilidad de una medición,
estimada por la desviación estándar experimental de ‘ n ’ lecturas tiene n − 1 grados de
91
libertad. Una regresión lineal de ‘ M ’ puntos mediante una ecuación de ‘ m ’ parámetros

tiene M − m grados de libertad. (CENAM, 2004).
Si la incertidumbre se estima por un método tipo B, la determinación del número
de grados de libertad implica el criterio del analista soportado por su experiencia, aun
cuando sea subjetiva, para determinar la incertidumbre relativa de la propia incertidumbre,
y calcular el número de grados de libertad para esa fuente específica, con la ecuación1:
1  u ( xi ) 
2
ν i =  
2  ∆u ( xi ) 
3.7.15
Donde: ∆u ( xi ) es una estimación hecha por el analista, de la incertidumbre u ( xi )
para la fuente ‘ i ’.
El número efectivo de grados de libertad se calcula según la ecuación de Welch-
Satterthwaite, aún cuando existan observaciones sobre su validez merecedoras de
atención. Esta ecuación puede escribirse en términos de la relación entre la contribución
de la fuente ‘ i ’ y la incertidumbre combinada como1:
 ui ( y ) 
4
 
 uc ( y ) 
n
1
=∑ 3.7.16
ν ef i =1 νi
1 El valor de resultante, generalmente se aproxima al entero menor más próximo.
92
3.8 ETAPAS PARA LA EVALUACIÓN DE LA INCERTIDUMBRE
Definir el mensurando Y
Establecer el modelo físico

Identificar las magnitudes de entrada X i
Establecer el modelo matemático
Identificar las fuentes de incertidumbre
Cuantificar la variabilidad de cada

fuente y asociarle una distribución
Determinar la incertidumbre estándar u ( xi )
Estimar correlaciones
Calcular la incertidumbre estándar combinada ‘ uc ’
Elegir el nivel de confianza
No ¿Cuantificar el número Si
de grados de libertad?
Estimar los grados de libertad ‘ν i ’
Determinar el factor Calcular el número efectivo

de cobertura ‘ k ’ de grados de libertad ‘ν ef ’
( )
Determinar t p ν ef
Calcular la incertidumbre expandida U
Figura 3.8.1 Evaluación de la incertidumbre Fuente: CENAM, 2004
93
4
TECNICAS Y METODOS PARA MUESTREO Y
ANALISIS DE MUESTRAS
94
TECNICAS Y METODOS PARA MUESTREO Y ANALISIS DE MUESTRAS
4.1 TECNICA PARA MUESTREO DE AGUA LLUVIA1
Para que un programa de muestreo tenga éxito se ha de recoger un volumen de

agua representativo de la masa de agua que se quiere investigar, y posteriormente
llevarlo a un laboratorio isotópico. La primera preocupación durante el proceso de
muestreo, transporte y almacenamiento es evitar el fraccionamiento isotópico a través de
la evaporación o de pérdidas difusivas del vapor de agua, y/o el intercambio isotópico con
los alrededores y con el material del envase. Estos efectos se pueden minimizar siempre
y cuando se utilicen métodos de recolección y envases apropiados. Una de las primeras
etapas consiste en seleccionar y comprobar cuidadosamente los métodos y las botellas
que se utilizarán. Sin embargo, el hidrólogo debería seguir las instrucciones específicas
del laboratorio que realice el análisis de sus muestras.
En la evaporación del agua de mar gran parte del vapor marino se mueve hacia
mayores latitudes y altitudes, donde se enfría, desciende y condensa, para posteriormente
precipitar en los océanos. La otra parte del vapor se dirige a los continentes donde
precipita formando diferentes formas de agua superficial y subterránea. Una "última" parte
del vapor de origen marino precipita en forma de hielo en las regiones del Ártico y la
Antártida.
En comparación con las aguas oceánicas, las aguas meteóricas (es decir, la
humedad atmosférica, la precipitación y el agua subterránea y superficial que se derivan
18
de ésta) resultan generalmente empobrecidas en especies isotópicas más pesadas: O,
17 2
O y H. Ello es debido a que el fraccionamiento isotópico (cinético) durante la
evaporación del agua marina es mayor que el fraccionamiento (de equilibrio), contrario
durante el proceso de condensación para dar precipitación, que muestra el efecto
Rayleigh de separación de lluvia que ocurre en un reservorio con un contenido de agua
(vapor) limitado en contacto con la atmósfera. El estándar de estos isótopos es la
composición media del océano.
A partir de los datos de la Red Global de los Isótopos de la Precipitación (Global
Network of Isotopes in Precipitation, GNIP) que estableció el OIEA en cooperación con la
OMM en 1961 se obtiene un esquema de la distribución global de isótopos en las aguas
meteóricas. En este programa se recogen muestras de precipitación mensuales en todo el
18
mundo y se analizan sus contenidos de O, 2H y 3H. El grado de empobrecimiento se
relaciona fenomenológicamente con los parámetros geográficos, tales como la latitud, la
1 Fuente: IGME, 2002.
95
altitud y la distancia a la costa, y con la fracción que precipita a partir de un determinado

contenido másico de vapor.
Mientras que los muestreos mensuales sirven para especificar las entradas del
sistema hidrológico a gran escala, se necesitan realizar muestreos de carácter más local.
Además, para entender el efecto de los cambios climáticos y los modelos de interacción
superficie/atmósfera sobre la señal isotópica de estos datos globales mensuales se
necesitan datos más detallados de la precipitación y del vapor atmosférico.
Los datos de la GNIP pertenecen a muestras de precipitación. El vapor atmosférico
se encuentra siempre mucho más empobrecido en relación a las especies isotópicas más
abundantes, cerca de una media del 10‰ en 18δ. En las regiones continentales templadas
y húmedas la humedad del aire y la precipitación se encuentran prácticamente en
equilibrio isotópico. Esto no se cumple de forma exacta ni cerca de la fuente de vapor, es
decir, en una zona marítima o costera ni bajo condiciones secas, en las que, las gotitas
que se forman en la base de las nubes están sometidas al proceso de evaporación.
4.1.1 Red Global de los Isótopos de la Precipitación, GNIP
A principios de la década del 1960 el Organismo Internacional de Energía Atómica,

OIEA (International Atomic Energy Agency, IAEA) de Viena y la Organización
Meteorológica Mundial, OMM (World Meteorological Organisation, WMO) en Ginebra,
establecieron una red de muestreo del agua lluvia con el objetivo de documentar los
2
parámetros isotópicos, H/1H, 18
O/16O y 3
H, junto con algunos de los parámetros
meteorológicos que intervienen en los sistemas hidrológicos. La red consta de unos 100
puntos de muestreo en todo el mundo, incluyendo las estaciones localizadas en los
mares, la costa y en el interior de los continentes. Todavía se recopilan y se analizan
mensualmente muestras de agua de lluvia, aunque con el paso de los años la red se ha
ido reduciendo y modificando. Durante periodos de tiempo cortos se fueron añadiendo
redes y estaciones locales y regionales.
4.1.2 Prácticas de campo generales
Los apartados que se dan a continuación tienen por objetivo lograr unas buenas
prácticas de campo, las cuales son aplicables a todo tipo de muestras de agua
(precipitación, agua superficial, agua subterránea):
96
1. Utilizar siempre una libreta de campo para anotar las observaciones y escribir los
datos numéricos de las muestras que se recogen en unas hojas de muestreo para
proporcionárselas al laboratorio.
2. Determinar las coordenadas geográficas de los puntos de muestreo mediante GPS
(Global Positioning Systems, sistema de posicionamiento global) ó mediante sistemas
de coordenadas nacionales, mapas, fotografías aéreas, etc.
3. Medir la altitud, la profundidad del nivel freático (agua subterránea), la profundidad de
muestreo (profundidad en el agua subterránea o en el agua superficial), el estado del
pozo, las condiciones del pluviómetro, los caudales (ríos, pozos surgentes), el nivel del
lago, las condiciones atmosféricas, etc.
4. Es muy importante registrar otros datos químicos y físicos que ayuden en la
interpretación, tales como la temperatura del agua, el pH, la alcalinidad, la
conductividad eléctrica, y otros constituyentes químicos posibles.
5. Llenar las botellas de muestreo completamente, siempre que el agua no tenga
posibilidad de congelarse durante el transporte aéreo (en ese caso se llenaran las dos
terceras partes de las botellas).
6. Marcar todas las botellas individualmente con lápices o marcadores indelebles (el
código del proyecto, la localización, la fecha, el número de la muestra, el nombre del
recolector, el tipo de análisis que se requiere); la información ha de tener una
referencia común entre la libreta de campo y las hojas para la colección de muestras.
4.1.3 Estrategia de muestreo de agua lluvia
El objetivo científico del programa es el que define la estrategia de muestreo cuando

llueve o nieva. Por ejemplo, el intervalo de muestreo podría ser de meses, semanas, días,
o incluso cada hora. En cualquier caso se necesitará registrar la cantidad de precipitación
para que posteriormente se pueda calcular los valores medios de las composiciones
isotópicas ponderadas.
Obviamente, en las recogidas de precipitación a corto plazo (puntual) se obtiene la
mayor información y el menor riesgo de evaporación. Las muestras se deben almacenar
individualmente en botellas. Si sólo se requieren las composiciones mensuales medias, se
pueden combinar muestras diarias en una botella más grande.
Cuando las muestras son recogidas semanal o mensualmente, la composición
isotópica de la muestra puede verse modificada muy probablemente por evaporación.
97
Esto puede minimizarse mediante la construcción de un muestreador de lluvia especial, o

introduciendo en la botella una pequeña cantidad de aceite mineral (mínimo 2 mm) que
queda flotando sobre el agua.
Cuando la recogida se realiza en época de nieves se ha de tener un especial
cuidado. Se debe de permitir que la nieve se derrita lentamente a temperatura ambiente,
evitando la evaporación.
4.1.4 Envases para el muestreo
La botella y el cierre (tapón) deben estar diseñados con un material adecuado de

manera que evite cualquier pérdida por evaporación y difusión o el intercambio de agua
con los alrededores. El efecto isotópico de la evaporación puede ser significativo: una
pérdida del 10% de la muestra dará cómo resultado un enriquecimiento isotópico de un
10‰ en 2H y un 2‰ en 18
O. Las conclusiones que se extraen de los análisis empíricos
son:
1. Los envases más seguros para el almacenamiento son las botellas de cristal, las
cuales permiten el almacenamiento durante al menos una década, siempre y cuando
el cierre no se rompa.
2. Cuando los periodos de almacenamiento son del orden de meses, se pueden utilizar
polietilenos de alta densidad (el agua y el dióxido de carbono se difunden fácilmente a
través de plásticos de baja densidad).
3. Las botellas con cuellos estrechos son las más apropiadas.
4. Se requieren tapas con cierres positivos (arandelas de plástico, neopreno, etc.)
5. El volumen de las botellas para los análisis combinados del 2H y del 18
O debería ser
14
normalmente de 50 mL; para el caso del C, 50 mL para la datación estándar y 250
mL para la datación AMS; 500 mL para análisis de 3H cuando la concentración es
baja. Si el almacenamiento ha de ser superior a un par de meses, entonces es
preferible recoger un gran volumen y almacenar las muestras en botellas de cristal (de
esta manera la relativa influencia de la evaporación será mínima). Generalmente, el
14
contenido de carbono disuelto de muestras de C de gran volumen se tratan en el
campo.
98
4.2 METODO PARA EL MUESTREO DE AGUA LLUVIA
4.2.1 Programa OIEA/OMM sobre la composición isotópica de la

precipitación1
El Organismo Internacional de Energía Atómica, en cooperación con la

Organización Meteorológica Mundial ha establecido desde hace muchos años una red
mundial de estaciones para la colección de muestras mensuales de precipitación, con
objeto de determinar la composición isotópica. Los isótopos, cuyas variaciones de
contenido se determinan son los estables de oxígeno-18 y de hidrógeno-2 (Deuterio), así
como el isótopo radiactivo de hidrógeno-3 (Tritio). Estos datos se utilizan como base para
las investigaciones de hidrología isotópica y para estudios meteorológicos y
climatológicos.
Para obtener datos isotópicos fiables es indispensable observar en detalle el
procedimiento que se describe mas adelante. Ante todo se debe evitar la evaporación,
porque el proceso de evaporación afecta notablemente la composición isotópica del agua
de la muestra. Por consiguiente, es indispensable utilizar frascos herméticos para
conservar, expedir y almacenar las muestras de precipitación recogidas para su análisis
isotópico. Es aconsejable utilizar los frascos facilitados por el OIEA, cuyo hermetismo ha
sido comprobado. Igualmente, durante la recolección, se debe retirar el agua del depósito
colector de lluvia inmediatamente después de haberse producido la precipitación, o se
debe proteger la muestra contra la evaporación con aceite de parafina medicinal.
Procedimiento técnico para el muestreo de precipitación para análisis isotópicos:
1. Cada muestra debe representar la precipitación integrada de un período de un mes, a
partir del primer día del mes hasta el último del mismo.
2. Los frascos provistos por el OIEA tienen un volumen de medio litro (para análisis de
Tritio) y de 50 mL (para el análisis de isótopos estables), cantidades de agua que se
consideran el óptimo necesario para los análisis isotópicos. Se necesita un mínimo de
300 mL de agua para efectuar los análisis de Tritio, deuterio y oxígeno-18. Cuando
solo se disponga de cantidades menores (por ejemplo, debido a que la precipitación
haya sido escasa), se debe enviar de todos modos el agua recogida al laboratorio
encargado de los análisis isotópicos, que en tal caso solo efectuará algunos de los
mismos. Si el Tritio y los isótopos estables se analizan en diferentes laboratorios, se
1 Fuente: OIEA/OMM, 1996.
99
llenará un frasco de 50 mL para el análisis de isótopos estables y con el resto del agua
se llenará el frasco de medio litro (o parte del mismo, si la muestra es insuficiente)
para el análisis del Tritio.
3. El agua de lluvia se recoge en un pluviómetro normal, haciéndose una lectura del
volumen recogido y vaciándose el pluviómetro tan pronto como sea posible después
de cada precipitación, de ser factible, o cada mañana. Después de la lectura del
pluviómetro se debe verter la precipitación en un recipiente de plástico de 5 litros con
un buen tapón para evitar la evaporación. Guárdese este recipiente en un lugar fresco
y oscuro. Es muy importante que el tapón esté siempre bien cerrado: en efecto, la
evaporación modifica la composición isotópica del agua, y por lo tanto se deben tomar
todas las precauciones posibles para evitarla.
4. Es absolutamente indispensable transferir el agua después de cada precipitación, o
cada día, y secar cada vez el colector del pluviómetro con un trapo limpio y seco antes
de volver a instalarlo en la posición de recolección.
5. Si el agua de lluvia debe permanecer varios días en el colector del pluviómetro (que
puede consistir sencillamente en una botella de plástico con un embudo) antes de
transferirlo a un recipiente hermético, es necesario poner aceite de parafina medicinal,
que se adquiere fácilmente en una farmacia, en el recipiente colector del pluviómetro,
para impedir la evaporación. La película flotante de parafina sobre el agua debe tener
un espesor de 0,5 cm aproximadamente. El agua de lluvia con el aceite de parafina se
puede transferir periódicamente al recipiente hermético. Al cabo de un mes se puede
separar el agua del aceite con un embudo separador o sencillamente retirando el
aceite con un sifón.
6. Al cabo del mes, se debe agitar toda el agua contenida en el recipiente hermético
antes de llenar los frascos que se han de enviar al laboratorio. Si el aceite de parafina
medicinal se encuentra presente, no se debe agitar el recipiente, sino que se lo debe
dejar en reposo durante una semana antes de llenar los frascos. Con esto se obtiene
una mezcla conveniente y se evita que el aceite se emulsione con el agua, lo que
haría más difícil la separación.
7. Si la cantidad de agua recogida en un mes cualquiera excediera de 5 litros, se puede
utilizar una segunda botella de 5 litros para acumular el agua excedente. Al final del
mes se debe mezclar toda el agua de los dos recipientes antes de llenar los frascos
con las muestras. Las operaciones descritas en los párrafos 3 a 7 se deben efectuar lo
100
más rápidamente posible, a fin de reducir el tiempo durante el cual la muestra quede
expuesta a la atmósfera y corra por lo tanto el riesgo de evaporación.
8. Si se utiliza el aceite de parafina medicinal y no se lo puede separar del agua en el
lugar de la recogida esta separación se hará en el laboratorio encargado del análisis
isotópico. En tal caso, se tratará de minimizar la cantidad de aceite presente en el
frasco de medio litro que se expide al laboratorio, cerciorándose de que la cantidad de
agua enviada excede en gran medida a la del aceite. Se debe recordar que se
necesita por lo menos una cantidad de 300 mL de agua para el análisis del Tritio, del
deuterio y del oxígeno-18.
9. Al cabo del mes, cuando se hayan llenado los frascos de muestras, se debe secar el
recipiente de 5 litros antes de utilizarlo para acumular la precipitación del mes
siguiente.
10. En ningún caso se llenará completamente un recipiente de plástico. Déjese siempre
un pequeño espacio de aire (más o menos el 5% del volumen del frasco) para permitir
la expansión del agua resultantes de posibles aumentos de temperatura, o de
descensos por debajo del punto de congelación. Se deberá procurar utilizar en todos
los casos los frascos facilitados por el OIEA, y se verificará que el tapón queda
herméticamente cerrado.
11. Se marcará claramente en las etiquetas facilitadas por el OIEA la información relativa
a la estación de observación, al mes y a la cantidad de la precipitación total. Los
frascos se marcarán inmediatamente después de llenados.
12. Conviene cerciorarse de que no existan objetos agudos en la caja (por ejemplo,
tornillos, clavos, astillas de madera) de expedición de los frascos. Dichos objetos
pueden perforar las botellas de plástico.
101
4.3 TECNICAS PARA ANALISIS DE TRITIO EN MUESTRAS DE AGUA1
El objetivo de esta sección es proporcionar tanto al hidrólogo como al analista,

algunas informaciones de los procedimientos que utilizan los laboratorios de isótopos para
determinar las composiciones isotópicas de las muestras del agua que se envían o se
llevan a los laboratorios. La intención es dar los pasos exactos que siguen los laboratorios
para efectuar los análisis.
Casi ninguna de las técnicas de medición isotópica se puede aplicar directamente a
partir del agua. Por este motivo, el principio que subyace en todos los métodos es que el
agua o los constituyentes que se quieren analizar (tales como el ácido carbónico disuelto)
se han de convertir en un compuesto químico que se pueda utilizar en el equipo de
medición. El requisito que se ha de cumplir durante la transformación es evitar cambios en
la composición isotópica, o en el caso de que ocurran que sean perfectamente
cuantificables.
Existen una serie de instrumentos para medir la radioactividad, cada uno con sus
ventajas y desventajas específicas. Los principales instrumentos que se discuten son el
contador de gas y los espectrómetros de centelleo líquido. En ambas técnicas la muestra
radioactiva se mide como si se tratase de una fuente interna, es decir, se mezcla con el
medio contador o es una parte intrínseca del mismo, responsable del funcionamiento del
instrumento. Esto tiene como ventaja que las partículas β de la desintegración radioactiva
no necesitan penetrar la pared del aparato; esto sólo es relevante cuando se pretende
detectar partículas β a partir de desintegración de 3H y 14
C, ya que en ambos casos la
energía de β es casi imperceptible.
Existen varias opciones para medir el contenido de tritio. La elección de un método
u otro depende del contenido (esperado) de 3H en la muestra y la precisión que se
requiera. Los diferentes procedimientos son:
3
1. Medir la actividad del H por medio del Contador Proporcional de Gas, CPG
(Proportional Gas Counting, PGC).
2. Medir mediante Espectrometría de Masa la cantidad de 3He que se forma después de
almacenar la muestra en el laboratorio durante un tiempo específico.
3. Medir la actividad del 3H por medio de Espectrometría de Centelleo Líquido, ECL
(Liquid Scintillation Spectrometry, LSS).
1 Fuente: IGME, 2002.
102
Además, existe la posibilidad de incrementar artificialmente en una cantidad

prefijada el contenido original de 3H (es decir, concentrarlo), normalmente mediante
3
enriquecimiento electrolítico, previo a la medición de H. Por tanto, las opciones
adicionales son:
a. Tratando la muestra tal y como se ha recogido.
b. Tratando la muestra después del enriquecimiento artificial.
El rango de elecciones se amplia si se considera la combinación de los diferentes

procedimientos (1, 2, ó 3) con las opciones adicionales con (‘a’ ó ‘b’).
La técnica LSS se aplica al agua. Se ha de mezclar la muestra con un líquido de
centelleo adecuado. Con el PGC se necesita un gas adecuado, como en el caso de los
análisis isotópicos estables.
4.3.1 Contadores de Gas
A pesar de que el funcionamiento de los diferentes contadores de gas es distinto, la

construcción básica es idéntica. Básicamente existen 3 tipos diferentes de contadores de
gas, dependiendo de la magnitud de la diferencia de potencial aplicada entre el alambre y
la pared del contador:
1. Cámara de Ionización.
2. Contador Proporcional de Gas (CPG ó PGC).
3. Contador Geiger-Müller (GM).
Los contadores se llenan con un gas especial necesario para tener características
de ionización apropiadas.
4.3.1.1 Cámara de ionización
La radiación que entra es la energía que pierde una partícula, originada a partir de
la reacción de desintegración dentro o fuera del tubo contador, cuando éste colisiona con
las moléculas de gas del contador. Estos sucesos hacen que las moléculas se ionicen.
Los iones positivos pesados, cuando pasan a través del campo eléctrico que se origina
dentro del tubo, se desplazan lentamente hacia la pared y se neutralizan mediante la
captación de electrones. Los pocos electrones primarios y negativos que se liberan
103
durante las colisiones son acelerados hacia el alambre central positivo. Estos electrones,
una vez que llegan al alambre, provocan pequeñas corrientes eléctricas o pulsos
eléctricos. Este pulso se registra en el circuito electrónico asociado al contador y se mide
su tamaño. Este pulso representa el número de electrones primarios y, por tanto, la
energía de la partícula inicial. De este modo se obtiene información acerca de la
desintegración radioactiva.
4.3.1.2 Contador proporcional
Los electrones primarios se aceleran en el campo eléctrico que hay entre el alambre
y la pared del contador. Si la diferencia de potencial del contador es suficientemente
grande, los electrones primarios que experimentan una aceleración hacia el alambre
obtienen velocidad y energía suficiente como para ionizar otras moléculas de gas y crear
nuevos electrones libres. El proceso se repite con los nuevos electrones y así
sucesivamente. De esta manera se genera una avalancha de electrones que se mueve
hacia el alambre donde se registra. Este fenómeno recibe el nombre de multiplicación de
gas. El pulso eléctrico resultante es proporcional a la multiplicación de gas (y de esta
manera depende también de la diferencia de potencial) y también es proporcional al
número de electrones primarios y por lo tanto, de la energía inicial de la partícula
(Contador Proporcional de Gas, CPG ó Proportional Gas Counter, PGC).
4.3.1.3 Contador de Geiger-Müller (GM)
Mientras funciona como contador proporcional, las avalanchas de electrones

secundarios se producen de forma muy local. Sin embargo, cuando la diferencia de
potencial es grande, la segunda ionización ocupará la totalidad del contador. El tamaño
del pulso será máximo y no dependerá de la energía de la partícula que entra ni del
voltaje del alambre: la existencia de la partícula se registra en el contador GM, aunque,
ésta no se puede identificar, como sucedía en el caso del contador proporcional. Esta
consideración es esencial si se quiere distinguir la partícula (por ejemplo, una partícula β
del 3H o del 14C) de partículas extrañas.
Por consiguiente, se deduce que el único contador apropiado para los objetivos que
aquí se buscan es el que funciona como contador proporcional. Este instrumento fue el
primero que se utilizó para medir las radioactividades del 3H y del 14
C. Estos átomos
tienen que ser aportados en forma gaseosa para que sean adecuados para el
104
funcionamiento del contador. Esta es una condición esencial, ya que la radiación β no

puede penetrar en la pared del contador como consecuencia de su extremadamente baja
energía. Posteriormente entró en vigor otra técnica, es decir, la espectrometría de
centelleo líquido1.
4.3.1.4 Preparación del gas para el PGC del 3H
En el caso del contador proporcional de gas, para el 3H existen varios gases

adecuados:
1. Hidrógeno: preparado por medio de:
H2O + Zn ó Mg ZnO ó MgO + H2
El gas hidrógeno preparado necesita mezclarse con un gas de recuento adecuado,

como por ejemplo, el argón.
2. Etano o propano: para prepararlos se necesita añadir a un hidrocarbono no saturado
el hidrógeno preparado, como en el caso 1, utilizando como catalizador Paladio (Pd):
C2H4 + H2 C2H6
C3H6 + H2 C3H8
Los cuales son ya buenos contadores gaseosos.

Las reacciones adicionales que se dan en el paso 2 se realizan a temperaturas
elevadas, en presencia de un catalizador apropiado.
4.3.1.5 Operación del contador
En ambos extremos del contador proporcional de gas se distorsiona la geometría y

por lo tanto el campo eléctrico se ve afectado. Por consiguiente, la detección de las
partículas que se generan en la desintegración radioactiva es menos eficiente. No se
conoce con exactitud la eficiencia global del contador y en general las medidas absolutas
no serán fiables. Para solucionar este problema se deben realizar medidas relativas: se
1 El funcionamiento general de la espectrometría de Centelleo Líquido se explica en la sección 4.3.2.
105
mide la muestra bajo las mismas condiciones que las utilizadas con una muestra de
referencia, o, también, en función de un estándar internacional. En caso contrario se ha
de conocer la dependencia exacta de la radioactividad medida de una muestra con
respecto de varios parámetros. A continuación se mencionan algunos detalles sobre los
parámetros esenciales:
1. Cantidad de gas en el contador: como tanto la muestra como la referencia se miden
en el mismo contador, el volumen del contador (V) no influye; basta medir la presión
(p) y la temperatura (T): la cantidad de gas = V*p/T con T = t + 273.15 K.
2. Pureza del gas contador: si el gas contiene impurezas electronegativas, es decir,
moléculas de gas que presentan una intensa atracción hacia los electrones, se
perderá parte de los electrones primarios y secundarios, disminuyendo así el tamaño
del pulso y la tasa de detección.
3. Fondo del contador: esto es, la tasa de detección (número de detecciones por
segundo) del contador sin fuente radioactiva, en este caso el CO2 y el C2H2, o el H2,
14
sin C o sin 3H, respectivamente. A la tasa global de detecciones se le debe restar el
fondo (sin fuente radioactiva). Para minimizar el fondo (si no se hiciese se obtendría
una tasa de detección en ordenes de magnitud mayor que la tasa real neta que se
quiere medir), se construye el contador con materiales de baja actividad y se protege
de la radiación del exterior.
Muchos de los contadores están hechos de cobre o cuarzo, con tamaños que van
desde los 0.5 a unos pocos litros; aunque también existen mini-contadores.
En principio el manejo de los datos de un equipo radiométrico es sencillo. Después
de un cierto tiempo tm se detectan un número Nt de desintegraciones en el contador. La
incertidumbre estadística o desviación estándar de este número es N1/2. A esta tasa de
detección en bruto Nt/tm (detecciones por segundo) se le debe restar el fondo F
(detecciones/s) para obtener la tasa neta A':
A' (t ) =
Nt
−F 4.3.1
tm
Se ha de estandarizar este resultado, es decir, se le ha de corregir respecto de una

cantidad de muestra de gas estándar presente en el contador. Para ello se aplica
106
simplemente la ley de Gay-Lussac; en otras palabras, multiplicando por los cocientes de

presión y de temperatura1:
273.15 105
A(t ) = A' (t ) =
T p
To po t + 273.15 p 4.3.2
Ya se ha estandarizado la actividad absoluta: 3A para el 3H, 14A para el 14C.

Ahora se ha de medir el estándar internacional (ácido oxálico) bajo las mismas
condiciones. El cociente de actividad se calcula como el cociente entre estas dos
actividades. La desviación estándar de la actividad medida es (el estándar de F es
despreciablemente pequeño):
1 A+ F
σA ≈σN = N =
tm tm
4.3.3
4.3.2 Espectrometría de Centelleo Líquido2
4.3.2.1 Principio físico
Este método se basa en el principio por el que ciertos materiales emiten luz
después de que sus moléculas queden excitadas como consecuencia de colisiones con
partículas de alta energía.
Aquí el agua (con 3H) se puede mezclar con un líquido centellante, que es una
mezcla comercial con varios constituyentes. Los requisitos que deben de cumplir esta
mezcla es que se combine perfectamente con el agua, que transforme las energías de los
electrones primarios en energía fluorescente y, finalmente, que se transforme en radiación
visible de baja energía dentro del rango de emisión secundaria del fotoelectrodo del
fotomultiplicador.
En este sentido también se puede decir que se está tratando con fuentes
radioactivas internas, como pasaba con los contadores de gas. Cuando se trata con
1 La presión debe trabajarse en Pascales (Pa).

2 Para más detalles revisar sección 5.1.
107
partículas β y γ de elevada energía se utiliza cristales sólidos formados por compuestos

orgánicos (antraceno) o inorgánicos (yoduro de sodio).
El resultado es un fotón de luz por cada partícula que entra en el centelleador, el
cual se puede "ver" mediante un detector fotosensible, el fotocátodo. Esto es posible
gracias a que ciertos materiales emiten electrones cuando sobre ellos incide un fotón: es
el conocido efecto fotoeléctrico. El número de electrones primarios es muy bajo. Por este
motivo se necesita un proceso que multiplique los centelleos, al igual que en el caso del
contador proporcional. Esto lo hace el denominado tubo fotomultiplicador. Cada electrón
primario se acelera y provoca la emisión adicional de electrones secundarios en el
electrodo secundario o dínodo, que se encuentra a un voltaje mayor. Este proceso se
repite hasta que finalmente llega al último dínodo un pulso eléctrico que se puede medir.
El pulso final todavía sigue siendo proporcional al factor multiplicador, que es función
directa del voltaje, y a la energía de la partícula que entra. Esto permite el registro
selectivo de sólo aquellas partículas que se originan a partir de las desintegraciones
radioactivas de interés (como el 14C ó el 3H).
4.3.2.2 Operación de detección
En los espectrómetros de centelleo líquido o en los contadores (LSS), normalmente

se juntan un gran número de muestras, en los que a su vez las muestras se sitúan en el
fotomultiplicador de forma automática. También se llevan a cabo arreglos para reducir al
máximo la medida del fondo, principalmente utilizando un dispositivo en antecoincidencia
de otros centelleadores (en lugar de usar contadores GM con PGC).
La ventaja del LSS es que la adquisición de datos está automatizada y es comercial,
mientras que el montaje de un contador de gas lo hace el propio laboratorio. Por otro lado,
el funcionamiento de un PGC es más "transparente", desde el punto de vista físico.
4.3.3 Espectrometría de masa del 3H mediante 3He
Se ha demostrado que la aplicación del 3H para obtener los tiempos de residencia

("edades") del agua subterránea depende del conocimiento de la cantidad de 3H de la
precipitación que entra. El estudio de la relación entre el 3H y el 3He proporciona la
posibilidad de determinar las edades sin necesidad de conocer la función de entrada del
108
tritio. Si el contenido original de 3H de la precipitación infiltrada es 3H0, el contenido

después de un tiempo de residencia t, 3Ht, sería:
3
H t =3H 0e − λt 4.3.4
La cantidad de 3He formado durante este periodo es igual a la cantidad de 3H que

se pierde por desintegración:
3
(
Het =3H 0 −3H t =3H t eλt − 1 ) 4.3.5
Entonces la edad del 3H/3He es:
12.43  3 He 
t= ln + 1
ln 2  3 H  4.3.6
La mayoría de las aplicaciones se relacionan con aguas subterráneas superficiales

y jóvenes a través del pico de 3H que aparece en la precipitación debido a los ensayos
nucleares a comienzos de la década de 1960. La presencia de 3H y 3He a grandes
profundidades puede ser debida a fracturas, grietas o pozos con fugas, o que existe una
producción in situ.
Para poder medir abundancias bajas de 3H (teóricamente inferiores a 0.0005 UT) se
debe realizar una delicada degasificación y almacenamiento de 50 a 100 mL de agua
durante al menos medio año en un recipiente perfectamente sellado, y posteriormente
recoger el producto de desintegración del tritio, 3He. Esta cantidad de gas inerte se puede
medir cuantitativamente mediante espectrometría de masas. El 3He que se produce
durante este periodo de almacenamiento (t) es:
3
(
Het =3H 0 −3H t =3H 0 1 − e− λt ) 4.3.7
Así que el contenido original de 3H de la muestra era:
109
3
He
3
H0 =
1 − e − λt 4.3.8
Para tener un valor de referencia: la cantidad de 3He que se forma después

almacenar 100 mL de agua con una concentración de 3H de 0.5 UT durante medio año es:
3  100 
Het = 0.5 ∗ 10−18 • 2 (
 1 − e 12.43
ln 2
)
• 0.5
• 22.41 ∗ 103 = 3.4 ∗ 10−15 mL
 18 
4.3.4 Purificación del agua
A menudo el agua recogida contiene demasiados contaminantes para permitir la

medida directa con LSS y el enriquecimiento electrolítico. Especialmente los
contaminantes con color impiden realizar un adecuado centelleo líquido. La purificación
del agua se lleva a cabo por medio de destilación. De hecho, muchos laboratorios
rutinariamente someten las muestras a destilación. La condición es que no se produzca
ningún cambio isotópico durante el tratamiento. Por este motivo, el procedimiento de
destilación ha de ser tan cuantitativo como sea posible, es decir, con un rendimiento
cercano al 90%. Además, se ha de evitar el contacto de la muestra con el aire, ya que el
contenido de vapor podría afectar el contenido de 3H de la muestra a través de un
intercambio, el cual es un proceso extremadamente rápido.
4.3.5 Enriquecimiento de 3H
Existen dos métodos para enriquecer artificialmente el agua con 3H:

1. La electrólisis de la muestra de agua.
2. La difusión térmica del H2, que se produce en la reducción del agua mediante, por
ejemplo, zinc o magnesio. Con este método se pueden obtener factores de
enriquecimiento muy elevados, pero el equipo y el tratamiento de las muestra es
complicado. No se acostumbra a utilizar en los laboratorios. El principio de la difusión
térmica consiste en que cuando una mezcla de gases se pone en contacto con una
pared fría o caliente, el componente con mayor masa (isotópicamente más pesado)
tiende a concentrarse en la zona fría, mientras que el componente con menor masa
(isotópicamente más ligero) se concentra en la región caliente. Si se aplica este
110
principio a una estructura en cilíndrica vertical con doble pared en la que el tubo
interno está caliente y el externo está frío, el componente más pesado se concentra en
la pared fría y, como tiene una densidad mayor (a bajas temperaturas) se desplaza
hacia abajo concentrándose en el fondo del tubo. El componente caliente y ligero se
concentra en la parte superior. Por consiguiente, se produce una separación de las
moléculas (isotópicamente) pesadas y ligeras. En este caso, se obtienen,
respectivamente, el 3H1H (TH) y el 1H2.
El primer método es relativamente simple, requiere escasa manipulación y
supervisión de la muestra durante el enriquecimiento, y se puede aplicar simultáneamente
a una serie de muestras y materiales de referencia.
Para la electrólisis a la muestra purificada se le añade Na2O ó NaOH sin tritio, para
incrementar la conductividad eléctrica y posteriormente poderse descomponer por medio
de una corriente eléctrica:
2H2O 2H2 + O2
El fraccionamiento isotópico del hidrógeno es remarcadamente grande (al contrario

que el fraccionamiento isotópico del oxígeno): alrededor del 90% del contenido de 3H de la
muestra de agua original permanece en el agua (el gas H2 que se libera se empobrece
mucho más en 3H). Esto significa que, si una cantidad de agua se reduce en un factor de
10, el enriquecimiento es 9.
Después de la electrólisis y antes de la medida de la actividad, la muestra
enriquecida se ha de destilar de nuevo, que ahora contiene una importante concentración
de NaOH, para eliminar la alta concentración de electrolito.
En función de la técnica de medida que se pretenda aplicar, se necesitará una
cantidad de agua de 5 a 20 mL. Si lo que se quiere es enriquecer la muestra, la cantidad
deseable será 250 mL.
111
4.4 METODO PARA LA PURIFICACIÓN DE AGUA
4.4.1 Equipos1
• Regulador con reóstato variable y agitador magnético.

• Balanza semianalítica.
• Bomba para recircular refrigerante.
• Cronómetro o reloj.
4.4.2 Reactivos2
• Permanganato de potasio R.A.

• Hidróxido de sodio R.A.
• Agua destilada.
4.4.3 Materiales
• 2 Matraz bola de 250 mL de fondo plano con entrada 24/40.

• 1 Refrigerante Liebig con entrada 24/40.
• 1 Conector con entrada 24/40.
• 1 Colector con entrada 24/40.
• 2 Manguera de hule látex.
• 3 Soportes metálicos.
• 3 Pinzas de 3 dedos con nuez.
• 1 Barra de agitación magnética.
• 1 Balón volumétrico de 100 mL.
• 2 Vidrios de reloj pequeños.
• 2 Espátulas.
• 1 Piseta.
• 1 Probeta de 100 mL.
• Frascos color ámbar de 100 mL.
• 1 Cubeta de 5 galones que contendrá el agua refrigerante.
1 Para especificaciones ver secciones 5.2, 5.3 y 5.4, respectivamente, en orden correspondiente al equipo.
2 Para especificaciones ver secciones 6.2, 6.3, respectivamente, en orden correspondiente al reactivo.
112
4.4.4 Desarrollo del método
1. Asegurarse de contar con los reactivos, materiales y equipos descritos en las

secciones 4.4.1, 4.4.2 y 4.4.3, respectivamente.
2. En la balanza semianalítica1, pesar los siguientes reactivos:
• 0.5 g de hidróxido de sodio.
• 0.1 g de permanganato de potasio.
3. Enjuagar con una parte del agua que se va a purificar:
• La bureta y el frasco ámbar.
• Los matraces bola, tanto el de entrada como el de salida del equipo.
• El equipo de destilación.
4. En el matraz que se colocará a la entrada del equipo, agregar:
• El hidróxido de sodio y el permanganato de potasio.
• 100 mL del agua que se requiere purificar, medidos en un balón de 100 mL.
• Agitador magnético.
5. Colocar el matraz bola en el regulador con reóstato variable2 y agitar por 1 minuto ó
hasta alcanzar disolución total.
6. Retirar el agitador magnético del matraz bola.
7. Montar el equipo de destilación3 como se presenta en la Figura C.4.
8. Hacer recircular el agua refrigerante con la bomba4.
9. Incrementar la temperatura del reóstato gradualmente, hasta alcanzar la temperatura
máxima permitida por el regulador (llevar al nivel 10).
10. Mantener el equipo de destilación abierto por 9 minutos, ó hasta alcanzar el punto de
ebullición5. Con esto se logra la expulsión de una buena cantidad del aire interno del
equipo6. Luego, cerrar totalmente el equipo.
11. Recolectar el agua destilada por 8 minutos, que es el tiempo necesario para obtener
10 mL. Enjuagar totalmente el balón recolector, la probeta y el frasco ámbar con esta
misma agua, luego descartarla.
1 De esta balanza se dan especificaciones en la sección 5.3.

2 Para especificaciones del regulador, verificar sección 5.2.
3 Asegurarse que la boquilla de salida del agua refrigerante del destilador esté en forma vertical y con
dirección hacia arriba para evitar la acumulación de aire dentro del refrigerante e incrementar la eficiencia.
4 De esta bomba se dan especificaciones en la sección 5.4.
5 Si se pudiera reducir la presión con un generador de vacío, este paso no sería necesario.
6 Lo ideal sería iniciar el proceso de destilación con la mínima cantidad de aire posible, dentro del refrigerante;
logrando con esto evitar la contaminación de la muestra; además de disminuir la presión interna del mismo,
lo que conlleva al incremento de la eficiencia, tanto de la rapidez de destilación del método como de la
concentración de Tritio en el destilado.
113
12. Recolectar el agua destilada por los siguientes 35 minutos, que es el tiempo necesario
para obtener 50 mL de la misma. Medirla en la probeta, depositarla en el frasco ámbar
y taparla herméticamente.
13. Etiquetar el frasco con código, tipo de agua, fecha de purificación, volumen de agua,
tipo de análisis, nombre del analista y colocarla en un lugar oscuro.
14. Esperar 15 minutos ó que la temperatura del agua no destilada logre una tendencia al
equilibrio con la temperatura ambiente.
15. Desechar el agua no destilada, al desagüe. Derramar agua suficiente, hasta que el
agua desechada, se haya diluido totalmente en el drenaje.
16. Desmontar el equipo de destilación y enjuagarlo completamente con agua destilada.
4.5 METODO PARA LA MEDICIÓN DE TRITIO EN MUESTRAS DE

AGUA1
4.5.1 Requisitos previos
1. Asegurar la disponibilidad de este procedimiento, del cuaderno de análisis de 3H en

agua y de los reactivos, materiales y equipo.
2. Preparar la solución de centelleo siguiente: disolver 0.73 g de PPO y 0.16 g de bis
MSB, en 53 mL de Xileno. Agregar 38.5 mL de detergente Tritón N 101 o surfacpol N
909. Guardar la solución en una botella color ámbar. En caso de que no se disponga
de estos reactivos, se puede emplear una solución de centelleo líquido comercial, con
características adecuadas para formar una emulsión con el agua obtenida de la
destilación2.
3. Verificar que el contador de centelleo líquido funcione correctamente.
4. Actualizar la carta de control de fondo del contador de centelleo líquido, siguiendo las
indicaciones de la sección de control de calidad, utilizando los datos de conteo
obtenidos de una muestra blanco de reactivos.
5. Determinar el factor de recuperación.
1 Fuente: OIEA, 2005.

2 Esta solución ha sido sustituida por una solución comercial llamada Ultima Gold LLT, de la cual se dan las
especificaciones en la sección 6.1.
114
4.5.2 Reactivos1
• PPO (2,5 difeniloxazol) grado centelleo líquido.

• Bis MSB (p-bis (o-metil estiril) benceno) grado centelleo líquido.
• Xileno R.A.
• Detergente Tritón N 101 o surfacpol N 909.
• Grasa de silicona.
• Permanganato de potasio R.A.
• Hidróxido de sodio R.A.
• Solución patrón de agua tritiada (T) de actividad conocida.
• Agua destilada.
4.5.3 Materiales
• Equipo de destilación.
• Matraz bola de 250 mL de fondo plano con entrada 24/40.
• Refrigerante Liebig con entrada 24/40.
• Conector con entrada 24/40.
• Colector con entrada 24/40.
• Manguera de hule látex.
• Soporte metálico.
• Pinzas de 3 dedos con nuez.
• Vasos de precipitados de 50 mL.
• Barras de agitación magnética.
• Pipetas volumétricas de 10 mL.
• Espátulas y pisetas.
• Varillas de vidrio.
• Desecador.
• Portamuestras para conteo por centelleo líquido de capacidad 22 mL.
• Frascos y botellas color ámbar.
1 Los primeros 4 reactivos han sido sustituido por una solución de centelleo comercial (Ultima Gold LLT).
115
4.5.4 Equipos
• Regulador con reóstato variable.

• Parrilla de calentamiento con agitador magnético.
• Campana de extracción de humos.
• Balanza analítica.
• Contador de centelleo líquido.
4.5.5 Descripción de actividades
4.5.5.1 Preparación de la muestra1 2
1. En un matraz bola de 250 mL poner 100 mL de la muestra de agua. Disolver

aproximadamente 0.5 g de hidróxido de sodio y 0.1 de permanganato de potasio.
2. Colocar el matraz en el regulador con reóstato variable y montar el equipo de
destilación mostrado en la Figura C.4.
3. Hacer circular agua por el refrigerante. Ajustar el voltaje adecuado en el regulador y
verificar que se inicia la destilación.
4. Desechar los primeros 10 mL del destilado, recolectar los siguientes 50 mL y desechar
el agua que no destiló.
5. Vaciar el destilado a un frasco color ámbar y taparlo herméticamente para evitar la
contaminación ambiental de la muestra.
6. En un portamuestras, mezclar 12 mL de la solución de centelleo con 10 mL del
destilado de la muestra.
4.5.5.2 Preparación de una muestra blanco1
En un portamuestras, mezclar 12 mL de solución de centelleo con 10 mL de agua

con bajo contenido de Tritio.
1 Dejar estabilizar la mezcla preparada mediante este procedimiento durante 8 horas en un lugar oscuro. Lo
más recomendable es en el interior del contador de centelleo líquido.
2 Para efectuar una buena purificación de agua verificar método desarrollado en sección 4.4.
116
4.5.5.3 Preparación del estándar1
En un portamuestras, poner 12 mL de solución de centello. Agregar 9 mL de agua

con bajo contenido de Tritio y 1 mL de agua tritiada con actividad conocida.
4.5.6 Conteo de Tritio por Centelleo Líquido
1. Colocar los portamuestras en el transportador del contador de centelleo líquido

mostrado en la Figura C.6, en el siguiente orden: Estándar, blanco, muestra. Contar
cada muestra durante el tiempo necesario para lograr el valor requerido de
concentración mínima detectable (CMD).
2. Anotar las cpm que se obtienen para cada una de las muestras, en el registro
destinado para tal fin.
3. Verificar que el conteo del blanco de reactivos esté dentro de 2 desviaciones estándar
(y anotar las cpm en la carta de control de fondo). En caso contrario, tomar las
medidas correctivas necesarias.
4.5.7 Cálculos
Calcular la eficiencia de conteo, la concentración de actividad de Tritio en la

muestra, la incertidumbre y la concentración mínima detectable.
4.5.7.1 Eficiencia de conteo (E)
cpme − cpm f
E= 4.5.1
Ae
cpme: Cuentas por minuto del estándar.

cpmf: Cuentas por minuto del fondo.
Ae Actividad del estándar.
117
4.5.7.2 Factor de recuperación (Fr)
cpmt − cpm f
Fr = 4.5.2
E * At
Cpmt: Cuentas por minuto del estándar.

At: Actividad del estándar de agua tritiada (dpm).
4.5.7.3 Concentración de actividad de Tritio (Am)1
Am =
(cpm m − cpm f )*1000
4.5.3
60 * E *V * Fr
cpmm: Cuentas por minuto de la muestra.

V: Volumen de la muestra en mL.
4.5.7.4 Incertidumbre de la concentración de actividad
 σ cpm
2

   σ 2 σ
2
 +  Ef  +  Fr 
tc
IA =  4.5.4
 cpm   Ef   Fr 
 
 
4.5.7.5 Concentración Mínima Detectable (CMD)1
4.66s f *1000
CMD = 4.5.5
60 * E *V * Fr
2
  σ Ef   σ Fr  2
2
 sf
= CMD ∗   +  +
  Ef   Fr 
I CMD 4.5.6
 cpm
 f   
-1
1 La respuesta será obtenida en Bq*L .
118
cpmF
sF = 4.5.7
tc
SF: Es la desviación obtenida de una sola medición, para un tiempo de conteo

dado, debido a que, el conteo de datos siempre se asume que tiene la
distribución de Poisson. Para más detalles revisar sección 5.1.8.
4.5.8 Determinación del factor de recuperación1
1. En una matraz bola de 500 mL, poner 99 mL de agua y 1 mL de agua tritiada con
actividad conocida (aproximadamente 3*103 dpm). Disolver aproximadamente 0.5 g
de hidróxido de sodio y 0.1 g de permanganato de potasio. Agregar piedras de
ebullición.
2. Colocar el matraz bola en una manta de calentamiento y montar el equipo de
destilación.
3. Hacer circular agua por el refrigerante. Ajustar el voltaje de salida del regulador con
reóstato variable al valor de 68 volts y verificar que se inicia la destilación.
4. Desechar los primeros 10 mL del destilado, recolectar los siguientes 50 mL y desechar
el agua que no destiló.
5. Vaciar el destilado a un frasco color ámbar y taparlo.
6. En un portamuestras, mezclar 12 mL de la solución de centelleo líquido con 10 mL del
destilado.
7. Dejar estabilizar la mezcla durante 8 horas en un lugar oscuro.
8. Colocar el portamuestras en el transportador del contador de centelleo líquido. Contar
durante el tiempo requerido.
9. Calcular el factor de recuperación usando las fórmulas. Anotar el resultado en el
registro destinado por cada laboratorio para tal fin.
10. Verificar el factor de recuperación cada vez que se ajusten las condiciones del
contador de centelleo líquido.
1 Para efectuar una buena purificación de agua verificar método desarrollado en sección 4.4.
119
5
IDENTIFICACION Y CALIFICACION DE
EQUIPOS
120
IDENTIFICACION Y CALIFICACION DE EQUIPOS
5.1 CONTADOR DE CENTELLEO LÍQUIDO1
5.1.1 ¿Qué es el contador de Centelleo Líquido?
El proceso de centelleo Líquido es básicamente la conversión de la energía de un

evento de decaimiento radiactivo en fotones de luz. Los tubos foto-multiplicadores (PMT)
que son parte del Contador de Centelleo Líquido son los que transforman los destellos de
luz (fotones) en pulsos eléctricos, los cuales son procesados por un sistema multicanal.
En este proceso la muestra que es analizada se disuelve en una sustancia química que
contiene un material centellador capaz de interactuar con las partículas energéticas
emitidas por la muestra, este proceso permite transformar esta interacción en destellos de
luz. (Packard, 1994).
El contador de centelleo líquido medioambiental (LSC) mide radionucleidos en el
ambiente natural donde las concentraciones del radionucleido son bajas y la contribución
de fondo del instrumento a la precisión de la medida es a menudo importante. Durante la
última década, se introdujo una nueva generación de espectrómetros de centelleo líquidos
fabricados comercialmente. Estos Instrumentos han sido clasificados como "nivel bajo",
porque sus rasgos de reducción de fondo han habilitado la cuantificación de muchas
actividades más bajas para un rango de radionucleidos, el factor E2/B se aumenta (donde
E es la eficacia y B es el fondo) o el MDA (Actividad Mínima Perceptible) se disminuye.
Por ejemplo, los aumentos contando sensibilidad han extendido el límite de edad eficaz
del radiocarbono que fecha de 50,000 años a aproximadamente 60,000 años. Además,
niveles de menos de 1 Bq L-1 de agua puede descubrirse para 3H medioambiental.
Además, la incorporación de Analizadores de Multicanal (MCA) y la tecnología del
microordenador han proporcionado los espectros y los datos sofisticados que manejan
capacidades que han hecho una herramienta analítica mucho más atractiva al LSC para
los análisis medioambientales. Debido a estos adelantos, el LSC de bajo nivel se usa
ahora normalmente para los análisis siguientes:
1. Medida de radionucleidos de la serie natural. Muchos se miden ahora rutinariamente a
los niveles medioambientales naturales en un rango de matrices de la muestra
210 222 231
medioambiental. Éstos incluyen isótopos de radio (Ra), uranio (U), Pb, Rn, Pa,
y 234Th.
1 La imagen del Contador se presenta en la Figura C.6.
121
2. Supervisando el ambiente alrededor de establecimientos asociados con la industria

del poder nuclear para radionucleidos antropogénicos, principalmente los emisores
beta sin emisiones gamma significantes como 3H, 14
C, 35
S, 55
Fe, 85
Kr, 89,90
Sr, 99
Te, y
241
Pu.
3. Desechos de armas nucleares; medida de actividades alfa total en partículas aéreas y
superficies limpias.
4. Fechado por Radiocarbono.
3
5. H ambiental en agua.
5.1.2 Principio de funcionamiento
En el contador de centelleo líquido, la radiación emitida por la sustancia radiactiva

interactúa con la sustancia química del centellador (cóctel de centelleo) del cual ella forma
parte, la intensidad luminosa que se desprende como producto de la interacción de la
radiación con el liquido centellador es capturada por los PMT que componen el detector,
estos amplifican la señal la cual se mide en un analizador multicanal, con fines de análisis
espectroscópico y poder determinar la sustancia emisora de radiación. En la técnica el
pulso de salida es proporcional al pulso de entrada. Esto, se muestra en la Figura 5.1.1.
Figura 5.1.1 Esquema del montaje del detector de centelleo líquido.
De acuerdo a lo anterior, los pasos que se siguen durante el proceso de centelleo

líquido son los que se dan a continuación:
122
1. Las partículas Beta son producto del decaimiento radiactivo. Para asegurar el traslado
eficaz de la energía entre la partícula beta y la solución, ésta debe ser un solvente
para la muestra que contiene el radionucleido.
2. En el líquido relativamente denso, la partícula beta viaja distancias cortas antes de
disipar toda su energía cinética. Típicamente una partícula beta tomará sólo unos
nanosegundos para disipar toda su energía cinética; su energía es absorbida por el
líquido centellador en tres termas: calor, ionización y excitación. Parte de la energía
de las partículas beta es absorbida por las moléculas del solvente (centellador),
excitándolas.
3. El solvente emite energía de excitación como luz ultravioleta (UV) y las moléculas del
solvente regresan a un estado no excitado. Las moléculas del solvente excitadas
pueden transferir energía a otras moléculas y al soluto (Figura 5.1.2). El soluto es un
material fluorescente. Una molécula del solvente excitado que cede su energía a una
molécula del soluto perturba la nube de electrones de los orbitales del soluto
llevándolo a un estado de excitación; así los electrones orbitales excitados de la
molécula del soluto regresan a su estado fundamental, una radiación resulta de este
proceso, en este caso un fotón de luz UV. La luz UV es absorbida, por moléculas del
material fluorescente las cuales emiten destellos de luz en el retorno al estado no
excitado. Los eventos de decaimiento nucleares producen aproximadamente 10
fotones por 1 keV de energía. La energía es disipada en un periodo de tiempo en el
orden de 5 nanosegundos. El número total de fotones de las moléculas del material
fluorescente excitadas que constituye el centellador. La intensidad de luz es
proporcional a la energía inicial de las partículas beta que interactúan.
Figura 5.1.2 Ilustración del Proceso de la Colisión.
123
4. Los destellos de luz colisionan en el cátodo del Tubo Foto Multiplicador (PMT). Los
electrones (proporcional al número de pulsos ligeros) se arrojan produciendo un pulso
eléctrico que es proporcional al número de fotones (destello de luz). Un Contador de
Centelleo Liquido (LSC) normalmente tiene dos PMT. La amplitud del pulso de PMT
depende de la localización del evento dentro del contenedor. Un evento que produce
100 fotones será representado por un pulso más grande si el evento está mas cerca al
PMT que si el evento es más remoto. La señal de cada PMT se registra en un circuito
que sólo produce una salida si dos señales ocurren juntas, eso es dentro del tiempo
de resolución del circuito, aproximadamente 20 nanosegundos (coincidencia en el
circuito). Por la suma, la amplitud de los pulsos de cada PMT es aumentada y se tiene
un rendimiento que es proporcional a la intensidad total producida en el centellador
(pulso analógico).
5. La amplitud del pulso eléctrico se convierte en un valor digital (0 ó 1) que representa
la energía de la partícula beta. En el analizador multicanal estos valores digitales
producidos por el LSC son comparados de acuerdo a su intensidad. Ya que cada
canal cuenta con una hendidura de memoria de almacenamiento, teniendo la
capacidad para registrar un rango de energía de 0-2000 keV.
6. El número de pulsos en cada canal es impreso o desplegado en una pantalla (CRT).
De esta manera, la muestra se analiza y el espectro puede trazarse para proporcionar
información sobre la energía de la radiación o la cantidad de material radiactivo
disuelto en el cóctel.
5.1.3 Interferente ó Quench
En ésta técnica de centelleo líquido existen factores que modifican o interfieren en

los resultados de conteo de radiación, a éste factor se le llama interferente (Quench).
El interferente es un factor que reduce la eficiencia de la transferencia de energía a
los fototubos o causa la absorción de los fotones en la muestra. Hay dos tipos principales
de Interferentes: el Interferente químico y el Interferente de color.
El Interferente químico causa una dispersión de la energía radiactiva antes de
convertirse en fotones. Este efecto ocurre durante el traslado de energía del solvente al
líquido centellador.
El Interferente de color es la atenuación de los fotones producidos por la
interacción de la partícula radiactiva con el material fluorescente, los cuales son
124
absorbidos o dispersados por el color en la solución, esto produce una reducción del
rendimiento en los fototubos impidiendo que los pulsos energéticos sean analizados en el
multicanal.
Los valores de índices espectrales de una muestra (SIS) en un espectro indican la
disminución o aumento del Interferente en el análisis de una muestra radiactiva; siendo
esta relación, tal que, a medida que aumenta el valor del Interferente, el parámetro SIS
disminuye. Esto se refleja en un espectro como un desplazamiento a valores de baja
energía.
Con lo anteriormente descrito se puede decir que, si el fenómeno quench afecta
el conteo de radiación captada por el equipo de centelleo; esto significa que en presencia
de un alto interferente, el sistema de medición disminuye su eficiencia en el análisis de
una muestra.
5.1.4 Eficiencia del sistema de medición
Se conoce como eficiencia, al porcentaje de radiación emitida que está siendo

registrado, dependiendo éste de la energía de la partícula de la naturaleza de la misma.
Entre mayor sea la energía de la partícula emitida, mayor es la probabilidad que el equipo
tiene para detectarla; pero si la energía de la partícula emitida es menor, también la
probabilidad para detectarla será menor. Lo que indica que para detectar una curva
energética de un radionuclido de baja energía será necesario escoger una buena técnica
y adecuada para su detección.
La eficiencia de un sistema de detección radiactiva viene definida por:
 CPM 
Eficiencia =   * 100 5.1.1
 DPM 
CPM: es el numero de cuentas por minuto registradas por el equipo de centelleo

DPM: es el número de desintegraciones por minuto emitido por la fuente
radiactiva.
Teniendo un estándar de referencia del radionucleido a analizar, se puede

determinar la eficiencia del equipo y por ende poder calcular el número de
desintegraciones radiactivas presentes en la muestra que se analiza. (Flores, 2004).
125
5.1.5 Nivel de confianza y radiación de fondo
La Radioemisión es muy aleatoria en la naturaleza y además es imposible predecir

cuando, un nucleido cualquiera decaerá. Para considerar esto, es necesario:
Medir un número grande de desintegraciones, cuyo valor medio lo determina el
equipo por la ecuación 5.1.2.
∑x i
x= i =1
5.1.2
n
Y aplicar las leyes de la probabilidad. Esto no es práctico si la vida media del

nucleido es corta ó si el tiempo de conteo es demasiado largo (actividad baja).
Los errores estadísticos pueden considerarse asumiendo distribución de poisson1,
que para una medida:
σA = A 5.1.3
A: es la Actividad ó el número de desintegraciones detectadas por el equipo.

σA: Desviación estándar de A.
Así para un nivel de confianza del 95.45%, el factor de cobertura es 2, por tanto:
valor = A ± 2 A 5.1.4
Para un valor de A incrementándose, el valor relativo de ± 2A½ disminuirá, así para

una actividad determinada, podemos ver su error y su nivel de confianza en la Tabla 5.1.1
Si usted quiere un error relativo menor al 2% con una sola lectura, debe obtener un
número mayor a 10,000 cuentas. Usted puede aumentar el tiempo de conteo si la vida
media lo permite y si el fondo es relativamente constante.
Cada sistema de detección contará varios pulsos incluso cuando ninguna muestra
esté presente, debido a la presencia de:
• Radiación de fondo.
• Emisión Espontánea del detector.
1 Para más detalles de la distribución, verificar en sección 5.1.8.
126
• PM corriente oscura.
• Ruido Electrónico.
Tabla 5.1.1 Actividad requerida para un nivel de

confianza y un error relativo dados.
ACTIVIDAD 2A½ Error (%)
10 6.3 63
100 20 20
1000 63 6.3
10000 200 2
100000 632 0.63
1000000 2000 0.2
La radiación de fondo es típicamente la fuente de mayor ruido. Cada tipo de

detector tiene su propio nivel de fondo, como se muestra en la Tabla 5.1.2. (CRI, s.f.).
Tabla 5.1.2 Nivel de fondo permitido
Promedio Fondo total (cpm)
GM 10 - 12
Nal(TI) 100 - 600
Centelleo líquido 10 - 30
Ge(Li) 10 - 100
5.1.6 Factores que afectan la sensibilidad del equipo
Existen dos aspectos en el diseño de estos sistemas de detección los cuales

afectan la sensibilidad en la detección de los eventos radioactivos:
1. El requerimiento de coincidencia para cada PMT produce un juego de respuestas en
un límite de detección. La partícula beta debe tener suficiente energía para producir al
127
menos dos fotones y cada uno debe interactuar con cada PMT. Inevitablemente, ya
que los fotones son irradiados en todas las direcciones, algunos se perderán a pesar
del reflector. Así, la probabilidad de que un fotón entre en cada PMT disminuye
cuando disminuye la energía de la partícula beta. Con unos cuantos keV de energía la
producción de energía, bajo condiciones ideales, es de 7 a 8 fotones por keV.
2. El fotocátodo de un PMT no es 100% eficiente. La eficiencia de conversión de un
fotón a un fotoelectrón (la eficiencia del cuanto) es alrededor del 30%. Por lo tanto,
cuando trabajamos con 3H, donde la energía beta promedio es menor de 6 keV, este
radionúclido no puede ser detectado con una eficiencia del 100% en muchos eventos
que no producen el suficiente número de fotones.
El efecto neto de estos dos factores da lugar a un umbral de detección, bajo el cual
un evento que ocurra fuera de los límites de dicho umbral difícilmente pueda ser
reconocido. A este nivel se le conoce como umbral de coincidencia y en términos de
energía ocurre en valores abajo de 1 keV.
Otro fenómeno el cual influye en todo conteo es el fondo, inevitablemente
producido por la radiación presente en el ambiente. Diferentes fuentes de radiación
pueden afectar la sensibilidad de la solución de centelleo y el proceso de detección:
1. Radiación cósmica la cual es variable e influenciada por la actividad de las manchas
solares y la presión barométrica.
2. Los desprendimientos de las pruebas nucleares los cuales pueden estar contenidos
en el aire.
3. Los materiales con los que está construido el laboratorio los cuales pueden tener
alguna actividad.
4. La actividad natural en el frasco de vidrio que contiene la muestra y las paredes de los
tubos fotomultiplicadores.
5. La radiación directa proveniente de las fuentes de actividad guardadas en el
laboratorio, o de aparatos que producen radiación tales como equipos de rayos X y
aceleradores lineales.
La muestra en la cámara de conteo y los PMT están rodeados de plomo, con un
grosor típico de alrededor de 2 pulgadas (5 cm.) en todas las direcciones. Esto disminuye
el fondo a proporciones razonables para todas las mediciones que involucran una
actividad baja. El conteo de fondo existe en todas las mediciones que se efectúen y cubre
todos los rangos de energía asociados en la detección de los radionúclidos que se
estudian en aplicaciones en las ciencias naturales. (CIAN, 1996).
128
5.1.7 Calibración del contador
Antes de realizar cualquier conteo, el contador primero deberá ser calibrado o

normalizado. Este procedimiento es requerido para ajustar cada uno de los tubos
fotomultiplicadores para el respectivo balance de una muestra y la calibración del
espectralaizer, el cual contiene a bordo 4000 canales para análisis multicanal. El
procedimiento de calibración ha sido automatizado y es activado usando el protocolo
marcado por SNC, el cual posiciona al equipo en autonormalización y calibración, con un
estándar de 14C, libre de interferentes, proporcionado con el contador. Cuando el sistema
está dentro de las especificaciones, el estándar 14C libre de interferentes, dará un valor de
tSIE (transformed index of the external Standard) de 1000 +/- 50 unidades. Si el valor de
tSIE está por debajo de 950 o por arriba de 1050, el contador está fuera de
especificaciones y debe ser calibrado. (Packard, 1995). Además debe verificarse que el
equipo cumpla con el valor deseado de Chi-Cuadrado descrito en la sección 5.1.8
numeral 4, y con la eficiencia descrita en la Tabla 5.1.9.
Es recomendado que la autonormalización y calibración sea realizada una vez al
día, mientras esté en uso el equipo.
A continuación se dan los pasos para efectuar un procedimiento adecuado a la
calibración, de acuerdo a los requerimientos del equipo1:
1. Inserte el protocolo etiquetado con SNC en un casete portamuestras.
14
2. Coloque el estándar C libre de interferentes, proporcionado con el contador, en la
primera posición del protamuestras. Cargue el casete portamuestras en el contador.
3. Inicie el procedimiento de normalización. El casete portamuestras será movido a la
posición, la muestra se cargará y la calibración iniciará automáticamente.
4. Cuando el procedimiento de calibración es completado, la muestra se podrá descargar
y un mensaje, SYSTEM NORMALIZED, será enviado al impresor.
5.1.8 Verificación del comportamiento estadístico del contador
Siempre que un nuevo contador se instale, que el contador sufra reparaciones

fuertes o después de que el contador se ha calibrado, como fue descrito en la sección
5.1.5, debe comprobarse la estabilidad del contador. Un resultado positivo establecerá la
1 Para realizar una mejor autonormalización es recomendado realizarla con los tres estándares libres de
14 3
interferentes más conocidos, los cuales son: Carbono 14 ( C), Tritio ( H) y fondo, colocándolos en el casete
portamuestras del contador en este mismo orden y siguiendo el mismo procedimiento descrito en la sección
5.1.7; además es de considerar que cada uno de estos, esté dentro de las mismas especificaciones.
129
fiabilidad de los datos generados. Aunque hay muchas maneras estadísticas de lograr
esta tarea, un método conveniente es la prueba del Chi-cuadrado de Pearson.
El conteo de datos siempre se asume que tiene la distribución de Poisson. El
propósito de la prueba del Chi-cuadrado de Pearson es establecer la probabilidad, P, de
repetidas cuentas en una muestra dada dentro de los límites establecidos de variabilidad.
Cuando el valor P está dentro de estos límites, el rendimiento del contador es aceptado
como normal. El Chi-cuadrado se define como sigue:
∑ ((valor observado) − (valor promedio))

n
2
i
X2 = i =1
5.1.5
valor promedio
Donde: n = el número de observaciones, i = valores observados que constituyen n,

y el valor promedio es el valor principal de todas las observaciones. (Se asume que el
valor promedio es el valor esperado).
Para una distribución de Poisson, el grado de libertad, F, se define como:
F = n −1 5.1.6
El valor más deseable de P es 0.5. En conteos estadísticos, Jarrett ha establecido

los límites aceptables de P para quedar entre 0.1 y 0.9. Los valores bajos de P indican
variabilidad alta y hacen pensar en inestabilidad del equipo. Los valores altos de P indican
la carencia de variabilidad o una conducta no aleatoria del contador que puede ser debido
a la generación de una constante, alto nivel de espurio electrónico "ruido" que aparece
como cuenta. Esta prueba debe ser hecha usando el estándar de tritio sellado, libre de
interferentes. El estándar debe ser contado por 1 minuto, 20 veces, puede ser usado otro
período de tiempo, dependiendo, de si el período de tiempo del instrumento es evaluado
por su estabilidad. El procedimiento a seguir para la Ejecución de la prueba Chi-
Cuadrado es dado a continuación:
1. Inserte el protocolo Nº 2 en el casete portamuestras.
2. Coloque el estándar 3H libre de interferentes, proporcionado con el contador, en la
primera posición del casete portamuestras. Cargue el casete en el contador, en el
sitio de la mano derecha del compartimiento de muestras. Remueva todos los demás
casetes del compartimiento de muestras.
130
3. Inicialice el conteo de la muestra. Mueva el casete de muestras a la posición, cargue

la muestra e inicialice el conteo. Después de predefinido el tiempo de conteo, los
datos de conteo serán impresos, retire la muestra del casete, y el casete será
transportado hasta que se retorne a la posición de conteo. En este punto, el
experimento es terminado removiendo el casete del contador.
4. Calcule el valor de chi-cuadrado para los 20 conteos. El valor de chi-cuadrado es
basado en el total de conteos. El valor deseado está entre 11.65 y 27.2. Si el valor
cae por debajo de 11.65 no es alarmante. Esto indica que el contador es muy estable
y el bajo valor de chi-cuadrado puede ser atribuido a los tiempos muy cortos bajo los
cuales fue ejecutada la prueba. Sin embargo, un valor arriba de 27.2 es preocupante.
En este caso, la prueba debe ser repetida y si el contador falla de nuevo, el contador
debe ser revisado antes de usos posteriores.
Además de la prueba Chi-cuadrado, para verificar que el contador funciona
correctamente al inicio, después de la realización de cambios fuertes efectuado al equipo,
es necesario corroborar que, durante el tiempo en el cual se está usando, funcione de
igual forma, para esto, es necesario efectuar pruebas de control de calidad, las cuales
deben efectuarse continuamente de acuerdo a la Tabla 5.1.3.
5.1.8.1 Verificación de la eficiencia en la medición de Tritio
1. Inicie la conversación del editor de protocolo presionando la tecla de función F1. Una
vez presionada la tecla de función, el sistema pide el número de protocolo.
2. Seleccione un número de protocolo que no esté siendo utilizado e introduzca el
número por medio del teclado. Presione la tecla <Intro> y una serie de preguntas del
protocolo se presentarán en pantalla.
3. Use valores asignados del sistema, con la excepción siguiente: CUENTAS/VIAL = 3.
4. Presione la tecla F1 dos veces para salir del editor.
5. Configure el transportador de la muestra como sigue:
a. Seleccione e inserte de manera correcta el protocolo etiquetado en un casete.
b. Cargue un estándar de 3H libre de interferentes.
c. Inicie el conteo.
6. Calcule la eficiencia de acuerdo a la sección 5.1.4. (Use la función de DECAIMIENTO
del instrumento para determinar los valores de DPM de 3H corregidos.). La eficiencia
mínima aceptable para 3H en su ambiente debe ser la descrita en la Tabla 5.1.9.
131
7. Si la eficiencia de 3H está por debajo del mínimo, realice una auto-normalización y

Calibración del sistema y repite la prueba. Si los resultados todavía no están dentro de
los límites definidos, llame a su representante de servicio técnico local.
Tabla 5.1.3 Control de calidad rutinario del contador de Centelleo
Parámetro Procedimiento Frecuencia Aceptación
Eficiencia • Usar una fuente sellada sin Diaria Los valores

del extinción y de actividad conocida. mientras medidos estarán
sistema de Se registra la tasa de conteo. esté en uso dentro del
acuerdo a el equipo. intervalo de 2s,
• Después de un mes se estima la
sección considerando el
desviación típica estadística de la
5.1.8.1 decaimiento de
distribución (s).
la fuente de
• Establecer cartas de control. referencia.
Fondo del • Se mide un fondo sellado sin 2 veces al Los valores

sistema de extinción. día medidos estarán
acuerdo a mientras dentro del
• Se registra la tasa de conteo.
sección esté en uso intervalo de 2s.
5.1.8.2 • Después de un mes es estima la el equipo.
desviación típica estadística de la
distribución (s).
• Establecer cartas de control.
Fuente: OIEA, 2005
5.1.8.2 Verificación de los niveles de radiación de fondo
1. Inicie la conversación del editor de protocolo presionando la tecla de función F1. Una
vez presionada, el sistema pide el número de protocolo a ser revisado.
2. seleccione un número de protocolo que no esté siendo utilizado e introduzca el
número por medio del teclado. Presione la tecla <Intro> y una serie de preguntas del
protocolo se presentarán en pantalla.
3. Use valores asignados del sistema, con las excepciones siguientes:
a. CUENTAS/VIAL = 10
132
b. RADIONUCLIDO: Región A: LL = O, UL = 18.6; Región B: LL = O, UL = 156;

Región C: LL = O, UL = 2000
4. Presione la tecla F1 dos veces para salir del editor.
5. Configure el transportador de la muestra como sigue:
a. Seleccione e inserte de manera correcta el protocolo etiquetado en un casete.
b. Cargue un estándar de fondo libre de interferentes.
c. Inicie el conteo.
6. El fondo del instrumento puede variar debido a las condiciones medioambientales. Por
ejemplo, la altitud y radiación del fondo causarán elevados niveles de fondo. Si el
fondo excede tres veces su nivel del fondo normal, avise a su represente local de
servicio técnico.
5.1.9 Precauciones operacionales y Limitaciones
1. Use sólo viales de muestras que reúnan las especificaciones recomendadas.

2. Este instrumento debe ser instalado, modificado y reparado, sólo por personal
autorizado; cualquier esfuerzo por instalar, modificar o reparar el equipo por personal
no autorizado puede causar mayores daños.
3. Se recomienda que la alimentación de energía al instrumento se mantenga en todo
momento. La alimentación sólo debe quitarse cuando es necesario. Esto mejorará la
estabilidad global del sistema.
4. La temperatura ambiente debe mantenerse dentro de un rango de 15° a 35°C.
5. La humedad ambiental no debe exceder el 85%.
6. El instrumento debe guardarse limpio y libre de todo el material extraño.
7. Evite preparar muestras alrededor del instrumento.
8. Siga toda la rutina de comprobación de rendimiento y los procedimientos de
mantenimiento preventivos.
9. Al medir muestras, la tapa debe cerrarse para impedir que material extraño entre en el
transportador de la muestra y que el ingreso de luz ultravioleta afecte la muestra.
10. Se recomienda que la unidad no sea posicionada permitiendo luz del sol directa o
desprotegido de luz fluorescente que entre en el transportador de la muestra. Esto
puede afectar los sensores ópticos dentro del transportador de la muestra y causar el
funcionamiento erróneo del transportador de la muestra. También, la luz directa de
este tipo puede excitar las muestras y causar resultados erróneos de conteo.
133
11. Se recomienda que la alimentación eléctrica sea proporcionada por una línea
separada que tenga su propio interruptor de aislamiento y fusible o circuito de corte. Si
se anticipan perturbaciones excesivas al voltaje de la línea, un transformador de
aislamiento o un suministro de poder ininterrumpido pueden ser necesarios.
5.1.10 Riesgos del equipo
5.1.10.1 Riesgos eléctricos y mecánicos
Los funcionamientos normales del sistema no proponen riesgo eléctrico ni

mecánico al usuario.
La eliminación de cualquier panel sólo debe ser realizado por personal calificado.
Asegure que el receptáculo de corriente directa (A.C.) al que el instrumento se conecta
tiene polo a tierra. El instrumento se ha probado para asegurar que, cuando se conecte
apropiadamente a un buen receptáculo de A.C., la caída a tierra sea menor a 500 µA. 10
amperios de protección son requeridos en líneas de A.C. a la que el instrumento será
conectado para 234V de funcionamiento y una protección de 20 amperio para 117V de
funcionamiento.
5.1.10.2 Riesgos de Radioactividad
Las cantidades pequeñas de radioactividad normalmente usadas en conteo por

centelleo líquido no son riesgosas para el usuario. Si embargo los usuarios deben
conservar todas las precauciones de seguridad normales al manejar material radiactivo.
Cuando sea posible, recipientes abiertos de material radiactivo, deben mantenerse lejos
del transportador de la muestra para evitar derramamientos y por consecuencia, en
tiempo fuera de servicio del sistema para evitar contaminación. Si un derramamiento
radiactivo ocurre dentro del instrumento, o si una muestra cae dentro del transportador,
limpie con materiales radiactivos de limpieza de acuerdo a la sección 5.1.11.1.
Si la unidad está provista con una fuente normal externa, por ninguna razón,
intente desmantelar cualquier parte del sistema normal externo o quitar la fuente. También
se prohíbe, el abandono o la disposición de la fuente externa por el usuario y sólo serán
realizadas por los representantes de servicio técnicos autorizados.
134
5.1.11 Mantenimiento del equipo
5.1.11.1 Limpieza del equipo
El transportador de la muestra del sistema debe ser limpiado ocasionalmente

usando una tela suave humedecida con solución de jabón apacible. Si el sistema tiene la
opción de transportador de la muestra refrigerada instalada, verificar mensualmente que
el filtro está libre del polvo y suciedad. Limpie el filtro como es requerido.
5.1.11.2 Mantenimiento preventivo
Con la excepción de la inspección y la limpieza, no hay procedimiento de

mantenimiento preventivo que pueda ser realizado por el usuario. En el sistema normal el
mantenimiento preventivo puede realizarse en una base prescrita bajo un acuerdo de
mantenimiento con su proveedor.
El sistema Tri-Carb debe inspeccionarse siempre que un mal funcionamiento del
sistema ocurra o por lo menos una vez por semana, para lo siguiente:
1. Chequear que los casetes y superficies del transportador de la muestra estén libres de
suciedad u otra materia. El movimiento del casete debe ser liso sin vibración excesiva.
2. Verificar para los conectores eléctricos o mecánicos sueltos (no realice ningún
desmontaje.)
3. Garantizar que todas las copias impresas y presentadas sean adecuadas.
4. Asegurar que todos los controles e indicadores están trabajando.
5.1.11.3 Mantenimiento correctivo
Actualmente no hay procedimiento de mantenimiento correctivo que puede ser

realizado por el usuario; sin embargo, la Tabla 5.1.4 proporciona una lista de posibles
problemas operacionales que pueden ser encontrados por el usuario durante el
funcionamiento del sistema normal y sus acciones correctivas asociadas.
135
Tabla 5.1.4 Procedimientos de Mantenimiento Correctivo
Problema Síntoma /Acción
No visualiza • La característica de protector de pantalla ha borrado la pantalla.

Presione la tecla <Alt> para restaurar.
• Verifique que el interruptor de poder del equipo y del monitor CRT,
están en la posición de encendido.
• Presione las teclas <Ctrl><Alt><Del> simultáneamente para realizar
un diagnóstico de prueba.
No imprime • Verifique que el interruptor de poder del impresor está en la posición

de encendido.
• Insuficiente papel. Cargue papel.
• Restaure el impresor interrumpiéndolo con el botón de
encendido/apagado (ON/OFF), poniéndolo primero en la posición de
apagado, y luego recolocándolo en la posición de encendido
nuevamente.
• Verifique que el impresor está en línea.
El • Verifique que el interruptor de poder del equipo está en la posición de

Transportador encendido.
de la muestra • Verifique que el número de casetes en la plataforma del transportador
no responde de la muestra sea el más apropiado.
a órdenes. • Chequee si el mensaje de error se despliega en video por diagnóstico
de mal funcionamiento.
• Estado de recuperación en marcha.
• Imprima una gráfica de la curva de correlación de la eficiencia de
DPM.
• Cambie el Interruptor de poder de apagado a encendido.
Movimiento • Si los sensores ópticos del transportador de la muestra son afectados

erróneo del por luz brillante, cierre la tapa.
transportador • Obstrucción en el transportador de la muestra.
de la • El casete portamuestra no está etiquetado apropiadamente (número
muestra. de identificación).
136
Problema Síntoma /Acción
Cambiador de • Verifique que el interruptor del equipo está en la posición de

muesta encendido.
inactivo. • Si el ciclo de conteo de todas las muestras ha sido completado,
restablezca el ciclo de control e inicialice el conteo.
• Conversación en modo ACTIVO, finalice la conversación.
• En conversación con un programa con el mismo número como lote de
muestra que tiene avanzada la estación de conteo, finalice la
conversación.
• Verifique el mensaje del error en video y/o impresora para el
diagnóstico de mal funcionamiento.
• Muestra en posición de conteo, presentación en tiempo cambiante.
Las muestras • Protocolo no definido, defina protocolo. Ciclos completados,

no cargan. restablezca mando del ciclo.
• Muestra trasportada fuera de tiempo, ciclos completados en todos los
protocolos.
• Dimensiones del vial incorrectas.
Indicador de • Protocolo no definido, defina protocolo.

protocolo • Ciclo completado, restablezca mando del ciclo.
desviado. • Dañado o etiquetas desconocidas.
Impresión • Anchura de Papel incorrecta

errónea. • Papel colocado en el impresor incorrectamente.
• Algo obstruye la entrada del papel en el impresor.
Presentación • Programa de diagnóstico activado, Presione F1 para volver a la

anormal Página de Estado.
Sistema • El sistema no reacciona a cualquiera función de entrada. Presione

Bloqueado. simultáneamente las teclas <Ctrl><Alt><Del>.
• Apague el equipo y espere de 10 a 15 segundos; luego enciéndalo.
• Si estos procedimientos o corrigen el problema, llame a su
representante de servicio técnico.
137
5.1.12 Especificaciones del tipo de viales para el análisis
Varios tipos de viales son usados con este sistema Tri-Carb. De la Tabla 5.1.5 a la
Tabla 5.1.7 se especifican las dimensiones aceptables del para su uso con el sistema.
La capacidad máxima de muestra para viales grandes es de 22 mL y para viales
pequeños es de 10 mL. Además de estos dos, existe un tercero, un tanto más pequeño
(para análisis donde no se requiera demasiada cantidad de muestra), cuya capacidad es
de 4 mL.
Tabla 5.1.5 Dimensiones requeridas para definir el tamaño de viales grandes
Item Mínimo (mm) Máximo (mm)
Diámetro de la tapa 22.0 Menor al diámetro del vial
Diámetro del vial 26.0 28.1
Altura del vial 58.4 63.0
Grosor de la base 0.5 2.8
Grosor de la tapa 0.5 3.2
Tabla 5.1.6 Dimensiones requeridas para definir el tamaño de viales pequeños
Tabla 5.1.7 Dimensiones requeridas para definir el tamaño de viales de 4 mL
138
5.1.13 Datos Generales y Requerimientos
5.1.13.1 Datos Generales
Fabricante: Canberra-Packard Instrument

Modelo: Tri-Carb 2100TR
Serie: A210001
Procedencia: Viena, Austria
Ingreso al CIAN: Marzo/19961
Rango de energía: (0-2000) keV
Fuente normal externa: 133Ba, 18,8 µCi ± 17%
5.1.13.2 Requerimientos eléctricos
117 Vac + 10%, 50/60 Hz, 20 amperios de protección

220 Vac + 10%, 50/60 Hz, 10 amperios de protección
Impulso de consumo < 900 VA; 1150 VA con opción de control de temperatura
5.1.13.3 Requerimientos Medioambientales
Temperatura de operación: (15-35) ºC

Humedad relativa: (30-85) %
5.1.14 Datos típicos de rendimiento2 3
Tabla 5.1.8 Fondo observado en modo de conteo normal (NCM)
Isótopo Energía (keV) Promedio (CPM)4

3
H 0 -18.6 17.3
14
C 0 -156 24.3
1 La orden de recibo es presentada en el anexo E, en el cual se especifican los accesorios del Contador.
2
2 Los valores para la eficiencia, el fondo y la E /B, por el NCM fueron determinados usando un juego de
estándares sellados de viales grandes de vidrio con P.N. 6008400 y 6008500; trazados de NIST a
PerkinElmer. En modo de conteo de alta sensibilidad los valores fueron determinados usando un juego de
estándares sellados de viales grandes de vidrio, con P.N. 6018914; trazados de NIST a PerkinElmer.
3 Todos estos valores fueron recolectados por PerkinElmer.
4 Comparar con valores de fondo dados para centelleo líquido de Tabla 5.1.2.
139
Tabla 5.1.9 Eficiencia mínima aceptable en NCM1
Isótopo Energía (keV) Eficiencia (%)
Vial grande Vial pequeño

3
H 0-18.6 60 58
14
C 0-156 95 94
Tabla 5.1.10 Figura de mérito (E2/B) en NCM
Isótopo Energía (keV) (E2/B)

3
H 1-18.6 180
14
C 4-156 380
Tabla 5.1.11 E2/B, Modo de conteo de alta sensibilidad

3
H 1-12.5 300
14
C 14.5-97.5 950
Tabla 5.1.12 E2/B, Modo de conteo en niveles muy bajos

3
H 1-12.5 500
14
C 14.5-97.5 1400
1 Para especificaciones del tipo de vial consultar sección 5.1.12.
140
5.2 REGULADOR CON REÓSTATO VARIABLE Y AGITADOR

MAGNÉTICO1 2
5.2.1 Datos Generales
Fabricante: IKA WORKS, Inc.

Modelo: RH Basic.
Serie: 03.110111.
Año de fabricación: 1998.
Fabricado bajo norma: ISO 9001.
5.2.2 Medidas de seguridad
Cuando se usan equipos eléctricos precauciones básicas se deben tomar para

reducir el riesgo de incendio, choque eléctrico y lesión personal, incluyendo las siguientes:
1. Lea todas las instrucciones antes de usar.
2. Remueva el cable de conexión de la unidad o de la pared para desconectar cuando se
vaya a hacer servicio, limpieza, o para cualquier otra razón.
3. Para reducir el riesgo de choque eléctrico, no sumerja el equipo en agua o líquidos.
4. Refiérase a las instrucciones para limpieza.
5. Asegúrese que el cable de conexión eléctrica que viene con su equipo cumple con sus
requisitos AC (Corriente alterna).
6. Use solamente cable de conexión eléctrica de tres puntas (conexión a tierra) con esta
unidad.
7. No trate de operar esta unidad si encuentra algún defecto o daño. Por favor devuelva
la unidad al centro de servicio para ser examinada, reparada, o hacerle los ajustes
eléctricos o mecánicos necesarios.
8. Use este equipo solamente para el propósito que fue diseñado.
9. Para evitar choque eléctrico, no abra esta unidad. Recurrir a personal calificado
solamente.
10. Cuando se esté trabajando sin el termómetro de contracto, el conector gris debe estar
conectado. De lo contrario, el calentador no trabajará.
1 Fuente: Works, s.f.

2 El regulador se presenta en la Figura C.3
141
11. Si el control principal de calentamiento no funciona adecuadamente, la temperatura

interna puede sobrepasar la permitida. Antes de que el potenciómetro se destruya, la
unidad se apaga. Si esto ocurre, apague y permita un tiempo para que la unidad se
enfríe, y después encienda el interruptor de calentamiento.
12. Si los líquidos con los que está trabajando caen sobre el equipo, limpie
inmediatamente.
5.2.3 Precauciones
1. Cuando se manejen productos químicos peligrosos, use protección adecuada para

sus manos y ojos.
2. El peso de los objetos en la placa no debe sobrepasar las 33 libras (15 Kg.).
3. No use recipientes que sean más grandes que el diámetro de la superficie de
calentamiento (5.5” ó 140 mm.).
4. Recuerde usar precaución cuando esté calentando o agitando recipientes de diámetro
pequeño porque se pueden voltear fácilmente.
5. No lo use cerca de productos químicos inflamables.
6. Para calentar líquidos inflamables, un controlador externo de temperatura se requiere
y debe ser instalado. El controlador apaga el agitador magnético antes de que el
medio alcance el punto de encendido.
7. El RH basic no debe ser usado en cuartos con materiales explosivos.
8. El instrumento debe ser colocado sobre una superficie a prueba de incendios o que no
sea inflamable.
9. Evite contacto con la placa calefactora, puede estar caliente (temp. máxima 450ºC).
10. También se debe tener cuidado cuando se usa este equipo cerca de equipos donde
se guarden datos, ya que puede resultar en pérdida de estos.
11. Antes de encender el instrumento, por favor asegúrese que su voltaje es el correcto
con el indicado en la placa. Si el voltaje no es el mismo, no lo encienda.
12. Para líquidos por encima de 500 mPas, el acoplamiento entre el magneto no es
suficientemente fuerte para hacer que la barra magnética se mueva. No se
recomienda el uso del RH basic para este propósito.
13. Los vasos o embudos deben ser a prueba de campos magnéticos (vidrio, acero
inoxidable, o aluminio).
14. No use barras magnéticas de más de 60 mm. de largo.
142
5.2.4 Agitación
1. La función de agitación se comienza, controla y para con el botón derecho.

2. Coloque una barra magnética dentro del vaso y colóquelo en la mitrad de la placa.
3. Cuando gire el control en sentido de las manecillas del reloj, la luz del indicador de
agitación se enciende.
4. La velocidad se puede ajustar desde 150 hasta 1200 revoluciones por minuto (rpm).
El motor gira en sentido contrario a las manecillas del reloj.
5. Para detener la agitación, gire el control en sentido contrario a las manecillas del reloj.
5.2.5 Calentamiento
1. El calentamiento se inicia, controla y para con el botón izquierdo.

2. Para iniciar el calentamiento, gire el control en sentido de las manecillas del reloj, la
luz del indicador de temperatura se enciende.
3. La temperatura de la placa puede ser ajustada desde 50 hasta 450 ºC.
4. Para disminuir la temperatura gire el control en sentido inverso a las manecillas del
reloj.
5.2.6 Limpieza
1. Desconecte la unidad.
2. Limpie cuidadosamente con un trapo humedecido en agua tibia.
3. No lo limpie con acetona o líquidos orgánicos, excepto alcohol.
4. En casos extremos, utilice alcohol de un grado medio.
5. Secarlo completamente.
6. Para evitar choques eléctricos, no abra la unidad. Esto debe ser realizado por
personal calificado. Nunca sumerja el equipo en agua u otros líquidos.
7. Si algún líquido inflamable o tóxico se derrama por encima o cerca de la unidad, por
favor referir a su unidad de materiales peligrosos para limpiar o descontaminar, o
contactar al manufacturero.
143
5.2.7 Normas y regulaciones
Tabla 5.2.1 Datos técnicos
EMV-regulación 89/336/EWG
Internacional
IEC 1010
Voltaje 115 V (AC) ± 10%, 60 Hz.
230 V (AC) ± 10%, 50/60 Hz.
Protección contra choque eléctrico I (Conexión a tierra)
Cable 2 + Conexión a tierra (fase simple)
Consumo de energía 515 VA
Fusible a 115V 2x5 Amp (T)
Fusible a 230V 2x2.5 Amp (T)
Tabla 5.2.2 Condiciones ambientales de operación
Temperatura (5-40)ºC ó (41-104)ºF
Humedad Relativa Máximo de 85% para temperaturas de hasta

31ºC, disminuyendo a un nivel de 50% a 40ºC.
Altitud máxima 2000 m.
Duración de operación 100%
Clase de protección IP 21 (DIN 40050)
Radio protegido Conforme a VDE 0871
Grado de polución 2
Categoría de voltaje excesivo II
144
5.3 BALANZA ANALÍTICA1 2
5.3.1 Datos Generales
Fabricante: Mettler Toledo.

Modelo: AG245.
Serie: 1118130041.
Fabricada bajo normas certificadas: ISO 9001 e ISO 14001.
Fecha de ingreso al CIAN: Mayo/1999.
Precisión: 41g/0.01mg, 210g/0.1mg.
Auto-calibración con una sola pesa.
5.3.2 Elementos de indicación, mando y conexión de la balanza
Parte Anterior
1. Indicador.
2. Elemento de acoplamiento izquierdo para ventanillas de corta aires.
3. Mango de ventanilla izquierdo.
4. Placa de la cámara de pesada.
5. Corta-aires anular.
6. Platillo.
7. Ventanilla de corta-aires izquierda.
8. Ventanilla de corta-aires con mango deslizador.
9. Corredera para instrucciones de manejo resumidas.
10. Ventanilla de corta-aires derecha.
11. Mango de ventanilla derecha.
12. Elemento de acoplamiento derecho para ventanillas de corta-aires.
13. Teclas de mando.
Parte Posterior
14. Pata roscada.
1 Fuente: Mettler, 1998.

2 La imagen de la balanza se presenta en la Figura C.1
145
15. Montura para seguro antirrobo.

16. Toma de conexión para alimentador.
17. Conexión de interfase LocalCAN.
18. Control de nivelación.
Figura 5.3.1 Partes de la balanza
146
Parte Inferior
19. Mecanismo para accionamiento del corta aires.

20. Tapa de abertura para pesadas debajo de la balanza.
Indicador
21. Unidades de pesada.

22. Indicador alfanumérico (resultado, menú, etc.).
23. Símbolo del detector de estabilidad.
24. Símbolo para resultado calculado.
25. Indicador de estado del adaptador de vibración.
26. Indicador de estado del adaptador de proceso de pesada.
27. Indicador de estado de la repetibilidad.
28. Indicadores de función para aplicaciones especiales.
29. Indicador de modo de calibración.
5.3.3 Medidas de Seguridad
1. Utilice la balanza exclusivamente en interiores cerrados.

2. No debe operar con ellas en ambiente expuesto a explosiones y sólo debe utilizar
enchufes con toma de tierra.
3. Utilice únicamente el alimentador suministrado con la balanza y asegúrese de que el
valor de tensión grabado coincide con la tensión de red local.
4. Utilice con la balanza sólo accesorios y aparatos periféricos correspondientes que
están adaptados de forma óptima a su balanza.
5. La balanza es de fabricación robusta, pero es un instrumento de precisión. Trátelo por
tanto con cuidado y se lo agradecerá con un servicio de muchos años sin problemas.
6. No manipule el teclado de la balanza con objetos puntiagudos.
7. No abra la balanza, pues no contiene piezas que el usuario pueda mantener, reparar o
sustituir.
147
5.3.4 Uso del Menú
El menú le permite adaptar la balanza a sus necesidades de pesada específicas.

En él puede modificar los ajustes de su balanza y activar funciones.
El menú contiene 14 opciones diferentes, cada una
de ellas con varías posibilidades de elección:
1. Reset: Llamada del ajuste de fábrica.
2. Calibración: Preajustes para el modo y la
comprobación de la calibración.
1 2
3. Llamada de ajuste automático : Activación o
desactivación de llamada de ajuste en el indicador.
3
4. Función : Preselección de la función que debe estar
disponible por pulsación en la operación de pesada.
5. Adaptador de vibración: Adaptación de la balanza a las
condiciones ambientales.
6. Adaptador de proceso de pesada: Adaptación de la
balanza a distintos modos de pesada.
7. Repetibilidad: Elección de la repetibilidad del resultado.
8. Unidad de pesada 11: Especificación de la 1a unidad
de pesada con que la balanza debe mostrar los
resultados.
9. Unidad de pesada 23: Especificación de la 2a unidad
de pesada con que la balanza debe mostrar los
resultados.
10. Corrección del cero: Activación o desactivación de la
corrección automática del cero (cero automático).
11. Desconexión automática: Preselección del tiempo al cabo del cual la balanza debe
desconectarse automáticamente.
12. Modo activación1: Comienzo sin o con test de indicador.
13. Iconos: Activación o desactivación de los iconos.
14. Ajustes: Salvaguardia o impresión de todos los ajustes de menú.
1 La balanza en versión verificada tiene ajustada la unidad de pesada de forma fija, tal que no puede
cambiarse.
2 Esta opción sólo aparece cuando en la opción 3 no se ha seleccionado “FACT" ó “CAL oFF".
3 En las balanzas en versión verificada sólo son seleccionabas las unidades de pesada estipuladas por la ley
de verificación específica del país.
148
5.3.5 Nivelación de la balanza
A fin de garantizar en todo momento resultados repetibles, la balanza ha de estar

en posición exactamente horizontal. Para compensar pequeñas desigualdades de la
superficie de apoyo la balanza se puede nivelar girando las dos patas roscadas de atrás
hasta que la burbuja de aire se situé en el centro del control de nivelación.
5.3.6 Ajustes de la balanza
5.3.6.1 Ajuste (calibración) con pesa interna
De acuerdo con el ajuste elegido en el menú, el ajuste puede ser totalmente

automático con la pesa interna incorporada (FACT) o semiautomático.
5.3.6.2 Ajuste (calibración) interno totalmente automático FACT
Su balanza sale de fábrica preparada para el ajuste totalmente automático con la

pesa interna de ajuste.
5.3.6.3 Ajuste (calibración) interno semiautomático
Si la balanza se encuentra fuera de la tolerancia de ajuste, y dependiendo de si se

ha ajustado en el menú la llamada de ajuste automático, la balanza le pide, mediante
«Cal» parpadeante en la pantalla, que ajuste (calibre) por pulsación con la pesa interna.
En las balanzas en versión verificada, el ajuste (calibración) se realiza automáticamente
con la pesa interna, de acuerdo con la ley de verificación específica del país.
Si quiere calibrar su balanza con la pesa interna, proceda de la forma siguiente;
1. Asegúrese de que en el menú está seleccionado "FACT" o el ajuste con pesas
internas (Cal int)".
2. Asegúrese también de que el platillo está descargado y cierre las ventanillas del corta-
aires (si existe). No hace falta tarar antes del ajuste.
3. Inicie el proceso de ajuste por pulsación larga de la tecla «Cal». La balanza indica
brevemente que se ajusta con la pesa interna.
Durante el ajuste se siguen los pasos siguientes:
149
1. Se carga la pesa de ajuste interna.

2. Se retira la pesa de ajuste interna.
3. La balanza procesa los resultados del ajuste.
4. La balanza comunica la terminación con éxito del ajuste.
5. La balanza vuelve automáticamente al modo pesada.
6. En cualquier momento se puede interrumpir un ajuste (calibración) en marcha por
pulsación corta de la tecla «C».
7. Si no es posible un ajuste como es debido (p. ej. a causa de vibraciones), la balanza
cancela el proceso de ajuste y el indicador señala "Abort”. Pulse la tecla «C» para
borrar este mensaje y empiece otra vez el proceso.
8. Si la balanza tiene conectada una impresora, el ajuste (calibración) se imprime
automáticamente de acuerdo con GLP.
5.3.6.4 Calibración con pesas externas (VariCal)
De acuerdo con el ajuste elegido en el menú, la calibración se puede hacer con la

pesa incorporada o con una pesa externa. La balanza sale de fábrica ajustado a la
1 2
calibración con pesa interna. Si quiere calibrar su balanza con una pesa externa ,
proceda de la forma siguiente:
1. Asegúrese de que en el menú está seleccionada la "Calibración con pesas externas
(VariCal)"
2. Asegúrese de que el platillo está descargado y cierre las ventanillas del corta-aires. No
hace falta tarar antes de la calibración.
3. Comience el proceso de calibración por pulsación larga de la tecla «Cal». La balanza
indica brevemente que se calibra con una pesa externa
4. La balanza le pide ahora que elija el peso deseado
5. Si no desea calibrar con el peso propuesto, puede elegir otro peso3 por pulsación
corta de la tecla « ». Las pesas disponibles dependen del modelo.
6. Confirme el peso elegido con la tecla menú « [». Con ello se activa el proceso de
calibración, La balanza determina el cero.
1 Si no es posible una calibración correcta (p. ej. a causa de vibraciones), la balanza cancela el proceso de
calibración y el indicador señala "Abort". Pulse la tecla «C» para borrar este mensaje y empiece otra vez el
proceso de calibración. Puede cancelar en cualquier momento la calibración en marcha por pulsación corta
de la tecla «C».
2 En cualquier momento puede cancelar la calibración en marcha por pulsación corta de la tecla «C».
3 Esta posibilidad no existe en las balanzas en versión verificada.
150
7. A continuación se le pide que cargue el peso.

8. Ponga el peso pedido en el centro del platillo.
9. Durante la calibración aparecen los segmentos horizontales.
10. Una vez concluido el proceso de calibración se le pide que quite el peso.
11. Una vez descargada la balanza indica el fin del proceso de calibración y regresa al
modo pesada.
12. Si la balanza tiene conectada una impresora, el ajuste se imprime automáticamente de
acuerdo con GLP.
5.3.7 Prueba de la balanza con pesa interna o externa
En cualquier momento usted puede comprobar la exactitud de su balanza. Esta

comprobación se realiza con la pesa incorporada o bien con pesas externas, dependiendo
de su ajuste en el menú.
5.3.7.1 Prueba de la balanza con la pesa interna1 2
1. Asegúrese de que se ha seleccionado el "Test de la balanza con la pesa interna (test

int)" en el menú.
2. Asegúrese de que el platillo está descargado y cierre las ventanillas del corta- aires.
No hace falta tarar antes del test.
3. Active el proceso por pulsación larga de la tecla «Cal». La balanza confirma
brevemente que la comprobación se realiza con la pesa interna.
Durante la comprobación aparecen las indicaciones siguientes:

1. Se carga la pesa interna.
2. La balanza determina el cero.
3. La balanza confirma que la prueba está hecha.
4. La balanza muestra ahora durante 10 segundos la diferencia (desviación) entre la
calibración y la pesada de comprobación actual.
5. Una vez concluida la prueba, la balanza vuelve automáticamente al modo pesada.
1 Si no es posible una calibración correcta (p. ej. a causa de vibraciones), la balanza cancela el proceso de la
prueba y el indicador señala "Abort". Pulse la tecla «C» para borrar este mensaje y empiece otra vez el
proceso de comprobación.
2 En cualquier momento puede cancelar una prueba en marcha por pulsación corta de la tecla «C».
151
6. Si su balanza tiene acoplada una impresora, se imprime automáticamente la

desviación calculada.
5.3.7.2 Prueba de la balanza con pesas externas1 2
1. Asegúrese de que se ha seleccionado el "Test de la balanza con pesas externas (test

E)" en el menú.
2. Asegúrese de que el platillo está descargado y cierre todas las ventanillas del corta-
aires. No hace falta tarar antes del test.
3. Comience el proceso de comprobación por pulsación larga de la tecla «Cal». La
balanza confirma brevemente que la comprobación se realiza con una pesa externa.
4. La balanza le pide ahora que cargue la pesa externa.
5. Durante la comprobación aparecen los segmentos horizontales.
6. La balanza le pide ahora que retire su peso.
7. Una vez retirado el peso, la balanza procesa los resultados de la comprobación.
8. La balanza confirma que el test está hecho y acto seguido vuelve automáticamente al
modo pesada.
9. Si su balanza está conectada a una impresora, se imprime automáticamente el peso
calculado de la pesa de control externa, Ahora puede anotar a mano en el informe el
peso teórico “Target" y la desviación “Diff”.
5.3.8 Acondicionamiento apropiado de la balanza
Las balanzas analíticas modernas, como las balanzas AG, trabajan hoy con tanta
perfección que es posible prescindir de salas especiales y mesas de piedra para pesar. La
electrónica más reciente acorta los tiempos de pesada y permite la adaptación a las más
variadas condiciones ambientales, con lo que las balanzas se pueden integrar
directamente en procesos de producción. Cierto es que ni siquiera hoy deben
despreciarse las influencias ambientales. Generalmente se trata de efectos físicos que
ocasionan variaciones de peso medibles para las balanzas analíticas (p. ej. por
evaporación lenta, absorción de humedad, etc.), o de fuerzas actuantes sobre la carga
(magnetismo, electrostática, etc.), que la balanza interpreta como cambios de peso. En
este capítulo encontrará información de ayuda para identificar tales influencias y eliminar
o reducir sus efectos.
152
5.3.9 Precauciones para un funcionamiento apropiado
5.3.9.1 La electricidad estática de cargas y recipientes
Figura 5.3.2 Cargas electrostáticas.
Esta electricidad estática aparece con frecuencia en locales con calefacción por
aire seco (menos de un 40 % de humedad relativa) y en materiales de vidrio o de plástico,
produciendo fuerzas que pueden afectar a la pesada. Ello se traduce en resultados
continuamente cambiantes e inestables del indicador.
En algunos casos basta con poner la carga en un recipiente metálico.
Utilice siempre el menor recipiente de pesada posible, ya que el error tiende a
aumentar con el tamaño del recipiente.
Eleve la humedad del aire con un humidificador de aire.
Utilice una pistola antiestática comercial o un spray antiestático, sí bien esto no da
buen resultado con todos los materiales, en muchos casos funciona.
5.3.9.2 Cargas o recipientes magnéticos
El magnetismo de una carga puede hacer que el resultado dependa de la posición

de la carga en el platillo y que el resultado se reproduzca mal. Las fuerzas magnéticas
son interpretadas erróneamente por la balanza como carga adicional.
153
En algunos casos sencillos basta con aumentar la distancia entre la carga y el

platillo. Ponga para ello la carga sobre un recipiente metálico no magnético (p. ej.
aluminio) o de vidrio. Como alternativa puede utilizar la abertura de suspensión de su
balanza y pesar por debajo.
Cuando sea posible debe intentar desmagnetizar la carga o el recipiente.
Ponga la carga en un recipiente magnéticamente blando para apantanar las
fuerzas magnéticas.
5.3.10 Mantenimiento y Limpieza
5.3.10.1 La limpieza simple
Separe el platillo y luego la placa de la cámara de pesada. Limpie ésta con un

pincel apropiado
5.3.10.2 La limpieza general
1. Quite la balanza de la alimentación eléctrica.

2. Retire el platillo.
3. Retire la placa de la cámara de pesada.
4. Cierre ambas ventanillas de la cámara.
5. Retire la corredera con las instrucciones de manejo resumidas.
6. Seguidamente retire de la balanza los cristales de la ventanilla superior de la cámara,
con cuidado hacia atrás. Sostenga el cristal inferior para que no caiga al suelo.
7. Suelte el bloqueo de la tapa de la cámara.
8. Saque con cuidado hacia arriba la tapa de la cámara.
9. Retire el cristal delantero y saque de su guía las dos ventanillas laterales de la cámara
hacia arriba. Estas dos ventanillas solo se pueden retirar si está adelante del todo
(“cerradas”).
1
10. Limpie todas las piezas sueltas desmontadas y la propia balanza .
11. Vuelva a ensamblar la balanza en orden inverso. Al colocar las ventanillas laterales
de la cámara de pesada, haga que descansen correctamente en su ranura guía2.
1 No utilice nunca agentes de limpieza por frotado o disolventes fuertes.

2 No olvide enclavar la tapa de la cámara de pesada.
154
5.3.11 Características técnicas y accesorios
Tabla 5.3.1 Alimentación eléctrica
AC/AC alimentador 115 V, -20%+15%, 50/60 Hz, 195mA, Sek: 12V, 50/60HZ, 1,25A
Cable de red 230 V, -20%+15%, 50/60 Hz, 90mA, Sek: 12V, 50/60HZ, 1,25A
Protección Disyuntor de protección térmica
balanza 9.5-17.5 V, 50/60 Hz, 7 µA 9-20 V = 0.7 W
Tabla 5.3.2 Condiciones ambientales para la balanza1
Altura sobre nivel medio del mar hasta 4000 m
Temperatura 5-40° C
Humedad atmosférica 80% RH @ + 30° C
Categoría de sobrevoltaje II
Grado de ensuciamiento 2
Equipo estándar
Balanza completa con abertura para pesar por debajo, dispositivo para seguro
antirrobo e instrucciones de manejo resumidas integradas, funda protectora para teclado e
indicador, pincel de limpieza, alimentador, soporte para alimentador, cable de red,
instrucciones de manejo, corta-aires anular.
1 Utilice la balanza exclusivamente en interiores cerrados.
155
Tabla 5.3.3 Características técnicas1
Precisión de indicación 0.1 mg/0.01 mg
Capacidad máxima 210g/41g
Zona de tarado O...210g/0... 41g
Repetibilidad (s) 0.1mg/0.02mg
Linealidad2 ±0.2mg/±0.03mg
Tiempo de estabilización (típico) 5 s
Tabla 5.3.4 Ajuste3
Con pesa interna 200 g
Con pesas externas 40/100/200 g
Tabla 5.3.5 Sensibilidad
Deriva de temperatura2 ±1.5 ppm/°C
Deriva a largo plazo4 ±0.003%
Interfase Interfase universal LocalCAN.
Platillo 85 mm. Acero inoxidable.
Altura útil sobre el platillo 240 mm.
1 Valores en el campo fino.

2 En el intervalo de temperatura de (10-30)ºC.
3 Interno, totalmente automático (FACT) activado a motor. Posibilidad de prueba para el control de la
sensibilidad.
4 Desviación de sensibilidad/año a partir de la prima puesta en funcionamiento con autocalibración FACT
activada.
156
5.4 BOMBA PARA RECIRCULACIÓN DE REFRIGERANTE1 2
5.4.1 Generalidades y especificaciones
Fabricante: Little Giant

Modelo: NK-2
Nº de serie: 527003
Fabrica en: Oklahoma
Tabla 5.4.1 Especificaciones de la bomba
Potencia (HP) 1/40
Voltaje (V) 115
Descarga (Plg) 1/4
Consumo Corriente (Amp) 1.7
Potencia (W) 100
Galones por 1’ 325

hora a la
3’ 300
altura de
5’ 270
10’ 130
Altura máxima (pie) 12.3
Presión (PSI) 5.3
Longitud de cable 6’
Dimensiones (Plg) 4.7 x 5.0 x 4.6
1 Fuente: Little, 2002.

2 La bomba se presenta en la Figura C.2
157
5.4.2 Rendimiento de la bomba
Tabla 5.4.2 Rendimiento
Flujo (Gal/Hora) Altura (Pies)
0 12.3
20 12.0
100 10.5
120 10.0
190 8.0
200 7.7
240 6.0
280 4.0
300 2.5
305 2.0
320 0.8
Altura vrs. Flujo
14
12
10
Altura (Pies)
8
6
4
2
0
0 50 100 150 200 250 300 350
Flujo (Gal/Hora)
Figura 5.4.1 Rendimiento de la Bomba con respecto a la altura
158
5.4.3 Identificación de la bomba
Figura 5.4.2 Bomba NK-2
Tabla 5.4.3 Partes de la Bomba
Nº Función Descripción
1 Filtro polietileno
2 Tornillos # 8 – 18 * 1”, SS
3 Salida Nailon
4 Empaque Nitrilo
5 Embolo Nailon
6 Plato Nailon
7 Codo Nailon
5.4.4 Características de la bomba
1. Completamente sumergible.
2. Servicio de trabajo continuo.
3. Resistente a la corrosión y al óxido debido a un recubrimiento de nailon.
4. Contiene alto contenido de aceite para la extensión de su vida útil y la rápida
disipación del calor. La succión protegida disminuye la aspiración de basura.
5. Protección de carga térmica excesiva.
159
5.4.5 Normas de seguridad
1. Cerciórese de que la unidad se encuentra desconectada de la fuente de electricidad,

antes de tratar de reparar o quitar cualquier pieza.
2. No utilice la bomba para bombear líquidos combustibles o explosivos, tales como
gasolina, petróleo combustible, kerosene, etc. No la utilice en ambientes explosivos.
La bomba solamente debe utilizarse en líquidos compatibles con los materiales de sus
elementos integrantes.
3. No manipule la bomba con las manos mojadas, ni mientras se encuentre en una
superficie mojada o húmeda o entre el agua.
4. Esta bomba está dotada de un cable de puesta a tierra, un enchufe tomacorriente de
puesta a tierra o ambas cosas. Para reducir el riesgo de choque eléctrico, cerciórese
de que se encuentre conectada a un receptáculo de puesta a tierra, debidamente
puesto a tierra.
5. En cualquier instalación en la cual puedan producirse daños materiales/o lesiones
personales causados por bombas que no funcionan o tienen escapes, debido a
interrupciones del servicio eléctrico, a obstrucciones de la tubería de descarga o a
cualquier otra razón debe utilizarse un sistema de seguridad, una alarma o ambos.
6. Sostenga la bomba y la tubería durante el ensamblaje y la instalación. La falta de
soporte puede ocasionar roturas de la tubería, caídas de la bomba, fallas de los
cojinetes del motor, etc.
7. Si la bomba es una bomba llena de aceite, la caja del motor viene de fábrica llena de
un lubricante dieléctrico, para proporcionar una termotransferencia óptima del motor y
una lubricación permanente de los cojinetes. El uso de cualquier otro lubricante podría
causar averías. Este lubricante no es tóxico; no obstante, si escapa de la caja del
motor, puede quitarse rápidamente de la superficie del agua, colocando sobre ella
toallas de papel u otro material absorbente para embeberlo, con el fin de no perturbar
la vida acuática.
160
5.4.6 Conexiones eléctricas1
1. No la conecte a un voltaje distinto del indicado.

2. Si la bomba está dotada de un enchufe eléctrico de tres dientes, el tercer diente es
para ponerla a tierra, con el fin de prevenir el peligro de posibles choques eléctricos.
No quite el tercer diente del enchufe. Se recomienda un circuito de ramal
independiente. No utilice cables de extensión. No corte el enchufe del cable.
3. Si el cable viene dotado de hilos conductores forrados, cerciórese de que los hilos
conductores se encuentren conectados correctamente a una fuente de electricidad. El
hilo verde o amarillo, es el de puesta a tierra; el hilo azul o blanco y el marrón o negro,
son hilos con corriente.
5.4.7 Funcionamiento
Las bombas de la serie NK están destinadas a usos que requieren la sumersión.

La bomba debe colocarse con la rejilla como base, o sobre las dos palcas de soporte que
se encuentran al otro lado de la entrada de la cuerda. Si la superficie es de arena o lodo,
es necesario proveer una superficie lisa para la bomba, cuando se la coloque con la toma
hacia abajo.
Las bombas No-Korode (NK) están diseñadas para su utilización en medios ácidos
suaves, alcalinos y aguas duras. Antes de utilizar la bomba en cualquiera de estos
medios, verifique la compatibilidad de los líquidos que entren en contacto con las piezas
de la bomba. Los materiales de la bomba consisten en: una caja de nailon llena de fibra
de vidrio; un difusor, una placa, una rueda móvil y un codo de nailon; un eje motor y
sujetadores de acero inoxidable; un obturador rectangular de nitrilo (entre el difusor y la
placa); un obturador del eje de "Viton" y una rejilla de polietileno. El forro de la cuerda es
de material de cloruro polivinílico. Las demás piezas plásticas son de nailon.
No intente restringir el lado de la toma de la bomba; la restricción de la toma puede
estropear el obturador del eje. Si se requiere un caudal menor, restrínjase el lado de la
descarga de la bomba. Por ejemplo, si se utiliza tubería plástica, colóquese una
abrazadera en la tubería, para restringir el caudal por medio de la compresión de los
tubos.
1 Consulte las ilustraciones de su hoja de instrucciones, para montar y desmontar correctamente su bomba
Little Giant.
161
No permita que la unidad funcione en seco. Está diseñada para que la enfríen los
líquidos bombeados, Si se permite que la bomba funcione en seco, puede estropearse el
obturador y el motor puede caerse. Si la unidad va a estar sin uso durante cierto tiempo,
siga las instrucciones de limpieza de la sección siguiente, antes de guardarla. No permita
que la unidad se congele durante el invierno. La congelación puede causar grietas o
deformaciones de las piezas plásticas, que puedan destruir la bomba.
5.4.8 Instrucciones de servicio1
1. Esta unidad se encuentra lubricada permanentemente. No se requiere lubricación. En

ningún caso abra la parte sellada de la unidad, ni quite los tornillos de la caja.
2. La limpieza periódica de la bomba prolongará su vida útil y eficiencia. Remítase a la
Figura 5.4.2, para montar y desmontar la cabeza de bombeo.
3. En primer lugar, quite la rejilla de la bomba. Luego, quite los 3 tornillos, como lo
indican las flechas2 de la figura mencionada en la figura anterior.
4. Limpie ligeramente cualquier corrosión o residuo que pueda ocluir la rueda móvil.
Utilice un cepillo y aceite penetrante, y raspe ligeramente para quitar el material
incrustado.
5. Dé vuelta manualmente a la rueda móvil para verificar que gire libremente. Coloque la
bomba de manera que usted no la toque y que la rueda móvil no esté tocando nada.
Enchufe la unidad en un circuito GFCI durante 10 segundos, para ver si la rueda móvil
gira: a) si gira y el GFCI no se desconecta, desenchufe la unidad e instale las piezas
en un orden inverso a aquél en el cual se quitaron, b) Si no rota, si la bomba
desconecta los automáticos o no funciona debidamente después de la limpieza,
devuélvala a Little Giant o a su centro de reparación autorizado. No intente hacer
usted mismo las reparaciones.
6. Cerciórese de que el cable eléctrico se encuentre en buen estado y no tenga muescas
ni cortes.
1 Cerciórese de que la unidad se encuentre desconectada de la fuente de electricidad, antes de intentar

reparar o quitar cualquier pieza.
2 No quite los demás tornillos que puedan encontrarse a la vista.
162
6
IDENTIFICACION DE MATERIALES Y
REACTIVOS
163
IDENTIFICACION DE MATERIALES Y REACTIVOS
6.1 ULTIMA GOLD LLT (COCTEL DE CENTELLEO LÍQUIDO)1
El cóctel de centelleo líquido con alto punto de ebullición es lo más nuevo de

Packard, es biodegradable y permite determinar bajos niveles de tritio en un rango amplio
de muestras de agua sin requerimiento de destilación.
Ultima Gold LLT acepta hasta un 54% de agua de grifo, agua de río, agua lluvia e
incluso agua de mar, con eficiencia de conteo de tritio de aproximadamente 30% y con
bajos niveles de fondo. Cuando sea usado con analizadores de centelleo líquido como
Packard Tri-Carb, los fondos son reducidos a niveles muy bajos, resultando en un mínimo
detectable de actividades por debajo de 1.1 Bq/L (para 500 minutos de conteo).
6.1.1 Características de funcionamiento
7. Alta capacidad de agua (hasta un 54%).

8. Alta eficiencia de conteo.
9. Acepta diferentes tipos de agua.
10. Muy bajos niveles de fondo.
11. Para bioensayos de orina, una capacidad arriba del 40%, permitiendo bajos niveles de
detección menores a 10 Bq/L (para 500 minutos de conteo).
12. Capacidad en muestras de Radionuclidos de metales pesados, arriba de 18% de 2M
HNO3, 2M HCl Y 2M H3PO4 para conteos de alfa, beta y alfa/beta.
13. No difunde a través de viales de polietileno.
14. Biodegradable.
15. Alto punto de ebullición de aproximadamente 140 ºC.
16. Características de seguridad deseables.
6.1.2 Capacidad de carga de agua
La detección y cuantificación de bajos niveles de tritio hace necesario

particularmente una alta capacidad de carga para asegurar un alto grado de exactitud en
el análisis (ver Figura 6.1.1).
La mezcla cóctel agua debe ser estable con respecto al tiempo y la temperatura
para bajos niveles de conteo, con tiempos de conteo que pueden ser superiores a 500
minutos y con temperaturas de conteo que pueden ser inferiores a 14ºC.
1 Fuente: PerkinElmer, 2008.
164
6.1.3 Tipos de agua y orina
Las especies radioactivas de interés pueden ser en agua de una variedad de

orígenes y por consiguiente el cóctel debe ser capaz de acomodarse a esta diversidad de
muestras.
Algunos investigadores destilan agua o simplemente la colectan y luego agregan
ácido para estabilizarla. La adición incluso de pequeñas cantidades de ácido puede
ocasionar serios efectos en la capacidad de la muestra.
Para esto es recomendado que el cóctel sea reevaluado con este tipo de muestras
modificadas para asegurar que la mezcla es todavía homogénea. Esto es especialmente
importante si están usándose viales de plástico, cuando ellos no son transparentes.
Adicionalmente lleve a cabo la evaluación con viales de vidrio a la temperatura de
conteo para asegurarse de la estabilidad en los períodos de conteo.
La alta aceptación de muestras es deseable para departamentos físicos de salud
que regularmente monitorean muestras de orina como parte de sus programas de salud
ocupacionales.
6.1.4 Figura de mérito
En LSC la razón señal/fondo es expresada como el cuadrado de la eficiencia de

detección dividida por el fondo (E2/B) y es usualmente nombrada como figura de mérito.
Fundamentalmente la más alta eficiencia con los más bajos fondos producen la más
alta sensibilidad (ver Tabla 6.1.2).
6.1.5 Propiedades de seguridad para la muestra y el usuario
Experiencias previas con DIN (Di-IsopropilNaftaleno) basadas en cócteles, indican

que no habrá ninguna infiltración a través de viales de plástico. Esto permite mayor
flexibilidad durante la preparación de la muestra y el rendimiento incrementado durante
periodos normalmente largos de conteo. Los más bajos fondos son obtenidos con viales
de polietileno que no son contaminados con 40K como en viales de vidrio.
Las inherentes características de DIN aliadas con propiedades conocidas de
surfactantes, asegura que el cóctel tenga alto punto de ebullición, sea biodegradable y
seguro para su uso.
165
6.1.6 Preparación del cóctel
El blanco fue definido en diferentes tipos de aguas que deben ser aceptadas para
altos volúmenes (arriba de 12 mL en 10 mL de cóctel para todas las temperaturas entre
12ºC y 20ºC), ver Figura 6.1.1.
Ultima Gold AB fue usada para puntos de inicio; al igual que éste cóctel, puede
contener 10 mL de agua a 20ºC pero no a menores temperaturas. Una serie de cambios
significativos fueron hechos para la formulación y el rendimiento en base a criterios
reunidos que todavía son útiles.
Unas formulaciones fueron evaluadas en un LSC de bajo nivel antes de elegir un
cóctel final. El cóctel final fue llamado Ultima Gold LLT.
Durante esta evaluación los factores surgidos fueron:
1. Con DIN basado en cócteles de bajos fondos, puede ser obtenido cuando el conteo es
a bajas temperaturas. Esto es más probable debido a un incremento en la viscosidad.
2. Pueden obtenerse fondos más bajos a costos de reducción de la eficiencia usando
rangos de configuraciones optimizadas (ver Tabla 6.1.2).
3. El cóctel fue encontrado para ser muy apropiado en el uso con muestras de orina.
4. Puesto que el cóctel se desarrolló de Ultima Gold AB, fue encontrado para ser
igualmente conveniente en trabajos de alfa/beta.
6.1.7 Rendimiento de Ultima Gold LLT
Tabla 6.1.1 Agua requerida para diferentes temperaturas.
Temperatura Agua tomada por 10 mL de Ultima Gold LLT (mL)
(ºC) Deionizada, destilada y Agua lluvia Agua de mar
12 12 12
14 12 11
16 12 9
18 12 7.3
20 12 5.5
166
Temperatura Vrs. Volumen de agua
20
Temperatura (ºC)
18 Agua de
mar
16
Deionizada,
destilada y
14 agua lluvia
12
0 3 6 9 12
mL de agua por 10 mL de Ultima Gold LLT
Figura 6.1.1 Relación Temperatura Vrs. Volumen de agua para Ultima Gold LLT.
6.1.7.1 Rendimiento para bajos niveles de tritio
Tabla 6.1.2 Rendimiento de Ultima Gold LLT para bajos niveles de Tritio1
Agua : Cóctel Eficiencia (%) Fondo (CPM) E2/B E2V2/B MDA (Bq/L-1)
8 mL : 12 mL 24.6 1.15 526 33680 1.22
10 mL : 10 mL 21.2 1.05 405 40490 1.11
11 mL : 9 mL 18.1 0.95 345 41730 1.06
1 Medidas hechas en un rango optimizado de energía de (0.4 – 4.5) KeV, con equipo de Centelleo modelo Tri-
Carb 2770TR/SL (operado a 15ºC) en modo de bajo nivel de conteo, todas las muestras en duplicado, 500
minutos de conteo.
167
6.1.7.2 Rendimiento con respecto al tiempo de conteo
Tabla 6.1.3 Rendimiento de Ultima Gold LLT con respecto al tiempo de conteo
Fondo MDA (pCi/L) MDA (Bq/L)
1000 500 250 100 60 1000 500 250 100 60

(CPM)
min min min min min min min min min min
1 27 37 53 82 107 1.00 1.37 1.96 3.03 3.96
2 37 53 73 120 153 1.37 1.96 2.70 4.44 5.66
3 47 63 90 143 187 1.74 2.33 3.33 5.29 6.92
5 60 87 117 187 240 2.22 3.22 4.33 6.92 8.88
15 103 143 203 327 420 3.81 5.29 7.51 12.10 15.54
20 117 167 237 377 483 4.33 6.18 8.77 13.95 17.87
Límite de Detección Vrs. Fondo
500 18.5
400 14.8
1000 min
DMA (pCi/L)
DMA (Bq/L)
300 11.1 500 min

250 min
200 7.4 100 min
60 min
100 3.7
0 0.0
20 15 5 3 2 1
Fondo (CPM)
Figura 6.1.2 Rendimiento de Ultima Gold LLT con respecto al tiempo de conteo
168
6.2 PERMANGANATO DE POTASIO
Formula: KMnO4
Peso molecular: 158.03 g/mol
Composición: K: 24.74%; Mn: 34.76% y O: 40.50%.
6.2.1 Generalidades
El permanganato de potasio (KMnO4) es un compuesto químico formado por iones

potasio (K+) y permanganato (MnO4−). Es un fuerte agente oxidante. Tanto en sólido como
en solución acuosa presenta un color violeta intenso.
El permanganato de potasio es un sólido cristalino púrpura, soluble en agua y se
obtiene por oxidación electrolítica del mineral de manganeso. Es no inflamable, sin
embargo acelera la combustión de materiales inflamables y si este material se encuentra
dividido finamente, puede producirse una explosión.
Es utilizado como reactivo en química orgánica, inorgánica y analítica; como
blanqueador de resinas, ceras, grasas, aceites, algodón y seda; en teñido de lana y telas
impresas; en el lavado de dióxido de carbono utilizado en fotografía y en purificación de
agua.
6.2.2 Propiedades químicas
Reacciona de manera explosiva con muchas sustancias como: ácido y anhídrido

acético sin control de la temperatura; polvo de aluminio; nitrato de amonio; nitrato de
glicerol y nitrocelulosa; dimetilformamida; formaldehido; ácido clorhídrico; arsénico (polvo
fino); fósforo (polvo fino); azúcares reductores; cloruro de potasio y ácido sulfúrico;
residuos de lana y en caliente con polvo de titanio o azufre.
El permanganato de potasio sólido se prende en presencia de los siguientes
compuestos: dimetilsulfóxido, glicerol, compuestos nitro, aldehidos en general,
acetilacetona, ácido láctico, trietanolamina, manitol, eritrol, etilenglicol, ésteres de
etilenglicol, 1,2-propanodiol, 3-cloropropano-1,2-diol, hidroxilamina, ácido oxálico en
polvo, polipropileno y diclorosilano. Lo mismo ocurre con alcoholes (metanol, etanol,
isopropanol, pentanol o isopentanol) en presencia de ácido nítrico y disolución al 20 % de
permanganato de potasio.
169
Por otro lado, se ha informado de reacciones exotérmicas violentas de este

compuesto con ácido fluorhídrico y con peróxido de hidrógeno.
Con mezclas etanol y ácido sulfúrico y durante la oxidación de ter-alquilaminas en
acetona y agua, las reacciones son violentas.
Con carburo de aluminio y con carbón se presenta incandescencia.
Trazas de este producto en nitrato de amonio, perclorato de amonio o diclorosilano,
aumentan la sensibilidad de estos productos al calor y la fricción.
Puede descomponerse violentamente en presencia de álcalis o ácidos concentrados
liberándose oxígeno.
En general, es incompatible con agentes reductores fuertes (sales de hierro (II) y
mercurio (I), hipofosfitos, arsénicos), metales finamente divididos, peróxidos, aluminio,
plomo, cobre y aleaciones de este último.
6.2.3 Propiedades físicas y Termoquímicas
Tabla 6.2.1 Propiedades físicas y termodinámicas del KMnO4
Propiedad Valor correspondiente a la propiedad1
Punto de fusión Se descompone a 240 ºC con evolución de oxígeno.
Densidad (a 25 ºC) 2.703 g/mL.
Solubilidad Soluble en 14.2 partes de agua fría y 3.5 de agua hirviendo.

También es soluble en ácido acético, ácido trifloro acético,
anhídrido acético, acetona, piridina, benzonitrilo y sulfolano.
∆fH0sólido -813,4 kJ/mol
S0sólido 171.7 J·mol-1·K-1
1 Todos los valores están dados en el SI y en condiciones normales (0 °C y 1 atm), salvo que se indiqu e lo
contrario.
170
6.2.4 Niveles de toxicidad
Tabla 6.2.2 Niveles de toxicidad del Permanganato de Potasio
Generales Polvo total Polvo respirable
Oral en humanos: 143 mg/kg Límite: 2.5 mg/m3 Límite: 1 mg/m3
Oral en ratas: 1090 mg/kg Máximo: 5 mg/m3 Periodos cortos: 2.5 mg/m3
6.2.5 Manejo y equipo de protección personal
Para manejar este compuesto deben utilizarse bata, lentes de seguridad y guantes,
en un área bien ventilada. Para cantidades grandes, debe usarse, además, equipo de
respiración autónoma.
No deben usarse lentes de contacto al manejar este producto. Al trasvasar
disoluciones de este producto, usar propipeta, nunca aspirar con la boca.
6.2.6 Riesgos
6.2.6.1 Riesgos de fuego y explosión
Es un compuesto no inflamable. Sin embargo los recipientes que lo contienen

pueden explotar al calentarse y genera fuego y explosión al entrar en contacto con
materiales combustibles.
6.2.6.2 Riesgos a la salud
1. Inhalación: Causa irritación de nariz y tracto respiratorio superior, tos, laringitis, dolor
de cabeza, náusea y vómito. La muerte puede presentarse por inflamación, edema o
espasmo de la laringe y bronquios, edema pulmonar o neumonitis química.
2. Contacto con ojos: Tanto en formas de cristales como en disolución, este compuesto
es muy corrosivo.
3. Contacto con la piel: La irrita y en casos severos causa quemaduras químicas.
171
4. Ingestión: Se ha observado en humanos que en dosis bajas o moderadas genera

quemaduras en tráquea y efectos gastrointestinales como náusea, vómito, ulceración,
diarrea o constipación y pérdida de conciencia. Con dosis mayores se ha presentado
anemia, dificultad para tragar, hablar y salivar, En casos severos se han presentado,
además de los anteriores, taquicardia, hipertermia (aumento de la temperatura
corporal), cansancio, daños a riñones y la muerte debida a complicaciones
pulmonares o fallas circulatorias.
5. Mutagenicidad: Se ha informado de un pequeño incremento de aberración
cromosomal en cultivos de células de mamíferos.
6. Peligros reproductivos: Se ha informado de disturbios ginecológicos en trabajadoras
expuestas a este compuesto, especialmente en mujeres jóvenes. Su uso como
abortivo local causa daños severos en la vagina y hemorragias.
6.2.7 Acciones de emergencia
6.2.7.1 Primeros auxilios1
1. Inhalación: Transportar a la víctima a una zona bien ventilada. Si se encuentra

inconciente, proporcionar respiración artificial. Si se encuentra conciente, sentarlo
lentamente y proporcionar oxígeno.
2. Ojos: Lavarlos con agua corriente asegurándose de abrir bien los párpados, por lo
menos durante 15 minutos.
3. Piel: Eliminar la ropa contaminada, si es necesario, y lavar la zona afectada con agua
corriente.
4. Ingestión: No induzca el vómito. Si la víctima se encuentra consciente dar agua a
beber inmediatamente.
6.2.7.2 Control de fuego, fugas o derrames y desechos
Utilizar equipo de respiración autónoma en incendios donde se involucre a este

compuesto. Utilizar agua para enfriar los contenedores involucrados y también para
extinguir el incendio.
1 En todos los casos de exposición, el paciente debe ser transportado al hospital tan pronto como sea posible.
172
Utilizar el equipo de seguridad mínimo como bata, lentes de seguridad y guantes y,

dependiendo de la magnitud del derrame, será necesario la evacuación del área y la
utilización de equipo de respiración autónoma.
Alejar del derrame cualquier fuente de ignición y mantenerlo alejado de drenajes y
fuentes de agua.
Construir un dique para contener el material líquido y absorberlo con arena. Si el
material derramado es sólido, cubrirlo para evitar que se moje.
Almacenar la arena contaminada o el sólido derramado en áreas seguras para su
posterior tratamiento.
Agregar disoluciones diluidas de bisulfito de sodio, tiosulfato de sodio, sales ferrosas
o mezclas sulfitosales ferrosas y ácido sulfúrico 2M para acelerar la reducción (no usar
carbón o azufre). Transferir la mezcla a un contenedor y neutralizar con carbonato de
sodio, el sólido resultante (MnO2), debe filtrarse y confinarse adecuadamente.
6.2.8 Almacenamiento
Debe almacenarse en recipientes bien tapados alejados de ácido sulfúrico, peróxido

de hidrógeno, combustibles, compuestos orgánicos en general, materiales oxidables y
protegidos de daños físicos, en lugares frescos y bien ventilados.
6.2.9 Usos y utilidades
Es utilizado como agente oxidante en muchas reacciones químicas en el laboratorio

y la industria. También se utiliza como desinfectante y en desodorizantes. Se utiliza para
tratar algunas enfermedades parasitarias de los peces, así como en el tratamiento del
agua potable, y como antídoto en los casos de envenenamiento por fósforo. En África,
mucha gente lo usa para remojar vegetales con el fin de neutralizar cualquier bacteria que
esté presente. Puede ser usado como reactivo en la síntesis de muchos compuestos
químicos. Por ejemplo, una solución diluida de permanganato puede convertir un
compuesto orgánico con un doble enlace de carbono en un diol. Soluciones más fuertes
pueden oxidar un grupo metilo en un anillo aromático en un grupo carboxilo. En química
analítica, una solución acuosa estandarizada se utiliza con frecuencia como titulante
oxidante en titulaciones redox debido a su intenso color violeta.
173
El permanganato violeta se reduce al catión Mn+2, incoloro, en soluciones ácidas. En

soluciones neutras, el permanganato sólo se reduce a MnO2, un precipitado marrón en el
cual el manganeso tiene su estado de oxidación +4. En soluciones alcalinas, se reduce a
su estado +6, dando K2MnO4.
Soluciones diluidas se utilizan como enjuague bucal (0,25 %), desinfectante para las
manos (alrededor del 1%).
Se utiliza como reactivo para determinar el número Kappa de la pulpa de madera.
El permanganato potásico se utiliza en algunas ocasiones para realizar lavados
gástricos en ciertas intoxicaciones.
6.2.10 Precauciones
El KMnO4 sólido es un oxidante muy fuerte, que mezclado con glicerina pura
provocará una reacción fuertemente exotérmica. Reacciones de este tipo ocurren al
mezclar KMnO4 sólido con muchos materiales orgánicos.
Sus soluciones acuosas son bastante menos peligrosas,
especialmente al estar diluidas. Mezclando KMnO4 sólido
con ácido sulfúrico concentrado forma Mn2O7 que
provoca una explosión. La mezcla del permanganato
sólido con ácido clorhídrico concentrado genera el
peligroso gas cloro.
El permanganato mancha la piel y la ropa (al reducirse a MnO2) y debería por lo
tanto manejarse con cuidado. Las manchas en la ropa se pueden lavar con ácido acético.
Las manchas en la piel desaparecen dentro de las primeras 48 horas.
174
6.3 HIDROXIDO DE SODIO
Formula: NaOH.
Peso molecular: 40.01 g/mol.
Composición: Na: 57.48%; H: 2.52% y O: 40.00%.
6.3.1 Generalidades
El hidróxido de sodio es un sólido blanco e industrialmente se utiliza como

disolución al 50% por su facilidad de manejo. Es soluble en agua, desprendiéndose calor.
Absorbe humedad y dióxido de carbono del aire y es corrosivo de metales y tejidos.
Es usado en síntesis, en el tratamiento de celulosa para hacer rayón y celofán, en la
elaboración de plásticos, jabones y otros productos de limpieza, entre otros usos.
Se obtiene, principalmente por electrólisis de cloruro de sodio, por reacción de
hidróxido de calcio y carbonato de sodio y al tratar sodio metálico con vapor de agua a
bajas temperaturas.
6.3.2 Propiedades físicas y termodinámicas
Tabla 6.3.1 Propiedades de disoluciones acuosas del NaOH
Concentración d415 Punto de Punto de

(%p/p) congelación (ºC) Ebullición (ºC)
5 1.056 -4 102
10 1.111 -10 105
20 1.222 -26 110
30 1.333 1 115
40 1.434 15 125
50 1.530 12 140
175
Tabla 6.3.2 Propiedades físicas y termodinámicas
Propiedad Valor correspondiente a la propiedad1
Punto de ebullición 1388ºC
Punto de fusión 318.4 ºC
Indice de refracción a 1.433 (a 320ºC) y 1.421 (a 420 ºC)

589.4 nm
Presión de vapor 1 mm Hg (739 ºC)
Densidad 2.13 g/ml
Solubilidad Soluble en agua, alcoholes y glicerol, insoluble en acetona

(aunque reacciona con ella) y éter.
1g de NaOH se disuelve en 0.9 ml de agua, 0.3 ml de agua

hirviendo, 7.2 ml de alcohol etílico y 4.2 ml de metanol.
pH de disoluciones 0.05 %: 12; 0.5%: 13; 5%: 14

acuosas (% p/p)
Disoluciones acuosas En la Tabla 6.3.1, se presentan algunas propiedades de

disoluciones acuosas del NaOH.
Calor específico 0.35 cal/gºC (a 20ºC)
Calor latente de fusión 40 cal/g
Calor de formación 100.97 Kcal/mol (forma alfa) y 101.95 Kcal/mol (forma beta)
Calor de transición de la 24.69 cal/g

forma alfa a la beta
Temperatura de transición 299.6 ºC
Energía libre de formación 90.7 Kcal/ mol
1 Todos los valores están dados en condiciones normales (25°C y 1 atm ó 760 mm Hg), salvo que se indiq ue
lo contrario.
176
6.3.3 Propiedades químicas
El NaOH reacciona con metales como Al, Zn y Sn, generando aniones como AlO2-,
ZnO2- y SnO32- e hidrógeno. Con los óxidos de estos metales, forma esos mismos aniones
y agua. Con zinc metálico, además, hay ignición.
Se ha informado de reacciones explosivas entre el hidróxido de sodio y nitrato de
plata amoniacal caliente, 4-cloro-2-metil-fenol, 2-nitro anisol, cinc metálico, N,N,-
bis(trinitro-etil)-urea, azida de cianógeno, 3-metil-2-penten-4-in-1-ol, nitrobenceno,
tetrahidroborato de sodio, 1,1,1-tricloroetanol, 1,2,4,5-tetraclorobenceno y circonio
metálico.
Con bromo, cloroformo y triclorometano las reacciones son vigorosas o violentas.
La reacción con sosa y tricloroetileno es peligrosa, ya que este último se
descompone y genera dicloroacetileno, el cual es inflamable.
6.3.4 Niveles de toxicidad
LD50 (en conejos): 500 mL/Kg de una disolución al 10%.

Irritación a piel de conejos: 500 mg/ 24h, severa.
Irritación a ojos de conejos: 4 mg, leve; 1% ó 50 µg/24h, severo.
IDLH: 250 mg/m3.
Periodos largos: 2 mg/m3.
Periodos cortos: 2 mg/m3.
Límite máximo: 2 mg/m3.
6.3.5 Manejo y equipo de protección personal
Para el manejo del NaOH es necesario el uso de lentes de seguridad, bata y

guantes de neopreno, nitrilo o vinilo. Siempre debe manejarse en una campana y no
deben utilizarse lentes de contacto al trabajar con este compuesto.
En el caso de trasvasar pequeñas cantidades de disoluciones de sosa con pipeta,
utilizar una propipeta, nunca aspirar con la boca.
177
6.3.6 Riesgos
6.3.6.1 Riesgos de fuego o explosión
Este compuesto no es inflamable sin embargo, puede provocar fuego si se

encuentra en contacto con materiales combustibles. Por otra parte, se generan gases
inflamables al ponerse en contacto con algunos metales. Es soluble en agua generando
calor.
6.3.6.2 Riesgos a la salud
El hidróxido de sodio es irritante y corrosivo de los tejidos. Los casos más comunes
de accidente son por contacto con la piel y ojos, así como inhalación de neblinas o polvo.
1. Inhalación: La inhalación de polvo o neblina causa irritación y daño del tracto
respiratorio. En caso de exposición a concentraciones altas, se presenta ulceración
nasal. A una concentración de 0.005-0.7 mg/m3, se ha informado de quemaduras en
la nariz y tracto. En estudios con animales, se han reportado daños graves en el tracto
respiratorio, después de una exposición crónica.
2. Contacto con ojos: El NaOH es extremadamente corrosivo a los ojos por lo que las
salpicaduras son muy peligrosas, pueden provocar desde una gran irritación en la
córnea, ulceración, nubosidades y, finalmente, su desintegración. En casos más
severos puede haber ceguera permanente, por lo que los primeros auxilios inmediatos
son vitales.
3. Contacto con la piel: Tanto el NaOH sólido, como en disoluciones concentradas es
altamente corrosivo a la piel. Se han hecho biopsias de piel en voluntarios a los
cuales se ha aplicado una disolución de NaOH 1N en los brazos de 15 a 180 minutos,
observándose cambios progresivos, empezando con disolución de células en las
partes callosas, pasando por edema y llegar hasta una destrucción total de la
epidermis en 60 minutos. Las disoluciones de concentración menor del 0.12% dañan
la piel en aproximadamente 1 hora.
Se han reportado casos de disolución total de cabello, calvicie reversible y
quemaduras del cuero cabelludo en trabajadores expuestos a disoluciones
concentradas de sosa por varias horas. Por otro lado, una disolución acuosa al 5%
genera necrosis cuando se aplica en la piel de conejos por 4 horas.
178
4. Ingestión: Causa quemaduras severas en la boca, si se traga el daño es, además, en

el esófago produciendo vómito y colapso.
5. Carcinogenicidad: Este producto está considerado como posible causante de cáncer
de esófago, aún después de 12 a 42 años de su ingestión.
La carcinogénesis puede deberse a la destrucción del tejido y formación de costras,
mas que por el producto mismo.
6. Mutagenicidad: Se ha encontrado que este compuesto es no mutagénico.
6.3.7 Acciones de emergencia
6.3.7.1 Primeros Auxilios1
1. Inhalación: Retirar del área de exposición hacia una bien ventilada. Si el accidentado
se encuentra inconciente, no dar a beber nada, dar respiración artificial y rehabilitación
cardiopulmonar. Si se encuentra conciente, levantarlo o sentarlo lentamente,
suministrar oxígeno, si es necesario.
2. Ojos: Lavar con abundante agua corriente, asegurándose de levantar los párpados,
hasta eliminación total del producto.
3. Piel: Quitar la ropa contaminada inmediatamente. Lavar el área afectada con
abundante agua corriente.
4. Ingestión: No provocar vómito. Si el accidentado se encuentra inconciente, tratar
como en el caso de inhalación. Si está conciente, dar a beber una cucharada de agua
inmediatamente y después, cada 10 minutos.
6.3.7.2 Control de fuego, fugas o derrames y desechos
Pueden usarse extinguidores de agua en las áreas donde haya fuego y se

almacene NaOH, evitando que haya contacto directo con el compuesto.
En caso de derrame, ventilar el área y colocarse la ropa de protección necesaria
como lentes de seguridad, guantes, overoles químicamente resistentes, botas de
seguridad. Mezclar el sólido derramado con arena seca, neutralizar con HCl diluido, diluir
con agua, decantar y tirar al drenaje. La arena puede desecharse como basura
doméstica.
1 En todos los casos de exposición, el paciente debe ser transportado al hospital tan pronto como sea posible.
179
Si el derrame es de una disolución, hacer un dique y neutralizar con HCl diluido,

agregar gran cantidad de agua y tirar al drenaje.
Para pequeñas cantidades, agregar lentamente y con agitación, agua y hielo.
Ajustar el pH a neutro con HCl diluido. La disolución acuosa resultante, puede tirarse al
drenaje diluyéndola con agua. Durante la neutralización se desprende calor y vapores, por
lo que debe hacerse lentamente y en un lugar ventilado adecuadamente.
6.3.8 Almacenamiento
El hidróxido de sodio debe ser almacenado en un lugar seco, protegido de la

humedad, agua, daño físico y alejado de ácidos, metales, disolventes clorados,
explosivos, peróxidos orgánicos y materiales que puedan arder fácilmente.
180
7
NORMAS DE TRABAJO Y
RADIOPROTECCION
181
NORMAS DE TRABAJO Y RADIOPROTECCION
7.1 RADIOPROTECCIÓN
La protección radiológica es una disciplina científico-técnica que tiene como

finalidad la protección de las personas y del medio ambiente frente a los riesgos derivados
de la utilización de fuentes radiactivas, tanto naturales como artificiales, en actividades
médicas, industriales, de investigación o agrícolas. El uso de las radiaciones ionizantes
reporta importantes beneficios a la Humanidad, pero también comporta ciertos riesgos,
que comenzaron a ponerse de manifiesto pocos años después del descubrimiento de los
rayos X, a finales del siglo XIX. Es necesario primero establecer unas normas de trabajo
que garanticen que no se producen daños inmediatos, daños de tipo determinista,
manteniendo las dosis por debajo del umbral y en segundo lugar aplicar todas las
medidas razonables para reducir al máximo la incidencia de los efectos biológicos
estocásticos o probabilísticos.
Las primeras normativas sobre protección radiológica datan de 1928 y fueron
elaboradas por un organismo internacional independiente ya sea de autoridad nacional o
supranacional, denominado entonces "Comisión Internacional de Protección contra los
Rayos X y el Radio", fundado en base a una decisión adoptada en el segundo Congreso
Internacional de Radiología. En el año 1950 se reestructuró esta Comisión y pasó a
denominarse "Comisión Internacional de Protección Radiológica (ICRP)", nombre con el
que se la conoce en la actualidad. Hoy en día está generalizada la existencia de normas
de protección radiológica basándose en las recomendaciones dictadas por la ICRP. Ello
permite un elevado nivel de homogeneidad en los criterios de protección radiológica
reflejados en la legislación de la mayoría de países. (UMA, 2005).
7.1.1 Tipos de fuentes radiactivas
7.1.1.1 Fuente encapsulada
Es todo material radiactivo herméticamente cerrado y sellado dentro de un

contenedor no radiactivo. Ejemplo es la fuente que está dentro del contador de centelleo.
7.1.1.2 Fuente no encapsulada
Es la que contiene sustancias radiactivas que pueden ser extraídas. Total o

parcialmente y manipuladas fuera de sus contenedores.
182
7.1.2 Tipos de riesgos
La dosis de radiación recibida por un individuo al permanecer en las proximidades

de un emisor o generador de radiaciones ionizantes, depende de tres factores: el tiempo
de exposición, la distancia a la fuente y el blindaje (sección 7.1.4).
En los laboratorios en los que se trabaja con fuentes no encapsuladas, es decir
sustancias radiactivas en recipientes abiertos, el individuo puede ser dañado por
irradiación y por contaminación mediante la absorción, ingestión o inhalación del material
radiactivo. Se previene el riesgo de contaminación radiactiva mediante el confinamiento y
manipulación de las fuentes no encapsuladas en lugares adecuados (cámaras de
guantes, cámaras con sistemas de extracción de aire, etc.), así como con el uso del
vestuario adecuado. Las precauciones generales a tener en cuenta para reducir la
contaminación son:
• Emplear la mínima cantidad posible de radionucleido necesaria para el resultado que
se quiera conseguir.
• Utilizar sistemas de confinamiento y retención: bandejas o similares.
• Utilizar siempre que sea necesario el detector.
• Emplear sistemas de descontaminación.
• Cumplir las normas de trabajo.
7.1.2.1 Riesgos de irradiación
Siempre que una persona u objeto esta próxima a una fuente, existe riesgo de
irradiación. Son producidos tanto por fuentes encapsuladas como por las no
encapsuladas.
7.1.2.2 Riesgos de contaminación
Siempre que sustancias radiactivas están presentes en un medio o superficie en

los que son indeseables hay contaminación radiactiva.
La contaminación radiactiva se debe fundamentalmente a fuentes no
encapsuladas, y en algunos casos a fuentes encapsuladas que han perdido su
hermeticidad. (CSIC, 2004).
183
7.1.3 Bases de protección
El sistema de protección radiológica, recomendado por la ICRP, está basado en

tres principios fundamentales.
7.1.3.1 Justificación
Los diferentes tipos de actividades que implican exposición a las radiaciones

deben estar justificados por las ventajas que proporcionen. Las ventajas tienen que
superar los efectos perjudiciales potenciales.
7.1.3.2 Optimización
Se sigue el criterio ALARA (As Low As Reasonably Achievable), según el cual

todas las exposiciones a las radiaciones ionizantes deben ser mantenidas tan bajas como
sea razonablemente posible, teniendo en cuenta los citados factores económicos y
sociales. Las dosis individuales, el número de personas expuestas y la probabilidad de
que se produzcan exposiciones potenciales, deben mantenerse en el valor más bajo que
sea razonablemente posible.
7.1.3.3 Limitación de dosis
En todo caso, la dosis de radiación que puede recibir cualquier individuo no debe
superar unos valores establecidos como límites legales, lo que garantiza la protección del
público en general y del personal profesionalmente expuesto.
La limitación de los efectos derivados de las radiaciones ionizantes se consigue
evitando las exposiciones no justificadas y manteniendo tan bajas como sea posible las
justificadas.
7.1.4 Protección frente a radiaciones
La protección frente a las radiaciones requiere en primer lugar entender bien la

naturaleza del problema para tomar las precauciones adecuadas. La protección frente a la
contaminación pasa por trabajar con la máxima pulcritud en un ambiente limpio y hay tres
formas fundamentales de protección frente a la irradiación.
184
7.1.4.1 Tiempo
Debe ser el menor posible. La dosis acumulada D por una persona en un área
donde la tasa de dosis es D* durante un tiempo t es:
D = D ∗ ⋅t 7.1.1
Así, cuanto menor sea el tiempo invertido en realizar una determinada operación,
menor será la dosis recibida. La dosis es directamente proporcional al tiempo de
exposición.
Como ejemplo: una persona que trabaja en un campo de 4 mSv/hora, nivel similar
al que producen 50 mCi de 32P a 10-15 cm, recibe en 1 hora 4 mSv pero en un periodo de
5 segundos recibe menos de 0.006 mSv.
7.1.4.2 Distancia
Debe ser la máxima posible de la fuente. Conviene tener en cuenta que la dosis
recibida a una distancia "d" de la fuente es inversamente proporcional al cuadrado de la
distancia. Esta es la ley de la inversa del cuadrado.
1
D= 7.1.2
d2
32
Como ejemplo: 1 MBq (27 mCi) de P en 1 mL produce una tasa de dosis de 210
mSv/hora en la superficie y menos de 0.021 mSv/hora (21 µSv/hora) a un metro de
distancia.
7.1.4.3 Blindajes o Pantallas
Cuando la combinación de tiempo y distancia, no reduce la dosis a niveles

permisibles, hay que interponer una barrera de material absorbente entre la fuente y el
usuario para atenuar la radiación. Para emisores beta energéticos, como es el caso del
32
P, se utilizan materiales plásticos, formados por elementos de bajo número atómico
(metacrilato con 1 cm de espesor). Para el resto de los emisores beta usados en la
3 35 14
instalación no es necesario, para el H en ningún caso; para el S y el C el
185
apantallamiento es necesario cuando se manipulan actividades elevadas. Para emisores

gamma de materiales compuestos por elementos de alto número atómico, generalmente
plomo o vidrio plomado.
Los blindajes son barreras situadas entre el producto radiactivo y los usuarios que
eliminan o atenúan la radiación. La elección de la pantalla adecuada depende del tipo de
emisión. Existen dos tipos de pantallas o blindajes, las denominadas barreras primarias
(atenúan la radiación del haz primario) y las barreras secundarias (evitan la radiación
difusa). (UMA, 2005).
32
Como ejemplo: la radiación β emitida por el P se detiene con un centímetro de
metacrilato, que absorbe eficazmente las partículas β y reduce la energía de la radiación
gamma de frenado o “bremsstrahlung1”. Para los emisores γ, como el 125
I, se necesitan
materiales pesados como el plomo para atenuar las radiaciones gamma o rayos X ya que
la radiación electromagnética se atenúa y no se detiene al chocar con la materia.
Figura 7.1.1 Penetración de los diferentes tipos de radiación.
1 Radiación electromagnética (rayos x) producida cuando partículas cargadas interactúan con la materia. En
32
la práctica se asocia con partículas Beta interactuando con materiales de alto peso molecular, así como P
interactuando con plomo.
186
7.1.5 Dosimetría
Los laboratorios de radioisótopos deben contar con dosímetros de área que

permitan controlar la dosis recibida por los usuarios en general y dosímetros personales
de solapa. Estos, son dosímetros de termoluminiscencia que se controlan mensualmente
en un centro autorizado. Las dosis leídas se exponen en el laboratorio durante un mes y
se archivan.
Todos los usuarios de los que se haya estimado la dosis mediante dosímetros
personales o rotativos tienen un historial dosimétrico del que pueden pedir certificación.
Por otra parte es obligatorio comunicar, al darse de alta como usuario de material
radiactivo, las dosis recibidas previamente o si se trabaja en otra instalación radiactiva.
Debe poseer dosímetro toda persona que trabaje con material radiactivo de los
32 125 90 137
siguientes radioisótopos: P, I, Sr y Cs. Los dosímetros son personales e
intransferibles. No se pueden dejar a otra persona.
El dosímetro personal se coloca en la zona del tronco más expuesta,
generalmente en el bolsillo superior, sobre la gabacha. Es importante que siempre se
mantenga frontal, la posición no es indiferente y, detrás de los sistemas de protección
empleados, tales como las pantallas de metacrilato.
Los dosímetros, cuando no se usan, se deben guardar en un lugar cerrado,
protegidos de la luz y el calor y donde solo exista radiactividad de fondo. Cada persona es
responsable del buen uso de su dosímetro.
Si se pierde un dosímetro o se contamina accidentalmente se debe comunicar al
supervisor de la instalación. El cambio de dosímetros se realiza mensualmente, en los
primeros 3 días de cada mes.
7.1.5.1 Control dosimétrico del ambiente
Mientras se trabaja con material radiactivo, es muy importante comprobar

frecuentemente que el área de trabajo y el medio ambiente no están contaminados. Los
14 35 32
emisores β, C, Sy P, se miden con monitores tipo Geiger y los monitores de cristal
de centelleo son preferibles para medir la contaminación de emisores γ. También se
realizan "frotis" en los que se extrae la contaminación y se mide por centelleo líquido. La
tasa de dosis se debe medir en el ambiente, bien con monitores o mediante dosímetros
fijos, para conseguir que sea tan baja como sea razonablemente posible.
187
7.1.5.2 Dosimetría personal
Las técnicas usadas para medir contaminación en el medio ambiente y áreas de

trabajo son válidas para controlar la posible contaminación personal en ropas y piel.
Cuando se trabaja con emisores β de alta energía y emisores γ es necesario usar
dosímetros personales, basados en películas fotográficas o en cristales
termoluminiscentes (TLD).
7.1.5.3 Límites de dosis
El sistema de protección radiológica establecido en la actualidad en España,

fundamentalmente se encuentra recogido en el Real Decreto 783/2001 por el que se
aprueba el Reglamento sobre Protección Sanitaria contra Radiaciones Ionizantes. Este
Reglamento recoge los límites de dosis tanto para personal profesionalmente expuesto
como para personal en formación y estudiantes así como para público en general. Para
trabajadores profesionalmente expuestos, resulta un límite de dosis efectiva de 100 mSv
durante todo periodo de cinco años oficiales (de enero a diciembre), sujeto además a una
dosis efectiva máxima de 50 mSv en cualquier año oficial. Además, también se imponen
limitaciones específicas a tres órganos o zonas del cuerpo:
• El cristalino: límite de dosis equivalente de 150 mSv por año oficial.
• La piel: límite de dosis equivalente de 500 mSv por año oficial. Dicho límite se aplicará
a la dosis promediada sobre cualquier superficie de 1 cm², con independencia de la
zona expuesta.
• Las manos, antebrazos, pies y tobillos: 500 mSv por año oficial.
Los límites de dosis para las personas en formación y estudiantes mayores de 18

años que durante sus estudios tengan que utilizar fuentes, el límite de dosis será el mismo
que el de los trabajadores expuestos.
188
Tabla 7.1.1 Límites máximos de dosis para el personal

profesionalmente expuesto
Tipos de dosis Límite de dosis (mSv)1
Dosis efectiva 50 mSv en un año oficial y 100

mSv en 5 años oficiales.
Dosis equivalente al cristalino 150
Dosis equivalente a la piel 500
Dosis en extremidades 500
Fuente: UMA (2005)
Tabla 7.1.2 Límites de dosis para usuarios de zonas vigiladas
Dosis efectiva 15 mSv en un año oficial y 30

mSv en 5 años oficiales.
Dosis en extremidades 150
Fuente: UMA (2005)
Tabla 7.1.3 Límites de dosis para los miembros del público
Dosis efectiva 1

1
1 Estas medidas son dadas para un año oficial, excepto en casos en que se indique lo contrario.
189
7.1.5.4 Protección especial durante el embarazo y la lactancia
Las usuarias de radiactividad están obligadas a informar al supervisor de la

instalación si están embarazadas o son gestantes ya que la protección del feto y del
lactante es similar a la de los miembros del público. Las condiciones de trabajo deben
asegurar que la dosis al feto desde la notificación del embarazo al final de la gestación no
exceda de 1 mSv. Este límite de dosis se aplica exclusivamente al feto y no es
directamente comparable con la dosis registrada en el dosímetro personal de la
trabajadora embarazada. Por ello, a efectos prácticos, y para exposición a radiación
externa, se puede considerar que 1 mSv al feto es comparable a una dosis de 2 mSv en
la superficie del abdomen.
La declaración de embarazo no implica que las mujeres gestantes o en período de
lactancia tengan que evitar el trabajo en presencia de radiaciones, pero es necesario
evaluar cuidadosamente el trabajo y las condiciones en que se realiza para que se
asegure el cumplimiento del citado límite. Como recomendación se procurará evitar que la
mujer gestante o en período de lactancia trabaje con material radiactivo.
7.1.5.5 Recomendaciones para el uso del dosímetro
• Cuando se realiza un cambio de gabacha, no olvidar el dosímetro de la gabacha

utilizada y colocarlo en la nueva.
• Cuando finalice su trabajo, deje el dosímetro en un lugar cerrado, protegido del calor y
la luz, donde solo exista el fondo natural de radiación.
• Si se pierde el dosímetro, comuníquelo inmediatamente al Supervisor.
• Si se sospecha una sobreexposición, notifíquelo al Supervisor.
• Si un dosímetro resulta contaminado, se quitara inmediatamente del lugar donde
estaba colocado, guardándolo en un contenedor y comunicándolo al supervisor.
7.1.5.6 Cuando se debe utilizar el dosímetro
Siempre que se manipulen isótopos y actividades que sean detectadas por el

dosímetro. En la Tabla 7.1.4 aparecen reflejados diferentes isótopos, indicando los casos
en los que se estima necesario, conveniente y no necesario el uso del dosímetro. Cuando
2
1 Valor promediado sobre cualquier superficie cutánea de 1 cm , con independencia de la superficie expuesta.
190
se indica que no es necesario, no es porque los isótopos o actividades utilizadas sean

inocuas, sino porque el dosímetro no lo detecta. (CSIC, 2004).
Tabla 7.1.4 Uso de dosímetros
Es necesario Es conveniente No es necesario
32 51 3
P Cr H
125 14
I C Ac > 5mCi
35
S Ac > 5mCi
Fuente: CSIC (2004)
7.1.6 Clasificación y delimitación de zonas
El titular de la actividad debe clasificar los lugares de trabajo, considerando el

riesgo de exposición y la probabilidad y magnitud de las exposiciones potenciales.
7.1.6.1 Zona controlada
Zona en la que existe la posibilidad de recibir dosis efectivas superiores a 6

mSv/año oficial o una dosis equivalente superior a 3/10 de los límites de dosis
equivalentes para cristalino, piel y extremidades. También tienen esta consideración las
zonas en las que sea necesario seguir procedimientos de trabajo, ya sea para restringir la
exposición, evitar la dispersión de contaminación radiactiva o prevenir, o limitar la
probabilidad y magnitud de accidentes radiológicos o sus consecuencias. Se señaliza con
un trébol verde sobre fondo blanco.
Las zonas controladas se pueden subdividir en:
• Zona de permanencia limitada. Zona en la que existe el riesgo de recibir una dosis
superior a los límites anuales de dosis. Se señaliza con un trébol amarillo sobre fondo
blanco.
• Zona de permanencia reglamentada. Zona en la que existe el riesgo de recibir en
cortos periodos de tiempo una dosis superior a los límites de dosis. Se señaliza con un
trébol naranja sobre fondo blanco.
191
• Zona de acceso prohibido. Zona en la que hay riesgo de recibir, en una exposición
única, dosis superiores a los límites anuales de dosis. Se señaliza con un trébol rojo
sobre fondo blanco.
7.1.6.2 Zona vigilada
Zona en la que, no siendo zona controlada, exista la posibilidad de recibir dosis

efectivas superiores a 1 mSv/año oficial o una dosis equivalente superior a 1/10 de los
límites de dosis equivalente para cristalino, piel y extremidades. Se señaliza con un trébol
gris/azulado sobre fondo blanco.
En caso de que el riesgo fuera solamente de irradiación externa, el trébol va
bordeado de puntas radiales y si fuera de contaminación radiactiva el trébol está
bordeado por un campo punteado. Sí se presentan los dos riesgos conjuntamente el
trébol está bordeado con puntas radiales sobre campo punteado. (UMA, 2005).
Figura 7.1.2 Señalización de zonas radiactivas.
192
7.2 NORMAS DE TRABAJO EN LABORATORIOS RADIOISÓTOPICOS
7.2.1 Normas generales de trabajo
Las siguientes normas son de obligado cumplimiento a la hora de trabajar en

instalaciones radiactivas:
• Anotar, antes de iniciar el trabajo, los datos requeridos en el Diario de Usuarios. Esto
permitirá al supervisor llevar el diario de operaciones obligatorio.
• Es necesario seguir las normas generales de seguridad del laboratorio, especialmente
las que se indican a continuación:
1. Esta prohibido comer, beber, fumar o la aplicación de cosméticos en los
laboratorios donde se manipule radiactividad.
2. No introducir objetos personales en el área donde se manipulan productos
radiactivos.
3. Usar ropa de laboratorio y guantes de látex o PET cuando se trabaje con
productos radiactivos.
4. Lavarse las manos cuidadosamente después de trabajar con productos
radiactivos, aunque no se detecte contaminación.
5. Las personas con heridas abiertas no pueden manipular productos radiactivos.
6. Trabajar con el material radiactivo en una zona exclusiva, sobre papel absorbente
y bandejas.
7. Trabajar en campana de gases cuando se use un radionucleido volátil (por
ejemplo, iodo) o se caliente una solución radiactiva.
8. Usar las pantallas protectoras de radiación cuando sea necesario. Usar gafas
protectoras o bien trabajar protegidos por una pantalla de metacrilato, aunque la
radiación no lo requiera, como protección contra las proyecciones.
9. Usar los dosímetros personales o rotativos cuando lo requiere el trabajo.
10. Mantener en todo momento una limpieza escrupulosa en el área de trabajo. Las
contaminaciones y manchas pequeñas se deben limpiar de inmediato.
11. Comprobar la ausencia de contaminación en la zona de trabajo, aparatos,
guantes, etc.; al iniciar el trabajo, frecuentemente durante el trabajo y al finalizar.
12. Mantener los residuos radiactivos en contenedores cerrados. Evitar la acumulación
de material radiactivo en los laboratorios. Almacenar todo el que no este en uso en
las áreas designadas.
193
13. Identificar, excepto los que se sean de uso inmediato, todos los contenedores con
material radiactivo. Indicar isótopo, cantidad y fecha.
14. Transportar el material radiactivo de forma que se impidan derrames.
15. No mezclar residuos sólidos y líquidos.
16. No dejar objetos cortantes o punzantes en las bolsas de residuos.
El uso de gabachas de laboratorio y guantes ayuda a proteger a los usuarios de

material radiactivo contra exposiciones accidentales de la piel, la descontaminación de
ésta es incómoda y difícil. Los guantes contaminados son una fuente de contaminación
tanto personal como de zonas y equipos, por eso es importante dejar todos los objetos
personales fuera del laboratorio. Es necesario chequear frecuentemente los guantes para
comprobar que están limpios y si los guantes están contaminados existe una gran
probabilidad de dispersar la contaminación. La norma es eliminar los guantes
contaminados, como residuo sólido, antes de cualquier otra operación. Al usar doble
guante se previene la contaminación de las manos al quitarse los guantes. Una de las
etapas de mayor exposición ocurre cuando se transfiere una alícuota de la solución madre
al tubo de trabajo, desde el momento de abrir el contenedor las manos quedan expuestas
a una alta radiación y en el momento de sacar la alícuota, uno mira para verificar lo que
esta sacando. Es aconsejable, para minimizar el impacto de la radiación sobre las manos
y los ojos, el uso de micropipetas y gafas protectoras o cuando sea necesario trabajar con
pantallas de metacrilato junto a precisión y rapidez en esta operación.
7.2.2 Normas generales de manipulación
7.2.2.1 A nivel personal
1. Usar siempre gabacha y guantes.

2. No pipetear con la boca. Usar pipetas automáticas.
3. No fumar, ni ingerir alimentos durante el tiempo de uso del isótopo.
4. Usar vitrinas en caso de utilización de productos volátiles o que se puedan generar
durante el experimento.
5. Utilizar el blindaje adecuado, siempre que sea necesario.
6. Llevar puesto dosímetro cuando sea necesario.
7. Tener a mano un detector.
194
8. Tener a disposición los contenedores de residuos radiactivos necesarios.

9. Es aconsejable utilizar tubos de tapón de rosca para manipular muestras marcadas.
7.2.2.2 A nivel de sitio de trabajo
1. Restringir el trabajo con radiactividad a una zona determinada del laboratorio.

2. Usar siempre doble contenedor, es decir trabajar en una bandeja contenida dentro de
otra mayor.
3. Cubrir el área de trabajo con papel plastificado.
4. Comprobar que al terminar el experimento, la superficie de trabajo, así como los
diferentes aparatos utilizados, no han sido contaminados.
5. No permitir en el entorno de trabajo, visitas ni reuniones.
6. Se tendrá especial cuidado en no contaminar objetos de uso compartido como
teléfono, interruptores de luz, grifos, tiradores de puertas, etc.
7.2.2.3 A nivel del entorno
1. Comprobar que no se ha dejado contaminación en ningún lugar.

2. Eliminar los residuos radiactivos de forma adecuada, según las normas específicas
para cada isótopo. en ningún caso se pueden depositar objetos como agujas de
jeringuillas, pipetas Pasteur, etc., en bolsas de plástico, debido al peligro de que estas
se rasguen.
3. No se recogerán los residuos radiactivos que no se adapten a las normas
establecidas.
4. Es aconsejable el uso de líquido de centelleo biodegradable.
7.2.2.4 Utilización de isótopos
En los laboratorios ordinarios solo podrán utilizarse las cantidades de los

diferentes radioisótopos indicadas en la Tabla 7.2.1. En este caso cada laboratorio
dispondrá de una zona exclusiva para el uso de radioisótopos. Las manipulaciones con
actividades superiores deben hacerse en el Laboratorio de radiactividad.
Estas actividades son globales, es decir entre alícuota de producto, actividad
incorporada en muestra y residuo radiactivo.
195
Tabla 7.2.1 Radiactividad máxima permisible

en laboratorio ordinarios
Radioisótopo Actividad (µCi)
32
P 20
35
S 100
3
H 250
14
C 250
125
I 20
51
Cr 20
Fuente: CSIC (2004)
7.2.3 Vigilancia y control de la radiación
Se realizan medidas de radiación con el fin de comprobar que las dosis y niveles
de riesgo existente están dentro de los límites correspondientes a la instalación radiactiva.
Estas medidas se realizan en todos los lugares situados en las proximidades de
las fuentes de radiación y en zonas de trabajo.
Se realizan de forma rutinaria, para determinar los niveles de radiación en el
puesto de trabajo y de forma periódica, para comprobar la idoneidad de algún
procedimiento concreto o algún blindaje.
A nivel personal tiene como finalidad conocer las dosis recibidas por los
trabajadores expuestos durante el desarrollo de su trabajo.
Cuando las medidas de radiación y contaminación superen los limites de registro
establecidos serán anotados en el Diario de Operación y se procederá a descontaminar.
196
7.2.4 Vigilancia y control de la contaminación
7.2.4.1 Medidas generales
Trabajar siempre sobre hojas de material absorbente (papel con la parte inferior
plastificada) o sobre bandejas para acotar el riesgo de contaminación. Preparar todo el
material necesario para el proceso antes de iniciar el trabajo y usar doble guante
desechable.
Comprobar con los minimonitores la contaminación personal, de la zona y del
equipo; antes, durante y al finalizar el trabajo.
Chequear la contaminación de zonas y equipos antes de iniciar el trabajo. La
última persona que ha trabajado en un lugar o con un equipo en el que se detecte
contaminación es responsable de la descontaminación. Al terminar el trabajo chequear
cuidadosamente y descontaminar si es necesario.
7.2.4.2 Medidas de contaminación en zonas de trabajo
Las medidas a los niveles de contaminación superficial los cuales son fijos o
desprendibles, se realizan en:
• Superficies: paredes, suelos, poyatas, etc.
• Aparatos: centrífuga, nevera, baños, etc.
• Material diverso: pantallas, contenedores de residuos radiactivos, etc.
De igual forma las medidas a niveles de contaminación ambiental son:

• Medidas de contaminación ambiental en los lugares donde se están realizando las
manipulaciones y en zonas colindantes.
• Medida del nivel de radiación de los diferentes contenedores y lugares donde se
guardan productos radiactivos y residuos radiactivos.
Existen dos formas de realizar estas medidas, las cuales son:

• Directas: Utilizando un monitor de contaminación de superficies: monitor para
emisores beta y gamma.
• Indirectas: realizando frotis. Utilizar papel de filtro, frotando la superficie a medir.
Contar el papel en el contador de Centelleo líquido (para emisores beta).
197
7.2.4.3 Medidas de contaminación personal
Tiene como finalidad reducir la dosis equivalente que puede recibir el organismo,
bien de forma directa por irradiación, o por incorporación de radioisótopos.
Existen dos tipos de medidas, los cuales son:
• Externa o cutánea: piel, ropa y calzado.
• Interna: se sospecha de la posible incorporación de radioisótopos contaminantes.
Estas medidas pueden ser realizadas de dos formas, las cuales son:
• Nivel de contaminación externa: monitores de contaminación portátiles.
• Nivel de contaminación interna: De forma indirecta realizando bioensayos de muestras
biológicas.
Las medidas de contaminación interna sólo se realizan cuando los valores

obtenidos en la vigilancia de las zonas de trabajo indican posibilidad de producirse
incorporaciones significativas de radioisótopos o cuando se produzca un accidente
radiológico que dé lugar a una contaminación interna.
Cualquier indicio de posible contaminación interna será notificado, de inmediato al
Supervisor de la Instalación Radiactiva, anotándose en el Diario de Operación.
7.2.5 Niveles de registro
Se establecen niveles de referencia, siguiendo recomendaciones internacionales.
7.2.5.1 Niveles de registro en el Diario de Operación
Son niveles de referencia, cuya superación implica el registro de las medidas

realizadas en el Diario de Operación.
Niveles de registro de contaminación superficial

Laboratorios con zonas autorizadas: 3.7 Bq/cm2.
Laboratorio de radioisótopos: 37 Bq/cm2.
198
Niveles de registro de contaminación personal

Externa (Piel): 0.37 Bq/cm2.
Nivel de registro para tasa de dosis

Laboratorios con zonas autorizadas: 1 µSv/h.
Laboratorio radioisótopos: 2.5 µSv/h.
7.2.5.2 Niveles de comunicación al Consejo de Seguridad Nuclear
Establecidos como niveles de referencia, cuya superación implica la comunicación

al Consejo de Seguridad Nuclear.
Niveles de Comunicación de contaminación Superficial

Laboratorios con Zonas Autorizadas: 370 Bq/cm2.
Laboratorios de radioisótopos: 3.7 KBq/cm2.
Niveles de Comunicación de la contaminación personal

Externa (piel): 3.7 Bq/cm2.
Interna: 1/100 LIA1.
7.2.6 Monitores de contaminación y radiación
El laboratorio de Radioisótopos debe tener al menos, los siguientes monitores

portátiles para detección de radiación y contaminación:
• Monitores portátiles modelo EP15, tipo Geiger, preparados para medir contaminación
superficial con emisores beta. Mide, tanto, emisores de alta energía (32P, 90
Sr) como
emisores de energía media (14C, 35S, 45Ca), en cuentas por segundo (cps).
• Monitor portátil modelo 900D, tipo Geiger Muller, preparado para medir radiación como
tasa de dosis en µSv/h. Este monitor mide tanto radiación gamma como beta superior
a 150 keV. Cuando mide beta y gamma juntos puede sobreestimar la dosis.
• Monitor portátil de centelleo con cristal sólido, modelo 44A, adaptado para medir la
contaminación con emisores de radiación gamma y rayos X. (137Cs, 125
I). Este monitor
no es adecuado para medir emisores beta. Mide en cps.
1 Limite de Incorporación Anual.
199
7.2.6.1 Manejo de los minimonitores
Antes de usar los minimonitores comprobar el estado de las pilas.

Los monitores son equipos frágiles y delicados por lo que se deben usar
cuidadosamente. No se puede tocar la ventana del detector que es muy frágil y es
necesario evitar que se contaminen. Es usual colocar una protección de plástico, para
32
evitar contaminaciones, en los monitores que se usan para detectar P. Estas barreras
14
pueden afectar la medida de los isótopos beta de menor energía como el C ó 35S y para
detectarlos hay que eliminar las barreras que puedan interferir.
Figura 7.2.1 Minimonitores para detección de radiactividad.
No es posible medir la contaminación con Tritio mediante monitores portátiles ya

que la radiación emitida no tiene suficiente energía para atravesar la ventana del detector.
Cuando se use el monitor para control de la dosis recibida por un usuario, el monitor debe
situarse en una posición equivalente, detrás de las pantallas y orientado hacia la fuente.
7.2.6.2 Ensayo de frotis para detectar tritio y carbono (14C)
Consiste en frotar una parte1 de la superficie con un papel humedecido con un

disolvente que sea adecuado para el isótopo que se quiere detectar. La actividad extraída,
que suele ser del 20 al 30% del total, se mide en el contador de centelleo. Este ensayo
detecta toda la radiactividad presente.
2
1 Aproximadamente 900 cm .
200
7.2.7 Vigilancia y control de material radiactivo
7.2.7.1 Normas para la adquisición de material radiactivo
• La adquisición de material radiactivo es autorizada por supervisor de la instalación

radiactiva.
• Está totalmente prohibido introducir productos radiactivos en centro si no se dispone
de autorización previa del supervisor.
• El solicitante tiene que cumplimentar un impreso de pedido en el que se refleje los
datos siguiente: actividad, nombre del producto radiactivo, radioisótopo, referencia en
el catalogo, casa comercial y fecha de pedido.
7.2.7.2 Recepción de material radiactivo
• La llegada de los pedidos de productos radiactivos deben ser comunicada al

supervisor.
• Antes de la apertura del paquete se comprobara la ausencia de radiación y el nivel de
contaminación.
• Se señalizará y registrará indicando: fecha, radioisótopos, actividad, compuesto
radiactivo y nombre del laboratorio.
• El supervisor comunicara la llegada a cada usuario.
7.2.7.3 Almacenamiento y transporte de material radiactivo
• Las fuentes y material marcado deben estar identificados con: nombre del compuesto,
radionucleido, laboratorio y fecha.
• Los productos radiactivos, serán almacenados de acuerdo con el tipo de emisión en
gammateca, congeladores o neveras.
• Se dispondrá de un inventario actualizado de todos los productos radiactivos
almacenados.
• El material radiactivo se guarda, mientras no este en uso, en recipientes blindados y
cerrados, que no permiten la irradiación ni contaminación de personas u objetos por
encima de los limites establecidos.
201
• En la actualidad cada laboratorio tiene asignado un contenedor de metacrilato, en el

cual se almacenan emisores beta, ubicados en el congelador del Laboratorio de
Radiactividad.
• Los emisores gamma, se guardaran en neveras a 4º o en congeladores a -20 ºC,
dependiendo del tipo de compuesto. Estos se mantendrán siempre en su recipiente de
origen plomado, para atenuar la radiación. Cuando el compuesto radiactivo emisor
gamma tenga que almacenarse a temperatura ambiente, la instalación dispone de una
gammateca.
• El transporte de material radiactivo dentro del laboratorio, se realizara en
contenedores de doble contención, blindados en caso necesario, y cerrados para
evitar la dispersión del material radiactivo.
Cuando se transporta material radiactivo, siempre bajo el control del supervisor,

entre edificios o laboratorios hay que asegurar que no se pueden producir accidentes que
expongan al público a radiación. Lo más recomendado es llevar el material radiactivo en
los mismos viales en los que se recibe el material radiactivo, que ya tienen el blindaje
adecuado. Estos viales se deben transportar dentro de un contenedor con papel
absorbente y siguiendo los pasos anteriormente mencionados en esta misma sección.
7.2.8 Incidentes con material radiactivo
Los incidentes mas posibles que se pueden producir son:

• Derrames de viales, de recipientes de residuos radiactivos o similares. El riesgo de
estos incidentes es de contaminación de:
a. Superficie de trabajo y pavimentos.
b. Material de laboratorio.
c. Ropa de trabajo.
d. Equipos de detección.
e. Aparatos distintos.
• Incendio con riesgo de contaminación ambiental.
• Robo de material radiactivo.
Los siguientes incidentes serán comunicados inmediatamente al supervisor, o en

su lugar al responsable del trabajo:
202
• Inhalación o ingestión de productos radiactivos, con riesgo de contaminación interna.

• Contaminación de la piel o interna de personas.
• Perdida de material radiactivo.
• Derrames de material radiactivo superiores a 50 µCi de cualquier isótopo.
• Derrames de cantidades superiores a 10 µCi de 32P o 1 µCi de 90Sr ó 137Cs.
• Accidentes (fuego y otros) que puedan suponer descontrol de material radiactivo y
perdida de seguridad.
7.2.8.1 Incidentes graves
Los incidentes graves son aquellos que implican contaminación de personas o

aquellos casos en cuales ocurren derrames de material radiactivo superiores a 50 µCi de
cualquier isótopo, para estos casos se deben actuar de la siguiente manera:
• Conservar la serenidad.
• Evitar que se extienda más, para ello utilizar material absorbente.
• Aislar el área contaminada, señalizarla y restringir el acceso.
• Notificarlo inmediatamente al supervisor.
• Lavar con agua y detergentes o disolventes adecuados el área contaminada.
• Comprobar que después de la limpieza no queda radiactividad en el área.
• Todo material utilizado en la descontaminación será recogido como residuo radiactivo.
7.2.8.2 Incidentes menores
Son los incidentes que no implican contaminación de personas y en general

menos de 50 µCi de material radiactivo derramado (menos de 10 µCi de 32P ó menos de 1
µCi de 90Sr ó 137Cs). Se tomarán las siguientes medidas:
• Avisar a los restantes usuarios del peligro para que permanezcan fuera del área
contaminada.
• Colocar papel absorbente sobre el líquido derramado.
• Apantallar para reducir la radiación si el radioligando lo requiere.
• Ser cuidadoso para no dispersar la contaminación por las restantes zonas.
• Usar dobles guantes para prevenir la contaminación de las manos.
• Chequear la zona y equipo antes de descontaminar.
• Avisar al supervisor si necesita ayuda y comunicar el incidente.
203
7.2.9 Métodos para la descontaminación
Como norma básica, se debe mantener el ambiente de trabajo y equipo tan limpio
como sea posible para conseguir que las dosis recibidas sean mínimas.
La última persona que ha trabajado en un lugar o con un equipo en el que se
detecte contaminación es responsable de la descontaminación.
Al trabajar sobre hojas de papel plastificado se reduce la zona afectada por la
contaminación. El papel contaminado se elimina como residuo radiactivo sólido. Es
conveniente recortar la zona de papel contaminada para reducir la cantidad de residuos
radiactivos. Limpiar inmediatamente el material contaminado con detergente especial, De
con 90, o similar, diluido al 2-3%. Si se deja secar el material contaminado puede ser
imposible descontaminarlo. Apantallar el material contaminado si la radiación es
apreciable. Todos los métodos para eliminar la contaminación externa van encaminados
a evitar la entrada del radionucleido en el interior del organismo.
7.2.9.1 Método general de descontaminación
• Localizar y señalizar la zona contaminada.

• Utilizar agentes descontaminantes frotando solo la zona contaminada, tratando de
evitar la dispersión del contaminante.
• Monitorizar. Si persiste la contaminación, continuar limpiando.
• Si la contaminación todavía persiste, dejar señalizada utilizando las etiquetas
adecuadas, indicando fecha, radioisótopo y actividad.
• Evacuar todo material utilizado en este proceso como residuo radiactivo.
• Reflejar el suceso, indicando fecha, medidas iniciales y finales de contaminación,
radioisótopo y procedimiento seguido para descontaminar, en el Registro de material
radiactivo correspondiente.
• Comunicarlo al Servicio de Radiactividad.
7.2.9.2 Método de descontaminación de superficies1
• En caso de derrame utilizar inmediatamente material absorbente.

• Acotar y señalizar la zona, restringiendo en caso necesario el acceso de personal.
• Trasladar los equipos no contaminados fuera de la zona afectada.
1 La Descontaminación se hará siempre por vía húmeda.
204
• Seguir las pautas indicadas en los métodos generales de Descontaminación.

• Si la contaminación persiste, la zona contaminada se dejara cubierta y señalizada.
7.2.9.3 Método de descontaminación de equipos
• Desconectar el equipo de la red.

• Se realizará una monitorización exhaustiva para localizar los puntos contaminados e
identificar el radioisótopo contaminante.
• Posteriormente se procederá a su descontaminación siguiendo las pautas
anteriormente indicadas.
• Si la contaminación es persistente o afecta a partes internas del equipo, será
conveniente que la descontaminación la lleve a cabo una empresa especializada.
• Si la contaminación ha sido producida por radioisótopos de período de
semidesintegración corto, el equipo se podría mantener almacenado, debidamente
blindado, hasta que decaiga la actividad radiactiva.
7.2.9.4 Métodos de descontaminación personal
Cuando la contaminación es externa:

• Quitar la ropa y elementos tales como anillos, reloj, etc.
• Controlar el material retirado con el detector adecuado.
• Lavar las zonas contaminadas sucesivas veces y monitorizar.
• No utilizar descontaminantes abrasivos, agua caliente ni disolventes orgánicos.
• En caso de contaminación generalizada:
o Informar al servicio de radiactividad.
o Descontaminar las distintas partes del cuerpo.
Cuando la contaminación es interna y por absorción1:

• Someter la herida a un chorro de agua a presión hasta que sangre.
• Monitorizar.
• Lavar la herida con agua oxigenada, o suero fisiológico.
• Aplicar antiséptico (mercurio-cromo) y pomada antibactericida.
• Cubrirla, para evitar la infección y la posible dispersión de restos de contaminación.
1 Heridas abiertas.
205
Cuando la contaminación es interna y por ingestión o inhalación:

• Favorecer su eliminación provocando vomito o expectoración.
• Facilitar la ingesta de líquido, para facilitar la eliminación.
• Se recomiendo acudir al servicio médico, previa comunicación al servicio de
radiactividad.
7.2.9.5 Descontaminación de las distintas parte del cuerpo
• Piel: Utilizar agua tibia, jabón y cepillo blando.

• Pelo y cuero cabelludo: Ocluir lo orificios nasales y oídos, y realizar tres lavados con
jabón neutro por un tiempo de 3 a 5 minutos.
• Ojos: Lavar con agua tibia o suero salino utilizando frascos lavaojos, durante un
tiempo aproximado de 15 minutos.
• Mucosas y fosas nasales: Enjuagar con agua salina.
• Boca: Enjuagar con agua salina, evitando la ingestión durante el proceso. Si la
contaminación persiste utilizar jabón neutro muy diluido.
• Oídos: Lavar con abundante agua, utilizando una jeringa.
7.2.10 Gestión de los residuos radiactivos
Se considera residuo radiactivo todo material u objeto que emite radiaciones

ionizantes por estar contaminado con isótopos radiactivos y para el que no hay previsto
ningún uso.
La gestión de residuos radiactivos es el conjunto de actividades técnicas y
administrativas que tienen por objeto acondicionar y controlar los residuos de forma que
no causen daño ni a la salud ni a los bienes de las personas. Para realizar una buena
gestión conviene tener en cuenta las siguientes precauciones generales:
• Clasificación de los residuos radiactivos.
• Caracterización.
• Segregación.
• Transporte interno.
• Almacenamiento.
• Evacuación.
206
El primer paso en la gestión de los residuos que se producen en una instalación

radiactiva es la segregación de los mismos. En el trabajo de laboratorio se determina en
cada método la gestión previa de los residuos generados para facilitar su segregación y
evitar que los residuos radiactivos existentes en el laboratorio supongan riesgos
radiológicos inaceptables para los trabajadores, para el público ni para el medio ambiente.
En general en el laboratorio se deben seguir las siguientes normas:
• Si el nivel de actividad del material residual es muy bajo ó indetectable, el residuo se
eliminará como los residuos o basuras de laboratorio.
• En cada método se determina que tipo de residuos son radiactivos pero a vía de
ejemplo: No es residuo radiactivo un papel contaminado con 10 cpm o menos y se
puede eliminar en la cubeta blanca.
• Todos los materiales o productos de desecho, para los que no se ha previsto ningún
uso, que contienen o están contaminados con material radiactivo se consideran
residuos radiactivos que se gestionan de acuerdo a sus características.
• Es muy importante tener en cuenta que no es posible asumir riesgos biológicos con
los residuos que entren o se generen en la instalación radiactiva.
7.2.10.1 Caracterización de los residuos radiactivos
Para caracterizar los residuos radiactivos hay que tener en cuenta, los aspectos:
• Radioisótopo contaminante.
• Estado físico del residuo.
• Actividad radiactiva.
• Si el residuo posee otro tipo de riesgos.
7.2.10.2 Segregación de los residuos radiactivos
La segregación de los residuos radiactivos se realiza de forma diferente según la

gestión final de los mismos. Siempre se debe de tender a minimizar la producción de
residuos y a no mezclar, residuos:
• Radiactivos con no radiactivos.
• De diferentes isótopos.
• Líquidos y sólidos.
• De alta actividad con residuos de baja actividad.
207
• Orgánicos con acuosos.

• Radiactivos con riesgo biológico con residuos que no tengan dicho riesgo.
Atendiendo al tipo de riesgo que poseen los residuos, estos pueden ser
clasificados, indicando como se realiza la segregación de los mismos:
• Residuos Radiactivos con productos tóxicos. La segregación de estos residuos se
realiza siguiendo los mismos criterios que si tuviesen solo riesgo radiactivo pero de
forma separada en contenedores dispuestos para residuos con ambos riesgos. En
este caso, no podrán desecharse viales con liquido cerrados herméticamente. Estos
viales deberán desecharse vacíos y abiertos.
• Residuos Radiactivos con Riesgo Biológico. La segregación de estos residuos se
realiza siguiendo los mismos criterios que si tuviesen solo riesgo radiactivo pero de
forma separada en contenedores dispuestos para residuos con ambos riesgos. A
estos contenedores se puede añadir productos específicos desinfectantes o
inactivadores del material biológico.
• Residuos Radiactivos con Productos Tóxicos y Riesgo Biológico. La segregación
de estos residuos se realiza siguiendo los mismos criterios que si tuviesen solo riesgo
radiactivo pero de forma separada en contenedores dispuestos para residuos que
posean los tres tipos de riesgo. A estos contenedores se pueden añadir productos
específicos desinfectantes o inactivadores del material biológico, siempre y cuando no
reaccionen violentamente con los productos tóxicos y peligrosos.
7.2.10.3 Residuos radiactivos de Gestión Interna
Son los residuos provenientes de la manipulación de radioisótopos con periodo de

semidesintegración menor a 100 días. Estos se almacenan en la propia instalación
radiactiva hasta su decaimiento o desclasificación y, posteriormente se eliminan como
residuos convencionales.
Para la recolección de residuos sólidos deben utilizarse:
• Botellas de plástico de boca ancha, con capacidad para 2 litros, para residuos
cortantes, punzantes, puntas de pipeta, pipetas Pasteur, vidrios, etc.
• Bolsas de plástico de Galga 200 ó de policarbonato transparente, con capacidad para
25 litros, para papeles, guantes, viales con liquido, cerrados herméticamente o
residuos sólidos de baja actividad.
208
• Contenedores específicos para agujas hipodérmicas.

• Bolsas de plástico con cierre hermético para cadáveres de animales o residuos
putrescibles1.
Para recolección de residuos líquidos deben utilizarse:

• Botellas de plástico con capacidad para 5 litros.
• Tubos de plástico con una capacidad máxima de 50 mL, para pequeños volúmenes de
alta actividad.
Para recolección de residuos mixtos deben utilizarse:

• Bolsas de plástico para viales con líquido de centelleo.
7.2.10.4 Señalización de los residuos radiactivos
Todos los residuos deben almacenarse señalizados con etiquetas adhesivas

específicas, en las que se indiquen:
• Radioisótopo contaminante.
• Tipo de residuo.
• Actividad.
• En el caso de residuos sólidos se especificará la actividad medida o estimada.
• En caso de residuos líquidos se contará una alícuota en un contador de centelleo
líquido para determinar la actividad.
• Si posee algún otro tipo de riesgo.
• Fecha de entrada en el almacén.
• Numero de contenedor.
• Fecha de almacenamiento/descalcificación del residuo.
7.2.10.5 Residuos con isótopos de vida corta (32P) y media corta

32
Los residuos líquidos con P se recogen en botes de plástico de 2 litros que se
mantienen apantallados en cajas de metacrilato. Los residuos sólidos se recogen en
bolsas dentro de cajas similares de metacrilato. Estos residuos se conservan en el
almacén de residuos hasta que decaen.
1 Para estos, se añade un absorbente tipo vermiculita.
209
Los restantes residuos de vida media menor de 2 meses se tratan de forma similar
32
a los residuos de P. Dado que se producen cantidades pequeñas en cada caso se
determinará la forma concreta de gestión.
7.2.10.6 Residuos con isótopos de vida media o larga (3H, 14C, 35S)
Las normas que se indican son generales para todos los residuos que se evacuan:
• Los sólidos compactables sin objetos punzantes se acumulan en bolsas que se
solicitan, normalmente hay en uso, en el departamento de radiactividad. Las bolsas se
etiquetan e identifican indicando el isótopo que contienen, la actividad estimada, la
fecha de cierre y el departamento de origen.
• Los objetos punzantes, agujas de inyectables y objetos cortantes tienen que ir en los
contenedores especiales, en cajas o en botes de plástico.
• Separar los líquidos acuosos y los líquidos orgánicos que se almacenan en
contenedores apropiados. Estos contenedores no resisten el pH ácido por lo que es
necesario que los líquidos acuosos estén próximos al pH neutro.
• Los viales llenos con el líquido de centelleo se acumulan en bolsas dobles. Las bolsas
se etiquetan e identifican indicando el isótopo que contienen, la actividad estimada, la
fecha de cierre y el departamento de origen. Es aconsejable colocar papel de filtro u
otro absorbente en el fondo de la bolsa para evitar que se acumule líquido. Las bolsas
deben ser inspeccionadas antes de su evacuación y si son rechazadas se devolverán
a su origen. Es importante cerrar bien los viales de centelleo y no usar rotuladores
gruesos ni de colores en los viales. Normalmente hay bolsas o unidades de
contención preparadas en el laboratorio de radioisótopos. En caso de necesitar
nuevos se solicitan al responsable del laboratorio.
7.2.10.7 Residuos de 137Cs ó similares1
Este isótopo requiere un blindaje especial, pero en las concentraciones en las que
se trabaja habitualmente, menos de 20 Bq/ml, el blindaje no es necesario. Es importante
no acumular residuos de estos isótopos en el laboratorio y es preferible mantenerlos en el
almacén de residuos. No evacuar, al menos en el procedimiento normal, los residuos de
137
Cs si la radiación en superficie supera de 3 a 5 mSv/h.
1 Emisores gamma.
210
8
EVALUACIÓN DE RENDIMIENTO Y ANALISIS
DE RESULTADOS
211
EVALUACIÓN DE RENDIMIENTO Y ANALISIS DE RESULTADOS
8.1 CONDICIONES AMBIENTALES DE OPERACIÓN
La Tabla 8.1.1, presenta los datos obtenidos de Temperatura y Humedad, bajo los
cuales opera el Contador de Centelleo Líquido, los cuales fueron obtenidos con el
medidor de temperatura y humedad presentado en la Figura C.5.
Tabla 8.1.1 Temperatura y humedad ambiental
Hora Fecha T (ºC) HR (%) Hora Fecha T (ºC) HR (%)
09:15 18/09/2007 22 45 15:15 15/10/2007 22 68
17:15 20/09/2007 19 41 10:00 18/10/2007 20 45
14:30 21/09/2007 21 44 12:00 21/10/2007 22 57
15:00 24/09/2007 20 64 12:15 23/10/2007 21 49
09:00 25/09/2007 21 48 14:45 26/10/2007 21 55
09:15 27/09/2007 21 44 13:00 31/10/2007 22 38
15:30 29/09/2007 19 47 11:00 04/11/2007 21 44
10:15 01/10/2007 22 48 13:00 09/11/2007 20 36
11:30 04/10/2007 20 63 14:00 13/11/2007 22 45
10:30 08/10/2007 21 61 11:00 18/11/2007 21 44
09:30 10/10/2007 22 38 13:30 22/11/2007 20 43
10:00 13/10/2007 21 42
De acuerdo a los requerimientos ambientales indicados para el buen funcionamiento

del Contador de Centelleo Líquido en la sección 5.1.13.3, el rango de temperatura de
operación debe ser de (15-35)ºC y el rango de Humedad Relativa de (30-85)%. Con la
ayuda de estos límites, se generan las cartas de control presentadas en la Figura 8.1.1 y
la Figura 8.1.2; para la Temperatura y la Humedad Relativa, respectivamente.
Para el buen funcionamiento del Cóctel de Centelleo; éste, fue probado en el rango
de temperaturas de (12-20)ºC; obteniendo, el mismo rendimiento para todas, tal como se
presenta en la Tabla 6.1.1 y en la Figura 6.1.1, debido a que la muestra fue destilada.
212
Temperatura (ºC)
35 LES
32
29
26
23 +2S
20 -2S
17
LEI
14
15/09/07 25/09/07 05/10/07 15/10/07 25/10/07 04/11/07 14/11/07 24/11/07
Figura 8.1.1 Carta de Control de Temperatura
Humedad Relativa (%)
85 LES
75
+2S
65
+1S
55
45
-1S
35
LEI
-2S
25
15/09/07 25/09/07 05/10/07 15/10/07 25/10/07 04/11/07 14/11/07 24/11/07
Figura 8.1.2 Carta de Control de Humedad Relativa
213
8.2 RENDIMIENTO DEL CONTADOR
La Tabla 8.2.1 presenta los datos de rendimiento del Contador de Centelleo, los
cuales fueron obtenidos a partir del procedimiento establecido en la Tabla 5.1.3, con los
estándares sellados cuyo certificado es presentado en el anexo E.3.
Tabla 8.2.1 Datos de Rendimiento del Contador
Fondo Eficiencia Figura de Chi

Fecha
(cpm) (%) Merito Cuadrado
27/11/2007 15.10 64.39 273.75 21.39
27/11/2007 15.73 64.39 262.46 24.52
27/11/2007 15.78 64.32 260.23 14.96
20/11/2007 16.55 64.76 252.08 22.23
20/11/2007 14.83 64.65 276.46 20.26
22/10/2007 15.53 64.98 270.75 21.13
18/10/2007 15.78 64.47 264.49 18.63
12/10/2007 15.25 64.61 270.77 24.24
11/09/2007 15.68 64.60 264.29 11.09
30/08/2007 15.73 64.82 267.62 30.59
05/07/2007 15.27 64.62 274.79 9.30
16/05/2007 15.57 64.65 264.51 14.05
11/05/2007 15.88 64.97 266.72 20.25
04/05/2007 15.02 64.62 279.32 7.67
23/02/2007 15.77 64.73 266.93 13.41
06/02/2007 15.65 64.96 269.52 15.05
30/01/2007 15.53 64.66 268.85 19.64
22/01/2007 16.57 64.55 251.58 10.36
214

Fecha
(cpm) (%) Merito Cuadrado
30/11/2006 14.63 64.67 284.41 18.30
10/11/2006 15.37 64.96 271.48 33.41
31/10/2006 16.13 64.68 260.47 26.35
31/08/2006 15.35 64.99 272.71 14.37
08/08/2006 16.38 64.78 253.40 31.27
20/06/2006 16.12 64.95 262.07 10.77
05/05/2006 15.23 64.71 273.79 19.79
17/01/2006 15.60 64.97 270.24 16.46
22/11/2005 15.45 65.16 279.37 14.09
04/11/2005 15.82 64.99 264.59 21.01
26/10/2005 14.97 65.31 287.94 14.47
21/10/2005 14.85 65.03 282.32 17.26
17/10/2005 15.08 65.42 284.40 12.40
10/10/2005 15.78 65.26 271.06 16.71
26/09/2005 14.70 64.92 286.01 19.91
06/09/2005 15.70 65.18 271.74 8.03
01/09/2005 15.45 64.87 272.18 10.95
31/08/2005 16.22 64.66 258.31 21.29
19/08/2005 15.97 65.24 265.89 23.48
11/08/2005 15.62 65.22 270.92 12.07
20/07/2005 15.12 65.16 282.82 16.26
12/07/2005 14.67 65.26 292.13 30.28
27/06/2005 16.15 65.23 265.58 22.98
215

Fecha
(cpm) (%) Merito1 Cuadrado
20/06/2005 15.83 64.70 263.11 16.60
23/05/2005 16.33 65.33 259.12 27.70
16/05/2005 15.22 65.04 276.41 21.28
02/05/2005 15.98 64.97 263.72 18.07
26/04/2005 14.82 65.01 282.43 20.55
19/04/2005 15.77 64.99 264.52 28.20
13/04/2005 15.53 64.83 269.63 16.08
08/04/2005 15.20 65.19 281.72 15.23
09/03/2005 15.73 64.97 266.93 35.13
28/02/2005 15.50 64.85 272.16 21.70
16/02/2005 14.53 65.26 292.43 12.25
10/02/2005 16.17 65.17 260.90 13.03
20/01/2005 15.27 65.51 278.00 31.52
Estos valores son presentados en las cartas de control presentadas de la Figura

8.2.1 a la Figura 8.2.7.
En las Figura 8.2.1, Figura 8.2.3, Figura 8.2.5; se especifican límites de control a
una desviación estándar y a dos desviaciones estándares; para el fondo, la eficiencia y la
figura de mérito, respectivamente.
En las Figura 8.2.2, Figura 8.2.4, Figura 8.2.6 y Figura 8.2.7; se dan los límites a
dos desviaciones estándares y los límites establecidos, en la Tabla 5.1.2 para los niveles
de radiación de fondo, en la Tabla 5.1.9 para la eficiencia, en la Tabla 5.1.10 para la figura
de mérito y en el numeral 4 de la sección 5.1.8 para la prueba Chi-Cuadrado,
respectivamente.
1 La figura de mérito es la razón señal/ruido. Para más detalles revisar sección 6.1.4.
216
Fondo (cpm)
17.0
16.5 +2S
16.0 +1S
15.5
15.0 -1S
14.5 -2S
14.0
Dic/04 May/05 Oct/05 Mar/06 Ago/06 Ene/07 Jun/07 Nov/07
Figura 8.2.1 Carta de Control de Fondos a 2S
Fondo (cpm)
LES
29
24
19
+2S
-2S
14
LEI
9
Figura 8.2.2 Carta de Control de Fondos
217
Eficiencia (%)
65.6
+2S
65.4
65.2 +1S
65.0
64.8
-1S
64.6
64.4 -2S
64.2
Figura 8.2.3 Carta de Control de Eficiencias a 2S
Eficiencia (%)
66
+2S
65
-2S
64
63
62
61
60 LEI
59
Figura 8.2.4 Carta de Control de Eficiencias
218
Figura de Mérito
290 +2S
280 +1S
270
-1S
260
-2S
250
Figura 8.2.5 Carta de Control de Figuras de Mérito a 2S
Figura de Mérito
295
+2S
275
255 -2S
235
215
195
LEI
175
Figura 8.2.6 Carta de Control de Figuras de Mérito
219
Chi_Cuadrado
35
+2S
30
LES
25
20
15
LEI
10
-2S
5
Figura 8.2.7 Carta de Control de Chi-Cuadrado
Debido a que el chi-cuadrado, sobrepasa los límites tanto superior como inferior en
las últimas dos mediciones observadas antes de octubre de 2007, que es el mes en que
se iniciaron las pruebas de evaluación del método, fue necesario hacer la prueba
manualmente el día 12 de octubre, obteniendo como resultados la Tabla 8.2.2. Con estos
datos y con la ayuda de la siguiente ecuación, se obtiene el valor de Chi_Cuadrado.
∑ ((valor observado) − (valor promedio))

n
2
i
X2 = i =1
valor promedio
5.1.5
Sustituyendo en esta ecuación se obtiene el siguiente resultado.
∑ (C −C)
n
2
i
1542772.52
X2 = i =1
= = 17.3
C 89200.8
Con este valor se puede concluir que el Contador funciona correctamente y que los
errores son debidos a los tiempos cortos de conteo.
220
Tabla 8.2.2 Datos para la prueba de Chi_Cuadrado.
Prueba CPM (C) SIS tSIE (C − C )2

1 89838.1 19.449 996 406183.16
2 89286.4 19.414 991 7331.64
3 89242.4 19.406 989 1732.64
4 88843.7 19.480 993 127502.56
5 88967.2 19.488 990 54557.28
6 89473.2 19.515 990 74215.38
7 89411.4 19.502 993 44362.89
8 89168.9 19.560 1000 1016.02
9 88737.0 19.587 999 215087.25
10 89165.7 19.486 993 1230.26
11 89460.2 19.490 994 67301.33
12 89100.7 19.491 997 10015.01
13 89481.5 19.565 1001 78806.53
14 89168.2 19.579 999 1061.13
15 88782.2 19.496 990 175205.03
16 88975.9 19.471 994 50568.77
17 89263.4 19.538 997 3921.89
18 89553.4 19.537 996 124344.39
19 88887.3 19.520 994 98266.58
20 89208.7 19.531 993 62.81
Media 89200.8 19.505 994 77138.63
221
8.3 DETERMINACIÓN DEL TIEMPO DE CONTEO
Para determinar el tiempo de conteo, antes es necesario establecer el nivel de

confianza con el cual se trabajará. Para tomar un factor de cobertura con un valor entero,
se trabajará con un nivel de confianza del 95.45%, Para todos los análisis; lo cual de
acuerdo a la Tabla 3.7.1, el valor de cobertura es de 2.
Ahora bien, como todos los conteos internos hechos por el contador de Centelleo se
ajustan de acuerdo a la distribución de Poisson, la desviación estándar de los datos para
estas mediciones, está definida de acuerdo a la ecuación.
σA = A 5.1.3
Por lo tanto para un nivel de confianza de 95%, la incertidumbre se calcula como.
U =2 A 8.3.1
Y el Error Relativo se define por la ecuación.
2 A 2
Er = = 8.3.2
A A
Donde A es la actividad total medida por el contador, y se define como.
A = t c ∗ Am 8.3.3
tc : Es el tiempo de conteo establecido para una medición.
Am : Es la actividad de la muestra.
Ahora, sustituyendo la ecuación 8.3.3 en la 8.3.2 y despejando tc , nos queda.
4
tc = 8.3.4
E ∗ Am
2
r
222
Que es como se define el tiempo de conteo para una medición, establecidos el nivel
de confianza y el Error Relativo.
Ahora, para un Error Relativo de 3.5%, para la determinación de la Radiación de
Fondo, que por estimación se establece que es de 7.0 cpm, el tiempo de conteo necesario
se calcula como sigue.
4 4
tc = = = 466mpc ≈ 500mpc
E ∗ Am 0.035 ∗ 7.0cpm
2
r
2
cpm: son cuentas por minuto

mpc: son minutos por cuenta o por medición.
El cálculo anterior establece que el tiempo de conteo por medición será de 500
minutos para un error relativo del 3.5%.
8.4 ESTABLECIENDO CONCENTRACIÓN DE BLANCO
La concentración de 3H en la precipitación bajo condiciones de equilibrio es

probablemente de unas 5 UT, que es equivalente a una actividad específica de unos 0,6
Bq/L (Roether, 1967). Begemann (1959) estimó que el contenido natural de 3H del agua
lluvia antes de los ensayos nucleares que empezaron a principios de la década de 1950
era de 5 UT en Europa central. (IGME, 2002).
Una gran parte del 3H (al igual que lo que pasa con el 14
C) que se produce en las
explosiones nucleares se inyecta a la estratosfera. Este vuelve a la troposfera cada año
durante la primavera y principios de verano. Esto es lo que provoca las variaciones
estacionales del 3H y del 14
C, las cuales son más pronunciadas en el primer caso, ya que
el tiempo de residencia en la atmósfera del H2O al que se asocia el 3H, es muy pequeño
(del orden de semanas). (IGME, 2002).
De acuerdo a lo anteriormente descrito, se puede estimar que el agua subterránea
existente en El Salvador contiene una concentración aproximada de Tritio de unas (4+/-1)
UT, con lo cual se estima que el agua blanco que se utilizará para la realización de este
proyecto tiene alrededor de (4+/-1) UT.
223
8.5 NIVELES DE RADIACIÓN DE FONDO
Para determinar los niveles de fondo es necesario tener bien definida la actividad de
tritio presente en el agua blanco considerando que esta debe ser lo más baja posible. Por
esta razón se trató de definir un blanco de los diferentes tipos de aguas profundas más
comunes que se pueden encontrar en el país, las cuales son:
• Agua purificada de Industrias Alpina.
• Agua purificada de Industrias Cristal.
• Agua potable distribuida por ANDA.
Al efectuar los análisis de cada matriz de agua con el método presentado en la
sección 4.5, se obtuvieron los datos presentados de la Tabla 8.5.1 a la Tabla 8.5.3; que
representan los niveles de fondo más la actividad de tritio en las mismas, y los valores
presentados en cada columna se especifican a continuación:
• CPMA: Cuentas por minuto en la región de energía de (0.0 a 18.6) keV.
• CPMB: Cuentas por minuto en la región de energía de (2.0 a 18.6) keV.
• SIS: Representa los valores de índices espectrales de una muestra1.
• tSIE: Representa el índice transformado por un estándar externo1.
Tabla 8.5.1 Niveles de radiación de fondo con agua

cristal como blanco
Muestra CPMA CPMB SIS tSIE
1 7.59 7.45 13.062 311
2 7.20 7.06 12.999 312
3 7.22 7.08 13.233 315
4 6.59 6.47 13.056 293
5 6.71 6.58 13.251 302
6 7.06 6.94 13.015 305
7 7.31 7.19 13.103 313
8 6.95 6.82 13.070 305
1 Representan niveles de interferencia. Para más detalle verificar secciones 5.1.3 y 5.1.7, respectivamente.
224
Tabla 8.5.2 Niveles de radiación de fondo con agua

alpina como blanco
1 7.05 6.88 12.916 308
2 7.35 7.23 13.080 312
3 7.11 6.98 12.942 311
4 6.81 6.68 13.193 306
5 7.25 7.12 13.138 305
6 7.45 7.30 13.779 317
7 7.21 7.06 12.945 305
8 7.48 7.34 13.024 310
9 7.23 7.09 13.074 313
10 6.99 6.87 13.262 307
11 7.42 7.30 13.253 310
12 7.09 6.94 13.259 312
13 6.99 6.94 13.011 305
Tabla 8.5.3 Niveles de radiación de fondo con Agua

Potable como blanco
1 7.11 6.98 13.129 316
2 6.95 6.84 13.228 312
3 7.41 7.25 13.742 318
225
En estas tablas se puede verificar que los datos obtenidos para cada matriz, son
muy semejantes y no se puede observar una diferencia representativa entre los mismos.
Esto se confirma en a través de un análisis estadístico, el cual es presentado a
continuación.
8.5.1 Análisis estadístico
8.5.1.1 Media Aritmética
La media aritmética representa una estimación del valor absoluto de la cantidad

medida y es definida como la suma de todas las mediciones divididas por el número total
de ellas, lo que se representa por la ecuación.
1 n
x= ∑ xi
n i =1 3.6.1
La que nos ayuda a determinar la media aritmética de las mediciones de fondo

efectuadas con las diferentes matrices de aguas. Estos valores son presentados en la
Tabla 8.5.4.
Tabla 8.5.4 Valores promedio para niveles de fondo con

diferentes matrices
Matriz Muestras CPMA CPMB SIS tSIE
Agua Cristal 8 7.08 6.95 13.099 307
Agua Alpina 13 7.19 7.06 13.144 309
Agua Potable 3 7.16 7.02 13.366 315
226
8.5.1.2 Dispersión
La dispersión (A) de datos es definida como el cociente de la diferencia entre el

valor más alto y el valor más bajo dividida por el valor absoluto de la estimación de una
cantidad medida (media aritmética) de los valores obtenidos en las mediciones. La cual se
expresa en la siguiente ecuación.
xmax − xmin
D= ∗100 8.5.1
x
Por tanto de la Tabla 8.5.1 a la Tabla 8.5.4 se toman los valores límites y los
promedios para encontrar los intervalos y la dispersión para cada tipo de matriz, los
cuales son presentados en la Tabla 8.5.5.
Tabla 8.5.5 Dispersión para niveles de fondo con diferentes Matrices
Num. de Media Mínimo Máximo Intervalo Dispersión

Matriz Muestras (cpm) (cpm) (cpm) (cpm) (%)
Agua Cristal 8 7.08 6.59 7.59 1.00 14.12
Agua Alpina 13 7.19 6.81 7.48 0.67 9.32
Agua Potable 3 7.16 6.95 7.41 0.46 6.42
8.5.1.3 Desviación estándar, Varianza y Coeficiente de Variación
La desviación estándar es la variabilidad de datos definida por la expresión:
∑ (x − x)
n
2
i
s= i =1
8.5.2
n −1
La varianza es definida como el cuadrado de la desviación estándar.
Varianza = s 2 8.5.3
227
El Coeficiente de Variación (CV) es también conocido como Desviación Estándar

Relativa (DER) y se define como el cociente de una estimación del error (s) dividida por
una estimación del valor absoluto de una cantidad medida. Tal como se expresa en la
ecuación siguiente.
s
CV = ∗100 8.5.4
x
De la Tabla 8.5.1 a la Tabla 8.5.4 se toman los datos para evaluarlos con las
ecuaciones 8.1.3 a la 8.1.5, generando la Tabla 8.5.6, que presenta los resultados para
cada una de las matrices de agua.
Tabla 8.5.6 Datos estadísticos para niveles de fondo con diferentes Matrices
Matriz Num. de Media Desviación Varianza Coeficiente de

Muestras (CPM) Estándar variación (%)
Agua Cristal 8 7.08 0.3254201 0.1058982 4.60
Agua Alpina 13 7.19 0.2033218 0.0413397 2.83
Agua Potable 3 7.16 0.2335237 0.0545333 3.26
Debido a que el coeficiente de variación y la dispersión de datos obtenidos para el

agua alpina son los más pequeños con respecto al número de datos, en comparación con
las otras dos matrices, se tomará ésta como agua blanco.
8.5.2 Incertidumbre de la radiación de fondo
8.5.2.1 Incertidumbre estándar de una simple medición
Esta incertidumbre es igual a la desviación estándar de las mediciones la cual se

define como el cociente de las cuentas por minuto, dividido por el tiempo de conteo para
la medición; debido a que, para los conteos internos de datos, siempre se asume que
cumplen la distribución de Poisson, y esto se expresa en la siguiente ecuación.
228
De aquí que, para las concentraciones de niveles de fondo, los factores que
definen la ecuación, son los que se expresan a continuación.
cpmF
sF =
tc
4.5.7
cpmF: Es la media de los niveles de radiación de fondo.

tc : Tiempo de conteo para cada medición (500 min.).
Con la cual, calculamos la incertidumbre, considerando la media aritmética de las

mediciones de agua alpina como una sola medición de radiación de fondo, quedándonos
con un valor de:
cpmF 7.19
u F1 = s F = = = 0.1198910 cpm
tc 500
8.5.2.2 Incertidumbre estándar del conjunto de mediciones
Para el cálculo de esta incertidumbre, se asume que los datos se distribuyen, de

acuerdo a la distribución Gausiana ó normal (esto se demuestra en la Figura 8.5.4); de
aquí que, la incertidumbre para un conjunto de mediciones, se define como el cociente de
la desviación estándar de las mediciones, dividida por la raíz cuadrada del total de las
mediciones, lo que se expresa en la siguiente ecuación.
s( x )
s (x ) =
n 3.6.4
Que evaluándola, para los datos obtenidos de la radiación de fondo, el valor que
se calcula, es el siguiente.
u F 2 = s (x ) =
s F 0.2033218
= = 0.0563913 cpm
n 13
229
8.5.2.3 Incertidumbre estándar combinada
El cálculo de la incertidumbre combinada, se hace de acuerdo a la sección 3.7.2.3,

utilizando la ecuación.
n
u c2 ( y ) = ∑ u 2 (xi )
i =1 3.7.11
Evaluando esta ecuación para las incertidumbres estándares calculadas

anteriormente, obtenemos como incertidumbre combinada, calculada para los niveles de
radiación de fondo, un valor de.
u F = u F2 1 + u F2 2 = 0.05639132 + 0.1198910 2 = 0.1324909 cpm
8.5.2.4 Incertidumbre expandida
La incertidumbre expandida se calcula a partir de la ecuación.
U = k · uc
3.7.13
Para un nivel de confianza del 95.45%, de la Tabla 3.7.1, el factor de cobertura (k)
toma un valor de 2. Por tanto.
U F = k ∗ u F = 2 ∗ 0.1324909 ≈ 0.2649817 cpm
De los cálculos anteriores, se toma que el valor de la radiación de fondo, queda

expresada como:
(F + U F ) = (7.19 ± 0.26) cpm
230
8.5.3 Distribución de la radiación de fondo
Aunque la desviación estándar proporciona una medida de la dispersión de un

conjunto de resultados alrededor del valor medio, no indica la forma de la distribución.
Para establecer la distribución de una medida se necesita un buen número de datos
obtenidos a partir de mediciones. Para este caso particular se harán dos gráficos para
representar la distribución:
1. Con los datos obtenidos únicamente a partir del agua alpina, que es, la que para estas
pruebas, se tomará como el agua blanco de referencia. Aquí se toman los datos de la
columna 2 de la Tabla 8.5.2, que son los que se observan en la Tabla 8.5.7.
Tabla 8.5.7 Niveles de Radiación de Fondo en CPM con agua alpina como blanco
7.05 7.35 7.11 6.81 7.25 7.45 7.21 7.48 7.23 6.99 7.42 7.09 6.99
Figura 8.5.1 Curva de Probabilidad Normal
231
Con la Tabla 8.5.7, podemos generar la Tabla 8.5.8, que presenta las frecuencias
para graficar el histograma presentado en la Figura 8.5.2, que represente la distribución
de los datos de radiación de fondo con agua alpina como blanco.
Tabla 8.5.8 Frecuencias de radiación de fondo con agua alpina como

blanco
Frecuencia 0 4 5 4 0
Radiación de
6.56-6.80 6.81-7.05 7.06-7.30 7.31-7.55 7.56-7.80
fondo (CPM)
4
Frecuencia
0
6.56-6.80 6.81-7.05 7.06-7.30 7.31-7.55 7.56-7.80
Radiación de fondo (CPM)
Figura 8.5.2 Histograma de radiación de fondo con agua alpina como blanco
2. Agrupando los datos de radiación de fondo, del agua alpina, el agua cristal y el agua
potable, ya que estos valores son muy semejante y por tanto, confundibles entre si.
Para esto tomaremos los datos de la columna 2 de la Tabla 8.5.1 a la Tabla 8.5.3, que
son los que se presentan en la Tabla 8.5.9.
232
Tabla 8.5.9 Niveles de radiación de fondo (cpm)
7.59 7.20 7.22 6.59 6.71 7.06 7.31 6.95 7.05 7.36 7.11 6.81
7.25 7.45 7.21 7.48 7.23 6.99 7.42 7.09 6.99 7.11 6.95 7.41
Con la Tabla 8.5.9 se puede generar la Tabla 8.5.10 que presenta las frecuencias
para graficar el histograma presentado en la Figura 8.5.3, para representar la distribución
de los datos de radiación de fondo, tal como se puede observar en la Figura 8.5.4.
Tabla 8.5.10 Frecuencias de medidas de radiación de fondo
Frecuencia 2 6 9 6 1
Radiación de
6.56-6.80 6.81-7.05 7.06-7.30 7.31-7.55 7.56-7.80
Fondo (CPM)
10
9
8
7
Frecuencia
6
5
4
3
2
1
0
6.31-6.55 6.56-6.80 6.81-7.05 7.06-7.30 7.31-7.55 7.56-7.80 7.81-8.05
Radiación de Fondo (CPM)
Figura 8.5.3 Histograma de radiación de fondo
233
7.06-7.30
Radiación de Fondo (CPM)
Figura 8.5.4 Distribución de datos para radiación de fondo
8.6 EFICIENCIA DEL MÉTODO DE MEDICIÓN
Para evaluar la eficiencia del método de medición, se tomarán los datos

presentados en la Tabla 8.6.1, recolectados a partir de los análisis, para los cuales se
prepararon las muestras para su medición en el equipo, como lo indica la sección 4.5.5.3,
que da la guía para preparar el estándar para efectuar las mediciones.
Cabe recalcar que, para estas mediciones se tomó como agua blanco el agua
alpina, considerando que la cantidad de tritio presente en la misma, está por debajo de las
5 UT, y que para este análisis se puede considerar despreciable, en comparación con la
actividad de tritio presente en el estándar.
Para efectuar los cálculos en la evaluación de la eficiencia nos auxiliamos de la
ecuación siguiente. Que fue definida en la sección 4.5.7.1
cpme − cpm f
E=
Ae 4.5.1
234
Tabla 8.6.1 Actividad de Tritio en 1 mL de MR
1 50.30 48.44 9.810 311
2 49.44 47.65 9.871 308
3 49.31 47.40 9.779 305
4 49.89 48.08 9.831 309
5 49.58 47.64 9.825 309
6 50.04 48.30 9.848 309
7 50.20 48.36 9.792 308
8 48.71 16.89 9.811 306
9 48.06 46.27 9.788 305
10 49.53 47.66 9.792 308
Media 49.51 44.67 9.815 308
Ahora bien, para evaluar la ecuación, es necesario conocer los tres factores que
se presentan en la misma:
• cpme: Es la actividad de Tritio en el estándar1, encontrada por el equipo; cuyo valor
corresponde a la media aritmética de los datos presentados en la Tabla 8.6.1;
cpme = 49.51 cpm
• cpmF: Es la actividad de fondo encontrada por el equipo; cuyo valor corresponde a la

media aritmética dada en la Tabla 8.5.4, de los datos obtenidos de las mediciones de
radiación de fondo.
cpmF = 7.19 cpm
1 Para estas pruebas se utilizó un Material de Referencia en lugar de un Estándar, ya que no pudo obtenerse.
235
• Ae: Es la actividad real del estándar de Tritio. Cuyo valor se calcula con la ayuda de la
ecuación siguiente.
t 
− • Ln 2
A = A0 e T 
8.6.1
A: Es la actividad, en desintegraciones por unidad de tiempo.

A0: Es la actividad inicial ó la actividad a tiempo cero (0).
t / T: Es el número de períodos transcurridos en la desintegración parcial del
radionúclido.
t: Tiempo transcurrido a partir del tiempo de referencia, denominado “Tiempo Cero”.
T: Período de semidesintegración ó período radioactivo, que es el tiempo que debe
transcurrir para que la actividad radioactiva de un radionúclido determinado quede
reducida a la mitad de su valor inicial.
Para efectuar el cálculo se toman los siguientes valores:
A0: Actividad del estándar de tritio especificada en el anexo E.2, cuyo valor es de
22,500 UT, medida en Octubre de 2005, por el INGEIS, Buenos Aires, Argentina.
t: Tiempo transcurrido desde Octubre de 2005 hasta Octubre de 2007 (fecha en que
se mide el estándar con el equipo de Centelleo del CIAN-FIA-UES). El tiempo
transcurrido es de 2 años.
T: El valor conocido más recientemente para el período radioactivo del Tritio es de
12.32 años. (Lucas y Unterweger, 2000; según IGME, 2002).
t / T: Con el tiempo transcurrido y el período radioactivo, se puede calcular el número de
períodos.
t 2 años 25
= = = 0.162337662
T 12.32 años 154
Ahora, podemos calcular la actividad del Material de Referencia del Tritio.
t 
−  • Ln 2
AMR = A0 e T 
= 22,500 UT ∗ e −0.162334 • Ln 2
= 20,105 UT
Con la ayuda del factor de conversión de UT a Bq/L de la Tabla A.2, nos queda.
236
0.118Bq / L dps 60dpm 1L

AMR = 20,105 UT ∗ = 2372.39 Bq / L = 2372.39 ∗ ∗
UT L 1dps 1000mL
dpm
AMR = 142.34
mL
Luego, para 1 mL de MR de tritio medido, La actividad nos da una valor de.
dpm
AMR = 142.34 ∗ 1mL = 142.34 dpm
mL
Por último, encontramos la eficiencia del método de medición, quedándonos así1.
cpmMR − cpmF 49.51cpm − 7.19cpm

E= = = 0.2973 ∗ 100%
AMR 142.34dpm
E = 29.73%
Haciendo los mismos cálculos para cada una de las mediciones, se obtiene la
Tabla 8.6.3, con la cual se generan los datos estadísticos, presentados en la Tabla 8.6.2.
Tabla 8.6.2 Datos estadísticos de la eficiencia del método

de medición
muestras Promedio Máximo Mínimo Intervalo
10 0.2973 0.3029 0.2871 0.0157
Dispersión Desviación Coeficiente de

(%) estándar Varianza Variación (%)
5.293 4.86626E-3 2.36805E-5 1.637
1 Este valor es muy semejante al dado por el fabricante del cóctel de Centelleo, que tiene un valor del 30% y
que se presenta en la sección 6.1, lo que indica que el método cumple con la eficiencia especificada.
237
Tabla 8.6.3 Eficiencias del método de medición
Muestra CPMA Eficiencia
1 50.30 0.3029
2 49.44 0.2968
3 49.31 0.2959
4 49.89 0.3000
5 49.58 0.2978
6 50.04 0.3010
7 50.20 0.3022
8 48.71 0.2917
9 48.06 0.2871
10 49.53 0.2975
Media 49.51 0.2973
8.6.1 Incertidumbre de la eficiencia del método de medición
Calculando la incertidumbre estándar para la media aritmética, considerándola

como una sola medición hecha por el equipo.
cpmE 49.51
u dE1 = s E = = = 0.3146617 cpm
tc 500
Ahora procedemos a calcular la incertidumbre estándar de los datos obtenidos

para calcular la Eficiencia del método de medición, para el conjunto de mediciones, para
lo cual necesitamos la desviación estándar, por lo que generamos la siguiente tabla de
datos estadísticos.
238
Tabla 8.6.4 Estadísticos de mediciones para la eficiencia

del método
Promedio Máximo Mínimo Intervalo

muestras (cpm) (cpm) (cpm) (cpm)
10 49.51 50.30 48.06 2.24

4.525 0.6926631 0.4797822 1.399
Ahora utilizando la desviación estándar de ésta tabla calculamos la incertidumbre

estándar del conjunto de mediciones.
s E 0.6926631
u dE 2 = = = 0.2190393 cpm
n 10
Ya con esto podemos calcular la incertidumbre estándar combinada para la

eficiencia, que corresponde a los datos obtenidos en las mediciones.
udE = u E2 1 + u E2 2 = 0.3146617 2 + 0.21913932 = 0.3833930 cpm
Ahora calculamos la incertidumbre de la suma de la incertidumbre estándar

combinada de los datos obtenidos para la eficiencia más los datos obtenidos para la
radiación de fondo.
u FdE = u dE
2
+ u F2 = 0.3833930 2 + 0.1324909 2 = 0.4056403 cpm
Para el cálculo de la incertidumbre de la eficiencia del método, es necesario

considerar también la incertidumbre del material de referencia (MR) que se utiliza para
comparar las mediciones hechas con las muestras en el equipo. De aquí que, es
239
necesario calcular la aportación de está incertidumbre hacia a la incertidumbre de la

eficiencia del método, por lo cual, se necesita de hacer los siguientes cálculos.
Como la incertidumbre del MR que se obtuvo, viene dada con un nivel de
confianza del 95.45%, de la Tabla 3.7.1, se toma el factor de cobertura (k) como un valor
de 2, con el cual, se calcula la incertidumbre combinada para el MR.
U MR 800 UT
u MR = = = 400 UT
k 2
Luego, la incertidumbre estándar combinada, la calculamos a partir de la ecuación.
 uc ( y )   u ( xi ) 
2 2
n
  = ∑  
 y  i =1  xi  3.7.12
Que fue definida en la sección 3.7.2.3, con la que calculamos la incertidumbre

estándar combinada de la Eficiencia del método de medición.
2 2
 u FdE   u MR 
uE = E ∗   + 
 cmp − cpm  A
 e f   MR 
2 2
 0.4056403   400 
u E = 0.2973 *   + 
 49.51 − 7.19   22500 
u E = 6.00483E − 3 ∗100% = 0.600483%
Con lo cual la incertidumbre expandida, para una nivel de confianza del 95.45%
nos da un valor de.
U E = 2 ∗ u E = 2 ∗ 0.600483% ≈ 1.20097%
Por lo que, la eficiencia nos queda expresada como sigue.
(E ± U E ) = (29.7 ± 1.2 ) %
240
8.7 EFICIENCIA DEL MÉTODO DE DESTILACIÓN1
En el método descrito en la sección 4.5, se le conoce como Factor de recuperación

(Fr) y para evaluarlo se siguieron los pasos descritos en el apartado 4.5.8, con los cuales
se obtuvieron los resultados presentados en la Tabla 8.7.1.
Tabla 8.7.1 Actividad de Tritio en 0.1 mL de MR
1 11.33 10.99 11.603 313
2 10.66 10.35 11.643 308
3 10.99 10.72 11.685 307
4 11.45 11.13 11.548 312
5 10.91 10.61 11.529 309
6 11.14 10.82 11.670 308
7 11.28 10.98 11.716 309
8 10.95 10.66 11.604 308
9 10.73 10.46 11.609 306
Media 11.05 10.75 11.623 309
Ahora con la ayuda de la ecuación.
cpmt − cpm f
Fr =
E * At 4.5.2
Calculamos el Factor de recuperación, quedándonos como sigue.
11.05cpm − 7.19cpm
Fr = = 0.9126 *100% = 91.26%
0.2973 *14.234dpm
1 Para verificar el buen funcionamiento del método, previamente se hicieron pruebas de control de la rapidez
de destilación, las cuales son presentadas en el anexo B.
241
Haciendo estos mismos cálculos para cada uno de los datos obtenidos de las
mediciones, los cuales son presentados en la columna 2 de la Tabla 8.7.1, se obtienen las
eficiencias presentadas en la Tabla 8.7.2, las cuales ayudan en la obtención de los datos
estadísticos presentados en la Tabla 8.7.3.
Tabla 8.7.2 Eficiencias del Método de Destilación
Factor de
Muestra CPMA
Recuperación
1 11.33 0.9790
2 10.66 0.8207
3 10.99 0.8987
4 11.45 1.0074
5 10.91 0.8798
6 11.14 0.9341
7 11.28 0.9672
8 10.95 0.8892
9 10.73 0.8372
Media 11.05 0.9126
Tabla 8.7.3 Datos estadísticos de la eficiencia del

método de destilación
Muestras Promedio Máximo Mínimo Intervalo
9 0.9126 1.0074 0.8207 0.1867

20.4559 6.40134-2 4.09771E-5 7.015
242
8.7.1 Incertidumbre de la eficiencia del método de destilación
Calculando la incertidumbre del agua tritiada, considerando la media como una

sola medición.
cpmt 11.05
ut1 = = = 0.1486532 cpm
tc 500
Ahora procedemos a calcular la incertidumbre estándar de los datos obtenidos

para calcular el Factor de Recuperación o la eficiencia del método de destilación, para el
conjunto de mediciones, para lo cual necesitamos la desviación estándar, por lo que
generamos la siguiente tabla de datos estadísticos.
Tabla 8.7.4 Estadísticos de mediciones para la eficiencia

del método de destilación
Promedio Máximo Mínimo Intervalo

Muestras (cpm) (cpm) (cpm) (cpm)
9 11.05 11.45 10.66 0.79

7.150 0.2708987 0.0733861 2.451
Cálculo de la incertidumbre para el conjunto de mediciones de agua tritiada.
st 0.2708987
ut 2 = = = 9.02996 E − 2 cpm
n 9
Ahora la incertidumbre estándar del agua tritiada se calcula como sigue.
ut = u t21 + u t22 = 0.1486532 2 + (9.02996E − 2) = 0.1739304 cpm

2
243
Luego la incertidumbre estándar de la diferencia de los datos obtenidos para el

agua tritiada menos la los datos de la radiación de fondo, se calcula como sigue.
utF = ut2 + u F2 = 0.1739304 2 + 0.13249092 = 0.2186450 cpm
Cálculo de la incertidumbre combinada del Factor de Recuperación.
2 2
  u E   0.1 ∗ u MR
2
 u tF 
u Fr = Fr ∗   +   +  
 cpmt − cpmF   E   AMR 
 0.2186450   0.60048   0.1 ∗ 400 

2 2 2
u Fr = 0.9126 *   +  + 
 11.05 − 7.19   29.73   22500 
u Fr = 5.48791E − 2 ∗100% = 5.48791%
Con lo cual la incertidumbre expandida, para un nivel de confianza del 95.45%,

nos da el siguiente valor.
U Fr = 2 ∗ u Fr = 2 ∗ 5.48791% ≈ 10.9758% = 11.0%
Con lo cual, el Factor de Recuperación nos queda expresado como.
(Fr ± U Fr ) = (91.3 ± 11.0 ) %
244
8.8 LIMITE DE DETECCIÓN DEL METODO DE MEDICIÓN
También conocido como Concentración Mínima Detectable (CMD), que es la

cantidad mínima del analito en la muestra, que puede ser distinguible de cero de manera
confiable (para más detalles revisar sección 2.4).
Este valor se calcula a partir de las ecuaciones siguientes, y con la ayuda del
factor de conversión de Bq/L a UT.
4.66s f *1000
CMD =
60 * E *V * Fr 4.5.5
cpmF
sF =
tc
4.5.7
Que fueron definidas en el apartado 4.5.7.5. Y evaluándolas obtenemos la

1
concentración mínima detectable .
7.19
Sb = = 0.1199166
500
4.66 * 0.1199166 *1000 1 UT

CMD = = 3.43194 Bq *
L
60 * 0.297 *10 * 0.912 0.118 Bq
L
CMD = 29.1 UT
Comparando éste valor con la Tabla 6.1.3 y la Figura 6.1.2, se puede observar que
el valor encontrado está por debajo del valor dado por el fabricante del coctel de
Centelleo, ya que el valor dado por éste, es de 3.7 Bq/L, contra el valor encontrado que es
de 3.4 Bq/L. Con lo cual, se concluye que el método funciona correctamente.
1 Aquí se debió considerar la concentración de Tritio presente en el agua tomada como blanco, que de
acuerdo a la sección 8.4, se estima que es de 4 UT. Pero debido a que el valor es relativamente bajo el
resultado no variará significativamente al valor ya establecido. De igual forma debió haberse considerado
para los cálculos de la radiación de fondo la eficiencia del método y el factor de recuperación, pero no se
consideró por la misma razón.
245
8.8.1 Incertidumbre del Límite de Detección
Aquí se debe considerar la incertidumbre de la estimación de la concentración de

Tritio en el agua considerada como blanco, que de acuerdo a la sección 8.4, es de 1 UT.
Considerando un nivel de confianza del 95%, el factor de cobertura (k) es de 2, por tanto.
UB 1
uB = = = 0.5 UT
k 2
Calculando la incertidumbre estándar combinada para el Límite de Detección.
2 2 2
uf   u Fr   u E 
uCMD1 = CMD ∗   +   + 
F   Fr   E 
2 2 2
 0.1324909   4.35   0.600483 
uCMD1 = 29.1 UT ∗   +  + 
 7.19   91.3   29.73 
uCMD1 = 1.5992 UT
uCMD = u CMD
2
1 + u B = 1.5992 + 0.5 = 1.6755 UT
2 2 2
Para un nivel de confianza del 95.45%, con un factor de cobertura de 2,

obtenemos la incertidumbre para la Concentración Mínima Detectable.
U CMD = 2 * uCMD = 2 *1.676 ≈ 3.351 UT
Por lo cual, la Concentración Mínima Detectable nos queda expresada como.
(CMD ± U CMD ) = (29.1 ± 3.4) UT
246
8.9 ACTIVIDAD DE TRITIO EN AGUA LLUVIA
Tabla 8.9.1 Análisis de Tritio en Agua Lluvia
1 6.88 6.77 13.213 296
2 7.07 6.96 13.331 298
3 6.92 6.79 13.074 304
4 7.37 7.26 13.244 304
5 7.04 6.91 13.032 301
6 6.91 6.79 13.215 301
7 7.09 6.94 13.130 305
8 6.91 6.76 12.925 305
9 7.08 6.93 13.062 304
10 7.08 6.92 12.837 305
11 7.03 6.90 13.106 302
12 6.86 6.69 12.770 298
13 6.94 6.82 13.072 302
14 7.10 6.97 13.181 302
15 7.24 7.12 13.115 303
Media 7.03 6.90 13.087 302
En la concentración de tritio en agua lluvia; para el muestreo se siguió la

metodología indicada en la sección 4.2 y para el análisis la indicada en la sección 4.5.
Con las cuales se obtuvieron los resultados de la Tabla 8.9.1, que como se puede
observar son valores muy semejantes a los obtenidos en la determinación de los niveles
de fondo; por lo cual, la concentración de tritio en agua lluvia no puede ser determinada
247
de manera directa, por el método utilizado en estas mediciones y es necesario aplicar

enriquecimiento de Tritio, el cual se explica en la sección 4.3.5. En esta sección se dan a
conocer dos métodos que son el enriquecimiento electrolítico y el enriquecimiento por
difusión térmica del H2; de los cuales, este último es menos utilizado debido a que el
equipo y el tratamiento de la muestra es complicado.
Los datos recolectados para este análisis son presentados en la Tabla 8.9.1.
Evaluando estos valores con la ecuación.
Am =
(cpmm − cpm f )*1000
60 * E *V * Fr 4.5.3
Obtenemos el siguiente resultado.
Am1 =
(7.03 − 7.19) ∗1000 = −0.9834 Bq ∗
1 UT
= −8.3 UT
60 ∗ 0.297 ∗10 ∗ 0.913 L
0.118 Bq
L
A este valor, hay que sumarle el contenido de tritio del agua blanco, que de
acuerdo a la sección 8.4, es de 4 UT.
Am = −8.3 + 4 = −4.3 UT
Con estos cálculos se confirma lo dicho en el primer párrafo de esta sección, ya

que la concentración de tritio encontrada está por debajo del Límite de Detección, y más
aún, como se puede observar, el valor encontrado es negativo, lo cual es imposible para
ser un valor real; y esto puede ser debido al leve incremento en los interferentes
presentes en el agua lluvia, comparados con los del agua blanco, esto se observa
comparando el valor de tSIE de la Tabla 8.5.2 con la Tabla 8.9.1, entre otras razones.
248
8.10 RESUMEN DE RESULTADOS
Tabla 8.10.1 Condiciones de ambientales de operación
Característica Valor encontrado en Limites aceptables

Evaluada las instalaciones
Temperatura (ºC) 19-22 15-35
Humedad Relativa (%) 35-68 30-85
Tabla 8.10.2 Rendimiento del Contador
Característica Evaluada Valor encontrado en las Limites aceptables

instalaciones
Fondo (cpm) 14.5-16.6 10-30
Eficiencia (%) 64.3-65.5 60
Figura de Mérito 252-292 180
Tiempo de conteo 500 min (Error Relativo de 3.5%)
Tabla 8.10.3 Características de desempeño del método
Característica Evaluada Valor encontrado en las

instalaciones
Radiación de Fondo (cpm) 7.19 +/- 0.26
Eficiencia (%) 29.7 +/- 1.2
Factor de Recuperación (%) 91.3 +/- 11.0
Concentración Mínima Detectable (UT) 29.1 +/- 3.4
249
CONCLUSIONES
• La radiación natural y artificial, pueden actuar sobre nuestro organismo desde fuera o
internamente, este último caso ocurre cuando se incorporan elementos radiactivos por
la respiración o cuando se ingieren alimentos o bebidas contaminadas. La radiación
artificial surge como producto del incremento constante y continuo de las aplicaciones
nucleares, contribuyendo a incrementar las fuentes de radiación ionizante,
aumentando con ello el riesgo de sobrepasar los limites de las tasas de dosis
radiológica, establecidas y aceptadas internacionalmente para la población, por la
liberación de radionúclidos al ambiente, lo cual contamina tierra, agua (H2O) y aire.
De acuerdo a esto, el método es aplicable para el monitoreo ambiental en el
cumplimiento de las normas internacionales, donde la concentración límite de Tritio en
aguas bebibles establecida por la EPA (Agencia de Protección Ambiental), es de 740
Bq/L, que comparándola con la CMD encontrada para el método (3.43 Bq/L), existe
una diferencia bien marcada; por lo cual, el método evaluado puede aplicarse de
manera confiable, en un plan de monitoreo continuo de las aguas ambientales.
• Para un tiempo de conteo de 500 minutos en el análisis de muestras de agua, con el

contador de Centelleo Líquido modelo Tri-Carb 2100TR, utilizando de manera directa
el método desarrollado por el OIEA, no es posible determinar la concentración de tritio
presente en muestras de aguas ambientales salvadoreñas; debido a que los niveles
de tritio presentes en estas, están por debajo de la concentración mínima detectable,
especificada para el método, en las instalaciones de los laboratorios del CIAN, cuyo
valor es de 29.1 UT, por lo cual, al efectuar las mediciones, estas son confundibles
con la radiación de fondo detectada por el contador, que es de 7.19 cpm.
• El tiempo de conteo necesario para efectuar la medición de una muestra en el

Contador de Centelleo Líquido se relaciona de manera inversa al error relativo
requerido en la medición y a la actividad presente en la muestra que se requiere
analizar. Esto quiere decir que entre mas altos sean, la actividad presente en la
muestra, y el error relativo requerido para el análisis, menor será el tiempo necesario
para efectuar la medición de Tritio en la misma.
250
RECOMENDACIONES
• Debido a la falta de disponibilidad de Materiales de Referencia de Tritio Certificados

en el país y en la región Centroamericana, fue necesario investigar en algunos países
de la región latinoamericana, como Argentina, Brasil y Cuba; la posibilidad de poder
obtenerlos, por medio del CIAN, a través de diferentes Organismos Internacionales de
apoyo como lo son el Instituto de Geocronología y Geología Isotópica (INGEIS),
Buenos Aires, Argentina; el Instituto de Radioprotección y Dosimetría (IRD), Río de
Janeiro, Brasil; Centro de Protección e Higiene de las Radiaciones (CPHR), La
Habana, Cuba; de los cuales no fue posible obtenerlos, recibiendo únicamente
Materiales de Referencia por medio de los primeros dos Organismos. De igual forma
se intentó la posibilidad de caracterizar agua blanco, para lo cual se enviaron
muestras a los organismos IRD y CPHR, de los cuales no se obtuvo respuesta. Es
por esto, que el presente proyecto tiene por nombre, “Evaluación de metodología para
medición de Tritio en agua” y se recomienda seguir investigando para obtener el Agua
blanco bien caracterizada y Certificada y el Material de Referencia Certificado, para
poder completar la validación del método.
• Como agua blanco es recomendable utilizar aguas profundas y viejas, de ser posible
con una edad no menor a 50 años, debido a que la edad media del Tritio es de 12.32
años, los que indica que para una edad de 50 años la concentración de Tritio se
habría reducido en no menos de 4 vidas medias, identificando así que para el caso de
una agua profunda, estimando que inicialmente tenga una concentración de 4 UT,
está, en 50 años se habría reducido a 0.24 UT.
• Para el cálculo de la incertidumbre, se recomienda que ninguna de las fuentes de

incertidumbre sea desechada por la suposición de que es poco significativa sin una
cuantificación previa de su contribución, comparada con las demás y apoyada en
mediciones. Es preferible la inclusión de un exceso de fuentes que ignorar algunas
entre las cuales pudiera descartarse alguna importante. No obstante, siempre estarán
presentes efectos que la experiencia, conocimientos y actitud crítica del analista
permitirán calificar como irrelevantes después de las debidas consideraciones.
251
• Para determinar concentraciones de tritio en muestras de agua con niveles
relativamente bajos, comparados con el límite de detección especificado en las
instalaciones del CIAN, para el contador modelo Tri-Carb 2100TR; las mediciones
pueden hacerse, en contadores con modelos más recientes (como por ejemplo el Tri-
Carb 2770TR), que cuentan con la capacidad de análisis para niveles bajos de conteo;
con los cuales, se pueden obtener niveles de radiación de fondo muy cercanos a 1
cpm, con los que, es posible disminuir la concentración mínima detectable hasta 1
Bq/L, que es equivalente a 8.5 UT, esto, siempre para un tiempo de conteo de 500
minutos. Pero debido a lo costosos que son estos contadores y, si la precisión
requerida para la medición no es tan exigente, es más recomendable aplicar
previamente a la muestra, un método de enriquecimiento.
• Cuando los niveles de tritio, están por debajo de la concentración mínima detectable,
es recomendable aplicar enriquecimiento, ya sea por electrolisis o por difusión térmica
del H2. Donde la electrolisis es relativamente simple, requiere escasa manipulación y
supervisión de la muestra durante el enriquecimiento, y se puede aplicar
simultáneamente a una serie de muestras y materiales de referencia. Caso contrario
a la difusión térmica que se produce en la reducción del agua mediante, zinc o
magnesio. Con este método se pueden obtener factores de enriquecimiento muy
elevados, pero el equipo y el tratamiento de las muestra son complicados.
• El laboratorio que va a modificar un método normalizado debe revalidarlo para

demostrar que las especificaciones del método original no se ven afectadas por la
modificación introducida. El nivel de revalidación requerido aumenta conforme la
magnitud de los cambios realizados. Se consideran cambios menores, por ejemplo, la
modificación del tamaño de la muestra y sustitución de reactivos. Se considera cambio
mayor, por ejemplo, el cambio de procedimiento o equipo y cambios en el alcance
(aplicación a matrices que no se especifican). Para demostrar que una versión
modificada de un método cumple las mismas especificaciones que el método original,
se deben realizar comparaciones utilizando réplicas. El diseño experimental y el
análisis de los resultados deben ser estadísticamente válidos. El laboratorio usuario de
un método normalizado modificado debe verificarlo contra sus especificaciones
originales, o de revalidación, y así demostrar que domina el ensayo y lo utiliza
correctamente.
252
• Antes de realizar cualquier conteo, el contador primero debe ser calibrado o
normalizado. Este procedimiento es requerido para ajustar cada uno de los tubos
fotomultiplicadores para el respectivo balance de una muestra y la calibración del
espectralaizer y debe realizarse con estándares sellados. Debe verificarse además
que el equipo cumpla con el valor deseado de Chi-Cuadrado. Es recomendado que la
autonormalización y calibración sea realizada una vez al día, mientras esté en uso el
equipo.
• Siempre que el contador sufra reparaciones fuertes o después de que el contador se

ha calibrado, debe comprobarse su la estabilidad. Un resultado positivo establecerá la
fiabilidad de los datos generados. Aunque hay muchas maneras estadísticas de lograr
esta tarea, el método conveniente es la prueba del Chi-cuadrado de Pearson.
Además de la prueba Chi-cuadrado, para verificar que el contador funciona
correctamente al inicio, después de la realización de cambios fuertes efectuado al
equipo, es necesario corroborar que, durante el tiempo en el cual se está usando,
funcione de igual forma, para esto, es necesario efectuar pruebas de control de
calidad, las cuales deben efectuarse continuamente.
253
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(W Buchmann, Ltg Tech, Documentation).
256
ANEXOS
257
A. UNIDADES DE RADIOACTIVIDAD
La conferencia general en pesos y medidas actuando con la recomendación de la

Comisión Internacional en Relación de Unidades y Medidas (CIRU) ha adoptado un
nombre de unidad especial para el SI en relación con radioactividad, que es el
Becquerelio (Bq) y que se define como desintegraciones por segundo (dps).
Además de la unidad de medida de Radioactividad también encontramos la unidad

de Radioactividad Específica que para el SI se define como Becquerelio por Litro (Bq/L).
También podemos encontrar otras unidades de medida de la radioactividad
específica como las Unidades de Tritio (UT) que se define como el equivalente a la
concentración de Tritio en Protio:
3
H
1
= 10 −18
H
Tabla A.1 Prefijos para el SI de unidades
Valor Nombre Símbolo Valor Nombre Símbolo
10-3 mili m 103 kilo k
10-6 micro µ 106 mega M
10-9 nano n 109 giga G
10-12 pico p 1012 tera T
10-15 femto f 1015 peta P
10-18 atto a 1018 exa E
258
Tabla A.2 Relaciones entre el SI de unidades y otras unidades
Cantidad Física Unidad del SI Otras unidades Relaciones
Actividad Becquerelio (Bq) Curie (Ci) 1 Bq = 2.70 pCi
1 Bq = 1 dps 1 Ci = 37 GBq
dpm 1 dps = 60 dpm
Actividad Específica Bequerel por Litro (Bq/L) UT 1 UT = 0.118 Bq/L
Dosis absorbida Gray (Gy) rad 1 Gy = 100 rad
1 Gy = 1 J/kg 1 rad = 10 mGy
Dosis equivalente Sievert (Sv) rem 1 Sv = 100 rem
1 Sv = 1 J/kg 1 rem = 10 mSv
Exposición C/kg Roentgen (R) 1 C/Kg = 3876 R
1 R = 258 mC/kg
259
B. RAPIDEZ DE DESTILACIÓN
En la eficiencia de la destilación intervienen muchos factores, pero los más

importante son la presión y la temperatura a la cual se da la misma en el interior del
destilador, ya que estos son los causantes del incremento o disminución de la rapidez a la
cual ocurre, que para el caso de la evaluación de actividades de tritio, influye mucho
debido a la diferencia de puntos de ebullición del agua normal con el agua radiactiva o
tritiada. De acuerdo a esto, entre más rápida sea la destilación, más alta será la eficiencia
del método, es decir que, la rapidez de destilación es directamente proporcional a la
eficiencia del mismo método.
Por esta razón fue necesario evaluar la rapidez a la cual se destila con el equipo y
con el método dado en la sección 4.4, recolectando los datos:
Tabla B.1 Volumen (mL) destilado para

un tiempo de 35 minutos
48 49 48 49 49 47 50 47 50
48 50 49 50 48 49 48 49
Tabla B.2 Volumen (mL) destilado para

un tiempo de 45 minutos
64 63 63 62 65 62 63 61 62
63 64 65 63 62 63 64 63
260
Evaluando la media aritmética para cada tiempo de destilación, se genera la Tabla
B.3.
Tabla B.3 Media aritmética de Volúmenes

de destilado para cada tiempo.
Tiempo (min) Media (mL)
35 48.7
45 63.1
Con los valores de la media aritmética, la rapidez de destilación para cada tiempo
es presentada en la Tabla B.4.
Tabla B.4 Rapidez de destilación

para cada tiempo
Tiempo (min) Rapidez (mL/min)
35 1.39
45 1.40
Estas rapideces de destilación son aceptables, solo si se cumplen todos los pasos
y se conserva la misma cristalería y el equipo dados en el método.
261
C. EQUIPOS DE LABORATORIO
Figura C.1 Balanza Analítica
Figura C.2 Bomba para recirculación de Refrigerante
262
Figura C.3 Regulador con reóstato variable y agitador magnético
Figura C.4 Equipo de Destilación
263
Figura C.5 Medidor de Temperatura y Humedad
Figura C.6 Contador de Centelleo Líquido
264
D. ESPECTROS DE MEDICIONES
Figura D.1 Espectro de medición de niveles de fondo
Figura D.2 Espectro de medición de Estándar
265
E. CERTIFICADOS DE MATERIALES DE REFERENCIA
E.1 Orden de recibo del Contador de Centelleo Líquido
266
E.2 Certificación del Material de Referencia de Tritio
267
E.3 Certificado de Estándares Sellados
268

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UNIVERSIDAD DE EL SALVADOR

FACULTAD DE INGENIERIA Y ARQUITECTURA

“EVALUACION DE METODOLOGIA PARA

RONAL FRANCISCO UMAÑA HERNANDEZ

PARA OPTAR AL TITULO DE:

CIUDAD UNIVERSITARIA, ABRIL DE 2008

MSC. RUFINO ANTONIO QUEZADA SÁNCHEZ

LIC. DOUGLAS VLADIMIR ALFARO CHÁVEZ

FACULTAD DE INGENIERIA Y ARQUITECTURA

ING. MARIO ROBERTO NIETO LOVO

ING. OSCAR EDUARDO MARROQUÍN HERNÁNDEZ

ESCUELA DE INGENIERIA QUIMICA

ING. FERNANDO TEODORO RAMÍREZ ZELAYA

Trabajo de Graduación previo a la opción al Grado de:

“EVALUACION DE METODOLOGIA PARA

RONAL FRANCISCO UMAÑA HERNANDEZ

Trabajo de Graduación Aprobado por :

ING. ANA CECILIA DIAZ DE FLAMENCO

San Salvador, Abril de 2008

ING. ANA CECILIA DIAZ DE FLAMENCO

LIC. JULIO ERNESTO PAYES HERNANDEZ

Al personal del Centro de Investigación y Aplicaciones Nucleares (CIAN) de la

Escuela de Ingeniería Química (EIQ), por proporcionarme a través de la Planta

Instituto de Geocronología y Geología Isotópica (INGEIS), Buenos Aires,

Lic. Víctor Manuel Segura Lemus (experto en validación de métodos químicos),

“A todos aquellos que siempre están atentos y disponibles”

“Ustedes conocerán la verdad y la verdad los hará libres”

A la Humanidad en petición a los hombres de ciencia dedicados al desarrollo de

“Miren los lirios, cómo crecen; ni se afanan ni se enredan”

Por último, te pido medites la siguiente pregunta y te ruego le des tu respuesta:

“Todos reciban el amor que habita dentro de mi”

INTRODUCCIÓN A LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS QUÍMICOS................1

1.1 DEFINICIÓN Y GENERALIDADES ............................................................................ 2

1.2 TIPOS DE VALIDACIÓN ............................................................................................ 4

1.3 ¿PORQUE ES NECESARIO VALIDAR UN MÉTODO?.............................................. 6

1.4 ¿CUANDO SE DEBEN VALIDAR LOS MÉTODOS?.................................................. 9

1.5 ¿COMO SE DEBEN VALIDAR LOS MÉTODOS? .................................................... 10

1.6 ¿QUIÉN DEBE VALIDAR LOS MÉTODOS? ............................................................ 12

1.7 CUAL ES EL GRADO DE VALIDACIÓN REQUERIDO PARA LOS MÉTODOS....... 13

1.8 REQUISITOS ANALÍTICOS PARA LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS ...................... 15

1.9 DESARROLLO DEL MÉTODO................................................................................. 19

1.10 NORMAS BASICAS PARA LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS .................................. 19

1.11 CONSIDERACIONES EN LA VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS .............. 20

CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO PARA VALIDACIÓN DE

2.2 CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO................................................................... 25

2.3 CONFIRMACIÓN DE IDENTIDAD Y SELECTIVIDAD/ESPECIFICIDAD.................. 30

2.4 LIMITE DE DETECCIÓN .......................................................................................... 34

2.5 LIMITE DE CUANTIFICACIÓN................................................................................. 38

2.6 LINEALIDAD Y RANGO ........................................................................................... 40

2.7 EXACTITUD ............................................................................................................. 43

2.8 VERACIDAD ............................................................................................................ 44

2.10 INTERCOMPARACIONES ....................................................................................... 51

2.13 FACTOR DE RECUPERACIÓN ............................................................................... 57

3.2 DEFINICIÓN DE INCERTIDUMBRE ........................................................................ 69

3.3 ERROR E INCERTIDUMBRE................................................................................... 71

3.5 FUENTES DE LA INCERTIDUMBRE ....................................................................... 76

3.6 CALCULO DE LA INCERTIDUMBRE....................................................................... 77

3.7 DETERMINACIÓN DE LA INCERTIDUMBRE .......................................................... 83