INFORME LABORATORIO # 4 BIOLOGIA.

DETERMINACION DE MEDIDAS
AL MICROSCOPIO

POR:

ARTEAGA ARNALDO

BUELVAS FIORELLA

GÓMEZ EMANUEL

MESTRA MARIS

DOCENTE:

BIOLOGA. ANA PAOLA MENDEZ PAEZ

UNIVERSIDAD DE CORDOBA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE BACTERIOLOGIA

MONTERIA 2020
 Contenido
1. OBJETIVOS..............................................................................................................................3
2. INTRODUCCION....................................................................................................................4
3. MARCO TEORICO..................................................................................................................5
3.1. EL MICROSCOPIO.........................................................................................................5
...........................................................................................................................................................6
3.2. EL MICROSCOPIO COMPUESTO...............................................................................7
3.3. ASPECTOS GENERALES DEL MICROSCOPIO COMUESTO..............................10
3.3.1. Poder de resolución...........................................................................................11
3.3.2. PROFUNDIDAD DE CAMPO..............................................................................12
3.3.3. AUMENTO DEL MICROSCOPIO.......................................................................12
3.3.4. MEDICION CON EL MICROSCOPIO................................................................13
4. METODOLOGIA.......................................................................................................................14
4.1. MATERIALES Y EQUIPO................................................................................................14
4.2. Procedimientos y análisis y resultados.................................................................14
5. CONCLUSION..........................................................................................................................17
Bibliografía...................................................................................................................................18
 1. OBJETIVOS
1.2. Adquirir habilidad en la medición aproximada del tamaño
microscópico de estructuras, microorganismos y celular
 2. INTRODUCCION
El estudio detallado de los componentes de células y tejidos animales o
vegetales, por el tamaño que poseen, requiere el uso de instrumentos
que permitan ampliar muchas veces más la imagen de las estructuras
que lo constituyen.

El instrumento que fue empleado por los primeros biólogos para estudiar
la célula y los tejidos, es el microscopio.

Si bien, el aumento total obtenido en el microscopio, indica los

diámetros en que se ha aumentado la imagen, por ejemplo 100 veces
(100x), este no informa acerca del tamaño real del objeto observado.

Para medirlos objetos microscópicos existen métodos precisos por medio

del ocular micrométrico o reglilla del ocular, que sirve como escala de
referencia, en la cual se ha calibrado el valor de una división con la
ayuda del objetivo micrométrico para los diferentes aumentos.

Por procedimientos sencillos, también es posible estimar el tamaño de

los organismos u objetos observados, al conocer el diámetro del campo
óptico.

La unidad de medición con el microscopio es la micra o micrómetro (μ)

Ilustración 1. Tabla de medidas de longitud

 3. MARCO TEORICO

3.1. EL MICROSCOPIO
El estudio detallado de los componentes de células y tejidos animales o
vegetales, por el tamaño que poseen, requiere el uso de instrumentos
que permitan ampliar muchas veces más la imagen de las estructuras
que lo constituyen.

El instrumento que fue empleado por los primeros biólogos para estudiar
la célula y los tejidos, es el microscopio. 1
El nombre deriva
etimológicamente de dos raíces griegas: mikrós, que significa pequeño
y skopéo, que significa observar[ CITATION Del \l 9226 ]. Es decir el
microscopio es un instrumento que sirve para observar objetos o
estructuras pequeñasi.

Existen dos tipos de microscopios que emplean la luz como fuente de

energía para formar imágenes aumentadas y detalladas de objetos que
a simple vista no es posible observar

a) Microscopio fotónico simple o lupa

b) Microscopio fotónico compuesto o microscopio compuesto

2
El microscopio simple o lupa es un instrumento de amplificación de
imágenes que consiste en la utilización de una o más lentes
convergentes en un solo sistema óptico. Dependiendo de la curvatura
de la superficie de las lentes las lupas pueden ampliar las imágenes de
los objetos desde 5, 8, 10, 12,20 y hasta 50 veces. Forman una imagen
de mayor tamaño, derecha y virtual[ CITATION Mon10 \l 9226 ]

1
Breve historia de la microbiología y la parasitología medica. [ CITATION Del \l 9226 ]-
2
MICROSCOPIA [ CITATION Mon10 \l 9226 ]
3
Los microscopios fotónicos compuestos que se emplean actualmente
tienen sus antecesores en los instrumentos ópticos desarrollados, entre
finales del siglo XIV y principios del siglo XV (1590-1610), por Hans
(padre) y Zacarías (hijo) Janssen; quienes mediante el tallado cuidadoso
de lentes biconvexas construyeron los primeros microscopios
compuestos.[ CITATION Del \l 9226 ]

Ilustración 2. Diagrama que muestra los

componentes del microscopio compuesto
creado por los Janssen.[ CITATION Mon10 \l 9226 ]

A partir de esa época, el microscopio es el instrumento mas utilizado en

el estudio de células y tejidos. Se fue perfeccionando, tanto en su parte
óptica como en su parte mecánica, gracias a los adelantos tecnológicos
aplicados a los componentes antes mencionados.

4
se denomina compuesto por que la imagen se forma
mediante la utilización de tres sistemas de lentes, cada
uno de ellos constituido por lentes convergentes y
divergentes.[ CITATION Mon10 \l 9226 ]

5
Los sistemas de lentes son el condensador, los objetivos y los
oculares[ CITATION PCE17 \l 9226 ].

3
Breve historia de la microbiología y la parasitología medica [ CITATION Del \l 9226 ]
4
[ CITATION Mon10 \l 9226 ]
5
Los sistemas de lentes son el condensador, los objetivos y los oculares [ CITATION PCE17 \l 9226 ]
6
En la actualidad, el microscopio fotónico es un instrumento de uso
cotidiano en los laboratorios de investigación y de diagnóstico así como
en las aulas de enseñanza de Biología, Bacteriología, Histología,
Microbiología y Patología.[ CITATION Mon10 \l 9226 ]

3.2. EL MICROSCOPIO COMPUESTO

7
El microscopio compuesto es un instrumento óptico que tiene un doble
aumento. El primer aumento lo realiza el objetivo, el cual produce una
imagen real y define la resolución del sistema. El segundo aumento lo
efectúa el ocular, que produce una imagen virtual aumentada de la
imagen real formada por el objetivo. La imagen observada es
aumentada e invertida. El microscopio compuesto esta constituido por
un sistema mecánico que lo sostiene y un sistema óptico formado por
diferentes lentes.[CITATION ano07 \l 9226 ]

Ilustración 3.
Diagrama del
microscopio
compuesto.[CITATION
ano07 \l 9226 ]

El sistema mecánico consta de las

siguientes partes (ilustración 2).

6
[ CITATION Mon10 \l 9226 ]
7
[CITATION ano07 \l 9226 ]
 1. 8La base. Tiene forma de U y sirve para darle estabilidad al
instrumento.[ CITATION ano07 \l 9226 ]
2. 9El brazo. Se fija a la base, sirve para transportarlo, y soporta
las piezas descritas a continuación.
3. 10
Tornillos para enfocar. Son dos, uno de enfoque rápido
(tornillo macrometrico) y otro para lograr nitidez de la imagen
(tornillo micrométrico). 11
Este último tiene un movimiento de
2mm entre dos topes y cuando posee una escala grabada
permite hacer mediciones de profundidad en la preparación
observada. [ CITATION ano07 \l 9226 ]
4. 12
La platina. Es una placa metálica con una perforación
central. Sobre ella se coloca la preparación que se va a
observar, que es sostenida por un par de pinzas que tiene un
sistema mecánico, denominado carro, que permite el
movimiento de derecha a izquierda y de adelante hacia atrás. A
veces se presenta dos escalas que permiten fijar la localización
de una determinada estructura.[ CITATION ano07 \l 9226 ]
5. 13
El tubo óptico. Tiene como función soportar los
oculares[ CITATION ano07 \l 9226 ]
6. 14
El revolver o porta objetivos. Es una pieza capaz de girar
que se encuentra en la parte inferior del tubo óptico. [ CITATION
ano07 \l 9226 ]
7. 15
El portacondensador. Se encuentra debajo de la platina y
sostiene el condensador. Tiene un tornillo sobre una cremallera
que permite bajar y subir el condensador hasta lograr el ajuste
lumínico.[ CITATION ano07 \l 9226 ]
8
La base[ CITATION ano07 \l 9226 ]
9
El brazo [ CITATION ano07 \l 9226 ]
10
Tornillos para enfocar[ CITATION ano07 \l 9226 ]
11
La platina[ CITATION ano07 \l 9226 ]
12
El tubo óptico[ CITATION ano07 \l 9226 ]
13
El revolver[ CITATION ano07 \l 9226 ]
14
El portacondensador[ CITATION ano07 \l 9226 ]
15
El sistema óptico consta de las siguientes partes (ilustración 2.)

8. 16
Objetivos. Son las lentes más importantes del microscopio
debido a que controlan el aumento posible y la calidad de la
imagen. Usualmente los objetivos se acoplan a los microscopios
mediante roscas estándar y pueden ser cambiados de un
microscopio a otro independientemente de su marca. Los
aumentos más ampliamente utilizados son: 4x, 10x, 40x y
100x. El aumento 100x es de inmersión. Cada objetivo tiene
grabado unas cifras que indican el aumento propio, la apertura
numérica, la longitud del tubo ocular y el grosor de los
cubreobjetos que debe utilizarse en la preparación para una
correcta observación. Por ejemplo, las siguientes cifras
grabadas: 40x/0.70; 160/0.17, indican: 40x el aumento del
objetivo; 0.70 la abertura numérica, es decir, la medida del
tamaño del cono de luz que el objetivo puede admitir; 160 la
longitud (en mm) del tubo del ocular que debe ser utilizados
con ese objetivo y 0.17 el espesor del cubreobjetos (en mm)
que debe usarse con ese objetivo.[ CITATION ano07 \l 9226 ]
9. 17
Oculares. Son los lentes situados en la parte superior del
tubo óptico, los más cercanos al ojo del observador. Dan una
segunda amplificación a la imagen previamente aumentada por
el objetivo. Su aumento se encuentra indicado en la estructura
metálica que lo contiene y oscila entre 5x y 15x. [ CITATION ano07 \l
9226 ]
10. El condensador. Esta sostenido por el portacondensador
18

y se encuentra formado por un sistema de lentes que

concentran los rayos luminosos sobre la preparación en ángulo
suficientemente grande como para llenar la apertura del

16
Objetivos[ CITATION ano07 \l 9226 ]
17
Oculares[ CITATION ano07 \l 9226 ]
18
El condensador[ CITATION ano07 \l 9226 ]
 objetivo. Su apertura numérica está grabada en el cuerpo
metálico y debe ser igual o muy aproximada a la del objetivo
que se emplea. El condensador puede ser utilizado con filtros
para la luz natural o con filtros coloreados, si así lo precisa la
observación. El uso del condensador requiere que sea colocado
en foco y centrado. Para colocarlo en foco, se enfoca la una
preparación, y mirando a través del ocular se sube o baja el
condensador hasta que se perciba cualquier detalle de la fuente
luminosa. Para el centrado se procede a quitar el ocular y mirar
a través del tubo. Si esta centrado la imagen de la apertura del
diafragma que se observa debe ser concéntrica con el borde del
objetivo. De no estar centrado el condensador, mediante los
tornillos de centrado del condensador que se encuentran en el
portacondensador, se procede a centrarlo. En algunos casos el
microscopio no tiene condensador y entonces esta provisto
solamente de un diafragma el cual permite controlar la
cantidad de luz que incide sobre la preparación. [ CITATION ano07 \l
9226 ]
11. 19
Espejo. Tiene dos caras: una plana y otra cóncava. Cuando
el microscopio tiene condensador lo correcto es usar la cara
plana del espejo, lo mismo que cuando no tiene condensador y
se trabaja con luz natural. La cara cóncava del espejo se usa
solo cuando el microscopio no tiene condensador y la
iluminación proviene de una fuente de luz artificial (lámpara).
[ CITATION ano07 \l 9226 ].

3.3. ASPECTOS GENERALES DEL MICROSCOPIO COMUESTO

Algunos aspectos generales del microscopio compuesto que deben ser
conocidos por estudiantes de áreas afines a la biología, tales como la
microbiología bacteriología, etc. Para el mejor uso del instrumento se

19
Espejo[ CITATION ano07 \l 9226 ]
refieren a: poder de resolución, profundidad de campo, aumento y
medición con el microscopio.

3.3.1. Poder de resolución

20
Resolución, o poder de resolución, se define como la capacidad límite
para diferenciar elementos próximos de un conjunto. Se le denomina
también poder separador.[ CITATION Mar15 \l 9226 ].

Por ejemplo. El poder separador normal del ojo humano es de 0.25 mm a

una distancia de 25 cm. Es decir, que si dos objetos de 0.12 mm están
juntos a 25 cm, el ojo humano no es capaz de diferenciarlos y los
percibe como un solo objeto. Con el microscopio se aumenta esta
posibilidad más de 1000 veces, ya que tiene un poder de resolución de
aproximadamente 0.25 micrómetros.
21
La posibilidad de aumentar por procedimientos ópticos la visión tiene
sus límites, ya que, si bien es teóricamente posible un aumento infinito,
desde el punto de vista físico el poder separador o poder de resolución
no puede superar la longitud de onda de la luz que
ilumina el objeto.[ CITATION Arr10 \l 9226 ].

Desde el punto de vista óptico el poder de resolución depende de la

apertura numérica del objetivo del instrumento (A.N).

Así, el poder separador se obtiene por la siguiente formula

p.s.=

Como ejemplo, suponiendo una longitud de onda de 0.5 micrómetros

(5000 Angstrom) y un objetivo de A.N.= 1, tendremos:

20
[ CITATION Mar15 \l 9226 ]
21
[ CITATION Arr10 \l 9226 ]
Cuando el haz ilumina completamente la apertura del objetivo, lo cual se
logra llenando el espacio entre el objetivo y la muestra con un medio
cuyo índice de refracción sea mayor que el del aire (generalmente aceite
de cedro con lentes de inmersión de 100x) el poder separador se duplica
y constituye un límite máximo.

Con este caso y con el mismo ejemplo anterior:

O sea, que el poder separador o de resolución es doble porque la

distancia que es capaz de diferenciar es la mitad de la anterior.

3.3.2. PROFUNDIDAD DE CAMPO

22
Es el intervalo sobre el cual puede modificarse la distancia de trabajo
del objetivo sin que se pierda la nitidez del contorno de la muestra que
se observa. Es inversamente proporcional a la apertura numérica y al
aumento. Por lo tanto, cuanto mayor la apertura del objetivo menor la
profundidad de campo, e igualmente, cuanto mayor el aumento menor
la profundidad de campo.[ CITATION ano07 \l 9226 ].

3.3.3. AUMENTO DEL MICROSCOPIO

Como regla general se debe trabajar con el menor aumento que permita
visualizar los detalles que se desean observar en la muestra. Con esto se
logra una mejor definición y mayor profundidad del campo.
23
El procedimiento lógico es comenzar con lentes, objetivos y oculares
de poco aumento y progresivamente usar objetivos de mayor aumento
hasta reconocer los detalles que no interesan. Reconocidos los detalles
se juega con el ocular para obtener la mejor definición. De no lograrse la
observación que interesa hay que tener en cuenta que pueden estar
fuera de las posibilidades del equipo o inclusive que no sea posible su
observación con luz normal. Calculando el poder de separación, y si se
conocen las dimensiones de los detalles a observar, es posible

22
Profundidad de campo[ CITATION ano07 \l 9226 ]
23
[ CITATION Mon10 \l 9226 ]
determinar si están dentro de la capacidad del instrumento. [ CITATION
Mon10 \l 9226 ].

Para calcular el aumento, a condición de que la longitud del tubo sea la

correcta, se multiplica el aumento del objetivo por el aumento del
ocular. Por ejemplo, si el objetivo es 100x, y el ocular 10x, el conjunto
proporcionara un aumento de 10 por 100=1000.

O sea, que el aumento será de 1000x

3.3.4. MEDICION CON EL MICROSCOPIO

Para medir objetos con el microscopio se requiere que este tenga como
accesorios: un micrómetro de platina, que es un portaobjetos que tiene
una escala dividida en centésimas de milímetros, y un micrómetro
ocular, que es una placa circular con una escala graduada que va inserto
en el ocular. Para realizar la medición se procede de la siguiente
manera:

1. Se coloca el micrómetro ocular y se enfoca de manera que se

observe con la máxima nitidez la escala.
2. Se coloca el micrómetro de platina y se superponen las escalas.
Como conocemos las dimensiones de la escala del micrómetro de
platina, podemos calcular el valor de cada división de la escala
ocular.

Una división del ocular es igual: al número de divisiones del micrómetro

de platina x 0.01 mm entre el número de divisiones del ocular que se
superponen

Se requiere un cálculo por separado para cada objetivo porque el

aumento es diferente.

Ilustración 4. Medición de milímetros en

papel milimetrado[ CITATION ano07 \l 9226 ]
 4. METODOLOGIA
4.1. MATERIALES Y EQUIPO
* Microscopio

*Portaobjetos y cubreobjetos

*Gotero

*Papel milimetrado

*Tijeras

*Un pedazo de lana

*Cabello

*Agua de charca.

4.2. Procedimientos y análisis y resultados.

Corte un pedazo de papel milimetrado de 1 cm cuadrado y móntelo
sobre el portaobjetos. Agregue una gota de agua y luego coloque el
cubreobjetos evitando la formación de burbujas. Coloque la preparación
sobre la platina del microscopio y observe con menor aumento, el papel
milimetrado debe quedar de tal manera que una línea pase por todo el
centro del campo visual.

Ilustración 5. Medición del diámetro del campo visual utilizando

papel milimetrado

¿Cuánto mide el diámetro del campo visual?

a. En milímetros: 10 mm
b. En micrómetros: 10000 U
c. En Angstrom: 100000000 A

Calcule en milímetros el área del campo visual del objetivo de menor

aumento para ello utilice la siguiente formula:

Con el dato anterior es posible determinar el diámetro correspondiente

al objetivo de mayor aumento. Para ello basta dividir el diámetro
encontrado del campo visual de menor aumento por la razón resultante
entre el número del objetivo de mayor aumento y el número de
objetivos de menor aumento. Por ejemplo, so el número del objetivo de
mayor aumento es 45x y el de menor aumento es 15x, la razón será
45x/15x=3. Si el diámetro del campo visual es menor aumento es de
1500 micrómetros, el diámetro del campo visual de mayor aumento será
1500 micrómetros/3=500 micrómetros.

Puesto que el diámetro del campo visual es inversamente proporcional

al poder de aumento de los objetivos, también se puede determinar
mediante la siguiente formula:

Donde d1: diámetro de menor aumento

d2: diámetro de mayor aumento.

a1: objetivo de menor aumento

a2: objetivo de mayor aumento

Calcule el diámetro y área del campo visual de cada uno de los objetivos
de su microscopio.

1. Determine el grosor de la lana con el objetivo de 40x

2. Realice un montaje de cabello con el objetivo de 40x determine su

grosor.

3. Tome una
gota de
agua de

charco, colóquela sobre un portaobjetos y cúbrala con la lámina.

Observe a menor aumento y busque entre los organismos del
 fitoplancton un alga filamentosa con el objetivo de 40x. luego pase
a mayor aumento y calcule la longitud de una célula como lo hizo
anteriormente, con el objetivo de 40x. compare los métodos. Haga
un dibujo claro del tamaño proporcional de la imagen observada
en cada estimación de los organismos microscópicos

Haga un dibujo claro de tamaño proporcional a la imagen observada en

cada estimación de los organismos microscópicos

Ilustración 6.
Cabello en 40x

Ilustración 7. Lana en 40x

5. CONCLUSION
Ilustración 8.
microorganismos en
agua de charca 40x
Según lo abarcado en el presente informe podemos llegar a la
conclusión de que: se puede estimar el radio de todo aquello que es
observado a través del microscopio mediante la fórmula:

Y por consiguiente el área de estos mediante la siguiente formula:

claro esta, que también hay otros formas de realizar mediciones

aproximadas de microorganismos al microscopio como es el observar
una muestra estando esta encima de papel milimetrado como se puede
ver en el siguiente ejemplo, en el cual se realiza una medición del
diámetro del campo visual de un microscopio:

Ilustración 9. Medición del diámetro del campo visual utilizando

papel milimetrado
 Bibliografía
(s.f.).

Arraiza, N., Viguria, p., Navarro, J., & Ainciburu, A. (2010). Manual de
microscopio. historia- descripcion y uso del microscopio optico.

Delgado Garcia, G., & Delgado Rodriguez, G. (s.f.). Breve historia de la

microbiologia y la parasitologia médica.

Escobar, L. M., & Gomez, R. (2016). Determinacion de medidas al

microscopio. Monteria.

Heywood, V. (2007). El microscopio.

Martinez Castro, C. J. (2015). Descubriendo el microscopio. Ciudad de

mexico.

Montalvo Arenas, C. E. (2010). Microscopio.

PCE Iberíca. S.L. (2017). Tipos de microscopio. Tobarra.

Ilustración 1. Tabla de medidas de longitud.............................................5

Ilustración 2. Diagrama que muestra los componentes del microscopio
compuesto creado por los Janssen. (Montalvo Arenas, 2010)..................7
Ilustración 3. Diagrama del microscopio compuesto. (Heywood, 2007)...8
Ilustración 4. Medición de milímetros en papel milimetrado (Heywood,
2007)......................................................................................................14
Ilustración 5. Medición del diámetro del campo visual utilizando papel
milimetrado.............................................................................................15
Ilustración 6. Cabello en 40x...................................................................17
Ilustración 7. microorganismos en agua de charca 40x..........................17
Ilustración 8. Lana en 40x.......................................................................17
Ilustración 9. medicion del diametro del campo visual utilizando papel
milimetrado.............................................................................................18
i