Practica N°1

Microscopio Compuesto

Alumnos:
Vanessa Morales Ali
Carolina Neyra Ribera
Alicia Reyes Soto
Gisel Rubín Espinoza
Sergio Aldair Toscano Sáccsadra

Profesor:
Advíncula Zeballos, Orlando
2020-01
INDICE
1. INTRODUCCIÓN...............................................................................................2

2 OBJETIVOS........................................................................................................3

3. MARCO TEORICO............................................................................................4

4. MATERIALES....................................................................................................6

5. PROCEDIMIENTOS...........................................................................................7

6. RESULTADOS....................................................................................................7

7. DISCUSIONES....................................................................................................8

8. CONCLUSIONES...............................................................................................8

9. CUESTIONARIO...............................................................................................8

10. REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS..................................................................17

DIAGRAMA DE MANEJO DEL USO DEL MICROSCOPICO......................................0

 1. INTRODUCCIÓN

“El microscopio es un instrumento que permite observar objetos demasiado pequeños para
ser percibidos a simple vista” (RAE, 2014).
La idea del microscopio fue concebida por Zaccharias Janssen en 1590. Robert Hooke
analizó un trozo de corcho y encontró un conjunto de cámaras diminutas que denominó
célula; más adelante, Hooke y Antonie van Leeuwenhoek pudieron observar células vivas.
Fue hasta el siglo XIX en que el microscopio se empezó a utilizar para la observación de
células (Alberts, et al; 2011)
Cada parte del microscopio tiene un uso específico y al usarse con la técnica correcta en
conjunto, se puede obtener una imagen clara de la muestra. La claridad de la muestra
depende de la luz, los objetivos y el enfoque. Por ejemplo, la fuente de luz es modificable
dependiendo la cantidad que se necesite para la muestra a observar, el condensador se
puede subir o bajar d del objetivo y el diafragma se puede abrir o cerrar para manipular la
cantidad de iluminación que atraviese hacia la preparación.
Para que sea posible observar en microscopio el objeto a analizar, es necesario escoger
apropiadamente el tipo de preparación dependiendo de la duración deseada de la muestra.
Existen tres tipos de preparaciones: fresca, temporal y permanente, de las cuales se escogió
la primera debido a que el tiempo de investigación a las muestras iba a ser corto.
2 OBJETIVOS

1. Conocer las normas de seguridad en el laboratorio.

2. Identificar los peligros y la forma de evitarlos.

3. Identificar las partes del microscopio.

3. MARCO TEORICO

Según Auxilab (2012), la terminación microscopio nace de dos palabras mikrós, pequeño  y
skoopéo, examinar. El creador más destacado fue el anatomista Anton Van Leeuwenhoer
por contribuir con el descubrimiento de la  composición de la sangre, en 1676 reveló las
bacterias. Sin embargo, los aparatos simples tenían resultados aberrados y difracciones. Por
ello, en 1766 se aplicó el método Doblete, aportado por Wollastone, donde se implementó
un ocular astronómico.

En el siglo 18, se da hincapié a la mecánica, complementando a lo ocular. Es así  como El

investigador Cuff Baker, en 1744, pensando en la rapidez, confeccionó una columna 
micrométrica y un espejo firme para evitar la dispersión de luz.

El microscopio compuesto lo  descubrió Sacarías Janssen, pero destaca el aportante

Dolland  por su preocupación apocromático, añadiendo lentes superpuestos, tanto
convergente y divergente. Ahora se aprecia el avance del microscopio compuesto en la
tecnología láser.

En los años que siguieron a la primera guerra mundial se logró alcanzar el límite de
aumento teórico para los microscopios ópticos (entre  500X y 1000X). Fue el deseo de los
científicos por ver las estructuras más pequeñas dentro de las células que llevó a la
invención por parte de Max Knoll y Ernst Ruska del microscopio electrónico de
transmisión. Este tipo de microscopio usa un haz de electrones en lugar de luz y la imagen
se ve reflejada en una superficie fluorescente que forma la imagen.

Definición:

El microscopio es un mecanismo útil que permite amplificar una imagen y otorga así  la
indagación de mejores y mayores detalles a una muestra específica. El microscopio tiene
una composición del sistema óptico y del sistema mecánico.

   Sistema Óptico:

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 Este sistema está formado por lentes los cuales están diseñados para poder
aumentar la imagen que deseamos estudiar, observar y analizar.  El sistema
óptico posee herramientas particulares como:

 Ocular : Es una herramienta básica y esencial para el sistema óptico, su

función es aumentar la imagen para poder observar la muestra.
 Objetivo: En esta herramienta se produce la mayor parte del aumento de la
muestra.
 Condensador:  Esta herramienta nos permite adecuar la intensidad y el
ángulo de la luz 
 Diafragma: Una pieza importante el cual regula la intensidad de la luz que
influye sobre la  muestra.
 Foco: Esta herramienta dirige los rayos luminoso hacia el condensador.

 Sistema Mecánico:

         Permite sujetar los lentes y el sistema de iluminación. Las partes del
sistema                    mecánico está compuesto principalmente  por un soporte,
platina, cabezal, revólver y            tornillos de enfoque.

 Soporte: Mantiene la parte óptica

 Platina: Pieza donde se coloca la muestra.
 Cabezal: Posee los sistemas de lentes oculares los que pueden ser monocular
y binocular.
 Revolver: Permite cambiar y girar los objetivos.
 Tornillos de enfoque: Macrométrico el cual aproxima el enfoque y
micrométrico que básicamente consigue el enfoque correcto.

Según la  asociación de Fitopatología Americana (2020), existe parámetros previos a

observación   de especímenes, el microscopio binocular contiene dos oculares, estos
elementos se separan de acuerdo a la distancia  interpupilar, observando una sola imagen,
ya sea regularizando los oculares. 

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Importancia del microscopio:

La importancia la encontramos desde que con el uso de esta herramienta se ha podido

avanzar en la biología, química  y medicina el cual impulsó a una revolución científica.
principal Básicamente la principal importancia del microscopio es poder resolver
problemas para el estudio de distintos agentes infecciosos como lo son virus, bacterias y
protozoarios, pero también han ayudado al descubrimiento de enfermedades que por una
parte serían imposible de detectar si no fuera por la ayuda del microscopio y por otra parte
las curas de dichas enfermedades.

4. MATERIALES
Pipetas de 10 ml
 10 láminas y laminillas/alumno
 Alcohol isopropìlico
 Recipiente con algodón
 Picetas con agua destilada
 1 estuche de disección/alumno
 1 cajita de laminillas
 Aceite de inmersión
 8 papeles lente
 1 cajita de láminas
 1 Papel milimetrado por mesa
 1 trozo de lana azul o negra por mesa
 Guardapolvo blanco ( estudiante)

 EQUIPOS
Microscopios compuestos
Estereoscopio

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5. PROCEDIMIENTOS
Los procedimientos del uso del microscopio esta en la ultima hoja del informe, debido que
se realizó un diagrama.

6. RESULTADOS
Por motivos del estado de emergencia y la inmovilización social obligatoria, no es posible
tener un evidencia sobre que hemos usado muestra en laboratorio, por ende a continuación
presentaremos un ejemplo.
Tomar un recorte de papel periódico una letra de tamaño pequeña en blanco y negro, luego
ubicar la muestra recortada en la laminilla para poder dirigir los lentes objetivos
directamente a la imagen de la letra.
Al pasar las dos letras recortadas de papel periódico, se pudo observar que la imagen
obtenida de la letra era totalmente inversa a la imagen original.
Tomamos dos letras "F" y "J" las cuales pasamos a observación a través de cada uno de los
lentes objetivos "4x" "10x" "40x" y "100x".

Al lente de “4x” Al lente de “10”

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7. DISCUSIONES
Al parecer el microscopio nos permite observar cosas que a simple vista no sè observan, lo
cual nos facilita para estudio de microorganismo, y así observar sus criterios taxonómicos,
su color, su forma, sus funciones, lo cual nos va a permitir avanzar en los estudios de
investigación. Quizá sea muy importante esta primera práctica debido a que el microscopio
lo utilizaremos en los siguientes laboratorios y ya tenemos una base teórica de cómo
realizar los enfoques (Aumento Ocular), como movemos el portaobjetos, etc. Dado que ser
un instrumento muy importante en cualquier laboratorio.

8. CONCLUSIONES
Esta práctica teoría nos ayudó para la familiarización y el mejor conocimiento de las partes
y el debido manejo del microscopio, y de los utensilios que se usan en el laboratorio.
Respecto al uso correcto de este instrumento, nos brinda una imagen más clara de lo que
estamos buscando, así como el buen cuidado que alarga la vida y nos brinda todo tipo de
ventajas en la investigación.

9. CUESTIONARIO
1. ¿Qué tipos de microscopios existen? Definir c/u de ellos.

Microscopios según el sistema de iluminación

1) Microscopio óptico

En el microscopio óptico la muestra es iluminada mediante luz visible. Esto significa que
existe un foco de luz apuntando hacia la muestra. Esa misma luz es conducida a través del
objetivo y del ocular hasta llegar a formar la imagen en el ojo del observador. Este es el

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tipo de microscopio más habitual pero su resolución está limitada por la difracción de la
luz. El aumento máximo que se puede obtener con este tipo de microscopio alcanza
alrededor de 1500x.

2) Microscopio electrónico

En el microscopio electrónico la muestra no es iluminada con luz sino que se utilizan

electrones. Los electrones impactan contra la muestra dentro de una cámara de vacío.
Existen diferentes tipos de microscopio electrónico pero su principio de funcionamiento se
basa siempre en capturar los electrones dispersados u omitidos por la muestra y así poder
reconstruir una imagen.

La ventaja principal de este tipo de microscopio es que puede obtenerse un nivel de

aumento muy superior al del resto de microscopios. Sin embargo, es necesario preparar la
muestra y colocarla en una cámara de vacío de modo que no es posible observar muestras
biológicas vivas. Los dos tipos de microscopio electrónicos principales son el microscopio
electrónico de barrido y el microscopio electrónico de transmisión.

3) Microscopio de luz ultravioleta

Los microscopios de luz ultravioleta iluminan la muestra, como el nombre indica, con luz
ultravioleta. Este tipo de luz tiene una longitud de onda más corta que la luz visible
utilizada en los microscopios ópticos. La ventaja principal de utilizar esta técnica es que
puede alcanzarse una resolución mejor que con luz visible. Además, el contraste obtenido
en la muestra es distinto que en los microscopios ópticos. De este modo, con el microscopio
de luz ultravioleta pueden observar muestras que aparecen transparentes si son observadas
con luz visible.

4) Microscopio de luz polarizada

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También conocido como microscopio petrográfico. Este microscopio es en realidad un tipo
de microscopio óptico al que se la han añadido dos polarizadores. Esto significa que la onda
de luz utilizada para observar la muestra tiene una dirección de oscilación concreta. Este
tipo de microscopio es muy útil para observar estructuras cristalinas de rocas y minerales.

5) Microscopio de fluorescencia

Los microscopios de fluorescencia son aquellos que utilizan las propiedades de

fluorescencia para generar una imagen de la muestra. Este microscopio permite observar
sustancias que emiten luz propia cuando son iluminadas con una longitud de onda
determinada. Para ello la muestra es habitualmente iluminada con una lámpara xenón o con
una lámpara de vapor de mercurio. Estos microscopios incorporan además filtros de luz
para aislar la luz correspondiente a la muestra.

Microscopios según el número de lentes

1) Microscopio simple

Este tipo de microscopio dispone de una única lente y es más habitualmente conocido como
lupa. Aún así, con un microscopio simple pueden conseguirse grandes aumentos. Hay que
destacar que durante el siglo XVII, Antonie van Leeuwenhoek utilizó este tipo de
microscopios para conseguir el mayor aumento alcanzado hasta el momento. A día de hoy,
uno de los conceptos basados en la misma idea es el Foldscope.

2) Microscopio compuesto

Este tipo de microscopio es aquél que dispone de por lo menos dos lentes. Este es el caso
más habitual en todos los microscopios modernos. Normalmente los microscopios disponen
de distintas lentes tanto en el objetivo como en el ocular para corregir las aberraciones
ópticas y alcanzar una imagen con buena calidad. La invención del microscopio está

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asociada con la invención del microscopio compuesto. Este apareció en los Países Bajos a
finales del siglo XVI.

Microscopios según la transmisión de la luz

1) Microscopio de luz transmitida

En este tipo de microscopio la luz atraviesa la muestra. Para esta clase de microscopios es
necesario preparar la muestra cortándola en láminas muy finas. La muestra se ilumina
desde debajo la platina. La preparación de la muestra hace que esta sea semitransparente y
parte de la luz pueda atravesarla y llegar al objetivo para ser observada posteriormente a
través del ocular. En general este es el sistema de iluminación más utilizado entre los
microscopios ópticos.

2) Microscopio de luz reflejada

En este caso la luz ilumina la muestra y parte de esta es reflejada y dirigida al objetivo. De
este modo es necesario iluminar la muestra desde la parte superior de la platina. Este tipo
de microscopía es utilizada para examinar materiales opacos como pueden ser estructuras
metálicas, materiales cerámicos, etc. Existen microscopios ópticos que permiten los dos
tipos de iluminación de modo que es posible observar tanto muestras semitransparentes
como opacas. Los microscopios estereoscópicos (permiten observar la muestra en tres
dimensiones) son siempre de luz reflejada.

Microscopios según el número de oculares

1) Microscopio monocular

Este tipo de microscopio dispone de un solo ocular a través del cual se puede observar la
muestra. Es el tipo más sencillo y es ideal para aficionados a la microscopía o para alguien
que se introduce en este campo. Su desventaja principal es que puede resultar un poco

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incómodo si tiene que utilizarse durante largos periodos de tiempo. Por este motivo los
microscopios monoculares no son en general utilizados en ámbitos profesionales.

2) Microscopio binocular

Los microscopios binoculares disponen, como indica su nombre, de dos oculares. Esto
permite observar la muestra simultáneamente con los dos ojos resultando en una mayor
comodidad para el usuario. Este es el tipo de microscopio más utilizado en los laboratorios
de investigación. La distancia entre los dos oculares puede regularse para adaptarse a las
necesidades del usuario. No hay que confundir el microscopio binocular con el microscopio
estereoscópico. El microscopio estereoscópico siempre es binocular. Sin embargo, no todo
microscopio binocular es estereoscópico.

3) Microscopio trinocular

El microscopio trinocular está equipado con dos oculares para observar la muestra además
de un tercer ocular para conectar una cámara. En el caso de conectar una cámara digital esta
puede conectarse a un ordenador para ver la imágenes de la muestra en tiempo real. Con
este microscopio es posible observar la muestra y al mismo tiempo tomar fotografías o
videos con la cámara.

Microscopio estereoscópico

El microscopio estereoscópico es un tipo de microscopio que permite observar la muestra

de forma tridimensional. Estos microscopios están equipados siempre con dos oculares. La
imagen de la muestra que llega a cada ocular es ligeramente distinta de modo que cuando se
combinan se consigue el efecto 3D. Este efecto no podría conseguirse si la muestra se
observara con un solo ocular.

El aumento que se consigue con el microscopio estereoscópico es inferior al que se

consigue con un microscopio óptico convencional. Sin embargo, los microscopios

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convencionales solo permiten una observación bidimensional de la muestra. Los
microscopios estereoscópicos son muy utilizados en aplicaciones donde debe manipularse
la muestra mientras se observa. Por ejemplo, para el montaje de circuitos o relojes.

1) Microscopio confocal

Este es un tipo de microscopio de fluorescencia. En lugar de iluminar la muestra de forma

global se ilumina punto a punto de forma sucesiva y se reconstruye la imagen al final del
proceso. Este proceso de escaneado de la muestra es similar al que se produce en los
microscopios electrónicos de barrido. Este tipo de microscopio fue inventado por Marvin
Minsky en 1957.

2) Microscopio de campo oscuro

Esta técnica de microscopía consiste en iluminar la muestra oblicuamente. De este modo

los rayos de luz que llegan al objetivo no provienen directamente del foco de luz sino que
han sido dispersados primero por la muestra. Esta técnica permite ver muestras que de otro
modo no serían visibles debido a su transparencia. También tiene la ventaja que no requiere
teñir la muestra para aumentar su contraste y poder observarla.

3) Microscopio de contraste de fases

La luz viaja a distintas velocidades dependiendo del medio de propagación. Esta propiedad
es utilizada en el microscopio de contraste de fases ya que la luz atraviesa la muestra con
distintas velocidades en distintas secciones. Este efecto es amplificado para generar la
imagen de la muestra. Mediante esta técnica no hace falta utilizar tintes y, por lo tanto,
pueden observarse células vivas. El microscopio de contraste de fases fue inventado por
Frits Zernike en 1932 y recibió por ello el premio Nobel de física en 1953.

2. ¿Cuáles son las funciones del diafragma, revólver, condensador, macro y micrométrico?

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Tornillo macrométrico:

Este tornillo permite ajustar la posición vertical de la muestra respecto el objetivo de forma
rápida. Se utiliza para obtener un primer enfoque que es ajustado posteriormente mediante
el tornillo micrométrico

Tornillo micrométrico:

El tornillo micrométrico se utiliza para conseguir un enfoque más preciso de la muestra.

Mediante este tornillo se ajusta de forma lenta y con gran precisión el desplazamiento
vertical de la platina.

Revólver:

El revólver es una pieza giratoria donde se montan los objetivos. Cada objetivo tiene
proporciona un aumento distinto, el revólver permite seleccionar el más adecuado a cada
aplicación. Habitualmente el revólver permite escoger entre tres o cuatro objetivos
distintos.

Condensador:

El condensador es el elemento encargado de concentrar los rayos de luz provenientes del

foco a la muestra. En general, los rayos de luz provenientes del foco son divergentes. El
condensador consiste en un seguido de lentes que cambian la dirección de estos rayos de
modo que pasen a ser paralelos o incluso convergentes.

Diafragma:

El diafragma es una pieza que permite regular la cantidad de luz incidente a la muestra.
Normalmente se encuentra situado justo debajo la platina. Regulando la luz incidente es

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posible variar el contraste con el que se observa la muestra. El punto óptimo del diafragma
depende del tipo de muestra observada y de su transparencia.

3. ¿Cuál es la apertura numérica de los lentes objetivos de 4X, 10X, 40X, 100X?

4x - - - - - > 0.10
10x - - - - - > 0.25
20x - - - - - > 0.40
40X - - - - - > 0.65
100x - - - - - > 1.25

4. ¿Qué es el grado de aumento y límite de resolución?

Límite de resolución:

Es la distancia mínima a la que se pueden ver dos objetos separados. Viene definido por
una fórmula en la que las principales variables son la longitud de onda de la luz y la
apertura numérica del objetivo, pero en la práctica, y asumiendo la máxima calidad de las
lentes, es aproximadamente la mitad de la longitud de onda de la luz con la que se observa.
En microscopía de campo claro es 0,2 micras, el microscopio óptico de efecto túnel
cuántico permite superar esta barrera y aumentar la resolución por debajo de 0,1 micras.

Grado de aumento:

El grado de aumento de una lente está determinado por el grado de curvatura de su

superficie y la distancia focal. En las lentes convexas mientras mayor sea la curvatura,
menor será la distancia focal y mayor será el aumento. Se ha enunciado anteriormente que
el microscopio compuesto aumenta en dos etapas y puesto que una sola lente no es
suficiente se deben colocar varias lentes una detrás de la otra, potenciando de esta manera
el poder de aumento. El primer juego de lentes, cercano al objeto en estudio, se denomina
objetivo y el segundo juego, cercano al ojo del observador se denomina ocular (11). Cada

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sistema de lentes es capaz de producir una imagen aumentada cuyo valor se enuncia con la
letra x, así que 10x significa que la imagen está aumentada 10 veces.

5. Coloca en un cuadro el aumento del ocular, el aumento de los 3 objetivos (10X, 40X y
100X)
con sus respectivas aperturas numéricas (A.N), los grados de aumento, los límites de
resolución en A° y en, así como el diámetro del campo óptico en mm para los 3 objetivos.
Considera la longitud de onda () de la luz igual a 5500A° (1A° = 10 = 10 µ, 1µm = 10
m).

Grado de Límite de Límite de Campo 

Aumento Apertura  Aumento Resolución (A°) Resolución Óptico
Ocular Numérica ( µ) (C.O)
(A.O) (A.N)
(por 10) LR = 1A° = 10 = 10 µ,
-10 -4
  µm a
(0.61*λ)/A.N 1µm = 10 m).
-6 mm 
λ = 5500A° (por 10 mm)
-3

10 x 0.25 100 x 13,420 A° 1.342µm 0.001342 mm

40 x 0.65 400 x 5,161.538 A° 0.5161538 µm 0.0005161538

mm

100 x 1.25 1000 x 2,684 A° 0.2684 µm 0.0002684 mm

6. ¿Para qué se utiliza el aceite de inmersión con el objetivo de 100X?

El aceite de inmersión es un líquido viscoso y transparente que tiene un alto índice

refractivo. Por este motivo es muy utilizado en las observaciones microscópicas, ya que
brinda la propiedad de concentrar la luz cuando esta pasa a través del objetivo de 100X del
microscopio, aumentando su poder de resolución.

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10. REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS

A. Klug 1978-1979. "Análisis de imágenes y la reconstrucción en la microscopia

electrónica de macromoléculas biológicas". "Chemical Scripta" N°14

Alberts B, Bray D, Hoplomg K, Jonhson A, Lewis J, Raff M, et al. Introduccion a la Biologia

Celular. 3era edicion. Editorial Medica Panamericana 2012.

Arraiza, N.Virugia,P. Navarro,J, y Ainciburu,A(2019). Manual de

microscopia.Auxilab,S.L. Recuperado de
http://pagina.jccm.es/museociencias/otras%20actividades%20web/material%20cnr
%20web/manual%20de%20microscopia.pdf

Real Academia Española, Microscopio. En Diccionario de la lengua española. 23a edicion. 2014
[consultado 2020 marzo 29]. Disponible en:  http: // dle.rae.es/srv/fetch?id?=PCkixnO

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 Uso del Microscopio DIAGRAMA DE MANEJO DEL USO DEL MICROSCOPICO

Tomarlo con las 2 manos, Para evitar rayas en los

Tomar el microscopio y Encontrar la magnificación lentes, es sugerido utilizar
1 mano en el brazo del
llevarlo a la mesa Limpiar los 2 tipos de lentes VE EL MICROSCOPIO
microscopio y la otra mano para cada lente papel para lentes para
en la base limpiarlo

 Girar el revolver hasta CONECTAR EL CABLE Para no tener fatiga Colocar una muestra
Cuando mueves un
objetivo, es necesario ver el escuchar el click que indica AL ENCHUFE visual, necesitas preparada sobre la abertura
microscopio del lado para que el objetivo de baja
potencia está en su ELÉCTRICO mantener ambos ojos de la platina
no dañar la lente.
posición abiertos

4x
Comenzar Ia Al observar nítida la

ENFOQUE observación TORNILLO muestra, girar el

MICROMÉTRICO micrométrico hasta
obtener un enfoque
10x fino.

Colocar una gota

EMPLEO DEL Subir la platina
mínima de aceite de
OBJETIVO DE lentamente hasta
6. inmersión sobre el
INMERSIÓN: 6. que la lente toca la
círculo de luz.
gota de aceite

ILUMINACION SEGÚN Enfocar a Cerrar el diafragma de campo

KÖHLER Centrar si es
10x y enfocar su imagen sobre la
necesario
imagen de la preparación