REACCIÓN ANTÍGENO-ANTICUERPO

DETERMINACION DEL GRUPO SANGUÍNEO Y FACTOR Rh

PAULA ANDREA DORIA

ANA CAROLINA GARCIA CASTRO
DORIA LUCIA MORELO

V SEMESTRE

GLORIA VERGARA PAZOS

UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
TECNOLOGÍA DE REGENCIA EN FARMACIA

MONTERÍA – CÓRDOBA
2020
 REACCIÓN ANTÍGENO-ANTICUERPO
La reacción antígeno-anticuerpo (Ag-Ac) es una de las piedras angulares en la
respuesta inmunitaria del cuerpo humano. El concepto se refiere a la unión
específica de un anticuerpo con un antígeno para inhibir o demorar su toxicidad.
El acoplamiento estructural entre las macromoléculas se realiza gracias a varias
fuerzas débiles que disminuyen con la distancia, como los puentes de hidrógeno,
las fuerzas de Van Der Waals, las interacciones electrostáticas y las hidrofóbicas.
El reconocimiento Ag-Ac es una reacción de complementariedad, por lo que se
efectúa a través de múltiples enlaces no covalentes entre una parte del antígeno y
los aminoácidos del sitio de unión del anticuerpo. La reacción se caracteriza por su
especificidad, rapidez, espontaneidad y reversibilidad.

CARACTERÍSTICAS
Especificidad
Capacidad del anticuerpo de unirse al antígeno que lo estimuló a través del
epítopo o determinante antigénico mediante uniones intermoleculares débiles. La
unión dada por la especificidad es muy precisa y permite distinguir entre grupos
químicos con diferencias mínimas a pesar de su similitud; además, permite la
detención de un sólo antígeno en cuestión. Por ejemplo permite distinguir entre
albúmina de un organismo a otro a pesar de que la variabilidad en los parátopos
sea mínima.
Rapidez
La velocidad con que ocurre la primera etapa de la reacción Ag-Ac es del orden de
milésimas de segundo, y está limitada únicamente por la difusión. La segunda
etapa, que es más larga, incluye todas las manifestaciones que se presentan
como consecuencia de la interacción, tales como precipitación, aglutinación,
neutralización, etc. esto es muy importante
Espontaneidad
La reacción Ag-Ac no requiere energía adicional para efectuarse.
Reversibilidad
Dado que la reacción se debe a fuerzas no covalentes, es reversible y, en
consecuencia, se ve afectada por factores como la temperatura, la proporción de
Ag-Ac, el pH y la fuerza iónica.
ANTICUERPOS
Un anticuerpo se define como una inmunoglobulina (Ig) capaz de una
combinación especifica con el antígeno que ha causado su producción en un
animal susceptible.
Ellos son producidos en respuesta a la invasión de moléculas foráneas en el
cuerpo. Los anticuerpos existen como una o más unidades en forma de Y,
compuesta por cuatro cadenas polipeptídicas. Cada Y contiene dos copias
idénticas de una cadena pesada (HC, heavy chain), y dos copias idénticas entre sí
de una cadena ligera (LC, light chain), llamadas así por sus pesos moleculares
relativos que son de aproximadamente 50kDa la cadena pesada y de cerca de
25kDa la cadena ligera.
Estas cadenas se mantienen unidas mediante enlaces disulfuros intercatenarios.
Estas cadenas pueden separarse por reducción de los enlaces S-S y acidificación.

Reacción de aglutinación
La aglutinación es un agregado de células o partículas debido a una formación
entrelazada. El fundamento de la aglutinación es una reacción inmunoquímica que
produce la agregación de partículas o células recubiertas de antígeno o
anticuerpo.
La reacción de la aglutinación se divide en dos fases, la primera en la que se
produce el contacto antígeno-anticuerpo sobre la superficie de la partícula (o
célula) empleada, y la segunda en la que las partículas se agregan y se puede
visualizar la aglutinación.
Determinación del grupo sanguíneo
Es un método para decirle cuál es el tipo específico de sangre que usted tiene. El
tipo de sangre que usted tenga depende de si hay o no ciertas proteínas, llamadas
antígenos, en sus glóbulos rojos.
La sangre a menudo se clasifica de acuerdo con el sistema de tipificación ABO.
Este método separa los tipos de sangre en cuatro tipos:

 Tipo A
 Tipo B
 Tipo AB
 Tipo O
OBJETIVOS:
 Analizar la importancia del grupo sanguíneo y el factor Rh
 Diferenciar e identificar cada uno de los antígenos
 Reconocer las reacciones de aglutinación
MATERIALES Y REACTIVOS:
 Solución anti-A
 Solución anti-B
 Solución anti-D (anti Rh)
 Sangre anti coagulada con EDTA
 Placa de vidrio
 Gradillas
 Papel kraf
 Bata
 Guantes
 Toallas de papel absorbente
 PROCEDIMIENTO

Clasificación directa o globular

Transferir una pequeña cantidad de sangre anti coagulada con EDTA a la paca de
vidrio en los espacios marcados como A, B, D.

Añadir los reactivos Anti A, B Y D a cada gota de sangre.

Mezclar con un palillo cada preparación

Observar en la reacción la presencia o ausencia de aglutinación contra un fondo

blanco bien iluminado.
ANÁLISIS DE RESULTADO
PRE-LABORATORIO
¿6.1 Cuáles son los antígenos del sistema ABO y del sistema Rh y en qué
lugar se encuentran?
SISTEMA ABO El sistema ABO fue el primer grupo sanguíneo descubierto.
Landsteiner en 1900 descubrió que los glóbulos rojos pueden clasificarse en A, B
y O, de acuerdo a la presencia o ausencia de antígenos reactivos en la superficie
de los glóbulos rojos. Dichos antígenos son de mucha importancia en transfusión
sanguínea, trasplante de tejidos y enfermedad hemolítica del recién nacido.
Compatibilidad de grupo ABO es esencial en toda prueba serológica pre-
transfusional. Naturaleza de los antígenos A y B. Los antígenos A y B son
glicoproteínas, producidas por genes alélicos en un locus único, localizados en la
parte proximal del brazo corte del cromosoma 9. Los antígenos correspondientes
se encuentran aparentemente adheridos a la membrana de los glóbulos rojos. La
especificidad antigénica es conferida por el azúcar, terminal; Ej. Azúcar
Naceteilgalactosamina proporciona la especificidad antigénica A y el azúcar
galactosa determina la actividad B. Los antígenos ABO están presentes en todos
los tejidos excepto el sistema nervioso central, de donde se deduce la importancia
de dicho sistema en transfusión de eritrocitos, leucocitos, plaquetas y trasplantes
de tejidos, también se encuentran presentes en las secreciones, como
polisacáridos solubles. El polisacárido presente en las secreciones es
químicamente idéntico al presente en los glóbulos rojos. ANTÍGENO Y
ANTICUERPOS En el sistema ABO, característicamente el plasma contiene
anticuerpos que reaccionan contra el antígeno ausente en sus glóbulos rojos.
Estos anticuerpos completos han sido llamados de "ocurrencia natural" pues se
creía que no eran de origen inmune. Sin embargo, se vio que bacterias, alimentos,
etc. pueden poseer un componente polisacárido similar al de los antígenos A, B,
H. El recién nacido no posee anticuerpos ABO bien desarrollados
inmunológicamente y los que se detectan son los transferidos pasivamente por la
madre. A medida que el niño crece y se expone a dichos antígenos del medio
ambiente, desarrolla anticuerpos contra los antígenos que no poseen los que
están bien formados inmunológicamente a los 6 meses de edad. Por lo tanto,
dichos anticuerpos probablemente son resultado de inmunización a polisacáridos
en diversos agentes del medio ambiente. Anti A y Anti B son anticuerpos de tipo
IgM aunque a menudo también son IgG. Antígenos ABO (sistema histo-
sanguíneo) ABO El grupo de antígenos ABO es de importancia médica. Son los
más inmunogenos de todos los antígenos sanguíneos Una incompatibilidad del
grupo sanguíneo es la causa de muerte más común en una transfusión Antígenos
del grupo ABO 4 antígenos, A, B, AB, A1 La determinación del antígeno, está
dada por una secuencia de oligosacáridos. Sus moléculas acarreadoras son
glicoproteínas y glucolipidos expresados en la superficie del glóbulo rojo
Codificado por el Locus ABO, con tres formas alélicas A, B, O Frecuencia de las
Ag en sangre- A: 43% Caucásicos, 27% Negros, 28% Asiáticos B: 9% Caucásicos,
20% Negros, 27% asiáticos A1: 34% Caucásicos, 19% Negros, 27% asiáticos
Fenotípicamente el más común es el O a nivel mundial. Grupo Sanguíneo
Antígenos Presentes en las Células Anticuerpos Presentes en Suero Genotipos A
Antígeno A Anti-B AA/AO B Antígeno B Anti-A BB/BO AB Antígeno A y Antígeno B
No AB O No Anti-A y Anti-B OO Los anticuerpos anti-A y anti-B de las personas
con grupos sanguíneos A y B son predominantemente del tipo IgM. Las personas
con grupo sanguíneo O son de tipo IgG predominantemente. Tanto los anticuerpos
anti-A y anti-B tipo IgM como los tipos IgG aglutinan los eritrocitos principalmente a
temperatura ambiente (20°C a 24°C) o por debajo de ésta, y activan
eficientemente el complemento a 37°C. Anticuerpos contra ABO.

SISTEMA Rh - Hr El antígeno Rho (d) fue caracterizado en 1939 por Levine y

Stetson, quienes encontraron el anticuerpo en el suero de una madre cuyo niño
tubo Enfermedad hemolítica del recién nacido. Recibió su nombre en 1940 cuando
Landsteiner y Weiner inmunizaron conejos con eritrocitos del mono Rhesus y
dicho antisuero aglutinaba los eritrocitos del 85o/o de la población (Rho positivo).
Sin embargo, hace algunos años se observó que en realidad Landsteiner y Weiner
no habían descubierto el anticuerpo Rh sino otro anticuerpo que fue denominado
LW. Posteriormente se observó que los pacientes Rh negativo desarrollaban Anti
Rh solamente al ser inmunizados (Transfusión, embarazo, etc.) GENÉTICA:
Existen dos teorías sobre el origen genético de los antígenos del sistema Rh. La
teoría de Fisher y Race propone la existencia de 3 genes, aunque muy cerca el
uno del otro y localizados en el mismo cromosoma, son independientes entre sí,
se llamaron D, C, E. Los alelos correspondientes se designan c y e. Todos los
antígenos fueron descubiertos a través del anticuerpo. Anti-d no ha sido
descubierto aún pues todavía no se ha descubierto el alelo de D, por cuanto d se
usa para denominar ausencia de D. La teoría de Weiner propone que un solo gen
(Rl) que da origen a un solo antígeno (Rhl) y este da origen a 3 factores Rho (D),
rh'(C) rh" (E). Existen 35 a 40 o más antígenos en el sistema Rh, pero solo 5 son
los que se utilizan con más frecuencia y el uso rutinario es el antígeno Rho (D): Al
igual que el sistema ABO, el sistema Rh-Hr tiene un puesto prominente en la
práctica de la transfusión sanguínea y en relación con la enfermedad hemolítica
del Recién Nacido es el más importante. A diferencia del sistema ABO, en el
sistema Rh-Hr no existen aglutininas (o anticuerpos) naturales y cuando se
presentan son el resultado de una inmunización previa. El antígeno Rho (D),
después de los antígenos ABO, es el más importante en la práctica de transfusión.
Aproximadamente 75o/o de las personas Rho (D) negativo desarrollan ante D al
ser expuestos a eritrocitos Rho (D) positivo. Todavía no se ha determinado la
constitución química del antígeno Rh. El antígeno Rho (D) es determinado
genéticamente a través de un gen autosómico dominante. Dicho gen
aparentemente reside en el cromosoma 1 .
6.2 ¿Cuáles son los anticuerpos para cada uno de los antígenos
anteriormente descritos y en qué lugar se encuentran?

¿Los anticuerpos contra los antígenos ABO de los cuales carece el individuo
(anticuerpos antitéticos) se encuentran en circulación lo cual queda enmarcado en
la regla de Landsteiner? ¿Los antígenos y anticuerpos correspondientes no
pueden fisiológicamente coexistir en el mismo individuo? Los anticuerpos los
podemos encontrar en la membrana de los eritrocitos. Los anticuerpos anti-AB son
xenoanticuerpos porque su producción obedece al estímulo de estructuras
bioquímicas de gran semejanza con los azúcares dominantes humanos con otros
ampliamente distribuidos en la naturaleza como lo son los de las bacterias.
(Rodríguez, 2004) El sistema de grupos sanguíneos ABO sigue siendo el primero
a tener en cuenta al momento de realizar una transfusión de sangre, ya que una
incompatibilidad causa algunas patologías. El sistema Rh representa un papel
importante en obstetricia, las madres Rh negativas, al ser sensibilizadas por
antígenos eritrocitarios de un producto Rh positivo, producirá anticuerpos Anti-Rh
que al cruzar la barrera placentaria pueden hemolizar los eritrocitos fetales,
causando la enfermedad hemolítica del recién nacido.
6.3 Mencione al menos dos discrepancias en la determinación del sistema
ABO que estén relacionadas con errores técnicos, problemas inherentes a
las células y problemas inherentes al suero.
ERRORES TÉCNICOS
• Identificación inadecuada de la muestra de sangre, tubos de ensayo
• Mezcla de muestras
• Error administrativo
• Suspensión celular demasiado concentrada o demasiada diluida
• Falla en la adición de reactivo
• Falla en seguir las instrucciones del fabricante
• Reactivo de mala calidad, contaminado
• Falta de observación de hemólisis
• Centrífuga sin calibrar
• Material de vidrio sucio/contaminado

PROBLEMAS INHERENTES A LA CELULAS: • Cuando las células están

suspendidas en su propio suero, un exceso de proteínas o presencia de proteínas
anormales, de la gelatina de Wharton (en sangre del cordón) o de otras
macromoléculas pueden causar la formación de rouleaux, simulando aglutinación.
El lavado previo de los hematíes que van a ser usados en todas las pruebas
celulares evita estos problemas, porque con este se eliminan dichas sustancias.
• Si el paciente es A o B o AB ha sido transfundido recientemente con glóbulos 0.
La muestra es una mezcla de sangre y los resultados pueden ser diferentes,
obteniéndose una reacción de campo mixto.
• El paciente puede presentar problemas de auto-sensibilización marcada y los
glóbulos rojos estar fuertemente sensibilizados; ellos pueden aglutinarse aún en
medios de baja concentración proteica.
• Fenómeno de poli aglutinación, causado por defectos genéticos o adquiridos de
la membrana de los glóbulos rojos. • Subgrupos débiles de A o de B.
PROBLEMAS INHERENTES AL SUERO:
• Presencia de anticuerpos irregulares fríos, que reaccionan con otros antígenos
presentes en los hematíes A o B usados en la prueba inversa. Entre los más
frecuentemente encontrados están: - Auto anti1, es el de mayor incidencia. - Anti-
A1 en el suero de personas A2 y A2B. - Anti-H en personas A1 o A1B,
generalmente causa pocos problemas en el grupo inverso por su baja frecuencia,
la cual se ha calculado en 0.5% en los A1 y 3% en los A1B. - Otros anticuerpos
tales como anti-P1, anti-Lea, anti-Leb, anti-M, etc.
• Presencia de anticuerpos contra elementos adicionados a los reactivos:
preservativos, colorantes etc.
• En disglobulinemias, debido a la presencia de altas concentraciones de
fibrinógeno, de proteínas anormales o de hipergammaglobulinemias que pueden
causar formación de rouleaux, simulando aglutinación.

6.4 ¿Para qué se hace el lavado de glóbulos rojos?

Lavado de eritrocitos Siempre que se utilicen eritrocitos para cualquier estudio en
un banco de sangre deben ser lavados tres veces para enfrentarlos a los
anticuerpos, la relación de células/solución salina isotónica óptima será de 1/60
volúmenes repartidos en 3 lavados consecutivos. En la prueba de Grupo ABO y
Rho (D) de rutina se pueden usar solo re suspendidos en solución salina isotónica
y deberán ser lavados cuando se demuestren incongruencias en las pruebas
directa e inversa o cuando se detecte algún auto testigo positivo. Algo de vital
importancia en el resultado final es que en cada lavado los eritrocitos deben ser
removidos totalmente de la pared del tubo por agitaciones suaves para evitar su
deterioro y posteriormente agregarles la salina, formando un remolino suficiente
para que todas las células queden re suspendidas homogéneamente en toda la
barra de salina agregada, de no ser posible esto por falta de práctica es
recomendable tapar la boca del tubo con para film y agitar por inversión. Lo
anterior también es válido para todos los lavados que se realizan para llevar a
prueba final de Coombs (salina-Coombs, albúmina-Coombs, etc.).
• Enfrentarlos a anticuerpos.
• Cuando se demuestren incongruencias en las pruebas.
• Cuando se detecte algún auto testigo positivo.
6.5 Mediante un esquema (dibujo), explique la reacción de hemaglutinación
para determinación de grupo sanguíneo

Se necesita una muestra de sangre. El examen para determinar el grupo

sanguíneo se denomina tipificación ABO. Su muestra de sangre se mezcla con
anticuerpos contra sangre tipo A y tipo B. Entonces, la muestra se revisa para ver
si los glóbulos sanguíneos se pegan o no. Si los glóbulos permanecen juntos, eso
significa que la sangre reaccionó con uno de los anticuerpos. El segundo paso se
llama prueba inversa. La parte líquida de la sangre sin células (suero) se mezcla
con sangre que se sabe que pertenece al tipo A o al tipo B. Las personas con
sangre tipo A tienen anticuerpos anti-B. Las personas que tienen sangre tipo B
tienen anticuerpos anti-A. El tipo de sangre O contiene ambos tipos de
anticuerpos. Estos 2 pasos pueden determinar con precisión su tipo de sangre. La
determinación del Rh usa un método similar a la tipificación ABO. Cuando se
realiza la determinación del tipo de sangre para ver si usted posee el factor Rh en
la superficie de sus glóbulos rojos, los resultados serán uno de estos: Rh+
(positivo), si usted tiene proteínas de la superficie celular Rh- (negativo), si usted
no tiene proteínas de la superficie celular.
 POSTLABORATORIO:
9.1 Suponga que usted obtiene los siguientes resultados con la prueba de
clasificación directa: Diga que grupo sanguíneo es el de su paciente. “+” significa
aglutinación y “0” significa no aglutinación.

A B AB Rhesus Es Grupo:
+ 0 + + A+
+ 0 + 0 A-
0 + + + B+
+ + + + AB+
0 + + 0 B-
0 0 0 + O+

9.2 Complete la siguiente tabla teniendo en cuenta las compatibilidades a la hora

de donar y recibir sangre:
RECECPTOR

D GRUPO A GRUPO B GRUPO AB GRUPO O

GRUPO A √ √
O
GRUPO B √ √
N
GRUPO AB √
A
N GRUPO O √ √ √ √

T
E
 9.3 ¿Cómo se utiliza la técnica de hemoaglutinación para el diagnóstico de
mononucleosis infecciosa?
La infección por VEB induce la formación de anticuerpos específicos y no
específicos en un individuo. Los anticuerpos no específicos, denominados
heterófilos, son producidos por la activación policlonal de linfocitos B infectados y
no están dirigidos contra el VEB, sin embargo, reaccionan con antígenos que se
encuentran en eritrocitos de otras especies animales llevando a su aglutinación.
Esta capacidad de aglutinación es utilizada en la reacción denominada de
PaulBunnell, que determina anticuerpos heterófilos a partir de la 2 semana de la
infección. El nivel máximo de anticuerpos es detectado por esta técnica a la 6ª
semana y niveles bajos hasta un año posterior a la infección primaria. En los
cuadros de mononucleosis infecciosa producidos por el VEB aparecen diversos
anticuerpos, tanto frente a los antígenos específicos de este virus como,
dependiendo de la edad, frente a proteínas no codificadas por él: los llamados
anticuerpos heterófilos (AH), que se caracterizan por provocar la aglutinación de
los eritrocitos de diversos mamíferos. Dada la posible confusión de este cuadro,
desde el punto de vista clínico, con enfermedades hematológicas, es esencial
utilizar para su diagnóstico una prueba diagnóstica que tenga, a la vez, una alta
sensibilidad y especificidad. Un falso negativo podría inducir a iniciar tratamientos
erróneos o, al menos, a prolongar la angustia del enfermo de forma innecesaria.
Por otra parte, un falso positivo puede retardar el tratamiento de la enfermedad
tumoral por un tiempo inaceptable. Es, por tanto, muy importante disponer de
técnicas rápidas, fiables y de realización prácticamente individualizada. Por
razones obvias, el diagnóstico serológico deberá hacerse, en la mayor parte de
ocasiones, sobre una única muestra de la fase aguda. El diagnóstico serológico de
la mononucleosis infecciosa por el VEB puede realizarse mediante la detección de
AH, o empleando pruebas serológicas específicas que detectan la presencia de
anticuerpos producidos frente a los antígenos del VEB. La aparición precoz de los
AH y de VCA-IgM, junto con el perfil específico de otros tipos de marcadores
serológicos en los enfermos con este síndrome, permite el diagnóstico en una
única muestra de suero coincidiendo con la aparición de los síntomas. Para la
detección de los AH se han empleado técnicas de hemaglutinación, de
aglutinación con látex, inmunoenzimáticas e inmunocromatográficas. Algunas de
estas pruebas son muy populares por la facilidad y rapidez de realización, su bajo
coste y por medir anticuerpos de una forma eficiente en el subgrupo de edad (la
adolescencia) en donde encontramos la mayor parte de los casos clínicos. No
obstante, la existencia de una gran cantidad de sistemas comerciales con
diferente diseño y resultados complica su utilización en la práctica. Como regla
general, cuando se utilizan técnicas de hemaglutinación, se deben elegir pruebas
que empleen hematíes de caballo y absorción con células de riñón de cobaya para
retirar los anticuerpos del tipo Forssman (anticuerpos naturales).
9.4 ¿En qué consiste la prueba de inhibición de la hemoaglutinación, para qué
enfermedades se utiliza? realice un esquema.
Inhibición de la hemaglutinación La inhibición de la aglutinación de los eritrocitos
recubiertos con antígeno por el antígeno homólogo es un método sensible y
específico para la identificación de pequeñas cantidades de antígeno soluble en la
sangre o en otros líquidos de los tejidos. El principio de este análisis es que, el
anticuerpo incubado previamente con antígenos homólogos solubles o de reacción
cruzada, es «inactivada» cuando se incuba con eritrocitos recubiertos de antígeno.
Este método de inhibición de la hemaglutinación ha resultado muy útil para la
identificación de HBsAg en la hepatitis y para la identificación del antígeno factor
VIII en la hemofilia y trastornos afines de la coagulación. El virus del Dengue
aglutina a eritrocitos de ganso y humanos del grupo O. Producto de la infección
del VD se forman anticuerpos que se unen al virus e inhiben la hemaglutinación.
Enfermedades que se pueden diagnosticar con la prueba
 Influenza aviar
 Bronquitis infecciosa
 Mycoplasma septicum
 Mycoplasma gallinarum
Virus naturalmente hemoaglutinantes
 Newcastle
 Bronquitis
 Influenza aviar
 Virus del dengue
9.5 Aparte de la hemoaglutinación que otras aplicaciones concretas tiene la
técnica de aglutinación.
Clasificación de las reacciones de aglutinación

Aglutinación directa
Un antígeno celular o de partículas insolubles es aglutinado directamente
por el anticuerpo. Un ejemplo de esto es la aglutinación de los eritrocitos del
grupo A por antisueros anti-A, la aglutinación de los eritrocitos RH positivos
por el antisuero anti-D o la aglutinación del antígeno brucelar por
anticuerpos anti- Brucella. Gran cantidad de partículas como pueden ser
eritrocitos, bacterias, hongos y virus pueden ser aglutinados por anticuerpos
séricos, algunas veces de manera inespecífica y otra muy específica,
siendo ésta última, respuesta a una previa inmunización del organismo
productor de los anticuerpos séricos. Las pruebas para identificar
anticuerpos específicos son llevadas a cabo titulando seriada mente
antisueros en diluciones al doble en presencia de una cantidad constante
de antígeno.
Aglutinación indirecta
Se refiere a la aglutinación de las células recubiertas de antígeno o a las
partículas inertes que son portadoras pasivas de antígenos solubles. Se
tienen ejemplos de lo anterior en la utilización de partículas de gelatina en
la búsqueda de anticuerpos contra Treponema pallidum por aglutinación
pasiva (TPPA), la fijación del látex para VDRL en la sífilis y en la utilización
de eritrocitos en la prueba de hemaglutinación indirecta (HAI) en la
búsqueda de anticuerpos contra Tripanosoma cruzi, agente causal de la
enfermedad de Chagas. De manera alterna, el antígeno puede ser
localizado recubriendo partículas de látex o eritrocitos con anticuerpo
purificado y practicando la llamada aglutinación inversa.

9.6 ¿Qué es la aglutinación pasiva, cuál es su utilidad?

Aglutinación pasiva Cantidades de anticuerpos contra un antígeno soluble

no pueden detectarse por precipitación si su concentración no excede los
20 µg/ml. Teniendo en cuenta que la aglutinación es más sensible se ha
procurado fijar antígenos solubles a partículas, de modo de transformar la
precipitación en aglutinación. A la reacción que resulta del empleo de
glóbulos rojos como soporte se la llama hemaglutinación pasiva, y
simplemente aglutinación pasiva cuando se utilizan otros. Generalmente las
uniones de los antígenos a los soportes son no covalentes y la fijación se
obtiene por mezcla directa o previo acondicionamiento de la superficie de
las partículas. En el caso de los hematíes, la fijación de hidratos de carbono
no necesita intermediarios; en cambio para las proteínas es necesario el
tenado previo o tratamiento con aldehídos simples como el fórmico, pirúvico
o glutámico. La aglutinación pasiva es un método semicuantitativo que
permite determinar concentraciones relativas de anticuerpos sobre la base
de la máxima dilución aglutinante. Es cuatro veces más sensible que la
aglutinación y mucho más aún que la precipitación. Ello es consecuencia
del tamaño de las partículas antigénicas que intervienen en la reacción. En
la precipitación, el antígeno es molecular y se necesitan muchos complejos
antígeno-anticuerpo agregados para que la reacción se visualice, en tanto
que en la aglutinación pasiva se lo ha transformado en una partícula de
gran tamaño, capaz de dar aglutinados con pocas de ellas. Esta técnica es
muy utilizada en serología diagnóstica, ya sea bajo la forma de aglutinación
pasiva directa o midiendo su inhibición. Esto sirve para investigar hormonas
y antígenos solubles diversos en sangre, orina y otros fluidos y
especialmente para el diagnóstico temprano del embarazo, puesto que en
estos casos hay marcado aumento de gonadotrofina urinaria: si se mezcla
un antígeno constituido por partículas inertes a las que se les ha fijado la
gonadotrofina y suero anti gonadotrofina bivalente, habrá aglutinación.
Mezclando dicho suero con la orina a analizar, en caso de que esta
contenga gonadotrofina, el anticuerpo será neutralizado, y si luego se
añade el antígeno fijado al soporte inerte, no habrá aglutinación. Ello
significa que el anticuerpo fue totalmente neutralizado en la primera etapa y
que por lo tanto la concentración de gonadotrofina urinaria es alta, lo que
permite hacer diagnóstico temprano de embarazo.

BIBLIOGRAFÍA

http://www.hemobaires.org.ar/pdfs/Deustch.pdf

https://www.medigraphic.com/pdfs/gaceta/gm-2004/gms043p.pdf

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https://es.scribd.com/doc/131736850/GLOBULOS-ROJOS-LAVADOS-docx
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