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Resumens Semana 7

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UNIVERSIDAD ESTATAL DE BOLÍVAR

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS, RECURSOS NATURALES Y DEL AMBIENTE

CARRERA DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

ASIGNATURA:

BIOTECNOLOGÍA

CICLO:

SEPTIMO “A”

TEMA:

RESUMEN DE LA SEMANA 7

DONCENTE

Dr. CARLOS JÁCOME

ESTUDIANTE:

ANDERSON KATAN

RESUMEN SEMANA 6

15/7/2020
UNIVERSIDAD ESTATAL DE BOLÍVAR
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS, RECURSOS NATURALES Y DEL AMBIENTE

La ingeniería genética es el proceso de la utilización de la tecnología del ADN


recombinante (ADNr) para alterar la composición genética de un organismo. La ingeniería
genética implica la manipulación directa de uno o más genes. La ingeniería genética se dio
a conocer en 1970, la tecnología del ADN recombinante comenzó con cosas muy simples,
en los últimos años la tecnología ah evolucionado de manera significativa, ya que hoy en
día se pueden transferir genomas completos puede ser clonados y transferidos de una célula
a otra, esto es puede definir como la ingeniería genética [CITATION Nat \l 12298 ]

Etapas que se llevan a cabo en ingeniería genética

 Aislamiento de una secuencia de ácido nucleico (gen)


 Inserción de este gen en un vector (plásmido, fago etc...)
 Incorporación de este vector en un huésped (E. coli, células eucariotas)
 El huésped transformado puede asegurar la propagación de la información genètica
modificada mediante la replicación (clon).
 En ciertos casos será posible hacer traducir (se dice expresar) la secuencia genética
insertada y amplificada, que será entonces funcional fuera del organismo del cual ha
sido inicialmente extraído.

Enzimas de restricción:

[ CITATION Biosf \l 12298 ] Las enzimas de restricción se denominan también nucleasas de


restricción, endonucleasas de restricción y en ocasiones restrictasas (…) La importancia de
las enzimas de restricción radica en su gran especificidad para reconocer una secuencia
corta de DNA bicatenario e hidrolizar un enlace fosfodiéster en cada hebra, siempre en la
misma posición. Cada enzima se caracteriza, pues, por su sitio o secuencia de
reconocimiento o de restricción, o secuencia diana.

 También conocidas como endonucleasas, cortan los enlaces fosfodiester a partir de


una secuencia que reconocen.
 La secuencia que reconocen es una secuencia palindrómica (secuencia que se lee
igual en ambas direcciones).

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 Son extraídas de bacterias, donde actúan como mecanismo de defensa para degrada
material genético extraño que entre en la célula

Las enzimas de restricción al cortar DNA pueden producir dos tipos de cortes:

Extremos cohesivos

Polinucleótido de doble cadena en el cual una de las cadenas se extiende más allá del final
de la otra, generando una cola mono catenaria que puede hibridarse con otra hebra de DNA.
Aparece, con frecuencia, como producto de la acción de algunas endonucleasas de
restricción.[ CITATION Clí17 \l 12298 ]

Extremos romos

Son cortes a la mitad de la secuencia blanco que no dejan extremos de cadena sencilla. La
enzima de restricción SmaI es un ejemplo de enzima que corta así:

Las enzimas de restricción al cortar DNA pueden producir dos tipos de corte

 Abruptos: cortan en solo punto


 Cohesivos o pegajosos: cortan a manera escalonada en dos puntos

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Frecuencia de reconocimiento

 Las enzimas que reconocen una secuencia de 4 bases, cortan con más frecuencias
que las que reconocen una secuencia de 6 bases
 La frecuencia está determinada por la probabilidad:
 Una secuencia de 4 bases tiene la probabilidad de ocurrir en un genoma cada 256 pb
(44
 =256)
 Una secuencia de 6 bases tiene la probabilidad de ocurrir en un genoma cada 4,096
pb (46
 =4096).
 Una secuencia de 8 bases tiene la probabilidad de ocurrir en genoma
aproximadamente cada 65,000 pb (48˜ 65,000).

El nombre de cada enzima de restricción esta asignado según el origen bacteriano de la


misma. La nomenclatura utilizada para denominar estas enzimas consiste en:

1º. Tres letras que corresponden al nombre científico del microorganismo (ej. Escherichia
coli (Eco); Haempphilus influenzae (Hin) )

2º. La cepa o estirpe si la hubiese (ej. EcoR, aislada de la cepa RY13 de E. coli )

3º. En números romanos, un número para distinguir si hay más de una endonucleasa aislada
de esa misma especie. No confundir con el tipo de enzima de restricción.

4º. Todas deberían llevar adelante una R de restricción o un M de metilasa según la función
de la enzima, pero generalmente se omite.

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De ésta manera, el nombre de la enzima de restricción EcoRI se construiría de la siguiente


manera

ELECTROFORESIS DE DNA

 Después de tratar el DNA con las diferentes enzimas, los fragmentos son separados
por su tamaño usando un gel de electroforesis.

 Después de la carrera del DNA en el gel, este se tiñe para revelar los patrones de
bandas formados en el gel que corresponden a fragmentos de diferentes tamaños.

PRINCIPIOS DE ELECTROFORESIS

El principio de la electroforesis consiste en la migración proporcional de las moléculas a


través de un gel u otro tipo de matriz porosa, según su peso molecular o tamaño;
movimiento generado por el campo eléctrico.

Técnica usada para separar y purificar macromoléculas (i.e. proteínas, ácidos


nucleicos) que varían en tamaño, cargao conformación.

Cuando moléculas cargadas son colocadas en un campo eléctrico, estas migran


hacia el polo positivo (ánodo) o polo negativo (cátodo) de acuerdo a su carga.

Permite producir fragmentos definidos que se pueden separar mediante una


electroforesis horizontal.

[ CITATION Dav161 \l 12298 ]

GELES COMÚNMENTE USADOS:

Agarosa: polisacárido extraído de algas. No tóxico. Poco poder de resolución, pero alto
grado de separación. Separa fragmentos de DNA de 200 a 50,000 pb.

Poliacrilamida: polímero de acrilamida. Tóxico. Menor grado de separación, pero alto


poder de resolución. Usado para fragmentos de DNA de
500 pb. Usado para separar mezclas de proteínas.

MAPA DE RESTRICCIÓN

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 Es un diagrama de la molécula de DNA en donde se muestra los sitios de corte de


las enzimas de restricción.

 Se puede localizar secuencias de bases especificas en un cromosoma para estimar el


grado de diferencia entre los cromosomas

 En la práctica se utilizarán una mezcla de varias enzimas de restricción

LA CLONACIÓN

Es la técnica central de la tecnología de DNA recombinante. Permite


replicar(clonar)engrandes cantidad es un pedazo específico de DNA, el DNA de interés es
cortado y ligado a un elemento genético, vector de clonación, que se puede replicar
autónomamente cuando se introduce a una bacteria en crecimiento, en la mayoría de los
casos.

EL DNA FINGERPRINTING O
ANÁLISIS DE HUELLAS GENÉTICAS

Es una técnica de laboratorio utilizada para


establecer un vínculo entre la evidencia
biológica y un sospechoso en una
investigación criminal. Una muestra de
ADN tomada la escena del crimen se compara con una muestra de ADN de un sospechoso.

Si los dos perfiles de ADN coinciden, la prueba incrimina al sospechoso. Si por el


contrario los dos perfiles de ADN no coinciden, entonces la prueba no puede haber venido
del sospechoso. El análisis de huellas genéticas también se utiliza para establecer la
paternidad.[CITATION Eri16 \n \l 12298 ]

Bibliografía
Biotec. (s,f). Introducción a los Enzimas de restricción. Obtenido de Biotec:
https://www.bioted.es/protocolos/INTRODUCCION-ENZ-RESTRICCION.pdf

Bodine,David. (s,f). Ingeniería genética. Obtenido de National Human Genome:


https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Ingenieria-genetica#:~:text=La

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%C3%A9tica%20de%20un%20organismo.&text=La%20ingenier%C3%ADa%20gen
%C3%A9tica%20implica%20la%20manipulaci%C3%B3n%20d

Clínica Universidad de Navarra. (2017). Extremos Cohesivos . Obtenido de


https://www.cun.es/diccionario-medico/terminos/extremos-cohesivos

D, E. (2016). Huella genética. Obtenido de Huella genética: https://www.genome.gov/es/genetics-


glossary/Huella-geneticaHuella%20gen%C3%A9tica

López, D. A. (2016). Electroforesis. ACCESS.

15/7/2020

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