PRÁCTICA 6 y 7: ANÁLISIS DE AGUA

RESIDUAL

Demanda Biológica de Oxígeno – DBO

Sólidos Sedimentables – SSED

TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES

EDICIÓN 2020

PROGRAMA DE INGENIERÍA CIVIL

LABORATORIO DE INGENIERÍA AMBIENTAL

Laboratorios de Ingeniería Sanitaria Página 1 de 17

 TABLA DE CONTENIDO

1. OBJETIVOS ............................................................................................................................. 4

1.1 OBJETIVO GENERAL. ...................................................................................................... 4

1.2 OBJETIVO ESPECIFICOS.................................................................................................. 4

2. SEGURIDAD PARA LA PRÁCTICA ............................................................................................ 4

3. CAPACIDAD MÁXIMA DE ESTUDIANTES POR PRÁCTICA ....................................................... 4

4. MARCO TEÓRICO ................................................................................................................... 4

4.1 Definiciones. .................................................................................................................. 7

5. TOMA Y PRESERVACIÒN DE LA MUESTRA ............................................................................ 7

6. PROCEDIMIENTO PARA LA PRÁCTICA ................................................................................... 7

6.1 Sólidos Sedimentables - SSED ....................................................................................... 7

6.2 Procedimiento para DBO............................................................................................... 8

6.3 Procedimiento para la determinación de OD. .............................................................. 9

7. RESULTADOS ....................................................................................................................... 10

7.1 Sólidos Sedimentables ................................................................................................ 10

7.2 Oxígeno Disuelto - OD ................................................................................................. 10

7.3 Demanda Biológica de Oxígeno - DBO ........................................................................ 10

7. DISPOSICIÓN DE RESIDUOS GENERADOS EN LA PRÁCTICA ................................................ 11

8. BIBLIOGRAFÍA ...................................................................................................................... 11

9. ANEXOS ............................................................................................................................... 12

A.1. PROCEDIMIENTOS ESQUEMÁTICOS:................................................................................ 12

Sólidos Sedimentables ............................................................................................................ 12

DBO (Sin siembra) ................................................................................................................... 13

DBO (Con siembra) .................................................................................................................. 14

OD............................................................................................................................................ 15

A.2. Material para la práctica. ................................................................................................ 16

A3. Reactivos para la práctica ................................................................................................ 16

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INDICE DE ILUSTRACIONES

Ilustración 1.Procedimiento esquemático sólidos sedimentables.............................................. 12

Ilustración 2. Procedimiento esquemático ensayo DBO Sin siembra. ........................................ 13

Ilustración 3. Procedimiento esquemático Oxígeno Disuelto. .................................................... 16

INDICE DE TABLAS

Tabla 1. Tabla guía cantidad de muestra para DBO según DBO esperada. .................................. 8

Tabla 2. Desechos generados en la práctica. .............................................................................. 11

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1. OBJETIVOS

1.1 OBJETIVO GENERAL.

Determinar la demanda bioquímica de oxígeno-DBO5, los sólidos sedimentables y el

contenido de materia orgánica de una muestra de agua residual a la entrada y salida de
un sistema de tratamiento.

1.2 OBJETIVO ESPECIFICOS.

• Aplicar los fundamentos teóricos adquiridos durante las clases teóricas de tratamiento
de agua residual, mediante la práctica del laboratorio

• Conocer los diferentes procedimientos de las prácticas de laboratorio DBO (Demanda

Bioquímica de Oxígeno), SSED (Sólidos Sedimentables) y contenido de materia orgánica
por el método de Absorción Ultra Violeta (AUV).

• Familiarizarse con los parámetros y valores límites establecidos en el Resolución 631 de

2015 para vertimientos puntuales de agua residual.

2. SEGURIDAD PARA LA PRÁCTICA

Debido a que esta metodología de análisis involucra reactivos químicos y contacto con
microorganismos patógenos, que representan un riesgo para la salud se hace necesario la
utilización de los siguientes implementos de seguridad:

• Bata de laboratorio.
• Guantes de nitrilo.
• Zapatos cerrados.
• Gafas de seguridad.

Adicionalmente se hace necesario seguir las recomendaciones para desarrollar las actividades
en el Laboratorio (Ver Protocolo de Higiene y Seguridad).

3. CAPACIDAD MÁXIMA DE ESTUDIANTES POR PRÁCTICA

La capacidad máxima del laboratorio de Ingeniería Ambiental para la práctica es de quince (15)
estudiantes.

4. MARCO TEÓRICO

Para poder evaluar el impacto que pueden llegar a producir las aguas residuales, se emplean
diversas técnicas. Para aguas residuales, que tienen una composición más o menos constante,

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se emplea la cantidad de carbono presente en las mismas, ya sea directamente, midiendo el
carbono orgánico total, COT, TOC en inglés, o indirectamente, midiendo la capacidad reductora
del carbono existente en dichas aguas. Estas últimas son la Demanda Química de Oxígeno, DQO,
y la Demanda Bioquímica de Oxígeno, DBO. Así, con estas técnicas podemos determinar la
cantidad de materia orgánica putrescible que está en el agua contaminada.

En la práctica siguiente se utilizarán procedimientos consignados en el Standard Methods para

la determinación de la Demanda Bioquímica de Oxígeno (DBO), Absorción Ultra Violeta (AUV) y
los Sólidos Sedimentables (SSED) de muestra de agua residual.

Sólidos Sedimentables -SSED :

En el ensayo de sólidos sedimentables se determina la cantidad de material que se sedimenta
de la muestra en un periodo de tiempo. Estos pueden ser determinados y expresados en función
de un volumen (mL/L) o de una masa (mg/L), mediante volumetría y gravimetría
respectivamente.

La denominación de sólidos sedimentables se aplica a los sólidos en suspensión que se

sedimentarán, en condiciones tranquilas, por acción de la gravedad. El método consiste en
colocar 1L de muestra bien mezclada en el cono imhoff y dejar sedimentar durante 45 minutos,
girar el cono suavemente para permitir el descenso de los sólidos adheridos a las paredes y dejar
sedimentar durante 15 minutos para completar una hora de sedimentación. Al completar el
tiempo se registra el volumen del material sedimentado en el cono y se expresan los resultados
como mL/L.

La determinación de sólidos sedimentables es básica para establecer la necesidad del diseño de

tanques de sedimentación como unidades de tratamiento y para controlar su eficiencia.

Oxígeno disuelto - OD:

La determinación de OD sirve como base para cuantificar DBO. Para la determinación de OD el

método más usado es el de la modificación del nitruro al método de Winkler, el cual es el más
indicado para eliminar la interferencia producida por nitritos presentes en la muestra. Los
nitritos constituyen la interferencia más común en efluentes tratados biológicamente y en
muestras incubadas para análisis de DBO. Alternativamente es posible realizar la medición de
OD con el uso de electrodos.

El fundamento del método se basa en el hecho de que el oxígeno oxida el ion Mn++ a un estado
superior de valencia en condiciones alcalinas, y en que el manganeso en estados superiores es
capaz de oxidar el ion I-a Yodo libre I20 en condiciones ácidas. La cantidad de yodo liberado se
mide con solución estándar de tiosulfato de sodio (Solución tituladora) y es equivalente a la
cantidad de oxígeno disuelto originalmente presente en la muestra.

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Demanda Biológica de Oxígeno:

La DBO (Demanda Bioquímica de Oxígeno) es una medida de la cantidad de oxígeno utilizado

por los microorganismos en la estabilización de la materia orgánica biodegradable, en
condiciones aeróbicas, en un periodo de cinco días y a 20ºC.

El ensayo de DBO5 es uno de los más importantes para determinar la concentración de la materia
orgánica de aguas residuales, normalmente se realiza a 5 días. Cuando no se hace en este
periodo de tiempo se debe tener en cuenta que factores como la nitrificación afectarían el
resultado, y a su vez es necesario realizar una corrección para obtener el valor real de la DBO de
la muestra.

En aguas residuales domésticas, el valor de la DBO a 5 días representa en promedio un 65 a 70%

del total de la materia orgánica oxidable. El ensayo supone la medida de la cantidad de oxígeno
consumido por organismos vivos en la utilización de la materia orgánica presente en un residuo,
por lo tanto, es necesario garantizar que durante todo el periodo del ensayo exista suficiente
OD para ser utilizado por los organismos. Además, debe garantizarse que se suministran las
condiciones ambientales adecuadas para el desarrollo y trabajo de los microorganismos, así que
hay que proporcionar los nutrientes necesarios para el desarrollo bacterial, tales como N y P, y
eliminar cualquier sustancia tóxica.

Otra característica que se debe tener presente en el ensayo es que es necesario que exista una
población de organismos suficiente en cantidad y en variedad de especies durante el ensayo. Es
por esto que cuando la muestra no contiene una población biológica adecuada, (por ejemplo,
algunos residuos industriales, aguas residuales desinfectadas o con alta temperatura o con pH
extremo) es necesario hacer siembra. El propósito del sembrado es introducir en la muestra
una población biológica capaz de oxidar la materia orgánica del agua residual. Cuando existe en
la muestra una población de microorganismos apropiada, como en aguas residuales domésticas
sin cloración, la siembra es innecesaria y puede no usarse.

El método utilizado para la determinación de DBO consiste en agregar un volumen de muestra

determinado a dos botellas Winkler de 300mL y completar con el agua de dilución, para
suministrar el oxígeno y los nutrientes necesarios por los microorganismos para degradar la
materia orgánica presente en la muestra aeróbicamente. Se determina el oxígeno inicial de una
de las botellas y la otra se incuba durante 5 días a 20ºC. Después de los 5 días se determina el
oxígeno disuelto final. Se calcula la DBO de la muestra por la diferencia entre el valor del OD
inicial y el valor del OD final.

La importancia de las pruebas de DBO radica en que permiten calcular o predecir

aproximadamente el efecto que causaría una determinada descarga de aguas residuales sobre
la concentración de oxígeno disuelto de un cuerpo de aguas receptor. Dicho en otras palabras,
las pruebas de DBO permiten evaluar la tolerancia de los cuerpos de agua receptores para
asimilar descargas de materia orgánica.

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4.1 Definiciones.
Agua de dilución: Es agua destilada, aireada durante un tiempo mayor a 24 horas, saturada de
oxígeno disuelto, a la cual se le agregan los nutrientes necesarios para que sirva como alimento
y suministro de oxígeno para los microorganismos que degradarán la materia orgánica presente
en la muestra.

Incubación: Periodo de tiempo durante el cual se deja la muestra en condiciones de

temperatura y humedad establecidas.

Inhibidores: Son moléculas que se unen a enzimas y disminuyen su actividad.

Siembra: efluente o licor mezclado de un sistema de tratamiento biológico que trate un agua
residual. Cuando no es posible que sea este, se usa el sobrenadante de agua residual doméstica
previamente sedimentada a temperatura ambiente durante 1 a 36 horas. Cuando se use
efluente o licor mezclado de un proceso de tratamiento biológico se recomienda inhibir la
nitrificación.

Testigo: Es una muestra conocida a la cual se le aplica el mismo procedimiento que a la muestra,
se utiliza para comparar y verificar que el ensayo realizado sea confiable. Para el ensayo de DBO
el testigo corresponde a sólo agua de dilución para verificar que el procedimiento seguido fue
el adecuado y que su caída de oxígeno disuelto luego de los 5 días de incubación no fue mayor
a 0.2 mg/L.

5. TOMA Y PRESERVACIÒN DE LA MUESTRA

Sólidos: se requiere almacenar la muestra refrigerada y realizar el ensayo máximo en los 7 días
siguientes a la toma de la muestra.

DBO: Tome la muestra de tal manera que sea representativa del vertimiento en estudio. Utilice
frascos plásticos de polipropileno de 2000 mL de capacidad. Refrigere la muestra a 4ºC hasta el
momento del análisis a menos que se vaya a realizar el ensayo en las 2 horas siguientes a la toma
de muestra. Inicie el análisis en las 24 horas siguientes a la toma de la muestra. La agencia de
protección del medio ambiente de los Estados Unidos (EPA) permite un tiempo de
almacenamiento de 48 horas.

6. PROCEDIMIENTO PARA LA PRÁCTICA

6.1 Sólidos Sedimentables - SSED

a) Llene un cono Imhoff hasta la marca de aforo de 1 litro con muestra bien mezclada.

b) A los 45 minutos de reposo gire suavemente el cono para permitir el descenso de los
sólidos adheridos a las paredes.

c) 15 minutos más tarde haga la lectura del volumen del material sedimentable en el
cono, en mL/L.

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6.2 Procedimiento para DBO
a) Preparación del agua de dilución: sature el agua destilada con O.D mediante aireación con
un suministro de aire limpio proveniente de un compresor, por ejemplo. Coloque el
volumen requerido de agua destilada en un recipiente apropiado y agregue 1 mL de cada
una de las soluciones buffer de fosfato, sulfato de magnesio, cloruro de calcio y cloruro
férrico (soluciones 1-4) por litro de agua de dilución.

b) Sembrado: si es necesario, agregue 3 a 5 mL de siembra por litro de agua de dilución.

Alternativamente, agregue 1 a 2 mL de siembra directamente en las botellas. Recuerde que
si es agua residual doméstica no se requiere hacer sembrado.

c) DILUCIONES: Prepare varias diluciones de muestra que puedan resultar con un residual de
O.D de por lo menos 1,0 mg/L y un abatimiento de O.D de por lo menos 2,0 mg/L después
de 5 días de incubación. Use las siguientes diluciones:
DBO medible mg/L mL de muestra en botellas de 300 mL
30.000 – 105.000 0,02*
12.000 – 42.000 0,05*
6.000 – 21.000 0,1*
3.000 – 10.500 0,2*
1.200 – 4.200 0,5*
600 – 2.100 1,0
300 – 1.050 2,0
120 – 420 5,0
60 – 210 10,0
30 – 105 20,0
12 – 21 50,0
6 – 12 100,0
0-7 300,0
Tabla 1. Tabla guía cantidad de muestra para DBO según DBO esperada.

Agregue a cada botella de DBO la cantidad escogida de muestra usando una pipeta volumétrica.

Agregue la cantidad apropiada de siembra (si no se agregó al agua de dilución), llene la botella
con agua de dilución y coloque el tapón si dejar burbujas al aire.

Prepare 2 botellas de DBO por cada dilución. Determine el OD inicial en una de ellas e incube la
otra durante 5 días a 20°C.

d) CHEQUEO DEL AGUA DE DILUCIÓN: Prepare además por lo menos 2 testigos con agua de
dilución sin siembra para control del agua de dilución. Determine el O.D inicial de uno de
ellos e incube el otro durante 5 días a 20°C. El abatimiento del OD de los testigos debe ser
menor de 0,2 mg/L.

e) INCUBACIÓN: incube un testigo con agua de dilución, una botella de cada muestra diluida y
una botella de control de la siembra durante 5 días a 20°C  1 en oscuro. Mantenga un sello
de agua alrededor del tapón de las botellas.

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f) Determine el O.D. final del testigo, las diluciones y el control de siembra.

g) CONTROL DE LA SIEMBRA: Cuando se siembra el agua de dilución, prepare una serie

separada de diluciones de la siembra para determinar su DBO. Determine el OD inicial de
cada dilución de la siembra y el OD final de cada dilución de siembra después de 5 días de
incubación a 20°C. Para determinar la DBO real de la muestra debe restarse la DBO de la
siembra. El consumo de OD del agua de dilución sembrada debe estar entre 0.6 y 1 mg/L.

6.3 Procedimiento para la determinación de OD.

a) Llene completamente la botella de 250 o 300 mL con la muestra a analizar dejando rebosar
para insertar el tapón sin dejar burbujas.

b) Añada 1 mL de solución de sulfato manganoso y 1 mL de solución alcalina de yoduro-nitruro

de sodio usando una pipeta. Si las soluciones son agregadas debajo de la superficie del
líquido, enjuague las pipetas antes de volver a introducirlas en las botellas de los reactivos.

c) Tapone cuidadosamente la botella para evitar burbujas de aire y mezcle bien, invirtiendo la
botella unas 15 veces. Deje sedimentar el precipitado hasta la mitad de la botella. Si el
precipitado es blanco (hidróxido de manganeso) no existe OD. En caso contrario el
precipitado será óxido básico mangánico de color café.

d) Remueva el tapón y agregue 1 mL de H2SO4 concentrado, sosteniendo la pipeta sobre la

superficie del líquido contra el cuello de la botella. Tapone la botella y mezcle bien hasta
que no se observe ningún floc. Si hay oxígeno se liberará yodo. El volumen que se toma
para titulación debe corresponder a 200 mL de muestra original, por ello debe hacerse una
corrección por la pérdida de muestra debida al desplazamiento provocado por la adición de
los 2 mL de reactivo: 1 mL de sulfato manganoso y 1 mL de reactivo alcalino de yoduro-
nitruro. Para botellas de 300 mL el volumen que se toma para titulación debe ser de:

(200)(300)
= 201 𝑚𝐿
300−2

e) Mida 201 mL de la botella y colóquelos en un frasco erlenmeyer. Titule añadiendo tiosulfato

de sodio y agitando la solución hasta obtener un color amarillo pajizo pálido. Agregue 1 mL
de solución fresca de almidón, el cual produce un color azul, y continúe la titulación hasta
que el color azul desaparezca. Anote la cantidad de tiosulfato gastado. Ignore cualquier
reaparición del color azul.

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 7. RESULTADOS

7.1 Sólidos Sedimentables

Exprese los resultados de la siguiente manera:

𝑆ó𝑙𝑖𝑑𝑜𝑠 𝑆𝑒𝑑𝑖𝑚𝑒𝑛𝑡𝑎𝑏𝑙𝑒𝑠 = ___________𝑚𝐿/𝐿

7.2 Oxígeno Disuelto - OD

Calcule el contenido de OD por la siguiente relación:

𝑚𝐿 𝑔𝑎𝑠𝑡𝑎𝑑𝑜𝑠 𝑋 𝑁 𝑋 8000
𝑚𝑔 𝑂𝐷/𝐿 =
𝑚𝐿 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
Donde:

N= normalidad del tiosulfato de sodio empleado.

7.3 Demanda Biológica de Oxígeno - DBO

Para cada dilución cuyo abatimiento de OD sea mayor o igual a 2,0 mg/L y cuyo OD final sea
mayor o igual a 1,0 mg/L calcule la DBO5 asi:

• Cuando se usa agua de dilución sin siembra:

𝑚𝑔𝐷𝐵𝑂 (𝐷1 − 𝐷2 ) ∗ 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑏𝑜𝑡𝑒𝑙𝑙𝑎 𝑒𝑛 𝑚𝐿
=
𝐿 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎

Dónde:

D1 = OD de la muestra diluida, inmediatamente después de preparada, mg/L

D2 = OD de la muestra diluida, después de 5 días de incubación a 20°C, mg/L

• Cuando se usa agua de dilución con siembra:

𝑚𝑔𝐷𝐵𝑂 ((𝐷1 − 𝐷2 ) − (𝐵1 − 𝐵2 )) ∗ 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑏𝑜𝑡𝑒𝑙𝑙𝑎 𝑒𝑛 𝑚𝐿
=
𝐿 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎

Dónde:

D1 = OD de la muestra diluida, inmediatamente después de preparada, mg/L

D2 = OD de la muestra diluida, después de 5 días de incubación a 20°C, mg/L
B1 = OD de la siembra diluida antes de la incubación, es decir, OD del control de siembra antes
de la incubación, mg/L
B2 = OD de la siembra diluida después de 5 días de incubación a 20°C, es decir, OD del control
de siembra después de 5 días de incubación a 20°C, mg/L

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 7. DISPOSICIÓN DE RESIDUOS GENERADOS EN LA PRÁCTICA

Los residuos generados durante la práctica deberán ser almacenados y dispuestos de la siguiente
manera:

PRÁCTICA RESIDUO GENERADO ALMACENAMIENTO DISPOSICIÓN

FINAL

Sólidos Muestra Este residuo no Este residuo no

Sedimentables requiere requiere
almacenamiento disposición
específica.

Demanda Muestra + agua de Almacenar en Este residuo será

Biológica de dilución + sulfato recipiente etiquetado dispuesto por la
Oxígeno manganoso + reactivo como Residuos empresa
alcalino + ácido sulfúrico Práctica DBO DESCONT S.A.
+ Solución tituladora E.S.P.
tiosulfato de sodio +
almidón.

Tabla 2. Desechos generados en la práctica.

8. BIBLIOGRAFÍA
• APHA, AWWA, WPCF, Standard Methods for the examination of Water and Wastewater,
12 Edicion, 1965.
• IDEAM. Demanda Bioquímica de oxígeno – 5 días, Incubación y electrometría.
Disponible en línea en:
http://www.ideam.gov.co/documents/14691/38155/Demanda+Bioqu%C3%ADmica+d
e+Ox%C3%ADgeno..pdf/ca6e1594-4217-4aa3-9627-d60e5c077dfa
• IDEAM. Instructivo para la toma de muestras de aguas residuales. Disponible en línea
en:
http://www.ideam.gov.co/documents/14691/38158/Toma_Muestras_AguasResiduale
s.pdf/f5baddf0-7d86-4598-bebd-0e123479d428, 2007.
• ROMERO ROJAS, Jairo Alberto. Tratamiento De Aguas Residuales. Teoría Y Principios De
Diseño. Ed. 3. Bogotá D.C., Colombia. Escuela Colombiana De Ingeniería.2008

• ROMERO ROJAS, Jairo Alberto. Calidad del Agua. Ed. 2. Bogotá D.C., Colombia. Escuela
Colombiana De Ingeniería.2008

• ROMERO ROJAS, Jairo Alberto. Acuitratamiento Por Lagunas De Estabilización. Ed. 2.

Bogotá D.C., Colombia. Escuela Colombiana De Ingeniería.1995

• T.H, Tebbutt. Fundamentos De Control De Calidad De Agua.

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9. ANEXOS
A.1. PROCEDIMIENTOS ESQUEMÁTICOS:
Sólidos Sedimentables

Ilustración 1.Procedimiento esquemático sólidos sedimentables.

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 DBO (Sin siembra)

1. Coloque muestra en 2 botellas

y complete con agua de
dilución
2. Llene 2 botellas con agua de
dilución

Ilustración 2. Procedimiento esquemático ensayo DBO Sin siembra.

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 DBO (Con siembra)

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 OD

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 Ilustración 3. Procedimiento esquemático Oxígeno Disuelto.

A.2. Material para la práctica.

Sólidos Sedimentables:

• 2 Cono Imhoff
• 2 Soportes universales con anillo
• Cronómetro
DBO:

a) Pipetas de acuerdo a la cantidad de muestra escogida

b) Pipetas de 2 mL
c) Botellas Winkler con tapa
d) Vaso de precipitados de 2 Litros
e) Pera pipeteadora
OD:
a) Pipeta de 5 mL
b) Probetas de 250 mL
c) Erlenmeyer de 250 mL
d) Bureta automática

AUV:
a) Probeta de 50 mL
b) Vaso de precipitado de 50 mL
c) Equipo de filtración
d) Erlenmeyer de 250 mL
e) Filtros
f) Crisoles
g) Espectrofotómetro

A3. Reactivos para la práctica

DBO:

a) Solución buffer de fosfato: disuelva 8,5 g de fosfato dihidrógeno de potasio, KH2PO4; 21,75
g de fosfato hidrógeno de potasio, K2HPO4; 33,4 g de fosfato hidrógeno disódico
heptahidrato, Na2HPO4.7H2O; y 1,7 g de cloruro de amonio, NH4Cl, en unos 500 mL de agua
destilada y diluya a 1 litro. El pH debe ser 7,2. Alternativamente, disuelva 42,5 g de KH2PO4
y 1,7 g de NH4Cl en unos 700 mL de agua destilada. Ajuste el pH a 7,2 con NaOH al 30% y
diluya a 1 litro.

b) Solución de sulfato de magnesio: disuelva 22,5 g de MgSO4 •7H2O en agua destilada y diluya
a 1 litro.

c) Solución de cloruro de calcio: disuelva 27,5 g de CaCl2, o 36,42 g de CaCl2.2H2O en agua

destilada y diluya a 1 litro.

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d) Solución de cloruro férrico: disuelva 0,25 g de FeCl3.6H2O en agua destilada y diluya a 1 litro.

e) Solución de H2SO4, 1N: agregue lentamente, agitando, 28 mL de ácido sulfúrico concentrado

a agua destilada. Diluya a 1 L

f) Solución de NaOH, 1 N: disuelva 40 g de hidróxido de sodio en agua destilada. Diluya a 1L

g) Solución de sulfito de sodio, 0,025N: disuelva 1,575 g de Na2SO3 en 1.000 mL de agua

destilada. Esta solución es inestable, prepárela diariamente.

h) Inhibidor de nitrificación:
▪ 2- cloro-6– (triclorometil) piridina
▪ solución ATU: disuelva 2,0 g de alitiourea. C4H8N2S en 500 mL de agua y diluya a 1L. Almacene
a 4°C. Descarte después de 2 semanas.

i) Solución de glucosa – ácido glutámico: seque reactivo de glucosa y ácido glutámico a 103°C
durante 1 hora. Agregue 150 mg de glucosa y 150 mg de ácido glutámico a agua destilada y
diluya a 1 litro. Prepare esta solución inmediatamente antes de su uso.

j) Solución de cloruro de amonio: disuelva 1,15g de NH4Cl en unos 500 mL de agua destilada,
ajuste el pH a 7,2 con solución de NaOH y diluya a 1 litro. La solución contiene 0,3 mgN/mL.

k) Solución de sulfato manganoso: disuelva 480 g de MnSO4.4H2O, 400 g de MnSO4.2H2O ó

364 g de MnSO4.H2O en agua destilada, filtre y diluya a 1 litro. Esta solución no debe
producir color con almidón, cuando se agrega a una solución de yoduro de potasio
acidificada.

l) Reactivo alcalino de yoduro-nitruro: disuelva 500 g de NaOH (ó 700 g de KOH) y 135 g de NaI
(ó 150 g de KI) en agua destilada y diluya a 1 litro. Agregue 10 g de nitruro de sodio, NaN3,
disuelto en 40 mL de agua destilada. Este reactivo no debe producir color con la solución de
almidón al diluirlo y acidificarlo.

m) Ácido sulfúrico, H2SO4 concentrado.

n) Almidón: disuelva 2 g de almidón soluble grado analítico y 0.2 g de ácido salicílico, como
preservativo, en 100 mL de agua destilada caliente.

o) Solución patrón de tiosulfato de sodio 0.1 N: disuelva 24.82 g de Na2S2O3.5H2O en agua

destilada hervida y fría y diluya a 1 litro. Preserve agregando 5 mL de cloroformo ó 1 g de
NaOH.

p) Solución estándar tituladora de tiosulfato de sodio 0.025 N: diluya 250 mL de solución

patrón de tiosulfato de sodio a 1 litro. Normalice con solución estándar de dicromato de
potasio 0.025 N, o con solución estándar de biyodato de potasio 0.025 N. La solución
estándar de tiosulfato de sodio, 0.025N es de una concentración tal que 1 mL es equivalente
a 0.2 mg de OD.

p.1 Solución estándar de dicromato de potasio 0.025 N: disuelva 1.226 g de K2Cr2O7, secado a
103ºC durante 2 horas, en agua destilada y diluya a 1 litro en un frasco volumétrico.

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