J. Pestic. Sci.

43 (1), 1–9 (2018)

DOI: 10.1584 / jpestics.D17-078

Revisar

Desintoxicación enzimática de plaguicidas organofosforados y

tóxicos relacionados

Karla Alejo-González,1 Erik Hanson-Viana2 y Rafael Vazquez-Duhalt1, *

Centro de Nanociencias y Nanotecnología, Universidad Nacional Autónoma de México,
1

Km 107 carretera Tijuana-Ensenada, Ensenada, Baja California 22760 México

2Facultad de Medicina, Universidad Autónoma de Baja California, Mexicali, México

(Recibido el 8 de noviembre de 2017; aceptado el 8 de enero de 2018)

Millones de casos de intoxicación por plaguicidas ocurren anualmente y representan un problema de salud pública. Además, la intoxicación por
plaguicidas es el método suicida preferido en las zonas rurales. Hace décadas se propuso el uso de enzimas para el tratamiento de la intoxicación
por plaguicidas organofosforados. Varias enzimas pueden transformar compuestos organofosforados como pesticidas y agentes nerviosos. Se
han propuesto algunos tratamientos enzimáticos específicos, incluyendo inyección directa de enzimas, portadores de liposomas y eritrocitos,
preparaciones PEGiladas y tratamientos enzimáticos extracorpóreos. Sin embargo, actualmente no se dispone de tratamientos enzimáticos. En
este trabajo, se revisa críticamente el uso de enzimas para el tratamiento de la intoxicación por plaguicidas organofosforados y se discuten los
desafíos restantes. © Sociedad de Ciencia de Pesticidas de Japón

Palabras clave: transformación enzimática, desintoxicación enzimática, desintoxicación de plaguicidas, organofosforado.

incidente de parálisis en 1930, en el que más de 30.000 personas se

Introducción
vieron afectadas.5) En 1995, un ataque terrorista en el metro de Tokio
Los compuestos organofosforados (OPC) son un grupo diverso de con sarín provocó más de 12 muertos y más de cinco mil heridos.6) Los
productos químicos que se utilizan tanto en aplicaciones domésticas agentes nerviosos también se han utilizado en la batalla, sobre todo en
como industriales. Ejemplos de organofosforados incluyen insecticidas Irak en los años ochenta.7) Más recientemente, el sarín se usó durante la
(malatión, paratión), gases nerviosos (sarín), agentes oftálmicos, Guerra Civil Siria en 2013, matando a más de 635 personas.8)
antihelmínticos, herbicidas y otros productos químicos industriales. El No existen estimaciones fiables sobre cuántas personas por año sufren
primer OPC se sintetizó a principios del siglo XIX mediante la reacción efectos en la salud relacionados con los plaguicidas. Hace tres décadas, la
de alcohol con ácido fosfórico.1) En 1872, se exploró por primera vez el Organización Mundial de la Salud9) Se estima que cada año se producen tres
uso de OPC como insecticidas.2) En 1936, el ejército alemán desarrolló millones de casos graves de intoxicación por plaguicidas, que resultan en
agentes de guerra química (tabun, sarin, soman). Un cuarto agente, VX, 220.000 muertes. Se estima que la auto-intoxicación por plaguicidas
se sintetizó en Inglaterra una década después.3) representa alrededor de un tercio de los suicidios del mundo, estimando
Desde su descubrimiento, el uso de plaguicidas ha beneficiado a la conservadoramente un rango plausible de 234,000 a
humanidad al proteger e incrementar la producción agrícola, no solo de 326.000 muertes por autoenvenenamiento por pesticidas cada año en todo el
mundo.10)
alimentos sino también de materias primas, y proteger contra
enfermedades infecciosas como la malaria. Los pesticidas se han Se han realizado los primeros esfuerzos para reducir los impactos
utilizado para eliminar plagas domésticas y de jardines y también como ambientales y de salud de los plaguicidas. En la década de 1930, Lange y
agentes protectores en muchos entornos, como lugares de trabajo y Kruger sintetizaron fosforofluoridatos y examinaron su toxicidad, lo que, en
escuelas. Se aplican en el suelo, en el aire y en diversos productos.4) la década de los 40, inspiró a Schrader a sintetizar OP más seguros, lo que
Durante la Segunda Guerra Mundial, en 1941, se reintrodujeron resultó en el desarrollo de paratión. El paratión se usó para controlar plagas
organofosforados en todo el mundo con fines pesticidas, como se después de la Segunda Guerra Mundial, pero fue prohibido debido a su alta
pretendía originalmente. El uso extensivo de plaguicidas ha afectado la toxicidad. Desde entonces, se han desarrollado y empleado OP etoxi mucho
salud humana. Ha habido varios casos masivos de intoxicación por más seguros para controlar una amplia gama de especies de insectos plaga.
compuestos organofosforados, como el jengibre jamaicano.
1. Efectos tóxicos

El principal mecanismo de acción de los pesticidas organofosforados

* A quién debe dirigirse la correspondencia. Correo
electrónico: rvd@cnyn.unam.mx (OPP) es la inhibición de la acetilcolinesterasa (AChE). La AChE es una
Publicado en línea el 31 de enero de enzima que hidroliza el neurotransmisor acetilcolina en colina y ácido
2018 © Pesticide Science Society of Japan acético. AChE se encuentra en el centro
 2 K. Alejo-González et al. Revista de ciencia de plaguicidas

sistema nervioso periférico y tral, uniones neuromusculares y glóbulos requerido para la protección. Una combinación de isómeros con menor
rojos. La AChE participa en la terminación de la transmisión de impulsos toxicidad podría mejorar la supervivencia y reducir las anomalías del

por la rápida hidrólisis del neurotransmisor acetilcolina en numerosas comportamiento.19)

vías colinérgicas en los sistemas nerviosos central y periférico. La

3. Tratamiento actual
inactivación de enzimas, inducida por plaguicidas organofosforados,
conduce a la acumulación de acetilcolina, hiperestimulación de los Hay tres agentes quimioterapéuticos aprobados por la FDA en la terapia
receptores nicotínicos y muscarínicos y alteración de la para el envenenamiento por OPP; atropina, oximas (pralidoxima u
neurotransmisión.11) Los compuestos organofosforados inactivan la obidoxima) y benzodiazepinas (p.ej, diazepam). El manejo inicial debe
AChE al fosforilar el grupo hidroxilo de serina ubicado en el sitio activo enfocarse en el uso adecuado de atropina. La atropina es un
de la enzima, estableciendo un enlace covalente con la AChE.11-13) Una antagonista parasimpaticolítico y competitivo de la acetilcolina sobre los
vez inactivada, la acetilcolina se acumula en todo el sistema nervioso, lo receptores muscarínicos. Aunque no actúa como antídoto, puede
que provoca la sobreestimulación de los receptores muscarínicos y neutralizar la fasciculación, la debilidad, la parálisis flácida y el paro
nicotínicos. Por tanto, los efectos clínicos se manifiestanvía la activación respiratorio y aliviar la bradicardia.3) Los estudios han demostrado que
de los sistemas nervioso central y autónomo y en los receptores la atropina (10 mg / kg) antes del paraoxon podría prevenir
nicotínicos en los músculos esqueléticos. a 2,08 mg / kg (1,51 a 2,84 mg / kg) LD50,20) Además, se ha demostrado que la
benactizina tiene mejores efectos en el sistema nervioso central que
Los signos y síntomas de la intoxicación por organofosforados la atropina, además, inhibe la sudoración o menoscaba la
son miosis; salivación; lagrimeo aumento de la motilidad acomodación, haciéndola más adecuada para su uso en
gastrointestinal, con incontinencia fecal y urinaria; náuseas y entornos hostiles.21)
vómitos; diaforesis; ansiedad; Confusión; fasciculación muscular, Cuando comienzan los síntomas de intoxicación, las
calambres y debilidad; convulsiones que provocan dificultad recomendaciones actuales para el tratamiento con oxima requieren una
respiratoria grave; falla diafragmática.14) Se han informado dosis inicial de pralidoxima seguida de una infusión.22) No se han
complicaciones tardías por exposición aguda o crónica. La mayoría establecido las dosis exactas. La naturaleza y el tipo de OPP son
de los casos se presentaron con fatiga, parestesia y dolor de importantes para determinar la respuesta a la terapia con oximas. La
cabeza, así como depresión y dolor crónico.15) mayoría de los compuestos se pueden clasificar como compuestos de
dimetilfosforilo o dietilfosforilo. Se considera que la intoxicación
2. Pretratamiento actual humana por OPP que llevan dos grupos metoxi (malatión, paraoxón-
El tratamiento médico de las intoxicaciones por plaguicidas es metilo, dimetoato) es bastante resistente a la terapia con oximas.23) Por

difícil, con muertes en más del 15% de los casos. Se han revisado otro lado, la ventana terapéutica potencial para la administración de un

las terapias disponibles y los factores que deben considerarse.16,17) antídoto de AChE está determinada por el "proceso de envejecimiento",

Un siglo después del primer uso de compuestos organofosforados, que es el estado inactivo de AChE (cuando está unido al OPP). Si esto

todavía no existe un protocolo general de tratamiento, siendo la ocurre, hay una eliminación no enzimática de una cadena lateral alquilo

atropina, las oximas y el diazepam los más comunes. del resto fosforilo, dejando un grupo hidroxilo en su lugar.24) Una vez

En situaciones donde se ha establecido el riesgo de exposición a que la AChE "envejece", la regeneración no es posible.25)

OPP, se deben implementar pretratamientos para protección. Los Por otro lado, en la intoxicación por megadosis, incluso la
tratamientos profilácticos actuales consisten en utilizar inhibidores concentración plasmática óptima de oximas puede no ser capaz de
reversibles de AChE para ocultar el sitio activo de AChE de la OPP. El hacer frente a la rápida reinhibición de la AChE reactivada en los
más ampliamente investigado es el carbamato piridostigmina (la única primeros días después de la intoxicación.25) La vida media de la AChE
sustancia aprobada por la FDA para dicho pretratamiento), un inhibidor dimetil y dietil fosforilada envejecida, determinada en eritrocitos
pseudoirreversible que hace un enlace lábil con la serina catalítica de la humanos aislados in vitro, son 3,7 y 33 horas, respectivamente.25,26) Por
AChE.11) Este tratamiento mantiene una cantidad suficiente de AChE lo tanto, se recomienda que la ventana terapéutica potencial para la
activa para preservar la transmisión colinérgica antes de la intoxicación administración del antídoto sea cuatro veces la vida media. Por tanto, el
y permanecer oculta al OP durante la exposición. En este tratamiento, la antídoto funciona a un máximo de 15 horas para el grupo
dosis es extremadamente desafiante. Además, la piridostigmina no dimetilfosforilo y 132 horas en el caso del grupo dietilfosforilo. Para los
atraviesa fácilmente la barrera hematoencefálica, lo que deja compuestos dimetilados, un día después de la intoxicación con
desprotegida la AChE del sistema nervioso central.3) insecticidas de dimetilfosforilo, prácticamente toda la AChE estará en la
Se han ensayado otras sustancias profilácticas, como la forma envejecida, de modo que la terapia con oxima será inútil en ese
fitostanigmina, tacrina, ranitidina y K-27. El compuesto más momento.27) Los estudios han mostrado mejores resultados con dosis
prometedor en este asunto es la oxima experimental K-27, que es bajas de pralidoxima (<2 g en una infusión intravenosa lenta). La
significativamente más eficiente que otros inhibidores de Organización Mundial de la Salud recomienda una dosis de pralidoxima
colinesterasa probados.18) de 30 mg / kg seguida de infusiones de> 8 mg / h.28) Otros estudios han
En la búsqueda de un inhibidor reversible de AChE del sistema demostrado que la administración de pralidoxima (90 mg / kg) antes
nervioso central, la huperzina A, un alcaloide natural, parece tener el paraoxon podría prevenir la LD de 4,50 mg / kg (3,28–6,16 mg / kg)50,20)
el mayor potencial. Sin embargo, este alcaloide es tóxico en dosis Es importante destacar que las oximas se asocian con múltiples efectos secundarios,
Vol. 43, núm. 1, 1 a 9 (2018) Desintoxicación enzimática de plaguicidas organofosforados 3

tales como mareos, visión borrosa, debilidad muscular, inhibición de la

4. Tratamientos a base de enzimas para organofosforados
respiración de los pacientes con la administración rápida, arritmia
Intoxicación por plaguicidas
cardíaca y asistolia repetida. Se han notificado anomalías de la función
hepática, así como hepatitis, con altas dosis acumuladas de atropina y Un enfoque alternativo a los inhibidores de la AChE son las moléculas
obidoxima.29) Además, algunos estudios han demostrado una mayor biocatalíticas que inactivan las OPP en el torrente sanguíneo o se
necesidad de cuidados intensivos y requisitos de ventilación con el uso metabolizan en metabolitos menos tóxicos antes de que puedan alcanzar la
de oxima, aunque no se ha demostrado de manera concluyente.24) AChE en los sitios fisiológicos. Cohen y Warringa propusieron por primera vez
el uso de enzimas para el tratamiento de la intoxicación por OPP.34) Las
El diazepam, el otro agente quimioterapéutico aprobado por la FDA, enzimas para tratamientos potenciales (Tabla 1) se pueden dividir según su
también es importante en el tratamiento o la profilaxis de las actividad catalítica para la transformación de OPP en actividad baja, media y
convulsiones y para proteger el sistema nervioso central. alta. Sin embargo, es difícil comparar los datos cuantitativos sobre la cinética
Se han recomendado otros tratamientos no aprobados por la FDA para la de transformación en los abundantes datos encontrados en la literatura
intoxicación por OPP. El glicopirrolato o la difenhidramina intravenosos debido a la heterogeneidad de los datos reportados.
pueden proporcionar un agente anticolinérgico de acción central alternativo valores. Solo unos pocos artículos informan sobre la enzimakgato y KMETRO
para tratar la toxicidad muscarínica si la atropina no está disponible o tiene Constantes determinadas en procedimientos rigurosos con enzima purificada.
un suministro limitado.30) Es bien sabido que el magnesio preparativos. La mayoría de ellos informan tasas de transformación en términos de

sulfato (MgSO4) reduce la liberación de acetilcolina a través del bloqueo moléculas de plaguicidas transformadas por extractos crudos o preparaciones

Canales de Ca; por lo tanto, el uso de MgSO4 Se ha propuesto, y los estudios parcialmente purificadas, lo que se conoce como contenido de proteína total. En

han demostrado que, cuando se utiliza junto con la terapia estándar, algunos casos, se han estudiado preparaciones microsomales. Por otro lado, la

podría reducir los días de hospitalización y la tasa de mortalidad.31) diversidad de estructuras químicas de OPP, afinidades enzimáticas y tasas de

Entre otros enfoques, la infusión de altas dosis de NaHCO3 transformaciones hacen que sea más difícil comparar

ha mostrado un resultado beneficioso porque los OPP tienden a hidrolizar el rendimiento general. Sin embargo, en la Tabla 2 algunoskgato se muestran
más eficientemente a un pH alto.32) Sin embargo, se necesita más investigación en los datos.
una población más grande para obtener resultados más concluyentes. Finalmente,
el glutamto juega un papel en las convulsiones inducidas por OPP a través de la 4.1. Enzimas de baja actividad.
sobreactivación denortemetilo-D-aspartato (NMDA). Los estudios han encontrado Numerosas enzimas y proteínas participan en las defensas naturales contra
que el anti-NMDA tiene un papel neuroprotector y previene la neuropatía y las las OPP y, en dosis de baja exposición, pueden ser suficientemente
convulsiones inducidas por OP.33)
protectoras. Las enzimas de baja actividad, llamadas "biodetectores
estequiométricos", son moléculas específicas que se unen irreversiblemente a

Tabla 1. Transformación enzimática de plaguicidas organofosforados seleccionados por diferentes proteínasa)

Fosfotriesterasa o Citocromos Diisopropil-

Pesticida Paraoxonasa Butirilcolinesterasa organofosforada
hidrolasa organofosforada P450 anhidrasa ácida fluorofosfatasa

Cadusafos [35]
Clorpirifós [36–38] [39–44] [45] [46] [47]
Clorpirifosoxón [48] [43] [45, 48–50]
Coumaphos [35, 51, 52]
Deltametina [53]
Demeton-S [54]
Diazinón [35, 52] [55, 56–58] [50]
Diazoxon [48] [45, 48]
Diclorvos [59]
Dimetoato de [20] [60] [61, 62] [59] [63–65] [66]
diisopropilfluorofosfato [67] [41]
Dyfonate [35]
Etoprofos [35]
Fenamifos [35] [68]
Fenitrotión [35, 47]
Malaoxon [69]
Malation [54] [65, 70]
Monocrotofos [71] [59]
Paratión [20, 35, 52, 72] [41, 44, 73]
Paroxon [20, 35, 38, 47, 52, 61, 74–92] [61, 73] [49, 50, 62, 65, 79, 93–101] [69, 102, 103] [63] [74]
a) Los números entre paréntesis corresponden a números de referencia
 4 K. Alejo-González et al. Revista de ciencia de plaguicidas

Tabla 2. Rango de constante de tasa de transformación (kgato) de diferentes en-

Las enzimas de actividad se podrían reducir utilizando un reactivador. La
zymes con diferentes pesticidas organofosforados desa)
reactivación de la butirilcolinesterasa humana por la presencia de oximas
Tasa de transformación puede retardar, pero no prevenir, el envejecimiento enzimático.110) Otros
Enzima
constanteskgato) enfoques incluyen la modificación de butirilcolinesterasa mediante la adición

Enzimas de baja actividad de inhibidores selectivos, como bambuterol o flavonoides.111)

Butilcolinesterasas 0,08-100 horas−1

Enzimas de actividad 4.2. Enzimas de actividad media

media Citocromos P450 0,7-15 min−1 Las enzimas de actividad media son catalizadores que degradan OPP con un
Dominio hemo de las paraoxonasas del 9–226 min−1 recambio relativamente alto, por lo que se cree que la administración de una

citocromo P450 BM3 4–340 min−1 pequeña dosis de enzima proporciona una mejor protección que grandes

Enzimas de alta actividad dosis de costosas enzimas de baja actividad. Se han considerado varias

Cloroperoxidasa 2–6 segundos−1 enzimas humanas, incluida la paraoxonasa-1 plasmática (PON-

Fosfotriesterasas u OPH 5–2100 segundos−1

1), prolidasas de eritrocitos e hígado, y regucalcina, un marcador de

a)
senescencia hepática humana (SMP-30).112) La paraoxonasa-1 humana
Datos obtenidos de las referencias que se muestran en la Tabla 1
(hPON-1) es una enzima dependiente de calcio secretada por el hígado
y transportada a través del torrente sanguíneo que se asocia con
OPP en una proporción molar. La butirilcolinesterasa humana es el lipoproteínas de alta densidad. Se han realizado mutaciones en el sitio
biodetector estequiométrico más avanzado. La butirilcolinesterasa, catalítico en hPON-1 para mejorar su eficacia contra las OPP. Se han
también conocida como pseudocolinesterasa, que se encuentra en el obtenido mejoras significativas en la actividad con el mutante H115W al
hígado y el plasma, juega un papel en la protección contra la exposición reducir un grupo voluminoso (Y71A) que aumentó 9 veces la hidrólisis
a dosis bajas de OPP, pero es ineficaz para la exposición a dosis altas.19) de paraoxon, y al introducir
La protección en humanos puede mejorarse mediante la administración ing un triptófano (F347W) que reduce la Kmetro a la mitad contra el sarín.
de butirilcolinesterasa exógena. Sin embargo, la administración de 113) Sin embargo, la eficiencia catalítica todavía está limitada por la
grandes cantidades de enzimas que exhiben actividades promiscuas falta de un ambiente hidrofóbico adecuado. Se requieren
podría perturbar ciertos procesos metabólicos o potenciar la reacción modificaciones químicas adicionales, como la PEGilación, para la
inmunogénica. Por lo tanto, el uso de PEGilación o la inclusión de aceptación inmunitaria y la modulación de la vida media.
enzimas recombinantes humanas y no humanas y enzimas bacterianas Otra enzima de interés es la regucalcina, también llamada marcador
en nanocontenedores debería prevenir las respuestas inmunes. Una de senescencia hepática humana (SMP-30), un metal promiscuo que
dosis de 200 mg de butirilcolinesterasa humana puede proteger a un contiene (Zn2+ y Mg2+) enzima lactonasa que está estructuralmente
ser humano contra el doble de la dosis letal media de relacionada con hPON-1 y diisopropil-fluorofosfatasa. Aunque todavía
soman (2×LD50) .19) Grandes dosis pueden conferir protección contra se desconoce el mecanismo catalítico de la hidrólisis de OPP por
hasta 5.5×LD50 de somán u 8×LD50 del agente nervioso de guerra VX. regcalcina, ha comenzado el interés por estudiar esta enzima.114) Por
104) Las dosis requeridas en humanos son extremadamente caras, otro lado, se ha encontrado que la prolidasa humana de los eritrocitos o
así que, en realidad, la investigación se centra en la producción a gran escala del hígado tiene propiedades catalíticas contra las OPP. Una nueva
de butirilcolinesterasa humana. Se ha producido una butirilcolinesterasa variante de prolidasa modificada a partir de las bacterias termófilas
humana recombinante, pero tiene una vida media en plasma mucho más previamente conocidas.Pyrococcus horikoshii
corta que la butirilcolinesterasa humana nativa. Por tanto, también se están mostró una actividad 8 veces mayor para la transformación de diisopropil-
realizando esfuerzos para ampliar su vida media mediante la adición de fosforofluoridato en comparación con el tipo salvaje P. furiosus
péptidos, la fusión con albúmina y la PEGilación. El objetivo principal de los prolidase.115)
bioconjugados de proteína PEG es mitigar las respuestas inmunitarias o La familia de monooxigenasa de citocromos P450 (CYP) también es
respuestas adversas relacionadas inmunológicamente asociadas con capaz de transformar OPP. El papel de los CYP en el metabolismo de los
productos proteicos terapéuticos que afectan su seguridad y eficacia.105,106) La plaguicidas en los seres humanos se ha estudiado ampliamente.116-118)

PEGilación de moléculas biológicamente activas también da como resultado Los CYP en el hígado humano generalmente están involucrados en la
el aumento de la estabilidad de las proteínas, el aumento de los tiempos de metabolización de plaguicidas y, aunque están involucradas varias isoformas
circulación y la reducción de la unión no específica a áreas no seleccionadas o diferentes, CYP2B6 y CYP2C19 parecen ser las más importantes.117-119) El

no enfermas. Por tanto, la conjugación de PEG es una estrategia en rápida polimorfismo encontrado en este grupo de enzimas determina la

evolución para el uso de proteínas terapéuticas y para los métodos de susceptibilidad a los efectos tóxicos de los pesticidas. Además, es bien sabido

administración de fármacos.107) Además, las propiedades de barrera del PEG que los pesticidas pueden actuar como inductores de isoformas CYP en

también pueden proteger las proteínas terapéuticas de las enzimas tejidos humanos.120-122) Como en las bacterias123-125)

proteolíticas digestivas en el sistema digestivo.108) La leche de cabra PEGilada y hongos,126,127) Los CYP también se encuentran en plantas y todos
con butirilcolinesterasa humana recombinante (72 mg / kg) mejoró la vida pueden transformar una variedad de pesticidas.128-130) Recientemente,
media y permitió una supervivencia del 100% de los cobayas expuestos a una variante de CYP de Bacillus megaterium ha sido analizado para pes-
2.5×LD50 con signos mínimos de intoxicación a pesar de una dosis de transformación ticida131) y la constante catalítica kgato para la transformación de
inyección intramuscular 2 horas después de la intoxicación.109) La dosis de baja paratión fue de 10,9 min−1 con un Kmetro de 59,4µMETRO.
Vol. 43, núm. 1, 1 a 9 (2018) Desintoxicación enzimática de plaguicidas organofosforados 5

Figura 1. Diferentes mecanismos de transformación enzimática de plaguicidas.

Se determinó la naturaleza química de los productos de la pudo transformar varios plaguicidas, en su mayoría compuestos
transformación mediada por CYP de varios plaguicidas. El principal halogenados, y no se pudo detectar ninguna transformación de
producto de la transformación del paratión fuepag-nitrofenol, pero plaguicidas organofosforados.134) Por lo tanto, la capacidad de la
también se encontró una pequeña cantidad de paraoxón.131) peroxidasa para transformar plaguicidas no podría contemplarse con
fines de desintoxicación de OPP.
4.3. Enzimas de alta actividad. La colinaesterasa manipulada muestra propiedades catalíticas deficientes,
La diisopropil-fluorofosfatasa es una fosfotriesterasa dependiente por lo que se han realizado esfuerzos para una mutación enzimática
de Ca (similar a hPON-1) obtenida del calamar Loligo vulgaris que autorregenerable. Se ha demostrado que la sustitución de una glicina en la
se ha encontrado que es más eficaz para hidrolizar posición 117 por una histidina (G117H) en la colina esterasa recombinante
diisopropilfosforofluoridato que hPON-1 o regucalcina.114) humana aumenta la actividad enzimática. Esta variante sigue siendo inútil

Diisopropilfosforofluoridato de eritrocitos murinos mostró para fines clínicos, ya que no se reactiva lo suficientemente rápido y no se
avances prometedores, sin embargo, su uso terapéutico aún detiene el envejecimiento de la enzima.3,14) La encapsulación de la esterasa de
necesita más estudios.32) colina humana en nanoportadores (copolímeros de polilisina / óxido de

Cloroperoxidasa, una peroxidasa fúngica de Caldariomyces fumago, polietileno) ha sido capaz de cruzar la barrera hematoencefálica y

supuestamente fue capaz de transformar plaguicidas organofosforados permanecer activa durante 72 h en ratones.135)

que contienen el grupo fosforotioato (P = S). Sin embargo, los productos Las fosfotriesterasas (PTE), también llamadas hidrolasas
oxidados se identificaron como derivados de oxon (P = O) donde el organofosforadas (OPH), son las enzimas más eficientes hasta el
átomo de azufre del grupo tioato se reemplaza por un átomo de momento y podrían ser muy estables cuando están PEGiladas. El PTE ha
oxígeno.126,132) Se sabe que estos derivados del oxon son más tóxicos que mostrado una vida media circulante aceptable (unos pocos días) y
el pesticida original.133) Por otro lado, la peroxidasa versátil implicada en estabilidad térmica.14) La acción de PTE se basa en la ruptura del enlace
la degradación de la lignina entre el átomo de P y el grupo saliente de OPP, lo que resulta en una
 6 K. Alejo-González et al. Revista de ciencia de plaguicidas

y metabolitos más polares; por lo tanto, no se acumulan en los tejidos actividad de las proteínas y, en algunos casos, el aumento de la
grasos y se eliminan por la orina.17) Los estudios iniciales mostraron que captación celular.142) Además, la funcionalización de enzimas PEGiladas
el uso de PTE de manera uniforme con altas dosis de paraoxón (50 mg / con ligandos específicos podría mejorar la internalización celular, como
kg) podría prevenir los síntomas y la importante inactivación de la lo demostró recientemente el citocromo P450 PEGilado funcionalizado

acetilcolinaesterasa en el cerebro.136) Una PTE modificada expresada en con ácido fólico.106)

E. coli resultó en propiedades hidrolíticas 15.000 veces mejores en La respuesta inmunológica también se puede superar encapsulando
comparación con la PTE salvaje.137) Los eritrocitos son las células la enzima dentro de una nanopartícula protectora, como un liposoma.
portadoras de PTE más estudiadas. La sustitución de Zn por Co PTE se encapsuló dentro de estabilizado estéricamente
aumentó al doble la actividad catalítica de PTE.139) El co- liposomas.20) El aumento de paraoxon LD50 fue 140 veces, en
PTE mostró un kgato de 526 segundos−1 en la transformación de paratión como comparación con la de los animales no tratados. Además, cuando
comparado con Zn-PTE salvaje, con un kgato de 254seg−1. Además de la Los liposomas estabilizados que contienen PTE se administraron juntos.
sustitución de metales, la PEGilación aumentó la termoestabilidad con atropina y pralidoxima, el LD50 aumentado 1000 veces.
y estabilidad frente a agentes quelantes de metales de ambas preparaciones Otra alternativa para proteger el tratamiento enzimático contra
de fosfotriesterasa de metales.138) La respuesta inmunológica es la encapsulación de PTE en eritrocitos. La
Se ha propuesto el uso de eritrocitos murinos, ya que ha demostrado PTE recombinante hibridaba eritrocitos murinos mediante diálisis
su utilidad en otras terapias, aunque se logró la encapsulación exitosa hipotónica con resellado y hibridación subsiguientes y se empleó como
de PTE en eritrocitos mediante diálisis hipotónica, y in vitro un vehículo enzimático para antagonizar los efectos tóxicos de las OPP.
experimentos han demostrado un alto nivel enzimático 139) Aquí nuevamente, los ratones tratados con eritrocitos PTE y atropina
hidrólisiskgato =2100 segundos−1) de paraoxon.75,139) Estudios recientes y pralidoxima mostraron paraoxon 1000 veces mayor
mostraron mejores formas de encapsulación de eritrocitos PTE con LD50.
su fusión con liposomas y pretratamiento con clorpromazina, aunque el El tratamiento enzimático extracorpóreo para la intoxicación por OPP es un

principal problema parece ser la exposición de la fosfatidilserina que otra alternativa. La primera desintoxicación extracorpórea con éxito
actúa como señal de eliminación (en vivo) de la circulación por informada fue después del ataque con sarín de Tokio en 1995, cuando un
macrófagos en el hígado y el bazo.140) Los liposomas estructuralmente paciente que no mostró mejoría después de seis horas de tratamiento
estabilizados con fosfatidiletanolamina derivatizada con PEG (PEG-PE) médico estándar se sometió a hemofiltración durante 4 horas, seguida de

también se han estudiado como portadores de PTE y como protección hemoperfusión con Hemosorba CH-350.5) Sin embargo, este enfoque es

contra una respuesta inmune. Sin embargo, sus usos clínicos son cuestionable, ya que los OPP son muy lipofílicos, por lo que su presencia en la

limitados debido a su rápida degradación y se ha propuesto su uso sangre es mínima, sirviendo solo en las primeras horas después del

dentro de células portadoras.20) Finalmente, se probó una proteína envenenamiento; también se necesitan equipos y personal médico calificado,

quimérica que combinaba fosfotriesterasa y un dominio de unión a lo cual, para tener un impacto internacional, es demasiado costoso,

celulosa para la hidrólisis de paraoxón.141) Las diferentes especialmente en los países en desarrollo. Se inmovilizó PTE recombinante en

transformaciones enzimáticas de OPP se esquematizan en la Fig. 1. un reactor de fibra hueca diseñado para la circulación sanguínea
extracorpórea para la desintoxicación de OPP posterior a la exposición.48)
5. Terapias enzimáticas alternativas
Conclusiones
Se han propuesto terapias enzimáticas alternativas. Se estudió la administración

directa de PTE con exposición a diferentes OPP en ratones.136) Como era de esperar, La desintoxicación enzimática, sin duda, es una alternativa atractiva para
el tratamiento con PTE aumentó la actividad hidrolizante de OPP en suero de ratón tratar la intoxicación por OPP. Sin embargo, se necesita más trabajo para
hasta seis veces cuando se midió 1 hora después de la administración, y la vida diseñar portadores más seguros para estabilizar la proteína y hacer que la
media de PTE en circulación fue de aproximadamente 5 horas. Los animales preparación sea sigilosa para el sistema inmunológico. La nanotecnología
pretratados con PTE toleraron incluso una cantidad 50 veces mayor de OPP, en está posibilitando grandes avances en los campos biomédicos. El diseño y
comparación con los animales no tratados. El tratamiento directo de PTE junto con producción de nano-reactores basados en una combinación de las
la administración de fisostigmina, un compuesto utilizado por diversas fuerzas propiedades catalíticas de las enzimas y las características únicas de los
armadas para el pretratamiento contra la intoxicación por agentes nerviosos, fue el materiales nanométricos son, sin duda, una oportunidad para resolver
diferentes desafíos en aplicaciones biomédicas. Recientemente, se ha
el antídoto más eficaz contra la intoxicación por sarín. El LD50 El valor del sarín revisado el uso de nanopartículas para transportar enzimas terapéuticas.143-145)
aumentó 4,3 veces en los ratones que recibieron una combinación Estos avances, junto con la mejora de la actividad catalítica de las enzimas
de fosfotriesterasa y fisostigmina.136) mediante herramientas moleculares, parecen ser una solución potencial para
El uso de preparaciones de enzimas libres como antídotos es lidiar con el gran número de intoxicaciones letales de OPP.
limitado debido a sus disposiciones fisiológicas desfavorables y posibles
reacciones inmunológicas. Se han producido bioconjugados
Agradecimientos
enzimáticos con polietilenglicol (PEG) para reducir la reacción
inmunógena.138) También se ha utilizado la PEGilación para mejorar la Este trabajo ha sido financiado por el Consejo Nacional de Ciencia y

estabilidad sistémica; evitar la degradación enzimática; opsonizar; para Tecnología de México (Subvenciones IFC 2015-1 y CB-251241). Agradecemos
a la Dra. Katrin Quester por su ayuda.
acumulación no selectiva; y para mantener la solubilidad y
Vol. 43, núm. 1, 1 a 9 (2018) Desintoxicación enzimática de plaguicidas organofosforados 7

283 (2002).
Referencias 29) P. Taylor: Agentes anticolinesterasa., En: LL Brunton, BA Chabner y
1) V. Pandit, S. Seshadri, SN Rao, C. Samarasinghe, A. Kumar y R. Valsalan: J. BC Knollman (Eds.) Goodman & Gilman The Pharmacological Basis
Emerg. Choque de trauma4, 132-134 (2011). of Therapeutics. Duodécima edición. Nueva York, Macmillan, Ch.
2) K. Soltaninejad y S. Shadnia: “Historia del uso y epidemiología del 10, págs. 239-254, 2011.
envenenamiento por organofosforados”, ed. por M. Balali-Mood, M. 30) Y. Yavuz, Y. Yurumez, IH Ciftci, O. Sahin, H. Saglam y M.
Abdollahi, Toxicología básica y clínica de compuestos Buyukokuroglu: Clin. Toxicol.46, 67–70 (2007).
organofosforados, Springer-Verlag London, págs. 25–44, 2013. 31) A. Basher, SH Rahman, A. Ghose, SM Arif, MA Faiz y AH
3) M. Moshiri, E. Darchini-Maragheh y M. Balali-Mood: DARU J. Dawson: Clin. Toxicol.51, 35–40 (2013).
Pharm. Sci.20, 81 (2012). 32) M. Balali-Mood, MH Ayati y H. Ali-Akbarian: Clin. Toxicol.43,
4) RC Gilden, K. Huffling y B. Sattler: J. Obst. Ginecol. Neonat. 571–574 (2005).

Nours.39, 103–110 (2010). 33) BA Weissman y L. Raveh: Toxicol. Apl. Pharmacol.232, 351–
5) T. Leibson y M. Lifshitz: J. Toxicol. 10, 767–7704 (2008). 358 (2008).
6) K. Yokoyama, Y. Ogura, M. Kishimoto, F. Hinoshita, S. Hara, A. 34) JM Cohen y MG Warringa: Biochim. Biophys. Acta26, 29–39
Yamada, N. Mimura, A. Seki y O. Sakai: JAMA 274, 379 (1995). (1957).
7) R. Gladstone y CJ Chivers: Los detalles forenses en el Informe de la ONU apuntan al 35) SMA Islam, RK Math, KM Cho, WJ Lim, SY Hong, JM Kim, HD
uso de gas por Assad, The New York Times. 16 de septiembre de 2013. Yun, JJ Cho y HD Yun: J. Agric. Food Chem.58,
8) SD Segalla: JN Afr. Semental.17, 315–336 (2012). 5380–5386 (2010).

9) Organización Mundial de la Salud: Impacto en la salud pública de los plaguicidas 36) CMH Cho, A. Mulchandani y W. Chen: Apl. Reinar. Microbiol.70,
utilizados en la agricultura. Programa de las Naciones Unidas para el Medio 4681–4685 (2004).
Ambiente, Ginebra, Suiza (1990). 37) S. Khodi, AM Latifi, M. Saadati, M. Mirzaei y H. Aghamollaei:
10) D. Gunnell, M. Eddleston, MR Phillips y F. Konradsen: Salud Pública J. Microbiol. Biotechnol.22, 23–238 (2012).
de BMC 7, 357 (2007). 38) C. Yang, R. Freudl, C. Qiao y A. Mulchandani: Apl. Reinar.
11) MB Colović, DZ Krstić, TD Lazarević-Pašti, AM Bondžić y Microbiol.76, 434–440 (2010).
VM Vasić: Curr. Neuropharmacol.11, 315–335 (2013). 39) J. Tang, Y. Cao, RL Rose, AA Brimfield, D. Dai, JA Goldstein y E.
12) S. Chowdhary, R. Bhattacharyya y D. Banerjee: Clin. Chim. Acta Hodgson: Drug Metab. Dispos.29, 1201–1204 (2001).
20, 66–76 (2014). 40) D. Dai, J. Tang, R. Rose, E. Hodgson, RJ Bienstock, HW
13) GA Petroianu: Pharmazie 64, 269-275 (2009). Mohrenweiser y JA Goldstein: J. Pharmacol. Exp. El r.299, 825–831
14) Agencia de Protección Ambiental de EE. UU., Evaluación de riesgo acumulativo de (2001).
organofosforados, Actualización de la Oficina de Programas de Plaguicidas. 31 de Julio, 41) H. Schulze, RD Schmid y TT Bachmann: Anal. Chem.76,
2006. 1720-1725 (2004).
15) M. Trovaslet-Leroy, L. Musilova, F. Renault, X. Brazzolotto, J. Misik, 42) C. Sams, GD Loizou, J. Cocker y MS Lennard: Toxicol. Letón.
L. Novotny, M.-T. Froment, E. Gillon, M. Loiodice, L. Verdier, P. 147, 253–260 (2004).

Masson, D. Rochu, D. Jun y F. Nachona:Toxicol. Letón.206, 14-23 43) K. Choi, H. Joo, RL Rose y E. Hodgson: J. Biochem. Mol. Toxicol.
(2011). 20, 279-291 (2006).
16) M. Eddleston, NA Buckley, P. Eyer y AH Dawson: Lanceta 371, 44) E. Mutch y FM Williams: Toxicología 224, 22–32 (2006).
597–607 (2008). 45) RJ Richter, GP Jarvik y CE Furlong: Toxicol. Apl. Pharmacol.235,
17) V. Palaniappen: Medicina. Updat. Assoc. Phys. India.95, 427–433 (2013). 1-9 (2009).
18) DE Lorke, SM Nurulain, MY Hasan, K. Kuca y GA Petroianu: J. 46) M. Eddleston, P. Eyer, F. Worek, Sheriff de MH Rezvi y NA Buckley:
Appl. Toxicol.34, 1096-1103 (2014). QJM 101, 467–474 (2008).
19) Y. Ashani y S. Pistinner: Toxicol. Sci.77, 358–367 (2004). 47) R. Liu, C. Yang, Y. Xu, P. Xu, H. Jiang y C. Qiao: J. Agric. Food
20) I.Petrikovics, K. Hong, G. Omburo, QZ Hu, L. Pei, WD McGuinn, Chem.61, 7810–7816 (2013).
D. Sylverster, C.Tamulinas, D. Papahadjopoulos, JC 48) P. Masson, D. Josse, O. Lockridge, N. Viguié, C. Taupin y C.
Jaszberenyi y JL Way: Toxicol. Apl. Pharmacol.156, 56–63 Buhler: J. Physiol. 92, 357–362 (1998).
(1999). 49) G. Amitai, L. Gaidukov, R. Adani, S. Yishay, G. Yacov, M. Kushnir y H.
21) L. Raveh, I. Rabinovitz, E. Gilat, I. Egoz, J. Kapon, Z. Stavitsky, B. Avi Meshulam: FEBS J. 273, 1906-1919 (2006).
Weissman y R. Brandeis: Toxicol. Apl. Pharmacol.227, 155– 162 50) RC Stevens, SM Suzuki, TB Cole, SS Park, RJ Richter y C.
(2008). E. Furlong: Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU105, 12780-12784 (2008).

22) KS Pawar, RR Bhoite, CP Pillay, SC Chavan, DS Malshikare y SG 51) AH Mansee, W. Chen y A. Mulchandani: J. Ind. Microbiol. Biotechnol.
Garad: Lanceta 368, 2136–2141 (2006). 32, 554–560 (2005).
23) J. Kassa: J. Toxicol. Clin. Toxicol.40, 803–816 (2001). 52) E. Porzio, L. Merone, L. Mandrich, M. Rossi y G. Manco: Biochimie
24) JV Peter, JL Moran y P. Graham: Crit. Care Med.34, 502–510 89, 625–636 (2007).
(2006). 53) WS Lan, J. Cong, H. Jiang, BG Gu y CL Qiao: Toro. Reinar.
25) F. Worek, M. Backer, H. Thiermann, L. Szinicz, U. Mast, R. Klimmek y P. Contam. Toxicol.75, 335–342 (2005).
Eyer: Tararear. Exp. Toxicol.dieciséis, 466–472 (1997). 54) DA Schofield y AA Dinovo: J. Appl. Microbiol.109, 548–557
26) F. Worek, C. Diepold y P. Eyer: Arco. Toxicol.73, 7 a 14 (1999). (2010).
27) S. Khan, R. Hemalatha, L. Jeyaseelan, A. Oommen y A. Zachariah: 55) C. Sams, J. Cocker y MS Lennard: Xenobiotica 34, 861–873
Tararear. Exp. Toxicol.20, 169-174 (2001). (2004).
28) M. Eddleston, L. Szinicz, P. Eyer y N. Buckley: QJ Med. 95, 275– 56) C. Sams, HJ Mason y R. Rawbone: Toxicol. Letón.116, 217-221
(2000).
 8 K. Alejo-González et al. Revista de ciencia de plaguicidas

57) WA Kappers, RJ Edwards, S. Murray y AR Boobis: Toxicol. Apl. Mermelada. Chem. Soc.135, 10426-10432 (2013).
Pharmacol.177, 68–76 (2001). 88) W. Wei, J. Du, J. Li, M. Yan, Q. Zhu, X. Jin y Y. Lu: Adv. Mater.25,
58) L. Fabrizi, S. Gemma, E. Testai y L. Vittozzi: J. Biochem. Mol. Toxicol. 2212–2218 (2013).
13, 53–61 (1999). 89) X. Tang, B. Liang, T. Yi, G. Manco, I. Palchetti y A. Liu: Enzyme
59) L. Jaganathan y R. Boopathy: Braz. Arco. Biol. Technol.42, 343– 348 Microb. Technol.55, 107–112 (2014).
(1999). 90) N. Suthiwangcharoen y R. Nagarajan: Biomacromoléculas 15,
60) M. Laaksonen, E. Kaliste-Korhonen, S. Kärenlampi y O. Hänninen: 1142-1152 (2014).
Chem. Biol. Interactuar.94, 197-213 (1995). 91) R. Khaksarinejad, A. Mohsenifar, T. Rahmani-Cherati, R. Karami y M.
61) KN Gan, A. Smolen, HW Eckerson y BN La Du: Drug Metab. Tabatabaei: Apl. Biochem. Biotechnol.176, 359–371 (2015).
Dispos.19, 100-106 (1991). 92) EN Efremenko, IV Lyagin, NL Klyachko, T. Bronich, NV
62) H. Yun, J. Yu, S. Kim, N. Lee, J. Lee, S. Lee y J. Rho: Proteína Expr. Zavyalova, Y. Jiang y AV Kabanov: J. Control. Lanzamiento247,
Purif.131, 34–41 (2017). 175-181 (2017).
63) JJ DeFrank y T. Ch. Cheng:J. Bacteriol. 173, 1938-1943 (1991). 93) CE Furlong, RJ Richter, SL Seidel, LG Costa y AG Motulsky: Anal.
64) WD McGuinn, EP Cannon, CT Chui, L. Pei, I. Petrikovics y Biochem.180, 242–247 (1989).
JL Way: Fundam. Apl. Toxicol.21, 38–43 (1993). 94) LG Costa, BE McDonald, SD Murphy, GS Omenn, RJ Richter, AG
65) SR Mortensen, SM Chanda, MJ Hooper y S. Padilla: J. Biochem. Motulsky y CE Furlong: Toxicol. Apl. Pharmacol.
Toxicol.11, 279-287 (1996). 103, 66–76 (1990).
66) J. Hartleib y H. Rüterjans: Proteína Expr. Purif.21, 210–219 (2001). 95) A. Smolen, HW Eckerson, KN Gan, N. Hailat y BN La Du:
67) FM Buratti y E. Testai: Toxicología 241, 33–46 (2007). Drug Metab. Dispos.19, 107-112 (1991).
68) D. Almenares-López, MF Martínez-Salazar, ML Ortiz-Hernández, R. 96) C. Sams y HJ Mason: Tararear. Exp. Toxicol.18, 653–658 (1991).
Vazquez-Duhalt y A. Monroy-Noyola: Toxicol. In vitro27, 97) O. Khersonsky y DS Tawfik: J. Biol. Chem.281, 7649–7656
681–685 (2013). (2006).
69) BC Geyer, RR Woods y TS Mor: Chem. Biol. Interactuar.175, 98) M. Valiyaveettil, Y. Alamneh, L. Biggemann, I. Soojhawon, HA
376–379 (2008). Farag, P. Agrawal y MP Nambiar: Toxicol. In vitro25, 905–913
70) FM Buratti, A. D'Aniello, M. Volpe, A. Meneguz y E. Testai: (2011).
Drug Metab. Dispos.33, 295-302 (2005). 99) SD Kirby, JR Norris, JR Smith, BJ Bahnson y DM Cerasoli: Chem.
71) MKJ Siddiqui, M. Mahboob y M. Mustafa: Toxicología 76, Biol. Interactuar.203, 181-185 (2013).
133-139 (1992). 100) DG Mata, PE Rezk, P. Sabnekar, DM Cerasoli y N. Chilukuri:
72) BN Novikov, JK Grimsley, RJ Kern, JR Wild y ME Wales: J. Pharmacol. Exp. El r.349, 549–558 (2014).
J. Control. Lanzamiento146, 318-325 (2010). 101) M. Goldsmith, Y. Ashani, R. Margalit, A. Nyska, D. Mirelman y
73) RJ Foxenberg, BP McGarrigle, JB Knaak, PJ Kostyniak y J. DS Tawfik: Chem. Biol. Interactuar.259 (Pt B), 242-251 (2016).
R. Olson: Drug Metab. Dispos.35, 189-193 (2007). 102) O. Lockridge, RM Blong, P. Masson, MT Froment, CB Millard y
74) F. Wang, M. Xiao y S. Mu: J. Biochem. Toxicol.8, 161-166 (1993). C. Broomfield: Bioquímica 36, 786–795 (1997).
75) L. Pei, G. Omburo, WD Mcguinn, I. Petrikovics, K. Dave, FM 103) I. Schumacher, A. Arad y R. Margalit: Biotechnol. Apl. Biochem.
Raushel, JR Wild, JL Deloach y JL Way: Toxicol. Apl. Pharmacol. 230, 225-230 (1999).
124, 296-301 (1994). 104) A. Saxena, W. Sun, JM Fedorko, I. Koplovitz y BP Doctor: Biochem.
76) K. Lai, NJ Stolowich y JR Wild: Arco. Biochem. Biophys.318, Pharmacol.81, 164-169 (2011).
59–64 (1995). 105) RL Lundbland y RA Bradshaw: Biotechnol. Apl. Biochem.26,
77) H. Shim, SB Hong y FM Raushel: J. Biol. Chem.273, 143-151 (1997).
17445-17450 (1998). 106) K. Quester, K. Juárez-Moreno, I. Secundino, Y. Rosenstein, KP Alejo,
78) RD Richins, A. Mulchandani y W. Chen: Biotechnol. Bioeng.69, A. Huerta-Saquero y R. Vazquez-Duhalt: Macromol. Biosci.
591–596 (2000). 17, 1600374 (2016).
79) D. Josse, O. Lockridge, W. Xie, C. Bartels, L. Schopferand y P. 107) A. Kolate, D. Baradia, S. Patil, I. Vhora, G. Kore y A. Misra: J. Control.
Masson: J. Appl. Toxicol.21 (Supl 1), S7 – S11 (2001). Lanzamiento192, 67–81 (2014).
80) M. Shimazu, A. Mulchandani y W. Chen: Biotechnol. Bioeng.76, 108) C. Monfardini, O. Schiavon, P. Caliceti, M. Morpurgo, JM Harris y FM
318-324 (2001). Veronese: Bioconjug. Chem.6, 62–69 (1995).
81) AL Simonian, JK Grimsley, AW Flounders, JS Schoeniger, T. 109) H. Mumford y JK Troyer: Toxicol. Letón.206, 29–34 (2011).
Cheng, JJ DeFrank y JR Wild: Anal. Chim. Acta442, 15-23 110) Z. Kovarik, Z. Radic, B. Grgas, M. Skrinjari, C. Spoljar, E. Reiner y V.
(2001). Simeon-Rudolf: Estructura de proteína BBA. 1433, 261-271 (1999).
82) B. diSioudi, JK Grimsley, K. Lai y JR Wild: Bioquímica 38, 111) M. Kovarik, G. Katalinic, J. Sinko, O. Binder, YS Holas, L. Jung, D.
2866–2872 (2001). Musilova, K. Jun y K. Kuca: Chem. Biol. Interactuar.187, 167-171
83) AA Wang, W. Chen y A. Mulchandani: Biotechnol. Bioeng.91, (2010).
379–386 (2005). 112) ME Gales y TE Reeves: Examen de drogas. Anal.4, 271–281 (2012).
84) L. Merone, L. Mandrich, M. Rossi y G. Manco: Extremófilos 9, 113) SD Kirby, JR Norris, RJ Smith, BJ Bahnson y DM Cerasoli: Chem.
297-305 (2005). Biol. Interactuar.203, 181-185 (2013).
85) SY McLoughlin, C. Jackson, J.-W. Liu y D. Ollis:Proteína Expr. 114) T. Belinskaya, N. Pattabiraman, R. diTargiani, M. Choia y A. Saxena:
Purif.41, 433–440 (2005). Biochim. Biophys. Acta1824, 701–710 (2012).
86) L. Briseño-Roa, Z. Oliynyk, CM Timperley, AD Griffithsa y A. 115) CM Theriot, RL Semcer, SS Shah y AM Grunden: Arqueas
R. Fersht: Protein Eng. Des. Sel.24, 209–211 (2011). 2011, 565127 (2011).
87) AN Bigley, C. Xu, TJ Henderson, SP Harvey y FM Raushel: 116) DL Eaton: Neurotoxicologia 21, 101-111 (2000).
Vol. 43, núm. 1, 1 a 9 (2018) Desintoxicación enzimática de plaguicidas organofosforados 9

117) E. Hodgson y RL Rose: J. Biochem. Mol. Toxicol.21, 182-186 quím. Physiol.102, 169-174 (2012).
(2007). 132) A. Boskin, CD Tran y M. Franko: Reinar. Chem. Letón.7,
118) E. Hodgson y RL Rose: Pest Manag. Sci.64, 617–621 (2008). 267-270 (2009).
119) MRJ Foxenberg, BP McGarrigle, JB Knaak, PJ Kostyniak y 133) I. Walz y W. Schwack: J. Agric. Food Chem.55, 8177–8186 (2007).
JR Olson: Drug Metab. Dispos.35, 189-193 (2007). 134) G. Davila-Vazquez, R. Tinoco, MA Pickard y R. VazquezDuhalt:
120) RL Rose, J. Tang, J. Choi, Y. Cao, A. Usmani, N. Cherrington y Enzyme Microb. Technol.36, 223–231 (2005).
E. Hodgson: Scand. J. Entorno de trabajo. Salud31 (Supl. 1), 156–163, 135) A. Gaydess, E. Duysen, Y. Li, V. Gilman, A. Kabanov, O. Lockridge y
discusión, 119–122 (2005). T. Bronich: Chem. Biol. Interactuar.187, 295–298 (2010).
121) V. Kumar, CS Yadav, S. Singh, S. Goel, RS Ahmed, S. Gupta, R. 136) K. Tuovinen, E. Kaliste-Korhonen, FM Raushel y O. Hänninen:
K. Grover y BD Banerjee: Quimiosfera 81, 464–468 (2010). Fundam. Apl. Toxicol.23, 578–584 (1994).
122) AC Povey: Toxicología 278, 294-304 (2010). 137) PC Tsai, N. Fox, AN Bigley, SP Harvey, DP Barondeau y F.
123) V. Urlacher y RD Schmid: Curr. Opin. Biotechnol.13, 557–564 M. Raushel: Bioquímica 51, 6463–6475 (2012).
(2002). 138) L. Perezgasga, L. Sánchez-Sánchez, S. Aguila y R. VazquezDuhalt:
124) H. Schulze, RD Schmid y TT Bachmann: Anal. Chem.76, Apl. Biochem. Biotechnol.166, 1236-1247 (2012).
1720-1725 (2004). 139) L. Pei, WD McGuinn, G. Omburo, AH Zitzer, I. Petrikovics y
125) I. Nagy, G. Schoofs, F. Compernolle, J. Vanderleyden y R. De Mot: J. JL Way: Biotechnol. Apl. Biochem.20, 35–41 (1994).
Bacteriol. 177, 676–687 (1995). 140) ME Favretto, JC Cluitmans, GJ Bosman y R. Brock: J. Control.
126) J. Hernandez, NR Robledo, L. Velasco, R. Quintero, MA Pickard y R. Lanzamiento170, 343–351 (2013).
Vazquez-Duhalt: Pesticidas. Biochem. Physiol.61, 87–94 (1998). 141) LM Goncalves, H. Chaimovich, IM Cuccovia y SR Marana:
127) J. Jauregui, B. Valderrama, A. Albores y R. Vazquez-Duhalt: Péptido de proteína. Letón.21, 468–475 (2014).
Biodegradacion 14, 397–406 (2003). 142) VE Bosio, GA Islan, YN Martínez, N. Durán y GR Castro:
128) B. Lamb, DC Lamb, SL Kelly y DC Stuckey: FEBS Lett. 431, Crit. Rev. Biotechnol.36, 447–464 (2016).
343–346 (1998). 143) BJ Bruno, GD Miller y CS Lim: El r. Deliv.4, 1443–1467
129) B. Siminszky, FT Corbin, ER Ward, TJ Fleischmann y RE Dewey: (2013).
Proc. Natl. Acad. Sci. EE.UU96, 1750-1755 (1999). 144) MJ Rostro-Alanis, EI Mancera-Andrade, MB Gómez Patiño,
130) M. Barrett: El papel de las enzimas del citocromo P450 en el D. Arrieta-Baez, B. Cardenas, SO Martinez-Chapa y R. Parra:
metabolismo de los herbicidas. En AH Cobbs y RC Kirkwood (Eds.) Biocatálisis 2, 1-24 (2016).
Herbicidas y sus mecanismos de acción. Sheffield Academic, Sheffield, 145) R. Koyani, J. Pérez-Robles, RD Cadena-Nava y R.
Gran Bretaña, págs. 25–37, 2000. VazquezDuhalt: Nanotechnol. Rvdo.6, 405–420 (2017).
131) L. Sánchez-Sánchez, R. Román y R. Vázquez-Duhalt: Pesticidas. Bio-