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Producción in Vitro De: Vanilla Planifolia

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Recibido: 04.02.2020 I Aceptado: 14.03.

2020

Palabras clave: Conservación, cultivo in vitro,


orquídea, vainilla.

Producción in vitro de
Vanilla planifolia
CANDY CARRANZA ÁLVAREZ
candy.carranza@uaslp.mx
ALEJANDRA MORALES LÓPEZ
JUAN JOSÉ MALDONADO MIRANDA
FACULTAD DE ESTUDIOS PROFESIONALES ZONA HUASTECA, UASLP

La familia Orchidaceae, una de las plantas más antiguas,


cuenta con más de 800 géneros y más de 25 000
especies y se caracteriza por la
diversidad de las flores de sus plantas.
Las orquídeas se consideran
especies atractivas desde el
punto de vista ornamental,
económico y medicinal;
sin embargo, también
existe una de la que
su fruto es comestible,
la Vanilla planifolia
Jackson (Jack.)
ex. Andrews.

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Figura 1
a) Vaina de Vanilla planifolia b) Flor de Vanilla planifolia

Del género Vanilla existen cerca de 107 especies (González-Arnao et al., 2009, p. 574), es de clima
distribuidas en todos los continentes, excepto en cálido, se desarrolla en condiciones de luz y sombra
Oceanía; además, gran parte de estas especies (52) bajo temperaturas de entre 20 y 30 °C. Una vez que
se encuentra en las zonas cercanas a la costa tropical las vainillas se recolectan —y para que tengan las ca-
de América. La Vanilla planifolia es originaria de racterísticas de olor, sabor y textura deseados— se
México, los estados que la producen principalmente lleva a cabo un proceso de curado llamado beneficia-
son Veracruz, Oaxaca, Puebla y San Luis Potosí (Luna- do, el cual se divide en seis etapas: a) despezonado,
Guevara et al., 2016). Los municipios del estado b) matado, c) sudado, d) secado al sol, e) depósito
potosino que producen esta orquídea se ubican en la provisional y f) clasificación de las diferentes calida-
región Huasteca y son: Aquismón, Axtla de Terrazas, des para la venta (figura 2).
Coxcatlán, Huehuetlán, Matlapa, Tamazunchale y
Xilitla (Vargas-Hernández, 2014). Durante las etapas del proceso de producción de la
vainilla, es decir, tanto en el cultivo como en el bene-
Esta orquídea se caracteriza por producir un fruto ficiado, esta especie vegetal se asocia con microorga-
elongado llamado vainas de 10 a 35 centímetros nismos como los hongos (Soto-Arenas, 2006, p. 289),
(cm) (figura 1a) y una flor amarilla (figura 1b), la cual algunos de los cuales son patógenos (Colletotrichum
—a diferencia de otras— no se comercializa como de gloeosporioides, Phytophthora sp., Fusarium oxys-
corte, dado que su vida media es corta; algunos pro- porum, Sclerotium sp. y Alternaria alternata) (Gam-
ductores comentan que sus flores sólo permanecen boa-Gaitán, 2014), y otros son benéficos (Trichoderma
abiertas seis horas. sp., Tunasnella sp. y Epulorhiza sp.) (Fiorela-Ordóñez
et al., 2012), dado que pueden proporcionarle nutrien-
Usos de Vanilla planifolia. tes para su desarrollo. El fruto de la vainilla produce la
Jack. ex. Andrews vainillina, una molécula orgánica de fórmula molecular
Es una de las orquídeas de mayor importancia en C8H8O3 formada por tres grupos funcionales (un alde-
el mundo, debido a que su fruto se utiliza como sa- hído, un éter y un fenol). Gracias a este compuesto,
borizante y aromatizante (Bory et al., 2008, p. 552); la vainilla puede darle sabor a una gran variedad de
es una planta hemiepífita (terrestre) y la única espe- alimentos, de ahí también su importancia económica
cie del género Orchidaceae con frutos comestibles en todo el mundo.

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Figura 3
Cultivo de vainilla

Cultivo de la vainilla
En la Huasteca potosina los sistemas de cultivo y pro- La aplicación de técnicas biotecnológicas como el cul-
ducción de vainilla son tradicionales (figura 3). Para tivo de tejidos in vitro es eficaz para llevar a cabo la
lograr su reproducción, esta especie requiere poliniza- aclimatación simbiótica, proceso por el cual la plántula
ción artificial, aunque también se realiza naturalmente generada in vitro, se adapta fisiológica y gradualmen-
por polinizadores naturales (abejas género Melipona, te a los cambios del medio ambiente cuando ésta es
Euglossa viridisima y Eulamea) (Soto-Arenas, 2006, traspasada de un frasco de cultivo a una maceta, y es
p. 286). Sin embargo, si se requiere una producción simbiótica cuando este proceso se realiza en coordi-
abundante, es necesaria una fertilización artificial. Para nación con otro organismo vivo, por ejemplo, una mi-
que las plantas de vainilla puedan desarrollarse requie- corriza aislada de una planta de la misma especie que
ren de un soporte de madera denominado tutor. Su normalmente está presente en condiciones de campo,
ciclo de vida inicia con dos años de crecimiento vege- y la cual le ayudará a lograr su adaptación de forma más
tativo, en el tercer año de desarrollo es cuando inicia la rápida. El cultivo de tejidos vegetales (CTV) o propaga-
producción de frutos (Kelso-Bucio et al., 2012, p. 501). ción in vitro involucra diferentes técnicas de cultivo de
tejidos, órganos o células vegetales y consiste en rege-
La vainilla, al igual que el resto de las orquídeas, pre- nerar plantas a partir de explantes bajo condiciones de
senta problemas para su conservación debido a la luz y temperatura controlada, cultivados en medios nu-
amenaza de su hábitat natural y a la baja tasa de tritivos adecuados y en forma aséptica (sin gérmenes).
germinación —el proceso de germinación de las or-
quídeas es muy complejo, dado que requiere de la ¿Qué es el cultivo de tejidos vegetales (CTV)
simbiosis (interacción biológica) con algunos hongos o propagación in vitro?
específicos para un proceso ecológico denominado Como su nombre lo indica, es un conjunto de técnicas
micorrización (es decir, que se asocian a las raíces)—. que permiten elevar la tasa de propagación y multipli-
Por ello, actualmente se buscan diversas alternativas cación por encima de la que se obtiene con métodos
para lograr una producción masiva que garantice la tradicionales, es decir, son técnicas para clonar cientos
producción sustentable de esta especie. de especies vegetales a partir de una sola sección de

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tejido vegetal, en condiciones controladas, y sin tomar
en cuenta el espacio y la época del año. Esta técnica
es necesaria cuando las especies son difíciles de pro-
pagar o cuando se requiere contrarrestar la pérdida de
especies vegetales sobreexplotadas, por ejemplo, las
orquídeas, cuya semilla necesita hacer una simbiosis
con un hongo para reproducirse; esta asociación es
muy difícil de encontrar. Por el método de cultivo in
vitro puede tenerse más de 98 por ciento de germina-
ción de las semillas, a diferencia de los métodos tra-
dicionales donde en ocasiones sólo se obtienen tasas
de 1 a 10 por ciento.

Actualmente, en el Laboratorio de Ciencias Ambientales


de la Unidad Académica Multidisciplinaria Zona Huaste-
ca, ahora Facultad de Estudios Profesionales Zona Huas-
teca de la Universidad Autónoma de San Luis Potosí Figura 4
(UASLP), se cuenta con el cultivo in vitro de orquídeas Cuarto de cultivo de la Facultad de Estudios Profesionales
silvestres, de las cuales, tres especies se encuentran Zona Huasteca de la UASLP, en donde se resguardan cultivos
bajo alguna categoría de la NOM-059SEMARNAT-2010, in vitro de Vanilla planifolia Jackson ex. Andrews.
otras cinco son de interés económico u ornamental y
seis de importancia ornamental o medicinal. Entre es-
tas especies micropropagadas, la de Vanilla planifolia en medios de cultivo sintéticos semisólidos sin ningu-
(figura 4) ha sido sobreexplotada, por lo que ahora se na hormona vegetal. La germinación de las semillas se
encuentra en la categoría de protección especial. presentó después de cuatro meses de cultivo, y con
las plántulas resultantes se produjeron protocormos
Las orquídeas que hasta ahora se han propagado por (tejido primario del tallo en forma de grano de maíz).
técnicas del cultivo in vitro se mantienen en un cuarto Los protocormos formados se sembraron en nuevos
de cultivo con temperatura y fotoperiodo controlados medios de cultivo enriquecidos con sustratos natu-
(16 horas luz y 8 de oscuridad) (figura 4), y han sido rales en donde se evaluó la brotación. Después de
modelo de estudio de al menos 12 tesis de licenciatu- tres meses de cultivo aparecieron los primeros brotes,
ra y de posgrado, en las cuales se ha tratado de con- los cuales se multiplicaron dividiéndolos en yemas y
tribuir a la conservación de la naturaleza cultivando los resembrándolos en nuevos medios de cultivo.
valores de responsabilidad social y sustentabilidad que
caracterizan a la UASLP. El valor de la familia de orquí-
deas de la Huasteca potosina reside en su importan-
cia botánica, ecológica y científica, y por constituir un
componente de la biodiversidad, por ello se justifican
los estudios encaminados a conservar esta familia de
plantas y protegerla de las amenazas ambientales. La vainilla enfrenta
problemas de hábitat
Propagación in vitro de Vanilla
planifolia Jackson ex. Andrews
amenazado y baja
Para establecer el cultivo in vitro se utilizaron vainas tasa de germinación
maduras antes de la dehiscencia (apertura de la vaina
para liberar sus semillas), y las semillas se sembraron

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a) b) c)
Figura 5
Cultivo in vitro de Vanilla planifolia: a) y b) formación y multiplicación de brotes, c) aclimatación de plántulas.

Para garantizar la sobrevivencia de las plántulas for- la simbiosis con las mismas. Los resultados mostraron
madas en el cultivo in vitro, es necesario inducir la que el tratamiento que presentó un mayor efecto be-
aclimatación de las mismas de manera simbiótica néfico en el crecimiento y altura de los brotes in vitro,
con las micorrizas benéficas que tienen en campo. fue el que estaba suplementado con el extracto del
Para obtener las micorrizas, primero se recolecta- hongo, en donde los brotes crecieron aproximadamen-
ron hojas de V. planifolia sembradas en sistema de te 0.4 cm y formaron un brote nuevo en cada yema.
acahuatl —que consiste en limpiar el terreno, me- Estos resultados fueron significativos respecto a las
diante chapeos con machete o azadón en los meses plantas control que no tenían el extracto del hongo, y
de mayo a junio, para establecer la plantación en en donde no se observaron dichos efectos (figura 5a
la época de lluvia a principios del septiembre— en y b). Se considera que la inoculación de hongos en los
el municipio de Axtla de Terrazas. Las muestras de cultivos in vitro antes de que las plantas sean llevadas
hojas fueron tomadas en tres puntos de los cultivos al medio ambiente externo, puede favorecer su super-
y abarcaron la extensión completa. Las hojas fueron vivencia, dado que las micorrizas favorecen la liberación
segmentadas en secciones de aproximadamente de nutrientes, así como la producción de metabolitos
1 centímetro cuadrado (cm ) y se inocularon en agar
2
que estimulan el crecimiento y maduración vegetal.
papa dextrosa suplementado con bencilpenicilina (100
microgramos/mililitros µg/ml), un medio común de Posteriormente, las plántulas que alcanzaron una altu-
cultivo microbiológico, para lograr el crecimiento de los ra de 10 a 15 cm se aclimatan en pequeñas macetas
hongos endófitos de la planta. hasta lograr su adaptación (figura 5c). Actualmente se
desarrollan nuevos experimentos
Después de realizar algunos experimentos, se identifi-
caron los hongos benéficos, a partir de los cuales
se prepararon extractos fúngicos y se adi-
cionaron al medio de soporte de
las plántulas para lograr

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CANDY
CARRANZA
ÁLVAREZ

Obtuvo el Doctorado en
Ciencias Químicas de la
Facultad de Ciencias Químicas
y el Posdoctorado en Ciencias
Ambientales de la UASLP.
Es profesora investigadora
en la Facultad de Estudios
Profesionales Zona Huasteca de
la UASLP y trabaja en el proyecto
“Biotecnología vegetal aplicada
a estudios de fitorremediación
y micropropagación para la
conservación de especies
vegetales”.

para lograr la aclimatación de las plán- Referencias bibliográficas:


Bory, S., Grisoni, M., Duval, M.F. y Besse, P. (2007). Biodiversity
tulas en campo, y así proponer una and preservation of vanilla: present state of knowledge.
nueva forma de producir vainilla. Genetic Resources and Crop Evolution, 55(4), pp. 551-571.
Fiorela-Ordoñez, N. (2012). Efecto de hongos endofitos de
orquídeas del grupo Rhizoctonia y otros endofitos cultivables
Hoy se busca que nuestras investigacio- sobre el desarrollo de plantas de Vanilla planifolia Jacks.
nes se vinculen con los sectores socia- Universidad Nacional de Colombia Sede: Colombia.
González-Arnao, M. T., Lázaro-Vallejo, C. E., Engelmann, F.,
les y productivos, de manera que en un Gámez-Pastrana, R., Martínez-Ocampo, Y. M., Pastelin-So-
futuro cercano se logre la transferencia lano, M. C. y Díaz-Ramos, C. (2009). Multiplication and
cryopreservation of vanilla (Vanilla planifolia ‘Andrews’).
de tecnología desarrollada a los produc-
In Vitro Cellular & Developmental Biology. Plant, 45(5), pp.
tores de vainilla de la región Huasteca. 574-582.
Es importante mencionar que en este Kelso-Bucio, H., Ba, K. y Sánchez-Morales, S. (2012).
Estimación in situ del Kc de la vainilla (Vanilla planifolia).
proyecto participa de manera directa Agrociencia, 46(5), pp. 499-506.
la Sociedad Productora de Vainilla del Luna-Guevara, J., Luna-Guevara, M., Cruz-Díaz, Y.,
Leyva-Abascal, J., Silva, L. y Herrera-Cabrera, B. (2016).
Centro de Acopio y Beneficiado de Medidas y límites de control durante el proceso de
Vainilla, Palmilla, Café, Piloncillo y De- beneficiado de Vanilla planifolia Jacks ex. Andrews. AP
Agroproductividad, 9(11-B), pp. 49-50.
rivados del Grupo Antonio Calderón
(Ganca), S. P. R., de la Huasteca potosi-
na, con quienes se tiene un acuerdo de
colaboración para trabajar en conjunto y
generar información científica en bene-
ficio del desarrollo económico, social y
tecnológico en la región.

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