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Reporte de Práctica "Electroforesis en Geles de Agarosa"

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LICENCIATURA EN CIENCIAS BIOMÉDICAS

Reporte de práctica “Electroforesis en geles de agarosa”

ALUMNA: Figueroa Garcia Yaremy Guadalupe.-19050202

MATERIA: Laboratorio de Biología Molecular.

PROFESOR(A): Alejandra Paola Martinez Camberos. Mazatlán,


Sinaloa, Martes

22/Septiembre/2021.
Electroforesis en geles de agarosa

La electroforesis en geles de agarosa o poliacrilamida es una de las metodologías


más utilizadas en el laboratorio en todo lo relacionado con el trabajo con ácidos
nucleicos. Mediante la electroforesis podemos separar fragmentos de ADN y ARN
en función de su tamaño, visualizarlos mediante una sencilla tinción, y de esta forma
determinar el contenido de ácidos nucleicos de una muestra, teniendo una
estimación de su concentración y grado de entereza. Podemos además extraer del
gel los fragmentos de ADN que sean de interés, para posteriormente utilizarlos en
diferentes aplicaciones. (Padilla, C. A. 2018).

El término electroforesis se usa para describir la migración de una partícula cargada


bajo la influencia de un campo eléctrico. Muchas moléculas importantes
biológicamente (aminoácidos, péptidos, proteínas, nucleótidos, ácidos nucleicos…)
poseen grupos ionizables y existen en solución como especies cargadas, bien como
cationes, o bien como aniones. Estas especies cargadas se van a separar en
función de su carga cuando se aplica un voltaje a través de los electrodos. Existen
muchos tipos de electroforesis, que se engloban en dos categorías fundamentales:
-Electroforesis de frente móvil.
-Electroforesis de zona.

Actualmente, sólo se utiliza la electroforesis de zona, en la cual la muestra se


desplaza sobre un soporte sólido, como papel de filtro, celulosa o gel (agarosa,
acrilamida…) y los componentes de la muestra migran en forma de pequeñas
bandas, también llamadas zonas. (Fierro, F. 2015).
Observaciones
Se puede observar como mi prediccion era incorrecta, puesto que yo crei que se
moverian asi porque el amarillo era de menor tamaño entonces hipotetice que
bajaria primero, despues el azul y al final el morado porque era el de mayor tamaño,
pero al llevar a cabo el experiment y observar los resultados me doy cuenta que no
fue asi rederente al morado y al azul, el morado bajo antes que el azul porque el
morado al tener mayor tamaño tambien tiene mayor carga y pues tambien la carga
es un factor para que esto se mueva.
Cuestionario

1. ¿En función de qué parámetros separa las moléculas de la electroforesis


mediante gel de agarosa? R= en función de su carga, tamaño y forma. Se trata de
un medio de separación especialmente eficaz para las biomoléculas cargadas como
el ADN, el ARN y las proteínas.

2. ¿Por qué las bandas de menor peso molecular migran más rápidamente que
las de mayor peso molecular? R= Porque como bien lo dicen son de menor
tamaño por lo tanto su peso es menor y tienen más facilidad de deslizarse a través
del gel.

3. ¿Qué es el Bromuro de etidio? ¿Cómo marca a los ácidos nucleicos? R= El


bromuro de etidio (BrEt) es un agente intercalante (se intercala entre las bases
nitrogenadas) que se usa como colorante fluorescente para la visualización de
ácidos nucleicos en geles de agarosa y poliacrilamida. El BrEt absorbe luz
ultravioleta de λ ≈ 300 nm, y emite una luz anaranjada de 590 nm, mediante la cual
podemos observar la posición y cantidad relativa del ADN en el gel tras la
electroforesis.

4. ¿Existen otros reactivos, además del Bromuro de etidio, para marcar a los
ácidos nucleicos en electroforesis? R= Si, esta el GelRed.

5. ¿Cómo se moverá el ADN en un campo eléctrico? R= Ra carga neta negativa


del ADN y el ARN hará que estos se muevan en dirección al ánodo

6. ¿Qué otras macromoléculas pueden ser separadas por electroforesis en


gel? R= Proteínas, Y ¿Cuál es el polímero más utilizado para cada una de esas
macromoléculas? R= Poliacrilamida
Conclusión

La electroforesis en gel de agarosa es una técnica muy eficaz para y sencilla que
nos sirve para separar ácidos nucleicos, y esto es gracias a la alta resistencia del
gel de agarosa puesto que nos permite la manipulación de geles para la separación
de fragmentos de DNA, y ha demostrado ser una herramienta muy útil para el
estudio no solo del ADN sino de proteínas y ARN lo que nos favorece en diversos
analisis y diagnosticos.
Bibliografía

➔ Fierro, F. (2015). Electroforesis de ADN. INCC.


http://www2.inecc.gob.mx/publicaciones2/libros/710/electroforesis.pdfPadilla

➔ C. A. (2018). Electroforesis de ácidos nucleicos en geles de agarosa.


Aislamiento y caracterización electroforética de DNA plasmídico. Rabanales.
https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-mol/pdfs/17%20ELECTROFORESI
S%20ACS%20NUCLEICOS%20GELES%20AGAROSA.pdf

➔ Electroforesis en gel (artículo). (2016). Khan Academy.


https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulati
on/biotechnology/a/gel-electrophoresis

➔ Reactivos en electroforesis. (s. f.). Biomodel. Recuperado 13 de octubre de


2021, de http://biomodel.uah.es/tecnicas/elfo/reactivos/reactivos.htm

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