Perez Liliam Mamani Yoselin PDF
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TESIS
PRESENTADA POR:
PUNO – PERÚ
2023
DEDICATORIA
A Dios por ser la luz que ilumina mi camino día tras día.
A mis Padres Hernán Omar Perez y Liliana Verónica Catacora por su amor y apoyo
A mi hermana Naommy por motivarme a cumplir cada una de mis metas y objetivos
trazados.
A mi padre Pedro (✟) sé que está feliz de verme concluir este proyecto, a mi madre
Luisa que siempre estuvo apoyándome día y día en toda mi etapa universitaria, a mis
Por último, a mi compañero de aventuras por siempre ser quien me impulsa a seguir
A nuestra alma mater la Universidad Nacional del Altiplano por brindarnos la calidad
investigación.
investigación.
De igual manera, deseamos expresar nuestra gratitud al Dr. James Arredondo, por
A nuestros seres queridos por su apoyo y motivación durante toda nuestra etapa
universitaria.
ÍNDICE GENERAL
Pág.
DEDICATORIA
AGRADECIMIENTOS
ÍNDICE GENERAL
ÍNDICE DE TABLAS
ÍNDICE DE FIGURAS
ÍNDICE DE ACRÓNIMOS
RESUMEN .................................................................................................................... 13
ABSTRACT................................................................................................................... 14
CAPÍTULO I
INTRODUCCION
CAPÍTULO II
REVISIÓN DE LITERATURA
CAPÍTULO III
MATERIALES Y MÉTODOS
3.7.1. Para evaluar el peso en los animales de experimentación (ratas wistar). ...... 55
3.7.2. Para determinar la función hepática y renal en ratas tipo wistar. .................. 55
........................................................................................................................ 58
CAPÍTULO IV
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
2021. ........................................................................................................................ 68
hepático. ......................................................................................................... 68
........................................................................................................................ 69
gástrico. .......................................................................................................... 70
hepático. ......................................................................................................... 71
........................................................................................................................ 72
gástrico. .......................................................................................................... 73
gástrico. .......................................................................................................... 77
4.3.10 Grupo aumento de peso: Evaluación microscópica histológica de tejido
hepático. ......................................................................................................... 78
........................................................................................................................ 79
gástrico. .......................................................................................................... 80
V. CONCLUSIONES ................................................................................................... 82
ANEXOS ........................................................................................................................ 94
Pág.
Tabla 1. Valor nutricional del batido formula 1 de Herbalife®. ................................ 32
Wistar. .......................................................................................................... 36
de peso. ........................................................................................................ 63
peso. ............................................................................................................. 66
ÍNDICE DE FIGURAS
Pág.
Figura 1. Etiqueta Nutricional del batido Formula 1 de Herbalife®. .......................... 33
FA : Fosfatasa Alcalina.
A nivel mundial existen una gran variedad de suplementos dietéticos que tienen
divididos en 5 grupos; grupo control general, grupo de reducción de peso formado por
formado por dos subgrupos; control y experimentales inducidos a delgadez, cada grupo
estuvo compuesto por 7 muestras animales. La variable peso se evaluó semanalmente, las
grave e inflamacion leve de la mucosa gástrica. Se concluye que el consumo del batido
Gastrotoxicidad, Nefrotoxicidad.
13
ABSTRACT
Worldwide there are a wide variety of dietary supplements that are very popular.
was carried out with the objective of evaluating the effect of consumption of the
the hepatic, renal and gastric level in wistar rats; the study is prospective experimental.
The sample consisted of 35 experimental animals, divided into 5 groups; general control
group, weight reduction group formed by two subgroups; control and experimental
induced overweight; weight gain group formed by two subgroups; control and
experimental induced to thinness, each group consisted of 7 animal samples. The weight
ALT, FA, and GGT; Renal function through urea, creatinine and albumin markers. T-
student was applied in the statistical treatment and differential comparison, resulting in
weight gain and reduction in the experimental groups with the Herbalife formula 1 shake;
Elevated levels were found in markers of liver and kidney function (p=0.001), histological
convoluted tubules and congestion in the renal cortex, and severe generalized congestion
and mild inflammation of the gastric mucosa. It is concluded that the consumption of
Herbalife® formula 1 shake causes alterations in liver and kidney tissue, expressed
Gastrotoxicity, Nephrotoxicity.
14
CAPÍTULO I
INTRODUCCION
En los últimos años, la información sobre una adecuada alimentación para tener
buena salud se ha evidenciado con investigaciones de alto nivel científico. Una buena
saludables. Una dieta balanceada es aquella que proporciona al organismo los macro y
micronutrientes necesarios para realizar sus funciones vitales. Sin embargo, los contextos
culturales, sociales y los estereotipos de belleza en la población tienen una gran influencia
alimentarias.
procesados y comidas rápidas con alta densidad calórica pero deficiente de nutrientes
esenciales. Frente a esta realidad surge el uso de suplementos dietéticos los cuales
constituyen una estrategia efectiva para la reducción y aumento de peso. Existe una gran
En el Perú, los suplementos dietéticos están regulados bajo el mismo marco legal
que los medicamentos, a diferencia de Europa que son regulados bajo el marco legal de
creciente y de salud pública debido al uso prolongado de estos productos que representa
15
un riesgo para la salud, por ello es importante la investigación de estos productos para
y analiza los resultados obtenidos en esta investigación, los mismos que se ordenan en
referencias bibliográficas.
personas buscan patrones socioculturales de un cuerpo ideal, tanto varones como mujeres
(IMC) es un indicador de la relación entre el peso y la talla que se utiliza para evaluar el
duplicado en todo el mundo, llegando en el año 2014 a más de 1 900 millones de adultos
mayores de 18 años con sobrepeso, de los cuales, más de 600 millones con obesidad, lo
que implica una prevalencia en adultos mayores de 18 años de 39% de sobrepeso y 13%
de obesidad (2).
16
La obesidad y sobrepeso contribuyen de manera significativa al desarrollo de
año 2017, indican que el 58% de los habitantes de la región viven con sobrepeso (360
mismo grupo de edad sufren de obesidad, siendo las mujeres las más afectadas en
peso y de esta manera solucionar sus problemas de salud y objetivos estéticos, recurriendo
Latinoamérica.
17
por distribuidores independientes o por Internet (7), entre los diferentes productos que
años aproximadamente, teniendo una gran acogida en los diferentes grupos etarios, está
por los que atraviesa la población actual, recurren a “suplementos dietéticos” para obtener
resultados rápidos sin tener en cuenta que hay diversos tipos de usos de los suplementos,
fórmula 1 de la empresa Herbalife® desde 2007 en diversos países del mundo como
hepatotoxicidad por suplementos nutricionales osciló entre el 2 y 11% (9). Los estudios
hepatotoxicidad (9).
sofisticados, haciendo uso de las Tecnologías de Información de forma masiva para llegar
18
Tomando en cuenta lo descrito y la tendencia cada vez mayor al consumo de este
generar información que permita conocer los efectos orgánicos del consumo de
Herbalife®, con la finalidad dirigir las decisiones respecto a su venta y distribución, así
como la decisión del consumidor frente a un producto que ofrece diversas y diferentes
opciones de uso, entre ellas el control del peso corporal, así como identificar y comprobar
¿Cuál será el efecto del consumo del batido formula 1 de Herbalife® para reducción y
Puno -2021?
Interrogantes específicas
1. ¿Cuál será el efecto del consumo del batido formula 1 de Herbalife® en la variación
3. ¿Cuál será el efecto del consumo del batido formula 1 de Herbalife® en la función
implica una presión significativa para la población en general. De tal manera que, se
asume la delgadez como valor altamente positivo y modelo corporal de imitar, ello
implica triunfo, éxito y control sobre sí mismo. Por el contrario, el no ser delgado o el
19
hayan hecho intentos de alcanzar la figura deseada. De acuerdo con los modelos
difundidos por los medios de comunicación, existe una preocupación excesiva por el peso
alimentaria (10).
productos que son atraídos por la publicidad referida a la reducción o aumento de peso
según sea el objetivo del consumidor, sin tomar en cuenta los efectos negativos para su
salud (11).
amplia gama de afecciones, que incluyen pérdida de peso, salud digestiva, salud cardíaca,
inmunidad (6), teniendo en cuenta que esta empresa tiene un producto con mayor acogida
según sea el objetivo del consumidor, el consumo considera sustituir tiempos de comida
por determinadas dosis del batido o caso contrario incluir el batido en cada tiempo de
comida (12).
polémica pues los testimonios de daño a la salud son cada vez más polémicos, son
contrarios a la promoción de buena salud que exhiben sus etiquetas y publicidad brindada
a la población consumidora.
20
El estudio tiene como finalidad de evaluar los posibles daños a la salud de la
población, por el consumo del batido formula 1 de Herbalife® que está ampliamente
distribuido en diferentes puntos de venta del país y de la región de Puno en la que tiene
e histológica en el hígado, riñón, nivel gástrico en ratas tipo wistar Puno – 2021.
21
Hipótesis Específicas.
22
CAPÍTULO II
REVISIÓN DE LITERATURA
2.1. ANTECEDENTES
2.1.1. Internacionales:
estos casos condujeron a una investigación del Ministerio de Salud en todos los
hospitales israelíes, de los cuales 12 pacientes con lesión hepática idiopática aguda
los resultados; 11 de los pacientes eran mujeres entre 13,4 y 49,5 años. Un paciente
diagnosticó daño hepático agudo después de 11.9 +/- 11.1 meses de inicio del
(13).
23
Manso G. et al (2011). En el estudio “Continuous reporting of new cases
in Spain supports the relationship between Herbalife® products and liver injury”.
de pacientes con daño hepático, encontraron casos en 16 mujeres, con una edad
24
de causalidad utilizando los criterios CI OMS. Teniendo como resultado; 12 casos
de edad de los pacientes fue de 51 años (rango 30-69) y la latencia de inicio fue
frente a los casos de DILI por medicación convencional y los casos DILI por
esteroides anabolizantes (EAA). Dando como resultado de los 856 casos incluidos
25
(HDS-DILI) y 20 a esteroides anabolizantes (EAA-DILI). En el Registro
por HDS fueron predominantemente mujeres (63%), mientras que los casos por
EAA fueron todos hombres. La edad media de los casos HDS-DILI fue más alta
que en los casos de EAA-DILI, pero menor que en pacientes DILI por medicación
DILI en el Registro Español presentaron unos valores medios más altos de ALT
(37xLSN) comparados con los inducidos por EAA (14xLSN) y los asociados con
bilirrubina total fueron más bajos que en los casos de EAA (8.9 vs 17xULN)
daño hepatocelular fue el más frecuente en todos los grupos, no obstante, los HDS
Ningún caso por EAA desarrollo FHF. La presencia de re-exposición fue más
con valores de transaminasas más altos, mayor gravedad llevando a FHF y re-
exposición inadvertida. Las plantas medicinales que con más frecuencia producen
casos de DILI fueron Camelia sinensis y los productos de Herbalife®. Por ello es
26
necesaria mayor concienciación y una regulación más estricta para prevenir
the use of Herbalife®”. En una encuesta de Islandia sobre las reacciones adversas
método RUCAM. Teniendo como resultado que los cinco casos había cuatro
colestásica. Los valores medios fueron para bilirrubina 190 umol/L (rango: 26-
311; ref. <20 umol/L), ALP 407 U/L (rango: 149- 712; ref. 35-105 U/L) y ALT
causalidad según RUCAM fue probable en tres casos y posible en dos, el uso de
27
Chen G, et al (2010). En el estudio “Acute liver injury induced by weight-
loss herbal supplements”. Reportaron tres casos de pacientes con lesión hepática
aguda inducida por suplementos herbales para bajar de peso. Donde analizaron un
consistentes con lesión hepática aguda inducida por el consumo de dos tipos de
suplementos herbales para bajar de peso juntos como una serie de casos.
y reducción de peso son los productos naturales que más han reportado
debe incluir información sobre el inicio del consumo del producto natural, el
variables. Con la cesación del agente implicado, los signos clínicos generalmente
28
valoración de efectos adversos se utiliza la escala de CIOMS/RUCAM (Council
los productos Herbalife®, que se espera que supere a los Estados Unidos en
2.1.2. Nacional
29
suplementos nutricionales como el Batido Nutricional y el Té Concentrado de
fue de que del 100 % de las muestras (5 personas) con niveles de sobre peso,
Ofrece productos que están diseñados para alcanzar los objetivos deseados por los
consumidores (22).
incluyen productos para la piel, que contienen sábila, Vit C y Vit B3; y
30
a. Batido Fórmula 1 de Herbalife®.
incluye el consumo de 2 cucharadas del producto (25 gramos) con 240ml de leche
semidesnatada (baja en grasa) o con agua, zumos de frutas u otros tipos de leche.
tanto para la reducción de peso, como para el aumento del mismo. El uso, que
31
Tabla 1. Valor nutricional del batido formula 1 de Herbalife®.
Porción: 2 cucharas medidoras (25 gr.)
Porción por envase: 22
Cantidad por Porción Cantidad de Porción de Polvo + 240 ml.
(2 cucharas medidoras) leche descremada
Calorías 90 kcal 170 kcal
Proteínas 9g 17 g
Carbohidratos 13 g 25 g
Grasas <1 g 1g
Fibra Dietética 3g 3g
Sodio 95 mg 200 mg
Potasio 190 mg 570 mg
CANTIDAD POR PORCION
VITAMINAS MINERALES
Vitamina A 350 mcg Calcio 71 mg
Vitamina D 2.5 mcg Hierro 2.4 mg
Vitamina E 7.5 mg Magnesio 40.0 mg
Vitamina C 14 mg Zinc 4.3 mg
Tiamina 0.4 mg Cobre 0.5 mg
Riboflavina 0.4 mg Molibdeno 15 mcg
Niacina 5 mg Selenio 15 mcg
Vitamina B6 0.5 mg Cromo 12 mcg
Ácido Fólico 87 mcg
Vitamina B12 1.4 mcg
Biotina 67 mcg
Ácido pantoténico 2.8 mg
Fuente: Etiqueta nutricional batido formula 1 de Herbalife® (2014)(26).
32
Figura 1. Etiqueta Nutricional del batido Formula 1 de Herbalife®.
Fuente: Etiqueta nutricional (2014)
cómo lo harían las personas, además son criados para utilizarse en experimentos,
Actualmente las ratas Wistar son una de las cepas más utilizadas
33
procedimientos comprenden el crecimiento de ciertas partes del cuerpo como la
permitan reflejar las condiciones del estado nutricional en la que se encuentran los
mismos (29).
se utilizan ratas Wistar como herramientas de investigación. Estas ratas son una
de las cepas más utilizadas en los laboratorios debido a su importante papel como
animal, controlando las variables de estudio para predecir con precisión los
salud para reflejar el estado nutricional de los roedores. Esto se debe a que muchos
34
procedimientos quirúrgicos, administración de medicamentos y suplementos,
35
Tabla 2. Peso corporal en gramos en función de la edad cronológica en días de ratas Wistar.
Valores de referencia del peso corporal (g) para ratas machos en función de la edad cronológica (días)
21 0.38 62.71 0.16 44.40 50.10 56.20 62.70 69.70 77.20 85.10
28 0.59 101.47 0.15 73.30 82.30 91.70 101.50 111.70 122.30 133.30
35 0.79 143.12 0.13 105.90 180.00 130.40 143.10 156.00 169.20 182.50
42 0.98 185.78 0.12 141.00 155.90 170.80 185.80 200.70 215.70 230.70
49 11.63 226.30 0.11 176.30 193.20 209.90 226.30 242.60 258.60 274.60
56 13.04 263.28 0.10 210.10 228.30 246.00 263.30 280.30 296.90 313.30
63 13.89 295.93 0.09 241.00 259.80 278.10 395.90 313.30 330.40 347.10
70 14.16 323.68 0.08 267.80 286.90 305.50 323.70 341.40 358.80 375.80
77 13.89 346.57 0.08 290.10 309.40 328.20 346.70 364.60 382.30 399.70
84 13.19 365.46 0.08 308.20 327.60 346.70 365.50 383.90 402.10 420.00
91 12.28 380.98 0.08 322.40 342.20 361.70 381.00 400.00 418.90 437.60
98 11.14 393.78 0.08 333.30 353.60 373.80 393.80 413.40 433.40 453.00
105 10.07 404.79 0.08 342.00 363.00 383.90 404.80 425.60 446.90 467.00
112 10.09 415.12 0.08 349.70 371.50 393.30 415.10 436.90 458.70 480.50
Fuente: Cossio M. (2013).
36
2.1.4. Marcadores bioquímicos, características histológicas y funcionales del
con el ser humano muchos de sus procesos metabólicos y bioquímicos, por lo cual
células, tejidos y órganos. También nos ayuda a entender las relaciones entre las
a. Función hepática
proteínas (35).
37
Ninguna prueba por sí sola puede proporcionar una evaluación completa del
hígado, los laboratorios utilizan una serie de pruebas para apoyar al diagnóstico y
enzima presente en diversos órganos como; corazón, hígado y células del músculo
los altos niveles de AST están asociados con enfermedad hepática (37).
para convertir las proteínas en energía. Cuando el hígado está dañado, la enzima
ALT se libera en el torrente sanguíneo y su nivel aumenta. Es por esto que la ALT
PARAMETRO RANGO
AST (IU/L) 24- 53
ALT (IU/L) 77 - 157
FA (IU/L) 132- 312
GGT (IU/L) 0.1 - 1.05
Bilirrubina Total
(mg/dL) 0.1 - 0.21
Fuente: Vargas JJ (2020)(32).
c. Histología hepática.
38
de estas sustancias provocar hepatotoxicidad (39) (42). Este órgano presenta una
conteniendo la mayor parte de sustancias que han sido absorbidas por el intestino.
sometido, los hepatocitos cuentan con mecanismos eficientes para enfrentar las
d. Función renal.
(43).
e. Riñón
corteza. Además, el seno renal de Malpighi está paralelo a la médula renal hasta
consumo excesivo de proteína podría tener una un efecto renal adverso. Una
39
renal (el mecanismo propuesto como origen del daño renal) podría ser una
renal (41).
40
Figura 3. Efectos de la dieta hiperproteica.
El gráfico describe los efectos metabólicos del consumo elevado de proteínas sobre la producción
de úrea.El consumo de lípidos favorece a la pérdida de peso por el contrario el consumo alto de
albúmina.
g. Creatinina
creatina por parte del músculo y se excreta por vía renal sin sufrir reabsorción
e hipotiroidismo;). Debemos tener en cuenta que existe una relación entre urea y
creatinina (49).
h. Urea
41
El incremento de la concentración de urea plasmática y/o la ratio de filtración
modelos animales desde hace años. Al ser necesario filtrar más urea, tiene que
(50).
autor, es necesario prestar mayor atención a los posibles efectos renales adversos
i. Albúmina
otras porciones del suero contienen cantidades más pequeñas de albúmina. Cada
del 24 % en el riesgo de muerte. Este riesgo aumentó hasta un 56% para los
42
Tabla 4. Marcadores bioquímicos normales en ratas Wistar
PARAMETRO RANGO
Albumina (g/dL) 3.2-4.3
Urea (mg/dL) 31.6-52.6
Creatina (mg/Dl) 0.15-0.35
mucosa, que es la capa más externa; luego viene la submucosa, que se encuentra
debajo de ella; lo muscular se encuentra entre ellos; y, por último, está la serosa.
(53).
células madre que crean nuevos tipos de células maduras. Los estómagos albergan
ácido clorhídrico y factor intrínseco; y células endocrinas tales como células tipo
43
En las criptas intestinales, las células epiteliales del intestino delgado
Otros tipos de células presentes en las criptas son las células endocrinas que
llamadas células M que recubren las placas de Peyer, o grandes grupos de folículos
En la figura se
muestra la mucosa,
criptas de Lieberkühn
y las células que
componen el intestino
delgado.
nutrientes.
44
La epidermis y la dermis se asientan sobre las capas de la submucosa y la
sanguíneos (55).
es una extensión del sistema nervioso entérico. Junto a este plexo hay una capa de
divide en dos subcapas. El plexo nervioso mientérico, que reside entre los
través del tubo digestivo. El tejido seroso se encuentra fuera del tracto digestivo
45
de forma crítica la función barrera, por lo que el conocimiento de su regulación y
la forma en que modulan los cambios en las células epiteliales es esencial para
para el control del peso que comercializa suplementos dietéticos y a base de hierbas,
para una amplia gama de condiciones que estas incluyen la pérdida de peso, la salud
presentado como una opción nutritiva que contribuye en el control de peso junto a
- Rata Wistar: es una rata albina que se desarrolló en el Instituto Wistar en 1906. Fue
creada para servir como modelo de investigación para los científicos que estudian
gel, cápsulas y otras formas. Existen suplementos de vitaminas, minerales, fibra, hierbas o
46
CAPÍTULO III
MATERIALES Y MÉTODOS
longitudinal.
Puno que está ubicado en la región sur este peruano con una altitud de 3829 msnm; en el
Humana.
adultas hembras, con un peso promedio de 255 gr ± 10 gr, edad 90 días distribuidos en 5
grupos. Las ratas de estudio tuvieron como origen el Bioterio de la Universidad Católica
estándar de fotoperiodo (12h luz/12h oscuridad), temperatura ambiental (22 ± 2°C), agua
finalidad de que se adapten a su entorno ambiental; además durante este periodo fueron
sobrepeso y delgadez.
47
Se empleó el cálculo de tamaño muestral en procedimientos de experimentación con
resultados (61).
Donde:
proyecto.
A =100-% de incidencia 1.
B = 100-% de incidencia 2.
Criterios de inclusión
Criterios de exclusión:
48
3.4. OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES
VARIABLE INDICADOR INDICE
-Dosis de batido fórmula 1 de Herbalife suministrados 1.Dosificación en gramos de acuerdo a la relación del peso
para ganancia de peso.
Consumo de batidos Herbalife 0.25 gramos para el aumento de peso.
VARIABLE
peso.
INDEPENDIENTE
PÉRDIDA O GANANCIA DE PESO: El animal de experimentación respecto al primer pesaje ha
tenido una pérdida o ganancia de peso según el grupo que pertenezca.
Variación del peso corporal Se evaluará la diferencia entre el peso basal y el peso
final. PESO NORMAL: 240g -260g
1. Evaluación del nivel basal y final a comparación del 1. FUNCIÓN RENAL NORMAL (32):
VARIABLE DEPENDIENTE
grupo control variación de los niveles bioquímicos.
PARAMETRO RANGO
2. Examen histológico de integridad del tejido renal.
Pruebas bioquímicas e histológicas de Albumina(g/dL) 3.2 - 4,3
la función renal
Urea (mg/dL) 31.6 - 52.6
49
3.5. DISEÑO EXPERIMENTAL.
FASE I – ADAPTACION
Duración: 14 días
- Jaula de polipropileno
- Bebedero
Acondicionamiento del bioterio. - Recipiente para comida
- Lecho
Recepción de los animales de Aplicación de ficha N°1 (Anexo Nº1)
experimentación
Alimentación. • Alimento balanceado.
• Agua.
-Dia 15: Toma de exámenes bioquímicos: Bilirrubina, AST, ALT, FA, GGT, Urea, Creatinina y Albumina en la ficha de control de datos
bioquímicos (Anexo Nº4).
-Días 7 y 15: Evaluación de peso y talla de los animales de experimentación (Anexo Nº1).
FASE II – INDUCCION
Duración: del día 15 al día 50.
GRUPO REDUCCION DE GRUPO AUMENTO DE CONTROL GENERAL
PESO PESO
7 animales de experimentación
14 animales de experimentación 14 animales de experimentación
Inducción a sobrepeso u obesidad Inducción a reducción de peso Mantenimiento de peso corporal
50
-Dieta hipercalórica - Alimentación rica en fibra. -Dieta balanceada.
-Agua ad libitum con sacarosa al - Dieta hipocalórica -Agua ad libitum
20%.
- Agua ad libitum. -Ficha de control de evaluación de peso corporal (Anexo Nº2)
-Ficha de control de evaluación
de peso corporal (Anexo Nº2). - Ficha de control de evaluación
de peso corporal (Anexo Nº2).
- Dia 51 Toma de exámenes bioquímicos: Bilirrubina, AST, ALT, FA, GGT, urea, creatinina y albumina en la ficha de control de datos
bioquímicos (Anexo Nº4).
-Evaluación de peso a los animales de experimentación cada 7 días (Anexo Nº1).
FASE III- EXPERIMENTAL
Duración: del día 51 al 120
GRUPO REDUCCION DE PESO GRUPO AUMENTO DE PESO CONTROL GENERAL
CONTROL EXPERIMENTAL CONTROL EXPERIMENTAL
7 animales de experimentación
7 animales de 7 animales de 7 animales de 7 animales de
experimentación experimentación experimentación experimentación
Alimentación - Alimentación rica -Dieta -Dieta Mantenimiento de peso corporal
rica en fibra. en fibra. hipercalórica hipercalórica
-Dieta -Dieta balanceada.
hipocalórica -Dieta hipocalórica -Agua ad -Agua ad libitum.
libitum. -Agua ad libitum
-Agua ad -Agua ad libitum. - Batido formula 1
libitum. -Ficha de control de Herbalife 0.13 -Ficha de control de evaluación de peso corporal (Anexo
-Ficha de control de evaluación de gr/día. Nº3)
de evaluación de
51
peso corporal -Batido formula 1 peso corporal -Ficha de control
(Anexo Nº3). de Herbalife (Anexo Nº3). de evaluación de
0.25gr/día. peso corporal
(Anexo Nº3).
-Ficha de control
de evaluación de
peso corporal
(Anexo Nº3).
-Dia 121: Eutanasia a los grupos de animales en experimentación y control.
-Evaluación cada 7 días del peso de los animales de experimentación una vez por semana (Anexo Nº1).
-Toma de exámenes bioquímicos: Bilirrubina, AST, ALT, FA, GGT, Urea, Creatinina y Albumina en la ficha de control de datos bioquímicos
(Anexo Nº4).
-Examen histopatológico de tejido hepático, renal, gástrico.
-Comparación del grupo control con el grupo experimental.
52
3.6. MATRIZ DE CONSISTENCIA
53
2. ¿Cuál será el 2. Determinar el histopatológicas de la
efecto del consumo efecto del consumo función renal
del batido formula 1 del batido formula 1
de Herbalife® en la de Herbalife® en la 4. Prueba
función hepática, función hepática, histopatológica
renal y gástrica en renal y gástrica en gástrica
ratas tipo wistar, ratas tipo wistar
Puno - 2021? Puno – 2021.
3. ¿Cuál será el 3. Determinar el
efecto del consumo efecto del consumo
del batido formula 1 del batido formula 1
de Herbalife® en la de Herbalife® en la
morfoestructural morfoestructural
hepática, renal y hepática, renal y
gástrica en ratas tipo gástrica en ratas tipo
wistar, Puno – 2021? wistar Puno – 2021
54
3.7. MÉTODOS, TÉCNICAS, PROCEDIMIENTOS E INSTRUMENTOS PARA
LA RECOLECCIÓN DE DATOS.
- Método: Antropometría.
- Procedimientos:
• El animal fue introducido en el recipiente con tapa, para proceder a la toma del
peso.
registro de datos.
Método: Bioquímico
Técnica: Espectrofotometría
Procedimientos:
ratas wistar.
suero sanguíneo.
55
Tabla 5. Descripción de procedimiento de los marcadores bioquímicos
Marcadores Condiciones del ensayo Ajuste del Cantidad de Tiempo de Lectura de la absorbancia Cálculos
espectrofotómetro muestra mezcla y T°
de
incubación
Fosfatasa - Longitud de onda: 405 En cero frente a agua -RT (mL) 1,2 Durante un Muestra inicial; lectura de la El promedio de la diferencia de
Alcalina nm destilada o aire. minuto. absorbancia cada minuto absorbancia por minuto
(FA) (62). -Muestra (uL) durante 3 minutos. (∆A/min).
-Cubeta: 1 cm paso de luz 20
-Temperatura constante
25ºC / 30ºC / 37ºC
Alanina- -Longitud de onda: 340 En cero frente a agua -RT (mL) 1,0 Durante un Muestra inicial; lectura de la El promedio de la diferencia de
amino nm destilada o aire. minuto. absorbancia cada minuto absorbancia por minuto
transferasa -Muestra (µL) durante 3 minutos. (∆A/min).
(ALT) (63). -Cubeta: 1 cm paso de luz 100
-Temperatura constante:
25ºC / 30ºC / 37ºC
Aspartato- -Longitud de onda: 340 En cero frente a agua -RT (mL) 1,0 Durante un Muestra inicial; lectura de la El promedio de la diferencia de
amino nm destilada o aire. minuto. absorbancia cada minuto absorbancia por minuto
transferasa -Muestra (µL) durante 3 minutos. (∆A/min).
(AST) (64). -Cubeta: 1 cm paso de luz 100
-Temperatura constante:
25ºC / 30ºC / 37ºC
-Longitud de onda: 405 En cero frente a agua -Muestra (µL) Durante un Muestra inicial; lectura de la El promedio de la diferencia de
nm destilada o aire. 100 minuto. absorbancia cada minuto absorbancia por minuto
Gamma- durante 3 minutos. (∆A/min).
glutamil -Cubeta: 1 cm paso de luz
transferasa
(GGT) (65). -Temperatura constante:
25ºC / 30ºC / 37ºC
Bilirrubina -Longitud de onda: 555 En cero frente a agua Blanco B Total 5 minutos a Lectura de la absorbancia (A).
(66). nm (530-580) destilada 15-25ºC.
-R 1 (mL) 1,5
-Cubeta: 1 cm paso de luz 1,5
56
-Temperatura: 15-25ºC -R 2 (µL) -- 50
(Nota 1) / -
Calibrador (µL)
100 100
Albumina -Longitud de onda:. 630 En cero frente a agua Blanco Patrón 10 min a Lectura de la absorbancia (A) del
(67). nm (600-650) destilada. Muestra temperatura Patrón y la muestra, frente al
ambiente Blanco de reactivo. El color es
-Cubeta: 1 cm paso de luz -R (mL) 1,0 1,0 (15-25ºC). estable 1 hora a temperatura
1,0 ambiente.
-Temperatura:
-Patrón (Nota1-
15-25ºC 2) (µL) 5 -
-Muestra (µL) 5
Urea (68). -Longitud de onda:340 nm En cero frente a agua Blanco Patrón Lectura de las absorbancias a Calcular: ∆A= A1 – A2
destilada. Muestra los 30 s (A1) y a los 90 s (A2).
-Cubeta:1 cm paso de luz
-RT (mL) 1,0
-Temperatura: 1,0 1,0
37ºC / 15-25ºC -Patrón (Nota2-
3) (µL) 10 -
-Muestra (µL)
10
-Longitud de onda: 492 En cero frente a agua Blanco Patrón Lectura de la absorbancia (A1) Calcular: ∆A= A2 – A1.
nm (490-510) destilada. Muestra al cabo de 30 segundos y al
cabo de 90 segundos (A2) de la
-Cubeta:.1 cm paso de luz -RT (mL) 1,0 adición de la muestra.
Creatinina 1,0 1,0
-Temperatura:
(69). -Patrón -
37ºC / 15-25ºC (Nota1,2)
(µL) 100
-Muestra (µL)
100
57
3.7.3. Determinación de la morfoestructura hepática, renal y gástrica en ratas
wistar.
-Método: Descriptivo.
4. Lectura en gr.
3. Lectura en cm3.
-Método: Histológico.
58
-Instrumento: Lamina histológica, micrótomo, equipo de disección
-Procedimiento:
creciente para eliminar el agua que contenga ya que la parafina no es miscible con
4. Aclaración: Xilol.
pirámide truncada.
8. Colocación sobre portaobjeto: Los cortes fueron colocados en agua tibia para
59
13. Aclaración: Se utilizó xilol, para diluir la resina adhesiva utilizada para pegar
el cubre objeto.
en una base de datos en Microsoft Excel 2019 para luego aplicar estadística
60
CAPÍTULO IV
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
0.001.
por los cambios que genera al utilizar la dosis indicada (24), el batido cubre el 50% de
(12) Sepúlveda (2015) encuentra que un balance energético negativo prolongado provoca
que el organismo pierda masa corporal, principalmente del tejido adiposo, actuando como
61
Herbalife encontró un efecto de reducción de peso en los participantes (21). Al igual que
batido formula 1 de Herbalife, es importante señalar que con una dieta del grupo control
(hipocalórica) también se logró la reducción de peso. Por lo tanto, con el batido formula
experimental
0.002.
consumir la dosis indicada (24), el batido cubre el 50% extra del requerimiento energético
diario; ya que, se recomienda complementar dos tiempos de comida con el batido (12).
Vargas y cols (2011) produce un balance energético positivo; ya que se incorporan más
calorías de las que se gastan y, como consecuencia, hay un incremento de peso y el exceso
de calorías se almacena en forma de grasa en los depósitos del tejido adiposo corporal
(73).
62
No se dispone estudios similares investigaciones con el consumo del batido
hipercalórica).
63
En la tabla 8 se observa la media de los marcadores bioquímicos del grupo de
reducción de peso de la función hepática, los valores del subgrupo experimental donde el
AST incremento 12.9 IU/L, ALT; 76 IU/L, FA se elevó 168 IU/L , el GGT triplico su
valor del pre experimental (post inducción sobrepeso) ,en la función renal se observa un
leve incremento teniendo un p- valor de 0.000 – 0.0001 y aunque los valores se muestran
llevando al límite de los valores normales en los marcadores bioquímicos de AST, ALT,
FA, GGT y bilirrubina (53). Cortés (2009) indica que las transaminasas (ALT y AST) son
en diversos tejidos del organismo, siendo las más específicas de lesión hepática, su
las reacciones adversas relacionadas con las hierbas medicinales donde los productos
hepatotoxicidad (17).
relacionada con Herbalife® durante el período 1999- 2008. Teniendo valores medios para
bilirrubina 190 umol/L (rango: 26-311; ref. <20 umol/L), ALP 407 U / L (rango: 149-
64
Los resultados de las pruebas que indican los niveles elevados de enzimas
hepáticas en la sangre indican daño temporal o crónico a las células del hígado. Como las
células del hígado son destruidas, liberan su contenido al torrente sanguíneo, esto incluye
las enzimas del hígado que se utilizan para la función normal del cuerpo. Las dos
principales enzimas que se liberan incluyen ALT y AST. Ambas de estas enzimas se
enzima en el torrente sanguíneo supera con creces los niveles normales. Cuando están
elevados los niveles de estas enzimas puede deberse al consumo excesivo de suplementos
dietéticos (78).
Por lo tanto, al observar los resultados del estudio en comparación con nuestros
el aumento de los valores, sin embargo, en el estudio se puede observar una alteración
65
Tabla 9. Marcadores bioquímicos de la función hepática y renal del grupo aumento de
peso.
Prueba De
Levene
Variable/ Media de datos bioquímicos p-Valor
parámetro
normal Grupo Basal Pre- Post- Sig. Sig.
experimental experimental (bilateral)
Nivel de significancia al 95%, α=0.05. Aspartato amino transferasa (AST), alanina amino
transferasa (ALT), fosfatasa alcalina (FA), gamma gutamil transferasa (GGT).
aumento de peso de la función hepática, los valores del subgrupo experimental donde el
ALT incremento 71.8 IU/L, FA duplico su valor con valor de incremento 167.1 UIU/L
del GGT duplico su valor del pre experimental (post inducción sobrepeso), en la función
66
indicada de producto (24), llegando al límite superior de los valores normales en los
la capacidad de eliminación del hígado, un fallo en los procesos hepáticos que conducen
La ALT y AST son enzimas cuya elevación en sangre indican destrucción de las células
que las contienen. Un aumento marcado de estas enzimas suele indicar una importante
producto específico; sin embargo, se debe descartar otras causas de enfermedad hepática
(78).
para fisicoculturismo y reducción de peso son los productos naturales que más han
(ALT) y la fosfatasa alcalina (FA) y la relación entre estas dos variables. La positividad
hepatotoxicidad (19).
67
función hepática. En un informe de investigadores españoles publicado en el 2011 donde
estos productos,
aumentar los valores de ALT (38), en cuanto a la función renal no existen investigaciones
similares, sin embargo, según los valores bioquímicos de la albumina, urea, creatinina
tejido hepático.
68
grupo experimental se tiene un plano frontal del hígado, donde encontramos una
modificación del parénquima superficial del lóbulo medio y una hiperplasia leve
normal.
superficial.
tejido renal.
69
Del grupo experimental, se tiene un plano frontal del riñón, observamos el
Los 3 grupos presentan una estructura anatómica normal, con el hilio renal
Además, el seno renal de Malpighi está paralelo a la médula renal hasta la vértebra
Herbalife®.
tejido gástrico.
Se observa una muestra gástrica del grupo de reducción de peso de las ratas
70
observa definido el ligamento hepato-gástrico y el ligamento hepato-duodenal.
Asimismo, el ligamento hepato-gástrico se observó dividido en dos partes: una
fijada sobre el hilio del hígado y la otra sobre la cara visceral del lóbulo lateral
izquierdo. El omento mayor se origina dorsalmente sobre la línea media, se
observaba con grasa, replegado sobre la curvatura mayor del estómago y presenta
un foramen omental marcado. Sin ninguna modificación estructural en los tres
grupos, no se encontraron estudios similares.
tejido hepático.
Se observa una muestra hepática del grupo de aumento de peso de las ratas
wistar, con los subgrupos de control general, control y experimentación. Del grupo
modificación del parénquima superficial del lóbulo medio del hígado y una
71
No existe evidencia en cuanto a la evaluación macroscópica hepática, sin
superficial.
tejido renal.
Se observa una muestra renal del grupo de aumento de peso de las ratas
médula renal de color marrón, situada entre la corteza, el seno renal. y En los 3
72
macroscópica renal por el consumo del batido formula 1 de Herbalife® en el
grupo.
tejido gástrico.
el omento menor que se extiende desde la curvatura menor del estómago hasta el
hilio del hígado. El omento menor presentó poca grasa y se observa definido el
una fijada sobre el hilio del hígado y la otra sobre la cara visceral del lóbulo lateral
observaba con grasa, replegado sobre la curvatura mayor del estómago y presenta
73
4.3.7. Grupo reducción de peso: Evaluación microscópica histológica de
La muestra hepática del grupo control (imágenes 1 y 2), se observan las estructuras
del grupo control se observa un parénquima hepático sin alteraciones. En el hígado del
74
daños a nivel del hígado en diferentes partes donde podemos deducir que fue a causa
los efectos de un suplemento dietético, donde se demostró que las ratas presentaron
resistencia y menor fatiga en la piscina de Morris, sin cambios otros. Los parámetros
3
1
7
8
6
4 1
2 1
El tejido renal del grupo control que se observa en las (imágenes 1 y 2),
75
control) se observan la corteza y medula renal sin alteraciones. En la muestra de tejido
(imagen 8).
muestran daños a nivel renal en diferentes partes del riñón, podemos deducir que fue a
España (2010) donde analizan los efectos metabólicos, renales y óseos de las dietas
hiperproteicas donde indican que un consumo excesivo de proteína podría tener una
respecto en población sana. Algunos estudios sugieren que la hiperfiltración renal (el
mecanismo propuesto como origen del daño renal) podría ser una respuesta adaptativa
evidencia científica que demuestre un efecto adverso sobre la función renal (41).
76
4.3.9. Reducción de peso: Evaluación microscópica histológica de muestras
de tejido gástrico.
1 3
6
2 4
Las muestras gástricas del grupo control que se observan en las imágenes 1 y
77
No se encontraron evidencias científicas acerca del examen histológico.
hepático.
3 7
5
1
2 6
4
peso de las ratas wistar y con subgrupos de control general, control y experimentación.
78
En la presente investigación podemos observar que en los subgrupos control
suplemento administrado.
renal.
3 5
1
7
6
8
4
22
El tejido renal del grupo control que se observa en las imágenes 1 y 2, muestran
observa la corteza y medula renal sin alteraciones. La muestra del tejido renal del sub
79
en corteza (imagen 7), degeneración turbia moderada en túbulos contorneados
a nivel renal en diferentes partes del riñón, podemos deducir que fue a causa del
suplemento administrado.
gástrico.
1 3
2 4
80
Se observan muestras histológicas gástricas del grupo aumento de peso de las
ratas wistar y con subgrupos de control general, control y experimentación.
Las muestras gástricas del grupo control que se observa en las imágenes 1 y 2;
mucosa, submucosa, muscular y serosa gástrica no muestran alteraciones histológicas.
El sub grupo control (imágenes 3 y 4) tampoco presentan alteraciones histologicas la
mucosa, submucosa, muscular y serosa gástrica. En el subgrupo experimental (imagen
5) se observa congestion generalizada grave e inflamacion leve de la mucosa.(imagen
6).
81
V. CONCLUSIONES
se incrementó un 67gr del peso con el consumo del batido formula 1 de Herbalife®.
- Se evaluó la función hepática y renal a través de los valores bioquímicos FA, AST,
ALT, GGT, bilirrubina, albumina, urea y creatinina donde se encontró en los grupos
enfermedad hepática.
82
VI. RECOMENDACIONES
tejidos alterados.
83
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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93
ANEXOS
94
ANEXO 1. FICHA DE CONTROL DE EVALUACION DE PESO CORPORAL - FASE
DE A DAPTACION
ADAPTACION
SEMANA 01 (…/…/…) SEMANA 02 (…/…/…)
CODIGO peso (Gr) talla (Cm) peso Talla
PH01
PH02
PH03
PH04
PH05
PH06
PH07
PH08
PH09
PH10
PH11
PH12
PH13
PH14
PH15
PH16
PH17
PH18
PH19
PH20
PH21
PH22
PH23
PH24
PH25
PH26
PH27
PH28
PH29
PH30
PH31
PH32
PH33
PH34
PH35
95
ANEXO 2. FICHA DE CONTROL DE EVALUACION DE PESO CORPORAL - FASE
DE INDUCCION
INDUCCION
SEMANA 01 SEMANA 02 SEMANA 03 SEMANA 04 SEMANA 05
(13/04/2021) (20/04/2021) (27/04/2021) (04/05/2021) (11/05/2021)
CODIGO peso talla peso talla peso talla peso talla peso talla
PH01
PH02
PH03
PH04
PH05
PH06
PH07
PH08
PH09
PH10
PH11
PH12
PH13
PH14
PH15
PH16
PH17
PH18
PH19
PH20
PH21
PH22
PH23
PH24
96
ANEXO 3. FICHA DE CONTROL DE EVALUACION DE PESO CORPORAL - FASE DE EXPERIMENTACION
EXPERIMENTACIÓN
SEMANA 01 SEMANA 02 SEMANA 03 SEMANA 04 SEMANA 05 SEMANA 06 SEMANA 07 SEMANA 08 SEMANA 09 SEMANA 10
(…/…/…) (…/…/…) (…/…/…) (…/…/…) (…/…/…) (…/…/…) (…/…/…) (…/…/…) (…/…/…) (…/…/…)
CODIGO peso talla peso talla peso talla peso talla peso talla peso talla peso talla peso talla Peso talla peso Talla
PH01
PH02
PH03
PH04
PH05
PH06
PH07
PH08
PH09
PH10
PH11
PH12
PH13
PH14
PH15
PH16
PH17
PH18
PH19
PH20
97
ANEXO 4. FICHA DE CONTROL DE DATOS BIOQUIMICOS
98
ANEXO 5. FICHA DE CONTROL MACROSCOPICA
I CONTROL GENERAL PH 04
PH 11
PH 15
PH 22
PH 26
PH 27
PH 32
II CONTROL BAJA DE PH 05
PESO
PH 13
PH 18
PH 33
PH 36
PH37
PH 38
PH06
PH12
PH23
PH28
PH31
PH35
PH40
PH 19
PH 20
PH 21
PH 24
PH29
PH34
V EXPERIMENTACION PH 01
SUBE DE PESO
PH 02
PH07
PH 09
PH 14
PH 25
PH 30
PH 39
99
ANEXO 6. MODELO DE INFORME HOSTOLOGICO
100
ANEXO 7. ANÁLISIS ESTADÍSTICOS EMPLEADOS EN ESTE ESTUDIO
T- STUDENT
Es un modelo estadístico que se utiliza para aproximar el momento de primer orden de una
población de distribución normal cuando el tamaño de la muestra es pequeño y no se conoce la
desviación típica.
En las muestras tiene una distribución normal; ‡ 2. Obtener para cada una de las muestras: a) el
tamaño de las muestras (n1 y n2), b) sus respectivas medias (m1 y m2), c) sus varianzas (v1 y
v2); 3. Probar que las varianzas sean homogéneas;
vc = ((n1-1)v1 + (n2-1)v2)/(n1 + n2 - 2)
Es decir, la varianza común (vc) es igual a un promedio pesado de las varianzas de las dos
muestras en donde los pesos para ese promedio son iguales al tamaño, menos uno (n-1) para cada
una de las muestras, c) con esa varianza común, se calcula el error estándar de la diferencia de las
medias ESM= √ ((vc) (n1 + n2)/(n1n2)); 5. Finalmente, la t-Student es igual al cociente de la
diferencia de medias entre el ESM anterior; 6. De acuerdo con nuestra hipótesis nula y alterna se
debe demostrar que existe diferencia entre las medias de las muestras, se consulta una tabla de t-
Student con grado de libertad igual a n1 + n2-2 y se calcula el valor de P.5
101
ANEXO 8. PRUEBA DE NORMALIDAD
PRUEBA DE SHAPIRO-WILK
Cuando la muestra es como máximo de tamaño 50 se puede contrastar la normalidad con la prueba
de shapiro Shapiro-Wilk. Para efectuarla se calcula la media y la varianza muestral, S2, y se
ordenan las observaciones de menor a mayor. A continuación, se calculan las diferencias entre:
el primero y el último; el segundo y el penúltimo; el tercero y el antepenúltimo, etc. y se corrigen
con unos coeficientes tabulados por Shapiro y Wilk. El estadístico de prueba es:
1. Analiza
2. Estadísticos Descriptivos
3. Explorar
102
ANEXO 9. PRUEBA DE NORMALIDAD SHAPIRO-WIL.
Se observa que en la variable composición corporal en el grupo reducción de peso en las ratas
wistar con una significancia para Herbalife de 0.109 y de grupo control 0.323 en ambos grupos
se comporta normalmente porque en ambos casos son mayores que α=0.05.
Se muestra que en la variable composición corporal en el grupo aumento de peso en las ratas
wistar con una significancia para Herbalife de 0.728 y de grupo control 0.340 en ambos grupos
se comporta normalmente.
Prueba de Normalidad
Shapiro-Wilk
TIPO
Estadístico gl Sig.
AST Herbalife 0.980 8 0.965
Control 0.889 7 0.271
ALT Herbalife 0.700 8 0.002
Control 0.966 7 0.868
FA Herbalife 0.735 8 0.006
Control 0.949 7 0.720
GGT Herbalife 0.863 8 0.127
103
Control 0.957 7 0.790
Bilirrubina Herbalife 0.782 8 0.018
Control 0.896 7 0.307
Albumina Herbalife 0.830 8 0.060
Control 0.886 7 0.255
Urea Herbalife 0.861 8 0.122
Control 0.922 7 0.482
Creatinina Herbalife 0.724 8 0.004
Control 0.960 7 0.822
Nota. Nivel de significancia al 95%, α=0.05.
Se muestra la variable AST, GGT, albumina y urea, en ambos grupos (Herbalife y control) se
comporta normalmente teniendo estos una significancia mayor igual a α=0.05, por otro lado, en
las variables ALT, FA, bilirrubina y creatinina, tienen un comportamiento diferente en el grupo
Herbalife, en el grupo control presenta un comportamiento normal; sin embargo, los datos
obtenidos del grupo Herbalife clínicamente tienen un comportamiento normal.
104
Se muestra la variable AST, ALT grupo control, bilirrubina, albumina y urea, en ambos grupos
(Herbalife y control) se comporta normalmente teniendo estos una significancia mayor igual a
α=0.05, por otro lado, en las variables ALT grupo Herbalife, FA y creatinina tienen un
comportamiento diferente en ambos grupos; sin embargo, los datos obtenidos con una
distribución diferente clínicamente tienen un comportamiento normal.
105
ANEXO 10. PANEL FOTOGRAFICO DE LA INVESTIGACION
106
PANEL FOTOGRAFICO DE MATERIALES Y TRATAMIENTO DE LA PRUEBA
MACROSCOPICA
107
PANEL FOTOGRAFICO DE MATERIALES Y TRATAMIENTO DE LAS MUESTRAS
HISTOLOGICAS
108
FOTO N° 7: INCLUSION EN PARAFINA.
109
FOTO N° 9: CORTE EN MICROTOMO.
110
FOTO N° 11: DESHIDRATACION EN SOLUCIONES DE ETANOL.
111
FOTO N° 12: ACLARACION EN XILOL.
112
N° 14: COLOCACION DE CUBREOBJETOS.
113
FOTO N° 15: LECTURA DE LA MUESTRA HISTOLOGICA POR EL PROFESIONAL
MÉDICO VETERINARIO RESPECTIVO.
114
115
116
117
118