¿Propiedades Fundamentales de una Enzima?

Especificidad
Las enzimas son muy específicas por el substrato de la reacción que catalizan. Interactúan con una o
muy pocas moléculas y catalizan únicamente un tipo de reacción, por lo que las moléculas con las que
interactúan deben ser muy parecidas, tanto en composición, como en estructura tridimensional.

Catalizadores
Actúan como catalizadores, acelerando la velocidad de la reacción química.

Efectividad
Cuando una enzima reacciona con un sustrato se forma un complejo inestable, luego la enzima se
recupera intacta y se puede volver a usar miles de veces una molécula de enzima puede transformar
muchas moléculas de sustratos. La efectividad se mide por el número de transferencia. LAS ENZIMAS EN
SUS FUNCIONES SON REGULABLES
Hay una serie de factores que hacen que la enzima funcione o no funcione, más rápido o no tan
rápidamente (desnaturalización). Entre los factores tenemos la temperatura, el pH del medio, la
presión, la electronegatividad, las concentraciones de sustratos o simplemente la actuación de los
inhibidores que son moléculas que regulan la actividad enzimática, inhibiéndola como su nombre lo
indica.

¿Cómo afecta la concentración del sustrato en la actividad enzimática?

En toda reacción catalizada por una enzima, si se mantiene constante la concentración del E, la
velocidad de la reacción aumenta exponencialmente al incrementarse la concentración del sustrato ya
que al existir más moléculas de sustratos es más probable el encuentro con la enzima y la formación del
complejo E-S
Este aumento de velocidad es más rápido para concentraciones bajas de sustratos y a medida que este
aumente se va haciendo más lento, hasta que las concentraciones del sustrato alcanzan cierto valor, a
partir del cual aunque aumente la concentración del mismo no aumenta la velocidad de la reacción.
Este aumento es debido a que la enzima está saturada por el sustrato.

¿A qué se define como actividad enzimática?

Es la cantidad de enzima que cataliza la conversión de 1 µmol de sustrato en un minuto. La actividad
específica es el número de unidades de enzima por miligramo de proteína (U/mg prot) o por mililitro de
disolución (U/ml).

Recientemente, el Sistema Internacional de Unidades (SI) ha definido la unidad de actividad enzimática

como la cantidad de enzima que transforma 1 mol de sustrato por segundo. Esta unidad se llama katal
(kat). Como 1 mol son 10 6 µmoles y 1 minuto son 60 segundos, resulta que 1 katal equivale a 60 x 10 6 U.
Esta unidad es muy grande, de forma que se utilizan frecuentemente los submúltiplos como el
microkatal (µkat, 10-6 kat) o el nanokatal (nkat, 10-9 kat).

Cuando se conoce el peso molecular del enzima puro y el número de centros activos por molécula de
enzima, las medidas de actividad enzimática permiten calcular el número de recambio del enzima, o
sea, el número de reacciones elementales que realiza el enzima por cada centro activo y por unidad de
tiempo.

Indique el grafico que explica el comportamiento de una enzima ante un sustrato en

base a la velocidad con lo que convierte en producto

Comportamiento de una enzima ante un sustrato en base a la velocidad en lo que convierte el producto,
manteniendo la cantidad de enzima constante. Si representamos v0 frente a [S]0 obtenemos una gráfica
como la de la Figura de la derecha. Cuando [S]0 es pequeña, la velocidad inicial es directamente
proporcional a la concentración de sustrato, y por tanto, la reacción es de primer orden. A altas [S]0, el
enzima se encuentra saturada por el sustrato, y la velocidad ya no depende de [S]0. En este punto, la
reacción es de orden cero y la velocidad es máxima (Vmax).

¿Cuál es el significado de Km?

Km tiene dos significados biológicos importantes:

Km = [S], lo que significa que Km es la concentración de sustrato necesaria para que la velocidad de
reacción alcance la mitad de su valor máximo. Es decir, Km = [S] a la velocidad de semisaturación.

2) La Km de una enzima también indica el grado de afinidad de ésta respecto del sustrato o, lo que es lo
mismo, la estabilidad del complejo E-S. Concretamente:
a) un valor alto de Km quiere expresar que para conseguir la semisaturación se requiere una elevada
concentración de sustrato y que, por lo tanto, la enzima no tiene gran afinidad por él.

b) valores bajos de Km indican que el complejo E-S se forma a bajas concentraciones de sustrato, es
decir, la enzima tiene gran afinidad por él.

¿Cuándo y por qué se dice que una enzima está saturada?

Las enzimas presentan una cinética que responde al modelo propuesto por Michaelis-Menten. Según tal
modelo, si se mide la velocidad de una reacción catalizada a una temperatura determinada y a una
concentración constante de enzima, es decir, si se varía la concentración de sustrato, se obtiene una
gráfica como la siguiente:
Podemos observar cómo la velocidad de reacción es directamente proporcional a la concentración de
sustrato, hasta llegar a un cierto límite en el cual se alcanza un máximo y ya no varía aunque se
incremente la concentración de sustrato.
Se dice entonces que se ha alcanzado la saturación, o lo que es lo mismo: la velocidad es máxima
cuando la enzima está saturada o formando el llamado complejo E-S. Es el momento que corresponde al
llamado estado de transición, en el que se produce la total interacción del sustrato con el centro activo
de la enzima. (Las reacciones no catalizadas no presentan este efecto de saturación).

¿Cómo y por qué los cambios del PH afectan a las acciones enzimáticas?

Las enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH; amino -NH2; tiol -SH; imidazol, etc.)
en las cadenas laterales de sus aminoácidos. Según el pH del medio, estos grupos pueden tener carga
eléctrica positiva, negativa o neutra. Como la conformación de las proteínas depende, en parte, de sus
cargas eléctricas, habrá un pH en el cual la conformación será la más adecuada para la actividad
catalitica (Figura de la derecha). Este es el llamado pH óptimo.

La mayoría de los enzimas son muy sensibles a los cambios de pH. Desviaciones de pocas décimas por
encima o por debajo del pH óptimo pueden afectar drásticamente su actividad. Así, la pepsina gástrica
tiene un pH óptimo de 2, la ureasa lo tiene a pH 7 y la arginasa lo tiene a pH 10 (Figura de la izquierda).
Como ligeros cambios del pH pueden provocar la desnaturalización de la proteína, los seres vivos han
desarrollado sistemas más o menos complejos para mantener estable el pH intracelular: Los
amortiguadores fisiológicos.

¿Por qué al aumentar la temperatura puede bloquearse la actividad enzimática?

En general, los aumentos de temperatura aceleran las reacciones químicas: por cada 10ºC de
incremento, la velocidad de reacción se duplica. Las reacciones catalizadas por enzimas siguen esta ley
general. Sin embargo, al ser proteínas, a partir de cierta temperatura, se empiezan a desnaturalizar por
el calor. La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima (Figura
de la derecha). Por encima de esta temperatura, el aumento de velocidad de la reacción debido a la
temperatura es contrarrestado por la pérdida de actividad catalítica debida a la desnaturalización
térmica, y la actividad enzimática decrece rápidamente hasta anularse.

¿Qué es un inhibidor enzimático?

Es otro mecanismo de control de las reacciones enzimáticas.

Los inhibidores enzimáticos son pequeñas moléculas o iones que provocan la pérdida o el bloqueo de la
actividad de las enzimas.

La inhibición puede ser de dos tipos

 REVERSIBLE:
Se trata de casos en los que se forma un complejo E-I, que puede disociarse y dejar activa a la enzima. A
su vez, puede ser:
- Competitiva:
El inhibidor y el sustrato se parecen y compiten por unirse al centro activo de la enzima. Se forma un
complejo E-I reversible. Su efecto se puede invertir aumentando la [S].
 - No competitiva:
En este caso el inhibidor y el sustrato pueden unirse simultáneamente a la enzima, aunque en puntos
distintos de su molécula, pero al unirse el inhibidor se produce un cambio en la conformación del centro
activo y la actividad enzimática queda bloqueada.
- Irreversible (envenenamiento):
El inhibidor modifica la estructura de la enzima o se une tan fuertemente a ella que la inactiva
totalmente.

¿A qué se le denomina y cómo se determina la velocidad máxima?

Vmax= velocidad máxima a concentración saturante de substrato.
Las enzimas pueden realizar hasta varios millones de reacciones catalíticas por segundo. La velocidad
máxima de una reacción enzimática se determina incrementando la concentración de su sustrato hasta
que la tasa de formación de producto sea constante. Esta se denomina la velocidad máxima (Vm) de una
enzima. En este estado, todos los sitios activos de todas las moléculas se encuentran saturados con
sustrato. Esto fue propuesto por Leonor Michaelis y Maud Menten en 1913.
Cuando la concentración de S es muy alta la enzima se encuentra saturada, todas las moléculas se
encuentran formando parte del complejo ES, entonces la tasa de reacción es insensible a los cambio en
[S] y depende solo de k₂. Formalmente: U = K2.
Esta velocidad de reacción es máxima y se llama Vmax. A k₂ se le llama constante de catálisis o Kat
(también llamada número de recambio por turnover number) que indica el número de reacciones por
unidad de tiempo que realiza un sitio activo. Las unidades de Kar son, usualmente, segundos. A
concentraciones de S debajo de la saturación la tasa depende tanto de la unión del sustrato como de la
tasa del paso catalítico. Sustituyendo la ecuación de equilibrio de la unión del sustrato en la ecuación 1
se obtiene la ecuación de Michaelis-Menten.

Holoenzima vs Apoenzima
Una HOLOENZIMA es una enzima que está formada por una proteína (Apoenzima) y un cofactor, que
puede ser un ion o una molécula orgánica compleja unida (grupo prostético) o no (una coenzima). En
resumidas cuentas, es una enzima completa y activada catalíticamente.
Las APOENZIMAS son enzimas que carecen de los componentes químicos apropiados para realizar la
actividad catalítica, por ello, se ayudan de otras sustancias no proteicas, denominadas cofactores que,
fijadas en su superficie mediante enlaces covalentes o débiles, le aportan a la enzima los grupos y
funciones químicas que necesita. En estos casos, la parte proteica de la enzima se denomina apoenzima
y la fracción no proteica es el cofactor.
Estado de transición vs energía de activación

Estado de transición es una teoría que explica la velocidad de reacción de reacciones químicas
elementales. La teoría asume la existencia de un tipo especial de equilibrio químico (cuasi equilibrio)
entre los reactivos y el complejo activado o estado de transición, una estructura intermedia inestable
por su alta energía. Mientras que; la ENERGÍA DE ACTIVACIÓN suele utilizarse para denominar la
energía mínima necesaria para que se produzca una reacción química dada. Para que ocurra una
reacción entre dos moléculas, éstas deben colisionar en la orientación correcta y poseer una cantidad
de energía mínima.

Centro activo vs sitio regulatorio

EL SITIO O CENTRO ACTIVO es la zona de la enzima en la que se realiza el sustrato para ser catalizado.
Mientras que el SITIO REGULATORIO son la secuencia de nucleótidos que interaccionan con las enzimas
reguladoras para afectar las síntesis

Inhibidor competitivo vs inhibidor no competitivo

En la INHIBICIÓN COMPETITIVA, el sustrato y el inhibidor no se pueden unir a la misma enzima al mismo

tiempo, como se muestra en la figura de la derecha. Esto generalmente ocurre cuando el inhibidor tiene
afinidad por el sitio activo de una enzima en el que también se une el sustrato; el sustrato y el inhibidor
compiten para el acceso al sitio activo de la enzima. Este tipo de inhibición se puede superar con
concentraciones suficientemente altas del sustrato, es decir, dejando fuera de competición al inhibidor.
Los inhibidores competitivos son a menudo similares en estructura all sustrato. Mientras que en la
inhibición no competitiva, es una forma de inhibición mixta donde la unión del inhibidor con la enzima
reduce su actividad pero no afecta la unión con el sustrato. Como resultado, el grado de inhibición
depende solamente de la concentración de inhibidor.