Docsity Prueba de Coombs Indirecta y Directa

Prueba de coombs- indirecta
y directa.
Inmunología
Universidad Católica Boliviana, Cochabamba
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UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
BIOQUÍMOCA Y FARMACIA
CAMPUS TIQUIPAYA
PRÁCTICA 9 “PRUEBA DE COOMBS

(DIRECTA – INDIRECTA)”
ESTUDIANTE: Terrazas Aranibar Luis.

DOCENTE: Dra. Hinojosa Serrudo Eliana.
MATERIA: Inmunología y Serología
GRUPO: A-2
FECHA DE ENTREGA: 30/04/22
Cochabamba-Bolivia
Gestión I-2022

INTRODUCCION
Los anticuerpos son proteínas producidas por el sistema inmunitario. Normalmente, los
anticuerpos se adhieren a sustancias extrañas, como bacterias y virus, y hacen que sean
destruidas.
REACCIÓN A UNA TRANSFUSIÓN
La sangre humana se clasifica de acuerdo a ciertos marcadores que se encuentran en la

superficie de los glóbulos rojos. Eso quiere decir que la sangre transfundida debe tener
los mismos antígenos de sus glóbulos rojos. Esto se conoce como una reacción a la
transfusión y puede causar enfermedades graves o, incluso, la muerte. (1)
Prueba de la antiglobulina directa (de Coombs directa)
La prueba de antiglobulina directa se utiliza para determinar si hay anticuerpos de unión

a eritrocitos o complemento en las membranas eritrocíticas. Se incuban los eritrocitos
del paciente con anticuerpos contra IgG y C3 humanos.
Teste indireto da antiglobulina (Coombs indireto)
La prueba de antiglobulina directa se utiliza para determinar si hay anticuerpos de unión

a eritrocitos o complemento en las membranas eritrocíticas. Se incuban los eritrocitos
del paciente con anticuerpos contra IgG y C3 humanos. (2)
MATERIALES
❖ Gradilla metálica
❖ Tubos de Khan
❖ Tubos de hemólisis
❖ Pipeta Pasteur con bulbo
❖ Cronómetro
❖ Termómetro
❖ Torundas
❖ Centrífuga
❖ Baño maría eléctrico
❖ Sangre completa
❖ Suero
PROCEDIMIENTO

PRUEBA DE COOMBS DIRECTA: La prueba directa de Coombs se usa para
demostrar la presencia de los anticuerpos que han fijado en las células del paciente in
vivo, por ejemplo en la enfermedad hemolítica del recién nacido, en la anemia
hemolítica adquirida, etc.
PROCEDIMIENTO
1. Preparar una suspensión al 2% en solución salina normal de las células probadas.
2. Agregue dos gotas de la suspención de las células preparadas a un tubo de 13 x

75mm.
3. Lavar con solución salina y centrifuge a 3500 r.p.m. durante 1 minuto. Efectúe este
lavado tres veces.
4. Después del último lavado, decante lo más posible.
5. Agregue dos gotas de suero anti-humano
6. Mezcle bien y centrifugue por 1 minuto a 1500 r.p.m. por 15 segundos.
7. Resuspenda los eritrocitos de los tubos y examine el resultado.
INTERPRETACIÓN
La aglutinación de los eritrocitos del paciente, por el anti-humano, indica que estos se
encontraban sensibilizados por anticuerpos.
PRUEBA INDIRECTA DE COOMBS:
La prueba indirecta de Coombs es utilizada para demostrar la presencia de los

anticuerpos circulares que cubren, pero que no aglutinan, a las células suspendidas en
salina. Se efectúa esta prueba combinando “invitro” a un anticuerpo con antígeno
específico. Ejemplo, cuando se hace una prueba anti-D en un suero materno, las células
de la prueba deberán contener el antígeno D.
PROCEDIMIENTO
1. Prepare una suspensión al 2% en solución salina normal de las células seleccionadas

para la prueba.

2. Agregue dos gotas del suero que va a probarse a un tubo de Khan.
3. Agregue dos gotas de la suspensión de las células preparadas, al tubo Khan
4. Agregue dos gotas de albúmina bovina solución al 22% al tubo
5. Incube en un baño maría a 37°C por 15 minutos. (la incubación puede prolongarse
hasta 60 minutos si
se desea).
6. Saque el tubo del baño maría, llénela con solución salina fresca, centrifugue a 3500
r.p.m.
durante 1 minuto y decante. Lávese tres veces.
7. Después del último lavado, decante lo más posible.
8. Agregue dos gotas de suero Anti-humano y mezcle bien.
9. Centrifugue por 1 minuto a 1500r.p.m. durante 15 segundos.
10. Resuspenda los eritrocitos con una agitación moderada y examine el resultado
RESULTADOS

Ausencia de aglutinación indican prueba negativa.
CUESTIONARIO
1) ¿Qué es un anticuerpo completo?
El término "anticuerpos completos" o de ocurrencia natural" se utiliza para indicar

anticuerpos IgM capaces de producir aglutinación visible de glóbulos rojos suspendidos
en solución salina, ej. anti-A, anti-B, Se les ha llamado también de "ocurrencia natural"
nombre que probablemente es incorrecto ya que aparentemente son producidos por
estimulación antigénica. (3)
2) Mencione tres causas de error que pueden causar resultados falsos.
• Prueba de Coombs directa
✓ Algunas drogas incluyendo penicilinas y cefalosporinas pueden causar PDC

positiva
✓ Material mal lavado
✓ Restos de detergentes
✓ Muestra conservada en la heladera y no procesada de inmediato (hay activación
del complemento
✓ Lavado inadecuado de los hematíes de sangre de cordón (gelatina de Wharton)
• Prueba de coombs indirecta
✓ La metildopa provoca aproximadamente el 25% de PIC positivos en pacientes
hospitalizados
✓ Solución fisiológica inapropiada, pH, resina de intercambio etc
✓ Restos de componente monoclonal por lavado insuficiente (4)
3)¿Qué entiende por eritrocitos sensibilizados?
Glóbulos rojos que tienen adheridos a un antígeno de la membrana eritrocitaria,

anticuerpos, complemento o ambos. (3)
4)Defina que es un anticuerpo incompleto.

Anticuerpos "incompletos" usualmente IgG son capaces de adherirse al antígeno, pero
son incapaces de aglutinar glóbulos rojos suspendidos en salina y para demostrar la
presencia de las mismas es necesario utilizar soluciones o medios potenciadores, como
ser: albúmina, enzimas, suero antiglobulina, etc. Estos anticuerpos solo aparecen con
estimulación antigénica (5).
BIBLIOGRAFÍA
1. Javier, Carril. Cigna. Prueba de antiglobulina de Coombs (Indirecta y directa). [En

línea] 21 de 06 de 2019. [Citado el: 18 de 04 de 2022.]
https://www.cigna.com/es-us/individuals-families/health-wellness/hw/pruebas-mdicas/
prueba-de-antiglobulina-de-coombs-hw44015.
2. franck, James. Manual. MSD. [En línea] [Citado el: 18 de 04 de 2022.]

https://www.msdmanuals.com/pt/profissional/multimedia/figure/teste-indireto-da-
antiglobulina-coombs-indireto.
3. Grispan S. GRUPOS SANGUÍNEOS ABO Y Rh [Internet]. Bvs.hn. [citado 22 de

abril de 2022]. Disponible en: http://www.bvs.hn/RMH/pdf/1983/pdf/Vol51-3-1983-
6.pdf
4. Test [Internet]. Com.ar. [citado 22 de abril de 2022]. Disponible en:

https://www.farestaie.com.ar/cd-interpretacion/te/bc/327.htm
5. Instrucción de trabajo prueba de antiglobulina humana [Internet]. Udg.mx. 2016

[citado 22 de abril de 2022]. Disponible en:
http://www.hcg.udg.mx/pags/Sec_Transparencia/PDFs_Transparencia/IT_BancSangre_
30.pdf


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REACCIÓN A UNA TRANSFUSIÓN

La sangre humana se clasifica de acuerdo a ciertos marcadores que se encuentran en la

Prueba de la antiglobulina directa (de Coombs directa)

La prueba de antiglobulina directa se utiliza para determinar si hay anticuerpos de unión

Teste indireto da antiglobulina (Coombs indireto)

La prueba de antiglobulina directa se utiliza para determinar si hay anticuerpos de unión

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1. Preparar una suspensión al 2% en solución salina normal de las células probadas.

2. Agregue dos gotas de la suspención de las células preparadas a un tubo de 13 x

4. Después del último lavado, decante lo más posible.

5. Agregue dos gotas de suero anti-humano

6. Mezcle bien y centrifugue por 1 minuto a 1500 r.p.m. por 15 segundos.

7. Resuspenda los eritrocitos de los tubos y examine el resultado.

PRUEBA INDIRECTA DE COOMBS:

La prueba indirecta de Coombs es utilizada para demostrar la presencia de los

1. Prepare una suspensión al 2% en solución salina normal de las células seleccionadas

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4. Agregue dos gotas de albúmina bovina solución al 22% al tubo

durante 1 minuto y decante. Lávese tres veces.

7. Después del último lavado, decante lo más posible.

8. Agregue dos gotas de suero Anti-humano y mezcle bien.

9. Centrifugue por 1 minuto a 1500r.p.m. durante 15 segundos.

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1) ¿Qué es un anticuerpo completo?

El término "anticuerpos completos" o de ocurrencia natural" se utiliza para indicar

2) Mencione tres causas de error que pueden causar resultados falsos.

• Prueba de Coombs directa

✓ Algunas drogas incluyendo penicilinas y cefalosporinas pueden causar PDC

3)¿Qué entiende por eritrocitos sensibilizados?

Glóbulos rojos que tienen adheridos a un antígeno de la membrana eritrocitaria,

4)Defina que es un anticuerpo incompleto.

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1. Javier, Carril. Cigna. Prueba de antiglobulina de Coombs (Indirecta y directa). [En

2. franck, James. Manual. MSD. [En línea] [Citado el: 18 de 04 de 2022.]

3. Grispan S. GRUPOS SANGUÍNEOS ABO Y Rh [Internet]. Bvs.hn. [citado 22 de

4. Test [Internet]. Com.ar. [citado 22 de abril de 2022]. Disponible en:

5. Instrucción de trabajo prueba de antiglobulina humana [Internet]. Udg.mx. 2016

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