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Práctica 13

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MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

ANALISIS BIOQUÍMICO CLÍNICOS I

Práctica 13

Determinación de creatinina

Introducción

El riñón elimina los productos nitrogenados del catabolismo proteico. En presencia de un trastorno
de la función renal, la disminución de la capacidad de excreción de los productos de desecho
nitrogenados es un factor fundamental en la aparición de los síntomas.

La creatinina es un producto de excreción de la creatina. La formación de ésta es constante por


reacción espontánea e irreversible, y aproximadamente 2% de creatina es transformada a creatinina
cada 24 horas.

La creatinina es un reflejo directo de la masa muscular, por lo cual su nivel sérico es más elevado en
los hombres que en las mujeres. La concentración sérica no es afectada por las modificaciones
dietéticas o las alteraciones del equilibrio electrolítico, razón por la cual la determinación de
creatinina sérica se considera óptima para valorar el funcionamiento renal de un paciente.

El rango de filtración glomerular GFR (en inglés Glomerular Filtration Rate) es el mejor indicador del
funcionamiento renal, éste varía de acuerdo con la edad, sexo y masa corporal, asimismo declina
con la edad. Se reporta en ml/min, es decir la cantidad de sangre que filtra el riñón por minuto.

Se han descrito diferentes fórmulas para estimar GFR con el valor de la creatinina sérica de un
paciente. Por esta razón, el valor de creatinina debe ser determinado con estricto control de calidad
y trazabilidad.

Una de las fórmulas más utilizadas para calcular GFR es la ecuación MDRD (Modified Diet Renal
Disease) que puede aplicarse sólo a personas mayores de 18 años, y se requieren los datos de edad,
sexo, raza, y la creatinina sérica por métodos convencionales. Otras fórmulas están diseñadas para
pacientes pediátricos, o con determinaciones de creatinina por métodos de espectrometría de masa
(http://mdrd.com/).

Con el valor de eGFR se puede estimar el grado de daño renal o la etapa de la enfermedad.

Fundamento del método

El ensayo de la creatinina está basado en la reacción de la creatinina con el picrato de sodio descrito
por Jaffé. La creatinina reacciona con el picrato alcalino formando un complejo rojizo. Se toma
lectura en un intervalo de tiempo (a los 30 segundos y a los 90 segundos, este intervalo permite
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eliminar gran parte de las interferencias conocidas del método. La intensidad del color formado es
proporcional a la concentración de creatinina en la muestra.

Objetivos

1. Efectuar la determinación de creatinina, detectando causas de interferencias.


2. Interpretar el resultado, para diagnosticar alteraciones renales

Material, reactivos y equipo

• Micropipetas de 500 y 50 µl
• Puntas para micropipetas
• R1 Reactivo pícrico
• R2 Reactivo alcalinizante
• Analizador semiautomatizado
• Tubos de vidrio de 13X100

Procedimiento
Reactivo de trabajo: Mezclar volúmenes iguales de R1 y R2 (estable 1 mes a 2-8°C)

Longitud de onda: 500 nm

1. Preparar el analizador en el programa para creatinina.


2. Pipetear 500 µl de reactivo de trabajo en un tubo.
3. Agregar 50 µl de suero, mezclar rápidamente y aspirar en el analizador.
El analizador está programado para tomar lecturas a los 30 y 90 segundos.
4. Anotar el resultado del analizador A1 (30 segundos) y A2(90 segundos) y el resultado final
de creatinina.
5. Calcular el ΔA =(A2-A1) y multiplicar por el F de calibración, lo cual corrobora el resultado
final. Creatinina= (ΔA)F
Nota: el factor de calibración se lleva a cabo con un estándar de creatinina de 2.0 mg/dl
F=(A2-A1)/2.0
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Actividades
1. ¿Cuál es la razón para solicitar determinación de creatinina en sangre?

2. ¿Cuáles son los valores de referencia para esta determinación?

3. ¿En qué consiste el estudio de depuración de creatinina?

4. Especifique las indicaciones que se deben dar al paciente para realizar la prueba de
depuración de creatinina

Resultados
Anota las absorbancias obtenidas y los cálculos efectuados.
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Fecha:___________________________

Nombre del
paciente_________________________________________Edad_______Sexo______

Resultado___________________________________________

Valores de referencia_________________________________

eGFR de acuerdo a la ecuación MDRD edad y sexo del paciente_____________________

Observaciones y/o Conclusiones

Bibliografía:

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