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Microbiologia 6.

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7. ¿Qué es un cultivo contaminado?

Un cultivo contaminado hace referencia a presencia de microorganismos no deseados, puede dase


al momento de la siembra, manipulación o en la incubación.
La contaminación en un cultivo puede tener varias fuentes, incluyendo:
Contaminación ambiental: Microorganismos presentes en el aire, agua, superficies o
equipos de laboratorio pueden entrar en contacto con el medio de cultivo durante el
proceso de preparación o manipulación.
Contaminación cruzada: Si no se toman medidas adecuadas de esterilización y
manipulación aséptica, los microorganismos presentes en muestras, herramientas o
equipos utilizados en el laboratorio pueden contaminar los cultivos.
Contaminación del medio de cultivo: Si el medio de cultivo no se prepara adecuadamente
o no se esteriliza correctamente, puede contener microorganismos no deseados que
contaminen los cultivos.

8. ¿Qué es un inóculo microbiano?


inóculo. Esto tiene aplicación en microbiología industrial para la obtención de productos
como antimicrobianos, enzimas, bebidas, fármacos, toxinas, vitaminas, aminoácidos ,
ácidos orgánicos, solventes, productos alimenticios y proteínas recombinantes . Un
inóculo adecuado debe estar en etapa y tamaño de crecimiento activo, libre de
contaminación y tener capacidad de formación de producto. Un medio de cultivo y
producción adecuado es esencial para proporcionar el entorno adecuado para el inóculo.
La calidad del inóculo se mejora aún más mediante la mejora de las cepas y la tecnología
de inmovilización celular. En el proceso de preparación se controla la biomasa, lo que
implica sensores, análisis de gases de escape y espectrofotómetros de masas. La
estandarización del inóculo también influye en la microbiología médica y de investigación.
Los métodos de susceptibilidad a los antibióticos, estandarizados por el Clínica Laboratorio
Standards Institute (CLSI), implican la preparación de un cultivo puro de un solo tipo de
organismo con una densidad celular específica, que constituye el inóculo.

9. Describa las características morfológicas de las colonias de los siguientes géneros


microbianos: Escherichia, Lactobacillus, Estafilococos, Clostridium, Salmonella.
 ESCHERICHIA COLI
Clasificación científica
Reino: Bacteria
Filo: Proteobacteria
Clase: Gammaproteobacteria
Orden: Enterobacteriales
Familia: Enterobacteriaceae
Género: Escherichia
Especie: E. coli ((E. freundi))
Nombre binomial: Escherichia coli
CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS
 Bacilo Gram negativo.
 No forma esporas
 Móviles (flagelos perítricos).
 Miden 0.5 µ de ancho por 3 µ de largo.
 Catalasa positivos.
 Oxidasa negativos.
 Reducen nitratos a nitritos.
 Producen vitamina B y K.
 AGENTE ETIOLÓGICO.
CARACTERÍSTICAS NUTRICIONALES:
 No exigente.
 Fermenta glucosa y lactosa con producción de gas.
 Es anaerobio facultativo
CARACTERÍSTICAS COLONIALES:
Las colonias de E. Coli en agar E.M.B. (eosina y azul de metileno)
tienen 2 a 4 mm de diámetro, un centro grande de color oscuro e
incluso negro, y tienen brillo verde metálico cuando se observan
con luz refleja.

 LACTOBACILLUS
Forma: Las células de Lactobacillus suelen ser bacilares o baciliformes, es decir, tienen
forma de bastón o vara. Sin embargo, la forma exacta puede variar dependiendo de la
especie y las condiciones de crecimiento.
Tamaño: El tamaño de las células de Lactobacillus puede variar, pero típicamente tienen
longitudes que oscilan entre 0.5 y 1.5 micrómetros y anchos de alrededor de 0.5
micrómetros.
Agrupación: A menudo, las células de Lactobacillus se presentan de forma individual, pero
también pueden formar cadenas cortas o pares.
Ausencia de esporulación: A diferencia de algunas otras bacterias Gram positivas, como
Bacillus, las células de Lactobacillus no forman esporas.
Ausencia de flagelos: La mayoría de las especies de Lactobacillus no tienen flagelos y son
no móviles. Sin embargo, hay algunas excepciones en las que se pueden observar flagelos.
Pared celular: Las células de Lactobacillus tienen una pared celular gruesa compuesta
principalmente de peptidoglicano, que es característico de las bacterias Gram positivas.
Coloración: En las tinciones de Gram, las células de Lactobacillus se tiñen de púrpura
oscuro a negro debido a la retención del cristal violeta por la pared celular gruesa.

 ESTAFILOCOCOS
CARACTERÍSTICA CIENTÍFICA
Reino: Bacteria
Clase: Bacilli
Orden: Bacillales
Familia: Staphylococcaceae
Género: Staphylococcus
Especie: S. aureus
Nombre binomial: Staphylococcusaureus
MORFOLOGÍA
Colonias lisas, brillantes y convexas.
• Poseer un Endo pigmento color amarillo naranja a blanco porcelana color dorado al
cual se le conoce como ”aureus”.
• Fermenta glucosa, lactosa y maltosa.
• El crecimiento ocurre en un amplio rango de temperatura 6,5 a 50º C, siendo optimo 30-
40º C.
CARACTERISTICAS
Coco inmóvil, de 0.8 a 1 micrómetro de diámetro, que se divide en tres planos para formar
racimos de uvas, responde positivamente a la tinción de Gram, es aerobio y anaerobio facultativo
por lo que puede crecer tanto en una atmósfera con o sin oxígeno, no presenta movilidad ni forma
cápsula. Es capaz de crecer hasta con un 10 % de sal común. Por esto puede crecer en el agua del
mar.

 CLOSTRIDIUM
Clostridium es un género de bacterias anaerobias formadoras de esporas termorresistentes que
en ausencia de oxigeno germinan, crecen y excretan toxinas.

Las esporas de Clostridium están ampliamente distribuidas en la naturaleza y en el medio


ambiente, y sus esporas se encuentran habitualmente en el suelo, polvo, sedimentos, aguas
estancadas, y en el tracto digestivo de los animales terrestres y marinos. Por ello, pueden
transmitirse a una amplia gama de alimentos, tanto alimentos crudos, como parcialmente tratados
(conservas, fermentados, ahumados, envasados al vacío).

Las condiciones generales que favorecen el crecimiento de Clostridium, la germinación de sus


esporas y en consecuencia la producción de su toxina son las siguientes:
alta cantidad de proteínas
baja concentración de sal
pH ligeramente ácido o alcalino (superior a 4,5)
ausencia de oxígeno, multiplicándose en alimentos envasados al vacío o en atmósfera modificada
Temperaturas entre 3º C y 45-60º C, sobreviviendo en la congelación.
Las especies más importantes asociadas a la contaminación de alimentos son Clostridium
botulinum y Clostridium perfringens, siendo la primera la principal causante de toxiinfecciones
alimentarias.
Clostridium botulinum
La temperatura óptima de crecimiento de C. botulinum es de 35-40ºC, temperatura a la cual se
multiplican las esporas y se produce la toxina botulínica.
Cada uno de los siete subtipos de C. botulinum produce una toxina botulínica diferente
identificadas con las letras de la A a la G. Cuatro de ellas (tipos A, B, E y F) pueden causar
botulismo humano, siendo los tipos A y B los más frecuentes y tóxicos. La toxina A posee mayor
afinidad por el tejido nervioso. Los tipos C, D y E provocan enfermedades en otros mamíferos.
La toxina botulínica es de las toxinas biológicas más potentes que existen ya que cantidades muy
pequeñas pueden causar la enfermedad.
Forma: Las bacterias del género Clostridium son generalmente bacilos o bastones, con forma
cilíndrica o ligeramente alargada.
Tamaño: Clostridium puede variar en tamaño, pero típicamente tienen dimensiones que oscilan
entre 0.5 y 2.0 micrómetros de ancho y de 2.0 a 10.0 micrómetros de largo.
 SALMONELLA
Forma y agrupamiento: Las bacterias del género Salmonella suelen tener forma de bacilo
(bastoncillo) Gram negativo, es decir, son alargadas y generalmente tienen extremos
redondeados. A menudo se presentan individualmente o en pares, pero también pueden
agruparse en cadenas cortas.
Tinción Gram: Salmonella se tiñe de rosa o rojo durante la tinción de Gram debido a la estructura
de su pared celular, que incluye una capa delgada de peptidoglicano y una membrana externa
lipídica.
Flagelación: La mayoría de las especies de Salmonella son móviles y poseen flagelos peritricos, es
decir, flagelos distribuidos por toda la superficie de la célula bacteriana. Estos flagelos les
confieren la capacidad de moverse de manera activa en medios líquidos.
Tamaño: Las células de Salmonella suelen tener un tamaño de aproximadamente 1-3 micrómetros
de ancho y 2-5 micrómetros de longitud, aunque esto puede variar dependiendo de la especie y
las condiciones de crecimiento.
Colonias en agar: En los medios de cultivo sólidos, las colonias de Salmonella pueden aparecer de
color blanco, translúcido o de color gris claro. A menudo tienen una forma lisa y convexa, aunque
esto también puede variar dependiendo de las condiciones de crecimiento y el medio utilizado.

10. ¿Se obtendría el mismo resultado si cuantificáramos las bacterias de una muestra
por turbidimetría o por diluciones seriadas? ¿ Por qué?
No, ya que cada una tiene generalidades y cuantificaciones diferentes ya que:En general,
la turbidimetría puede ser preferible para muestras con alta densidad celular y cuando se
requiere un análisis rápido, mientras que las diluciones seriadas son más adecuadas para
una cuantificación precisa en rangos más amplios de concentraciones bacterianas. A
continuación veremos algunas ventajas y limitaciones.

Principio: La turbidimetría Ventajas: Limitaciones:


mide la turbidez o la
TURBIDIMETRÍA Es un método rápido y simple que no La turbidimetría no proporciona
opacidad de una muestra requiere preparación de diluciones. una cuantificación precisa en
microbiana, la cual está Es adecuado para muestras con una alta rangos de baja densidad célula.
relacionada con la densidad densidad celular. No puede distinguir entre
celular. Cuanto más turbia bacterias vivas y muertas, ya
sea la muestra, mayor será la que la turbidez también puede
concentración de bacterias. ser causada por otros materiales
en suspensión.
Principio: Las diluciones Ventajas: Limitaciones:
DILUCIONES SERIADAS
seriadas implican diluir una Proporciona una cuantificación precisa en Es un proceso más laborioso y
muestra en serie en medios un rango más amplio de concentraciones lleva más tiempo que la
estériles para reducir la bacterianas, incluyendo muestras con una turbidimetría.
concentración de bacterias a baja densidad celular. Requiere una preparación
un nivel en el que sea posible Permite distinguir entre bacterias vivas y cuidadosa de diluciones y placas
contar las colonias formadas muertas, ya que solo las bacterias viables de cultivo, así como incubación
en placas de cultivo. formarán colonias en el medio de cultivo. y recuento de colonias.
11. Se sembraron dos placas de medios de cultivo a partir de las diluciones 1/10.000 y
1/100.000. Tras la incubación de las placas a 37° C, no apareció ninguna colonia.
¿Significa esto que no había ninguna bacteria en la muestra problema? Explique este
resultado.
a ausencia de colonias en las placas sembradas a partir de las diluciones 1/10.000 y
1/100.000 no necesariamente significa que no había bacterias en la muestra problema.
Las diluciones seriadas se utilizan para diluir la muestra original con el fin de obtener una
cantidad manejable de bacterias en el medio de cultivo. Sin embargo, si la concentración
de bacterias en la muestra original era muy baja, es posible que incluso las diluciones
1/10.000 y 1/100.000 todavía no contengan suficientes bacterias para formar colonias
visibles en las placas de cultivo.
Error técnico: La preparación de las diluciones y las placas de cultivo puede verse afectada
por errores técnicos, como la contaminación cruzada, la preparación incorrecta de medios
de cultivo o diluciones, o la mala técnica de siembra en las placas. Estos errores pueden
llevar a resultados falsos negativos, donde las bacterias presentes en la muestra no se
cultivan correctamente en las placas.

13. ¿Desde su punto de vista cual es la importancia de aplicar correctamente las técnicas
de siembra para el futuro desempeño de su profesión?

Desde nuestro punto de vista es esencial la importancia del uso correcto de las técnicas de
siembra ya que al reflejarlas a otra personas, en nuestro caso como profesores debemos
tener claro el tema para asi poder brindar un buen aprendizaje y un efectivo
conocimiento. La capacitación y experiencia en estas técnicas no solo mejoran la calidad y
eficiencia del trabajo en el laboratorio, sino que también son valoradas y pueden
contribuir a crear grandes mentes, con el entrenamiento adecuado en técnicas de siembra
también fomenta una cultura de seguridad en el laboratorio para nuestros estudiantes y la
obtención de resultados precisos y confiables en los experimentos microbiológicos. Un
manejo incorrecto de las muestras o una siembra inapropiada pueden conducir a
resultados erróneos o inconsistencias en los datos, lo que compromete la integridad de la
investigación o los diagnósticos microbiológicos.

BIBLIOGRAFÍAS
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