TP1-Biomoléculas-OP, HA, MHFC V05-Corregido

TECNICATURA SUPERIOR EN PALEONTOLOGÍA BIOLOGÍA GENERAL
Tecnicatura en Paleontología-2024
Trabajo Práctico de Laboratorio Nº1 - Biomoléculas
– INFORME –
ORNELLA PIRIZ
HUGO ALAN ACHA
MAURO H. FERNÁNDEZ CUPPARI
CONTENIDO
1. INTRODUCCIÓN .......................................................................................................... 3
2. MATERIALES Y MÉTODOS ........................................................................................... 3
2.1. RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS .............................................................................................................. 4
2.2. EXTRACCIÓN Y RECONOCIMIENTO DE ADN .................................................................................................. 4
2.3. RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS ................................................................................................................... 4
2.4. RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS ...................................................................................................... 5
3. RESULTADOS .............................................................................................................. 5
3.2. EXTRACCIÓN Y RECONOCIMIENTO DE ADN .................................................................................................. 6
3.4. RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS ...................................................................................................... 7
4. DISCUSIÓN .................................................................................................................. 8
4.2. EXTRACCIÓN DE ADN ............................................................................................................................. 8
4.4. RECONOCIMIENTOS DE CARBOHIDRATOS ..................................................................................................... 9
TABLAS Y FIGURAS
Figura 1. De izq. a der.: Tubo 1, tubo 2, tubo 3. ................................................................................................... 5

Figura 2. ADN en la fase intermedia de la solución de lisis. ................................................................................ 6
Figura 3. Tubo 4: mezcla heterogénea de aceite en la fase superior y agua destilada en la inferior. .................. 6
Figura 4. De izq. a der.: Tubo 4, Tubo 5, Tubo 6 y Tubo 7. ................................................................................... 7
Figura 5. De izq. a der.: Tubo 1, Tubo 2, Tubo 3 y Tubo 4. ................................................................................... 7
Figura 6. De izq. a der.: Tubo 5, Tubo 6 y Tubo 7. ................................................................................................ 8
1. INTRODUCCIÓN
En las células se encuentran sustancias constituidas por átomos de carbono unidos entre sí
(compuestos orgánicos), que pueden formar largas cadenas. Los carbonos se asocian con
hidrogeno, oxigeno, y en ocasiones con nitrógeno, fosforo y azufre, y otros elementos
minoritarios.
Las células tienen la capacidad de producir compuestos orgánicos a partir de compuestos
inorgánicos. Entre los compuestos orgánicos sintetizados encontramos a las biomoléculas:
carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos, de gran importancia en los seres vivos.
Se realizaron 4 experimentos: reconocimiento de proteínas, extracción y reconocimiento
de ADN, reconocimiento de lípidos y reconocimiento de carbohidratos.
2. MATERIALES Y MÉTODOS
Para realizar el TP se formó un grupo de 3 integrantes que proveyeron una parte de los
materiales y la otra parte fue provista por la cátedra:
 1 banana
 1 papa chica
 1 huevo
 Sacarosa (una cucharada)
 Granos de arroz (una cucharada)
 Hielo (un vaso)
 Detergente (medio vaso)
 Aceite de cocina (medio vaso)
 Almidón (dos cucharadas)
 Papel de cocina
 Colador pequeño
 Cloruro de sodio (tres cucharadas)
 Pinza de depilar, aguja de disección, gotero, pincel
 Instrumental de laboratorio (tubo de ensayo, pipetas, mortero, vaso de precipitados)
 Lugol (solución acuosa de yodo)
 Agua destilada o potable
 Agua caliente (37°C)
 Algodón
 Alcohol 96° frío (dejar en congelador la noche anterior)
 Carbohidratos (glucosa, almidón)
 Éter etílico
 Ácido acético (vinagre)
2.1. RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS

Se rotularon 3 tubos de ensayo (1, 2, 3) y se los colocó en gradilla.
Tubo 1: se le agregó 4 ml de agua destilada y 2 ml de clara de huevo. Se lo agitó suavemente
y se lo dejó reposar en gradilla.
Tubo 2: se le agregó 4 ml de agua destilada, 2 ml de clara de huevo y 2 ml de alcohol etílico.
Se lo agitó suavemente y se lo dejó reposar en gradilla.
Tubo 3: se le agregó 4 ml de agua destilada, una cucharadita de almidón, 2 ml de saliva y
una cucharadita de sal. Se lo agitó suavemente con varilla de vidrio, se lo dejó reposar a
37C° 5 minutos y luego se le agregó 3 gotas de lugol.
2.2. EXTRACCIÓN Y RECONOCIMIENTO DE ADN

Se realizó una solución de lisis salino-jabonosa en un vaso de precipitados compuesta de 50
ml de agua, 1 cucharada de detergente y una cucharada de sal. Se la agito con varilla de
vidrio suavemente para no hacer espuma.
Se preparó el material orgánico pelando la banana, cortándola en trozos pequeños y
triturándola en un mortero. Luego se añadió la banana triturada en el vaso con solución de
lisis, se mezcló y dejó reposar 5 minutos para que las células se rompan. Se mantuvo en
reposo en frio con hielos.
La mezcla se filtró por un papel de cocina en un principio, pero al no filtrar correctamente
se cambió por algodón. Por último, se recogió el líquido filtrado en un tubo de ensayo.
Para realizar la precipitación del ADN, sobre el filtrado y las paredes del tubo se agregó
lentamente alcohol frío (50 ml), evitando que se mezclen. Se dejó reposar unos
minutos hasta observar 3 fases. Sobre la capa blanquecina (interfase alcohol-agua) se
introdujo una varilla de vidrio para recuperar el ADN desnaturalizado con movimientos
circulares.
2.3. RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

Se rotularon 4 tubos de ensayos (4, 5, 6, 7) y se los colocó en gradilla.
Tubo 4: se le agregó 4 ml de agua destilada y 2 ml de aceite. Se lo agitó suavemente y se lo
dejó reposar en gradilla.
Tubo 5: se le agregó 4 ml de alcohol etílico y 2 ml de aceite. Se lo agitó suavemente y se lo
dejó reposar en gradilla.
Tubo 6: se le agregó 4 ml de éter etílico y 2 ml de aceite. Se lo agitó suavemente y se lo dejó
reposar en gradilla.
Tubo 7: se le agregó 4 ml de detergente y 2 ml de aceite. Se lo agitó suavemente y se lo dejó
reposar en gradilla.
2.4. RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

Se rotularon 7 tubos de ensayos (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7) y se los colocó en gradilla. Se trituró arroz
en mortero, media banana en mortero y se realizó un raspado de papa.
Tubo 1: se le agregó 4 ml de agua destilada y 3 gotas de lugol y se agitó unos segundos.
Tubo 2: se le agregó 4 ml de agua destilada, cucharadita de almidón y agitó, 3 gotas de lugol
y se agitó unos segundos.
Tubo 3: se le agregó 4 ml de agua destilada, 1 cucharadita de glucosa y agitó, 3 gotas de
lugol y se agitó unos segundos.
Tubo 4: se le agregó 4 ml de agua destilada, 1 cucharadita de sacarosa y agitó, 3 gotas de
lugol y se agitó unos segundos.
Tubo 5: se le agregó 4 ml de agua destilada, granos de arroz triturados, 3 gotas de lugol y
se agitó unos segundos.
Tubo 6: se le agregó 4 ml de agua destilada, raspado de papa, 3 gotas de lugol y se agitó
unos segundos.
Tubo 7: se le agregó 4 ml de agua destilada, raspado de banana, 3 gotas de lugol y se agitó
unos segundos.
3. RESULTADOS

Tubo 1: se observan dos fases: agua destilada como sobrenadante y albumina precipitada
al fondo del tubo.
Tubo 2: se observan tres fases: alcohol etílico como sobrenadante, agua destilada en
intermedia y la albumina precipitando al fondo del tubo.
Tubo 3: se observa un cambio de color en el tubo.
Figura 1. De izq. a der.: Tubo 1, tubo 2, tubo 3.

3.2. EXTRACCIÓN Y RECONOCIMIENTO DE ADN

Se observa el ADN en el tubo, pero al agitarlo este se rompió imposibilitando su extracción
con la varilla de vidrio.
Figura 2. ADN en la fase intermedia de la solución de lisis.

Tubo 4: se observan 2 fases, una superior de aceite formando micelas y una inferior de agua
destilada.
Figura 3. Tubo 4: mezcla heterogénea de aceite en la fase superior y agua destilada en la inferior.
Tubo 5: se observan 2 fases, una superior de alcohol etílico y una inferior de aceite.
Tubo 6: se observa 1 sola fase.
Tubo 7: se observan 2 fases, una superior con de aceite y una inferior de detergente.
Figura 4. De izq. a der.: Tubo 4, Tubo 5, Tubo 6 y Tubo 7.
3.4. RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

Tubo 1: Se observa una mezcla homogénea.
Tubo 2: Se observa un cambio de color por la reacción de lugol.
Tubo 3: No se observa reacción de lugol.
Tubo 4: Se observa poca reacción de lugol.
Figura 5. De izq. a der.: Tubo 1, Tubo 2, Tubo 3 y Tubo 4.

Figura 6. De izq. a der.: Tubo 5, Tubo 6 y Tubo 7.
4. DISCUSIÓN

Tubo 1: el agua no se mezcla con la clara de huevo ya que esta es insoluble por su alto
contenido lipídico.
Tubo 2: el alcohol desnaturaliza la proteína (indica que la estructura se aleja de la nativa)
por lo tanto deja de ser soluble.
Tubo 3: a 37° (temperatura fisiológica humana) la amilasa salival está dentro del rango de
temperatura óptima e hidroliza el almidón. El almidón hidrolizado reacciona con el lugol y
da el cambio colorimétrico. Luego de un tiempo, la reacción baja su velocidad ya que los
sitios activos se saturan.
4.2. EXTRACCIÓN DE ADN

La solución de lisis (agua jabonosa + sal) junto con el alcohol desnaturalizan el empaquetado
del ADN (histonas + ADN), este deja de ser soluble y se lo observa en una fase. El ADN no
pudo ser pescado con la varilla de vidrio, ya que la acción mecánica del agitado previo los
rompió.

Tubo 4: el agua no es miscible con el aceite, la molécula no se divide en dos polos
eléctricamente cargados; por esta razón los aceites se consideran sustancias no polares en
contraposición al agua, una sustancia polar.
Tubo 5: el aceite es más denso que el alcohol y por eso decanta, dejando al alcohol como
sobrenadante.
Tubo 6: El agua y el éter, un solvente orgánico, pueden no mezclarse completamente ya
que el éter tiene dos cadenas hidrocarbonadas hidrofóbicas cortas que deben acomodarse
entre las moléculas de agua vecinas, evitando que se unan por hidrógeno.
Tubo 7: el detergente es una molécula anfipática que contienen grupos tanto polares
(hidrofílicos) y no polares (hidrofóbicos), por tanto, el extremo polar se une con el agua y el
no polar con el aceite.
4.4. RECONOCIMIENTOS DE CARBOHIDRATOS

El almidón es una sustancia que utilizan las plantas como forma de almacenar energía. Para
detectar la presencia de este compuesto utilizamos lugol, que en presencia de almidón
(polisacárido) reacciona cambiando de color marrón (u ocre) al color violeta. De esta
manera, el lugol actúa como un indicador químico con los polisacáridos y en menor medida
disacáridos, como se observó en el Tubo 4 en el que se usó un azúcar común. También hubo
reacción positiva en los tubos 5 (arroz), 6 (papa), y 7 (banana), ya que el arroz es un grano
que contiene almidón y otros polisacáridos de reserva, la papa es un tubérculo con función
de reserva y la banana contiene tanto polisacáridos como azúcares más simples en su
composición

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Trabajo Práctico de Laboratorio Nº1 - Biomoléculas

Figura 1. De izq. a der.: Tubo 1, tubo 2, tubo 3. ................................................................................................... 5

2.1. RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS

2.2. EXTRACCIÓN Y RECONOCIMIENTO DE ADN

2.3. RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

2.4. RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

3.1. RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS

Figura 1. De izq. a der.: Tubo 1, tubo 2, tubo 3.

3.2. EXTRACCIÓN Y RECONOCIMIENTO DE ADN

Figura 2. ADN en la fase intermedia de la solución de lisis.

3.3. RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

Figura 4. De izq. a der.: Tubo 4, Tubo 5, Tubo 6 y Tubo 7.

3.4. RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

Figura 5. De izq. a der.: Tubo 1, Tubo 2, Tubo 3 y Tubo 4.

Figura 6. De izq. a der.: Tubo 5, Tubo 6 y Tubo 7.

4.1. RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS

4.2. EXTRACCIÓN DE ADN

4.3. RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS

4.4. RECONOCIMIENTOS DE CARBOHIDRATOS

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