Cotrina 8
Cotrina 8
Cotrina 8
Centrifugacin
Centrfuga
Es una mquina que pone en rotacin una muestra para separar por fuerza centrfuga sus componentes o fases las que son generalmente una slida y una liquida, en funcin de su densidad.
Tipos de Centrifugacin
Centrifugacin Diferencial Es el mtodo ms comn de separacin. En este mtodo el tubo de centrifuga se llena con una mezcla uniforme. El mtodo es bastante inespecfico y no se puede saber si la partcula buscada quedara en el sobrenadante, en el tubo o repartido entre ambos ; sin embargo es una tcnica muy til para aislamiento de organeras subcelulares.
Tipos de Centrifugacin
Centrifugacin en Gradiente de Concentracin
Este mtodo es algo ms complicado que la centrifugacin diferencial. La tcnica no solo permite la separacin de varios sino de todos los componentes de la muestra, tambin permite realizar medidas analticas. Este mtodo implica la utilizacin de un soporte fluido cuya densidad aumenta desde la zona superior a la inferior.
CENTRIFUGACION DIFERENCIAL
Tipos de centrfugas
Caractersticas comunes: Un motor que hace girar un rotor donde se colocan los tubos que contienen las muestras a centrifugar. Diferencias: Velocidad que puede alcanzar la centrfuga Presencia o ausencia de refrigeracin Presencia o ausencia de vaco Volumen mximo de muestra Tipos ms usados en el laboratorio: Microfugas; utilizan tubos Eppendorf (hasta 10000xg) Centrfugas refrigeradas; volmenes mayores (hasta 100000xg) Ultracentrfugas preparativas (hasta 600000xg)
Equipos
Sedimentadoras
Tubular
Cmara mltiple
Tazn slido
Centrfugas
Filtrantes
Decantadoras
Discos
Equipos de Filtracin-Centrfuga
Canasta perforada cubierta con un medio filtrante que gira a altas velocidades. Los slidos se depositan sobre el medio filtrante. Salida de lquido claro.
Centrfuga Tubular
Capaz de separar partculas hasta de 0.1 m. Modelos industriales: - 15000 rpm - 12000 G - entre 500 y 3500 l/h - 2 a 4 kg slido por lote
Centrfuga de Discos
Clasificacin segn la forma de descarga de slidos: Retencin de slidos. Tazn abierto de descarga intermitente de slidos. Vlvula tipo boquilla de descarga intermitente de slidos. Boquilla para la descarga continua de slidos
Tazn abierto
Retencin de slidos
Dimetro de 21-44 cm Fuerzas centrfugas de 5000-8000 G Capacidad de slidos de 5 a 20 litros Flujos de 0.4 a 1500 l/min
Las partculas generan friccin, la que se opone a su movimiento, la que depende del tamao, forma e hidratacin de la partcula y de la viscosidad del medio.
Fundamentos
Teora de sedimentacin:
Accin de la Gravedad
Ley de Stokes
Accin de una fuerza centrfuga Fuerza de aceleracin = Fuerza de empuje + Fuerza de arrastre
Flujo laminar Partculas esfricas
Velocidad de sedimentacin
SEDIMENTACION LIBRE
E: Empuje hidrosttico
E Fr P
CENTRIFUGACION
Fr E R P PR Fc
P: Peso
Factor G
Medida relativa de la velocidad de sedimentacin de una partcula en un campo centrfugo con respecto a su velocidad de sedimentacin en el campo gravitacional.
G: campo centrfugo aplicado (aceleracin; cm/seg2) : velocidad angular (en radianes/seg) r: distancia de la partcula al eje de rotacin (cm)
F = m x G = m x 2 x r
(m = masa de la partcula)
EL CAMPO CENTRIFUGO
Se expresa generalmente en en mltiplos del campo gravitacional g (981 cm/seg2). El campo centrfugo relativo (CCR) es la razn entre la aceleracin centrfuga a un radio y velocidad especificados, y la aceleracin de gravedad: CCR = 4 2 x (rpm)2 r/ 3600 x 981
Las unidades del CCR se expresan en x G y las revoluciones por minuto se abrevian como rpm. Habitualmente estos clculos se hacen con un nomograma.
Dnde: es la velocidad de sedimentacin de la esfera 2/9 es una constante para la forma esfrica r el radio de la partcula p la densidad de la partcula m la densidad del medio g el campo gravitacional la viscosidad del medio As, dos partculas esfricas pueden separarse en funcin de su densidad y/o su tamao