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Cotrina 8

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CENTRIFUGACIN

DOCENTE: M. Sc. HUBERT ARTEAGA MIANO

ALUMNO: COTRINA SAPAICO, ALFONSO S.

Centrifugacin

Separacin de sustancias de diferente densidad mediante movimiento giratorio

Centrfuga
Es una mquina que pone en rotacin una muestra para separar por fuerza centrfuga sus componentes o fases las que son generalmente una slida y una liquida, en funcin de su densidad.

Tipos de Centrifugacin
Centrifugacin Diferencial Es el mtodo ms comn de separacin. En este mtodo el tubo de centrifuga se llena con una mezcla uniforme. El mtodo es bastante inespecfico y no se puede saber si la partcula buscada quedara en el sobrenadante, en el tubo o repartido entre ambos ; sin embargo es una tcnica muy til para aislamiento de organeras subcelulares.

Tipos de Centrifugacin
Centrifugacin en Gradiente de Concentracin
Este mtodo es algo ms complicado que la centrifugacin diferencial. La tcnica no solo permite la separacin de varios sino de todos los componentes de la muestra, tambin permite realizar medidas analticas. Este mtodo implica la utilizacin de un soporte fluido cuya densidad aumenta desde la zona superior a la inferior.

CENTRIFUGACION DIFERENCIAL

CENTRIFUGACION EN GRADIENTE DE DENSIDAD

Variaciones dentro de la centrifugacin en gradiente de densidad


Centrifugacin de equilibrio en gradiente o isopicnica Esta tcnica se emplea para separar partculas similares en tamaos pero distintas en densidad. Puestos que las protenas poseen casi la misma densidad, este mtodo no suele utilizar para su separacin, sin embargo, en situaciones donde intervienen diferentes densidades, la centrifugacin isopicnica es el mtodo adecuado.

Variaciones dentro de la centrifugacin en gradiente de densidad


Centrifugacin zonal La muestra a analizar se deposita en la parte superior de un gradiente de densidad preformado. Bajo fuerza centrfuga las partculas comenzaran a sedimentar a travs del gradiente, movindose cada partcula a diferentes velocidades dependiendo de su masa.

Tipos de centrfugas
Caractersticas comunes: Un motor que hace girar un rotor donde se colocan los tubos que contienen las muestras a centrifugar. Diferencias: Velocidad que puede alcanzar la centrfuga Presencia o ausencia de refrigeracin Presencia o ausencia de vaco Volumen mximo de muestra Tipos ms usados en el laboratorio: Microfugas; utilizan tubos Eppendorf (hasta 10000xg) Centrfugas refrigeradas; volmenes mayores (hasta 100000xg) Ultracentrfugas preparativas (hasta 600000xg)

Equipos
Sedimentadoras

Tubular

Cmara mltiple
Tazn slido

Centrfugas
Filtrantes

Decantadoras
Discos

Equipos de Filtracin-Centrfuga
Canasta perforada cubierta con un medio filtrante que gira a altas velocidades. Los slidos se depositan sobre el medio filtrante. Salida de lquido claro.

Equipos de sedimentacin centrfuga


La suspensin se alimenta a un tazn que se hace girar provocando que los slidos se colecten sobre una pared y el sobrenadante se recupere por accin de un colector lquido. Clarificacin. Recuperacin de slidos. Operacin en forma continua o intermitente.

Centrfuga Tubular
Capaz de separar partculas hasta de 0.1 m. Modelos industriales: - 15000 rpm - 12000 G - entre 500 y 3500 l/h - 2 a 4 kg slido por lote

Centrfugas de Cmara Mltiple


Dimetro de 335 a 615 mm Entre 5000 y 8400 rpm 5000 y 9000 G Capacidad de slidos entre 2.5 y 60 litros.

Centrfugas Decantadoras o de Tornillo


Velocidades entre 1600 a 6000 rpm Campos centrfugos menores. Dimetro de 15 a 140 cm. Descarga de slidos de 30 kg/h hasta 60 ton/h

Alimentaciones entre 3.8 a 1890 l/min.

Centrfuga de Discos
Clasificacin segn la forma de descarga de slidos: Retencin de slidos. Tazn abierto de descarga intermitente de slidos. Vlvula tipo boquilla de descarga intermitente de slidos. Boquilla para la descarga continua de slidos

Tazn abierto

Retencin de slidos
Dimetro de 21-44 cm Fuerzas centrfugas de 5000-8000 G Capacidad de slidos de 5 a 20 litros Flujos de 0.4 a 1500 l/min

DATOS NECESARIOS PARA DEFINIR UNA CENTRIFUGACION


- Velocidad del rotor - Distancia radial - Duracin de la centrifugacin La velocidad de sedimentacin de una partcula depende, adems de la masa de la partcula, de la densidad y viscosidad del medio y el grado de desviacin de la partcula de una forma esfrica.

Las partculas generan friccin, la que se opone a su movimiento, la que depende del tamao, forma e hidratacin de la partcula y de la viscosidad del medio.

Fundamentos
Teora de sedimentacin:
Accin de la Gravedad

Ley de Stokes
Accin de una fuerza centrfuga Fuerza de aceleracin = Fuerza de empuje + Fuerza de arrastre
Flujo laminar Partculas esfricas

Velocidad de sedimentacin
SEDIMENTACION LIBRE
E: Empuje hidrosttico
E Fr P

CENTRIFUGACION

Fr: Fuerza de roce viscosa

Fr E R P PR Fc

P: Peso

Factor G
Medida relativa de la velocidad de sedimentacin de una partcula en un campo centrfugo con respecto a su velocidad de sedimentacin en el campo gravitacional.
G: campo centrfugo aplicado (aceleracin; cm/seg2) : velocidad angular (en radianes/seg) r: distancia de la partcula al eje de rotacin (cm)

Fuerza centrfuga aplicada

F = m x G = m x 2 x r
(m = masa de la partcula)

EL CAMPO CENTRIFUGO
Se expresa generalmente en en mltiplos del campo gravitacional g (981 cm/seg2). El campo centrfugo relativo (CCR) es la razn entre la aceleracin centrfuga a un radio y velocidad especificados, y la aceleracin de gravedad: CCR = 4 2 x (rpm)2 r/ 3600 x 981
Las unidades del CCR se expresan en x G y las revoluciones por minuto se abrevian como rpm. Habitualmente estos clculos se hacen con un nomograma.

VELOCIDAD DE SEDIMENTACION DE UNA ESFERA


La velocidad de sedimentacin depende no slo del campo centrfugo aplicado sino tambin de la densidad y radio de la partcula y de la viscosidad del medio. La relacin entre estas variables est definida por la ley de Stokes para una partcula esfrica rgida:

Dnde: es la velocidad de sedimentacin de la esfera 2/9 es una constante para la forma esfrica r el radio de la partcula p la densidad de la partcula m la densidad del medio g el campo gravitacional la viscosidad del medio As, dos partculas esfricas pueden separarse en funcin de su densidad y/o su tamao

Aplicaciones industriales de las centrfugas


Industria lechera. Industria de jugos naturales y cerveceras. Refinera de petrleo. Industria pesquera Industria de refinamiento de aceite de pescado Industria de refinamiento de aceites vegetales. Industria refinadora de azcar Purificacin de los aceites lubricantes Limpiadoras o lavadoras en seco Fbrica de productos qumicos Anlisis de Laboratorios.

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