PRUEBAS DE

COAGULACIO
N
Las pruebas de coagulación son un
conjunto de exámenes que evalúan la
capacidad del organismo para formar
coágulos de sangre y detener los
sangrados. Estas pruebas incluyen:
• la evaluación de factores de
coagulación,
• plaquetas y
• la integridad de los componentes
vasculares.
No existe una prueba de detección confiable para la
identificación de trastornos plaquetarios, sino
deberán hacerse una serie de pruebas.
Antes de realizar las pruebas se debe asegurar que
existe un recuento plaquetario de al menos 100
000/µl y que no se ha consumido antiagregantes en
los 10 días previos, ya que puede dar un falso
positivo.
Las muestras deben mantenerse a una temperatura
ambiente (20-25oC) durante su transporte y
almacenamiento. Los tubos deben transportarse en
posición vertical y se debe tener cuidado de no agitar
o sacudir las muestras.
 BIOMETRIA HEMATICA

• RECUENTO PLAQUETARIO
• VOLUMEN PLAQUETARIO MEDIO
• ANCHO DE DISTRIBUCION
PLAQUETARIA
• PLAQUETOCRITO
• FROTIS DE SANGRE PERIFERICA
 TIEMPO DE SANGRADO
Es el tiempo en el que dejan de sangrar los pequeños
vasos sanguíneos que han sido lesionados por una
incisión estandarizada, esta prueba tiene como finalidad
medir la FASE PRIMARIA de la coagulación sanguínea, es
decir, la interrelación entre las plaquetas y las paredes
de los vasos sanguíneos para formar el tapón
hemostático temporal y la capacidad que tienen los
capilares venosos para contraerse (vasoconstricción) y
evitar la hemorragia.
Es sencilla, económica y mide la función de las plaquetas
y los vasos sanguíneos.
 PRUEBA DE LAZO (Fragilidad
capilar)
En esta prueba se induce la extravasación de las plaquetas a
través de una presión constante, que bajo esa presión en
vasos sanguíneos normales debería de haber una
extravasación de un bajo número de plaquetas, sin embargo,
cuando hay una alteración en la permeabilidad de los vasos,
la extravasación de las plaquetas aumenta y se relaciona con
alguna patología.
Normalmente, la pared vascular no permite extravasación de
sangre, solo en situaciones anormales como desnutrición,
intoxicación, etc, se puede presentar una fragilidad del
endotelio capilar o pared vascular, que permite una salida
anormal de la sangre a los tejidos, lo que se traduce como
PETEQUIAS.
Es una medida de la integridad de los componentes
 TIEMPO DE OBTURACION
Es una prueba automatizada, es un equipo pequeño
(PFA), mide una agregación in vitro, sirve para
determinar la resistencia a la aspirina. Se coloca la
muestra en 2 cartuchos, dentro del equipo, un cartucho
contiene colágeno con epinefrina o ADP, y el otro P2Y
(Receptor plaquetario). Dentro de cada cartucho se
estimula el flujo de sangre de manera artificial, cada
cartucho tiene agregantes o agonistas plaquetarios que
estimulan que la plaqueta dentro del flujo creado, se
vaya adhiriendo o agregando.
Valora automáticamente la adhesión y agregación
plaquetaria.
 RETRACCION DEL COAGULO
Evalúa la parte final de la HEMOSTASIA PRIMARIA,
la parte donde el coagulo se contrae y consolida
por las proteínas contráctiles que tiene la plaqueta.
Se basa en la contracción de las plaquetas, gracias
a la proteína contráctil TROMBASTENINA, ADP
plaquetario y otras proteínas.
La retracción del coágulo depende del número de
plaquetas, de su actividad funcional y de la
concentración del FIBRINOGENO.
Anormal: Trombasteína de Glanzmann, fibrinólisis
severa, insuf renal y policitemia vera.
 AGREGACION PLAQUETARIA
La medición de la agregación plaquetaria o agronometría
plaquetaria es una técnica para estimar la cinética de la
agregación de las plaquetas por medio de turbidometría
(medición de la turbidez o densidad óptica). Mide el
tiempo de agregación de las plaquetas en reacción a un
agonista (activador).
En la actualidad existen 2 métodos diferentes para el
estudio de la agregación plaquetaria: El método óptico
original con plasma rico en plaquetas (PRP) y el método
de impedancia con sangre completa.
Es una prueba útil para ver las alteraciones de los
receptores plaquetarios y las trombocitopatías.
 CITOMETRIA DE FLUJO
Es una técnica muy sofisticada, cuantifica y mide
los receptores de las plaquetas (Gp).
Metodología que permite analizar células (u otras
partículas: 0.2-50µm) que se encuentran en un
fluido, en base a sus características de dispersión
de la luz y fluorescencia, al interaccionar una a
una con un rayo laser, una dispersión frontal mide
el tamaño de la célula o partícula evaluada y una
dispersión lateral mide la granularidad y/o
complejidad interna de la célula o partícula
evaluada.
Las pruebas de coagulación son ensayos funcionales que
tienen como objetivo replicar in vitro la activación del
sistema de la coagulación y evaluar la funcionalidad del
mismo, lo que permite fundamentar y orientar el
diagnóstico clínico.
Las pruebas clásicas son:
• Tiempo de Tromboplastina Parcial activado (TTPa) que
evalúa la vía intrínseca;
• Tiempo de Protrombina (TP) el cual evalúa la vía
extrínseca
• Tiempo de Trombina (TT) que evalúa la vía común.
Estas pruebas de laboratorio son útiles para detectar
deficiencias congénitas o adquiridas de factores de la
coagulación, de allí que se usen para estudiar pacientes
con manifestaciones hemorrágicas.
Las pruebas para evaluar la coagulación emplean plasma
fresco citratado, el cual debe ser procesado lo más
rápidamente posible y mantenerse en frio, sin ser
expuesto a contacto directo con hielo.
• La sangre se mezcla suavemente en tubos de plástico
con citrato de sodio al 3.8% en una proporción 1:9 e
inmediatamente se centrifuga a 4°C a 1400 rpm
durante 15 ó 20 minutos para obtener Plasma Pobre
en Plaquetas (PPP).
• Los plasmas no deben almacenarse por más de 2
semanas a -20°C o de 6 meses a -70°C.
• Cantidad de anticoagulante inapropiada puede dar
resultados muy alterados, que confunden al clínico,
debido a que la cantidad de citrato interfiere con el
calcio utilizado durante la prueba. Este error se ha
disminuido notablemente con los tubos de vacío con
presión negativa disponibles en la actualidad, ya que
están calibrados para extraer la cantidad exacta de
sangre para mantener la proporción adecuada con el
anticoagulante.
• El tiempo transcurrido entre la extracción de la sangre y
la realización de las pruebas, ya que si transcurren más
de 4 horas algunos factores lábiles como FV y VII se
inactivan, dando tiempos prolongados sin que
necesariamente reflejen la condición in vivo del
paciente.
 TIEMPO DE PROTROMBINA
La prueba es de un solo paso ya que se le
adiciona tromboplastina y cloruro de calcio y se
mide el tiempo en el que se forma el coagulo,
su valor oscila entre 10 a 13 segundos, pero
este tiempo varía dependiendo el tipo de
tromboplastina y el método de detección de
coágulos. Es un método global para evaluar
defectos en los factores de la vía extrínseca
(VII), común (X, V y II) y fibrinógeno. Esta
prueba es útil para realizar el control de
pacientes con terapia de anticoagulantes orales
RAZÓN O COCIENTE INTERNACIONAL
NORMALIZADA (RIN O INR)
Existe variabilidad entre las tromboplastinas utilizadas por las
casas comerciales, esto ocasiona que exista variabilidad en el
TP, por esta razón la OMS desarrollo un estándar con un Índice
Internacional de Sensibilidad (ISI) de 1.0 y las casas
comerciales la usan de referencia, entre más cercano es a
1.0 es más sensible la tromboplastina, para corregir la
variabilidad de los reactivos se desarrolló la Razón
Internacional Normalizada (RIN o INR) para mejorar la
estandarización de los informes de TP a nivel internacional.
El INR representa la relación de TP que se obtendría si se
hubiera utilizado la tromboplastina de referencia internacional
para evaluar al paciente, el INR se calcula con la siguiente
formula:
INR= (TP del paciente/TP del control normal ISI)
TIEMPO DE PROTROMBINA
V.N. = 10 a 13
seg
TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL
ACTIVADA (TTPa)
El TTPa evalúa el funcionamiento de la vía intrínseca de
la coagulación y emplea como activadores ácido
elágico, celite, sílica o caolín, en presencia de
fosfolípidos. Esta prueba detecta la deficiencia de los
factores VIII, IX, XI y XII. Adicionalmente, el TTPa se
prolonga por deficiencia de los factores de la vía común
como V, X, II y el fibrinógeno en menor grado. Esta
prueba también es muy útil para evaluar el tratamiento
con anticoagulantes no orales tipo heparina y para
rastrear el anticoagulante lúpico (agente
protrombótico, ya que la presencia de este anticuerpo
produce la precipitación y formación de trombos).
V.N. = 24 a 36 seg
(Autoanticuerpos)
 TIEMPO DE TROMBINA (TT)
El TT mide el tiempo de formación de
fibrina a partir del fibrinógeno presente
en el plasma, en presencia de una
cantidad estandarizada de trombina.
Esta prueba es muy útil para determinar
la presencia de fibrinógenos anormales
(disfibrinogenemias) o bajos niveles de
fibrinógeno circulante
(hipofibrinogenemias).
Para el ensayo, inicialmente se debe preparar
una solución de trombina estándar entre 2-3
UI/ mL, que debe dar un tiempo de coagulación
con un plasma control entre 18 y 22 seg.
Con tiempos de coagulación menores a 15 seg
debe hacerse una mayor dilución de la
trombina.
En general, se aplica el siguiente
procedimiento:
se mezclan 0.1 ml de PPP fresco citratado y
0.1 ml de la solución de trombina y se