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    1re STL

    Fiche technique n28

    RECHERCHE DE LDC, ODC (DECARBOXYLASES) ET ADH


    (DIHYDROLASE)
    1. Intrt
    La recherche des enzymes : - LDC : lysine dcarboxylase
    - ODC : ornithine dcarboxylase
    - ADH : arginine dihydrolase
    est dune grande importance pour lidentification des bactries de la famille
    des Enterobacteriaceae (bacille gram -, oxydase -) et dautres bacilles
    Gram -.

    milieu semi-synthtique

    2. Composition
    Quantit
    (g/L)

    Composant
    Arginine ou Lysine ou
    Ornithine

    0,2

    Extraits de levure

    Glucose en faible quantit


    Pourpre de bromocrsol
    NaCl

    1
    5
    2

    pH

    Rle
    Lecture
    dun
    caractre
    biochimique
    Apport
    de
    facteurs
    de
    croissance, vitamines.
    Source de carbone et dnergie
    Indicateur de pH
    Maintien de lisotonie

    6,8
    3. Principe

    Les enzymes ADH, LDC et ODC catalysent respectivement la dcarboxylation


    de larginine, de la lysine et de lornithine prsent dans le milieu.

    cette dgradation aboutit la formation de produits basiques ;


    lalcalinisation du milieu est rvle par un virage de lindicateur de
    pH (le pourpre de bromocrsol) sa teinte basique (violette).

    R - CH

    NH2
    COO

    dcarboxylase

    + H+

    + 1 e-

    dihydrolase

    R-CH2-NH2
    amine

    CO2

    1re STL

    Fiche technique n28

    On opre en milieu anarobie et contenant une faible concentration de


    glucose.

    lacidification (due lutilisation du glucose) et lanarobiose sont des


    conditions favorables la synthse des dcarboxylases.

    dans un premier temps, la bactrie dgrade le glucose entranant ainsi une


    acidification
    dans un second temps, si elle possde lenzyme correspondante, elle utilise
    larginine ou la lysine ou lornithine, entranant une alcalinisation du milieu.

    4. Ensemencement
    Ensemencer le milieu avec une goutte de suspension bactrienne dense.
    Agiter
    Si le tube nest pas plein, le recouvrir par de la vaseline strile afin de placer le
    milieu en anarobiose.
    Incuber 24 heures 37C, le bouchon viss compltement.

    5. Lecture
    Observation

    Coloration
    jaune

    Coloration
    violette

    Interprtation

    Conclusion

    Il y a eu acidification du milieu lie


    lutilisation du glucose mais il ny a
    pas eu ralcalinisation.
    Le substrat (arginine ; lysine ou
    ornithine) na donc pas t dgrad

    La bactrie ne possde pas


    lADH ou la LDC ou lODC
    Elle est dite
    ADH ou LDC ou ODC -

    Il y a eu acidification du milieu lie


    La bactrie possde lADH ou
    la fermentation du glucose PUIS il
    la LDC ou lODC
    y eu ralcalinisation du milieu lie
    la dgradation du substrat
    Elle est dite
    (arginine ; lysine ou ornithine) par la
    ADH + ou LDC + ou ODC +
    bactrie

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