Memoire Ortie 2020

République Algérienne Démocratique et Populaire
Université Abdelhamid Ibn ‫جامعة عبد الحميد بن باديس‬

Badis-Mostaganem ‫مستغانم‬
Faculté des Sciences de la ‫كلية علوم الطبيعة والحياة‬
Nature et de la Vie
DEPARTEMEN DE BIOLOGIE
MéMoire de fin d’études

Présenté par
BOUABDELLI Salah Eddine

Pour l’obtention du diplôme de
Master en BIOLOGIE
Spécialité : Pharmaco -Toxicologie
Thème
Screening Phytochimique, Analyse Chromatographique

et Activité Anti-oxydante de l’Ortie (Urtica dioica L)
Soutenue le ……...…/…../2020
Devant le Jury
Présidente Mme ATTOU. N Grade MCB U. Mostaganem

Encadreur Mme KRIBI. S Grade MCB U. Mostaganem
Examinatrice Mme BELHOUCINE. M Grade Pr U. Mostaganem
Année universitaire 2019- 2020

Remerciements
Au terme de ce rapport, nous avons le réel plaisir d’exprimer notre sincère Remerciements
à tous ceux qui nous a accompagnés au cours de la réalisation de ce mémoire.
C'est avec l'aide de Dieu tout puissant, que ce modeste projet a pu être réalisé, Dieu qui
nous a donné fois, raison et lucidité.
Dieu Merci.
J'exprime ma profonde gratitude à mon encadreur Madame KRIBI Soraya Maitre de

conférences B à l’université Abdelhamid Ibn Badiss de Mostaganem de m'avoir accordé tout en
acceptant de diriger ce travail et qui m’a beaucoup encouragé et m’aidé. Son attention, sa
bienveillance, ses orientations et ses critiques ont été des encouragements pour moi afin de
mener cette étude.
Mes remerciements s’adressent aux membres du jury Mme ATTOU .N, Maitre de
conférences B à l’université Abdelhamid Ibn Badis de Mostaganem, qui m’a fait l’honneur de
présider le jury de ce mémoire. Je tiens à exprimer ma gratitude à Madame BELHOUCINE. M
Professeur à l’université Abdelhamid Ibn Badis de Mostaganem pour avoir accepté d’examiner
ce travail.
Ma profonde reconnaissance à tous nos professeurs de la Faculté des Science de la Nature
et de la Vie de Mostaganem que chacune et chacun soient assurés de mon perpétuelle gratitude
et de mon amitié.
Mes remerciements vont aussi à Mme Saadia responsable de laboratoire de biochimie à

1’université de Mostaganem.
Nous sommes également reconnaissants à nos collègues de la licence et du Master pour

tous les bons moments que nous avons partagés ensemble pendant toute la période de formation.
Dédicaces
C’est avec un très grand honneur que je dédie ce modeste travail aux
Personnes les plus chères au monde, mes chers parents pour leurs
amour Et bonté et que sans eux je n’aurai jamais pu atteindre mon
objectif, que Dieu me les gardes
Je dédie mon travail à mes sœurs ainsi qu’à mes beaux frères
Mon neveux et mes nièces : Mohamed rayane, Rofaida, Razane et Eline
A ma fiancée et sa famille
A mes amies, Miloud, Yacine, Azzedine, Charef et Bilal et à toute la
promotion Pharmacotoxicologie 2019/2020

Liste des abréviations
UV : Ultraviolet
CCM : Chromatographie sur couche mince
Rf : Rapport frontal
DPPH : 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl
IC 50 : Concentration Inhibitrice 50%
PI : Pourcentage d’inhibition.
μl : Micro litre
mg/mL : Milligramme par millilitre
mm : Millimètre
mn : Minute
nm : Nanomètre
Liste des tableaux
Tableau 1 : Récolte, séchage et conservation des plantes……………………………………...5
Tableau 02 : Les différentes méthodes d’évaluation du pouvoir antioxydant………………..16
Tableau 3 : Tableau des constituants chimiques des parties aériennes de l’ortie…….…….....25
Tableau 4 : Propriétés Thérapeutique d'Urtica dioica L……………………………………...27
Tableau 5 ; la composition de l’ortie pour 100g de plante fraiche……………………….……30
Tableu 6 : la composition de l’ortie pour 100g de plante fraiche……………………………...31
Tableau 7 : Résultats du criblage phytochimique des feuilles d’Urtica dioica L……………..45
Tableau 8 : représente les résultats obtenus de la CCM……………………………………….48
Tableau 9 : IC50 de DPPH d'extrait d'Urtica dioica L………………………….……………...50

Liste des figures
Figure 01 : Squelette de base des flavonoïdes…...……………………………………………10
Figure 02 : Quelques exemples des flavonoïdes………………………………………............10
Figure 03 : Structure d'un tanin hydrolysable………………………….……………………...13
Figure 04 : Structure d'un tanin condensé…...……………………….………………………..13
Figure 05 : Diverses formes d’utilisation des plantes médicinales……………………….…...14
Figure 06 : Urtica dioica L.........................................................................................................21
Figure 07 : Feuille d’Urtica dioica L……………………………………………….………....21
Figure 08 : Fleur d’Urtica dioica L ………………………………………………………………….22
Figure 09 : Racine d’Urtica dioica L ………………………………………….……………...23
Figure 10 : Poil urticant d’Urtica dioica L ……………………………………………….…...24
Figure 11: Urtica dioica L Mostaganem, 2020………………………………………….…....34
Figure 12 : (Urtica Dioca L.) racine feuille et poudre/ Mostaganem, janvier2020 ……….....35
Figure 13 : protocole de préparation d’extrait méthanolique par macération………………..37
Figure 14 : préparation de l’extrait aqueux par infusion………………………….…………...38
Figure 15 : caractérisation des alcaloïdes et flavonoïdes sur CCM……………………………40
Figure 16 : Réaction entre le radical DPPH et l’antioxydant pour former le DPPH stable.....41
Figure 17 : extraction méthanolique…………………...…………………………….....….…..44
Figure 18 : Mise en évidence des métabolites secondaires…………………………………....45
Figure 19 : plaque CCM après séchage………….…………………………………………….46
Figure 20 : étude de séparation des principes actifs (alcaloïdes et flavonoïdes) .. …….……...47
Figure 21 : Pourcentage d'inhibition du radicale libre de l'extrait méthanolique d'Urtica

dioica……………………………………………………………………………………….......49
Remerciements
Dédicaces
Liste des abréviations
Liste des tableaux
Liste des figures
Table des matières
Résumé
Introduction .............................................................................................................................. 1
Chapitre I : L’intérêt biologique des plantes médicinales
1.Généralités ............................................................................................................................... 4
2. Récolte et conservation des plantes médicinales.................................................................... 4
3. L’intérêt biologique des plantes médicinales ......................................................................... 5
4. le médicament végétal ............................................................................................................ 6
5. Préparations à base de drogue(s) végétale(s) ......................................................................... 6
6. Solubilité des différents composants ...................................................................................... 7
7. Métabolite secondaire des plantes médicinales ...................................................................... 8
7.1. Les huiles essentielles ...................................................................................................... 8
7.2. Les polyphénols ............................................................................................................... 8
7.3. Acides phénoliques .......................................................................................................... 9
7.4. Les flavonoïdes ................................................................................................................ 9
7.4.1. Classification des flavonoïdes................................................................................. 10
7.5. Les alcaloïdes ................................................................................................................ 11
7.5.1. Structure des alcaloïdes........................................................................................... 11
7.5.2. Classification des alcaloïdes ................................................................................... 11
7.5.3. Les alcaloïdes vrais ................................................................................................. 11
7.5.4. Les pseudo-alcaloïdes ............................................................................................. 11
7.5.5. Les proto-alcaloïdes ................................................................................................ 11
7.5.6. Rôle des alcaloïdes .................................................................................................. 12
7.6 . Les saponosides ............................................................................................................ 12
7.7..Les tanins ....................................................................................................................... 12
8. Le pouvoir antioxydant des polyphénols ............................................................................. 14
81. Généralités sur les antioxydants ..................................................................................... 14
8.2. Mécanismes et pouvoir antioxydant des polyphénols ................................................... 15
8.2.1. Captures directes des radicaux libres ................................................................. 15
8.2.2.Les méthodes d’évaluation du pouvoir antioxydant ................................................ 15
8.3. Sources d’antioxydants....................................................................................................16
Chapitre II : la présentation botanique et biologique de la plante Urtica dioica
1. Description générale des Urticacées..................................................................................... 19

2. Dénominations de l'ortie....................................................................................................... 19
3. Origine et aire de répartition ................................................................................................ 20
4. Classification et Caractères Botaniques ............................................................................... 20
5. Description de l'Ortie dioïque .............................................................................................. 20
5.1. Feuille ............................................................................................................................ 21
5.2. Tige ................................................................................................................................ 22
5.3. Fleurs ............................................................................................................................. 22
5.4. Fruit et la graine ............................................................................................................. 23
5.5. Racines........................................................................................................................... 23
5.6. Poils (L’action urticante) ............................................................................................... 24
6. Composition chimique d’Urtica dioica L ............................................................................ 24
a. les parties aériennes .......................................................................................................... 24
b. Racines.............................................................................................................................. 26
7. Utilisation d'Urtica dioica .................................................................................................... 26
7.1. Principales Utilisations thérapeutiques .......................................................................... 26
7.1.1. Utilisation thérapeutique traditionnelle................................................................... 26
7.1.2. Utilisation thérapeutique actuelle ........................................................................... 27
7.2. Usages agricoles ............................................................................................................ 28
7.3. Usages en cosmétique .................................................................................................... 29
7.4. Usages divers ................................................................................................................. 29
7.5. Usages alimentaires ....................................................................................................... 30
8. Valeur nutritionnelle de l’ortie ............................................................................................. 30
Chapitre III : Matériels et méthodes
1. Généralités ............................................................................................................................ 33
2. Objectifs ............................................................................................................................... 33
3.Matériels et méthodes............................................................................................................ 33
3.1. Matériel végétal ............................................................................................................. 33
3.1.1. Classification botanique .......................................................................................... 34
3.2. Collecte du matériel végétal .......................................................................................... 34
3.4. Séchage .......................................................................................................................... 35
3.5. Broyage .......................................................................................................................... 35
3.6. Le mode d’extraction ..................................................................................................... 36
3.6.1.Extraction par macération ........................................................................................ 36
4.Criblage "Screening" phytochimique .................................................................................... 37
4.1. Test des saponines……………………………………………………………………..37
4.2. Test des flavonoïdes ...................................................................................................... 38
4.3. Test des tanins ............................................................................................................... 38
4.4. Test des stérols ou triterpénes ........................................................................................ 38
4.5. Test des alcaloïdes ......................................................................................................... 38
4.6. Test des phénols............................................................................................................. 38
5.Caractérisation des alcaloïdes et des flavonoïdes sur plaque CCM ...................................... 39
5.1. Préparation de la cuve chromatographique ................................................................... 39
5.2. Dépôt de l’échantillon sur la plaque .............................................................................. 39
5.3. Développement du chromatogramme ............................................................................ 39
5.4. Révélation et calcul de Rf .............................................................................................. 39
6. L’activité antioxydante par méthodes (Piégeage du radical DPPH) .................................... 41
6.1. Principe .......................................................................................................................... 41
6.2. Calcul des IC50 et de l'activité antiradicalaire (Scavenging activity) ........................... 41
Chapitre IV : Résultats et discussions
1.Résultats d’extraction ............................................................................................................ 44

1.2. Mode d’extraction.......................................................................................................... 44
2. Résultats du Screening phytochimique ................................................................................ 44
3. Caractérisation des alcaloïdes et des flavonoïdes sur plaque CCM ..................................... 46
4. Test de piégeage du radical libre DPPH............................................................................... 49
Conclusion générale ………………………………………....................................................53
Références bibliographiques ................................................................................................. 56

Résumé
L'Ortie est une plante communément répandue. Tout le monde la connaît pour son contact
urticant. En fait, c'est une plante médicinale utilisée depuis l'Antiquité pour ses nombreuses
propriétés thérapeutiques.
Dans le but de connaître les activités biologiques des plantes médicinales utilisées
traditionnellement par la population, notre travail a porté sur l’étude des extraits bruts des feuilles
et racines de Urtica dioica L (Urticaceae) par la méthode d’infusion et de macération
méthanolique
Le criblage phytochimique a mis en évidence une richesse de substances bioactives. La

caractérisation des alcaloïdes et des flavonoïdes sur plaques de CCM a révélé un nombre
important de spots, ce qui indique une richesse importante de composés de ces métabolistes
secondaires
Le piégeage du radical (DPPH) a montré que l'extrait méthanolique d'Urtica dioica est doté
d'une activité anti-oxydante importante ( IC50 = 1.87 mg/ml)
Mots clé : Urtica dioica L ; screening phytochimique ; CCM ; Activité anti-oxydante

Abstract
Nettle is a common plant. Everybody knows it for its stinging. In fact, it is a medicinal plant
used since ancient times for its many therapeutic properties.
In order to know the biological activities of medicinal plants traditionally used by the
population, our work has focused on the study of raw extracts of leaves and roots of Urtica dioica
L (Urticaceae) by the method of infusion and methanolic maceration.
Phytochemical screening has revealed a wealth of bioactive substances. The characterization
of alkaloids and flavonoids on TLC plates revealed a large number of spots, indicating a
significant richness of compounds of these secondary metabolists
Radical scavenging (DPPH) has shown that the methanolic extract of Urtica dioica has a high
antioxidant activity (IC50 = 1.87 mg/ml).
Keywords: Urtica dioica L; phytochemical screening; TLC; antioxidant activity

‫ملخص‬
‫نبات القراص نبات شائع‪ .‬يعرفها الجميع بسبب اتصالها الالذع ‪ .‬في الواقع ‪ ،‬إنه نبات طبي تم استخدامه منذ العصور‬
‫‪.‬القديمة لخصائصه العالجية العديدة‬
‫بهدف معرفة األنشطة البيولوجية للنباتات الطبية المستخدمة تقليديًا من قبل السكان ‪ ،‬ركز عملنا على دراسة‬
‫بطريقة التسريب والتنعيم الميثانولي )‪ Urtica dioica L (Urticaceae‬المستخلصات الخام من أوراق وجذور‬
‫كشف الفحص الكيميائي النباتي عن ثروة من المواد النشطة بيولوجيا‪ .‬كشف توصيف القلويدات والفالفونيدات على‬
‫‪.‬عن وجود عدد كبير من البقع ‪ ،‬مما يشير إلى ثراء كبير لمركبات هذه المستقلبات الثانوية ‪ TLC‬لويحات‬
‫يتمتع بنشاط كبير كمضاد لألكسدة ‪ Urtica dioica‬أن المستخلص الميثانولي من )‪ (DPPH‬أظهر المسح الجذري‬
‫)مجم ‪ /‬مل ‪(IC50 = 1.87‬‬
‫النشاط المضاد لألكسدة ‪ TLC.‬؛ الفحص الكيميائي النباتي‪: Urtica dioica L‬الكلمات المفتاحية‬
Introduction
Introduction
Introduction
Le monde des végétaux est plein de ressources et de vertus, d’où l’homme puise non
seulement sa nourriture mais aussi des substances actives qui procurent souvent un bienfait à
son organisme. Un grand nombre de plantes médicinales, possèdent des propriétés biologiques
très intéressantes, qui trouvent applications dans divers domaines en médecine, pharmacie,
cosmétique et en agriculture (Farombi ,2003).
Cependant, l’évaluation des propriétés phytothérapeutiques comme antibactérienne,
antioxydants demeure une tache très intéressante et utile, en particulier pour les plantes d’une
utilisation rare ou moins fréquente ou non connues dans la médecine et les traditions
médicinales. Ces plantes représentent une nouvelle source de composés actifs. En effet ; les
métabolites secondaires font et restent l’objet de nombreuses nouveaux constituants naturels
tels que les extraits par les solvants. La recherche des substances naturelles est un thème porteur
depuis quelques années et les laboratoires pharmaceutiques sont toujours prêts à l'élaboration
de nouveaux composés actifs, à l'identification, à la caractérisation des molécules naturelles et
à la mise au point des médicaments qui ont pour origine des substances naturelles et de s'inspirer
de leurs structures moléculaires pour imaginer de nouveaux médicaments. Ces molécules que
constitue le principe actif des plantes médicinales appartiennent majoritairement aux
métabolites secondaires tels que les polyphénols, les huiles essentielles et les alcaloïdes et
autres.
A cet effet notre étude porte sur l’activité biologique et valorisation de la plante Urtica
dioca L « l’ortie » qui est appelé reine des plantes. Elle joue un rôle très important dans la
cuisine algérienne (soupe, galette de pain à base d’ortie et autres). Elle possède des propriétés
anti anémique, anti diabétique et anti-inflammatoire (inflammation des articulations osseuses
et prostate). Cette plante a été récoltée commercialement pour l'extraction de la chlorophylle,
qui est utilisé comme colorant vert (E140) dans les aliments et les médicaments (Brown, 1995).
Les feuilles contient de la chlorophylle, des caroténoïdes, des vitamines C, K, B vitamines du
groupe (B1, B2 et B5), les tanins, l’huile essentielle, les protéines et minéraux (Fe, Cu, Mn et
Ni), tandis que la tige et la racine contiennent des flavonoïdes. Les feuilles sont comestibles,
elles peuvent être consommées crus, en quiches ou en soupe (Akbay ,2003), en plus, elle fait
toujours l’objet de plusieurs travaux de recherches.
1
Introduction
Le présent travail est divisé en trois chapitres dont le premier nous avons présentés la
plante Urtica dioca, son origine, ses principaux aspects botaniques et caractères écologiques.
Le deuxième chapitre concerne les métabolites secondaires à propriété thérapeutique anti
inflammatoire et anti oxydante.
Le troisième chapitre est consacré à l’étude phytochimique (le criblage des métabolites
secondaires). Il porte également sur le diagnostic et la séparation des principaux principes actifs
qui permettront d’expliquer les effets thérapeutiques de la plante à savoir les flavonoïdes et les
alcaloïdes par l’utilisation de la technique de chromatographie sur couche mince (CCM). Ces
tests consistent à détecter les différentes familles de composés par des réactions de précipitation
ou de coloration en utilisant des réactifs spécifiques pour chaque famille. Et enfin une partie est
réservée à une évaluation de l’activité antioxydante par méthode de DPPH.
L’ensemble des résultats a été discuté à la fin de ces chapitres dans le but de déterminer
l’intérêt thérapeutique de l’extrait de cette plante l’ortie.
Enfin dans la conclusion générale, on discutera les principaux résultats obtenus, les
limites de notre travail et les perspectives proposées et les protocoles non effectués pour pouvoir
compléter voir améliorer cette étude.
2
Chapitre I :
L’intérêt biologique
des plantes
médicinales
1. Généralités
1.1. Définition
Les plantes médicinales "sont des drogues végétales au sens de la Pharmacopée européenne
dont au moins une partie possède des propriétés médicamenteuses". Ces plantes médicinales
peuvent également avoir des usages alimentaires, condimentaires ou hygiéniques. En d’autres
termes nous pouvons dire qu’une plante médicinale est une plante dont un des organes, par
exemple la feuille ou l'écorce, possède des vertus curatives lorsqu’il est utilisé à un certain dosage
et d’une manière précise. Au Moyen Âge, on parlait de "simples" (Debuigne, 1974)
La connaissance rationnelle des plantes médicinales date de l'Antiquité. C'est Hippocrate
qui différencie l'usage interne et l'usage externe et qui définit la notion de dose qui permet de
distinguer l'effet thérapeutique de l'effet toxique (Colette-Keller, 2004). Au cours des dernières
décennies, les recherches scientifiques les plus modernes n'ont fait que confirmer le bien-fondé
des vertus thérapeutiques de la plupart des plantes médicinales utilisées (Carillon, 2000). Ce
savoir traditionnel ancestral, transmis de génération en génération, est devenu aujourd'hui une
mine d'informations extrêmement précieuses pour les chercheurs d'industrie pharmaceutique.
Aujourd'hui la pharmacologie s'oriente de plus en plus vers des traitements à base de plantes, car
l'efficacité de la synthèse chimique a largement atteint ses limites et n'arrive plus à être créative.
L'exemple de l'antibio-résistance microbienne, à l'origine de la recrudescence des maladies
nosocomiales se passe de tout commentaire (Iserin, 2001).
2. Récolte et conservation des plantes médicinales
Les propriétés des plantes dépendent essentiellement de la région de production, de la

période de récolte et des techniques de cueillette. La connaissance du calendrier des récoltes et
des techniques de cueillette et de conservation doit toujours être considérée afin de garantir la
qualité des produits. Les différentes parties d'une plante (racines, tiges, feuilles, fleurs, fruits et
graines) ont des modalités de croissance bien déterminées.
Les méthodes et les conditions de conservation doivent permettre d'éviter toute modification de
la nature des plantes (vermine, moisissures, micro-organismes) afin de préserver l'intégrité de
leurs propriétés actives (tableau 1). C'est une étape importante dans la garantie des propriétés
des plantes étudiées ou utilisées (Valnet, 2001 ; Çaucir et al., 2005).
4
Tableau 1 : Récolte, séchage et conservation des plantes (Valnet, 2001)
Partie de la plante Cueillette Séchage Conservat

on
Racines à l’air sec
Racines charnues à l’étuve
Racines mucilagineuses au four
Racines vivaces Au printemps
Racines des plantes En automne
annuelles et bisannuelles
Ecorce des plantes Quand il a acquis une certaine
annuelles et bisannuelles épaisseur et se sépare facilement du
corps
Au soleil ou à
Ecorce d’arbre En hiver
L’étuve
Ecorce d’arbrisseau En automne
Ecorce de résineux En printemps
A l’abri de l’humidité
Bois
Fleurs Au début de leur épanouissement A l’ombre et à
Les fleurs de rose se cueillent en atmosphère sèche
boutons
Feuilles Avant la floraison
Semences Quand la plante se dessèche
Tiges En même temps que les feuilles Au soleil ou
Feuilles épaisses dans une serre à
30-
Bourgeons Au début du printemps
Fruits Un peu avant complète maturité
3. L’intérêt biologique des plantes médicinales

De nombreux composés d’origine végétale ont déjà démontré des propriétés
antimicrobienne et antioxydante ; ces composés agissent suivant plusieurs mécanismes :
formation de complexes avec des macromolécules telles que les protéines et les polysaccharides,
5
inhibant ainsi leurs fonctions (polyphénols) ; rupture de membranes microbiennes (flavonoïdes

lipophiles, terpénoïdes) et inhibition de l’adhésion de protéines microbiennes aux récepteurs
polysaccharidiques de l’hôte (polypeptides). Les plantes médicinales fournissent également des
composés qui n’ont pas nécessairement un effet direct sur les microorganismes. Ces composés
appartiennent à diverses classes phytochimiques et agissent comme inhibiteurs des pompes à
efflux (flavonoïdes, terpénoïdes, alcaloïdes), inhibiteurs des PBP 2a (quinones, terpénoïdes), et
comme inhibiteurs des béta-lactamases (gallates d’alkyle) (Okusa, 2012).
4. le médicament végétal
Le médicament végétal, originaire de la matière vivante, est généralement mieux toléré
par l'organisme que de nombreuses substances de synthèse, physiologiquement très actives, mais
dont les effets secondaires sont parfois imprévisibles. Le monde végétal offre à la thérapeutique
des matières premières abondantes et variées, dont les ressources sont loin d'être complètement
exploitées. De plus la phytothérapie reste très actuelle, bien qu'ayant subi une évolution certaine
depuis ces dernières années.
En ces cinquante dernières années, grâce aux progrès des méthodes d'analyse, les
connaissances sur les végétaux se sont considérablement accrues. Beaucoup de revues d'extraits
bibliographiques comportent un nombre considérable de publications ayant trait à l'isolement des
constituants nouveaux chez les plantes, à l'étude détaillée de leur structure chimique, de leurs
propriétés physiologiques ou de leur formation chez le végétal. Même chez les drogues très
anciennement connues et employées depuis des siècles comme la Digitale, on découvre des
principes et des propriétés nouvelles. (Jamet J. 1998)
5. Préparations à base de drogue(s) végétale(s)

Les préparations à base de drogue(s) végétale(s) se présentent en extraits, teintures, huiles
grasses ou essentielles, fragments de plantes, poudres, sucs exprimés par pression… Leur
production met en œuvre des opérations de fractionnement, de purification ou de concentration.
Cependant, les constituants isolés, chimiquement définis, ou leur mélange ne sont pas considérés
comme des préparations à base de drogue(s) végétale(s). Des substances, telles que des solvants,
des diluants, des conservateurs peuvent entrer dans la composition des préparations à base de
drogue(s) végétale(s) ; la présence de ces substances doit être indiquée (Agence du
Médicament , 1998)
6
6. Solubilité des différents composants

En effet chaque plante contient des molécules différentes. Les flavonoïdes sont
généralement solubles dans l’eau. De plus des études ont montré que le solvant utilisé à haute
température augmentait le rendement de l’extraction de ces composés. Pour une même drogue,
l’infusé obtenu est trois à quatre fois plus concentré en flavonoïdes que le macérat ( Goetz, 2004).
Les alcaloïdes peuvent être présents dans les tisanes. Ce sont rarement les constituants
recherchés et ils peuvent se révéler toxiques. Ils sont solubles aux deux-tiers dans l’eau d’une
infusion. Les alcaloïdes du Quinquina sont quant à eux insolubles. Par contre, leur miscibilité
dans l’alcool augmente fortement. Les substances amères se retrouvent dans une tisane car elles
sont très hydrosolubles. Elles peuvent toutefois être détruites par la chaleur. Les vitamines
hydrosolubles, lorsqu’elles sont présentes dans la drogue, se retrouvent dans les tisanes. Mais
elles se conservent mal dans les préparations et sont plus ou moins détruites par la chaleur. C’est
le cas de la vitamine C. Les huiles essentielles sont solubles dans l’eau d’une infusion lorsque la
température est celle de l’eau bouillante. Lors d’une décoction elles disparaissent par évaporation
lente. Lors du refroidissement de l’infusé, elles précipitent en surface. L’estimation en quantité
est faible d’huiles essentielles qui se retrouvent dans une infusion traditionnelle. Les tanins ont
également une solubilité très diverse, allant d’un extrême à l’autre. Par exemple la catéchine est
peu soluble dans l’eau. Les dérivés anthracéniques peuvent se retrouver en quantité assez
importante dans l’infusé. Là encore de nombreux paramètres jouent leur rôle sur l’extraction de
ces composés, comme par exemple la pression gazeuse qui va augmenter celle-ci. Le simple fait
de couvrir la tisane durant le temps d’infusion augmentera la concentration en dérivés
anthracéniques du liquide obtenu. Enfin le reste des substances retrouvées dans les tisanes sont
classées dans ce groupe : les substances diverses. Les protéines ou encore les cires en font partie.
Leurs solubilités sont bien sûr très variées. De tous ces composés, les polyphénols sont parmi les
plus retrouvés dans les infusés. Par contre pour ce qui est des composés volatils, les teneurs
retrouvées sont très faibles (Lamaison, 2004).
Selon la ou les plantes utilisées, l’extraction par l’eau bouillante de la drogue donne des
résultats différents. L’hydrosolubilité des constituants ainsi que la structure histologique de la
drogue jouent chacune leur rôle dans le pourcentage des molécules retrouvées dans l’eau filtrée
après infusion. Plus une molécule est hydrophile, plus elle passera aisément dans une infusion.
( AFSSAPS , 2009)
7
7. Métabolite secondaire des plantes médicinales

Les plantes possèdent des métabolites dits « secondaire» bio synthétisés à partir de
métabolites primaires qui sont les protéines, les glucides et les lipides. Ces composés diffèrent
en fonction des espèces, ils interviennent dans les relations qu’entretient la plante avec les
organismes vivants qui l’entourent. Ils sont probablement des éléments essentiels de la
coévolution des plantes avec les organismes vivants, tels que parasites, pathogènes et prédateurs,
mais aussi pollinisateurs et disséminateurs. Ces différentes relations ont donné lieu à une extrême
diversification des composés secondaires (Krief, 2003). Plus de 8500 métabolites secondaires
sont déjà connus. Les plus grands groupes sont les alcaloïdes, les terpénoïdes, les stéroïdes
et les composés phénoliques. Ils présentent une énorme valeur économique (en particulier pour
l'industrie pharmaceutique et la cosmétique) (Alilou, 2012).Les produits du métabolisme
secondaire sont en très grand nombre, plus de 200.000structures définies (Hartmann, 2007) et
sont d’une variété structurale extraordinaire mais sont produits en faible quantité. Ces molécules
marquent de manière originale, une espèce, une famille ou un genre de plante et permettent
parfois d’établir une taxonomie chimique. Ils constituent un groupe de produits naturels qu’il
convient d’explorer pour des propriétés anti oxydantes, antimicrobiennes, anti-inflammatoires et
anticancéreuses (Epifano et al., 2007).
7.1. Les huiles essentielles
Les huiles essentielles sont des substances huileuses, volatiles et odorantes qui sont
sécrétées par les plantes aromatiques que l'on extrait par divers procédés dont l’entraînement à la
vapeur d’eau et l’hydro distillation, par pressage ou incision des végétaux qui les contiennent
(Oakes et al., 2001). Elles se forment dans un grand nombre de plantes comme sous-produits du
métabolisme secondaire (Angus et al., 1976). Elles sont très utilisées dans l'industrie de produits
cosmétiques, pharmaceutiques et agro-alimentaire. Les huiles essentielles se retrouvent dans des
glandes minuscules situées dans différentes parties de la plante aromatique : les feuilles, les
fleurs, les fruits, les graines, l'écorce et pour certaines plantes dans les racines (Eckert et
Knutson, 1994).
7.2. Les polyphénols
Les polyphénols sont des produits du métabolisme secondaire des végétaux, présents dans
toutes les parties des végétaux supérieurs : racine, tiges, feuilles, fleurs, fruits (Boizot et
Charpentier, 2006).
8
En effet les composés phénoliques, constituent le groupe le plus nombreux et le plus

largement distribué dans le royaume des végétaux, avec plus de 8000 structures phénoliques
connus (Lugasi et al., 2003).
Les principales classes de composants phénoliques sont: les acides phénoliques (acidecaféique,
acide hydroxycinnamique, acide chlorogénique), les flavonoïdes qui représentent plus de la
moitié des polyphénols, les tanins, et les coumarines (King et Young, 1999 ; Tapiero et al.,
2002).
7.3. Acides phénoliques
Ces composés sont dérivés de deux sous-groupes distingués : les acides

hydroxycinnamiques, dont les plus abondants sont l’acide caféique, l’acide férulique, l’acide
chlorogenique, et les acides hydroxybenzoïque, mais les plus répandus sont l’acide salicylique et
l’acide gallique. Sont contenus dans un certain nombre de plantes agricoles et médicinales. Et
présents chez toutes les céréales. Ils sont considérés comme substances phytochimiques avec des
effets prébiotique, antioxydant, de chélation et anti-inflammatoire. Leur toxicité est très faible
car ils sont considérés non toxiques. Les mieux caractérisés pharmacologiquement, sont l’acide
caféique et l’acide férulique qui montrent l’effet anticancéreux au niveau des poumons chez les
souris, alors que l’acide gallique agit par le même effet en prévenant le déclanchement du cancer
œsophagien chez les rats (Laraoui., 2007)
7.4. Les flavonoïdes
Le terme flavonoïde désigne une très large gamme de composés naturels appartenant à la
famille des polyphénols (Seyoum et al., 2006), ils sont considérés comme des pigments
quasiment universels des végétaux, souvent responsables de la coloration des fleurs, des fruits et
parfois des feuilles. À l’état naturel les flavonoïdes se trouvent le plus souvent sous forme
d’hétérosides (Bruneton, 1999 ;Ghestem et al., 2001). En effet, les flavonoïdes sont
omniprésents dans les organes aériens jeunes où ils sont localisés dans les tissus superficiels
(Remsy et al., 1996). Une meilleure connaissance de la biodisponibilité des flavonoïdes est
indispensable pour expliquer leurs effets protecteurs sur la santé (Walle, 2004)
9
Figure 1: Squelette de base des flavonoïdes (Walton et Brown, 1999)
7.4.1. Classification des flavonoïdes

La famille des flavonoïdes se divise en différentes classes qui diffèrent par leurs structures
chimiques: flavanols, flavones, flavonols, flavanones, isoflavones et anthocyanes (Medic et al.,
2004). Quelques exemples de ces flavonoïdes sont représentés dans la figure 2
Flavanols
Flavanols
Anthocyane Flavone
Figure 2. Quelques exemples des flavonoïdes (Gnu, 2007)
10
7.5. Les alcaloïdes
Le terme d’alcaloïdes a été introduit par W. Meisner au début du XIX ème siècle pour
désigner des substances naturelles réagissant comme des bases (Bruneton, 2009).
La définition admise des alcaloïdes est celle donnée par Winterstein et Trier en 1910 : « Un
alcaloïde est un composé organique naturel (le plus souvent d’origine végétale), hétérocyclique
avec l’azote comme hétéroatome, de structure moléculaire complexe plus ou moins basique et
doués de propriétés physiologiques prononcées même à faible dose » (Zenk et Juenger, 2007).
En général les alcaloïdes ne se concentrent pas dans une seule partie de la plante, ils se présentent
avec des concentrations différentes dans les tiges, les fleurs, les racines et les feuilles. Cette même
concentration se diffère selon la période de récolte.
Plus précisément, ils sont le plus souvent localisés dans les tissus périphériques ; assises externes
des écorces de tige et de racine, téguments des graine, etc. et rarement dans les tissus morts. Au
niveau cellulaire, la synthèse des alcaloïdes a lieu au niveau du réticulum endoplasmique et le
stockage dans les vacuoles (Krief, 2003)
7.5.1. Structure des alcaloïdes

La plupart des alcaloïdes dérivent des acides aminés tels que le tryptophane, L’ornithine,
la lysine, l’asparate, l’anthranilate, la phénylalanine et la tyrosine. Ces acides aminés sont
décarboxylés en amines et couplées à d’autres squelettes carbonés (Cyril, 2001).
7.5.2. Classification des alcaloïdes

Les alcaloïdes se divisent en trois classes :
7.5.3. Les alcaloïdes vrais
L’azote est inclus dans l’hétérocycle, ce groupe représente la majorité des alcaloïdes (Guignard,
2000).
7.5.4. Les pseudo-alcaloïdes
Les pseudo-alcaloïdes présentent le plus souvent toutes les caractéristiques des alcaloïdes vrais,
mais ne sont pas des dérivés des acides aminés (Badiaga, 2011).
7.5.5. Les proto-alcaloïdes

Les proto-alcaloïdes dérivent d’acides aminés, mais l’azote n’est pas inclus dans le système
hétérocyclique (Badiaga, 2011).
11
7.5.6. Rôle des alcaloïdes
A forte dose, la plupart des alcaloïdes sont très toxiques. À faible dose, ils peuvent avoir
une valeur thérapeutique. En effet, les alcaloïdes ou des extraits qui en renferment ont été utilisés
depuis la préhistoire comme médicaments relaxants musculaires, analgésique et tranquillisants
(Hopkins, 2003). Chez les plantes synthétisantes, les alcaloïdes régulent la croissance et le
métabolisme, ils désintoxiquent et transforment les substances nocives aux plantes, et les
protègent contre les rayons ultraviolets comme ils ont des effets contre les herbivores (Mauro,
2006).
7.6. Les saponosides

- Les saponosides constituent un vaste groupe d'hétérosides fréquents chez les végétaux. Elles
peuvent être classées en deux groupes selon la nature de leur génine.
- . Les saponosides à génines stéroïdiques.
-Les saponosides à génines triterpéniques (Bruneton, 1991).
7.7. Les tanins

Les tanins sont des substances qui entrent dans la texture des parois cellulaires. Selon leur
concentration dans un produit alimentaire, ils développent une note organoleptique positive
(bière, vin), ou négative lorsque leur astringence et leur amertume deviennent excessives. Ils
donnent aussi une saveur particulière à certains tissus végétaux [Cheftel, 1980].
Ce sont des substances polyphénoliques de structure variées, ayant la propriété de tanner la peau
[Nahrsted et Butterweck, 1997].
On distingue habituellement chez les végétaux supérieurs deux groupes de tanin, différents, aussi
bien par leur structure que par leur origine biogénétique [Haslam, 1989].
les tanins hydrolysables (Figure 03), sont des oligo ou des polyesters d'un sucre et d'un nombre
variable de molécule d'acides phénols. Le sucre est très généralement le glucose.
L'acide phénol est soit de l'acide gallique dans le cas des tanins galliques, soit l'acide
hexahydroxydephinique HDDP et ses dérivés d'oxydation dans le cas des tanins éllagiques
[Bruneton, 1999].
12
Figure 03 : Structure d'un tanin hydrolysable.
Les tanins condensés (Figure 04) ou pro-anthocyanidols, se différencie fondamentalement des

tanins galliques et éllagiques car ils ne possèdent pas de sucre dans leur molécule, et leur structure
est voisine de celle des flavonoïdes [Paris et Hurabielle, 1981].
Figure 04 : Structure d'un tanin condensé
13
Figure 5 : Diverses formes d’utilisation des plantes médicinales (Hosttmann, 1997)
8. Le pouvoir antioxydant des polyphénols

8.1. Généralités sur les antioxydants
Un antioxydant est défini comme une substance ajoutée à faible dose à un produit
naturellement oxydable à l'air, est capable de ralentir ou d'inhiber le phénomène d'oxydation.
Cette définition peut être élargie et le terme "antioxydant" englobe ainsi toutes les substances qui
protègent les systèmes biologiques contre les effets délétères potentiels des processus ou
réactions qui engendrent une oxydation excessive (Shimizu, 2004).
Les antioxydants sont des composés qui protègent les cellules du corps des dommages causés
par radicaux libres (Willcox et al., 2004). C’est pourquoi l’oxygène considéré comme une source
de vie pour les organismes aérobies au même temps comme une source d’agression pour
l’organisme (Ekoumou, 2003). En effet des dérivés hautement réactifs de l’oxygéne peuvent
apparaitre au cours des réactions enzymatiques ou sous l’effet des rayons U.V (Cavina, 1999).
Le stress oxydatif se définit comme étant un déséquilibre profond de la balance entre les
systèmes oxydants de l’organisme en faveur des premiers, ce qui conduit à des dommages
cellulaires et irréversibles. Le stress oxydatif est un fonctionnement de l’organisme qui est
14
normal tant qu’il ne dépasse pas certains limites (Pincemail et al., 1999).
Le stress oxydatif est impliqués dans de très nombreuse pathologies comme facteur
déclenchant ou associé à des complications (Favier, 2003), Il peut étre associé à l’athérosclérose,
l’asthme, l’arthrite, la cataractogénèse l’hyperoxie, l’hépatite, l’attaque cardiaque, les
vasospasmes, les traumatismes, les accidents vasculaires cérébraux, les pigments d’âge, les
dermatites, les dommages de la rétine. (Cohen et al.1999, Packer et Weber, 2001).
8.2. Mécanismes et pouvoir antioxydant des polyphénols

Plusieurs études épidémiologiques ont montrés qu’il y a un rapport inverse entre la prise
d’aliments riches en polyphénols et le risque des maladies neuro-dégénératives (Hu, 2003 ;
Bubonja-Sonja et al., 2011).
Cette relation est liée au fait que les composés phénoliques possèdent des propriétés
antioxydantes et sont capables de piéger les radicaux libres générés en permanence par notre
organisme ou formés en réponse à des agressions de notre environnement tels que O2
(Superoxyde anion), HO2 (Superoxy radical), H2O2 (Hydrogène peroxyde), OH (Hydroxyle
Radical), RO- (Alkoxyle Radical), ROO- (Peroxyde Radical) (Bors, 1990 ; Yamasaki et al.,
1996).Ils formeraient des espèces radicalaires intermédiaires peu réactives (Laughton et al.,
1989 ; Puppo,1992).
8.2.1. Captures directes des radicaux libres

Les polyphenols possèdent une structure chimique aromatique permettant une délocalisation
électronique importante, donc une stabilisation de leurs formes radicalaires.
C’est pourquoi les propriétés antioxydantes des polyphenols sont souvent associées à leur
potentiel antiradicalaire. De nombreuses études soutiennent le fait que l’activité antioxydante des
polyphenols est essentiellement liée à leur capacité de réduire les espèces réactives de l’oxygène
comme les supéroxyde, hydroxyles, péroxyls, et alkoxyles par transfert d’hydrogène (Fiorucci,
2006).
8.2.2. Les méthodes d’évaluation du pouvoir antioxydant

Il existe différentes méthodes pour mesurer le pouvoir antioxydant d’un aliment ou d’un fluide
biologique (tableau 02) (Salah et al., 1995) :
15
Tableau 02 : Les différentes méthodes d’évaluation du pouvoir antioxydant (Salah et al., 1995).
Tests du pouvoir antiradicalaire
Tests Avantage Limites Références

Peu spécifique
Sensible, simple et (Benzie et strain,
FRAP 37O Ne mesure que le
rapide 1996)
pouvoir réducteur
Rapide,peu Ne mesure que le
(Brand-williams et
DPPH 20O sensible pouvoir
antiradicalaire al., 1995)
8.3. Sources d’antioxydants
Nous avons principalement deux sources d’antioxydants :
A. Source endogène
Se compose de protéines, d’oligoéléments et d’enzymes qui constituent la première ligne de
défense en participant à la neutralisation excédentaire en radicaux libres (Coene, 2004).
* La superoxydedismutase (SOD)
Cette enzyme existe sous deux formes : une cytoplasmique, qui nécessite comme cofacteur les
ions de cuivre et de zinc (CuZnSOD) et l’autre mitochondriale, qui utilise le manganèse comme
cofacteur (MnSOD) (Jacques et André, 2004). Elle transforme l’anion superoxyde en peroxyde
d’hydrogène qui se transforme en O2 et en eau par catalase (Allain, 1996).
* La catalase
Détruit l’eau oxygénée et évite ainsi la formation de radicaux OH.
* La glutathion-peroxydase
Se trouve dans les mitochondries, elle nécessite la présence de deux cofacteurs importants : le
glutathion réduit et le sélénium. Elle détruit les peroxydases lipidiques.
*Les chélateurs de métaux
La ferritine, la transferrine, l’albumine qui par liaison aux métaux leur font perdre partiellement
ou totalement leur activité de stimulation des réactions radicalaire (Traoré, 2005).
16
B. Source exogène
Peut-être soit des nutriments classiques (peptides et acides aminés, vitamines E et C) ou des
composants bioactifs (flavonoïdes, caroténoïdes).
* Les polyphénols : doivent leur activité à un très grand nombre de résidus hydroxyle, qui sont
autant de munition pour lutter contre les radicaux libres (Rolland, 2004).
* Les flavonoïdes : réagissent avec les radicaux libres empêchant les dégradations liées à leur
intense réactivité au niveau des phospholipides membranaire. Cette capacité antioxydante serait
liée à l’affinité pour les radicaux et donc à la structure du flavonoïde.
* Tanins : inhibent la peroxydation lipidique, ce sont des piégeurs de radicaux libres, des
inhibiteurs de la formation de l’ion superoxyde (Bruneton, 1993)
17
Chapitre II :
Présentation botanique
et biologique de la
plante « Urtica dioica »
Chapitre II : la présentation botanique et biologique de la plante
Urtica dioica / Ortie
1. Description générale des Urticacées

La famille des Urticacées comprend une cinquantaine de genres et après de 700 espèces
réparties à travers le monde. Deux genres sont représentés dans nos pays septentrionaux : Urtica
et Parietaria. On distingue les Urticacées avec poils urticants (genre Urtica) ou sans (genres
Parietaria et Boehmeria).
Les principales espèces du genre Urtica sont :
 Urtica dioica L.
 Urtica urens L. (Ortie brûlante ou "petite ortie")
 Urtica pilulifera L. (Ortie romaine ou "ortie à pilules")
 Urtica cannabina L.
 Urtica atrovirens Req.
 Urtica membranea Poiret.
Ce sont les espèces U. dioica et U. urens qui sont connues pour posséder des propriétés
médicinales. U. dioica étant le sujet de cette étude.
Les Urticacées sont des plantes herbacées élancées à feuilles stipulées opposées par deux
et à petites fleurs unisexuées. Les fleurs mâles possèdent quatre sépales et quatre étamines, les
fleurs femelles son formées de quatre sépales et d'un carpelle, et donnent naissance à un fruit
sec : un akène. (Bertrand, Bézanger-Beauqesne et al., 1961).
2. Dénominations de l'ortie
D'après Wichtl et Anton 1999, Urtica dioica L. est appelée :
- En français : Ortie commune, Grande ortie, Ortie vivace,
-En anglais: Nettle, Common Nettle, Stinging Nettle, Tall Nettle, Slender Nettle, California
Nettle, Greater Nettle.
-En arabe: ‫حرايق‬, ‫القراص‬.
19
3. Origine et aire de répartition

Originaire d'Eurasie, l'Ortie s'est répandue dans toutes les régions tempérées du monde. On la
rencontre plus en Europe du Nord qu'en Europe du Sud, en Afrique du nord, en Asie et
largement distribuée en Amérique du Nord et du Sud (Brisse et al., 2003).
4. Classification et Caractères Botaniques

Le terme Urtica tire son nom du latin uro ou urere qui signifie "celle qui brûle", allusion à ses
poils urticants dont le contact est très irritant. Le terme dioica vient de dioïque, ce qui signifie
que les fleurs mâles et les fleurs femelles se trouvent sur des pieds séparés (Rioux et al., 2009).
Selon (Quézel & Santa, 1963). Urtica dioica L. appartient au :
Règne : plantae (plantes).

Sous-règne : Tracheobionta (plantes vasculaires).
Embranchement : Magnoliophyta (phanérogames).
Sous-embranchement : Magnoliophytina (angiospermes).
Classe : Rosideae.
Sous-classe : Rosideae dialycarpellées.
Ordre : Rosales.
Famille : Urticaceae.
Genre : Urtica L.
Genre espèce : urtica dioica L.
5. Description de l'Ortie dioïque

L'Ortie dioïque est aussi appelée "Grande Ortie », "Ortie commune" ou "Ortie vivace".
L’ortie est une plante herbacée vivace, vigoureuse et à longue durée de vie par un rhizome jaune
rampant, nitrophile, couverte de poils crochus irritants elle peut atteindre 1,50 mètre de haut
(Beloued., 2001). (Figure 06)
20
Figure 6 : Urtica dioica L
5.1. Feuille
Urtica dioica est constituée de feuilles simples charnues, tombantes dentelées, grossièrement
en forme de cœur, et la tige sont recouverts de poils urticants blanc (Alternatine medicine
review., 2007).
Les feuilles simples à long pétiole sont opposées deux à deux, de couleur vert foncé en raison
de leur richesse en chlorophylle (schaffner., 1992 ; moutsie., 2008). (Figure 07)
Figure 7 : Feuille d’Urtica dioica L

Photo prise par moi-même janvier 2020- Mostaganem
21
5.2. Tige
Elle est dressée, velue, non ramifiée et quadrangulaire portant des poils urticantes et des poils
courts, très fibreuse porte des feuilles opposes ovales, acuminées fortement dentées sur les
bords, à grosse dents ovales- triangulaires (Schaffner., 1992).
5.3. Fleurs
Elles sont déposées en grappes ramifiées, allongées et pendantes, les grappes se situent à
l’aisselle des feuilles comme déjà dit, la grande ortie et dioïque car elle porte les fleurs femelles
et male sur des plants différents (boullard., 2001 ; fleurentin., 2008).
* Fleurs femelles : Elles ont 4 sépales et un ovaire velu de couler verdâtre, les grappes qui les
portent pendent, en particulier lorsque les graines se forment, elles sont dépourvues de nectar
[moutsie., 2008].
* Fleurs males : Elles ont 4 sépales et 4 étamines, elles sont portées par longues grappes serrées
très rameuses, développées par paires, à l’aisselle des feuilles. Chaque étamine libère environ
15000 graines de pollen jaune, à la réputation allergisante (moutsie., 2008).
La floraison est estivale, soit du printemps jusqu’au début d’automne (Fletcher., 2007).
(Figure 08)
Figure 8 : Fleur d’Urtica dioica L.

Photo prise par moi-même janvier 2020- mostaganem
22
5.4. Fruit et la graine

Le fruit d’Urtica dioica L est constitué d’un akène, formé dans un calice persistant, contient
une graine provenant des panicules à maturité, leur couleur sable à jaune – brun, de forme
aplatie, ovoïde et pointue, mesure 1.0 à 1.5 mm de long sur 0.7 à 1.0 mm de large. Son extrémité
pointue porte des restes de stigmates pénicillés. Ces fruits sont très souvent entourés de deux
petites feuilles extérieurs, étroites, et de deux feuilles intérieures plus grandes, larges et de
couleurs vertes ou de leurs restes (Wichtl et Anton., 2003).
5.5. Racines
Ce sont des rhizomes – tiges souterraines, jaunâtres, traçants et abondement ramifiés qui
développent chaque année de nouvelles pousses, d’où le caractère par fois envahissant de l’ortie
ils fixent l’azote de l’aire grâce à l’action de microorganismes (Rhizobium frankia) qui vivent
en symbiose avec l’ortie (moutsie., 2008). (Figure 09)
Figure 9 : Racine d’Urtica dioica L

Photo prise par moi-même janvier 2020- mostaganem
G : racine d’une plante âgée, M : racine d’une plante Moyenne, J : racine d’une plante jeune
23
5.6. Poils (L’action urticante)

L’action urticante est due au liquide contenu dans les poils et qui est libéré au moindre choc
qui casse leur extrémité, les transformant ainsi en une véritable aiguille hypodermique. Ce
liquide contient de l’acétylcholine, de l’histamine et d’après des travaux publiés en 1990.
Les poils urticants contiennent de l’histamine, de l’acide formique, de l’acide acétique, de

l’acétylcholine, de l’acide butyrique, que des leucotriénes, de la 5-hydroxytryptamine
(sérotonine) ainsi que d’autres substances irritantes (fleurentin., 2008). (Figure 10)
Figure 10 : Poil urticant d’Urtica dioica L

[fleurentin., 2008].
6. Composition chimique d’Urtica dioica L

Vu son usage traditionnel millénaire, les scientifiques ont accordé un important intérêt à sa
composition chimique (Tita et al., 2009).
L’étude phytochimique d’Urtica dioica L a révélé que cette plante contient des
métabolites secondaires, essentiellement des flavonoïdes, des tanins et des composés volatiles,
mais aussi des acides gras, des polysaccarides, des stérols, des terpènes des protéines, des
vitamines et des minéraux (Rafajlovska et al., 2001 ; Krystofova et al., 2010 ; Gul et al.,
2012).
a. les parties aériennes
Les parties aériennes d’Urtica dioica L (les feuilles) contiennent de la chlorophylle, plusieurs
24
vitamines, caroténoïdes, huiles essentielles et des minéraux parmi lesquels on cite : Fe, Cu, Mn et Ni.
Quant aux poly phénols présents dans cette plante, il s’agit principalement d’après la littérature de
kaempférol, isorhamnetine, quercétine, isoquercitineet d’astragaline qui confère à la plante ses
propriétés antioxydantes (Bhuwan et al., 2014)
- Flavonoides: Quercetin-3-O-rutinoside (rutin), kaempferol-3-O-rutinoside and isorhamnetin-
3-O-glucoside.
- Huiles essentielles : Carvacol, carvone, naphthalene, (E)-anethol, hexahydrofarnesyl acetone,
(E)-geranyl acetone, (E)-β-ionone and phytol.
- Mineraux et les traces des éléments : Calcium, Potassium, Magnesium, Phosphorus, Iron,
Sulphur, Zinc, Manganese, Copper, Nickel and Selenium. (Gül S,.et al 2012)
- Vitamines : vitamin A (retinol), vitamin B2 (riboflavin), vitamin B5 (pantothenic acid),
vitamin B9 (acide folique), vitamin C (acide ascorbique), vitamin K (phylloquinone). (Pradhan
S,. et al 2015).
- Autres constituants : Tannins, chlorophyll et carotenoids. ( Rutto LK,.et al 2013)
Les tiges dont les poils contiennent de l’acétylcholine, de l’histamine, 5-hydroxytryptamine
(sérotonine), des leucotriénes et de l’acide formique qui sont responsables de l’effet urticant de
la plante (Collier et al., 1956 ; Fu et al., 2006).
Tableau 3 : Tableau des constituants chimiques des parties aériennes de l’ortie (Ghedira et
al. 2009).
Famille de constituants constituants chimiques

chimiques
Neuromédiateurs Histamine (0,1 à 0,56 %),
acétylcholine (1 %), sérotonine (0,02%), leucotriènes
(présence contestée), choline acétyltransférase
Acide phynols Acide caféique et ses esters (acide caféyl-malique, 1,6 %),
acide chlorogénique, acide néochlorogénique
Flavonoide 3-glucosides et 3-rutinosides du quercétol, du kaempférol, et
de l’isorhamnetol
Autres constituants Scopolétol, sitostérol, glycoprotéines, lipides, sucres, acides
aminés libres, traces de nicotine, vitamine C,
chlorophylle, vitamine K, huile essentielle, tanins
Mineaux (cendre 18 ℅) Calcium, potassium, silicates
partiellement solubles
25
b. Racines
Les racines contiennent :
- Les polysaccharides : glucans, arabinogalactans et rhamnogalacturonans.
- Flavonoides : myricetin, quercetin, kaempferol, quercetin-3-O-rutinoside (rutin),
kaempferol-3-O-rutinoside et isorhamnetin.
- Minéraux et traces d’éléments : Calcium, Magnesium, Zinc, Manganese.
- Phytosteroles : β-sitosterol; β-sitosterol-3-O-β-glucoside, (6'-O-palmitoyl)-sitosterol-3-O-β-
D-glucoside; 7β–hydroxysitosterol; 7α-hydroxysitosterol; 7β-hydroxysitosterol-β-D-glucoside
7α- hydroxysitosterol - β- glucoside; 24 R- ethyl -5α- cholestane-3 β, 6α –diol ; stigmasterol,
campesterol, stigmast-4-en-3-on, hecogenin.
- Lignans : neo-olivil, secoisolariciresinol, dehydrodiconiferyl alcohol, isolariciresinol,
pinoresinol, et 3,4-divanillyltetrahydrofuran.
- Coumarines : Scopoletin ( Seliya, et al 2014).
7. Utilisation d'Urtica dioica

L'Ortie est une des rares plantes que l'on peut reconnaître les yeux fermés. Elle est
considérée comme une « mauvaise herbe », mais en réalité c'est une plante riche en vitamines
et minéraux et pourvue de nombreuses vertus. Son utilisation est multiple, elle est employée à
des fins médicinales en agriculture, en alimentation, en cosmétique, en teinturerie, dans
l'industrie du textile (Bertrand et Jeanne., 2008).
7.1. Principales Utilisations thérapeutiques
7.1.1. Utilisation thérapeutique traditionnelle

L'ortie est un remède traditionnel utilisé depuis des années contre l'anémie et le manque
d’énergie : on dit que c'est un excellent fortifiant grâce à sa haute teneur en fer et autres
minéraux. On dit aussi qu'elle stimule les fonctions digestives (lourdeurs et crampes d'estomac)
(Wichtl et Anton., 2003).
La tisane d'ortie est toujours proposée par les phytothérapeutes comme remède traditionnel pour
la goutte et les rhumatismes. En Allemagne, la tisane d'ortie est utilisée comme diurétique léger,
mais elle n'est pas suffisamment puissante pour être associée à un traitement de l'hypertension
ou les problèmes cardiaques. Alors qu'en Russie, l'ortie est aussi employée pour les troubles
biliaires et hépatiques (Valnet., 1983).
26
7.1.2. Utilisation thérapeutique actuelle

L'ortie dioïque appartient au monopole pharmaceutique. Elle est inscrite sur la liste des
plantes médicinales retenues comme telles par la Pharmacopée dans le monde entier.
Aujourd'hui, les propriétés médicinales de l'ortie sont reconnues et la plupart des pratiques
populaires ancestrales ont été confirmées par l'analyse et l'expérimentation. De nos jours, l'ortie
rentre dans la composition d'une multitude de médicaments allopathiques et les recherches se
poursuivent et viennent toujours confirmer certaines utilisations empiriques (Cazin., 1997).
Tableau 4 : Propriétés Thérapeutique d'Urtica dioica L
Propriétés Thérapeutiques Actions Références
Traitement de cancer Les effets de la racine d'ortie - Konrad et al., 2000

prostatique et le traitement de l'HBP. (Un - Durak et al., 2004
d'hypertrophie bénigne effet comparable à celui de la - Schneider et
de la prostate. tamsulosine). Rubben, 2004
- Safarinejad, 2005
- Hoffman, 2006
Hypotenseur Les racines d'Ortie peuvent - Broncano, 1983
produire des réponses - Newal et al., 1996
hypotensives à travers des - Blumenthal, 2000
effets vasodilatateurs. Par la - Tahri et al., 2000
libération de l'oxyde d'azote - Testai et al., 2002
endothélial et par l'ouverture - Legssyer et al., 2002
des canaux potassiques. Et à
travers une action inotrope
négative.
Diurétique Augmente le débit urinaire - Blumenthal, 2000
- Yener et al., 2008
Hépato- Elimination des toxines - Turkdogan et al., 2003
protectrice, accumulées dans - Yener et al., 2008
Dépurative l'organisme (urée- ions de
chlorure).
La feuille aide à assainir
autant la lymphe
que le sang en diminuant
l'acidité tout en
régulant les facteurs
inflammatoires.
27
Tableau 4 (Suite) : Propriétés Thérapeutique d'Urtica dioica L
Propriétés Thérapeutiques Actions Références
Anti-allergique, Anti- Utile dans le traitement de - Mittman, 1990

oxydante l'allergie au pollen, - Gulcin et al., 2004
traitement de longue durée. - Ilhami et al., 2009
Effets sur les récepteurs clés -Roschek et al., 2009
et les enzymes associés à la
rhinite allergique (feuilles).
Anti-anémique, Anti- Antifatigue grâce à la forte - El houri et al., 2006
agrégation teneur en fer contenu dans la
plaquettaire chlorophylle des feuilles.
Anti- Activité inhibitrice sur un - Glusker et Rossi, 1986
inflammatoire, œdème de patte de rat des - Wagner, 1994
Immuno- polysaccharidique de l'extrait - Akbay et al, 2003
stimulateur aqueux des racines. - Capasso et al., 2003
Une activité immuno-
stimulatrice des flavonoïdes
glycosides des feuilles sur les
neutrophiles.
Traitement de Effet sur la maturation des - Wang et Wei, 2001
rhumatismes et Arthrose cellules dendritiques - Broer et Behnke, 2002
myéloïdes humaines, avec
diminution de l'induction la
réponse des
cellules T primaires du
rhumatisme articulaire.
Consolidation des cartilages
grâce à sa richesse en Silice
(surtout les racines).
Effet sur la fonction La feuille d'ortie est capable - Wichtl et Anton, 2003
cérébrale et la de diminuer la transcription
mémoire des facteurs de
l'inflammation, et de stimuler
la performance cérébrale.
Alopécie (chute des Stoppe la chute des cheveux. - Davis, 1982
cheveux) (Surtout les racines)
7.2. Usages agricoles

L'ortie nous plonge au tout début de l'agriculture. Car cette plante fut rapidement apprivoisée
et devint une alliée précieuse du jardinier, qui peut, grâce à quelques applications simples,
rendre son jardin plus productif (Tabardel., 2003).
28
Il appréciera ses vertus fertilisantes et insecticides, et renforcera la vitalité de ses légumes. Mais
c'est surtout pour le jardinier biologique qu'elle est un outil indispensable. C'est, entre autres,
grâce à elle et à ses multiples utilisations que l'on peut sans difficulté se passer des traitements
qui empoisonnent le jardin et notre santé. On note aussi que sa seule présence stimule la
croissance des végétaux voisins, de plus elle protège le sol des accidents climatiques
(Bertrand., 2007).
Le purin d'ortie s'utilise soit comme fertilisant, soit en traitement préventif de certaines maladies
ou invasions de parasites. Sa réputation est ancienne. On l'utilisait en agrobiologie sans même
connaître les raisons scientifiques. Ce n'est que récemment que des chercheurs, intrigués par
ces résultats, ont décidé de le soumettre à de rigoureuses expérimentations. Les travaux
effectués en 1981, sont l'œuvre de Roif Peterson, chercheur suédois. Ils confirment en tous
points les travaux de terrain et donnent des arguments de poids aux fervents défenseurs
de l'agriculture biologique (Peterson., 1986). Sans oublier que c'est aussi un excellent
accélérateur de compost (Bertrand., 2007).
7.3. Usages en cosmétique

L'Ortie est également utilisée en cosmétique sous forme de shampooing, car on lui attribue la
capacité de stimuler la croissance des cheveux (les feuilles et les racines sont d'excellents
toniques capillaires) et dans certains produits pour traiter les maladies de la peau
comme 1'eczéma et l'acné (Binns., 2006).
7.4. Usages divers

L'Ortie est aussi utilisée pour certains colorants car elle a une haute teneur en
chlorophylle. Ses teintes vont du jaune (racines) au vert (feuilles). On a extrait de la
chlorophylle des colorants alimentaires (E140), des arômes utilisés pour des dentifrices et
chewing-gums (Sylvie et Ghislain., 2005). On retrouve également cette plante dans la
fabrication du papier et dans la composition de billets de banque (Petiot et aI., 2010).
On cite aussi qu'en Normandie, l'ortie était utilisée pour enlever les taches de graisse
récalcitrantes. En montagne, les bergers récuraient leur chaudron à fromage avec une poignée
d'orties fraîches. Cette propriété bien réelle de l'ortie est due à la forte concentration de la plante
en silice (dans les poils) et en cristaux de calcium (dans l'épiderme) (Bertrand., 2002)
29
7.5. Usages alimentaires

« Il y en a des plus riches que moi qui ont mangé des orties ! » Dicton populaire français. L'ortie
dioïque fait sans doute partie de ces légumes primitifs. Consommés depuis la nuit des temps.
Les feuilles de cette plante sont comestibles, et peuvent être mangées crues (hachées en salade)
ou en légumes, dans des gratins, en soupe, des quiches ou dans la potée aux orties. Le plus
souvent elles sont consommées cuites à l'instar des épinards (Couplan et Styner., 2002).
L'ortie est aussi cultivée à des fins alimentaires pour ensuite être vendue dans des magasins
d'alimentation bio sous des présentations pratiques (Bertrand et Jeanne., 2000).
C'est une plante extrêmement nutritive car elle est riche en chlorophylle et en minéraux, dont
le fer, en protéines et en vitamines. Un taux de 4,8 mg de chlorophylle par gramme des feuilles
sèches a été trouvé. Cultivée depuis des temps immémoriaux comme fourrage, l'ortie a
l'avantage d'être présente autour de toute ferme. Les agriculteurs mettent à profit toutes les
parties de la plante pour alimenter le bétail, qu'il soit grand ou petit, de la poule à la vache.
Fauchée, puis fanée et séchée, l'ortie perd son pouvoir urticant, et constitue un fourrage
d'excellente qualité, particulièrement riche en éléments minéraux et en protéines. Elle peut être
donnée à tous les animaux de la ferme. Celle-ci peut être consommée fraîche ou sèche, seule
ou mélangée à d'autres aliments (Tabardel., 2003).
La feuille d'ortie fraîche finement hachée est mélangée à du son et de la farine, servait à
engraisser les dindonneaux, les poulets et les canards. Tandis que les chevaux, ânes et les
ruminants apprécient la feuille d'ortie, quand elle est sèche (Lieutaghi., 1996).
8. Valeur nutritionnelle de l’ortie

L’analyse a été réalisée en mai 2008 par les laboratoires ‘Toulouse à partir de plantes fraiches
(Bertrant 2010)
Tableau 5 : la composition de l’ortie pour 100g de plante fraiche (Bertrant 2010)

calories Protides Lipides Glucide Cellulose
57 5.5 0.7 7.1 2
30
Tableu 6 : la composition de l’ortie pour 100g de plante fraiche (Bertrant 2010)
Elément Donné bibliographique Analyse terrain

Provitamine A 700UI pour 100g < 214µg/100g
Vitamine B9 - 212mg/100g
Vitamine B1 0.15mg/100g 0.03mg/100g
Vitamine B2 0.15mg/100g 0.12
Vitamine C 333mg/100g 41mg/100g
Phosphore(P) 0.105g/100g 0.673g/100g
Potassium(k) 0.41g/100g 2.044g/100g
Calcium(Ca) 0.63g/100g 3.24g/100g
Magnésium(Mg) 0.071g/100g 0.399g/100g
Fer (Fe) 7.8mg/100g 13.4mg/100g
Manganèse ( Mn) - 3.31mg/100
Zinc (Zn) - 1.87mg/100g
Cuivre (Cu) - 1.59mg/100g
Bore (B) - 3.05mg/100g
Sodium (Na) 0.001mg/100g 8.06mg/100g
L’ethnobotaniste Francois Couplan auteur du Guide nutritionnel des plantes sauvages

et cultivées, précise que « l’ortie est la plante verte la plus riche en protéine d’excellente qualité
puisque équilibrée en acides aminés ». Sur les 20 acides aminés existants, 18 sont retrouvés en
forte proportion dans les feuilles d’orties (Couplan 2011).
Sa teneur en vitamine C est nettement supérieure à celle de n’importe quel agrume. Elle
contient jusqu’à six fois plus de vitamine C qu’une orange (Delvaille, 2013).
La vitamine C (acide ascorbique) 6 fois supérieure par rapport a l’orange, vitamine K,vitamine
E (α-tocopherol), provitamine A (β-carotène), vitamine B1 et B2 (riboflavine) (Delvaille,
2013)..
- Pigment : Des pigments sont également présents comme la chlorophylle avec un taux de
2,7 %, mais il ne semble pas plus élevé que celui des feuilles d’autres drogues ainsi que des
β-carotènes (provitamine A) (Delvaille, 2013).
31
Chapitre III :
Matériels et
Méthodes
Chapitre III : Matériels et Méthodes
1. Généralités
La plupart des espèces végétales qui poussent dans le monde entier possèdent des vertus
thérapeutiques, car elles contiennent des principes actifs qui agissent directement sur
l’organisme.
Dans de nombreuses régions de l’Algérie, le recours aux plantes réputées pour leur pouvoir
antioxydant est de plus en plus fréquent.
Il est donc important d’étudier l’efficacité de cette espèce qui appartient à la famille des
Urticacées (Urtica dioica L)
2. Objectifs
Le but de notre travail est
 L’extraction méthanolique des flavonoïdes
 Screening phytochimique pour la recherche de certains composés actifs de la plante
ortie dioïque
 Caractérisation par chromatographie sur couche mince (CCM) des flavonoïdes et
alcaloïdes
 l’étude du pouvoir antioxydant d’ortie (Urtica dioca ).
3. Matériels et méthodes
Notre travail a été effectué au laboratoire de biochimie 03 de l’université Abdel Hamid Ibn
Badis (Mostaganem)
3.1. Matériel végétal

L’intérêt de ce travail est la valorisation d’une plante médicinale (Urtica dioica)
poussant à l’état spontané dans le bassin méditerranéen plus particulièrement dans la région de
Mostaganem.
La plante étudiée a été choisie essentiellement sur la base de leur intérêt et leur fréquence
d’emploi grâce à l’enquête ethno-pharmacologique effectuée auprès des tradi-thérapeutes, des
herboristes et des personnes utilisant ou vendant les plantes médicinales.
33
3.1.1. Classification botanique
Règne : plantae (plantes).

Sous-règne : Tracheobionta (plantes vasculaires).
Embranchement : Magnoliophyta (phanérogames).
Sous-embranchement : Magnoliophytina
(angiospermes).
Classe : Rosideae.
Sous-classe : Rosideae dialycarpellées.
Ordre : Rosales.
Famille : Urticaceae.
Genre : Urtica L.
Espèce : urtica dioica L
Figure 11: Urtica dioica L/ Mostaganem, 2020
3.2. Collecte du matériel végétal

Le matériel végétal utilisé est constitué des feuilles d’Urtica dioica récoltée de la région de
Abdelmalek Ramdhan (40 km à l’est de la wilaya de Mostagenem) en Janvier 2020.
34
Figure 12 : (Urtica Dioca L.) racine feuille et poudre/ Mostaganem, janvier2020
3.3. Lavage
La plante (Urtica Dioca L.) a été lavée par l’eau de robinet pour éliminer les grosses
particules (la poussière) présent dans cette plante récoltée, puis rincée à l’aide de l’eau distillée
pour éviter la présence des impuretés.
3.4. Séchage
Le matériel végétal fraîchement collecté a été séché sur du papier à l'ombre, à
température ambiante et dans un endroit sec à l'abri de l'humidité pendant quelques jours
jusqu’au moment de préparation des extraits.
3.5. Broyage
Le broyage à été fait à l’aide d’un mixeur pour diminuer la taille de la matière végétale
à pour objectif d’élever la surface du contact avec le solvant utilisé.
35
3.6. Le mode d’extraction
L’extraction des plantes médicinales est très importante pour avoir un extrait de bonne
qualité et de grande quantité. La qualité d’un extrait-fluide de phytothérapie peut se résumer à
trois points principaux :
-à-dire la garantie de la certification biologique, et la
provenance des plantes notre choix est basé sur le bon site, la saison en mois de janvier
ype de solvant employé : le méthanol plus ou moins toxiques qui peut se retrouver dans
le produit final et après évaporation à sec.
Notre procédé d’extraction est basé sur
L’extraction traditionnelle par l’eau (infusion) et la solubilité des substances d’un mélange
dans un solvant. Le mélange à extraire peut être solide ou liquide et le solvant liquide utilisé
est le méthanol.
3.6.1. Extraction par macération
a. Principe
La macération est la méthode d'extraction solide-liquide la plus simple. Elle consiste en la

mise en contact du matériel végétal avec le solvant sans ou avec agitation, L'opération bien que
généralement longue et a rendement souvent médiocre, est utilisée dans le cas d'extraction de
molécules thermosensibles (Leybros et Fremeaux, 1990).
b. Mode d’opération
La méthode d’extraction consiste à porter l’échantillon de la plante à la macération dans l’un

des solvants cités ci-dessus pendant, 24h
c. Extraction des flavonoïdes
Nous avons fait la macération par le méthanol, 1g de l’échantillon de la plante avec 10ml
de méthanol à température ambiante, la solution a été macérée pendant 24h.
Ensuite nous avons fait une filtration de la solution à l’aide d’un papier filtre puis le filtrat a
été déposé dans une boite de pétri. Le filtrat est ensuite évaporée à sec et pesés à un poids
constant.
36
1g de matériels végétale (poudre) +

10ml de méthanol
Macération à température
ambiante et a l’ombre pendant
24h
Filtration
Mettre le filtrat dans une boite

pétri
Evaporation à sec pendant une

2j
Extrait méthanolique
Figure 13 : protocole de préparation d’extrait méthanolique par macération.
4. Criblage "Screening" phytochimique
Le screening phytochimique nous a permis de mettre en évidence la présence des classes

principales métabolites secondaire (Tanins, flavonoïdes, les composés réducteurs, stérols,
alcaloïdes, quinone libre et phénols) au niveau des tissus végétaux de la plante étudiée. La
détection de ces composés chimiques est basée sur des essais de solubilité des constituants, des
réactions de précipitation et le changement de couleur.
4.1. Test des saponines
On ajoute 5ml d'extrait aqueux, puis introduit dans un tube à essai. Le tube est agité
vigoureusement, la formation d'une mousse (hauteur supérieure de 1cm) stable et persistante
pendent 15min, indique la présence des saponines (Vigor et al. , 2011).
37
4.2. Test des flavonoïdes

1ml d'acide chlorhydrique concentré et quelques gouttes de Fecl3 ajoutés à 1 ml de
l'extrait. La coloration rose-rouge ou jaune, après trois minutes d'incubation à température
ambiante, indique la présence des flavonoïdes (Hadduchi et al. , 2014).
4.3. Test des tanins

Huit gouttes d'une solution diluée de chlorure ferrique à 1 % sont ajoutées à 1 ml de
l'extrait. Après quelques minutes d'incubation à température ambiante, le chlorure ferrique
développe une coloration verdâtre qui indique la présence des tanins catéchiques ou bleu
noirâtre qui révèle l'existence des tanins galliques (Hadduchi et al., 2014).
4.4. Test des stérols ou triterpénes

Ont été recherchés par la réaction de Liebermann. Le résidu est dissout dans 1 ml
d'anhydride acétique ; nous avons ajouté 0,5 ml d’acide sulfurique concentré au triturât.
L'apparition, à l'interphase, d'un anneau violet, virant au bleu puis au vert, indique une
réaction positive (Koffi et al., 2009
4.5. Test des alcaloïdes

2ml d’extrait aqueux dans un tube à essai on ajoute quelques gouttes d’HCl à 1pour 100
pour libérer les polyphénols puis on ajoute quelque goutte de réactif DRAGENDORFF, la
coloration orange indique la présence des alcaloïdes.
4.6. Test des phénols

2ml de l’éthanol est ajouté à 2 ml de l’extrait, L’ajout de quelques gouttes de FeCl3 permet
l’apparition d’une coloration Vert violacé qui indique la présence des phénols (Iqbal Hussain
et al, 2011).
Figure 14 : préparation de l’extrait aqueux par infusion
38
5. Caractérisation des alcaloïdes et des flavonoïdes sur plaque CCM
La chromatographie sur couche mince consiste à placer sur la plaque une tache et de laisser
éluer en la trempant dans un solvant ou un mélange de solvant (appelé éluant), l’éluant diffuse
le long du support. La tache migre sur la feuille plus ou moins vite selon la nature des
interactions qu’elle subit de la part du support et de l’éluant.
5.1. Préparation de la cuve chromatographique
* Introduire l’éluant ou le mélange de solvants. Dans la cuve nous avons mis 4v/4v/2v
(méthanol éthanol et l’eau distillé)
* Ajuste le niveau à environ 1cm du fond de la cuve.
* Garnir l’intérieure de la cuve d’un papier filtre imprégné d’éluant et plaqué contre les parois ;
une ouverture est ménagée dans le filtre pour observer le développement du chromatogramme.
* Fermer le récipient (la cuve doit être saturée de vapeur de solvant)
5.2. Dépôt de l’échantillon sur la plaque
* Nous avons activé la plaque pendant 20mn à l’étuve 35.

* Déposer environ 0.5ml de la solution en un point situé à 1cm de l’extrémité inférieure de la
plaque ; le diamètre de la tache doit être d’environ 2mm pour la disposition de plusieurs
produits.
* Sécher à l’aide d’un séchoir ; éventuellement faire de nouvelles applications.
5.3. Développement du chromatogramme
* Placer la plaque dans la cuve en position verticale.

* Refermer le récipient qui ne doit plus être déplacé.
* Lorsque le front du solvant se trouve à environ 1cm de l’extrémité supérieure de la plaque, la
retirer et marquer cette position. (le trait peut être tracé à l’avance et servir de repère pour arrêter
l’élution).
5.4. Révélation et calcul de Rf
* Sécher la plaque à l’aide d’un séchoir.

* Cercler les taches et pointer leur centre.
* Calculer les Rf
39
Rf : retarding factor ou rapport frontal Rf = di/ds
di : distance parcourue par le composé (mesuré au centre de la tache)
ds : distance parcourue par le front du solvant
Les révélateurs utilisés réactif dragendrof pour la mise en évidence des alcaloïdes et Fecl3 pour
la mise en évidence des flavonoïdes.
Les plaques ont été placées dans la cuve chromatographiques préalablement saturées pour leur
migration. A la fin de la migration, les plaques ont été retirées de la chambre
chromatographique, puis séchées à l’aide d’un séchoir pendant 10min.
Après le séchage des plaques on a fait une pulvérisation de dragendrof La coloration

orange indique la présence des alcaloïdes.
Pour d’autre plaque on a fait une pulvérisation de Fecl3 La coloration bleu indique la
présence des flavonoïdes.
Figure 15 : caractérisation des alcaloïdes et flavonoïdes sur CCM
40
6. L’activité antioxydante par méthodes (Piégeage du radical DPPH)

La méthode de piégeage du radical de 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazine (DPPH-) a été
décrite pour la première fois par Blois (1958).
6.1. Principe
A température ambiante, le radical DPPH- présente, en solution alcoolique, une intense
coloration violette qui disparaît au contact d’une substance donneuse de protons (figure 16)
Cette décoloration met en évidence le pouvoir antioxydant d’un échantillon par sa capacité à
piéger le radical libre et se traduit par une diminution de l’absorbance à 517 nm (Moon &
Shibamoto, 2009).
Figure 16 : Réaction entre le radical DPPH- et l’antioxydant

pour former le DPPH stable (Moon & Shibamoto, 2009).
La méthode utilisée a été décrite par (Muhammad et al., 2012). Un volume de 100μl de
l'extrait (avec dilution convenable) est ajouté à 2ml de la solution méthanolique du DPPH
(0.024g/l) fraichement préparée. Le contrôle négatif est préparé en parallèle en mélangeant
100μl du méthanol avec 2 ml de la solution méthanolique de DPPH. Après incubation à
l'obscurité pendant 30 min et à température ambiante la lecture des absorbances est effectuée à
517 nm à l'aide d'un spectrophotomètre.
6.2. Calcul des IC50 et de l'activité antiradicalaire (Scavenging activity)
L'IC50 ou la concentration inhibitrice de 50 % est la concentration de l'échantillon testé

nécessaire pour réduire 50% de radical DPPH·. Les IC50 sont calculées graphiquement par les
régressions logarithmiques des pourcentages d'inhibition en fonction de différentes
concentrations de chacun des extraits testés (Scherer et al., 2009 ; Fabri et al., 2009)
41
La capacité de piégeage du radical libre est ensuite calculée à travers le pourcentage d’inhibition
:
% d’activité anti radicalaire = [(Abs contrôle-Abs échantillon) /Abs contrôle] ×100.
avec :
PI: pourcentage d’inhibition.
A0 : absorbance du control (sans échantillon) A1 : absorbance de l’échantillon après 60 min
L’étude de la variation de l’activité antiradicalaire en fonction de la concentration des

extraits permet de déterminer la concentration qui correspond à 50% d’inhibition (IC50). Une
faible valeur d’IC50 correspondant à une grande efficacité de l’extrait. (Scherer et al., 2009 ;
Fabri et al., 2009)
42
Chapitre IV :
Résultats et discussions
1. Résultats d’extraction
1.2. Mode d’extraction
Après macération d’un gramme de poudre de la plante dans 10ml de méthanol pendant 24h et
après deux jours d’évaporation à sec la quantité récupérée de flavonoïde est 400mg
Figure 17: extraction méthanolique
2. Résultats du Screening phytochimique

Les tests consistent à détecter les différents composés chimiques existants dans l’Urtica
dioica L par des réactions qualitatives de caractérisation. Ces réactions sont basées sur des
phénomènes de précipitation ou de coloration par des réactifs spécifiques.
Ces dernières permettent de définir la présence ou non de quelques métabolismes secondaires.
Le screening phytochimique effectué a permis d'obtenir les résultats suivants :
44
T A
T Terp
T Tn T F
Figure 18 : Mise en évidence des métabolites secondaires

T : témoins A : alcaloïde Terp : terpène Tn / tanin F : flavonoïdes
Tableau 7 : Résultats du criblage phytochimique des feuilles d’Urtica dioica L
Métabolite Secondaire Remarque Résultats
Saponosides formation d'une mousse (H : supérieure de 1cm) -

Flavonoïde Apparition d’une couleur Rouge
++
Tanins une coloration verdâtre
++
Phénols Vert violacé ++
Alcaloïdes orange ++
(-) : test négatif, (+) : test faiblement positif, (++) : test positif, (+++) : test fortement positif.
45
Ce tableau montre que l'extrait méthanolique d'Urtica dioica L contient : des flavonoïdes, des
tanins catéchiques, des stérols, des composés réducteurs, des phénols et des alcaloïdes. Cette
plante est toutefois dépourvue des saponines,
Des travaux effectués sur Urtica dioica L nous ont confirmé la présence des flavonoïdes, des
stérols et aussi des tannins (Basaran., 2001 ; Chaurasia et Wichtl., 1987 ; Tita., 1993). Nos
résultats s’accordent avec ceux enregistrés par Afif- Chaouche (2015) pour quelques
paramètres phytochimiques trouvés sauf que cet auteur a noté la présence des saponines au
niveau des échantillons testés ce qui inverse notre cas. Cela est probablement en relation avec
le site biogéographique de l’espèce car l’échantillonnage entre la région de Mostaganem et de
Tizi-Ouzou est différent
3. Caractérisation des alcaloïdes et des flavonoïdes sur plaque CCM
Lorsque la plaque CCM est séchée, les spots apparaîtront sous forme des taches de
couleurs jaune
Figure 19 : plaque CCM après séchage
Les plaques CCM sont pulvérisées avec le réactif de Fecl3 après la migration des
extraits, nous avons observé des taches bleu noir qui indiquent la présence des flavonoïdes dans
46
ces extraits. La pulvérisation par le réactif dragendroff la coloration orange nous indique la
présence des alcaloïdes.
Les résultats sont généralement exprimé sous la formation d’un facteur de rétention (Rf) est
définie comme suit : Rf = di/ds.
Les résultats sont généralement exprimés sous la forme d’un facteur de rétention. Le
facteur de rétention (Rf) est défini comme suit : Distance parcourue par extrait depuis
l’origine/ Distance parcourue par le front du solvant depuis l’origine.
Les résultats de chromatographie sur couche mince sont mentionnés sur les figures suivantes :
Figure 20 : étude de séparation des principes actifs (alcaloïdes et flavonoïdes)
 Calcule de Rf : Le tableau suivant représente les résultats
Rf : (retarding factor ou rapport frontal)
di : distance parcourue par le composé
ds : 8cm distance parcourue par le front du solvant
47
Tableau 8 : représente les résultats obtenus de la CCM
Ortie dioïque
ds (cm) di (cm) couleur Rf
Avant révélateur 8 d1 =4 Jaune orange 0.5

Fecl3 d 2=5 Vert pistache 0.63
d3=5.5 Vert jaune 0.69
d4=5.8 Vert clair 0.73
d5= 6.3 Jaune 0.79
d6=7 Jaune clair 0.88
Après révélateur 8 d1 =4 Orange clair 0.5
Fecl3 d 2=5 Vert 0.63
d3=5.5 Vert jaune 0.69
d4=5.8 Trace vert 0.73
d5= 6.3 fonce 0.79
d6=7 orange 0.88
Après révélateur 8 d1 =4 Marron clair 0.5
dragendroff d 2=5 Vert foncé 0.63
d3=5.5 Vert clair 0.69
d4=5.8 Bleu violacé 0.73
d5= 6.3 Bleu clair 0.79
d6=7 0.88
La migration des substances dépond essentiellement de leur polarité : les flavonones , les
flavonols ,méthoxy-flavanes ont les valeurs les plus élevées de RF (0.5-0.75).(Bandyukova et
shinkarenko,1973 ;in zeghad,2009 ;in Allal,2013).
Selon le tableau (8), on remarque que les fractions du chromatogramme obtenu présentent des
diminutions et augmentations de valeur du RF. Le RF de la phase aqueuse très élevé (5 spots)
il est riche en flavonoïdes (0.5et 0.75) approximation sont flavonone , flavonol ,
méthoxyflavane, et donne un résultat optimale ( majoritaire ) par rapport les autres fractions,
selon (Bandyukova et Shinkarenko(1973), est donc la plante étudiée possède une richesse en
flavonoïdes.
48
Une étude sur l’extrait méthanolique de l’ortie est en accord avec nos résultats pour quelques
composants chimiques. Cette étude réalisée en Chine a montré la présence de huit constituants
chimiques identifiés (Ramzan, 2014).
4. Test de piégeage du radical libre DPPH

La mesure de l’absorbance a été effectuée par spectrophotométrie à 517 nm, à partir des valeurs
obtenues, nous avons calculé les pourcentages d’inhibition en utilisant la formule donnée
auparavant.
Les valeurs obtenues nous ont permis de tracer la courbe qui représente les variations de
pourcentage d’inhibition en fonction de la concentration d’extrait méthanolique, la
détermination graphique de IC50 se fait à partir de la courbe, qui constitue l’activité anti-
oxydante de l’extrait méthanolique d’Urtica dioica L (Figure 21).
Activité anti-oxydante d'Urtica dioica L

% Inhibition
0,2 0,4 0,6 0,8 1,2

Concentration mg/ml
Figure 21 : Pourcentage d'inhibition du radicale libre de l'extrait

méthanolique d'Urtica dioica L
L’IC50 est inversement lies à la capacité antioxydant d’un composé, car il exprime la quantité
d’antioxydant requise pour diminuer la concentration du radicale libre de 50%.
49
Le tableau 09 mentionne les résultats obtenus de l’activité antioxydant des différents extraits
de l’Urtica dioïca L
Tableau 9 : IC50 de DPPH d'extrait d'Urtica dioica L
L'échantillon Urtica dioica L
IC 50 mg/ml 1,87
L'extrait méthanolique d'Urtica dioica L est doté d'une activité antioxydant important, leur IC50
est 1.87 mg/ml mais relativement faible que celle d'acide ascorbique.
En étudiant la décoction et l’infusion de l’ortie [Albayrak et al., 2012] ont enregistré une non
efficacité avec des taux maximaux ne dépassant les 40% d’inhibition du radical DPPH avec des
concentrations allant jusqu’à 2mg/ml ce qui concorde avec les résultats enregistrés dans notre
étude. De même l’extrait méthanolique de cette plante n’a pas donné une satisfaction en
enregistrant un pourcentage d’inhibition du radical DPPH de l’ordre de 21,18%.
Le même constat a été fait par [Deliorman-Orhan et al., 2012] car la décoction de l’ortie
d’origine de Turquie s’est révélée inefficace vis-à-vis du radical DPPH avec un pourcentage
maximal de 21,4 ± 0,2%.
Dans une étude réalisée par [Dall’Acqua et al., 2008] l’extrait méthanolique d’Urtica dioica
d’Italie a enregistré la plus faible activité vis-à-vis du radical DPPH (avec IC50 de 419± 10
µg/ml) comparée aux autres extraits de la même région (Rubus ulmifolius avec IC50 de 5,1 ±
0,5 µg/ml et Mentha pulegium avec IC50 de 8,3 ± 0,5 µg/ml). Malgré cette faible activité
signalée pour Urtica dioica mais elle reste plus forte que celle enregistrée dans notre étude.
De même, l’étude réalisée par [Güler., 2013] sur deux types de macérations (aqueuse et acide)
d’Urtica dioica de Turquie a révélé des IC50 plus importants que les notre avec 0,30 et
0,37mg/ml respectivement pour la macération aqueuse et acide de cette plante.
L’étude réalisée par [Monfared et al., 2011] une bonne efficacité inhibitrice du radical DPPH
par l’extrait aqueux d’Urtica dioica de Turquie (en enregistrant des IC50 de l’ordre de 8,4 ±
0,1 et 11,7 ± 0,2 µg/ml respectivement pour pré et post-floraison) comparé à l’extrait d’Ether
50
de la même plante (avec des IC50 de l’ordre de 12,4 ± 0,1 et 22,5 ± 0,2 µg/ml). Comparé à cette
étude, [Hudec et al., 2007] ont constaté une faible efficacité de l’extrait aqueux d’Urtica dioica
quel que soit en post ou préfloraison par contre l’extrait d’éther a révélé une forte efficacité en
post ou préfloraison.
Selon [Monfared et al., 2011] la différence d’efficacité d’U. dioica dépends essentiellement
de la région de cueillette et du stade physiologique de la plante.
L’étude de [Joshi et al., (2015)] portée sur l’efficacité des différents extraits d’U. dioica de
l’Inde a révélé une bonne efficacité de l’extrait d’acétate d’éthyle vis-à-vis du radical DPPH en
enregistrant une IC50 de 78,99 ± 0,171 µg/ml comparé aux autres extrait qui ont données des
IC50 de l’ordre de 168,2 ± 0,364, 215,96 ± 0,066 et 302,90 ± 0,141 µg/ml respectivement pour
les extraits de n-butanol, Pet-éther et en dernier lieu l’extrait éthanolique, ce qui en témoigne
de l’effet du solvant d’extraction sur l’efficacité inhibitrice de l’extrait.
51
Conclusion générale
D’après l’enquête ethnopharmacologie effectuée par plusieurs chercheurs sur les plantes
médicinales, Urtica dioïca L reste parmi les moins utilisés dans la médecine alternative
Algérienne. Pour cela l’objectif assigné à cette étude est de valoriser cette espèce en évaluant sa
composante phytochimique et son intérêt dans plusieurs vertus thérapeutiques
Dans un premier volet de ce travail, nous avons procédé à l’extraction des molécules
bioactives par la méthode d’extraction méthanolique et par infusion ainsi que la révélation du
criblage phytochimique de l’ortie récolté de la région de Abdelmalek Ramdhan (wilaya de
Mostaganem)
Dans un deuxième volet, nous avons mis en évidence et évalué quelques propriétés
biologiques de ces extraits à savoir l’activité antioxydante.
L’analyse du criblage phytochimique a mis en évidence une richesse en molécules

bioactives notamment les flavonoïdes, les terpénoïdes, les tanins, les stérols et ainsi que les
polyphénols. Les alcaloïdes et les flavonoïdes ont été caractérisés respectivement par les réactifs,
Gragendrof et Fecl3 sur plaque CCM. L’analyse du chromatogramme a révélé une richesse de
composés en alcaloïdes et en flavonoïdes correspondant à un nombre important de spots après
révélation.
Les résultats relatifs à l’évaluation du pouvoir antioxydant des extraits par la méthode, de
piégeage du radicale DPPH sont révélés positifs. Les concentrations d’inhibition à 50 ℅ (IC50)
sont calculées graphiquement par les régressions logarithmiques des pourcentages d'inhibition
en fonction de différentes concentrations de chacun des extraits testés ce qui a révélé que l'extrait
méthanolique d'Urtica dioica est doté d'une activité antioxydante importante (IC50= 1.87
mg/ml)
Cette étude avait pour but de valoriser l’ortie, et donner des résultats satisfaisants pour pouvoir
l’utiliser à des couts réduits par des méthodes simples (décoction, infusion, macération,….etc.).
53
En perspective, il serait fort intéressant d’approfondir les études par une expérience In vivo et
de s’en assurer de l’innocuité totale chez un modèle animal de choix, à même capable de vérifier
les autres propriétés biologiques des autres types d’extraits à savoir les extraits par les solvants
organiques.
Il serait, également, très instructif d’explorer la composition chimique de l’extrait et de tester

l’effet isolé et synergique des différents constituants des différents extraits de cette espèce
végétale
54
Références
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République Algérienne Démocratique et Populaire

Université Abdelhamid Ibn ‫جامعة عبد الحميد بن باديس‬

MéMoire de fin d’études

BOUABDELLI Salah Eddine

Screening Phytochimique, Analyse Chromatographique

Présidente Mme ATTOU. N Grade MCB U. Mostaganem

Année universitaire 2019- 2020

J'exprime ma profonde gratitude à mon encadreur Madame KRIBI Soraya Maitre de

Mes remerciements vont aussi à Mme Saadia responsable de laboratoire de biochimie à

Nous sommes également reconnaissants à nos collègues de la licence et du Master pour

amour Et bonté et que sans eux je n’aurai jamais pu atteindre mon

objectif, que Dieu me les gardes

Mon neveux et mes nièces : Mohamed rayane, Rofaida, Razane et Eline

A mes amies, Miloud, Yacine, Azzedine, Charef et Bilal et à toute la

promotion Pharmacotoxicologie 2019/2020

IC 50 : Concentration Inhibitrice 50%

Tableau 1 : Récolte, séchage et conservation des plantes……………………………………...5

Tableau 02 : Les différentes méthodes d’évaluation du pouvoir antioxydant………………..16

Tableau 3 : Tableau des constituants chimiques des parties aériennes de l’ortie…….…….....25

Tableau 4 : Propriétés Thérapeutique d'Urtica dioica L……………………………………...27

Tableau 5 ; la composition de l’ortie pour 100g de plante fraiche……………………….……30

Tableu 6 : la composition de l’ortie pour 100g de plante fraiche……………………………...31

Tableau 7 : Résultats du criblage phytochimique des feuilles d’Urtica dioica L……………..45

Tableau 8 : représente les résultats obtenus de la CCM……………………………………….48

Tableau 9 : IC50 de DPPH d'extrait d'Urtica dioica L………………………….……………...50

Figure 01 : Squelette de base des flavonoïdes…...……………………………………………10

Figure 02 : Quelques exemples des flavonoïdes………………………………………............10

Figure 03 : Structure d'un tanin hydrolysable………………………….……………………...13

Figure 04 : Structure d'un tanin condensé…...……………………….………………………..13

Figure 05 : Diverses formes d’utilisation des plantes médicinales……………………….…...14

Figure 06 : Urtica dioica L.........................................................................................................21

Figure 07 : Feuille d’Urtica dioica L……………………………………………….………....21

Figure 08 : Fleur d’Urtica dioica L ………………………………………………………………….22

Figure 09 : Racine d’Urtica dioica L ………………………………………….……………...23

Figure 10 : Poil urticant d’Urtica dioica L ……………………………………………….…...24

Figure 11: Urtica dioica L Mostaganem, 2020………………………………………….…....34

Figure 13 : protocole de préparation d’extrait méthanolique par macération………………..37

Figure 14 : préparation de l’extrait aqueux par infusion………………………….…………...38

Figure 15 : caractérisation des alcaloïdes et flavonoïdes sur CCM……………………………40

Figure 17 : extraction méthanolique…………………...…………………………….....….…..44

Figure 18 : Mise en évidence des métabolites secondaires…………………………………....45

Figure 19 : plaque CCM après séchage………….…………………………………………….46

Figure 20 : étude de séparation des principes actifs (alcaloïdes et flavonoïdes) .. …….……...47

Figure 21 : Pourcentage d'inhibition du radicale libre de l'extrait méthanolique d'Urtica

Table des matières

Chapitre II : la présentation botanique et biologique de la plante Urtica dioica

1. Description générale des Urticacées..................................................................................... 19

Chapitre III : Matériels et méthodes

Chapitre IV : Résultats et discussions

1.Résultats d’extraction ............................................................................................................ 44

Conclusion générale ………………………………………....................................................53

Références bibliographiques ................................................................................................. 56

Le criblage phytochimique a mis en évidence une richesse de substances bioactives. La

Mots clé : Urtica dioica L ; screening phytochimique ; CCM ; Activité anti-oxydante

Keywords: Urtica dioica L; phytochemical screening; TLC; antioxidant activity

‫‪.‬القديمة لخصائصه العالجية العديدة‬

‫)مجم ‪ /‬مل ‪(IC50 = 1.87‬‬

2. Récolte et conservation des plantes médicinales

Les propriétés des plantes dépendent essentiellement de la région de production, de la

Tableau 1 : Récolte, séchage et conservation des plantes (Valnet, 2001)