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ALT GPT BR FR Rev. 02

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ALT/GPT BR opt.

REF 1105000 REF 1105010


2 x 50 mL 3 x 100 mL ALAT/GPT BR
CONTENU CONTENU IFCC
Réactif R1. 2 X 40 mL Réactif R1, 3 X 80 mL Méthode enzymatique UV
Réactif R2. 1 X 20 mL Réactif R2. 1 X 60 mL
CINETIQUE
Uniquement pour diagnostic in vitro

PRINCIPE INTERFERENCES

L’Alamine aminotransferase (ALAT/GPT) catalyse le transfert du - La lipémie (intralipides  15 g/L) n’interfère pas.
groupement amine de l’Alamine à l’oxoglutarate avec formation du - La bilirubine (>30 mg/dL) n’interfère pas.
glutamate et du pyruvate. Ce dernier est réduit en lactate par le - L’hémoglobine (> 10 g/L) n’interfère pas.
lactate déshydrogénase (LDH) en présence du nicotinamide - D’autres médicaments et substances peuvent interférer.3,4
adénine di nucléotide (NADH) réduite.
La réaction mesurée cinétiquement à 340 nm par la diminution de
l’absorbance résultant de l’oxydation de la NADH en NAD+ est MATERIEL AUXILIAIRE
proportionnelle à l’activité enzymatique d’ALAT présente dans
l’échantillon. - Photomètre ou colorimètre avec compartiment de mesure
thermostable à 30/37ºC, capable de faire des lectures à
ALAT/GPT
340 nm.
L-Alamine + 2-Oxoglutarate L-Glutamate + Pyruvate
- Chronomètre, enregistreur graphique ou imprimante.
- Cuvettes de 1 cm de trajet optique.
LDH - Pipettes pour mesure et distribution des réactifs et
Pyruvate + NADH + H+ Lactate + NAD+
échantillons.
Cette méthode a été formulée suivant la méthode standardisée
décrite par IFCC. Clin Chem Lab Med 2002 ; 40(7) : 718-724 (1). PROCEDURE

1. Préincuber le réactif de travail, échantillons et contrôles à la


COMPOSITION DES REACTIFS
température de réaction.
2. Ajuster le zéro du photomètre avec de l’eau distillée.
R1 Substrat ALAT. Tampon Tris 150 mmol/L, pH 7,3, L-
3. Pipeter dans des cuves:
Alamine 750 mmol/L, Lactate déshydrogénase > 1350
U/L

R2 Coenzyme ALAT. NADH 1,3 mmol/L, 2-Oxoglutarate 75 Température de réaction 37°C 30 °C


mmol/L, Biocides.
Réactif de travail 1,0 mL 1,0 mL
CONSERVATION ET STABILITE Echantillon 50 L 100 L

Conserver à 2-8ºC.
Tous les composants du kit sont stables jusqu'à la date de 4. Mélanger doucement par retournements. Mettre la cuve dans le
péremption mentionée sur l'étiquette. Ne pas utiliser les réactifs au- compartiment de lecture de l’appareil et chronométrer.
delà de cette date de péremption. 5. Incuber pendant 1 minute, et lire l’absorbance initiale.
Conserver les flacons hermétiquement fermés à l’abri de la lumière 6. Répéter les lectures exactement à 1, 2 et 3 minutes.
et éviter les contaminations pendant l’usage. 7. Calculer la différence entre les absorbances.
8. Calculer moyenne des différences d’absorbances et en déduire
Se débarrasser des réactifs s’il apparaît des signes de détérioration: la variation moyenne par minute (A/min).
- Présence de particules et d’une turbidité.
- Absorbance du blanc réactif (A) à 340 nm < 1.000 dans une
cuve de 1 cm d’épaisseur. CALCULS
PREPARATION DES REACTIFS
U/L = A/ min x 3333 (37°C)
Réactif de travail. Mélanger 4 mL de réactif R1 à 1 mL de réactif U/L = A/ min x 1746 (30°C)
R2.
Le réactif est stable 4 semaines à 2-8°C.
Stocker le réactif de travail à l’abri de la lumière. Les échantillons ayant une A/min supérieure à 0,160 à 340 nm
doivent être dilués dans la proportion de 1:10 avec le sérum
ECHANTILLONS physiologique et puis refaire l’analyse. Multiplier les résultats obtenus
par 10.
Sérum ou plasma sur EDTA ou héparine non hémolytiques.
L’ALAT dans le sérum ou le plasma est stable pendant 24 heures à Pour exprimer les résultats en unités SI appliquer:
température ambiante et une semaine à 2-8°C. U/L x 0,01667 = kat/L

QUALITY SYSTEM CERTIFIED LINEAR CHEMICALS, S.L.U. Joaquim Costa 18 2ª planta. 08390 Montgat (Barcelona) SPAIN
ISO 9001 ISO 13485 Telf. (+34) 934 694 990; E-mail: info@linear.es ; website: www.linear.es NIF-VAT:B60485687
VALEURS DE REFERENCE4
Sérum, plasma - Corrélation. Ce test (y) a été comparé avec une méthode
commerciale similaire (x). Les résultats suivants ont été
obtenus:
37°C Jusqu’à 40 U/L (0,67 kat/L)
N = 50 r = 0,99 y = 1,041x + 1,447
Adultes
Ces caractéristiques analytiques ont été obtenues en utilisant des
30°C Jusqu’à 25U/L (0,42 kat/L) équipements automatiques. Les résultats peuvent varier en
fonction de l'équipement.
Chez les nouveau-nés et les enfants les taux d’ALAT sont deux fois
plus élevés que chez les adultes, ces taux atteignent les valeurs de
l’adulte, approximativement, à l’âge de 6 mois. NOTES
Il est recommandé que chaque laboratoire établisse sa propre
plage de valeurs de référence. 1. Cette méthode peut être utilisée avec n’importe quel
appareil. Toute application sur un appareil devrait être validée
CONTROLE DE QUALITE par une démonstration de la concordance des résultats avec
les caractéristiques analytiques de la méthode. Il est
Pour assurer un contrôle de qualité (QC) approprié, chaque test recommandé de valider périodiquement l’appareil. Veuillez
doit inclure un ensemble de contrôles (normal et anormal), traités contacter le distributeur pour toutes questions relatives à
comme ayant des valeurs inconnues. l’application de la méthode.

REF 1980005 HUMAN MULTISERA NORMAL 2. Le diagnostic clinique ne devrait pas se limiter sur les seuls
résultats du test, mais intégrer corrélativement les données
Evalué comme niveau normal d’ALAT.
cliniques et de laboratoire.
REF 1985005 HUMAN MULTISERA ABNORMAL
Evalué comme niveau élevé d’ALAT. BIBLIOGRAPHIE
Si les valeurs sont en dehors de la plage définie, vérifiez
l'instrument, les réactifs et la procédure. 1. Winn-Deen E S, David H, Sigler G, and Chavez R. Clin. Chem
Chaque laboratoire doit établir ses propres plans de contrôle de 1988;34 : 2005.
qualité interne et les mesures correctives, dans le cas où les 2. International Federation of Clinical Chemistry (IFCC).
résultats des contrôles sont hors des tolérances acceptables. Clin.Chem Lab Med 1998;36:185.
3. Young, D.S. Effects of Drugs on clinical Laboratory Tests. 5th
INTERPRETATION CLINIQUE Ed. AACC Press, 2000.
4. Tietz. Textbook of Clinical Chemistry, 2nd Edition.Burtis CA,
Le groupe d’enzymes appelées transaminases existe dans des Ashwood ER. W.B. Saunders Co. 1994.
tissus de beaucoup d’organes. Une activité nécrotique dans ces
organes cause une augmentation anormale des quantités de ces
enzymes dans le sang.
Le tissu cardiaque est riche en ASAT dont les taux sériques sont
augmentent après un infarctus du myocarde, mais aussi bien chez
les patients présentant une maladie musculaire, une dystrophie
musculaire et une dermatomyosite.
Le foie est particulièrement riche en ALAT, le dosage de cet
enzyme est utilisé comme test d’exploration des hépatites
infectieuses et toxiques. Des taux parallèlement élevés d’ALAT et
d’ASAT peuvent aussi être retrouvés dans des troubles hépato-
cellulaires et de pancréatite aiguë, évoquant ainsi que l’obstruction
de l’arbre biliaire par le pancréas tuméfié et la présence d’une
maladie hépatique associée puissent contribuer à l’élévation
d’ASAT chez ces patients.
Des élévations modérées des activités enzymatiques d’ALAT et
d’ASAT peuvent être observées après une imprégnation alcoolique
et l’administration d’une variété de médicaments tels que les
salicylates, les opiacés et l’ampicilline.

CARACTERISTIQUES ANALYTIQUES

- Limite de détection : 7,95 U/L


- Linéarité. Jusqu’à 500 U/L
- Précision

U/L Intra-série Inter-série


Moyenne 32,4 140,8 32,4 140,8
S.D. 0,79 1,41 0,97 2,77
CV% 2,43 1,00 3,49 1,97
N 10 10 10 10
B1105-2/0901
- Sensibilité : 0,280 mA/min / U/L GPT. R1.fr

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ISO 9001 ISO 13485 Telf. (+34) 934 694 990; E-mail: info@linear.es ; website: www.linear.es NIF-VAT:B60485687

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