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RAPPORT RK STACK
Domaine ؛Sciences de la Nature et de la Vie
Filière: Sciences biologiques
Spécialité: Toxicologie fondamentale et appliquée
Je remercie également les techniciens, laborantins, biologistes, pour leur soutien technique,
et pour le temps qu'ils m'ont consacré toute au long de cette période, sachant répondre à
mes interrogations.
Table de matière
Liste des figures .............................................. ………………………………. I
Liste des tableaux ........................................................................................................... II
Liste des abréviations ................................................................................................... III
Introduction
Présentation de l’établissement .................................................................................... 1
8. Ferritine ................................................................................................................ 9
9..D-Dimère .............................................................................................................. 10
10. La coagulation (Hémostase)……………………………………………………….11
5. La Glycémie......................... ……………………………………………………..18
Références bibliographiques………………………………………………………...20
Liste des figures
I
Listes des tableaux
II
Listes d’abréviations
TP : Taux de prothrombine
TCA : Temps de céphaline activée
VS : Vitesse de sédimentation
III
Résumé
Chaque expérience que j'ai pu avoir, était très bénéfique mais le stage dans le laboratoire m’a
permis de voir ce que mes études peuvent apporter comme travail.
Ce stage a été effectué dans l'établissement hospitalier régionale de la Sûreté Nationale
d’Oran au sein du laboratoire d'analyse médicale (unité biochimie et hématologie) Le
laboratoire de biologie médicale est très important dans plusieurs cas de figures. Ainsi, dans
un premier cas, il joue un rôle de prévention. Cela se manifeste par le fait qu’il permet la
découverte précoce de maladies notamment cardiovasculaires, le diabète ou d’autres maladies
évitables si elles sont dépistées à temps, Cela un pour protéger la santé de la population. Elle
peut éviter massivement ce type de maladie qui a tant- fait des dommages. Parmi les types
d'analyses que j'ai faites pendant cette période de stage : Analyse biochimique « Protides »
pour diagnostiquer certaines pathologies liées à un mauvais fonctionnement du foie ou des
reins, à des symptômes inflammatoires ou à certains cancers. Analyses hématologie « CRP »
qui est considérer comme un bon marqueur de l’infection et pour évaluer l’activité de
l’inflammation et pour surveiller l’efficacité du traitement, Le système ABO est
systématiquement réalisé chez les donneurs de sang, chez les personnes qui vont bénéficier
d’une transfusion sanguine et chez les femmes enceintes. L’hémogramme (FNS) permet de
détecter des pathologies : anémie, infection et d’apporter des informations quantitatives et
qualitatives sur les cellules sanguines
2
Introduction
Dans le cadre d'enrichir les informations et d’accueillir l’expérience, j'ai décidé de faire un
stage volontaire en analyse médicale. Ce stage d’une durée de 15 jours, s'est déroulé au
niveau de 1’hôpital régional de la Sûreté nationale d’Oran et au sein du service laboratoire
urgence.
Ce rapport présente le travail que j'ai effectué lors de mon stage qui a débuté du 2
novembre au 16 novembre 2021. Le but de ce-dernier n'est pas de faire uniquement une
présentation exhaustive de tous les aspects théoriques que j'ai pu apprendre ou approfondir,
mais aussi, de manière synthétique et claire de faire un tour d'horizon des aspects pratiques
et humains auxquels j'ai été confrontée.
J’espère que ce travail sera un supplément intéressant dans le domaine, pour l’ensemble des
techniciens concernés et des étudiant d’avenir.
Presentation le l’établissement:
Mon stage s’est déroulé à 1’hôpital. Régional de la Sûreté national d’Oran, Cet
établissement hospitalier composé de 120 lits, et de services dotés d’équipements
médicaux sophistiqués. Chirurgie générale. Chirurgie urologique. Neurochirurgie.
Médecin interne. Pédiatre, diabétologie et neurologie ainsi qu’un centre de transfusions
sanguines, cet hôpital est doté d’un centre d’imagerie médicale d’un laboratoire d’analyse
et d’un service de chirurgie dentaire et une unité de réductions fonctionnelle et
réadaptation et est destiné à toute la région ouest du pays, dont le bloc opératoire équipé,
d’un matérielle ultra-moderne et encadré par des chirurgies spécialisées.
Organigramme de laboratoire :
Laboratoire d’urgence
Réception Salle
D’urgence
Chef de Salle
service Biochimie Salle
Bactériologie
Salle
D’hématologie
Salle de
Prélèvement
1
Chapitre I : Les analyses hématologiques
Les analyses hématologiques sont pratiquées sur le sang pour permettre le diagnostic ou le
suivi de certaines maladies. Le sang est composé d'un liquide, le plasma, dans lequel
flottent des cellules (globules rouges, blancs et plaquettes) et un grand nombre de
substances (protéines, hormones, vitamines, etc.). Ainsi, l'hématologie regroupe l'analyse
des cellules du sang mais aussi d'éléments dissous dans le plasma comme les facteurs de la
coagulation ou les anticorps. Les résultats des analyses sanguines sont les suivantes pour
cette catégorie : -Les cellules du sang (NFS) : plaquettes, formule leucocytaire,
réticulocytes, myélogramme, vitesse de sédimentation (VS), hémogramme numération
sanguine-La coagulation (Hémostase) : Temps de saignement, temps de prothrombine
(INR), temps d’acéphalien activé (TCA), protéine C / - Groupage sanguin ABO/ Rhésus.
2
Chapitre 'ا: Les analyses hématologiques
Certains paramètres liés à ces éléments sont mesurés (taux d'hémoglobine, volume
globulaire moyen = VGM) et d'autres sont calculés (hématocrite, teneur corpusculaire
moyenne en hémoglobine = TCMH, concentration corpusculaire moyenne en
hémoglobine = CCMH),
Figure 1 : les tube utilisé EDTA Figure 2 : automate FNS -RAY BC3000
3
Chapitre 1 : Les analyses hématologiques
2. La protéine c réactive
La protéine C réactive (CRP) est une protéine produite par les hépatocytes, c’est-à-dire les
cellules du foie, qui est ensuite sécrétée dans le sang, c'est un marqueur précoce de la
réponse
inflammatoire, son dosage permet d'évaluer l’état inflammatoire d’un patient. Un dosage
peut
être demandé dans différents cas :
4֊ Principe :
Le CRP LATEX est un test rapide au latex pour la recherche de la Protéine c Réactive
(CRP).
Le particule de latex, sensibilisées avec des anticorps spécifiques de la CR? humaine, sont
agglutinées en présence de sérum de patient contenant la CR?.
i Les Réactifs :
Test qualitatif :
Déposer successivement sur la carte
:
-1 goutte du contrôle positif
-1 goutte du contrôle
négatif
1 goutte (50 pi) de sérum à
tester.
- Placer à côté de chaque dépôt 1 goutte de Latex anti-CRP bien homogénéisé.
- Mélanger les 2 gouttes à l’aide d’un agitateur et les étaler.
- Imprimer à la carte un mouvement de rotation et observer l’apparition éventuelle
d’une agglutination en 2 minutes.
Lecture
Réaction négative : La suspension reste homogène
Réaction positive : agglutination nette en 2 minutes.
Interprétation :
Taux normal adulte 2 6 mg/1 La concentration en CRP augmente en cas de maladies
inflammatoires aiguës et de tumeurs malignes.
Le suivi continu des patients présentant une concentration élevée en CRP donne une bonne
indication de la réponse
Une agglutination thérapeutique
indique de ces
un taux de CRP ≤ àmalades.
6mg/l
Positif
L’agglutination apparait dans les 2min
Négatif
Pas d’agglutination dans les 2min
L’absence d’agglutination indique un taux de CRP ≤ à 6mg/l
5
Chapitre 1 : Les analyses hématologiques
3. Vitesse de sédimentation
Principe :
La vitesse de sédimentation ou VS est un test qui mesure la vitesse à laquelle les globules
rouges chutent dans un tube de sang placé à la verticale. Cet examen permet de détecter
une inflammation ou une infection, comme la tuberculose ou une infection urinaire. La
vitesse de sédimentation s’obtient par un prélèvement sanguin effectué sur un
anticoagulant (citrate de sodium) et EDTA Elle est mesurée à deux moments : une heure et
deux heures après le prélèvement. La VS est mesurée en millimètres de dépôts (1)
٠ De l’âge (la vitesse de sédimentation augmente au fil du temps) : ainsi, les valeurs
normales sont inférieures à 20 et 25 mm respectivement chez les hommes et les
femmes de plus de 65 ans, tandis qu’elles sont inférieures à 2 mm par heure chez
les nourrissons, et comprises entre 3 et 13 mm/heure chez les enfants ؛
٠ De la présence ou non d’une grossesse :
٠ De la prise de certains médicaments, notamment les anti-inflammatoires
(stéroïdiens ou non), qui font diminuer la vitesse de sédimentation, ou des
œstrogènes qui, inversement, vont la faire augmenter.
٠ Cholestérol élevé
٠ Obésité.
Technique :
- Le sang doit être recueilli dans des tubes (citrate de sodium) ou (EDTA)
Remplir la pipette graduée (en verre) jusqu’ au point 0 et en observe le résultat après 1h
6
Chapitre 1 : Les analyses hématologiques
Les systèmes ABO et Rhésus sont les plus importants à déterminer dans le cadre de
transfusions sanguines afin de respecter les règles de compatibilité. En effet, l'injection de
produit sanguin d'un donneur non compatible avec le groupe sanguin du receveur peut
entraîner des accidents transfusionnels dramatiques, c'est pourquoi la détermination du
groupe sanguin est si importante et nécessite au moins 2 déterminations avant la délivrance
d'une carte.
Le système ABO:
Dans le système "ABO", les antigènes présents sur les globules rouges s'appellent
des agglutinogènes. Chaque humain est caractérisé par la présence ou l'absence
d'agglutinogènes sur ses globules rouges. 11 y a deux agglutinogènes qui peuvent
être présents ou absents sur nos globules rouges, l'agglutinogène A et
l'agglutinogène B et leur présence détermine le type de groupe sanguin. Ainsi, selon
que le globule rouge porte :
Rhésus (RHD) :
Le système 'RH" est formé d'un groupe d'antigènes portés aussi à la surface des globules
rouges. On dit de quelqu’un qu’il est : "RH+” s'il possède l’antigène " R.H" sur ses
globules rouges Normalement, il n'y pas d'anticorps anti-Rh dans le sang sauf dans le cas
d'une mère "enfant "RH+ " ou dans le cas d'un individu "RH-" qui a reçu une
transfusion de sang "éviter de donner du sang porteur de l'antigène Rh à un individu qui
ne l'a pas car l'organisme de ce dernier réagira en fabriquant des anticorps anti-Rh. Ces
anticorps ne causent pas de dommages immédiatement, mais lors d'un deuxième
contact avec l'antigène Rh, ils provoqueront une agglutination des globules rouges pouvant
ainsi causer des dommages importants.
7
Chapitre 1 : les analyses hématologiques
Matériels
-Plaque blanche
EDTA
-Pipette pasteur
REACTIFS
. Sérum anti A
Sérum anti B
Sérum anti AB
Sérum Anti D
Technique
/ -On dépose sur une plaque blanche, côte à côte, une goutte de sérum qui contient des
agglutinines A (anti A) et une goutte de sérum qui contient des agglutinines B (anti
B) et une goutte de sérum qui contient des agglutinines AB (anti AB) et une goutte
de sérum qui contient des agglutinines D (anti D).
/ On ajoute ensuite à chacune de ces gouttes une goutte de sang de l'échantillon à tester
/ On brasse légèrement la goutte et on attend quelques secondes ;
/ On peut déjà remarquer si les globules rouges qui contiennent des agglutinogènes,
formeront une réaction d'agglutination avec les agglutinines correspondantes et
nous pourrons voir des agrégats de globules rouges sur la plaque.
5. Ionogramme sanguin :
L'ionogramme et le dosage des principaux constituants ioniques du sang. Il peut aussi être
fait dans les urines. L'ionogramme sanguin permet le dépistage et la surveillance d'un
déséquilibre acido-basique, du niveau d'hydratation, de certaines pathologies
principalement rénales et hépatiques. Les troubles de l'hydratation nécessitent l'exploration
des ions les plus importants quantitativement : le Sodium (Na+), le Potassium (K+) et le
Chlore (Cl-).l]
Tube utilisé : héparine de lithium
8
Chapitre1 : Les analyses hématologiques
6. Sérologie :
Sérologie : La sérologie est 1'étude du sérum, c'est-à-dire le sang débarrassé de ses
cellules et de certains constituants. La plupart du temps, il a l'aspect d'un liquide
transparent et jaunâtre. Communément, la sérologie consiste à évaluer l'immunité à une
maladie en mesurant la quantité d'anticorps spécifiques de celle-ci. Les résultats des
analyses sanguines sont les suivantes pour cette catégorie : Hépatite (A, B, C), Rubéole,
VIH ...
Tube utilisé : héparine de lithium
7. TSH:
La thyréostimuline, ou TSH (thyroid stimulating hormone), est une hormone sécrétée par
l’hypophyse, une glande située dans le cerveau. Son rôle est de stimuler la thyroïde afin
qu'elle produise deux hormones, la T3 (triIodothyronine) et la T4 (thyroxine),
indispensables à l’équilibre de l’organisme. Elles régulent, entre autres, la température
corporelle, le rythme cardiaque ou encore le transit intestinal. (3)
Les valeurs normales se situent entre 0,15 mUI/1 (micro-unités internationales par litre de
Sang) et 3,5 mUIl.
9
Chapitre1 : Les analyses hématologiques
8. Ferritine:
La ferritine est une protéine qui se trouve à l’intérieur des cellules et se lie au fer, de sorte
à ce qu’il soit disponible en cas de besoin.
Elle est présente dans le foie, la rate, les muscles squelettiques, la moelle osseuse et dans
la circulation sanguine en plus petite quantité. D’ailleurs la quantité de ferritine dans le
sang est directement liée à la quantité de fer stocké dans l’organisme
Les D-dimères sont issus de la dégradation de la fibrine, une protéine impliquée dans la
coagulation sanguine.
Quand le sang coagule, par exemple en cas de blessure, certains de ses constituants se fixent
les uns aux autres, notamment à l'aide de la fibrine.
Quand la coagulation sanguine est insuffisante, elle peut être à l’origine de saignements
spontanés (hémorragies). Au contraire, lorsqu’elle est excessive, elle peut être associée à
la formation de caillots sanguins pouvant avoir des conséquences néfastes (thrombose
veineuse profonde, embolie pulmonaire). Dans ce cas, un mécanisme de protection se met
en place pour dégrader la fibrine en excès et la réduire en fragments, certains d’entre eux
étant les D- dimères. Leur présence peut donc témoigner de la formation d'un caillot
sanguin. [2)
10
Chapitre1 : Les analyses hématologiques
11
ChapitreI : les analyses hématologiques
12
sa
Salle de biochimie
sa
La biochimie est 1'étude des réactions chimiques du monde vivant. Les analyses
biochimiques consistent à mesurer les quantités des constituants des liquides biologiques
(sang, urine, et...) la plupart des maladies sont en effet des répercussions sur leur
composition et leur analyse peut aider au diagnostic et au suivi de nombreuses maladies.
Les résultats des analyses sanguines sont les suivantes pour cette catégorie : urée,
créatinine, acide urique, bilirubine, glycémie, TGO, TGP.
13
Chapitre II : les analyses biochimiques
La créatinine est un déchet métabolique normal produit par l'organisme. Elle est le résultat
de la dégradation de la créatine, éliminée en majeure partie par les reins. Son taux dans
l'organisme dépend de la capacité d'élimination rénale et de la masse musculaire.
L'analyse de la créatinine permet d'avoir des informations sur le fonctionnement des reins
et sur la masse musculaire du patient. 6]
mg/L ùmol/L,
Nouveau-né 7-10 60-90
1ère semaine 2-5 20-45
1ère année 2-10 20-90
4 à 10 ans 3-8 30-70
10 à 14 ans 4-10 40-90
Homme adulte 7-13 65-120
Femme adulte 6-11 50-100
Les Réactif :
Réactif RI Hydroxyde de sodium
Echantillons :
14
Chapitre II : Les analyses biochimiques
4֊ Technique manuelle :
/ Allumer le spectromètre à l’aide d’une l'eau distillée
/ Le 1er tube est un blanc réactif on ajoute l000ùL de réactif de créatinine (R1+R2)
/ Le 2ème tube et le 3ème on les utilise comme des calibrant on ajoute dans chaque
tube l000ùl de réactif de créatinine (R1+R2) + l00ùL de calibrant R 3
/ Le 4ème tube et le 5ة٠ غon les utilisent comme échantillon on ajoute l000ùl du réactif
de créatinine et 100.Ա! du sérum de contrôle positif dans le 4ème tube et 1000ùl du
réactif de créatinine et l00ùl du sérum de contrôle négatif
/6ème : tube on ajoute l000ùl du réactif de créatinine +100 ùl du sérum du patient et en
lire le taux de créatinine dans le spectromètre.
15
Chapitre II : Les analyses biochimiques
On distingue 2 transaminases :
٠ L'ALAT (alanine aminotransferase), également appelée SGPT. Cette
transaminase se retrouve au niveau du foie spécifiquement.
٠ LASAT (aspartate aminotransferase) ou SGOT. Cette enzyme se retrouve plus
abondamment dans les muscles, notamment le cœur, et elle est présente, en petites
quantités, dans d'autres tissus et organes : pancréas, globules rouges, reins, rate,
poumons...
٠ De par leur fonction métabolique importante à l'intérieur des cellules et leur
localisation précise, les transaminases peuvent refléter une lésion cellulaire SI leur
taux augmente.
٠ Ainsi, un taux augmenté de transaminases peut signifier une maladie hépatique, me
maladie cardiaque, etc. (7)
٠ 16
Chapitre II : Les analyses biochimiques
Généralement, la plupart de l’acide urique contenu dans le corps humain se dissout dans le
sang et rejoint les reins pour être éliminé dans les urines. Mais dans certains cas,
l’organisme produit un excès d’acide urique ou ne parvient pas à en éliminer assez. Cette
condition peut être à l’origine de troubles divers. [2]
Le médecin prescrit un dosage sanguin (on parle d’uricémie) et/ou un dosage urinaire de
l’acide urique pour :
٠ Détecter la goutte ;
٠ Évaluer le bon fonctionnement des reins ;
٠ Il peut aussi être demandé en cas de grossesse ;
٠ Ou chez les personnes en surpoids.
mg/1 umol/1
Nouveau-né 20-35 120-210
Enfant 20-50 120-300
Femme 25-60 150 -360
Homme 35-70 210-420
17
Chapitre II : Les analyses biochimiques
4. Urée :
L’urée est une molécule produite par le foie et provient de la dégradation des protéines.
Eliminée dans les urines, elle représente la principale forme d’élimination des déchets azotés
de l’organisme.
Le dosage sanguin de l’urée permet d’évaluer la fonction rénale, n est également utile pour
suivre 1’effîcacité de la dialyse rénale. [8)
5. La glycémie :
Le dosage de la glycémie permet de mesurer le taux de دdans le sang, c'est-à-dire la
glycémie. Ce test est essentiellement utilisé pour la surveillance au long cours d'un diabète
déjà diagnostiqué, mais aussi pour le dépistage et le diagnostic des diabètes sucrés, et plus
généralement pour détecter toute éventuelle hausse de la glycémie (hyperglycémie). [9]
18
Conclusion
Au terme de ce rapport. Je dois dire que ce stage a été très enrichissant pour moi, car il
m’a rapporté beaucoup de connaissance concernant le monde du laboratoire, sa
structure, son fonctionnement et surtout son activité.
Sur le plan Professional, ce stage m’a permis de découvrir beaucoup plus de la vie
professionnelle, pour acquérir des informations pratiques ainsi que de développer mes
connaissances dans le domaine de la biologie depuis le début de mes études.
Enfin je tiens à exprimer mes satisfactions d’avoir peu travailler dans de bonnes
conditions matérielles et un environnement agréable.
19
les références bibliographiques
Amer. յ. Clin. Path. 28.611 (1957)
Hind. C.R.K. and M.B. Pepys nt. Med. 5-151 (1984).
20