TP6 Enzyme

THEME 1A – Transmission, variation et expression du patrimoine génétique
TP6 – La spécificité des enzymes
Les protéines exprimées dans la cellule peuvent avoir des fonctions biologiques variées, en particulier
la réalisation de réaction chimique par les enzymes. Les enzymes sont des biocatalyseurs (catalyseurs biologiques)
qui accélèrent les réactions chimiques. Chaque enzyme peut transformer une molécule appelée substrat en une autre
molécule appelée produit. Par exemple, l’amylase et la pepsine participent à la digestion des aliments.
Problème posé : Comment les enzymes permettent-elles de digérer spécifiquement certains aliments ?
On cherche à identifier la spécificité d’action et la spécificité de substrat de diverses enzymes impliquées dans l’alimentation (amylase, pepsine).
Matériel et données :
- Solutions purifiées d’enzymes digestives : amylase (salive et sucs pancréatiques) et pepsine (protéase pancréatique qui agit dans l’estomac)
- Solutions de substrats alimentaires : amidon, ovalbumine (sa présence est identifiée par un trouble dans la solution, sa dégradation rend le liquide transparent)
- Réactifs : eau iodée (coloration bleue en présence d’amidon), Liqueur de Fehling (précipité rouge brique en présence de glucides simples).
- Bain marie à 37°C, tubes à essai, HCl 1M, eau distillée
Propositions d’activités Capacités / Critères de réussite
➢ ETAPE 1 : Proposez une stratégie expérimentale afin de déterminer si l’amylase et la Proposer une démarche de résolution
pepsine peuvent digérer les mêmes molécules (substrats) Tenir compte des données et du matériel, des réactifs, des
Appelez le professeur pour vérification enzymes. Envisager des témoins et les conditions d’expérience.
S’aider de l’introduction, de la liste de matériel et du document A
➢ ETAPE 2 : Mettez en œuvre le(s) protocole(s) proposé(s) Mettre en œuvre un protocole

Appelez le professeur pour vérification Respect du protocole, précision des volumes, natures des
réactifs mélangés
➢ ETAPE 3 : Récapitulez vos résultats sous la forme la plus appropriée.
- Analysez les résultats obtenus et utilisez les documents 1 à 3 pour compléter votre travail Communiquer à l’écrit (étape 3)
- Présentez les résultats sous une forme qui vous semble la plus adaptée Savoir choisir un mode de représentation (graphique, schéma,
tableau …)
➢ ETAPE 4 : Répondez au problème initial et identifier le niveau de spécificité des enzymes Communiquer à l’écrit (étape 4)
Le texte récapitule : « on a vu que », « or on sait que », « donc ».
- Rédigez un texte qui répond au problème.
Gérer et organiser le poste de travail
➢ En fin de séance, rangez le matériel et nettoyez la paillasse
e SVT - M POURCHER (MAJ : 10/10/2023)

Document 1 : L’effet du pH et de la température sur l’action de diverses enzymes
La plupart des enzymes fonctionnent pour une température et un pH donnés (température
optimale et pH optimal). Néanmoins, d’autres enzymes peuvent supporter des conditions de pH ou de
température variable. Généralement, ces conditions optimales sont celles du milieu naturel de l’enzyme. La
plupart des enzymes ont donc des conditions optimales autour de 35°C et pH 7. De plus, les températures
et pH extrêmes ont tendance à dégrader les enzymes (structure protéique).
Document 2 : Etude de la vitesse de réaction en fonction de la concentration en substrat

Le graphique ci-contre montre la concentration de
produits [P] formés par une solution d’enzyme mais
avec 3 concentrations croissantes de substrat [S]1,
[S]2 et [S]3.
Plus la concentration en substrat augmente, plus la
concentration en produits augmente. On en déduit
que l’enzyme fonctionne plus rapidement. On peut
mesurer cette vitesse par le coefficient directeur de
la tangente à l’origine (Vi1 < Vi2 < Vi3).
Malgré tout, si on augmente la concentration au-delà
de [S]3, la vitesse de la réaction n’augmentera pas : il
y a un phénomène de saturation de l’enzyme. Ceci
permet de déduire que le substrat doit se fixer dans
une poche de l’enzyme appelé site actif.
Document 3 : Schéma montrant le mode d’action d’une enzyme

PROTOCOLE SPECIFICITE DE SUBSTRAT DES ENZYMES
1. Préparer 6 tubes à essai comme décrit dans le tableau suivant :
Tubes Contenu
1 4 ml d’ovalbumine + 20 gouttes de pepsine + quelques gouttes d’acide
2 4 ml d’ovalbumine + 20 gouttes d’amylase
3 4 ml d’ovalbumine + 20 gouttes d’eau
4 4 ml d’amidon + 20 gouttes de pepsine + quelques gouttes d’acide
5 4 ml d’amidon + 20 gouttes d’amylase
6 4 ml d’amidon + 20 gouttes d’eau
2. Bien agiter les tubes pour les mélanger

3. Mettre les 6 tubes au bain-marie à 37°C pendant 20 mn.
4. A la fin de l’expérience
a. Observez le niveau de trouble des tubes 1, 2 et 3
b. Ajoutez 1 goutte d’eau iodée dans les tubes 4, 5 et 6.
PROTOCOLE SPECIFICITE D’ACTION DES ENZYMES

(ne sera pas réalisé en TP)
Dans notre expérience, on a pu identifier que l’amidon était dégradé par une enzyme spécifique.
Cependant, on ne sait pas quel est le produit formé lors de cette réaction enzymatique. Pour ce faire, on a
réalisé différentes expériences pour déterminer quelles sont les molécules produites par deux enzymes :
l’amylase et la maltase.
MALTOSE AMIDON
Le maltose est un glucide formé de 2 glucoses L’amidon est un glucide complexe formé de très
reliés entre eux. nombreuses molécules de glucoses reliés entre elles.
Glucose
A partir des formules chimiques des deux glucides ci-dessus, on peut penser que l’amylase et la maltase pourraient
avoir le même produit et ainsi former du glucose toutes les deux. On a alors réalisé les séries d’expériences
suivantes.
Tube et conditions Test glucose (0 min) Test glucose (5 min) Test glucose (10 min)
① Tube Amidon seul Négatif Négatif Négatif
② Tube Amidon + Amylase Négatif Négatif Négatif
③ Tube Maltose seul Négatif Négatif Négatif
④ Tube Maltose + Maltase Négatif 2 g/L 5 g/L
⑤ Tube Amidon + Amylase + Maltase Négatif 2 g/L 5 g/L
➢ A partir de ces résultats, déterminez quels sont les produits des deux enzymes et expliquez en quoi cela
nous permet de dire que les enzymes ont une spécificité d’action.

TP6 Enzyme

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

TP6 Enzyme

Transféré par

Informations du document

Titre original

Copyright

Formats disponibles

Partager ce document

Partager ou intégrer le document

Options de partage

Avez-vous trouvé ce document utile ?

Ce contenu est-il inapproprié ?

Droits d'auteur :

Formats disponibles

TP6 Enzyme

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

THEME 1A – Transmission, variation et expression du patrimoine génétique

TP6 – La spécificité des enzymes

Propositions d’activités Capacités / Critères de réussite

➢ ETAPE 2 : Mettez en œuvre le(s) protocole(s) proposé(s) Mettre en œuvre un protocole

e SVT - M POURCHER (MAJ : 10/10/2023)

Document 2 : Etude de la vitesse de réaction en fonction de la concentration en substrat

Document 3 : Schéma montrant le mode d’action d’une enzyme

e SVT - M POURCHER (MAJ : 10/10/2023)

2. Bien agiter les tubes pour les mélanger

PROTOCOLE SPECIFICITE D’ACTION DES ENZYMES

e SVT - M POURCHER (MAJ : 10/10/2023)

Vous aimerez peut-être aussi