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LIAISON ® Rubella IgM ([REF] 310730) 1. FINALIDAD DEL ENSAYO El ensayo LIAISON ® Rubella IgM emplea la tecnología de la quimioluminiscencia (CLIA) en un ensayo inmunológico para la determinación cuantitativa de anticuerpos específicos de clase IgM dirigidos contra el virus de la rubeola en muestras de suero o plasma humano. El ensayo debe realizarse en la serie de instrumentos LIAISON ® Analyzer. 2. SUMARIO Y EXPLICACIÓN DEL TEST La rubeola es una enfermedad exantematosa infecciosa provocada por un virus de RNA en hélice simple que pertenece a la familia de los Togavirus. La enfermedad tiene una evolución benigna y raramente presenta complicaciones; en un buen porcentaje de los casos la infección es subclínica. La sintomatología es normalmente modesta, caracterizada por un leve estado febril, malestar general, erupción cutánea durante tres-cinco días y a veces también coriza (catarro nasal) y conjuntivitis. La rubeola normalmente va acompañada por linfadenopatía. La infección otorga la inmunidad permanente. La rubeola es especialmente grave si se contrae durante los primeros cuatro meses de gestación. Si la mujer llega a la edad fértil sin una adecuada protección de anticuerpos y se ve afectada por la primera infección durante el embarazo, existe un elevado riesgo de daño del embrión o del feto. La rubeola congénita provoca graves malformaciones en los recién nacidos, muchas de las cuales son permanentes e influyen negativamente en el desarrollo sucesivo (catarata, sordera, hepatoesplenomegalia, retardo psicomotor, alteraciones óseas, cardiopatías y lesiones del sistema nervioso central). Las consecuencias patológicas para el feto dependen del poder teratógeno del virus y del momento del embarazo en el que se ha contraído la enfermedad. De hecho, la edad de gestación en el momento de la infección materna es considerada la variable más importante para la transmisión intrauterina y para el daño del feto. Es opinión generalizada que el riesgo disminuye según va avanzando el embarazo: es máximo en el caso de infección contraída en los dos primeros meses de gestación (40-60%) y disminuye progresivamente durante el cuarto y el quinto mes (10-20%). Los datos clínicos obtenidos en los recién nacidos y los estudios de aislamiento del virus han demostrado que la infección del feto es rara después del segundo trimestre de gestación. El virus de la rubeola se transmite al feto durante la infección primaria materna, tanto aparente como inaparente, cuando el virus circulante infecta la placenta y el feto. La transmisión intrauterina del virus asociada a la reinfección materna es sumamente rara e indica que la inmunidad materna (o natural o debida a la vacunación) protege el feto de la infección. La infección materna (a) puede no provocar infección del feto; o bien puede provocar (b) reabsorción del embrión si la infección se verifica en las fases muy precoces de la gestación; (c) aborto espontáneo; (d) muerte del recién nacido en el momento del parto; (e) infección de la placenta sin infección del feto; (f) infección de la placenta y del feto. Los recién nacidos afectados pueden presentar lesiones macroscópicas en varios órganos o, como se observa a menudo, ninguna lesión claramente evidente. Sin embargo, muchos de estos niños aparentemente sanos presentan a largo plazo sordera, lesiones al sistema nervioso central u otros defectos. La primera respuesta inmune de tipo humoral a la infección consiste en la síntesis de la IgM específica anti-virus de la rubeola que alcanza niveles séricos elevados dos semanas después del exantema y persiste en circulación de uno a dos meses. La IgG específica aparece unos días después del exantema, aproximadamente una semana después de la aparición de la IgM. Aumenta rápidamente hasta alcanzar un nivel constante dentro de seis y diez semanas después del inicio de la enfermedad sintomática y posteriormente sufre una disminución progresiva hasta alcanzar un nivel (15-200 UI/mL) que persiste en circulación durante toda la vida. La reinfección, completamente asintomática, está acompañada por un aumento modesto de los niveles de IgG específica. La correcta detección de la IgM y de la IgG anti-virus de la rubeola proporciona un dato esencial para el diagnóstico y el seguimiento de la infección aguda, para la confirmación del estado inmune de la paciente y por lo tanto para la elección de medidas de profilaxis en las mujeres fértiles no inmunes. Desde que se encuentra a disposición una vacuna, el ensayo de la IgG anti-rubeola es muy utilizado para determinar la seroconversión de la paciente después de la vacunación. 3. PRINCIPIO DEL ENSAYO El método para la determinación cuantitativa de IgM específica anti-virus de la rubeola es un ensayo con captura de anticuerpos basado en el principio de la quimioluminiscencia (CLIA). Una IgG monoclonal de ratón anti-IgM humana se emplea para recubrir las partículas magnéticas (fase sólida) y un anticuerpo monoclonal de ratón anti-virus de la rubeola está enlazado a un derivado del isoluminol (conjugado anticuerpo-isoluminol). Durante la primera incubación, los anticuerpos IgM presentes en los calibradores, en las muestras o en los controles enlazan la fase sólida. Durante la segunda incubación, el antígeno de la rubeola reacciona con la IgM dirigida contra el virus de la rubeola ya enlazada a la fase sólida. Durante la tercera incubación, el anticuerpo conjugado reacciona con el complejo inmune que se ha formado durante la segunda incubación y demuestra así que la reacción inmunológica ha tenido lugar. Después de la primera y la tercera incubación, se elimina el material no enlazado mediante un ciclo de lavado. A continuación, se añaden los reactivos starter que inducen una reacción de quimioluminiscencia. La señal luminosa, y por lo tanto la cantidad de conjugado anticuerpo-isoluminol, se mide con un fotomultiplicador en unidades relativas de luz (RLU, relative light units) e indica la concentración de IgM anti-virus de la rubeola presente en los calibradores, en las muestras o en los controles.
principios básicos de la informatica aplicada a los documentos de archivo.
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