El Microscopio

Partes del Microscopio

- OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador (por donde
mira). Su misin es ampliar la imagen del objetivo. Suelen tener dos
oculares, por eso se llaman binoculares, si solo tiene uno se llama
monocular.
- El TUBO: El tubo ptico se puede acercar o alejar de la
preparacin (lo que se quiere ver) mediante un TORNILLO
MACROMTRICO o de grandes movimientos que sirve para realizar
un primer enfoque. El tornillo macromtrico permite hacer un

movimiento rpido hacia arriba o hacia abajo del tubo o la platina, y

se utiliza para localizar la imagen a observar.
- REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite,
al girar, cambiar los objetivos. La esfera se suele llamar CABEZAL y
contiene los sistemas de lentes oculares (monoculares o binoculares
(2 lentes)).
- BRAZO : Es una pieza metlica de forma curvada que puede
girar; sostiene por su extremo superior al Tubo ptico y en el inferior
lleva varias piezas importantes.
- PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin que se quiere
observar. Tiene en su centro una abertura circular por la que pasar
la luz del sistema de iluminacin.
- OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la
imagen de sta determinando las cantidad de aumentos con la que
queremos observar.
- PINZAS DE SUJECION: Parte mecnica que sirve para sujetar
la preparacin. La mayora de los microscopios modernos tienen las
pinzas adosadas a un carro con dos tornillos, que permiten un avance
longitudinal y transversal de la preparacin.
- CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos que
inciden sobre la preparacin. El condensador de la parte de abajo
tambin se llama FOCO y es el que dirige los rayos luminosos hacia
el condensador.
-TORNILLOS DE ENFOQUE: Macromtrico que aproxima el
enfoque y micromtrico que consigue el enfoque correcto.
- BASE: Sujeccion de todo el microscopio.
Sobre la PLATINA se coloca la preparacin que se va a observar con
un Orificio central por el que pasa la Luz procedente del Espejo. El
ESPEJO con una cara plana y otra cncava, est montado sobre un
eje giratorio ubicado en la zona ms inferior del brazo por debajo de
la Platina.

Microscopio ptico
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Microscopio ptico.Descripcin:A) ocular,B) objetivo, C) portador del objeto, D) lentes de la

iluminacin, E) sujecin del objeto, F) espejo de la iluminacin.

Un microscopio ptico es un microscopio basado en lentes pticos. Tambin se le

conoce como microscopio de luz, (que utiliza luz o "fotones") o microscopio de campo
claro. El desarrollo de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton van
Leeuwenhoek. Los microscopios de Leeuwenhoek constaban de una nica lente pequea
y convexa, montada sobre una plancha, con un mecanismo para sujetar el material que se
iba a examinar (la muestra o espcimen). Este uso de una nica lente convexa se conoce
como microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros aparatos pticos.
ndice
[ocultar]

1Historia

2Partes del microscopio ptico y sus funciones

3Sistema de iluminacin

4Microscopio ptico compuesto

5Principales elementos de un microscopio bsico

6Poder separador, objetivos de inmersin y aumento til

o

6.1Las aberraciones

6.2Correccin de las aberraciones

7Aplicaciones del microscopio ptico

8Microscopio estereoscpico

9Conectar una cmara digital a un microscopio ptico

o

9.1Mtodos bsicos

10Vase tambin

11Referencias

12Enlaces externos

Historia[editar]

1608: Zacharias Jansen construye un microscopio con dos lentes convergentes.

1611: Johannes Kepler sugiere la manera de fabricar un microscopio compuesto.

1665: Robert Hooke utiliza un microscopio compuesto para estudiar cortes

de corcho y describe los pequeos poros en forma de celdas a los que l llam
"clulas". Publica su libro Micrographia.

1674: Leeuwenhoek informa su descubrimiento de protozoarios. Observar

bacterias por primera vez nueve aos despus.

1828: W. Nicol desarrolla la microscopa con luz polarizada.

1838: Schleiden y Schwann proponen la teora de la clula y declaran que la clula
nucleada es la unidad estructural y funcional en plantas y animales.
1849: J. Quekett publica un tratado prctico sobre el uso del microscopio.

1876: Abb analiza los efectos de la difraccin en la formacin de la imagen en el

microscopio y muestra cmo perfeccionar el diseo del microscopio.

1881: Retzius describe gran nmero de tejidos animales con un detalle que no ha
sido superado por ningn otro microscopista de luz. En las siguientes dos dcadas
l, Cajaly otros histlogos desarrollan nuevos mtodos de tincin y ponen los
fundamentos de la anatoma microscpica.

1886: Carl Zeiss fabrica una serie de lentes, diseo de Abb que permiten al
microscopista resolver estructuras en los lmites tericos de la luz visible.

1908: Khler y Siedentopf desarrollan el microscopio de fluorescencia.

1930: Lebedeff disea y construye el primer microscopio de interferencia.

1932: Zernike inventa el microscopio de contraste de fases.

1937: Ernst Ruska y Max Knoll, fsicos alemanes, construyen el primer microscopio
electrnico.

1952: Nomarski inventa y patenta el sistema de contraste de interferencia

diferencial para el microscopio de luz.

Partes del microscopio ptico y sus funciones[editar]

Tubo, cremallera de enfoque y tornillo macromtrico.

Oculares intercambiables de diferentes aumentos.

Tornillos macro y micromtrico.

Objetivos desmontados.

Diafragma - Condensador.

Platina y base.

Revlver.

1 * Ocular: lente situada cerca del ojo del observador. Capta y ampla la imagen formada
en los objetivos.
2 * Objetivo: lente situada en el revlver. Ampla la imagen, es un elemento vital que
permite ver a travs de los oculares.
3 * Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin.
4 * Diafragma: regula la cantidad de luz que llega al condensador.
5 * Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
6 * Tubo: es la cmara oscura que porta el ocular y los objetivos. Puede estar unida al
brazo mediante una cremallera para permitir el enfoque.

7 * Revlver: Es el sistema que porta los objetivos de diferentes aumentos, y que rota
para poder utilizar uno u otro, alinendolos con el ocular.
8 * Tornillos macro y micromtrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina o el tubo
hacia arriba y hacia abajo. El macromtrico permite desplazamientos amplios para un
enfoque inicial y el micromtrico desplazamientos muy cortos, para el enfoque ms
preciso. Pueden llevar incorporado un mando de bloqueo que fija la platina o el tubo a una
determinada altura.
9 *Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la
preparacin, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminacin
situada por debajo. Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un
sistema de cremallera que permite mover la preparacin. Puede estar fija o unida al brazo
por una cremallera para permitir el enfoque.
10 *Brazo: Es la estructura que sujeta el tubo, la platina y los tornillos de enfoque
asociados al tubo o a la platina. La unin con la base puede ser articulada o fija.
11 * Base o pie: Es la parte inferior del microscopio que permite que ste se mantenga de
pie.

Sistema de iluminacin[editar]
La fuente de luz (1), con la ayuda de una lente (o sistema) (2), llamada colector, se
representa en el plano del diafragma iris de abertura (5) del condensador (6). Este
diafragma se instala en el plano focal anterior del condensador (6) y puede variar su
abertura numrica. El diafragma iris (3) dispuesto junto al colector (2) es el diafragma de
campo. La variacin del dimetro del diafragma de campo permite obtener su imagen igual
al campo visual lineal del microscopio. La abertura numrica del condensador (6) supera,
generalmente la de la abertura del objetivo microscpico: es la iluminacin que permite ver
mejor lo que queremos observar como las clulas o las membranas celulares entre otros.

Microscopio ptico compuesto[editar]

Artculo principal: Microscopio compuesto

Un microscopio compuesto es un microscopio ptico con ms de un lente. Se utilizan

especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en lminas tan finas que
se transparentan.

Principales elementos de un microscopio bsico[editar]

Diagrama simple de la ptica de un microscopio.

Los microscopios de este tipo suelen ser ms complejos, con varias lentes en el objetivo
como en el ocular. El objetivo de estas lentes es el de reducir la aberracin cromtica y
la aberracin esfrica. En los microscopios modernos el espejo se sustituye por una
lmpara que ofrece una iluminacin estable y controlable.
Los microscopios compuestos se utilizan para estudiar especmenes delgados, puesto que
su profundidad de campoes muy limitada. Por lo general, se utilizan para examinar
cultivos, preparaciones trituradas o una lmina muy fina del material que sea.
Normalmente depende de la luz que atraviese la muestra desde abajo y usualmente son
necesarias tcnicas especiales para aumentar el contraste de la imagen.
La resolucin de los microscopios pticos est restringida por un fenmeno
llamado difraccin que, dependiendo de la apertura numrica (AN o
) del sistema
ptico y la longitud de onda de la luz utilizada ( ), establece un lmite definido ( ) a
la resolucin ptica. Suponiendo que las aberraciones pticas fueran despreciables, la
resolucin sera:

Normalmente, se supone una

es el aire, la

de 550 nm, correspondiente a la luz verde. Si el medio

prctica mxima es de 0,95, y en el caso de aceite de hasta 1,5.

Ello implica que incluso el mejor microscopio ptico est limitado a una resolucin de
unos 0,2 micrmetros.

Poder separador, objetivos de inmersin y aumento

til[editar]

Poder separador

De la teora de la difraccin sobre la formacin de imgenes mediante un microscopio

se obtiene que la distancia mnima entre dos puntos visibles por separado es:

Donde es la longitud de onda de la luz monocromtica en la que se observa el

objeto y A es la apertura del microscopio.

Objetivos de inmersin

El medio ptico lquido que rellena el espacio entre el objeto y el objetivo se le

denomina lquido de inmersin. El ndice de refraccin de este es prximo al
del vidrio (se utilizaagua, glicerina, aceites de cedro y
de enebro, monobromonaftalina, entre otros).1

Aunque todos los componentes que constituyen un microscopio son importantes,

los objetivos son de suma importancia, puesto que la imagen, en definitiva,
depende en gran medida de su calidad. Los mejores objetivos son aquellos que
estn corregidos para las aberraciones.

Las aberraciones[editar]
Son alteraciones pticas en la formacin de la imagen debidas a las propias lentes
del objetivo.

aberraciones geomtricas (efecto Keystone)2

aberraciones cromticas

Correccin de las aberraciones[editar]

Para evitar las aberraciones geomtricas se construyen los llamados objetivos
planos o planticos, lo cual suele estar indicado en el propio objetivo con la
inscripcin PLAN. Los objetivos que estn corregidos para las aberraciones
cromticas se denominan acromticos (corregidos para el rojo y el azul),
semiapocromticos (corregidos para el rojo y el azul y tienen una mayor
apertura numrica) y finalmente los apocromticos (que son de mayor calidad
y estn corregidos para el rojo, el azul y el verde).

Aplicaciones del microscopio ptico[editar]

Este instrumento ha sido de gran utilidad, sobre todo en los campos de la
ciencia en donde la estructura y la organizacin microscpica es importante,
incorporndose con xito a investigaciones dentro del rea de la qumica (en
el estudio de cristales), la fsica (en la investigacin de las propiedades fsicas
de los materiales), la geologa (en el anlisis de la composicin mineralgica y
textural de las rocas) y, por supuesto, en el campo de la biologa (en el estudio
de estructuras microscpicas de la materia viva), por citar algunas disciplinas
de la ciencia.
Hasta ahora se da uso en el laboratorio de histologa y anatoma patolgica,
donde la microscopa permite determinadas aplicaciones diagnsticas, entre
ellas el diagnstico de certeza del cncer, numerosas estructuras cristalinas,
pigmentos, lpidos, protenas, depsitos seos, depsitos de amiloide,
etctera.

Microscopio estereoscpico[editar]

Microscopio estereoscpico. En la platina se aprecia una concha de 4 cm de dimetro.

Microscopio estereoscpico.

El diseo de este instrumento, tambin llamado lupa binocular, es distinto al

del diagrama de ms arriba y su utilidad es diferente, pues se utiliza para
ofrecer una imagen estereoscpica (3D) de la muestra. Para ello, y como
ocurre en la visin binocular convencional, es necesario que los dos ojos
observen la imagen con ngulos ligeramente distintos. Obviamente todos los
microscopios estereoscpicos, por definicin, deben ser binoculares (con un
ocular para cada ojo), por lo que a veces se confunden ambos trminos.
Existen dos tipos de diseo, denominados respectivamente convergente (o
Greenough) y de objetivo comn (o Galileo).
El diseo convergente consiste en usar dos microscopios idnticos inclinados
un cierto ngulo uno con respecto a otro y acoplados mecnicamente de tal
forma que enfocan la imagen en el mismo punto y con el mismo aumento.
Aunque es un diseo econmico, potente y en el que las aberraciones
resultan muy fciles de corregir, presenta algunas limitaciones en cuanto
a modularidad (capacidad de modificar el sistema para poner accesorios) y la
observacin durante tiempos largos resulta fatigosa.
El diseo de objetivo comn utiliza dos rutas pticas paralelas (una para cada
ojo) que se hacen converger en el mismo punto y con un cierto ngulo con un
objetivo comn a ambos microscopios. El diseo es ms sofisticado que el
convergente, con mejor modularidad y no genera fatiga en tiempos de
observacin largos. Sin embargo es ms costoso de fabricar y las

aberraciones, al generarse la imagen a travs de la periferia del objetivo

comn y en un ngulo que no coincide con el eje ptico del mismo, son ms
difciles de corregir.
Los microscopios estereoscpicos suelen estar dotados, en cualquiera de sus
variantes, de un sistema pancrtico (zoom) o un sistema de cambiador de
aumentos que permite observar la muestra en un rango de aumentos variable,
siempre menor que el de un microscopio compuesto. El microscopio
estereoscpico es apropiado para observar objetos de tamaos relativamente
grandes, por lo que no es necesario modificar los objetos a ver, (laminar) ni
tampoco lo es que la luz pase a travs de la muestra. Este tipo de
microscopios permite unas distancias que van desde un par de centmetros a
las decenas de ellos desde la muestra al objetivo, lo que lo hace muy til
enbotnica, mineraloga y en la industria (microelectrnica, por ejemplo) como
en medicina (microscopios quirrgicos) e investigacin, fundamentalmente en
aplicaciones que requieren manipular el objeto visualizado (donde la visin
estereoscpica es esencial).
Podramos decir que un microscopio estereoscpico sirve para
las disecciones de animales.

Conectar una cmara digital a un microscopio

ptico[editar]

Adaptador digital LM para la Canon EOS 5D.

Un adaptador ptico mecnico es importante en fotografa digital. Dicho

adaptador sirve de enlace entre la cmara y el microscopio. Es especialmente
importante que la conexin mecnica sea firme, pues cualquier movimiento
mnimo, es decir, vibraciones de la cmara, reducira la calidad de la imagen
notablemente. Adicionalmente, se requiere un adaptador ptico para el
trayecto de luz con el que se lograr as que el sensor CCD/CMOS de la
cmara proyecte una imagen de total nitidez e iluminacin.
La fotomicrografa (fotografa realizada con la ayuda de un microscopio
compuesto) es un campo muy especializado de la fotografa, para la que hay
disponibles equipos de precio muy elevado, y no simples equipos de estudio.

Con un microscopio de calidad adecuada, como los que se encuentran en la

mayora de los laboratorios cientficos, se pueden realizar fotomicrografas de
una calidad razonable, utilizando una cmara de uso general, de objetivo fijo o
intercambiable.

Mtodos bsicos[editar]
Hay dos mtodos bsicos de tomar fotografas por medio del microscopio. En
el primer mtodo el objetivo de la cmara realiza una funcin parecida a la
del cristalino del ojo y proyecta sobre el sensor una imagen real de la imagen
virtual que se ve por el ocular del microscopio. Este mtodo es el nico
adecuado para utilizacin de cmaras con objetivo fijo, esto es, no
intercambiable.
El segundo mtodo, adecuado para cmaras con objetivo intercambiable,
implica retirar el objetivo de la cmara y ajustar el microscopio de modo que el
ocular forme una imagen directamente sobre el sensor.
La calidad de la ptica de un microscopio (objetivo y ocular) es fundamental
en la determinacin de la calidad de una imagen fotogrfica. Los objetivos y
oculares de microscopio se encuentran en diferentes calidades, determinadas
por la precisin con que han sido corregidos de aberraciones. Los objetivos
ms econmicos estn corregidos de aberracin esfrica para un solo color,
generalmente el amarillo verdoso, pero no de aberracin cromtica para la
totalidad del espectro visible, sino solo para dos o tres colores, primarios.
Estos objetivos se llaman acromticos, y tambin muestran cierta cantidad
de curvatura de campo; esto es, que la totalidad del campo de visin del
objetivo no puede llevarse simultneamente a foco fino.
Existen los acromticos de campo plano, en los que la curvatura de campo ha
sido casi totalmente corregida, se denominan planacromticos.
Los apocromticos estn corregidos de aberracin esfrica para dos colores y
de aberracin cromtica para los tres colores primarios. Aun as, mostrarn
curvatura de campo a menos que sean planapocromticos, los mejores
objetivos de que se dispone. Los oculares tambin tienen diferentes calidades.
Los ms simples son los de campo ancho.
Los oculares compensadores se disean para compensar ciertas aberraciones
cromticas residuales del objetivo, y dan su mejor resultado cuando se utilizan
con objetivos apocromticos, aunque tambin pueden utilizarse con xito con
los acromticos de mayor potencia. Existen los oculares foto, especiales para
fotomicrografa, y cuando se utilizan con los objetivos planapocromticos dan
la mejor calidad posible de fotografa.