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Facultad de Ciencias
Escuela de Biología Marina

Profesor Patrocinante
Dr. Juan Roberto Jaramillo
Instituto de Ciencias Marinas y
Limnológicas
Universidad Austral de Chile

“Estudio histológico de las estructuras reproductivas de dos géneros de ectoparásitos caligidos

de Eleginops maclovinus en el sur de Chile”

Tesis de Grado presentada como

parte de los requisitos para optar
al Título de Biólogo Marino.

CRISTÓBAL GUILLERMO LEVICOY BUSTAMANTE

VALDIVIA – CHILE
2013
ÍNDICE

ÍNDICE .................................................................................................................................... 23

ÍNDICE DE FIGURAS ............................................................................................................. 45

ÍNDICE DE TABLAS .............................................................................................................. 67

1. RESUMEN ........................................................................................................................ 78

2. ABSTRACT ...................................................................................................................... 89

3. INTRODUCCIÓN ............................................................................................................910

3.1 Biología de Caligidos ...................................................................................................1011

3.2 Eleginops maclovinus ..................................................................................................1113

3.3 Formulación del Problema ............................................................................................ 1213

3.4 Hipótesis de Trabajo .....................................................................................................1314

3.5 Objetivo General .......................................................................................................... 1315

3.6 Objetivos Específicos ...................................................................................................1315

4. MATERIALES Y MÉTODOS........................................................................................ 1415

4.1 Áreas de muestreo ........................................................................................................1415

4.2 Obtención de peces nativos ........................................................................................... 1516

4.3 Extracción de Parásitos .................................................................................................1517

4.4 Preparación de las muestras .......................................................................................... 1617

2
 4.4.1 Preparación de muestras “in toto” ........................................................................... 1618

4.4.2 Preparación de cortes histológicos .......................................................................... 1718

5. RESULTADOS .............................................................................................................. 2021

5.1 Captura de Eleginops maclovinus ................................................................................. 2021

5.2 Parasitosis de Eleginops maclovinus ............................................................................. 2223

5.3 Descripción del sistema reproductivo ............................................................................ 2829

5.3.1 Hembra de Caligus rogercresseyi ........................................................................... 2829

5.3.2 Macho de Caligus rogercresseyi ............................................................................ 3334

5.3.3 Hembra de Lepeophtheirus mugiloides ...................................................................3839

5.3.4 Macho de Lepeophtheirus mugiloides.....................................................................4243

6. DISCUSIÓN ................................................................................................................... 4647

6.1 Sistema reproductivo de Caligus rogercresseyi y Lepeophtheirus mugiloides ............... 4647

6.2 Parasitosis de Eleginops maclovinus ............................................................................. 4849

7. CONCLUSION .............................................................................................................. 5152

8. BIBLIOGRAFIA ............................................................................................................ 5253

3
ÍNDICE DE FIGURAS

Figura 1. Morfología de un copépodo caligido ..........................................................................11

Figura 2.Áreas de muestreo. A, Caicaen; B, Colaco y C, Yaldad. (Region de los Lagos, Chile).15

Figura 3. Equipos utilizados para realizar los cortes histológicos, A Micrótomo Leica modelo
RM-2145, B Baño histológico……………………………………………………………………19
Figura 4. A) Distribución de peso de E. maclovinus en tres áreas de muestreo, B) Distribución de
talla de E. maclovinus en tres áreas de muestreo…………………………………………………21
Figura 5. Ectoparásitos encontrados en Eleginops maclovinus, A Caligus rogercresseyi, B
Lepeophtheirus mugiloides, C Clavella adunca, D Acanthochondria phycidis………………….24

Figura 6. A) Distribución de Abundancia de Caligus rogercresseyi y Lepeophtheirus mugiloides

sobre Eleginops maclovinus en tres áreas de muestreo, B) Prevalencia de Caligus rogercresseyi y
Lepeophtheirus mugiloides sobre Eleginops maclovinus en tres áreas de muestreo…………….26
Figura 7. A) Abundancia porcentual de Caligus rogercresseyi y Lepeophtheirus mugiloides
sobre Eleginops maclovinus en tres áreas de muestreo………………………………………….28
Figura 8. Análisis esquemático del sistema reproductivo de hembra adulta de Caligus
rogercresseyi, A) Parte anterior del cefalotórax, muestra un par de ovarios, un oviducto en el
ovario derecho, (Ov =ovario, Ovi = oviducto y Td = tracto digestivo).B) Sección de ovario
mostrando ovocitos rodeados por un epitelio simple o monoestratificado, (Ovo = ovocito, Epis =
epitelio simple)…………………………………………………………………………………...31
Figura 9. Esquema del sistema reproductivo de hembra adulta de Caligus rogercresseyi, A)
Segmento Genital, el oviducto se encuentra lleno de ovocitos vitelogénicos, se aprecia el
receptáculo seminal en la parte inferior del segmento. ( ovi = oviducto, rs = receptáculo seminal,
td = tracto digestivo ). B) Oviducto lleno de ovocitos vitelogénicos (ovo = ovocito).
……………………………………………………………………………………………...…….32

Figura 10. Análisis esquemático del sistema reproductivo de hembra adulta de Caligus
rogercresseyi, A) Vitelario o glándula del cemento (Gc). B) Receptáculo seminal, se observan en
el centro de este espermatozoides almacenados (Es = espermatozoides, Rs = receptáculo
seminal)……………………………………………………………………………………...…...33
Figura 11. Espermatóforo desprendido desde el segmento genital de una hembra ovigera de
Caligus rogercresseyi, se observan los tubos del espermatóforo………………………………...34
Figura 12. Esquema del sistema reproductivo de macho adulto de Caligus rogercresseyi, A)
Parte anterior del cefalotórax, muestra un par de testículos, un espermioducto o vaso deferente en
el testículo derecho, (Ts = testículo, Epd = espermioducto y Td = tracto digestivo).B) Sección de
testículo (Eg = Espermatogonia, Ect = Espermatocito, Esd = Espermatida, Ez =
Espermatozoide)………………………………………………………………………………….36

4
Figura 13. Esquema del sistema reproductivo de macho adulto de Caligus rogercresseyi, A)
Espermioducto o vaso deferente, se observan espermatozoides en su interior (Epd =
espermioducto, Ez = espermatozoides). B) Segmento genital con un par de sacos del
espermatóforo (Sep =Saco del espermatóforo, Esp = Espermatóforo)…………………………..37
Figura 14. Esquema del sistema reproductivo de macho adulto de Caligus rogercresseyi, donde
se observa el espermatóforo maduro junto a la glándula del cemento (Esp = Espermatóforo, Ez =
Espermatozoide, Gc= glándula del cemento)…………………………………………………….38
Figura 15. Esquema del sistema reproductivo de hembra adulta de Lepeoptheirus mugiloides,
A) Parte anterior del cefalotórax, muestra un par de ovarios y parte del tracto digestivo (ov
=ovario, td = tracto digestivo). B) Sección de ovario mostrando ovocitos rodeados por un epitelio
simple o monoestratificado, (Ovo = ovocito, Epis = epitelio simple)……………………………40
Figura 16. Esquema del sistema reproductivo de hembra adulta de Lepeoptheirus mugiloides,
A) Segmento Genital, el oviducto se encuentra lleno de ovocitos vitelogenicos, se aprecia el
receptáculo seminal en la parte inferior del segmento. (Ovi = oviducto, Rs = receptáculo seminal,
Gc = glándula del cemento, Td = tracto digestivo). B) Oviducto lleno de ovocitos vitelogenicos
(Ovo = ovocito). E) Vitelario o glándula del cemento…………………………………………...41
Figura 17. Esquema del sistema reproductivo de hembra adulta de Lepeoptheirus mugiloides,
E) Receptáculo seminal, se observan en el centro de este espermatozoides almacenados (Es =
espermatozoides, Rs = receptáculo seminal)……………………………………………………..42
Figura 18. Espermatóforo adherido al segmento genital de una hembra ovigera de
Lepeophtheirus mugiloides……………………………………………………………………….43
Figura 19. Esquema del sistema reproductivo de un macho adulto de Lepeoptheirus mugiloides,
A) Parte anterior del cefalotórax, muestra un par de testículos y parte del tracto digestivo (Ts =
testículo, td = tracto digestivo). B) Sección de testículo (Eg = Espermatogonia, Ect =
Espermatocito, Esd = Espermatida, Ez = Espermatozoide)……………………………………...45
Figura 20. Esquema del sistema reproductivo de un macho adulto de Lepeoptheirus mugiloides,
C) Segmento genital con un par de sacos del espermatóforo (Sep =Saco del espermatóforo, Esp =
Espermatóforo). D) Espermatóforo maduro (Esp = Espermatóforo, Ez = Espermatozoide)…….46

5
ÍNDICE DE TABLAS

Tabla 1. Protocolo para la preparación de muestras In toto……………………………………..17

Tabla 2. Protocolo para preparación de las muestras para inclusión en parafina………………..18
Tabla 3. Protocolo para la tinción con Hematoxilina-Eosina…………………………………...20

Tabla 4. Resumen del Test Kruskal-Wallis (análisis de varianza de una vía en rangos),
comparación de las tres áreas de muestreo en peso y longitud de los peces capturados (nivel de
significancia P < 0,05)……………………………………………………………………………22
Tabla 5. Resumen Test a posteriori de comparaciones múltiples (Método de Dunns). Se compara
el peso y longitud de los peces capturados en las tres áreas de estudio (nivel de significancia P <
0,05)………………………………………………………………………………………………22
Tabla 6. Abundancia (A), intensidad (I) y prevalencia (P), de parásitos caligidos de Eleginops
maclovinus calculados de acuerdo a Margolis et al. (1982) y Bush et al. (1997). (n= número de
individuos)………………………………………………………………………………………..25
Tabla 7. Resumen del Test Kruskal-Wallis, (análisis de varianza de una vía en rangos),
comparación entre las 3 áreas de muestreo para cada una de las especies de ectoparásitos
caligidos (nivel de significancia P < 0,05)……………………………………………………….27
Tabla 8. Resumen Test a posteriori de comparaciones múltiples (Método de Dunns),
comparación de las abundancias de ambas especies de caligidos (Caligus rogercresseyi y
Lepeophtheirus mugiloides) en las tres áreas de muestreo en (nivel de significancia P < 0,05)…27
Tabla 9.- Resumen del Test Kruskal-Wallis, análisis de varianza de una vía en rangos,
comparación de abundancia entre especies en las 3 áreas de muestreo (nivel de significancia P <
0,05)………………………………………………………………………………………………28

6
1. RESUMEN

Los estudios acerca del sistema reproductor de Caligidos, hasta ahora realizados, han tenido un

enfoque principalmente morfológico y se han realizado en especies económicamente importantes del

hemisferio norte. En Cchile, en cambio, hasta ahora no existen estudios sobre este tema por lo que el

presente estudiola presente investigación se constituye en un referente que pretende realizar una

descripción de la morfología, histología y desarrollo del sistema reproductivo de dos especies de

parásitos caligidos, (Lepeophtheirus mugiloides (Villalba y Durán, 1985) y Caligus rogercresseyi

(Boxshall y Bravo, 2000) mediante el uso de técnicas para microscopia óptica. Adicionalmente se

estudió el grado parasitosis que dichas especies presentaron en tres áreas de muestreo diferenciadas,

entre sí, por el grado de actividad acuícola que mostraban.

El sistema reproductor de la hembra de ambos ectoparásitos está formado por un par de ovarios

ubicados en la zona media del cefalotórax; un par de oviductos que se extienden a lo largo del sistema

digestivo hasta llegar al segmento genital, donde se encuentran un par de glándulas cementantes y un

receptáculo seminal. El sistema reproductor del macho, es similar en ambas especies y consta de un

par de testículos ubicados en la zona media del cefalotórax, un par de vasos deferentes, glándulas

cementantes y los sacos del espermatóforo ubicados en el segmento genital. El espermatóforo en L.

mugiloides es una estructura que se adhiere fuertemente adherida al segmento genital de la hembra

mientras que en C. rogrecresseyi es fácilmente desprendible.

Respecto de la parasitosis, el área que presentóo mayor impacto por la salmonicultura fue la que

presento mayores abundancias de C. rogercresseyi y menores abundancias de L. mugiloides (sobre el

70% de los parásitos caligidos infectantes pertenecieron a la especie C. rogerccresseyi). En el área con

menor influencia acuícola, en cambio, se observa una reducción de la abundancia de ambos parásitos

y la relación porcentual entre ellos es cercana al 50%. Esto indica que existe una relación directa entre

la abundancia de C. rogercresseyi y la actividad salmonera en el área de muestreo.

7
2. ABSTRACT

To date, studies on the reproductive system of Caligids species have mainly been conducted on

morphological approaches and mainly focused on economically important species of the northern

hemisphere. Moreover in Chile, until now no studies exist on this subject, for this reason the

present study is a benchmark proposing to conduct a description of the morphology, histology

and development of the reproductive system of two species of caligidos parasites,

(Lepeophtheirus mugiloides (Villalba y Durán, 1985) y Caligus rogercresseyi (Boxshall y Bravo,

2000)) using optical microscopy techniques. Additionally the level of parasitosis that both species

showed three different sampling areas was studied, these areas differ from each other by the

degree of aquaculture showing.

The reproductive system of the female both ectoparasites is formed by a pair of ovaries located in

the middle of the cephalothorax, a pair of oviducts extending along the digestive tract until the

genital segment, where there are a pair of cement glands and a seminal receptacle. The male

reproductive system is similar in both species and consists of a pair of testes located in the middle

of the cephalothorax, a pair of vas deferens, cement glands and spermatophore sacs located in the

genital segment. The spermatophore in L. mugiloides is a structure strongly adhered to the female

genital segment while in C. rogrecresseyi is easily removable.

Regard to the parasitosis, the area had higher impact by salmon farming was showed higher

abundances of C. rogercresseyi and less abundant of L. mugiloides (over 70% of the parasites

infecting caligidos belonged to the species C. rogerccresseyi). On the other hand, in the area with

less influence salmon farming, showed a reduction in the abundance of both parasites and the

percentage ratio between them is about 50%. This indicates that there is a direct relationship

between the abundance of C. rogercresseyi and salmon farming activity in the sampling area.

8
 3. INTRODUCCIÓN

Alrededor de 2000 especies de artrópodos parásitos han sido descritos alrededor del

mundo, la mayoría de las cuales pertenecen a la subclase Copépoda; comúnmente llamados

copépodos (Lester y Hayward, 2006). Los copépodos utilizan un extraordinario rango de

hospedadores, se les encuentra en cada Phylum disponible en el medio ambiente marino, desde

las esponjas y cnidarios hasta los equinodermos y cordados; incluyendo las ascidias, peces y

mamíferos (Rhode, 2005). En respuesta a esta gran diversidad de hospedadores, los copépodos

muestran una increíble variedad de adaptaciones para asegurar la infestación y la sobrevivencia

en el huésped. Muchos copépodos parásitos tienen gran importancia económica debido a que

actúan como agentes de enfermedades en poblaciones de peces silvestres y de cultivo, dentro de

éstos los de mayor relevancia son los llamados piojos de mar, pertenecientes a la familia

caligidae (Rhode, 2005).

En Chile hay descritas 20 especies de copépodos caligidos (Muñoz y Olmos, 2007), de

estos Caligus rogrecresseyi (Boxshall y Bravo, 2000), comúnmente conocido como el “piojo del

salmón”, ha provocado un gran impacto en la salmonicultura durante los últimos años en el sur

del país (Boxshall y Bravo, 2000). Este ectoparásito no sólo afecta a los salmones de cultivo, sino

que también está presente en varias especies de peces nativos, tales como; Eleginops maclovinus

(Cuvier y Valenciennes, 1830) nombre común “robalo” (Pisces, Nototheniidae), Odonthestes

regia (Humboldt, 1821) nombre común “pejerrey” (Pisces, Atherinidae), y Paralichthys microps

(Günther, 1881) nombre común “lenguado” (Pisces: Paralichthydae) (Carvajal et al., 1998).

Carvajal et al. 1998 señalaron que a E. maclovinus como uno de los principales responsables en

9
la transmisión de este parásito a los salmones, debido a que este pez esta asociado a las balsas

jaulas donde encuentra su alimento.

3.1 Biología de Caligidos

Los copépodos caligidos pertenecen a la familia Caligidae, que posee 27 géneros los

cuales reúnen cerca de 465 especies (Brusca y Brusca, 2002). Todos ellos viven en agua salada y

regularmente se les encuentra parasitando peces teleósteos (Kabata, 2003). Tienen como

característica ser aplanados dorso-ventralmente y el cuerpo dividido en un cefalotórax en la parte

anterior y en la parte posterior un tronco o segmento genital (Rhode, 2005) (Figura 1).

Figura 1. Morfología de un copépodo caligido.(Imagen modificada de Noble et al, 1989)

10
 Los caligidos generalmente se adhieren al huésped usando una combinación de succión y

garras. El cefalotórax es bordeado completamente con una membrana marginal, la cual permite

que este se adhiera como una gran ventosa sobre la superficie del huésped. En la superficie

ventral dentro del cefalotórax, las antenas y maxilipedos son usados para engancharse a la piel

del pez. Algunos caligidos cuentan adicionalmente con un par de ventosas, las lúnulas,

localizadas ventralmente en la parte frontal del cefalotórax. A pesar de estas modificaciones

muchos caligidos adultos se mueven libremente sobre la superficie del pez (Rhode, 2005).

3.2 Eleginops maclovinus

Eleginops maclovinus comúnmente conocido como “robalo” es un notothenido

perteneciente a la familia Eleginopidae y es la única especie de este género; es endémico de las

costas temperadas y aguas sub Antárticas de Sur América (Licandeo et al., 2006). Su

distribución va desde Valparaíso (33°S) al canal Beagle (54°S) en el Océano Pacífico (Guzmán y

Campodonico, 1973; Pequeño, 1989; Licandeo et al., 2006) y desde el Canal Beagle a Uruguay

(35°S) en el Océano Atlántico (López, 1963; Eastman, 1993; Licandeo et al., 2006).

E. maclovinus es parasitado por 9 especies de copépodos (Muñoz y Olmos, 2007) de los

cuales 5 pertenecen a la familia caligidae, estos compiten entre sí por la superficie del pez donde

se desplazan libremente en sus estadios adultos, a diferencia de las otras especies de parásitos que

permanecen fijos a branquias y aletas. De estos 5 parásitos caligidos, dos han sido reportados

parasitando a salmones de cultivo, en un principio Caligus teres (Wilson, 1905) y luego C.

rogercresseyi (erróneamente identificado como C. flexispina), siendo este último el que con

11
mayor éxito ha migrado desde la población nativa y el que mayor perdidas ha generado a las

empresas salmonicultoras en Chile (González y Carvajal, 1994; Carvajal et al, 1998).

3.3 Formulación del Problema

La información biológica y reproductiva de los parásitos caligidos está orientada sólo a

especies económicamente importantes; Lepeophtheirus salmonis que afecta a salmónidos en el

hemisferio norte (Ritchie et al., 1996; Pike y Wadsworth, 1999; Mustafa et al., 2000) y Caligus

rogercresseyi en el hemisferio Sur (Carvajal et al., 1998; Boxshall y Bravo, 2000; González et

al., 2000; González y Carvajal, 2003). En Chile los estudios sobre copépodos parásitos han

tenido un enfoque taxonómico y ecológico, identificando las especies presentes en la fauna nativa

y su relación con el huésped, no proporcionando información acerca de su biología (Fernández y

Villalba, 1986).

Actualmente en Chile existen dos estudios relacionados con aspectos reproductivos de C.

rogercresseyi, el primero realizado por Pino et al. (2007) el cual demostró que el macho adulto es

atraído por las hembras adultas y juveniles, el segundo realizado por Osorio (2008) en el cual se

analizó la conducta de apareamiento de este mismo parásito sobre su hospedero nativo Eleginops

maclovinus, demostrando la conducta polígama del macho. Respecto al desarrollo gonadal de

copépodos caligidos (colocar autores), en la actualidad sólo existen un par de estudios realizado

en el hemisferio norte, no existiendo estudios de este tipo en especies chilenas.

En función de esta falta de información es que se plantea estudiar el sistema reproductivo

de dos especies de parásitos caligidos del mismo hospedero (Eleginops maclovinus), con el fin de

realizar una descripción detallada de las estructuras involucradas en la reproducción de ambas

12
especies y analizar los parámetros de abundancia, prevalencia e intensidad de estas especies en

tres zonas de muestreo en el sur de chile

3.4 Hipótesis de Trabajo

Se postula que el desarrollo de las estructuras reproductivas de dos especies de parásitos

caligidos de Eleginops maclovinus presentan diferencias.

3.5 Objetivo General

Determinar las diferencias y semejanzas en las estructuras reproductivas de machos y

hembras, de dos especies de parásitos caligidos de Eleginops maclovinus en el sur de Chile.

3.6 Objetivos Específicos

1. Describir el sistema reproductivo de machos y hembras en dos especies de parásitos

caligidos de Eleginops maclovinus.

2. Establecer las eventuales diferencias y semejanzas en el desarrollo de las estructuras

reproductivas de machos y hembras en ambas especies, desde un punto de vista

biológico, ecológico.

3. Comparar abundancia, prevalencia e intensidad de dos especies de parásitos caligidos en

tres localidades de muestreo en el sur de chile.

13
 4. MATERIALES Y MÉTODOS

4.1 Áreas de muestreo

Para la recolección de los parásitos se seleccionaron tres áreas de muestreo, diferenciadas

entre sí por la menor o mayor influencia de centros de cultivo de salmónidos. El área de Colaco

(50 km. al sur de Puerto Montt) se presenta como zona libre de centros de cultivo, debido a que

durante el muestreo se encontraba en un periodo de descanso sanitario. El área de Yaldad (11 km

al oeste de Quellón, Isla de Chiloé) se presenta como una zona medianamente influenciada por la

actividad salmonera, debido a que durante el muestreo había solo un centro de cultivo activo y el

área de Caicaen (Comuna de Calbuco) que se presenta como una zona altamente influenciada, ya

que durante el muestreo aproximadamente una decena de centros estaban en funcionamiento

(centros de engorda y acopio) (Figura 2).

Figura 2. Áreas de muestreo. A, Caicaen; B, Colaco y C, Yaldad. (Region de los Lagos, Chile)

14
4.2 Obtención de peces nativos

Se realizó una captura de peces nativos por cada zona seleccionada (Yaldad, Caicaen y

Colaco). Los peces fueron capturados utilizando red agallera, para luego ser colocados dentro de

bolsas plásticas individuales, previamente etiquetadas y enumeradas. Los peces fueron

identificados, medidos y pesados. Se seleccionaron únicamente los robalos (Eleginiops

maclovinus) por ser esta la especie objetivo de la presente investigación.

4.3 Extracción de Parásitos

Los parásitos caligidos fueron extraídos de cada uno de los robalos capturados,

individualizando los parásitos de cada pez por separado, mediante frascos plásticos previamente

rotulados. Los estadios adultos fueron tomados de la superficie del pez con la ayuda de pinzas

finas, estos se colocaron en frascos plásticos y fijados con Formol Cálcico de Baker.

Los parásitos obtenidos se mantuvieron en Formol cálcico de Baker por 15 días antes de

ser transferidos a alcohol 70%. La identificación de los parásitos se efectuó bajo lupa

estereoscópica y microscopio separando por especie y sexo, para Caligus rogercresseyi se usaron

las descripciones realizadas por Boxshall y Bravo (2000) y Gonzáles y Carvajal (2003), mientras

que las descripciones de Villalba y Duran (1985) se utilizaron para Lepeophtheirus mugiloides.

Los parámetros de prevalencia, abundancia e intensidad se calcularon de acuerdo a Margolis et

al. (1982) y Bush et al. (1997). Se realizaron análisis de varianza para contrastar estos parámetros

entre ambas especies y entre las diferentes áreas de muestreo, utilizando el software estadístico

Sigmaplot versión 12.0.

15
4.4 Preparación de las muestras

Con la finalidad de poder observar y describir las diferentes estructuras ligadas a la

reproducción, una vez identificados y separados los parásitos se seleccionaron 60 individuos de

cada especie, 30 individuos machos adultos y 30 individuos hembras adultas (ovigeras). Algunos

de estos ejemplares fueron destinados para realizar cortes histológicos los que fueron teñidos

usando el método de Hematoxilina-Eosina, otros fueron utilizados para realizar preparaciones “in

toto”.

4.4.1 Preparación de muestras “in toto”

Las muestras seleccionadas para este proceso fueron transparentadas con una solución de

HCl, luego estas fueron incluidas en bálsamo de Canadá mediante el protocolo que se describe en

la Tabla 1.

Tabla 1. Protocolo para la preparación de muestras In toto.

Proceso Solución Duración

Alcohol 70% 15 min
Alcohol 80% 15 min
Alcohol 90% 15 min
Deshidratación
Alcohol 95% 15 min
Alcohol 100% I 15 min
Alcohol 100% II 15 min
Xilol I 30 min
Diafanización
Xilol II 30 min
Inclusión final Porta objeto con Bálsamo de Canadá

16
 Las muestras se dejaron secar en una estufa Memmert a 37° C por aproximadamente una

semana. El análisis de las muestras in toto se realizó bajo un microscopio binocular Carl Zeizz

Axiolab E, y se capturaron fotografías con una cámara digital Canon A540.

4.4.2 Preparación de cortes histológicos

Los cortes histológicos se realizaron en instalaciones del Centro Imar de la Universidad

de los Lagos ubicado en Puerto Montt. Las muestras seleccionadas para este proceso fueron

previamente fijadas y mantenidas en alcohol 70% para posteriormente ser procesadas según el

protocolo descrito en la Tabla 2.

Tabla 2. Protocolo para preparación de las muestras para inclusión en parafina.

Proceso Solución Duración

Alcohol 70% 15 min
Alcohol 80% 15 min
Alcohol 90% 15 min
Deshidratación
Alcohol 95% 15 min
Alcohol 100% I 15 min
Alcohol 100% II 15 min
Xilol I 30 min
Diafanización
Xilol II 30 min
Parafina fundida I 1 hora
Inclusión Parafina fundida II 1 hora
Parafina fundida III 1 hora
Inclusión final Parafina fundida en taco histológico

Una vez incluidas las muestras se procedió a realizar los cortes histológicos con un

micrótomo marca Leica modelo RM-2145 (Figura 3). Los cortes se realizaron longitudinales al

individuo y con un grosor de 5 µm. Los cortes así obtenidos fueron montados sobre un

portaobjeto embebido con albúmina de Meyer con la ayuda de un baño histológico. Los cortes se

17
dejaron secar por un mínimo de 7 días para posteriormente ser teñidos con Hematoxilina-Eosina

mediante el protocolo descrito en la Tabla 3.

A B

Figura 3. Equipos utilizados para realizar los cortes histológicos, A Micrótomo Leica modelo
RM-2145, B Baño histológico.

18
 Tabla 3. Protocolo para la tinción con Hematoxilina-Eosina.

Proceso Solución Duración

Xilol I 5 min
Xilol II 5 min
Alcohol 100% 5 min
Desparafinar
Alcohol 95% 5 min
Alcohol 90% 5 min
Alcohol 70% 5 min
Lavado Agua 5 min
Hematoxilina 5 min
Lavado 10 min
Tinción
Eosina 1,5 min
Lavado 5 min
Alcohol 70% 2 min
Alcohol 90% 2 min
Deshidratación Alcohol 95% 2 min
Alcohol 100% I 5 min
Alcohol 100% II 5 min
Xilol I 5 min
Diafanización
Xilol II 10 min
Montaje Final Porta objeto con Bálsamo de Canadá

Finalmente las muestras se dejaron secar en estufa Memmert TU15 a 37° C. El análisis de

este material se efectuó con un microscopio binocular Carl Zeizz Axiolab E. Se seleccionaron

algunas muestras para ser fotografiadas con una cámara digital Canon A540.

19
 5. RESULTADOS

5.1 Captura de Eleginops maclovinus

Se capturaron un total de 69 ejemplares a la especie Eleginops maclovinus, 24 en la zona

de Yaldad, 34 en la zona de Colaco y 11 en la zona de Caicaen. Los peces de mayor tamaño se

encontraron en la zona de Caicaen con un peso promedio de 304,3 ± 136,20 gr. y una longitud

promedio de 28,4 ± 5,10 cm., seguido de la zona de Colaco con un peso promedio de 197,2 ±

149,97 gr. y una longitud promedio de 26,3 ± 4,07 cm. y los peces de menor tamaño fueron los

capturados en la zona de Yaldad con un peso promedio de 57,0 ± 39,79 gr. y una longitud

promedio de 16,1 ± 2,48 cm. La distribución de peso y longitud se grafica en la figura 4 A) y B)

respectivamente

1200 50

1000 A 45 B
40
800

35
Longitud (cm)
Peso (gr)

600
30
400
25

200
20

0 15

10
Yaldad Colaco Caicaen Yaldad Colaco Caicaen

Figura 4. A) Distribución de peso de E. maclovinus en tres áreas de muestreo, B) Distribución de

talla de E. maclovinus en tres áreas de muestreo.

20
 Un análisis de varianza demostró que existen diferencias estadísticamente significativas

para ambos parámetros (p<0,001, Tabla 4). El análisis a posteriori indica que en la zona de

Yaldad los peces capturados fueron de menor tamaño (peso y longitud p<0,05 Tabla 5) y que las

diferencias observadas en la zona de Colaco y Caicaen no son estadísticamente significativas.

Tabla 4. Resumen del Test Kruskal-Wallis (análisis de varianza de una vía en rangos),
comparación de las tres áreas de muestreo en peso y longitud de los peces capturados (nivel de
significancia P < 0,05).

Parámetro Peso Longitud

H
45,639 43,710
(dos grados de libertad)

P <0,001 <0,001

Tabla 5. Resumen Test a posteriori de comparaciones múltiples (Método de Dunns). Se compara

el peso y longitud de los peces capturados en las tres áreas de estudio (nivel de significancia P <
0,05).

Peso
Comparación Dif. de Rangos Q P<0,05

Caicaen vs Yaldad 44,083 6,035 Si

Caicaen vs Colaco 15,559 2,236 No

Yaldad vs Colaco 28,525 5,333 Si

Longitud
Comparación Dif. de Rangos Q P<0,05

Caicaen vs Yaldad 38,951 5,332 Si

Caicaen vs Colaco 7,836 1,126 No

Yaldad vs Colaco 31,115 5,817 Si

21
5.2 Parasitosis de Eleginops maclovinus

A partir de los muestreos realizados se logró identificar 4 especies de ectoparásitos en los

peces capturados, todos ellos pertenecientes a la clase copépoda (nombre común “copépodos”),

dos pertenecientes a la familia Caligidae: Caligus rogercresseyi (Boxshall y Bravo, 2000) y

Lepeophtheirus mugiloides (Villalba y Durán, 1985) (Figura 5, A y B). Ambas especies adheridas

a la superficie y aletas del pez. Acompañando a estas especies se identifico a Clavella adunca

(Strom, 1762) de la familia Lernaeopodidae y Acanthochondria phycidis (Rathbun, 1886) de la

familia Chondracanthidae (Figura 5, C y D). Estos dos últimos parásitos fueron descartados de

esta investigación por no pertenecer a la familia objetivo, ambos parásitos fueron encontrados

adheridos a las branquias, en baja prevalencia y abundancia.

22
A B

C D

Figura 5. Ectoparásitos encontrados en Eleginops maclovinus, A Caligus rogercresseyi, B

Lepeophtheirus mugiloides, C Clavella adunca, D Acanthochondria phycidis.

Se recolecto un total de 726 parásitos caligidos, de los cuales el 65,7% perteneció a la

especie C. rogercresseyi y el 34,3% a la especie L. mugiloides. Del total de parásitos de la

especie C. rogercresseyi el 38,8% correspondió a hembras y el 61,2% a machos. En el caso de L.

mugiloides el 16,1% correspondió a hembras y el 83,9 a machos.

23
 Se calculó la abundancia, prevalencia e intensidad de C. rogercresseyi y L. mugiloides

según Margolis et al (1982) y Bush et al. (1997). Los resultados se detallan en la Tabla 6.

Tabla 6. Abundancia (A), intensidad (I) y prevalencia (P), de parásitos caligidos de Eleginops
maclovinus calculados de acuerdo a Margolis et al. (1982) y Bush et al. (1997). (n= número de
individuos).
C. rogercresseyi L. mugiloides

A I P (%) n A I P (%) n

Yaldad 3,25 4,33 75 78 1,13 1,69 66,67 27

Colaco 4,38 4,97 73,17 149 3,41 4,61 60,98 116

Caicaen 22,77 22,77 100 250 9,64 10,60 90,91 106

Las mayores abundancias de ambas especies se registraron en el área de Caicaen (22,77 y

10,6 parásitos/pez, para C. rogercresseyi y L. mugiloides respectivamente). Del mismo modo en

esta área se encuentran las mayores prevalencias de ambos parásitos (Figura 6). Se compararon

las abundancias entre áreas para ambas especies mediante un análisis de varianza en rangos (Test

Kruskal-Wallis). Para C. rogercresseyi y L. mugiloides se encontraron diferencias significativas

entre áreas (p<0,001 para ambas especies, Tabla 7). Un análisis a posteriori para identificar las

áreas diferentes, indico que en el área de Colaco y Yaldad las abundancias son estadísticamente

iguales, diferenciándose ambas del área de Caicaen, para las dos especies de parásitos (Tabla 8).

24
 A

Figura 6. A) Distribución de Abundancia de Caligus rogercresseyi y Lepeophtheirus mugiloides

sobre Eleginops maclovinus en tres áreas de muestreo, B) Prevalencia de Caligus rogercresseyi y
Lepeophtheirus mugiloides sobre Eleginops maclovinus en tres áreas de muestreo.

25
Tabla 7. Resumen del Test Kruskal-Wallis, (análisis de varianza de una vía en rangos),
comparación entre las 3 áreas de muestreo para cada una de las especies de ectoparásitos
caligidos (nivel de significancia P < 0,05).

Parámetro C. rogercresseyi L. mugiloides

H
22,722 16,662
(dos grados de libertad)

P <0,001 <0,001

Tabla 8. Resumen Test a posteriori de comparaciones múltiples (Método de Dunns),

comparación de las abundancias de ambas especies de caligidos (Caligus rogercresseyi y
Lepeophtheirus mugiloides) en las tres áreas de muestreo en (nivel de significancia P < 0,05).

Caligus rogercresseyi
Comparación Dif. de Rangos Q P<0,05

Caicaen vs Yaldad 32,578 4,460 Si

Caicaen vs Colaco 30,138 4,331 Si

Yaldad vs Colaco 2,440 0,456 No

Lepeophtheirus mugiloides
Comparación Dif. de Rangos Q P<0,05

Caicaen vs Yaldad 29,184 3,995 Si

Caicaen vs Colaco 17,866 2,567 Si

Yaldad vs Colaco 11,317 2,116 No

Al analizar las diferencias entre especies en cada área de muestreo mediante un análisis de

varianza, encontramos que en el área de Yaldad y Caicaen las abundancias de C. rogercresseyi y

L. mugiloides son estadísticamente diferentes (Tabla 9).

26
Tabla 9.- Resumen del Test Kruskal-Wallis, análisis de varianza de una vía en rangos,
comparación de abundancia entre especies en las 3 áreas de muestreo (nivel de significancia P <
0,05).

Parámetro Yaldad Colaco Caicaen

H
7,099 0,817 4,027
(un grado de libertad)

P 0,008 0,366 0,045

En las áreas de muestreo de Caicaen y Yaldad sobre el 70% de los parásitos caligidos sobre

los peces muestreados pertenecían a la especie Caligus rogercresseyi en el área de colaco este

valor alcanzo el 56 % (Figura 7).

Figura 7. A) Abundancia porcentual de Caligus rogercresseyi y Lepeophtheirus mugiloides

sobre Eleginops maclovinus en tres áreas de muestreo.

27
5.3 Descripción del sistema reproductivo

La descripción de las estructuras que componen el sistema reproductivo de machos y

hembras de ambas especies se realizó mediante el análisis de muestras in toto y cortes

histológicos.

5.3.1 Hembra de Caligus rogercresseyi

El sistema reproductor de todas las hembras estudiadas apareció formado por un par de

ovarios de forma ovalada y apariencia granular, estos están situados en el cefalotórax, en el dorso

a la misma altura de los ojos (mancha ocular) (Figura 8, A). Un par de oviductos nacen desde la

parte superior del ovario, estos recorren a lo largo el cefalotórax, paralelos al tracto digestivo,

bajando hasta el segmento genital.

Los ovarios se encuentran llenos de ovocitos pre-vitelogénicos (Figura 8, B), los cuales

van ingresando al oviducto en donde se inicia el proceso de vitelogénesis cuando los ovocitos

ingresan al segmento genital (Figura 9, A). Los ovocitos en este lugar aumentan de volumen por

la acumulación de vitelo y consecuentemente con ello los ovocitos vitelogénicos se tiñen de un

color rosado, debido a la afinidad de la eosina a los gránulos de vitelo (Figura 9, B). El oviducto

sufre un engrosamiento como resultado del ingreso de los ovocitos a su interior provocando con

ello el ensanchamiento del segmento genital el cual se extiende hasta el atrio genital, lugar donde

convergen la glándula del cemento y el receptáculo seminal (Figura 10 A y B).

La totalidad de las hembras ovigeras analizadas presentaron espermatozoides en el

receptáculo seminal pero solo un 12% de las hembras analizadas de las 3 localidades presentaban

espermatóforos adheridos en el margen posteroventral del segmento genital en las cercanías del

orificio genital.

28
 El espermatóforo tiene forma ovoide, semitransparentes (fijados en formalina) de

consistencia dura pero fácilmente desprendible de la hembra. Estos espermatóforos se conectan

con el receptáculo seminal a través de los tubos del espermatóforos (Figura 11).

29
 A

Figura 8. Análisis esquemático del sistema reproductivo de hembra adulta de Caligus rogercresseyi, A) Parte anterior del cefalotórax, muestra
un par de ovarios, un oviducto en el ovario derecho, (Ov =ovario, Ovi = oviducto y Td = tracto digestivo).B) Sección de ovario mostrando
ovocitos rodeados por un epitelio simple o monoestratificado, (Ovo = ovocito, Epis = epitelio simple).

30
 A

Figura 9. Esquema del sistema reproductivo de hembra adulta de Caligus rogercresseyi, A) Segmento Genital, el oviducto se encuentra lleno
de ovocitos vitelogénicos, se aprecia el receptáculo seminal en la parte inferior del segmento. ( ovi = oviducto, rs = receptáculo seminal, td =
tracto digestivo ). B) Oviducto lleno de ovocitos vitelogénicos (ovo = ovocito).

31
 A

Figura 10. Análisis esquemático del sistema reproductivo de hembra adulta de Caligus rogercresseyi, A) Vitelario o glándula del cemento
(Gc). B) Receptáculo seminal, se observan en el centro de este espermatozoides almacenados (Es = espermatozoides, Rs =
receptáculo seminal).

32
 Espermatoforo

Tubos del espermatoforo

Figura 11. Espermatóforo desprendido desde el segmento genital de una hembra ovigera
de Caligus rogercresseyi, se observan los tubos del espermatóforo.

5.3.2 Macho de Caligus rogercresseyi

El sistema reproductor masculino está conformado por un par de testículos ubicados

al igual que los ovarios, en la región dorsal del cefalotórax a nivel de los ojos (mancha

ocular). A partir de cada uno de ellos nace el espermioducto o vaso deferente, el cual se

extiende desde la zona superior del testículo hasta el segmento genital corriendo paralelo al

tracto digestivo (Figura 12, A).

La maduración de las células gaméeticas parece ocurrir en aéreas diferenciales,

puesto que en ambos testículos se pudo observar zonas con diferentes estadios de la

espermatogenesis (Figura 12, B). En la zona posterior del testículo se encontró células bien

definidas de forma casi esférica que corresponden principalmente a las espermatogonias.

33
Próximas a la zona media del testículo se aprecian células de menor tamaño y cuya forma

vario entre formas casi esféricas y otras más alargadas, las que corresponden a los

espermatocitos.

Desde la zona media del testículo hasta gran parte de la zona anterior, se observan

células de formas irregulares junto con restos de citoplasma de color rosa, estas células

corresponden a las espermátidas que están eliminando los cuerpos residuales para

completar su desarrollo.

En la zona más anterior del testículo se encuentran los espermatozoides, células

alargadas y flageladas que se internan en el espermioducto o vaso deferente, para ser

transportados hasta el segmento genital (Figura 13, A). El espermioducto termina en el saco

del espermatóforo, en el cual también desemboca una glándula del cemento ubicada a cada

lado del tracto digestivo en el segmento genital (Figura 13, B). Todos los especímenes

analizados presentaban espermatóforos maduros.

Dentro del saco del espermatóforo se observan dos o tres espermatóforos en

diferente estado de desarrollo, un par de glándulas de cemento acompañan a cada uno de

los sacos, las cuales se encuentran unidas por la zona ventral de los sacos.

El espermatóforo maduro está formado por una cubierta quitinosa gruesa dentro de

la cual se encuentra almacenado un gran número de espermatozoides (Figura 14).

34
 A

Figura 12. Esquema del sistema reproductivo de macho adulto de Caligus rogercresseyi, A) Parte anterior del cefalotórax, muestra un
par de testículos, un espermioducto o vaso deferente en el testículo derecho, (Ts = testículo, Epd = espermioducto y Td = tracto
digestivo).B) Sección de testículo (Eg = Espermatogonia, Ect = Espermatocito, Esd = Espermatida, Ez = Espermatozoide).

35
 A

Figura 13. Esquema del sistema reproductivo de macho adulto de Caligus rogercresseyi, A) Espermioducto o vaso deferente, se
observan espermatozoides en su interior (Epd = espermioducto, Ez = espermatozoides). B) Segmento genital con un par de sacos del
espermatóforo (Sep =Saco del espermatóforo, Esp = Espermatóforo).

36
Figura 14. Esquema del sistema reproductivo de macho adulto de Caligus rogercresseyi, donde se observa el espermatóforo maduro
junto a la glándula del cemento (Esp = Espermatóforo, Ez = Espermatozoide, Gc= glándula del cemento).

37
5.3.3 Hembra de Lepeophtheirus mugiloides

En la hembra los órganos reproductivos están ubicados en forma similar a lo visto en C.

rogercresseyi, y corresponde a un par de ovarios forma ovalada y apariencia granular, ubicados

en el cefalotórax a la misma altura que los ojos (mancha ocular) (Figura 15, A). El oviducto surge

desde la parte superior de cada uno de los ovarios y recorre el cefalotórax paralelo al tracto

digestivo, bajando hasta alcanzar el segmento genital. Aquí el oviducto sufre un engrosamiento a

medida que se adentra en el segmento genital.

Los ovarios se encuentran llenos de ovocitos pre-vitelogénicos, los cuales van ingresando

al oviducto (Figura 15, B). Los ovocitos en el oviducto entran en la fase de vitelogenesis al

ingresar dentro del segmento genital (Figura 16, A). Este aumenta su volumen en la medida que

los ovocitos comienzan a llenarse de vitelo, el cual es posible detectar por la coloración rosada

que evidencia su afinidad con la eosina (Figura 16, B).

El oviducto finaliza en el atrio genital, lugar donde convergen la glándula de cemento y el

receptáculo seminal (Figura 17).

El 100% de las hembras ovigeras analizadas presentaron espermatozoides en el

receptáculo seminal y el 80% de las hembras analizadas presentaban espermatóforos adheridos en

el margen posteroventral del segmento genital en las cercanías del orificio genital.

El espermatóforo tiene forma alargada, color amarillo-anaranjado (fijado en formalina)

semitransparente de consistencia dura y firmemente adherido al orificio genital en el borde

posterior del segmento genital. Estos espermatóforos se conectan con el receptáculo seminal a

través de los tubos del espermatóforos (Figura. 18).

38
 A

Figura 15. Esquema del sistema reproductivo de hembra adulta de Lepeoptheirus mugiloides, A) Parte anterior del cefalotórax,
muestra un par de ovarios y parte del tracto digestivo (ov =ovario, td = tracto digestivo). B) Sección de ovario mostrando ovocitos
rodeados por un epitelio simple o monoestratificado, (Ovo = ovocito, Epis = epitelio simple).

39
 A

Figura 16. Esquema del sistema reproductivo de hembra adulta de Lepeoptheirus mugiloides, A) Segmento Genital, el oviducto se
encuentra lleno de ovocitos vitelogenicos, se aprecia el receptáculo seminal en la parte inferior del segmento. (Ovi = oviducto, Rs =
receptáculo seminal, Gc = glándula del cemento, Td = tracto digestivo). B) Oviducto lleno de ovocitos vitelogenicos (Ovo = ovocito).
E) Vitelario o glándula del cemento.

40
Figura 17. Esquema del sistema reproductivo de hembra adulta de Lepeoptheirus mugiloides, E) Receptáculo seminal, se observan
en el centro de este espermatozoides almacenados (Es = espermatozoides, Rs = receptáculo seminal).

41
Figura 18. Espermatóforo adherido al segmento genital de una hembra ovigera de
Lepeophtheirus mugiloides.

5.3.4 Macho de Lepeophtheirus mugiloides

Al igual que la hembra de L. mugiloides el sistema reproductivo del macho es similar al

observado en el macho de Caligus rogercresseyi, este está formado por un par de testículos

ubicados en la región dorsal del cefalotórax a nivel de los ojos (mancha ocular) (Figura 19, A).

Desde la zona superior de cada testículo nace el espermioducto o vaso deferente, el cual se

extiende hasta el segmento genital, corriendo en forma paralela al tracto digestivo.

Como se observó en C. rogercresseyi es posible diferenciar en cada uno de los testículos

zonas dominadas por diferentes estadios de la espermatogenesis (Figura 19, B). En la zona

posterior del testículo se ubican las espermatogonias, seguidas de los espermatocitos que se

sitúan en las proximidades de la zona media y finalmente desde la zona media del testículo hasta

la zona anterior se encuentran las espermátidas.

El espermioducto vaso deferente nace en la porción superior del testículo y se extiende

desde el cefalotórax hasta el segmento genital en donde aparece engrosado por su conexión con el
42
saco del espermatóforo (Figura 20, A) que ocupa la cavidad del segmento genital casi en su

totalidad.

Todos los especímenes analizados presentaban espermatóforos con espermatozoides en su

interior. Dentro del saco del espermatóforo se observan dos o tres espermatóforos en diferentes

estados de desarrollo, un par de glándulas de cemento unidas por la zona ventral acompañan a

cada uno de los sacos. Se aprecia una cubierta quitinosa gruesa rodeando el espermatóforo

maduro, dentro de este se observa un gran número de espermatozoides (Figura 20, B).

43
 A

Figura 19. Esquema del sistema reproductivo de un macho adulto de Lepeoptheirus mugiloides, A) Parte anterior del cefalotórax,
muestra un par de testículos y parte del tracto digestivo (Ts = testículo, td = tracto digestivo). B) Sección de testículo (Eg =
Espermatogonia, Ect = Espermatocito, Esd = Espermatida, Ez = Espermatozoide).

44
 A

Figura 20. Esquema del sistema reproductivo de un macho adulto de Lepeoptheirus mugiloides, C) Segmento genital con un par de
sacos del espermatóforo (Sep =Saco del espermatóforo, Esp = Espermatóforo). D) Espermatóforo maduro (Esp = Espermatóforo, Ez =
Espermatozoide).

45
 6. DISCUSIÓN

6.1 Sistema reproductivo de Caligus rogercresseyi y Lepeophtheirus mugiloides

Los estudios existentes sobre el sistema reproductivo de copépodos ectoparásitos, han

sido realizados en especies del hemisferio norte, y han tenido un enfoque principalmente

morfológico, centrándose en las familias; Caligidae (Scott 1901, Wilson 1905), Pennelidae

(Scott 1901), Lernapodidae (Wilson 1911a) y Ergasilidae (Wilson 1911b). Posteriormente en

1996, Ritchie et al., realizaron un estudio más detallado del sistema reproductivo de

Lepeophtheirus salmonis, describiendo la morfología, histología y el desarrollo de las diferentes

estructuras involucradas en la reproducción utilizando microscopia de luz y electrónica.

El análisis realizado en esta investigación nos indica que las estructuras reproductivas de

Lepeophtheirus mugiloides y Caligus rogercresseyi no presentan grandes diferencias entre

especies, tanto para machos como para hembras. Más aun, los resultados aquí descritos, en ambas

especies, son similares a las descripciones realizadas previamente en otros caligidos (Scott, 1901;

Wilson, 1905; Pike y Wadsworth, 1999).

Pike y Wadsworth, (1999) indican que para la familia Caligidae los órganos

reproductivos de ambos sexos son pareados y tanto los ovarios de la hembra como testículos del

macho están situados en el cefalotórax, justo detrás del nivel de los ojos, similar a lo observado

en L. mugiloides y C. rogercresseyi. Scott (1901) describió los órganos reproductivos de machos

y hembras para Lepeophtheirus pectoralis y Lernaeocera branchialis; este autor logro diferenciar

gran parte de las estructuras reproductivas en similar ubicación a lo encontrado en la presente

investigación. Similares descripciones realizo Wilson (1905) en Caligus bonito.

46
 Entre las observaciones realizadas por Ritchie et al., (1996) a las estructuras de la hembra

de L. salmonis, se describen un par de receptáculos seminales fusionados formando una

estructura única , similar a la descrito por Anstenrud (1990) en L. pectoralis. En el caso de L.

mugiloides y C. rogercresseyi se encontraron un par de receptáculos seminales no fusionados,

característica ésta, que según algunos autores, es compartida por la mayoría de los copépodos

Sipohonostomatoideos (Huys y Boxshall, 1991) y algunos copépodos planctónicos (Marshall y

Orr, 1955).

En los testículos de los machos de ambas especies aquí estudiadas, se logró identificar con

cierta facilidad los diferentes estados de la espermatogénesis (desde espermatogonias a

espermatozoides), según Ritchie et al (1996) este proceso de maduración gamética es estándar

para todas las especies de copépodos. La distribución de las células observadas dentro del

testículo de C. rogercresseyi y L. mugiloides es similar a la encontrada por dicho autor en L.

salmonis, En general, se describen tres zonas diferentes; una zona posterior ocupada por

espermatogonias, una zona media ocupada por espermatocitos y una zona anterior donde

comienzan a desarrollarse los espermatozoides. Esta distribución también fue observada en L.

pectoralis (Gouliart, 1937) y en Labidiocera aestiva, un copépodo de vida libre (Blades y

Youngbluth, 1981).

Si bien la gran mayoría de las estructuras reproductivas en C. rogercresseyi y L.

mugiloides son similares entre si y entre las especies pertenecientes a la familia Caligidae

descritas en la literatura; en la presente investigación se establece que el espermatóforo difiere

en forma y consistencia entre ambas especies estudiadas. El espermatóforo del macho en L.

mugiloides es una estructura sólida y fuertemente adherida al segmento genital de la hembra

mientras que en C. rogrecresseyi esta estructura es de menor tamaño y fácilmente desprendible.

47
 Esta leve diferencia, que a primera vista pareciera no ser significativa desde la perspectiva

anatómica del sistema reproductivo de estos parásitos, puede tener alguna implicancias en la

conducta reproductiva de estos. Un antecedente interesante a este respecto, surge a partir de la

descripción que se ha hecho para algunas especies de Caligidos donde algunas hembras pierden

el espermatóforo después de su primera copula, pudiendo eventualmente ser fecundadas

nuevamente por otro macho (Anstensrud, 1990). Un espermatóforo fuertemente adherido al

segmento genital de la hembra, por el contrario, asegura la exclusividad de la progenie de un

único macho.

Osorio (2008) estudio la conducta reproductiva de C. rogercresseyi en condiciones de

laboratorio, describiendo una conducta polígama del macho y conducta monógama de la hembra,

según esto, es posible que en condiciones naturales algunas hembras tengan la capacidad de

aceptar un segundo par de espermatóforos con la consecuente producción de mayor

descendencia. Ciertamente esta hipótesis debiera ser probada en una investigación que apunta a

resolver de manera específica esta idea.

6.2 Parasitosis de Eleginops maclovinus

Los resultados relacionados con los aspectos ecológicos de estos parásitos, indican que

existe una fuerte relación entre la abundancia de Caligus rogercresseyi parasitando sobre

Eleginops maclovinus y la cantidad de centros de cultivo en la zona de captura de este pez. Los

resultados observados en Caicaen y Yaldad (zonas con alta concentración de centros de cultivo)

mostraron que ambas, son áreas donde la mayor proporción de parásitos corresponde a C.

rogercresseyi (en ambos caso, más del 70% de los parásitos caligidos totales observados sobre el

pez pertenecen a esta especie)., mientras que cuando la cantidad de centros de cultivo disminuye,

la abundancia de ambas especies de parásitos tiende a equiparase, como es el caso del área de

48
Colaco, que es una zona sin actividad salmonera (periodo de descanso sanitario), en donde la

proporción de ambas especies de caligidos se acerca estadísticamente a una proporción de 1:1

(Figura 7).

Nuestros resultados son diferentes a lo reportado en estudios anteriores realizados en el

Sur de Chile puesto que hasta hace algunos años L. mugiloides era el parasito que se encontraba

en mayor abundancia sobre E. maclovinus, mostrando valores superiores al 70% con respecto al

total de parásitos observadas en el hospedador (Carvajal et al. el, 1998; Sepúlveda et al 2004).

Carvajal et al. el año 1998 reporta cuatro especies de parásitos caligidos sobre E.

maclovinus; ellas fueron Lepeophtheirus mugiloides, Caligus rogercresseyi, Caligus teres y

Caligus Chaelodactylus, estas dos últimas presentaron baja abundancia y prevalencia. Por su

parte, Sepúlveda et al., 2004 registro en el mismo hospedador solo tres especies de caligidos; L.

mugiloides, C. rogercresseyi y C. teres, este último en baja abundancia y prevalencia. Al

contrastar estos datos con datos de la presente investigación, observamos que solo dos especies

de caligidos se mantuvieron presentes en este hospedador. Es posible que el aumento en la

abundancia de C. rogercresseyi haya desplazado a otras especies de caligidos que compartían el

mismo hábitat.

Carvajal et al. 1998, señalo a E. maclovinus como una especie vinculada a las jaulas de

cultivo de salmónidos, donde se alimenta y transmite (según este autor) parásitos a los salmones,

y que probablemente fue este pez quien en primera instancia contagio a los salmones. Los

resultados del presente estudio indican que probablemente los salmones estarían retro-infestando

a E. maclovinus, debido a la gran cantidad de centros de cultivo y las altas abundancias de C.

rogercresseyi los que estarían liberando un gran número de larvas a la columna de agua. Esto se

49
asemeja a lo observado por Krkošek et al. (2007) en la Columbia Británica, Canadá, donde los

salmones de cultivo traspasan sus parásitos a la fauna nativa provocando una disminución de la

población de salmones rosados. En Noruega en áreas de intensa actividad de cultivo, el parasito

Lepeophtheirus salmonis no solo provoca mortalidad en la población nativa de truchas si no

también provoca cambios conductuales, induciendo un prematuro retorno de las truchas juveniles

a los ríos y estuarios (Birkeland y Jakobsen, 1997)

Un seguimiento realizado desde el año 2000 al año 2006, sobre la caligidosis de los

salmones de cultivo en sur de chile (Bronchuer, 2010), nos indica que las cargas de Caligus

rogercresseyi aumentaron significativamente sobre el salmón Atlántico, el periodo 2005-2006,

relacionándose con un aumento en la biomasa de cultivo y la disminución de la efectividad de los

fármacos utilizados en esa para combatir la caligidosis. Este aumento en la población de parásitos

puede haber desplazado los parásitos nativos de E. maclovinus descritos por otros autores y que

no fueron encontrados a lo largo de nuestra investigación. Desde el año 2006 a la fecha las

abundancias de C. rogercresseyi sobre los salmones de cultivo se ha convertido en una de las

principales preocupación de la industria acuícola en chile, por lo que estas se mantienen

relativamente bajas mediante medidas de control basadas en una gama más amplia de fármacos y

un monitoreo constante de las abundancias de este parasito en los peces. Este plan de manejo en

la salmonicultura puede haber tenido un impacto en la parasitosis de caligidos sobre E.

maclovinus permitiendo el retorno de las especies posiblemente desplazadas. Esta problemática

requiere de un constante seguimiento de la parasitosis de los peces nativos vinculados a las balsas

de cultivo. Actualizar la literatura hasta el 2013

Discutir y explicar la importancia de este estudio, primero en Chile al describir la

morfología reproductiva de copépodos parasitos, así como de copépodo de vida libre

50
 Señalar la relevancia de la problemática de mayores caligidosis en peces silvestes de areas

salmonicolas, similar al Hemisferio Norte donde hay una gran conciencia ambiental por el tema,

llevando a sin numero de estudios, revisar Congreso Sealice 2010.

7. CONCLUSION

 En este estudio sSe logró realizar una descripción detallada de las estructuras que

componen el sistema reproductivo de los adultos (machos y hembras) de Caligus

rogercresseyi y Lepeophtheirus mugiloides.

 Las estructuras reproductivas descritas para Caligus rogercresseyi y Lepeophtheirus

mugiloides no presentan diferencias significativas entre sí. Tampoco presentan grandes

diferencias con otras especies de caligidos descritos en la literatura.

51
  El espermatóforo de los machos de ambas especies presenta diferencias morfológicas,

expresadas en ……….

 La abundancia de Caligus rogercresseyi y Lepeophtheirus mugiloides presenta relación

directa con la menor actividad salmonera en el área de muestreo.

Aumentar las conclusiones, respecto a aspectos reproductivos de las dos especies evaluadas, asi

como otras descritas en la literatura.

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