Bitacora de TrabajoP6
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Folio
Práctica Cromatografía realización: 1
6 05/03/2019
Resultados.
La cromatografía es un método utilizado para la separación de una mezcla de solutos. Para que esto
pueda llevarse de una forma adecuada se deben considerar varios factores como lo es la fase móvil y la
fase estacionaria, el estado físico y químico de los compuestos, además de la concentración de estos. En
esta práctica hicimos tres experimentos que a continuación se describirán
Experiencia 1. Cromatografía en placa fina.
a. Separación de carotenos.
Primero en un cromato placa trazamos una línea con un lápiz de punta suave la cual mide 0.5 cm de la
base hacia arriba, después con el uso de un capilar aplicamos la muestra de carotenos en dos puntos
equidistantes encima de la línea, luego dentro de una cámara cromatográfica agregamos una mezcla
hexano: acetona 6:1 e introducimos la cromato placa prestando atención a que la mezcla de hexano:
acetona no rebasara la línea que trazamos con el lápiz, lo que a continuación observamos fue la asención
de la mezcla de hexano: acetona por capilaridad arrastrando los diferentes compuestos, esto lo podemos
saber por qué el color cambia durante el arrastre, el compuesto más polar es el que no avanza demasiado
y el menos polar es el que viaja a mayor distancia con la fase móvil.
b. Identificación de aceites esencial por cromatografía en placa fina.
Como no había el equipo suficiente esta parte del experimento no pudo realizarse.
Experiencia 3. Separación de Licopenos
En esta parte del experimento lo que hicimos fue exactamente lo mismo que con los carotenos a
excepción de que usamos nuestro extracto de Licopenos en lugar del de carotenos y el resultado fue
diferente.
Experiencia 2. Separación de carotenos por cromatografía en columna.
Primero fijamos la columna de cromatografía con ayuda de unas pinzas universales, después
introducimos por la parte superior de la columna un pedazo de algodón pequeño para que no haya
perdidas de silica gel, agregamos una suspensión compuesta de silica gel y una mezcla de hexano:
acetona aunque en el manual decía 4g nosotros agregamos más por la sugerencia del profesor, siempre
tuvimos en goteo uniforme la columna de cromatografía durante el proceso de agregar el Cloruro de
Sodio hasta un centímetro por encima de la silica y después de agregar nuestro líquido que contenían los
carotenos, es aquí donde por diferencia de polaridad observamos la separación de los diferentes
componentes de nuestra extracción de carotenos y captamos los diferentes colores en los tubos de
ensayo.
Análisis de resultados.
Experiencia 1. Cromatografía en placa fina.
c. Separación de carotenos.
En base a los resultados obtenidos en la separación de carotenos por cromatografía en placa fina
pudimos sacar el valor del Rf para este experimento su valor es de Rf= 0.4/3.4 = 0.1176
Conclusión.
La cromatografía se utiliza para la separación de una muestra formado por dos o más componentes de origen sintético
o natural y se distribuyen entre dos fases, donde una de las cuales constituye una fase estacionaria de amplio
desarrollo superficial y la otra es un fluido que pasa a través o a lo largo del lecho estacionario (fase móvil).
Se basa en la diferente velocidad con que se mueve cada uno de los solutos a través de un medio poroso, arrastrados
por un disolvente en movimiento. Existen dos métodos para la realización de la cromatografía; cromatografía en
columna y en placa fina.
Para la cromatografía en columna consta de un eluyente en una columna que se debe empacar homogéneamente, la
fase estacionaria en cuyo extremo superior se aplica la muestra a separar, y se procede así a separar los componentes
que conforman la muestra. La cromatografía en placa fina consta de una cámara para contener una placa de vidrio o
aluminio adsorbida con sílica gel. Dentro de la cámara se coloca una muestra ideal de los disolventes que servirán
como la fase móvil, por medio de capilaridad hasta llegar al límite (generalmente 1cm antes del borde de la placa).
Posteriormente se revelan cuánto recorrieron las muestras, las sustancias menos polares avanzan más y las sustancias
más polares que quedan abajo o no avanzan casi nada.
CUESTIONARIO.
1. Indicar qué precauciones se deben tener al empacar una columna de cromatografía.
Imperfección con el llenado (fase móvil), montaje, generación de burbujas por un mal montado del algodón.
2. Indicar qué fracciones se separaron por cromatografía en columna de los extractos de espinaca, jitomate y
cómo se identificaron.
Carotenos, clorofilas, fosforinas. Se identificaron por colores.
3. ¿Escriba qué conclusiones se obtienen de la cromatografía en capa fina y de la cromatografía en columna?
La cromatografía en columna te permite separar y purificar compuestos. Mientras que la cromatografía en
capa fina te permite comprobar la pureza del compuesto y compararlo.
4. Definir los siguientes términos:
Adsorción: Fenómeno por el cual un sólido o un líquido atrae y retiene en su superficie gases, vapores,
líquidos, etc.
Partición: Fenómeno de reparto entre las dos fases debido a la solubilidad.
Eluyente: Disolvente utilizado en técnicas cromatográficas para extraer un componente que se quiere
separar de otra fase.
Eluato: Cada una de las sustancias que migran a través de la fase estacionaria.
No. Folio Continuación
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Disolvente: Líquido capaz de disolver otras sustancias.
Fase móvil: Fase que se mueve en dirección definida.
Fase estacionaria: Sustancia que esta fija en una posición durante una cromatografía.
Rf: “Relación de frentes”; se utiliza con fines de identificación de compuestos cuando se tienen patrones de
referencia.
BIBLIOGRAFÍA.
- McMurry, J. (2017). Química Orgánica. México: Cengage Learning.
- William, H. Brown. Química Orgánica. 2ª Ed. CECSA.