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    MÉTODOS FÍSICOS

    Métodos basados en las propiedades físicas de las biomoléculas Si queremos separar


    biomoléculas que tienen los mismos grupos funcionales, sus propiedades químicas
    serán muy parecidas o idénticas. Por tanto, habrá que utilizar métodos experimentales
    basados en las propiedades físicas de las biomoléculas como, por ejemplo, el tamaño,
    la forma, la carga o la polaridad. Esta última propiedad es especialmente importante,
    ya que afecta a la solubilidad, la volatilidad y a la capacidad de adsorción de las
    biomoléculas.

    MÉTODOS DE HIBRIDACIÓN
    Estos métodos se basan en las interacciones que se establecen entre pares de bases
    complementarias en los ácidos nucleicos (la adenina se empareja con la timina o con
    el uracilo, mientras que la citosina se empareja con la guanina).
    Se utilizan principalmente para identificar moléculas de ADN o de ARN que presenten
    una secuencia determinada. Para ello, es necesario disponer de una pequeña
    molécula de ADN o ARN complementaria a la secuencia que nos interesa. Esta
    molécula se denomina "sonda" y, normalmente, se sintetiza por métodos químicos
    (síntesis orgánica) o bioquímicos (reacción en cadena de la polimerasa, o PCR). El
    emparejamiento entre la sonda y una molécula de ADN o ARN que contenga una
    secuencia complementaria se denomina hibridación.
    Para poder detectar y cuantificar la formación de híbridos es necesario recurrir a
    métodos indirectos. El método más habitual consiste en marcar la sonda con isótopos
    radioactivos, con moléculas fluorescentes o con algún antígeno que, posteriormente,
    pueda ser detectado con un anticuerpo unido a una enzima.
    Referencias bibliograficas:
     Roca Pilar. Oliver Jordi. Rodríguez Ana (2003) Bioquímica técnicas y
    métodos. Editorial hélice. Madrid, España.

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