FOSFORILACIÓN OXIDATIVA Y

CADENA TRANSPORTADORA
DE ELECTRONES

Profesor Roberto Bravo Mujica

 CADENA
TRANSPORTADORA
DE ELECTRONES
Agente
O2
reductor
Reacciones
redox
Agente H2O
oxidante

• NADH + H+ + ½O2 -------> NAD+ + H20 ∆G0' = -220 KJ/mol

• FADH2 + ½O2 -------------> FAD + H20 ∆G0' = -150 KJ/mol

FOSFORILACIÓN OXIDATIVA PROCESOS TRANSDUCTORES DE ENERGÍA

• La síntesis de ATP, a partir de ADP y Pi, es un proceso endergónico:

ADP + Pi ⎯⎯→ ATP + H2O ∆G’o = 30.5 kJ/mol

NADH + H+ + ½O2 NAD+ + H20 FADH2 + ½O2 FAD + H20

CADENA TRANSPORTADORA DE ELECTRONES

∆G’o = -220 kJ/mol ∆G’o = - 150 kJ/mol

Energía protón motriz ΔpH y ΔΨ

FOSFORILACIÓN OXIDATIVA (ATP sintasa)

ADP + Pi ATP + H2O

∆G’o = 30.5 kJ/mol
 Membrana Interna de Mitocondria: Crestas
Mitocondriales,
sitio donde ocurre la cadena respiratoria y fosforilación
oxidativa en células eucariotas (1948)

Albert L. Lehninger
1917-1986
 Componentes de la cadena respiratoria mitocondrial
Espacio intermembranas (Lado P) pH = 7.0

Matriz (Lado N) pH = 7.8

Complejos Multienzimáticos de la cadena transportadora de electrones.

Coenzima Q
Ubiquinona
Nombre Grupos Prostéticos
Complejo I : NADH deshidrogenasa FMN , Fe-S
Complejo II : Succinato deshidrogenasa FAD , Fe-S Transportadores móviles
de electrones

Complejo III: Ubiquinona-citocromo C Hem , Fe-S

oxidoreductasa
Complejo IV : Citocromo Oxidasa Hem - Cu Citocromo C
Componentes de la cadena respiratoria mitocondrial

• Complejo Lipídico, transportador móvil de electrones.

Coenzima Q • Acepta electrones del complejo I y del complejo II y también desde intermediarios de la oxidación de
Ubiquinona los ácidos grasos como veremos mas adelante.

Transportadores móviles
de electrones

• Pequeña Proteína transportadora móvil de electrones .

Citocromo C • Transporta electrones desde el complejo III al complejo IV de la cadena transportadora de electrones.
 ESPACIO INTERMEMBRANOSO
H+
ESTADO OXIDADO ESTADO REDUCIDO
CANAL C CANAL O
COMPLEJO COMPLEJO-(H:-)

H+
MATRIZ
 RESUMEN DE REACCIONES : Reacciones de transferencia de e- se realiza a alta velocidad por estar los transportadores de e- incorporados en la
membrana interna (restringidos en sus movimientos) y asociados entre sí (uniones intermoleculares)

CoQ
NADH COMPLEJO I oxidado
oxidada

CoQH2
NAD+ COMPLEJO I reducido
reducida

NADH + CoQ (OX) + 5H+ (matriz N) → NAD+ + CoQH2(red) + 4H+ ( espacio p)

COMPLEJO I
Esta reacción da lugar a un bombeo de 4 protones ,que crea un
gradiente de pH , con ∆G° = -81 KJ/ mol.
ESPACIO INTERMEMBRANOSO

ESTADO OXIDADO H+ ESTADO REDUCIDO

CANAL O
COMPLEJO-(H:-)
CANAL C
COMPLEJO

CoQ
oxidada

CoQH2
reducida

H+
MATRIZ
 COMPLEJO III oxidado
CoQH2 Cit-C
reducida oxidado

COMPLEJO III reducido

Cit-C-H2
CoQ
reducido
oxidada
 RESUMEN DE REACCIONES : Reacciones de transferencia de e- se realiza a alta velocidad por estar los transportadores de e- incorporados en la
membrana interna (restringidos en sus movimientos) y asociados entre sí (uniones intermoleculares)

CoQH2 Cit-C
COMPLEJO III oxidado
reducida oxidado

CoQ Cit-C-H2
COMPLEJO III reducido
oxidada reducido

CoQH2 (red) + 2 cit c1(oxidado) + 2H+N →CoQ (OX) + 2 cit c1reducido + 4H+P

COMPLEJO III
Esta reacción da lugar a un bombeo de 4 protones ,que crea un
gradiente de pH.
 COMPLEJO IV oxidado
Cit-C-H2 H2O
reducido

COMPLEJO IV reducido
Cit-C O2
oxidado
 RESUMEN DE REACCIONES : Reacciones de transferencia de e- se realiza a alta velocidad por estar los transportadores de e- incorporados en la
membrana interna (restringidos en sus movimientos) y asociados entre sí (uniones intermoleculares)

Cit-C-H2 COMPLEJO IV oxidado H2O

reducido

Cit-C COMPLEJO IV reducido O2

oxidado

2cit cred + 4H+N + 1/2O2 → 2 cit cox + 4H+P + H2O

COMPLEJO IV
Esta reacción da lugar a un bombeo de 4 protones ,que crea un
gradiente de pH.
RESUMEN DE REACCIONES : Reacciones de transferencia de e- se realiza a alta velocidad por estar los transportadores de e- incorporados en la
membrana interna (restringidos en sus movimientos) y asociados entre sí (uniones intermoleculares)

COMPLEJO I NADH + CoQ (OX) + 5H+ (matriz N) → NAD+ + CoQH2(red) + 4H+ ( espacio p)
CoQH2 (red) + 2 cit c1(oxidado) + 2H+N →CoQ (OX) + 2 cit c1reducido + 4H+P
COMPLEJO III

COMPLEJO IV 2cit cred + 4H+N + 1/2O2 → 2 cit cox + 2H+P + H2O

NADH + 11 H+ (N) + 1/2 O2 ⎯⎯→ H2O + NAD+ + 10 H+ (P)

NADH + H+ + 1/2 O2 ⎯⎯→ H2O + NAD+

 Complejo I Complejo III
e- (CoQ- Cit-C oxidoreductasa
NADH deshidrogenasa
(FMN-Fe-S ) (Hemo-Fe-S –Cit-C )
(( NADH-CoQ oxidoreductasa) Bomba –canal de H+
Bomba –canal de H+

NAD+ NADH + H+

CoQ / CoQH2

CIT-C ox / CIT C red

Fumarato succinato
Complejo IV
Complejo II Citocromo oxidasa
Succinato Deshidrogenasa (Hemo-Cu )
(FAD -Fe-S-Hemo )
Bomba –canal de H+
(( Succinato--CoQ oxidoreductasa)
e-

H2O O2
• NADH + H+ + ½O2 -------> NAD+ + H20 ∆G0' = -220 KJ/mol
• FADH2 + ½O2 -------------> FAD + H20 ∆G0' = -150 KJ/mol
• NADH + H+ + ½O2 -------> NAD+ + H20 ∆G0' = -220 KJ/mol
• FADH2 + ½O2 -------------> FAD + H20 ∆G0' = -150 KJ/mol
 Visión General Cadena Respiratoria

ALTA CONCENTRACIÓN DE PROTONES: pH acido

Acumulación de cargas positivas

BAJA CONCENTRACIÓN DE PROTONES: pH básico

Acumulación de cargas negativas

Se genera entonces un gradiente electroquímico ΔpH y ΔΨ

El efecto neto de esta diferencia es la fuerza protón-motriz
Visión General; Cadena respiratoria y
Fosforilación oxidativa
Complejo I: NADH-CoQ- oxidorreductasa ( deshidrogenasa)

• La cadena respiratoria comienza con la

entrada de e- del NADH al complejo I
EL COMPLEJO I CATALIZA LA
TRANSFERENCIA DE ELECTRONES
DESDE EL NADH HASTA LA CoQ
Grupos Prostéticos Fe- S
FMN

NADH + Q + 5H+ (matriz) → NAD+ + QH2 + 4H+ ( espacio p)

Esta reacción da lugar a un bombeo de

protones ,que crea un gradiente de pH , con
∆G° = -81 KJ/ mol.
EL COMPLEJO I CATALIZA LA TRANSFERENCIA DE ELECTRONES DESDE EL NADH HASTA
LA CoQ

Primer Paso: Transferencia de electrones desde el NADH a la FMN

NADH + H+ + E—FMN NAD+ + E—FMNH2

Segundo Paso: Se reoxida la flavoproteína reducida y transfiere electrones a la

proteína de Fe-S.

E—FMNH2 + 2Fe-S oxidado E– FMN + 2Fe—S reducido + 2H+

Tercer Paso: La proteína de Fe-S reducida ,dona sus electrones a la coenzima

Q, la cual se reduce:.

2Fe—S reducido + 2H+ + CoQ 2Fe-S oxidado + CoQH2

Ubiquinona o Coenzima Q

• La reducción completa (UQH2)

requiere 2 e- y 2 H+ y se produce
en 2 pasos sucesivos
• La UQ puede aceptar 1 e-
formándose radical semiquinona
(UQH•)
• Capaz de actuar como unión
entre un dador de 2 e- y un
aceptor de 1 e-
• Debido a que es pequeña e
hidrofóbica difunde a través de la
membrana interna, actuando de
lanzadera de equivalentes de
reducción entre otros
transportadores electrónicos de la
membrana, menos móviles
Complejo I NADH deshidrogenasa

Esta reacción da lugar a

un bombeo de
protones ,que crea un
gradiente de pH , con
∆G° = -81 KJ/ mol)
 Mitocondria
• Las únicas moléculas que cruzan la membrana interna son aquellas para las que hay
proteínas transportadoras específicas. La membrana interna posee transportadores
de metabolitos esenciales (ADP, ATP, ácidos carboxílicos, Ca2+, aminoácidos, etc.)

• La membrana interna aloja a las proteínas y lípidos que componen LA CADENA

RESPIRATORIA y el complejo enzimático responsable de la síntesis de ATP (ATP asa)
 Segundo Paso: Oxidación de CoQH2 (Ubiquinona reducida)

Debido a que es pequeña e hidrofóbica difunde a través de la membrana interna, actuando de lanzadera de
equivalentes de reducción entre otros transportadores electrónicos de la membrana.

Esta reacción ocurre en el complejo III: Complejo Ubiquinona- Citocromo C – oxidoreductasa.

• El centro “core” funcional tiene tres subunidades:

1. Citocromo b: contiene 2 hemos, b562 y b566, que se
denominan bH y bL
2. proteína sulfoférrica.
3. Citocromo c1

Ecuación Neta:

CoQH2 + 2 cit c1(oxidado) + 2H+N →CoQ + 2 cit c1reducido + 4H+P

Complejo III Citocromo c reductasa
 Complejo III: Citocromo C - CoQ oxidoreductasa. Complejo
citocromo bc1.

CoQH2 + 2 cit c1ox + 2H+N →CoQ + 2 cit c1rd + 4H+P

 Tercer Paso: Oxidación del Citocromo C reducido
Ocurre en el complejo IV: Citocromo Oxidasa : Se utiliza oxigeno molecular como
ultimo aceptor de electrones .

La necesidad de O2 para esta reacción

es lo que hace “aeróbicos” a los
organismos.

Cuatro electrones son capturados por el

oxigeno para reducirlo completamente a
agua y a la vez 4 protones se bombean al
espacio P.

Se oxida al Citocromo C para volver a

usarlo en el complejo III

Ecuación Neta:
4 cit cred + 8H+N + O2 → 4 cit cox + 4H+P + 2H2O
Complejo II: Succinato –CoQ-Oxidorreductasa
(Succinato deshidrogenasa)
También cataliza
transferencia de electrones
a la CoQ.

Su fuente de electrones es
el FADH2

Posee Fe-S como grupo

prostético

Ciclo de Krebs :
Succinato + E-FAD → Fumarato + E– FADH2
Complejo II Succinato deshidrogenasa.
Succinato-coenzima Q reductasa
• Contiene también
centros sulfoférricos y
un citocromo b560 que
son los que finalmente
transfieren los
electrones desde el
FADH2 a la CoQ.
RESUMEN; La cadena respiratoria
mitocondrial, consta de una serie de
transportadores electrónicos, la mayoría
proteínas integrales de membrana, con grupos
prostéticos capaces de aceptar y donar 1 ó 2 e-

• Tipos de transferencia de e- (equivalentes de reducción) en la cadena

respiratoria:
(1) transferencia directa de e- (Fe3+/Fe2+)
(2) transferencia de un H+ (1 e-)
(3) transferencia de un hidruro (:H-) portador de 2 e-

• Por cada par de e- transferidos al O2

• 4 H+ son bombeados por el Complejo I,
• 4 H+ por el Complejo III
• 2 H+ por el complejo IV
• Todos ellos desde la matriz mitocondrial
(Lado N), hacia el espacio intermembranoso
(Lado P)
NADH + 11 H+ (N) + 1/2 O2 ⎯⎯→ H2O + NAD+ + 10 H+ (P)
3
 RESUMEN : LOS ELECTRONES SON CANALIZADOS
HACIA LOS ACEPTORES UNIVERSALES .
• La mayor parte de los e- que entran en la cadena respiratoria
proviene de la acción de deshidrogenasas que capturan e-
provenientes de reacciones catabólicas, canalizándolos en forma
de pares de e- hacia aceptores universales
• Aceptores universales de e-: NAD, NADP, FMN ó FAD
• Las deshidrogenasas ligadas a nucleótidos de piridina, catalizan:

Sustrato reducido + NAD+  Sustrato oxidado + NADH + H+

Sustrato reducido + NADP+  Sustrato oxidado + NADPH + H+

Las deshidrogenasas ligadas al NAD eliminan dos átomos de

hidrógeno de sus sustratos (:H- y H+)
 Los electrones son canalizados hacia
aceptores universales de electrones

• El NAD+ puede colectar equivalentes de reducción a partir del NADPH.

Esta reacción es catalizada por las enzimas transhidrogenasas:
NADPH + NAD+  NADP+ + NADH

• El NADH y el NADPH son transportadores electrónicos

hidrosolubles, asociados reversiblemente con deshidrogenasas

• El NADH actúa como transportador de difusión, llevando e- que

provienen de reacciones catabólicas a su punto de entrada en la
cadena respiratoria, el complejo NADH deshidrogenasa (Complejo I)

• La flavoproteínas contienen nucleótidos de flavina (FAD o FMN)

fuertemente unido, a veces covalentemente. El nucleótido oxidado
puede aceptar un e- (dando la forma semiquinona) o dos e- dando
FADH2 o FMNH2
 La transferencia de electrones es un
proceso exergónico
• En la cadena de transporte de e-, pasan 2 e- desde el NADH al O2
NADH + H+ + 1/2 O2 ⎯⎯→ H2O + NAD+

• La reacción neta es altamente exergónica

Teniendo en cuenta NAD+/NADH E’o = -0.320 V
O2/H2O E’o = + 0.816 V
 E’o = 1.14 V
El cambio de energía libre:
∆G’o = - n F ∆E
∆G’o = - 2 x 96500 x 1.14 V = - 220 kJ/mol NADH (c/2e-)

• En mitocondrias respirando activamente, la relación NADH/NAD es mayor

que 1, y el ∆G’o es mucho mayor (más negativo) que -220 kJ/mol

• Para el succinato ∆G’o = - 150 kJ/mol

• En las condiciones celulares, la oxidación mitocondrial del NADH

o del succinato libera una energía superior a la necesaria para la
síntesis de ATP
Translocación de H+ asociada al flujo de electrones

Espacio intermembranas (Lado P) pH = 7.0

pH = 7.8
Matriz (Lado N)

• Por cada par de e- transferidos al O2, 4 H+ son bombeados por el

Complejo I, 4 H+ por el Complejo III y 2 H+ por el complejo IV; todos
ellos desde la matriz mitocondrial (Lado N), hacia el espacio
intermembranas (Lado P)

NADH + 11 H+ (N) + 1/2 O2 ⎯⎯→ H2O + NAD+ + 10 H+ (P)

• Existe una translocación de H+ desde la matriz hacia el EIM (fuerza
protomotriz)
 FOSFORILACION OXIDATIVA :

NH2

O O N
N
- -
O P O P O
- - CH2 N
O O O N

ADP
OH OH

NH2

O O O N
N
- - -
O P O P O P O
- - - CH2 N
O O O O N
H2O
Enlaces Anhidro Fosfato
( Fosfoanhídro) ATP
OH OH

ADP + Pi→ ATP +H2O ΔG° = +31KJ/mol

 FOSFORILACION OXIDATIVA :

The Nobel Prize in Chemistry 1978

"for his contribution to the understanding of biological
energy transfer through the formulation of the
chemiosmotic theory"

La teoría quimiosmótica mitocondrial

(P. Mitchell, 1961)
Peter Mitchell
1920-1992

“ El transporte de electrones se acopla con la síntesis de ATP ,mediante un

gradiente de protones ( H+) a través de la membrana interna mitocondrial”
NADH + H+ + ½O2 NAD+ + H20 FADH2 + ½O2 FAD + H20

CADENA TRANSPORTADORA DE ELECTRONES

∆G’o = -220 kJ/mol ∆G’o = - 150 kJ/mol

Energía protón motriz ΔpH y ΔΨ

FOSFORILACIÓN OXIDATIVA (ATP sintasa)

ADP + Pi ATP + H2O

∆G’o = 30.5 kJ/mol
 ATP sintasa
(ATPasa ,Complejo V, F1Fo)
MATRIZ

• Sub. c (de F0) F1 : una proteína

forman 2 círculos
concéntricos periférica de
• La subunidad  pasa
a través del centro
membrana (33)
esférico 3 3
• Sub.  y  (de F1) se
unen firmemente al
anillo de sub. c.

F0 :una proteína integral

(ab2c10-12)
Espacio
Intermembranoso
 MATRIZ
F1

H+ ESTADO REDUCIDO
CANAL O
COMPLEJO-(H:-)

ADP + Pi ⎯⎯→ ATP + H2O

H+

ESPACIO INTERMEMBRANOSO ΔpH y ΔΨ

 The Nobel Prize in Chemistry 1997
"for their elucidation of the enzymatic mechanism
underlying the synthesis of adenosine triphosphate
(ATP)"
El gradiente electroquímico de protones a través de la membrana interna mitocondrial
(fuerza proto-motriz) es crucial para los procesos de transducción de energía y
síntesis de ATP

• Las translocación de H+ a través de F0

John Walker Paul Boyer
provoca que el cilindro C y la subunidad 
adjunta, roten alrededor del eje de g
(perpendicular al plano de la membrana)

• El pasaje de H+ a través de F0 llevan a Matriz F1

cambios conformacionales de la
subunidad  de la F1-ATPasa

•El proceso endergónico de rotación de la

sub.  es impulsado por el proceso
exergónico de la translocación de H+ del
lado P al N EIM F0
 ATP SINTASA F0 :una proteína integral
Rotor molecular
(ab2c10-14)

H+
H+

Espacio Intermembranoso

H+
H+

Subunidad a MATRIZ

H+
 El movimiento de protones impulsa la roracion de la
Espacio Intermembranoso
subunidad C, que hace girar la subunidad Sub.  -  (de
F1) lo que induce a cambios conformacionales de las
subunidad beta .

+ +

+ +

aa
+ aa
MATRIZ
 F1 : una proteína periférica de
membrana (33)

ADP
T
Cada subunidad  cambia de
conformación
L
Pi
O
L :Relajada Unión de ADP + Pi ATP
T: Tensa Síntesis de ATP
O: Abierta Liberación de ATP
PASO 1 : UNION DE ADP y Pi ( conformación L)
PASO 2 : SINTESIS DE ATP ( conformación T)
PASO 3. LIBERACIÓN DE ATP ( conformación O)

SI UNA SUBUNIDAD  ADQUIERE UNA CONFORMACIÓN , LAS OTRAS SE

ENCUENTARN EN CONFORMACIONES ALTERNAS.

SUBUNIDAD 1 : L→T→O→L→T→O→ etc.

SUBUNIDAD 2 : O→L→T→O→L→T→ etc.

SUBUNIDAD 3 : T→O→L→T→O→L→ etc.

La interconversión entre las distintas formas de las

subunidades B esta dada por la rotación de la subunidad
Gama (γ) que gira 120° en el sentido contrario del reloj a
medida que pasan los protones por el canal
La interconversión entre las distintas formas de las
subunidades B esta dada por la rotación de la subunidad
Gama (γ) que gira 120° en el sentido contrario del reloj a
medida que pasan los protones por el canal.

CADA 360° DE LA subunidad Gama (γ) : teóricamente se

sintetizan 3 ATP.
 120°

SE ESTIMA QUE POR CADA ATP GENERADO SE NECESITA

APROXIMADAMENTE EL TRANSPORTE DE 4 PROTONES
NADH + 11 H+ (N) + 1/2 O2 ⎯⎯→ H2O + NAD+ + 10 H+ (P)

En la actualidad

1 NADH 2,5 ATP

1 FADH2 1,5 ATP

ADP + Pi→ ATP +H2O ΔG° = +31KJ/mol

 1 NADH = 2,5 ATP
Síntesis de ATP 1 FADH2 = 1,5 ATP

• La síntesis de ATP, a partir de ADP y Pi, es un proceso endergónico:

ADP + Pi ⎯⎯→ ATP + H2O ∆G’o = 30.5 kJ/mol

• En condiciones fisiológicas, en eritrocitos

[ATP] = 2.25 mM
[ADP] = 0.25 mM y [Pi] = 1.65 mM
A 25 oC, pH = 7.0 ∆G’ = 51.8 kJ/mol

• NADH + H+ + ½O2 -------> NAD+ + H20 ∆G0' = -220 kJ/mol

• FADH2 + ½O2 -------------> FAD + H20 ∆G0' = -150 kJ/mol

La cadena de transporte
1 NADH = 60%rendimiento de e- libera energía más
1 FADH2 = 52 % rendimiento ¿Y el resto de energía? que suficiente para
sintetizar ATP
 COMPLEJO
ATP-ADP
SINTATOSOMA

Transporte
DESACOPLAMIENTO REGULADO ;GENERACION DE CALOR

Desacoplamiento de la cadena transportadora de la

síntesis de ATP

GRASA PARDA: Tejido adiposo adaptado para producir

calor , rico en mitocondrias y altamente irrigado

La membrana interna contiene una gran cantidad de la

PROTEINA DESACOPLANTE ( UCP-1) o TERMOGENINA.

Esta proteína es una vía alternativa para que los protones

vuelvan a la matriz y por lo tanto hace un “ cortocircuito”
de la pila protónica de la mitocondria, la energía del flujo
de electrones se libera como calor y no como ATP.
Esta vía se activa cuando baja la temperatura.
 Regulación de la Fosforilación Oxidativa
Sólo la concentración de ADP se relaciona con la regulación de la cadena
transportadora de electrones y la fosforilación oxidativa: SE CONOCE COMO
CONTROL RESPIRATORIO o CONTROL POR MEDIO DE ACEPTOR

Adición
de ADP
Los electrones no se
Consumo de Oxígeno

mueven desde los

combustibles hacia
Agotamiento
el oxígeno molecular
de ADP a menos que se
necesite producir
Tiempo ATP
 Partamos por el ciclo de Krebs

Acetil-CoA

2CO2
3NADH + 3H+
Ciclo del
Acido Cítrico 1 GTP
1 FADH2

Cadena Traducción de energía Nucleótidos energéticos Total

respiratoria
1 NADH 2,5 ATP 3 x 2,5 = 7,5
y
fosforilación 1 FADH2 1,5 ATP 1 x 1,5 = 1,5
10
oxidativa
1 GTP
 DESCARBOXILACION OXIDATIVA DEL PIRUVATO

NADH + H+ Acetil-CoA CO2

Ciclo del
Acido Cítrico

Cadena 10 ATP Total : 12,5 ATP

respiratoria
a partir de
y 2,5 ATP 1 piruvato
fosforilación
oxidativa
 Si terminamos en la glucosa

1 GLUCOSA GLUCOLISIS 2 PIRUVATO

2 NADH citosol

x 12,5
PRODUCCIÓN NETA 2 ATP

27 ATP 25 ATP

Me tengo que ir a la cadena transportadora

 NADH citosol

II

FADH2 mitocondria

Lanzadera glicerol-3-fosfato ( MUY ABUNDANTE EN MÚSCULOS):los electrones

son transferidos a glicerol-3-P, que los transfiere posteriormente al FAD
 LANZADERA DIHIDROXICETONA FOSFATO/ GLICEROL-3-P

M
CITOSOL MEMBRANA
E
M INTERNA DE
B MITOCONDRIA
R Cadena
A Transportadora
2,5 ATP N
1,5 ATP
A
E
X
T FADH2
E
R
N
A Dihidroxiacetona
Dihidroxiacetona
NADH + H+ fosfato D fosfato
E Glicerol –3-
M fosfato
I deshidrogenasa
T
O
NAD+ Glicerol -3-P
C
Glicerol –3-P
O
N
D
R
I
A
FAD
 ATP sintasa
Gran complejo enzimático, que cataliza la síntesis de ATP a partir de ADP y Pi,
acompañado del flujo de H+ desde el lado P al N

F1 : una proteína periférica de

Matriz F1
membrana (33)

Está formado por

dos componentes:

F0 :una proteína integral (poro de

H+) (ab2c10-12)

EIM F0
-ADP  -ATP  -vacío
Alta afinidad Baja afinidad
por ATP por ATP
+ +
 Propósito transferencia de electrones.

La transferencia de electrones en la cadena respiratoria

bombea protones hacia la cámara externa de la mitocondria, de esta
forma se crea un potencial electroquímico de fuerza protón -
motriz suficiente para movilizar los H+ a la cámara interna y producir la

1 .
F1-ATPsintasa
síntesis del ATP= El
enacoplamiento
el complejonoFesFo
químico,
sino electroquímico y físico
 Mecanismo síntesis ATP.
Tres subunidad B (entre cada una
Cada F1 presenta existe una subunidad alfa asociada.

T
γ

subunidad B
L :Relajada Unión de ADP + Pi
T: Tensa Síntesis de ATP
O
O: Abierta Liberación de ATP
 La interconversión entre las distintas
formas de las subunidades B esta
dada por la rotación de la subunidad
Gama (γ) que gira 120° en el sentido
contrario del reloj a medida que pasan
los protones por el canal

L T

T O
γ γ

O L
ATPasa: Helloquitiada
 α
α
L T γ
γ

γ
BALANCE ENERGÉTICO DESDE LA GLUCOLISIS A LA
FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

¿ cuánta energía obtenemos de la glucosa?

Masa Molar Glucosa 180,16g/mol

 ATP → ADP + Pi
ΔG° = -31KJ/mol
Por ejemplo para un requerimiento de
1Kcal = 4,184 KJ

ΔG° = -7,4Kcal/mol 1000 Kcal/día 2000 Kcal/día

1 kcal

0,135 mol de ATP 135 mol de ATP/día 270 mol de ATP/día

86,53 g de ATP 68469 g de ATP 136938 g de ATP

Masa Molar ATP:
507,18g/mol

70,2 mol Factor de 130 g diarios de hidratos de

520 Kcal Atwater carbono para niños y
de adultos
4 Kcal/g
ATP/día
 Balance Energético de la Oxidación Completa de la Glucosa
LO QUE NO ESTA BIEN

180 g de glucosa = 1 mol

Nunca fue 36 ATP Sólo son 30 ATP

2000 kcal/día 270 mol de ATP/día

1620 g de Glucosa/día

Esto sólo lo creería un digno miembro de la

alta sociedad de la farándula criolla

Valor máximo de 55 % del total de la energía ingerida

Masa Molar Glucosa 180,16g/mol

1 GLUCOSA GLUCOLISIS 2 PIRUVATO

PRODUCCIÓN NETA

2 NADH y 2 ATP

DESCARBOXILACION OXIDATIVA DEL PIRUVATO

NADH + H+ Acetil-CoA CO2

2 x Ciclo del
Acido Cítrico

3NADH + 3H+ 1 FADH2 1 GTP 2CO2

2 ATP + 2 GTP + 2 NADH citosol + 8 NADH matriz + 2 FADH2

 2 ATP + 2 GTP + 2 NADH citosol + 8 NADH matriz + 2 FADH2

Cadena transportadora de electrones y fosforilación oxidativa

En el pasado En la actualidad

1 NADH 3 ATP 2,5 ATP

1 FADH2 2 ATP 1,5 ATP

En el pasado En la actualidad

8 NADH 24 ATP 20 ATP

2 FADH2 4 ATP 3 ATP

En el pasado : 32 ATP + 2 NADH citosol

Actualmente: 27 ATP + + 2 NADH citosol
Inhibidores y aceptores de electrones
artificiales
• Inhibidores:
• 1. Rotenona: producto vegetal, que se usa
como insecticida.
• 2. Amital: barbitúrico
• 3. Antimicina A : antibiotico de streptomyces
• 4. Cianuro, azida, monoxido de carbono.
NADH FMN FE-S CoQ Cit-b

Metosulfato de fenazina.
Azul de metileno.
FE-S
2,6-diclorofenol-indofenol

Cit-c1

Cit-c

Tetrametil-p-fenilendiamida.

Cit-a3 Cit-a
Ferricianuro
oxígeno
Inhibidores de la ATP Sintasa

Oligomicina
Diciclohexil carbodiimida ( DCCP)

DESACOPLADORES:
2,6-diclorofenol-indofenol
2,4- DINITROFENOL
 PROCESOS TRANSDUCTORES DE ENERGÍA

CADENA TRANSPORTADORA DE ELECTRONES

• Básicamente consiste en re-oxidar NADH y FADH2 : pasando

los e- a una cadena de transporte electrónico hasta el O2. La
energía que se disipa en el transporte es aprovechada para
sintetizar ATP.
• NADH + H+ + ½O2 -------> NAD+ + H20 ∆G0' = -220 KJ/mol
• FADH2 + ½O2 -------------> FAD + H20 ∆G0' = -150 KJ/mol

• relación NADH/NAD ∆G’o = -220 kJ/mol

• Relación FADH2/ FAD+ ∆G’o = - 150 kJ/mol

La cadena de transporte de e- libera energía más que suficiente

para sintetizar ATP ( FOSFORILACIÓN OXIDATIVA)
 PROCESOS TRANSDUCTORES DE ENERGÍA
FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
• La fosforilación oxidativa se refiere a la síntesis química de ATP
impulsada por el proceso exergónico de transferencia de
electrones desde el NADH o del FADH2 al O2

• La mayor parte del ATP sintetizado por los organismos aeróbicos

es consecuencia de la fosforilación oxidativa acoplada a la cadena
transportadora de electrones.

• La síntesis de ATP, a partir de ADP y Pi, es un proceso endergónico:

ADP + Pi ⎯⎯→ ATP + H2O ∆G’o = 30.5 kJ/mol

 La teoría quimiosmótica mitocondrial
(P. Mitchell, 1961)

H+ H+ H+ pH = 7.0
Espacio O2
intermembrana (P)

Membrana
mitocondrial FP b c a a3 ATPasa
interna

Matriz
mitocondrial (N)
ADP + Pi ATP
pH = 7.8

H+

La fuerza proto-motriz, lleva a la síntesis de ATP, como

consecuencia del flujo pasivo de H+ hacia la matriz mitocondrial, a
través de un poro de H+ (F0) asociado a la ATP sintasa (Complejo V)

ADP + Pi + nH+ (p) ⎯⎯→ ATP + H2O + nH+ (N)

 Fosforilación oxidativa
Síntesis de ATP acoplada al flujo de electrones

• Cuando se suspenden mitocondrias en una solución

amortiguadora, que contiene un sustrato oxidable, ADP y
Pi, ocurren 3 procesos:
(1) se oxida el sustrato
(2) se consume O2 (hay respiración)
(3) se sintetiza ATP

• Si el dador de e- es el NADH, las mitocondrias sintetizan 3

ATP por cada par de e- pasados al O2

• Si el dador es succinato, se sintetizan 2 ATP

• El consumo de O2 y la síntesis de ATP son dependientes
de la presencia de un sustrato oxidable y de ADP y Pi
 Regulación del consumo de O2 mitocondrial
Efecto del ADP

• El ADP aumenta el consumo de O2

• Control respiratorio

Consumo de O2 en presencia de ADP (Est. 3)

Consumo de O2 en ausencia de ADP (Est. 4)

El control respiratorio, usualmente de 4 a 10,

es el índice mas sensible para juzgar la
integridad y el acoplamiento mitocondrial y,
por lo tanto, la calidad de las mitocondrias
aisladas.
Postulados de la teoría quimiosmótica mitocondrial
(P. Mitchell, 1961)

• El transporte de e- a través de la cadena respiratoria está asociado al

transporte de H+ desde la matriz hacia el espacio intermembranas
• La membrana interna es impermeable a los H+
• Se conserva la energía de oxidación de los procesos metabólicos en
forma de potencial electroquímico, ya que se genera un gradiente
electroquímico de H+
• La cadena respiratoria está acoplada a la síntesis de ATP
• El flujo de H+ a favor de su gradiente electroquímico proporciona la
energía libre para la síntesis de ATP. Las concentraciones de H+ en
las 2 fases acuosas (EIM y M) separadas por la membrana interna,
constituyen la fuerza responsable (fuerza proto-motriz) de la formación
de ATP a partir de ADP y de Pi, por acción de la F1-ATPasa de la
membrana mitocondrial
 Cadena respiratoria mitocondrial ó cadena de
transporte de electrones

• Transportadores universales de electrones

- Nucleótidos de piridina (NAD y NADP)
- Nucleótidos de flavina (FMN y FAD)

• Otros grupos transportadores de electrones

- Ubiquinona ó Coenzima Q (benzoquinona) -
Citocromos -
proteínas
Proteínas ferro-sulfuradas
 Cadena respiratoria mitocondrial ó
cadena de transporte de electrones

• Una serie de moléculas con grupos prostéticos redox con potenciales de

reducción estándar crecientes desde el
NADH (-320 mV) al O2 (+ 816 mV)

• Transporte de e- mitocondrial: reacción global

NADH  Fp(FMN)  UQ  cit bKbT  cit c,c1  cit aa3  O2

 Mecanismo de la transducción de energía en los
animales

• Todos los seres vivos son máquinas electroquímicas

• La energía química (G) de los sustratos (alimentos) que se oxidan

genera un gradiente electroquímico de H+ a través de la membrana
interna mitocondrial

• El gradiente electroquímico de H+ (G) se utiliza para la producción

de ATP (la F1-ATPasa es un rotor molecular)

• La energía química del ATP (G) se utiliza para que puedan ocurrir
las reacciones endergónicas
 REACCIONES DE ACOPLAMIENTO
• Reacciones suficientemente exergónicas como para impulsar la síntesis del A

• 1. Los desacopladores químicos como el 2,4 dinitrofenol (DNP), carbonilcianuro

fenilhidrazina, impiden la síntesis de ATP acoplada a la respiración. Transportan
protones hacia la matriz ,sin pasar por Fo.
Los ionóforos, desacoplan la fosforilación oxidativa.
Se fijan a iones inorgánicos, rodeándolos.

Los complejos ionóforo- ión metálico difunden, a

través de las membranas. Ej: la valinomicina se
une al K+ y atraviesa las membranas de la
mitocondria.

La entrada de iones neutraliza las cargas (-) en

la matriz, disminuyendo la fuerza electromotriz del
bombeo de H.
VOLVER
NAD+ y NADH
FADH2
GTP

VOLVER
Metabolitos
 FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

Bibliografía
• Valdez & Boveris. (2006) Fosforilación oxidativa y Teoría Quimiosmótica.
En “Temas de Fisicoquímica-Material Complementario”. Pp 113
• Lehninger, Nelson, Cox. (1998-2a edición) Fosforilación oxidativa y
Fotofosforilación. En “Principios en Bioquímica”. Pp 542
• Lehninger, Cox. (2002-3a edición) Oxidative phosphorilation and
Photophosphorilation. En “Principles of Biochemistry”. Pp 659
• http://nobelprize.org/nobel_prizes/chemistry/laureates
 Otros grupos transportadores de electrones
Citocromos

b a

• Son proteínas que contienen el grupo

prostético hemo: 4 anillos penta-atómicos
nitrogenados en una estructura cíclica llamada
porfirina. Los 4 N están coordinados con un
Fe2+ (cit reducido) o Fe3+ (cit oxidado)
• Hemo de cit c está unido covalentemente a su
proteína, a diferencia de hemos de cit a y b
• El cit c mitocondrial es una proteína soluble
c (excepción), asociada a MI por interacciones
electrostáticas
 Agrupaciones Hierro – Azufre
(ferroproteinas sin grupo hemo) grupo
prostéticos
 Grupo hemo
• Anillo de Porfirina
• Hierro
• Nitrógeno
 Otros grupos transportadores de electrones
Proteínas ferro-sulfuradas

• En las proteínas ferro-sulfuradas, el hierro está presente no en forma de hemo,

sino en asociación con átomos de azufre inorgánico o con azufre de residuos
Cys de la proteína, o con los dos simultáneamente
• Centros (Fe-S): estructuras sencillas a complejas
• Participan en reacciones de transferencia de 1 e- en la que se oxida o reduce
uno de los átomos de Fe
• Al menos, 8 proteínas Fe-S intervienen en la cadena e transporte de e-
• Potenciales de reducción: -0.65V a + 0.45 V
 Potenciales de reducción estándar de los transportadores de la cadena
respiratoria mitocondrial

E’o (mV)

NADH - 320
FMNH - 290
Fe-S (Complejo I) - 270
FADH - 10
Fe-S (Complejo II) 20
Ubiquinol (UQH2) 50
Citocromo bk 77
Citocromo bT 190
Citocromo c (+c1) 230
Citocromo a+a3 380
Oxigeno 816

Los e- fluyen espontáneamente desde los transportadores de E’o más

bajo hacia los transportadores con E’o más elevado.
En la tabla, los de más arriba reducen a los de mas abajo
Fuerza proto-motriz
Gradiente electroquímico de H+
 Potencial electroquímico para el H+

Aplicando el concepto de potencial electroquímico de

Guggenheim (1924)

~
mH+(2) = mH+° + RT ln aH+(2) + z F (2) (2) EIM

~
mH+(1) = mH+° + RT ln aH+(1) + z F (1) (1) Matriz

~
DmH+(2-1) = RT ln (aH+(2)/ aH+(1) ) + z F (2-1)

~
m(2-1) = RT ln (C2/C1) + z F (2-1)
 Potencial electroquímico para el H+
~
m(2-1) = RT ln (C2/C1) + z F (2-1)
A 25 oC
ln (C2/C1) = 2.3 (log [H+] 2 - log [H+] 1)
= 2.3 (pH1 - pH2) = 2.3 pH
En mitocondrias
respirando
~ * pH = 0.75-0.8
m(2-1) = 2.3 RT pH + F (2-1)  = 0.15-0.2 V

~
m(2-1) = 5.7 kJ/mol pH + (96.5 kJ/V mol) (2-1)
~
m(2-1) = 5.7 kJ/mol (0.8) + (96.5 kJ/V mol) (0.15 V)
~
m(2-1) = 20
kJ/mol
 Potencial electroquímico para el H+

~
m(2-1) = 20
kJ/mol
Para 10 H+ que translocan a través de la membrana

NADH + 11 H+ (N) + 1/2 O2 ⎯⎯→ H2O + NAD+ + 10 H+ (P)

• Aproximadamente, 200 kJ/mol de los 220 kJ liberados por la

oxidación de 1 mol de NADH son conservados en el
gradiente electroquímico de H+ (fuerza proto-motriz)

• Cuando los H+ vuelvan espontáneamente a través de su

gradiente electroquímico, hacia la matriz mitocondrial, la
energía estará disponible para realizar trabajo
 Potencial electroquímico para el H+

~
m(2-1) = 2.3 RT pH + F (2-1) *

Considerando ~
p = m/F

p = 2.3 RT/F pH +  (2-1) 2.3 RT/F = 59 mV

p =  + 59 pH

• En mitocondrias en estado de reposo (estado 4) (pH M = 7.8; pHEIM = 7.0):

p =  + 59 pH = 170 mV + 50 mV = 220 mV

• La fuerza proto-motriz (p), expresa en mV (220-230 mV) el potencial

electroquímico del H+ que es utilizado en la síntesis endergónica de
ATP a partir de ADP y Pi