UNIVERSIDAD FRANZ TAMAYO

CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA

Determinación de
concentración de Ácido
Úrico en sangre
ESTUDIANTE:
 WARA ORELLANA MEDRANO

DOCENTE: DR. NELSON PUITA SANDOVAL

ASIGNATURA: BIOQUIMICA CLINICA I
FECHA: 4/04/23
QUINTO SEMESTRE

COCHABAMBA – BOLIVIA
 REGLAMENTO GENERAL DEL LABORATORIO

En cuanto a Bioseguridad
 Uso de Gorro
 Uso de barbijo
 Uso de pijama
 Uso de Bata
 Uso de guantes
 Uso de zapato cerrados
 Cabello Recogido
 Uñas Cortadas
 Prohibido el uso de artes y anillos
 Nada de ingerir alimentos o bebidas dentro de la práctica
 Lavarse las Manos antes y después de cada procedimiento

En cuanto a Responsabilidades
 Puntualidad
 Participación
 Compañerismo
 Entrega de trabajos hasta la hora día programada
 Venir con todo el material necesario para cada práctica
 Prohibido el uso de celulares
 Limpiar el área de trabajo antes de retirarse
 Lavar y guardar todo el material utilizado
 Guardar todos los equipos y reactivo utilizados
 INDICE

1. INTRODUCCION
2. FUDAMENTO
3. OBJETIVOS
4. MATERIALES E INSUMOS
5. MARCO TEORICO
6. PROCEDIMIENTO
7. CARACTERISTICAS DE LA PRUEBA
8. DATOS
9. CONCLUSIONES
10. BIBLIOGRAFIA
 DETERMINACION DE ACIDO URICO EN
SANGRE

1. INTRODUCCION
El ácido úrico es un metabolito de las purinas, ácidos nucleicos y nucleoproteínas.
Habitualmente la concentración de ácido úrico en suero varia de un individuo a otro
de acuerdo a diversos factores tales como: sexo, dieta, origen étnico, constitución
genética, embarazo.
Niveles anormales de ácido úrico en suero son índice de desorden en el metabolismo
de las sustancias que lo originan o de inadecuada eliminación.
Cuando se produce un aumento de la concentración de ácido úrico en sangre se
puede padecer hiperuricemia o «gota». Esta afección se caracteriza por un
incremento de la concentración de ácido úrico en sangre (mayor de 7 mg/dl en
varones y mujeres posmenopáusicas; 6 mg/dl en mujeres premenopáusicas y 4 mg/dl
en niños) que el organismo no es capaz de eliminar por orina (mediante la filtración
en los riñones), y esto hace que se acumule en forma de unas sales insolubles que
son los uratos, en ciertas articulaciones. Esta afección de las articulaciones puede
acabar produciendo una artritis crónica. Además, el aumento de la concentración de
ácido úrico en sangre puede ocasionar cálculos renales en el riñón y producir
nefropatía gotosa.

2. FUNDAMENTO

La determinación del ácido úrico se realizar por reacción con la uricasa.

El peróxido de hidrogeno formado reacciona por la acción catalítica de la
peroxidasa con ácido 3,5 – dicloro – 2 – hidroxibenzenesulfónico (DCHBS) y 4 –
aminofenazona (PAP) para producir un complejo rojo – violeta de quinoneimina
como indicador
URICASA

Acido Urico+ O2+ H2O Alantoina + CO2 + H2O2

 PEROXIDASA

2H2O2 + DHBS + 4 Aminoantipirina Antipirilquinonimina + 4

H2O

3. OBJETIVOS

GENERAL:
 Realiza un perfil renal en muestras de diferentes pacientes para la correcta
evaluación de la función renal
ESPECIFICOS:
 Conocer el método empleado y los pasos a seguir para la
determinación de ácido úrico
 Determinar los cálculos correspondientes para encontrar factor y
concentración de la muestra
 Usar el equipo (starfax) de manera correcta y con la programación
correspondiente
 Conocer las distintas definiciones, concentraciones y materiales
usados en la practica

4. Materiales e insumos
Para preservar el bienestar del analista usar las barreras de protección adecuadas como
ser:

Bioseguridad:
Bata
Pijama
Cofia
Guantes
Barbijo
Barrera protectora
Cobertores de zapatos

MATERIALES Y EQUIPOS PRACTICA:

Micropipetas 20 ul y 1000 ul
Tips Graduados
Tubos de ensayo delgados
 Marcador para vidrio
Reloj de tres tiempos
Reactivo de Acido Urico
Suero
Espectrofotómetro

5.- MARCO TEORICO

ACIDO URICO:

El ácido úrico es un químico que se crea cuando el cuerpo descompone sustancias

llamadas purinas. Las purinas se producen normalmente en el cuerpo y también se
encuentran en algunos alimentos y bebidas.
Los alimentos con un alto contenido de purina incluyen el hígado, las anchoas,
la caballa, las judías (frijoles) y arvejas (chícharos) secas y la cerveza.
La mayor parte del ácido úrico se disuelve en la sangre y viaja a los riñones. Desde ahí
sale a través de la orina. Si su cuerpo produce demasiado ácido úrico o no lo elimina en
cantidades suficientes, usted se puede enfermar.
Los niveles altos de ácido úrico en la sangre se denominan hiperuricemia.
Este examen se hace para ver cuánto ácido úrico tiene usted en la sangre. Se puede
utilizar otro examen para verificar el nivel de ácido úrico en la orina

METABOLISMO DE PURINAS
Esta sustancia es expulsada del cuerpo por medio de la orina y es producida Gracias al
metabolismo del DNA (purinas).
Quienes participan en este proceso son la Adenosina monofosfato, inosina monofosfato,
xantosina monofosfato y guanosina monofosfato; estas se desfosforilan, y luego se les
quita la ribosa y quedanla hipoxantina, xantina y guanina, para que después estas son
oxigenadas y se logra obtener el ácido úrico .
Este tiene diferentes rutas, pero siempre se va a obtener ácido úrico:

CAUSAS DE AUMENTO Y DEFICIENCIAS DEL ACIDO URICO

El ácido úrico corresponde a una sustancia química que se produce en el cuerpo como
resultado de la descomposición de las purinas, cuyos niveles deben mantenerse entre 2,4
y 5,7 en el caso de las mujeres, y entre 3,4 y 7,0 en el caso de los hombres,
para evitar que nuestra salud se vea comprometida

HIPERURICEMIA:
Hiperuricemia o ácido úrico alto puede generarse como consecuencia de factores como:
 La obesidad
• El exceso de bebidas alcohólicas.
• Una dieta alta en purinas, lo que se debe al exceso de carnes rojas y embutidos,
legumbres, pescados, maricos y alimentos con fructosa añadida.
• Los problemas renales que afectan la expulsión del ácido úrico.
• La administración de ciertos medicamentos que aumentan los niveles de esta
sustancia.
En cuanto a las enfermedades que se le atribuyen, la hiperuricemia puede estar
vinculada patologías como:
 Enfermedad de gota, producida por la deposición del exceso
de ácido úrico en las
 articulaciones, lo que produce un dolor parecido al de una quemadura.
 Cálculos en los riñones.
 Nefrolitiasis
 Nefropatía crónica o aguda

HIPOURICEMIA
Un nivel de ácido úrico bajo, también conocido como hipouricemia, puede ser el
resultado de algunos factores como:
 Patologías subyacentes como el síndrome de Fanconi y la enfermedad de
Wilson.
 La diabetes.
 Una alimentación deficiente en proteínas animales, como el pollo, la
carne y los pescados azules.
 El exceso de bebidas alcohólicas.
 La administración de medicamentos como la cortisona, los salicilatos y
los estrógenos.
Como ya hemos dicho, la hipouricemia se relaciona con enfermedades como el
síndrome de Fanconi y la enfermedad de Wilson, al igual que con la diabetes y algunas
patologías que afectan el normal funcionamiento de los riñones

PURINAS
La purina es una base nitrogenada, un compuesto orgánico heterocíclico aromático. La
estructura de la purina está compuesta por dos anillos fusionados, uno de seis átomos y
el otro de cinco. En total estos anillos presentan cuatro nitrógenos, tres de estos son
básicos, ya que tienen el par de electrones sin compartir en orbitales sp2 en el plano del
anillo, el nitrógeno restante no tiene carácter básico ya que el par de electrones no
compartidos que posee, es parte del sistema de electrones π del sistema aromático, por lo
cual se encuentran deslocalizados e incapaces de captar un protón.
Cuando las purinas son metabolizadas en el interior de las células se produce ácido úrico.
Este ácido úrico se puede cristalizar en las articulaciones, por diferentes motivos,
produciendo gota o en los riñones o vías urinarias produciendo así litiasis úrica. Si en
cambio se degradan en el intestino delgado por medio de enzimas pancreáticas se
hidrolizan en nucleósidos y bases libres.
GOTA
La gota es una enfermedad producida por el depósito de cristales microscópicos de
ácido úrico en las articulaciones, provocando su inflamación dolorosa.

A veces, estos cristales forman acúmulos que se pueden palpar -tofos-, o se depositan en
los riñones, provocando cólicos nefríticos o alteraciones en su función.

La gota es causada por tener un nivel de ácido úrico superior a lo normal en el cuerpo.
Esto puede ocurrir si:

 El cuerpo produce demasiado ácido úrico

 El cuerpo tiene dificultad para deshacerse del ácido úrico

Cuando se acumula demasiado ácido úrico en el líquido alrededor de las articulaciones

(líquido sinovial), se forman cristales de ácido úrico. Estos cristales hacen que la
articulación se inflame, causando dolor, hinchazón y elevación de la temperatura en el
área.

6. PROCEDIMIENTO
RESUMEN
Atemperar reactivos
Depositar 1000 ul de reactivo
Ingresar a la prueba de Ácido Úrico
Leer blanco
Leer estándar
Adicionar 20 ul de muestra en el reactivo
Mezclar y leer la concentración después de 5min de la reacción a 37 °C

PROCEDIMIENTO CLASE

1. Debemos rotular los tubos como blanco, estándar y muestra dependiendo

la cantidad de muestras que hagamos
2. Del reactivo usamos 1000 ul o 1ml y ponemos a todos los tubos
3. Llevamos a 2 min a baño María a atemperar
4. Al tubo rotulado como estándar le añadimos 20 ul de estándar
5. Se mezcla en el vortex y se lleva a baño María por 5 minutos a 37C se
limpia el tubo y se lee
6. Primero leemos el blanco anotamos datos
7. Luego procedemos a leer el estándar y anotar datos
8. A cada muestra le añadimos 20ul del control ´patológico, lo llevamos al
vortex y baño María por 5 minutos
 9. Limpiamos, leemos y anotamos los datos

PROGRAMACION STARFAX (COLORIMETRICO ENZIMATICO

ESTANDAR)

1. Pulsamos 2 - Patron
2. Pulsamos 3 enter - Fija filtro
3. Pulsamos 0 -No se coloca filtro diferencial
4. Pulsamos 8 enter – Concentracion patron
5. Pulsamos 4- Codigo
6. Pulsamos 1 enter
7. Pulsmaos 1 – Poner rango si
8. Normal bajo – 2.4
9. Alto – 7.0 enter
10. Linealidad baja – 0
11. Linealidad alta - 20
 7. CARACTERITICAS DE LA PRUEBA

Linealidad: El ensayo es lineal hasta 20 mg/ dl de ácido úrico en suero o plasma

Valores de referencia para el kit de ácido úrico

Suero mg/dl
Hombres 3,4 -7,0 mg/dl
Mujeres 2,4 – 5,7 mg/dl

8. CALCULOS

F = [ ] ST [ ]nx = Abs nx * F [ ]nx = Abs nx * [ ] ST

Abs ST Abs ST

F = 8,0 109,6
O,073

[ ]nx = 0,036* 109,6 3.95

[ ]nx = 0,036 * 8,0 3.95 Podemos observar que

0,73 cumple con los datos
del factor ST y de la
muestra para hallar
factor y concentración

9. CONCLUSIONES
Pudimos realizar la práctica de manera eficiente realizando distintas muestras
simulando pacientes para poder evaluar su correcta función renal mediante la
determinación de ácido úrico en sangre mediante el método colorimétrico
enzimático estándar además de realizar el método correcto y cálculos
correspondientes para poder sacar factor y concentración estándar con la cual
usaremos los datos para poder completar el perfil , pudimos manejar el starfax
de manera correcta realizando la programación completa para poder verificar las
muestras y pudimos entender el funcionamiento de esta prueba y su utilidad
clínica en nuestra carrera.
 Y también es importante resaltar la utilidad de la práctica ya que la prueba
de ácido úrico en sangre se puede usar para: Ayudar a diagnosticar gota,
usualmente cuando se hace junto a un análisis del líquido sinovial. Vigilar los
niveles de ácido úrico en personas que están recibiendo quimioterapia u otro
tratamiento contra el cáncer.

10. BIBLIOGRAFIA

Chu, S.Y. Can J. Med., Techol. 40/5: 154 (1978).

Day, J.H., La Prensa Médica Argentina, Vol. 58 No. 15:786 (1971).
Donadon, V., Barbieri, E. Menin., A, Canterin, A, LAB Vol,III No.
4:473(1976).
Internacional Federation of Clinical Chemistrry, Clin. Chim., Acta, 87/3:
459 F (1978)