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4-Expresión Génica. Transcripción y Traducción

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TP N°5.

Expresión génica
29 de marzo de 2022
Dogma central de la biología
UTR: secuencias no traducidas
En procariotas

En eucariotas

Upstream (corriente Downstream


arriba )-1 (corriente abajo)
+1
TRANSCRIPCIÓN
ARN polimerasa en procariotas

ARN mensajero
3-5% del ARN celular
(vida corta)
Señales en el ADN
Los promotores o secuencias consenso son secuencias cortas del ADN, que son
reconocidas por el factor sigma de la ARN polimerasa para unirse y dar inicio a la
transcripción.
ELONGACIÓN
La ARN-polimerasa, se desplaza por la hebra patrón (molde o no-codificante),
insertando nucleótidos de ARN, siguiendo la complementariedad de bases
ADN cadena molde: 3‘…..TACGCTA...5‘
ADN cadena codificante: 5´….ATGCGAT..3,
ARNm: 5‘….AUGCGAU ...3'
Cadena codificante

Cadena molde

El ARNm se sintetiza en dirección 5´---3´ complementando las bases del ADN de la


hebra molde hasta encontrar secuencias de finalización. La cadena codificante o sin
sentid0 NO se Transcribe.

Sin embargo la información necesaria para la síntesis de la proteína se encuentra


en la CADENA CODIFICANTE, pero necesita utilizar la cadena molde para
polimerizar los nucleótidos por complementariedad de bases.
Terminación de la transcripción
Secuencias ricas en CG que se complementan consigo mismas formando la horquilla de terminación que es
seguida de un tramo de poli U (corresponden a residuos de A en el ADN). La ARN polimerasa se desprende y
el ARNm primario se separa de la cadena de ADN.
Señales de iniciación de la traducción
(en procariotas)

Secuencia se une a la subunidad


pequeña del ribosoma.
En Procariotas la transcripción y traducción
son simultáneas

Polirribosomas o polisomas
Problema 5.7
El siguiente esquema representa una porción de la microscopía electrónica obtenida por Miller, mostrando la simultaneidad
de los procesos de transcripción y traducción en Escherichia coli:
a) Identificá qué representan 1, 2, 3 y 4
b) Identificá los extremos 5’ y 3’ de la cadena molde del ADN y del ARNm.
c) Agregá al esquema los polipéptidos en el proceso de síntesis indicando los tamaños relativos y los extremos N y C
terminales del péptido más largo.
d) Indicá con una flecha la dirección de movimiento de la ARN polimerasa
e) ¿Qué diferencias presentará este diagrama en sistemas eucariotas?
1 2

4
Problema 5.7

2- ARN polimerasa
1- ADN Dirección de la transcripción

3´ 5´
3´ 3´ aa NH3
COOH aa
se transcribe último polipéptido aa
(más joven) aa polipéptido
Polisoma o
polirribosoma
3 -Ribosomas 5´

4-ARNm Este extremo


se transcribe Este extremo se
primero transcribe primero
5´ (el más viejo)
En Eucariotas la transcripción y
traducción no son simultáneas
Procesamiento del ARN
Gen de la ovoalbúmina
Si la especie humana tiene entre 20,000 y 30,000 genes ¿cómo se
explica que hay más de 100,000 proteínas?

Un mismo gen puede dar lugar a más de una proteína, con diferentes funciones en la célula (isoformas)

CORTE Y EMPALME O “SPLICING” ALTERNATIVO


Similares genomas
Similar número de genes
Similar disposición de intrones y exones…

¿Entonces qué nos diferencia de los ratones?

Edición diferencial
TRADUCCIÓN

• Ribosomas

• Constituidos por ARNr y proteínas


• El ARNr representa un 80-85% del ARN celular
total
Cada molécula de ARNt transporta a un
aa específico hasta los ribosomas.
10% ARN celular.
ARN tranferencia (ARNt)
Código genético

1. Escrito de manera lineal


Segunda posición 2. Específico o no ambiguo: cada codón
especifica un único aminoácido.

3. Degenerado o redundante: un aminoácido


puede ser especificado por más de un codón.

4. Contiene una señal de «inicio» y tres de «fin»,


(tripletes que inician y terminan la traducción,
respectivamente)
5. Los codones se leen por orden y sin ninguna
interrupción (hasta el stop).

6. El código es no solapado.

7. El código es casi universal (salvo pequeñas


excepciones).
• Según el grupo radical (R)

• No polares (hidrofóbicos)
• Polares (hidrofílicos)
• Polares cargados positivamente
• Polares cargados negativamente
La peptidil transferasa es una ribozima (ARN con actividad
catalítica) encargada de formar el enlace peptídico entre dos
aminoácidos
Marcos de lectura
Marcos de lectura abiertos (ORF, open reading frame)

Es cualquier región del ADN que está entre un codón de inicio (AUG) y un codón de stop (TAA, TAG o TGA) a no menos
de 50 codones. Un ORF puede codificar una proteína o no. Cuando codifica una proteína se trata de una secuencia
codificante (CS, coding sequence).
En procariotas, las anotaciones
y comparaciones son más
fáciles por la ausencia de
intrones
Alelos Alelo “wild-type” o silvestre

Alelos múltiples
Mutaciones puntuales
Mutaciones con cambio del
marco de lectura
Resolución de problemas

• Problema 5.1
• Las ADN polimerasas son capaces de editar y
corregir errores, pero las ARN polimerasas
parecen no tener esta capacidad. Considerando
que un error en la incorporación de una base
puede producir el mismo error en la cadena
polipeptídica codificada ya sea si se cometió en
el ADN o en el ARN, ¿por qué existe esta
diferencia tan grande en la capacidad de corregir
errores entre la ADN polimerasa y la ARN
polimerasa?
Problema 5.9
Una planta diploide posee un gen, cuyo alelo A codifica una enzima que cataliza la síntesis de alizarina, un pigmento
rojo que se deposita en los pétalos de las flores (Fig. 5.1). Sin embargo, existen formas mutantes de esta enzima,
codificadas en el alelo a, de modo tal que no son funcionales.
a) ¿Cómo serían los flores de una planta homocigota AA (que lleva dos copias del alelo que codifica la enzima normal)
comparada con una planta Aa (que lleva una copia del alelo que codifica la enzima normal y una del alelo que codifica
la enzima mutante inactiva)?
b) Revisá la respuesta que diste en (a) teniendo en cuenta la actividad enzimática: ¿qué pasaría si en la planta Aa la
actividad total fuera la mitad de la que hay en la planta que posee los dos alelos normales? ¿Y si tuviera 2/3 de la
actividad?
c) ¿Qué ocurriría si en ciertas zonas del tejido de la flor se expresara uno de los alelos y en otra zona se expresara el
otro?

Fig. 5.1 Fórmula desarrollada de la


alizarina.
ENZIMA
ADN NORMAL que
ARN
(alelo A) cataliza síntesis de
alizarina

ENZIMA
ADN
ARN MUTANTE (no
(alelo a)
funcional)

Los ALELOS de un mismo gen tiene distintos


grados de DOMINANCIA

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