Práctica N6 Química Orgánica
Práctica N6 Química Orgánica
Práctica N6 Química Orgánica
PRÁCTICA DE LABORATORIO
INFORME DE PRÁCTICA
PRÁCTICA N°: 6
TÍTULO: Cromatografía
INTEGRANTES:
HORARIO DE PRÁCTICA
LIMA, PERÚ
2023
1. Introducción
La cromatografía es una técnica analítica que desempeña un papel fundamental en una amplia gama
utilizado para separar y analizar los componentes de una mezcla, permitiendo la identificación y
cuantificación precisa de sustancias químicas en una muestra. Esta técnica se basa en la capacidad de
diferentes compuestos para interactuar de manera única con un material estacionario y un solvente
móvil, lo que da como resultado una separación en función de sus propiedades físicas y químicas. En
2. Objetivos
3. Marco Teórico
Cromatografía de adsorción:
La cromatografía de adsorción se basa en la adsorción de los componentes de una muestra en una fase
estacionaria sólida, como sílice gel o alúmina. Los componentes se separan en función de su afinidad
por la fase estacionaria y su interacción con la fase móvil. Las moléculas con mayor afinidad por la
fase estacionaria se desplazan más lentamente a través de la columna cromatográfica, lo que permite
Cromatografía de reparto:
distribución de los componentes entre dos fases líquidas inmiscibles: la fase estacionaria y la fase
móvil. Los componentes se separan en función de su coeficiente de partición entre estas dos fases.
Figura 1
Cromatografía en columna
La cromatografía en columna es una técnica cromatográfica clásica en la que una columna empacada
con una fase estacionaria sólida se utiliza para separar los componentes de una muestra. Los
componentes se separan en función de sus interacciones con la fase estacionaria y la fase móvil a
Figura 2
Procedimiento:
a. Cromatografía en papel
Sobre una cinta de papel Whatman® N°1 de 3x10 cm se realizan las siguientes operaciones:
a) Marque una tenue línea recta con lápiz a 1.5 cm de un extremo de la tira del papel de filtro.
b) Doble la tira longitudinalmente, de modo que quede dividida en 2 mitades. En cada mitad,
cualquiera de los colorantes en solución. Espere que cada gota seque antes de sembrar la
siguiente.
d) Espere que el solvente de siembra se evapore (puede ayudarse con corrientes de aire).
Luego, introduzca la tira en un tubo de ensayo de 2x15 cm, en cuyo interior se ha colocado el
por completo.
e) Cuando la fase móvil haya ascendido unos 8 cm, retire el papel, marque el frente del
solvente con lápiz y déjelo secar. f) Observe, compare las dos muestras sembradas y calcule el
Rf de cada sustancia.
a) Cerciórese de que la cromatoplaca (el portaobjeto con la sílica-gel) esté seca. Entonces, use
un lápiz para realizar una línea horizontal a 1 cm del borde inferior. Esta será la "línea de
partida". Marque dos puntos equidistantes de los bordes y del centro que se encuentren en
b) Utilice capilares para realizar el sembrado de las muestras. En uno de los puntos siembre
siembre uno de los colorantes. Luego, deje secar por un tiempo prudencial.
● Cromatografía en papel
Discusión
No, en la cromatografía de papel se utiliza papel filtro como fase estacionaria y en la cromatografía
de capa fina se utiliza una placa de sílica-gel.
¿Cuál de sus compuestos tiene mayor afinidad por la fase fija o estacionaria? ¿Cómo se
determina esto?
La afinidad de los compuestos por la fase fija o estacionaria en cromatografía depende de sus
propiedades químicas y físicas, así como de la interacción específica entre los compuestos y la fase
estacionaria utilizada en una técnica de cromatografía particular. En general, los compuestos que
tienen una mayor afinidad por la fase estacionaria tienden a moverse más lentamente a través del
sistema cromatográfico y, por lo tanto, tienen tiempos de retención más largos. Los compuestos
con menor afinidad se mueven más rápidamente y tienen tiempos de retención más cortos.
En este experimento, la sustancia B (azul de metileno) tiene más afinidad por la fase estacionaria.
6. Conclusión
En este informe, hemos realizado el proceso de cromatografía que nos permite ejecutar la separación,
una mezcla compleja. Es necesario resaltar que este método es el más efectivo y seguro en las técnicas
separativas, basadas en propiedades físicas de los materiales. Dentro de este proceso, se obtienen 2
fases cromatográficas las cuales son la fase móvil y la fase estacionaria. La fase móvil fluye a través
de una fase estacionaria, arrastrando a los compuestos de la mezcla. Por otro lado, la fase estacionaria
retiene los componentes de la muestra en la que fluye la fase móvil. Es importante mencionar que el
que constituyen las mezclas, por lo que es de utilidad para hallar Rf de cada componente y determinar
Ahuja, S., & Dong, M. W. (2006). Handbook of Pharmaceutical Analysis by HPLC (Vol. 156).
Academic Press.
Christian, G. D., & Dasgupta, P. K. (2001). Analytical Chemistry. John Wiley & Sons.
Skoog, D. A., West, D. M., Holler, F. J., & Crouch, S. R. (2013). Fundamentals of Analytical
2. ¿Cuáles son las diferencias entre la cromatografía de capa fina (TLC) y la de papel?
● Cromatografía de Capa Fina (TLC): En TLC, se utiliza una placa de vidrio o plástico
recubierta con una capa delgada de fase estacionaria, generalmente sílice gel o alúmina. Esta
fase estacionaria. El papel es más poroso y menos compacto en comparación con la capa fina
Detección y cuantificación:
● TLC: TLC permite una fácil detección visual de los compuestos separados, ya que las
ya que a veces se requiere una reacción química para revelar las manchas de los compuestos.
mediante la aplicación de reveladores químicos específicos que reaccionan con ciertos grupos
aplicación de la ninhidrina puede hacer que aparezca como una mancha coloreada.
resolución (HPLC) o cromatografía en capa fina (TLC), algunas sustancias incoloras pueden
fluorescer cuando se iluminan con luz ultravioleta (UV). Esto significa que emitirán luz
visible a una longitud de onda diferente de la luz incidente. Puede utilizar una lámpara de UV
4. ¿Cómo se determina
● Elección de la fase estacionaria: Decida qué tipo de fase estacionaria (columna, papel
cromatográfico, etc.) Se utilizará en función de las propiedades de la muestra. Las
fases estacionarias polares son adecuadas para compuestos polares, mientras que las
fases estacionarias no polares son mejores para compuestos no polares.
especialidades.
● Petróleo y Gas: En la industria del petróleo y el gas, se utiliza para analizar muestras
de petróleo crudo, gas natural y productos derivados para determinar la composición
y la calidad de los productos.
muestra problema y nota que su valor de Rf es de 0.1. ¿Está de acuerdo con que el
apropiadamente.
● El valor de Rf de 0.1 puede determinar que el compuesto tiene una retención alta en
8. Indague y explique con detalle cuáles métodos utilizaría para localizar las bandas de
● Detección UV: La mayoría de las sustancias orgánicas absorben luz ultravioleta a ciertas
longitudes de onda. Por ello, se puede utilizar un detector UV para localizar las bandas de
agregar un reactivo químico en la fase móvil para localizar las bandas de adsorción en la
columna.
es una técnica que mide la masa molecular de los iones que se generan a partir de los
sustancias incoloras.
● Tinción: Se pueden utilizar tintes específicos para visualizar las bandas de adsorción en
la columna. Por ejemplo, se puede agregar una solución de yodo en la fase móvil para
localizar las bandas de adsorción. El yodo se une a los compuestos orgánicos y forma un
Análisis de Mezclas Complejas: Puede aplicarse para analizar mezclas complejas, como
columna se utiliza para purificar proteínas y ácidos nucleicos a partir de extractos celulares o
de cultivos.
10. Realice un resumen breve acerca de la cromatografía líquida de alto desempeño o High
caracteriza por el uso de una fase móvil (solvente) bombeada a través de una columna con
una fase estacionaria. La HPLC destaca por su alta eficiencia, velocidad y capacidad de
separación debido al uso de columnas más pequeñas y partículas más finas, así como a la
molecular.
En resumen, la HPLC ofrece resultados precisos y reproducibles, destacándose por su