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Brucelosis Bovina (Salud Publica)

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1

FINOR UA
GRM
FACULTAD INTEGRAL DEL NORTE
MEDICINA VETERINARIA Y
ZOOTECNIA

TRABAJO DE EXPOSICIÓN
“BRUCELOSIS”

INTEGRANTES:
Fernando Aguilar Carreño
Carmen Rebollo Marquez
María Elena Castro Mamani

MATERIA:
Salud publica veterinaria

DOCENTE:
Dr. Ygor Milko Veizaga Terrazas

MONTERO – SC - BOLIVIA
2

ÍNDICE:
INTRODUCCIÓN............................................................................................................................. 4
OBJETIVOS:..................................................................................................................................... 5
▪ OBJETIVO GENERAL: ...................................................................................................... 5
▪ OBJETIVOS ESPECIFICOS: ............................................................................................. 5
HISTORIA. ........................................................................................................................................ 6
DEFINICIÓN. ................................................................................................................................... 6
SINONIMIA. ..................................................................................................................................... 7
AGENTE ETIOLÓGICO................................................................................................................. 7
RESERVORIO. ................................................................................................................................. 7
PUERTA DE SALIDA. ..................................................................................................................... 8
PUERTA DE ENTRADA AL HOSPEDERO................................................................................. 8
PERIODO DE INCUBACIÓN. ....................................................................................................... 8
PERIODO DE TRANMISIBILIDAD. ............................................................................................ 9
MODO DE TRANSMISIÓN. ........................................................................................................... 9
FACTORES DE RIESGO PARA QUE HAYA UNA TRANSMISIÓN DE BRUCELOSIS: .. 10
PRESENTACIÓN DE LA ENFERMEDAD EN EL ANIMAL. ................................................. 11
PRESENTACIÓN DE LA ENFERMEDAD EN EL HOMBRE. ............................................... 11
TRIADA EPIDEMIOLOGIA ........................................................................................................ 12
CADENA EPIDEMIOLOGICA. ................................................................................................... 13
ESPECTRO DE LA ENFERMEDAD........................................................................................... 13
DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA................................................................................................. 14
REALIDAD NACIONAL ............................................................................................................... 15
DISTRIBUCIÓN DE LA BRUCELOSIS BOVINA EN BOLIVIA ........................................... 15
REPORTE EPIDEMIOLÓGICO ............................................................................................. 15
EN LA ACTUALIDAD ............................................................................................................... 16
CASOS DE BRUCELOSIS HUMANA EN BOLIVIA ................................................................ 17
RESULTADOS Y DISCUCIÓN ................................................................................................ 17
¿QUÉ HACEMOS SI UN CASO POSITIVO DE BRUCELOSIS APARECE EN NUESTRO
HATO? ............................................................................................................................................. 19
DIAGNOSTICO .............................................................................................................................. 20
1. PRUEBA DE AGLUTINACION DEL ANTIGENO BUFFERADA EN PLACA ........ 20
2. PRUEBA DE ELISA. .......................................................................................................... 21
3

3. ELISA INDIRECTA. .......................................................................................................... 21


4. ELISA SANDWICH ........................................................................................................... 23
TRATAMIENTO ............................................................................................................................ 24
▪ TRAMATIENTOS EN LAS PERSONAS: ....................................................................... 24
▪ TRATAMIENTO EN LOS ANIMALES: ......................................................................... 24
PREVENCIÓN. ............................................................................................................................... 24
VACUNACIÓN. .......................................................................................................................... 25
ESTRATEGIAS DE COMBATE .............................................................................................. 26
PROGRAMAS DE CONTROL. .................................................................................................... 28
▪ RECURSOS HUMANOS ................................................................................................... 29
▪ RECURSOS ECONOMICOS ............................................................................................ 29
BIBLIOGRAFIA: ........................................................................................................................... 30
4

INTRODUCCIÓN.
En 1968 la Organización Mundial de la Salud afirmó que la brucelosis era responsable de
más enfermedades, miserias y pérdidas económicas que cualquier otra enfermedad animal
conocida que afecte a los humanos. Esta enfermedad ejemplifica la falta de interacción de
los sectores de salud pública y veterinaria, haciendo de esta infección una de las zoonosis
más frecuentes en el mundo, con especial importancia en los países mediterráneos de
Europa y África, el Oriente Medio, América Central y América del Sur, Asía Central, la
India y México.

La brucelosis es una enfermedad infectocontagiosa producida por la bacteria Brucella sp,


que afecta a varias especies de mamíferos, incluido el hombre, aunque su principal blanco
son los ganados bovino, equino, porcino, ovino y caprino, así como otras especies silvestres
de relevancia económica. Es considerada una enfermedad ocupacional de personas que
trabajan con animales infectados o sus tejidos, es decir, particularmente granjeros,
veterinarios y trabajadores de mataderos.
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OBJETIVOS:
▪ OBJETIVO GENERAL:
o Concientizar a todos los colegas, estudiantes veterinarios y trabajadores,
sobre el cuidado y precaución que deben tener contra la Brucelosis bovina
en los hatos lecheros.

▪ OBJETIVOS ESPECIFICOS:
o Estudiar el comportamiento epidemiológico de la brucelosis bovina.
o Identificar las fuentes de infección de la Brucella abortus en los hatos
lecheros.
o Aplicar las medidas de control y prevención contra la Brucelosis en nuestro
medio.
6

BRUCELOSIS

HISTORIA.
Históricamente, en la Isla de Malta y en casi todos los países del mediterráneo; en la India,
China e Inglaterra; existía una enfermedad febril que atacaba al hombre y especialmente al
ganado caprino, y que por mucho tiempo se confundió con la fiebre tifoidea, paludismo y
otros síndromes febriles. Fue hasta que David Bruce en 1887, estudió la enfermedad en
humanos, conocida como fiebre de Malta, del Mediterráneo o fiebre ondulante,
descubriendo en los bazos de los sujetos muertos un microorganismo, que lo llamó
Micrococcus melitensis; enfermedad característica de las cabras y transmisible al hombre.

Bang en 1897 aisló un microorganismo responsable del aborto contagioso en el ganado


bovino, afección que se llama enfermedad de Bang, y lo llamó Bacillus abortus. Hutyra en
1909, aisló una bacteria existente en fetos abortados de marranas muy relacionados con el
Bacillus de Bang y el de la fiebre ondulante.

En Inglaterra el año 1565, se conoció una forma de aborto contagioso en bovinos; Marston
en 1861, contrajo una enfermedad febril prevaleciente en la zona del Mediterráneo y la
descripción de su propio padecimiento, hace suponer casi con certeza, que estaba sufriendo
de brucelosis, enfermedad muy común hasta esos tiempos en la Isla de Malta. La Brucella
melitensis, que afecta a las cabras y ovejas fue aislada por primera vez por Bruce, en 1887;
la B. abortus, fue aislada por Bang y Stribolt en 1887, de la placenta de una vaca que había
abortado, afección llamada en la actualidad enfermedad de Bang; en 1914 Traum aisló B.
suis, de fetos abortados por cerdas; Evans en 1918 señala la semejanza morfológica entre
B. melitensis, B. abortus, B. suis, B. neotomae, B. ovis y B. canis.

DEFINICIÓN.
La brucelosis es una enfermedad zoonotica causada por bacterias del Genero Brucella.

Es una infección que se transmite de los animales a las personas, en su mayoría por el
consumo de lácteos no pasteurizados.

La brucelosis bovina es una enfermedad causada por la bacteria Brucella abortus, que
provoca abortos en el ganado bovino, con pérdida económicas considerables.
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SINONIMIA.
- Enfermedad de Bang (en bovinos).

- Fiebre Ondulante.

- Fiebre de Malta.

- Fiebre Melitense o Melitococia.

- Fiebre del Mediterráneo (en el hombre).

- Aborto Contagioso, Aborto Infeccioso, Aborto Epizoótico (en animales).

AGENTE ETIOLÓGICO.

RESERVORIO.
La brucelosis es una zoonosis, es decir que el reservorio de esta bacteria son los animales
principalmente como bovinos, ovinos, caprinos, porcinos y caninos.

La infección entre ellos es muy contagiosa.

- Brucella abortus, su reservorio son los bovinos


- Brucella melitensis, su reservorio son los ovinos y caprinos
- Brucella suis, su reservorio son los porcinos
- Brucella canis, su reservorio son los caninos
8

PUERTA DE SALIDA.
Los microorganismos de la brucelosis son liberados del reservorio a través de diferentes
vías:

- Vía gastrointestinal, a través de las heces.


- Vía renal, a través de la orina.
- Vía reproductiva:
o En la hembra a través de la expulsión del feto, la placenta y los fluidos
vaginales.
o En el macho a través del semen.
- Vía glándula mamaria, a través de la leche.
- Vía conjuntival.

PUERTA DE ENTRADA AL HOSPEDERO.


Las brucelas pueden ingresar al organismo sano por diferentes vías:

- Vía oral, a través de la ingesta de alimentos, agua y leche que este contaminada.
- Vía respiratoria, a través de la inhalación del microorganismo que se encuentra en el
ambiente.
- Vía reproductiva, mediante la copula.
- Vía percutánea, a través de la manipulación de fetos, placenta y otros.

PERIODO DE INCUBACIÓN.
El periodo de incubación en general dura de 1 a 3 semanas, pero a veces puede prolongarse
por varios meses.

En infecciones naturales es difícil de medir el periodo de incubación (desde la infección, el


aborto o el nacimiento prematuro), porque no se puede determinar el momento de la
infección. Por experimentación se ha comprobado que el periodo de incubación es
sumamente variable inversamente proporcional al desarrollo del feto, dependiendo de la vía
de transmisión, edad, susceptibilidad del animal, especie de la bacteria, estado de gestación
y cantidad de bacterias que se ingiere. Cuando más adelantada esta la preñez, más corto
será el periodo de incubación.
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Si la hembra se infecta por vía oral en la época del servicio, el tiempo de incubación puede
prolongarse unos 200 dias, mientras que, si se expone 6 meses después de la monta, el
periodo de incubación será aproximadamente 2 meses.

El periodo de incubación serológica (desde la infección hasta la aparición de anticuerpos)


dura varias semanas a varios meses.

PERIODO DE TRANMISIBILIDAD.
Después de que la vaca infectada aborta o pare normalmente, el agente patógeno no
permanece por mucho tiempo solo en el útero, sino que también suele acomodarse en los
ganglios y glándulas mamarias de las vacas, en este caso la infección se vuelve crónica.

Las brúcelas pueden permanecer en las ubres durante años.

En si los animales infectados pueden eliminar Brucella spp. durante toda la vida, es decir,
que pueden transmitir la enfermedad así mismo durante toda la vida y son el reservorio y la
principal fuente de contagio para el ser humano.

MODO DE TRANSMISIÓN.
Las vías de transmisión pueden resumirse en:

- Contacto: de piel o mucosas con tejidos de animales infectados o sus productos


como ganglios, sangre, orina, semen, secreciones vaginales, fetos abortados y en
especial placentas. Este mecanismo es el más frecuente en el medio rural y puede
llegar a ser el responsable del 60%-70% de todos los casos registrados. Afecta a
trabajadores rurales, veterinarios, matarifes y ganaderos, aunque también puede
afectar a trabajadores de laboratorio o de servicios de salud.
- Ingestión: de alimentos no pasteurizados de origen animal, como leche y sus
derivados (quesos, crema, manteca, helados) y en menor medida carnes poco
cocidas (la carga bacteriana en el tejido muscular animal es baja).
- Inhalación: de polvo en los lugares contaminados donde hay animales infectados,
como establos, mataderos, salas de recepción de leche, camiones jaula para
transporte de ganado, etc.
- Inoculación: de material infectado-contaminado por Brucella spp. Este tipo de
transmisión afecta fundamentalmente a veterinarios, matarifes y personal de
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laboratorio. También se ha descripto la enfermedad por auto inoculación accidental


de vacuna de Brucella abortus cepa 19 y B. melitensis Rev.1, de uso en medicina
veterinaria.
- Perinatal: por vía transplacentaria, por la ingestión de leche materna o por la
exposición a sangre, orina o las heces de la madre infectada durante el parto.
- La transmisión interhumana es excepcional, aunque se ha informado posterior a
una transfusión de sangre, trasplante de médula ósea y se han descrito casos
ocasionales en los que se sospecha transmisión sexual.

FACTORES DE RIESGO PARA QUE HAYA UNA TRANSMISIÓN DE


BRUCELOSIS:
- Ocupación: veterinarios, granjeros o cuidadores en contacto con animales
principalmente domésticos, personas que manipulan productos y subproductos
animales como carniceros, ordeñadores y personas dedicadas a la manufactura de
lácteos; personal de laboratorio en contacto con muestras clínicas.
- Alimentación: ingestión de leche no pasteurizada o derivados lácteos realizados de
forma “artesanal” con leche no pasteurizada proveniente de animales infectados.
- Convivencia con animales: contacto directo con productos de desecho, tejidos o
excretas de animales enfermos o portadores asintomáticos o con animales de
establo.
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PRESENTACIÓN DE LA ENFERMEDAD EN EL ANIMAL.


La brucelosis bovina existe en todo el mundo, sin embargo, ya se ha logrado erradicar en
algunos países como Alemania, Australia, Dinamarca, Hungría, noruega entre otros.

En las hembras se manifiesta de la siguiente manera:

- El síntoma principal en todas las hembras es el aborto o la expulsión prematura o a


término de terneros muertos o débiles.
- A consecuencia retención de placenta.
- Metritis (que puede causar la infertilidad permanentemente).

En los machos se puede observar:

- Inflamación de los testículos.


- Inflamación del epidídimo.
- Inflamación de la vesícula seminal.
- Disminución de la fertilidad y libido.

Las brucelas penetran el organismo animal y se multiplican primero en los ganglios


regionales y luego son conducidas por la linfa y la sangre a diferentes órganos.

Unas dos semanas después de una infección, se puede comprobar bacteriemia y es posible
aislar el agente de la corriente sanguínea.

Las localizaciones más frecuentes se hallan en los ganglios linfáticos, útero, ubre, órganos
genitales del toro, bazo e hígado.

En la placenta de la vaca se ha podido encontrar la presencia de una gran cantidad de


eritrol, un hidrato de carbono que estimula la multiplicación de las brucelas, lo que
explicaría la gran susceptibilidad de los tejidos fetales del bovino.

PRESENTACIÓN DE LA ENFERMEDAD EN EL HOMBRE.


Lo más frecuente es la aparición de síntomas generales, entre los que predomina la fiebre.

Alrededor del 30% de los pacientes presentan síntomas respiratorios dominados por la tos y
hasta un 20% tienen síntomas digestivos.
12

A la exploración física, más de la mitad de los pacientes presentan un aumento del tamaño
del hígado (hepatomegalia), muchas veces acompañado de un aumento del bazo
(esplenomegalia) y hasta una cuarta parte de los pacientes presentan adenopatías palpables.
Las lesiones cutáneas son raras.

Las manifestaciones localizadas aparecen por afectación específica de un determinado


órgano o tejido. La localización osteoarticular es la más frecuente. Aparece en
aproximadamente un tercio de los pacientes y se manifiesta principalmente con sacroiletis
y/o espondilitis de predominio lumbar.

La localización neurológica (principalmente meningitis con mayor o menor grado de


encefalitis), cardiovascular (endocarditis y pericarditis) representan las formas más graves
de la enfermedad.

Los síntomas más habituales son:

- Fiebre.
- Tos.
- Estreñimiento.
- Hepatomegalia.
- Esplenomegalia

TRIADA EPIDEMIOLOGIA.

AGENTE:
GENERO: BRUCELLA
ESPECIE: ABORTUS

AMBIENTE:
HUESPED:
ALIMENTOS Y AGUA
CONTAMINADA BOVINOS
13

CADENA EPIDEMIOLOGICA.
Dentro de esta cadena epidemiológica de la brucelosis bovina encontramos principalmente
como agente etiológico al Brucella Abortus, donde los reservorios principales vendrían ser
el bovino y el hombre ya que el género Brucella son considerados zoonoticas, como puerta
de salida serian la vía, Gastrointestinal vía respiratoria, vía reproductiva, el modo de
transmisión seria el consumo de alimento contaminado, por medio de la respiración y
contacto del tejido vivo o muerto del animal infectado, la puerta de entrada son la vía oral,
vía respiratoria y la percutánea. Y como huéspedes susceptibles tenemos al bovino y al
hombre.

ESPECTRO DE LA ENFERMEDAD
En el inaparente tenemos el 35% ya que esta enfermedad tiene un periodo de tiempo
variable, puede ser que los signos se manifiesten en un periodo rápido de15 dias y un
periodo lento de 200 dias. En la parte de aparente, es decir, los signos visibles, en la parte
moderada tenemos un 40% ya que aquí se puede presenciar un poco la merma de leche,
concepción demorada y en los toros se puede notar la baja calidad del semen e inclusive
provocando una infertilidad. Ya después tenemos el estado gravo donde aquí los signos
serían principalmente los abortos o nacimientos de neonatos muy débiles, encontramos
14

retención de placenta, también una metritis. Y como final tenemos en la parte de fatal un
0% ya que esta enfermedad no provoca la muerte.

INAPARENTE APARENTE
MODERADA GRAVE FATAL
35% 40% 25% 0%

DISTRIBUCIÓN GEOGRÁFICA.
Mundial. La distribución de las diferentes especies de Brucella y sus biovares presenta
variaciones geográficas. B. abortus es la más ampliamente difundida; B. melitensis y B.
suis tienen una distribución irregular; B. neotomae se aisló de ratas del desierto (Neotoma
lepida), en Utah, Estados Unidos de América, y su distribución se limita a los focos
naturales, sin haberse comprobado la infección en el hombre o en animales domésticos. La
infección por B. canis se ha comprobado en muchos países de varios continentes, y puede
afirmarse que su distribución es mundial. B. ovis parece estar distribuida en todos los
países donde la cría de ovinos es importante.
15

REALIDAD NACIONAL
Históricamente la presencia de la Brucelosis bovina en el Territorio Boliviano causa
problemas económicos a los productores, afectando la producción y productividad de la
ganadería de carne y leche y desde el punto de vista de la salud pública es una enfermedad
zonótica de gran importancia (SENASAG, 2016). No existe información escrita que
permita fijar la época de aparición de la brucelosis en Bolivia. Se supone que esta
enfermedad fue introducida entre 1936 y 1939 con la importación de ganado de carne y
leche de la República Argentina. Otros dicen que entró al país con ganado de procedencia
brasileña. El primer diagnóstico serológico del que se tiene referencia fue realizado en el
año 1945 por el Dr. Vladimir Ribera (LIDIVET, 2003). Muchos trabajos se han
desarrollado para evaluar la prevalencia e incidencia de brucelosis bovina a nivel nacional,
cuyo mapeo epidemiológico realizado por Gonzáles (2004), de acuerdo a trabajos de tesis
de grado ejecutados en la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la UAGRM.
(Apaza, 2019)

DISTRIBUCIÓN DE LA BRUCELOSIS BOVINA EN BOLIVIA

Fuente: (Apaza, 2019)

REPORTE EPIDEMIOLÓGICO
Sistema Nacional de Vigilancia Epidemiológica Del 04 al 10 de septiembre de 2022

Atención de enfermedades de notificación obligatoria


16

Las zonas donde se realizó la atención de enfermedades de Notificación obligatoria, se


localizan en los departamentos de Santa Cruz, Beni y La Paz, al cual se le hizo seguimiento
sanitario respectivo por el veterinario oficial del Servicio. (F u e n t e: U N A L A B - V E T
L A B - LABORATORIO CNMGB-BN-SISTEMA GRAN PAITITI)

EN LA ACTUALIDAD
SENASAG INICIA CICLO DE VACUNACIÓN CONTRA LA BRUCELOSIS
BOVINA EN TODO EL DEPARTAMENTO DEL BENI

En el predio ganadero denominado La Loma de Ovando distante a 4 kilómetros de la


ciudad de Trinidad sobre la carreta a Puerto Almacén, El Servicio Nacional de Sanidad
Agropecuaria e Inocuidad Alimentaria (SENASAG) a través del Programa Nacional de
Brucelosis Bovina y Pequeños Rumiantes dio inicio al Ciclo de Vacunación Contra la
Brucelosis Bovina de la gestión 2022, en todo el departamento del Beni.

En la ocasión Omar Zabaleta, director departamental del SENASAG en el Beni, dio a


conocer que la vacunación bajo Resolución Administrativa 205/2022, inicio hoy 14 de
octubre de la presente gestión y concluye el 31 marzo del 2023, donde se tiene previsto
inmunizar 175.000 terneras y 1.353 bufalino, comprendidos entre los 03 a 8 meses de edad.
17

“La inmunización que beneficiará a 8.794 productores del Beni, se realizará a través de
brigadas autorizadas y fiscalizada por el SENASAG” Afirmo.

La autoridad Sanitaria a tiempo de oficializar el Ciclo de Vacunación realizo la entrega de


10 Certificados de Predios Libre de Brucelosis Bovina en el Beni, quienes cumplieron con
todo el proceso de saneamiento como establece el Programa Nacional de Prevención y
Control de la Brucelosis Bovina y Pequeños Rumiantes.

CASOS DE BRUCELOSIS HUMANA EN BOLIVIA


El estudio es descriptivo transversal, se realizó en la ciudad de Cochabamba. El tamaño de
la muestra fue de 52 personas que presentaban alguna sintomatología o sospecha de la
enfermedad. Los datos fueron tomados de los resultados emitidos por el Laboratorio de
Sanidad animal de la Unidad nacional de laboratorios (UNALAB CBBA. Se realizó prueba
Seroaglutinación rápida con antígeno Rosa de bengala y confirmación con prueba de
ELISA de Competencia en UNALAB CBBA.

De las 52 personas muestreadas durante este periodo, se encontraron 23 casos positivos por
Seroaglutinación rápida con antígeno Rosa de Bengala y 14 casos confirmados positivos
mediante ELISA de Competencia.

Dentro de las causas posibles de los casos positivos se encontró que en su mayoría son del
personal veterinarios que trabajan en la atención del ganado bovino, personas que
consumen leche y sus derivados sin pasteurización.

RESULTADOS Y DISCUCIÓN
Para este estudio se muestrearon 52 personas durante el 2013 al 2016, las muestras fueron
analizadas primero mediante la prueba Seroaglutinación rápida con antígeno Rosa de
bengala, se encontraron 22 casos positivos, los cuales pasaron a la prueba confirmatoria
ELISA de competición.
18

Cuadro 1. Resultados obtenidos con SAR – RB

Cuadro 1. Resultados obtenidos con SAR – RB

Cuadro 2. Resultados obtenidos prueba confirmatoria ELISA


19

Grafica 2. Resultados obtenidos prueba confirmatoria ELISA

Dentro de las causas posibles de los casos positivos se encontró que el personal que trabaja
con ganado vacuno en granjas que tienen presencia de brucelosis bovina, dieron resultaron
positivos comprobados

¿QUÉ HACEMOS SI UN CASO POSITIVO DE BRUCELOSIS APARECE EN


NUESTRO HATO?
▪ Primero sería identificar al animal sospechoso de brucelosis a través de los síntomas
(Aborto, Fallas reproductivas, merma de carne y leche), una vez identificado lo
aislamos del resto de los animales sanos para evitar posibles contagios.

▪ Una vez separado le hacemos su respectivo diagnóstico laboratorial (Prueba


serológica, ELISA).

▪ Si la prueba sale positivo el animal será descartado y sacrificado.

▪ Hacer una buena higienización de las zonas donde se encontraba el animal


infectado.
20

DIAGNOSTICO
1. PRUEBA DE AGLUTINACION DEL ANTIGENO BUFFERADA EN PLACA
La prueba del antígeno bufferado en placa es utilizada como tamíz, ya que es de fácil
ejecución y de fácil lectura detecta tanto IgG como IgM. Su gran sensibilidad permite
detectar con alta probabilidad los animales infectados en una población.

Toma de muestra

Se utilizara tubos anticoagulantes con tapa roja para poner la muestra, algodón, alcohol,
hielo seco para preservar las muestras, guantes, servilletas, bolsa de color rojo para recoger
los residuos, marcadores, indumentaria y tapa bocas. Se toma la muestra sanguínea en el
canal central de la cola propiamente en la arteria sacra coccígea. No sin antes de sacar la
muestra se tendrá que limpiar el área de la cola.

Para realizar esta técnica se utilizan:

▪ Antígeno de Brucella abortus con una concentración celular del 10 al 12% y PH 3,8
a temperatura ambiente.

▪ Suero problema sin hemolisis ni contaminación a temperatura ambiente.

▪ Placa de vidrio limpia y desengrasada.

▪ Pipetas de vang.

▪ Pipetas Pasteur para dispensar un volumen de 0,03 ml de antígeno.

▪ Varillas para mezclar.

Procedimiento:

1. Agitar suavemente la suspensión de antigeno durante 5 min.

2. Depositar con la pipeta de vang 0,08 ml de suero problema sobre la placa de vidrio.

3. Depositar 0,03 ml del antigeno al lado del suero.

4. Mezclar el antigeno con el suero con la varilla mezcladora haciendo movimientos


circulares hasta abarcar una superficie plasmada de 3cm de diámetro.
21

5. Rotar la placa para homogenizar la mezcla.

6. Realizar la lectura a los 8min a simple vista.

Interpretación de los resultados:

Las reacciones se clasifican en positivas cuando la mezcla suero-antigeno aparecen grumos,


es decir, se observa aglutinación. Negativa cuando la mezcla suero-antigeno es de turbidez
homogénea y sin grumos, es decir, no se observa aglutinación.

2. PRUEBA DE ELISA.
Es una prueba por la que un anticuerpo o antígeno se une a una enzima como medio para
detectar una relación entre el anticuerpo y el antígeno.

Existe 4 tipos de pruebas de ELISA: Elisa directa, Elisa indirecta, Elisa sándwich y Elisa
competitiva. Entre estas 4 pruebas la más usadas son la Elisa indirecta y Elisa sándwich.

3. ELISA INDIRECTA.
La técnica se realiza en una placa de microtitulación especial para Elisa compuesta por un
material que se adhieran en él, proteínas en forma específica. En la placa debe estar
adheridos el antígeno que es reconocido por el anticuerpo que se tiene que detectar.

1. Fijación del antígeno a la placa/pocillos

Se rellenan los pocillos con los antígenos preparados y se incuban en condiciones


adecuadas (37°C). Una vez finalizada la incubación la mayor parte de los antígenos que no
se han unido a la placa serán eliminados con el sobrenadante. Se hace 3 lavados posteriores
con un tampón adecuado eliminara los antígenos que aun pudieran quedar libres.

2. Bloqueo de la placa/pocillos

Este proceso permite rellenar todos aquellos hueco en los que no se ha fijado el antigeno, se
evita así que las siguientes incubaciones se unan a las placas de forma inespecífica otras
moléculas no deseadas que podrían interferir con los resultados.

Como sustancia bloqueante se utiliza una proteína que no reaccione con el antígeno ni con
el resto de reactivos utilizados en el ensayo. Habitualmente esta proteína es la albumina
22

sérica bovina (BSA). Se añaden esta proteína a los pocillos y se incuba el tiempo necesario
para que se fije a los mismos, rellenando todos los huecos que pudieran quedar. El exceso
se elimina con los sobrenadantes y con él la proteína que no se ha fijado en los pocillos.

3. Incubación con la muestra problema

Se añade el suero extraído del paciente sospechoso a los pocillos, se incuban el tiempo
necesario, si los anticuerpos buscados se encuentran en las muestras se unirán
específicamente a los antígenos fijados previamente. Una vez terminada la incubación se
retira el sobrenadante, y se realiza 3 lavados con el tampón adecuado eliminando así todo
aquello que no se ha unido específicamente en los antígenos fijados en la placa.

4. Incubación con el conjugado

El conjugado es un anticuerpo unido covalentemente a una enzima por ejemplo la


peroxidasa, el conjugado tiene que ser específico de algún epitopo presente en el tipo de
inmunoglobulina que se busca en el suero.

Tras añadir el conjugado y esperar el tiempo de incubación correspondiente, el conjugado


se une a los inmunocomplejos formados en el paso anterior. Si en la muestra no existían
anticuerpos de la brúcela todo el conjugado permanece libre.

Una vez terminada la conjugación se retira el sobrenadante de los pocillos. Se realiza el


lavado otras 3 veces.

5. Incubación con el substrato/cromógeno

Para detectar la presencia de los inmunocomplejos y poder determinar cuáles son las
muestras positivas o negativas se utiliza una mezcla con el sustrato de la enzima y
cromógeno. Cuando la enzima del conjugado es la peroxidasa el sustrato es el peróxido de
hidrogeno y a menudo el OPD el cromógeno. Se añade a mezcla de sustrato de cromógeno
a los pocillos. Durante la incubación el sustrato se rompe y el oxígeno generado hace que el
OPD se oxide y cambie de color. Para detener la reacción se añade acido a los pocillos, el
ácido desnaturaliza la enzima y estabiliza el color. La reacción positiva se observa cuando
el pocillo pase de ser de un color amarillento pálido a ser un color marrón oscuro.
23

4. ELISA SANDWICH
Para sensibilizar la placa se prepara los anticuerpos monoclonales a la concentración
adecuada. Con estos anticuerpos se rellenan los pocillos de la placa de microtitulación. Los
anticuerpos son proteínas y si se incuban en condiciones adecuadas quedan fijados en los
pocillos en las placas.

La mayor parte de los anticuerpos que no se han fijado en la placa se eliminaran con el
sobrenadante y se limpiara 3 veces con un tampón adecuado.

Bloqueo de la placa/pocillo

Este proceso permite rellenar todos aquellos huecos que no se han fijado de los pocillos.

Como sustancia bloqueante se utilizara albumina sérica bovina. Se añade la proteína


bloqueante sérica bovina, y se incuba el tiempo necesario para que se fije a los mismos. A
continuación se elimina el sobrenadante y con él la proteína que no se ha unido a la placa y
se realizara su limpieza 3 veces.

Incubación con la muestra problema

Se añade el suero extraído del paciente sospechoso a los pocillos, se incuban el tiempo
necesario. En caso que los antígenos buscados estén en las muestras estos se unen
específicamente a los anticuerpos fijados previamente. Si esto ocurre tras la incubación
correspondiente se forman inmunocomplejos que quedan inmovilizados a su vez al pocillo.

Una vez terminada la incubación se retira el antinadante y se realiza 3 lavados.

Incubación con el conjugado

Se añade el conjugado, el conjugado es un anticuerpo unido covalentemente a una enzima,


por ejemplo la peroxidasa, en el Elisa tipo sándwich el conjugado tiene que ser específico
de algún otro epitopo del antigeno buscado en la muestra.

Tras el periodo de incubación correspondiente el conjugado se une a los monocomplejos


formados en el paso anterior. Se realiza el lavado 3 veces.

Tras los lavados en la placa permanecen fijados los anticuerpos iniciales los antígenos de la
Brucella y el conjugado correspondiente, es decir los inmunocomplejos formados. Si en la
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muestra no estaba el antigeno buscado, en la placa solo quedan los anticuerpos unidos
inicialmente en la misma.

Incubación con el substrato/cromógeno

Para detectar la presencia de los inmunocomplejos y poder determinar cuáles son las
muestras positivas o negativas se utiliza una mezcla con el sustrato de la enzima y
cromógeno. Cuando la enzima del conjugado es la peroxidasa el sustrato es el peróxido de
hidrogeno y a menudo el OPD el cromógeno.

Se añade a mezcla de sustrato de cromógeno a los pocillos. Durante la incubación el


sustrato se rompe y el oxígeno generado hace que el OPD se oxide y cambie de color. Para
detener la reacción se añade acido a los pocillos, el ácido desnaturaliza la enzima y
estabiliza el color. La reacción positiva se observa cuando el pocillo pase de ser de un color
amarillento pálido a ser un color marrón cremoso oscuro.

TRATAMIENTO.

▪ TRAMATIENTOS EN LAS PERSONAS:


- En el hombre los tratamientos son largos y caros.
- Hay muchos antibióticos que ayudan a tratar la enfermedad y prevenir posibles
complicaciones:
- Tetraciclinas, sulfas
- Doxiciclina asociada a Estreptomicina o a Gentamicina
- Doxiciclina asociada a Rifampicina

▪ TRATAMIENTO EN LOS ANIMALES:


No se realiza tratamiento en los animales ya que la OMS - OPS lo prohíbe por la resistencia
que la bacteria provoca al antibiótico, además no es seguro porque la localización de la
bacteria es intracelular, llegando probablemente hasta los lugares de baja irrigación
sanguínea.

PREVENCIÓN.
La mejor prevención para la brucelosis bovina es la vacunación usando la cepa 19 para
terneros de 3 a 8 meses de edad y la RB 51 en hembras de 8 meses en adelante.
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Calendario sanitario contra la brucelosis bovina con la vacuna cepa 19 (terneras de 3 a 8 meses)

Ene Feb Mar Abr May Jun Jul Ago Sep Oct Nov Dic

x x x x

VACUNACIÓN.
▪ El SENASAG establece que la vacunación será sistemática, estratégica,
regionalizada y obligatoria para todas las hembras comprendidas entre los 3 y 8
meses de edad, como medida de control y prevención de la brucelosis bovina, con
las vacunas (Cepa19 y/o cepa RB51.)

▪ En la resolución administrativa N 032/2005, en su artículo primero: Establece el


programa nacional para la Vigilancia, Control y Declaración de Planteles y Hatos
libres de Brucelosis y Tuberculosis Bovina, bajo la dependencia de la Unidad
Nacional de Sanidad Animal SENASAG.
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ESTRATEGIAS DE COMBATE
Cobertura inmunológica

La ejecución del componente de Inmunización en el programa de prevención y Control de


la Brucelosis Bovina, se realizará de forma obligatoria en TODOS LOS TERNEROS
MACHOS Y hembras de 3 a 8 meses de edad.

La vacunación Sera ejecutada por profesionales médicos veterinarios acreditados, no


acreditados y técnico vacunadores previa capacitación por autoridad nacional competente
SENASAG, en base a los Planes Locales de Vacunación, quienes serán responsables de la
aplicación correcta de la vacuna contra la Brucelosis bovina.

La vacunación es un proceso secuencial que comienza con la elaboración de la vacuna y


finaliza cuando ésta es aplicada en el animal, generándose así la protección inmunitaria.

Estricto control sanitario

La identificación de los animales vacunados, se efectuará de la siguiente manera:

▪ Muesqueo en la oreja derecha, parte delantera del borde ventral.

▪ Tatuaje en la oreja derecha colocando el código del vacunador, campaña y año.

▪ Identificación Individual del Animal (aretes, caravanas, chip).

▪ Marcación a fuego con la letra “V” de 4 cm, en el maxilar derecho.

Educación sanitaria

Capacitación de médicos veterinarios, no acreditados y técnicos vacunadores que serán los


encargados de realizar la vacunación previa capacitación por el servicio oficial, debiendo
contar con el material logístico y el biológico necesario para realizar la vacunación,
desplazándose a los establecimientos ganaderos por su propia cuenta.

La Comisión Departamental de apoyo al programa proveerá los formularios de


notificación, actas de vacunación y material para identificación del establecimiento
ganadero o predio vacunado.

CERTIFICACIÓN DE LA VACUNACIÓN
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Una vez concluida la vacunación el propietario, administrador del predio y el vacunador


deberán firmar el acta de vacunación, luego dicho documento junto con sus copias será
presentado en la Oficina Local para la emisión del certificado oficial de vacunación contra
la Brucelosis bovina y posterior entrega al interesado.

Las copias de los certificados deben ser enviados a la Distrital del SENASAG
correspondiente, a la brevedad posible para que posibiliten el ingreso de la información al
Sistema Gran Paititi. El veterinario oficial deberá elaborar informes de avance semanal y de
cierre del plan de vacunación.
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PROGRAMAS DE CONTROL.
- Aislamiento del animal enfermo.

- Cuarentena de animales enfermos o con sospecha.

- Plan local de vacunación.

- Periodo de vacunación.

- Vacunación.

- Las técnicas de prueba y eliminación, diversas formas de vigilancia y la


identificación del origen de la enfermedad.

- Limpiar y desinfectar a fondo todas las áreas expuestas a los animales infectados y
sus secreciones.

- Capacitación de médicos veterinarios, no acreditados y técnicos vacunadores.

- Vacunación en predios lecheros, propiedades en trazabilidad y cabañas.

- Notificación obligatoria de la enfermedad.

- Realizar pruebas.
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▪ RECURSOS HUMANOS
- Capacitación de médicos veterinarios, no acreditados y técnicos
vacunadores.

- Médico veterinario acreditado


- Senasag
- Médico y enfermera en caso de que contraiga la enfermedad

- Señor Productor: Sólo el personal que cuente con la credencial de


"vacunador acreditado", está autorizado por el SENASAG para realizar la
vacunación de sus bovinos. Solicítela antes de comenzar la vacunación.

▪ RECURSOS ECONOMICOS
- Materiales para varios usos:
- Vacunas
- Gafas (protectores de ojos)
- Barbijo.
- Termo conservador (frio 2 a 8°C)
Lodo povidona, Alcohol 70°Gl / Alcohol en gel
- (parauso posterior a la vacunación - en la
- desinfección de las manos del operador).
- Señalador o muesqueador (punta V).
- Aretes numerados.
- Areteador.
- Tatuador, con 2 juegos de número y tinta
- respectiva, para la identificación del animal
- vacunado.
- Credencial de Vacunador acreditado.
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BIBLIOGRAFIA:
- https://www.msal.gob.ar/images/stories/ryc/graficos/0000000525cnt-guia-medica-
brucelosis.pdf
- https://www.elsevier.es/es-revista-revista-medicina-e-investigacion-353-articulo-
brucelosis-una-zoonosis-frecuente-S2214310615000382
- https://www.cun.es/enfermedades-
tratamientos/enfermedades/brucelosis#:~:text=La%20brucelosis%20es%20una%20
zoonosis,leche%20o%20mediante%20transmisi%C3%B3n%20ven%C3%A9rea.
- Libro de zoonosis y enfermedades transmisibles comunes al hombre y a los animales
Tercera edición volumen I. Bacteriosis y Micosis de Pedro N. Acha y Boris Szyfres
– 2001
- Libro del compendio de enfermedades infecciosas de los animales domésticos 2020
santa cruz de la sierra – Bolivia
- https://repositorio.umsa.bo/xmlui/bitstream/handle/123456789/23206/T-
2694.pdf?sequence=1&isAllowed=y
- https://www.facebook.com/BoliviaSenasag?__cft__[0]=AZWl732FdihKxorjDI14lp
-0U43M8E1gP_W7eDto7Jq9MWLJjGXT7sx3wyQa49M0oLBsISfFwqryg-
A0UQlTo17P-t_pfKtNJfyRUSyZ-UQjx7iwqIT2XZ_Y7EtYnbH2Z8o&__tn__=-
UC%2CP-R
- https://www.senasag.gob.bo/index.php/component/finder/search?q=brucelosis+bovi
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- https://www.senasag.gob.bo/phocadownload/2022/REPORTE-SEMANALES-
SINAVE/BOLETIN%20SINAVE-36.pdf
- https://www.senasag.gob.bo/index.php/reportes-epidemiologicos-
semanales/category/5437-2022
- file:///C:/Users/59177/Downloads/MANUAL%20OPERATIVO%20DE%20VACU
NACION%20CONTRA%20LA%20BRUCELOSIS%20BOVINA.pdf
- https://www.youtube.com/watch?v=FmVV4e8evc8
- https://www.youtube.com/watch?v=pgxEGlr2Ycc
- https://www.youtube.com/watch?v=KrGC0ZgIDI8
31

- https://www.senasag.gob.bo/images/areas_senasag/SA/rumiantes_Equidos/BRUCE
LOSIS1.pdf
- https://www.cfsph.iastate.edu/Factsheets/es/brucella_abortus-es.pdf
- file:///C:/Users/PC/Downloads/REGENSA_v2021.pdf
- file:///C:/Users/PC/Downloads/RA_032_2005.pdf
- http://ddigital.umss.edu.bo:8080/jspui/bitstream/123456789/28336/1/ANALISIS%2
0DE%20LA%20SITUACION%20DE%20LA%20BRUCELOSIS%20HUMANA%
20%20CON%20%20MUESTRAS%20PROCESADAS%20DURANTE%20EL%20
PERIODO%20COMPRENDIDO%20ENTRE%20EL%202013%20A%202016%20
EN%20EL%20LABORATORIO%20OFICIAL%20DEL%20SENASAG-
GONZALES%20QUINT%20FABIOLA%20-
%20fabiola%20gonzales%20quint.pdf

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