UNMSM Facultad de

Medicina.
Estudios Generales

Proliferación celular y apoptosis:

Moléculas inductoras é inhibidoras. Modificaciones en el DNA y
en proteínas de membrana.
Bases Moleculares del Cáncer
Protooncogenes y oncogenes.

Dr. Clever Arias Camacho - Dra. Nancy Rojas Morán

nrojasm@unmsm.edu.pe
 INTRODUCCION
En condiciones fisiológicas, la homeostasis celular mantiene el estado de
diferenciación de cada célula y regula estrictamente su tasa de proliferación, su
tiempo de supervivencia y su territorialidad, de acuerdo a las necesidades del
organismo.
Controla el numero de neuronas
APOPTOSIS

La apoptosis participa en muchos otros procesos fisiológicos y

patológicos como :
Embriogénesis
Metamorfosis
Mecanismos de acción de hormonas y factores paracrinos
Respuestas del sistema inmunitario
Respuesta celular a infecciones virales, y enfermedades
autoinmunes y
Respuesta celular a la quimioterapia y a la radioterapia.
Controlado por señales
extrínsecas e intrínsecas
Virus y por las perforinas
Proceso Activo,
con gasto de
energía
SEÑALES DE ENCUENTRAME
 SEÑALES DE ENCUENTRAME
Figura 1. Comparación de las señales de “encuéntrame” apoptóticas y
necróticas. (Izquierda) La apoptosis se caracteriza por la contracción celular, la
formación de ampollas en la membrana, la fragmentación del ADN y la condensación
nuclear. A medida que las células experimentan apoptosis, se secretan señales de
“encuéntrame” como lisofosfatidilcolina (LPC), CX3CL1, ICAM3 y esfingosina 1-fosfato
(S1P), que se exponen en la hoja externa de la membrana plasmática y/o se liberan a
través de cuerpos apoptóticos o exosomas. La pannexina 1 (PANX1) es un canal de
membrana importante que participa en la formación de protrusiones de membrana y
la liberación de ATP/UTP durante la apoptosis. LPC, lisofosfatidilcolina; S1P,
esfingosina-1-fosfato.
(Derecha) La necrosis se considera una forma incontrolada de muerte celular
caracterizada por hinchazón nuclear y organular, ruptura de la membrana plasmática
y fuga de contenido intracelular, que muchos caen en la categoría de patrones
moleculares asociados a daños (DAMP o señales de peligro). Las señales de
"encuéntrame" liberadas por las células necróticas incluyen péptidos formilados
derivados de las mitocondrias, así como moléculas liberadas del citosol como H ₂ O ₂ ,
ATP/UTP, leucotrieno B4 (LTB4) y quimiocinas CXC/CC. LTB4 también puede liberarse
a través de vesículas extracelulares selladas. Los componentes quimiotácticos del
complemento C3a y C5a se generan después de la activación del complemento en la
La muerte celular en los diferentes
subtipos de células afecta a:
La definición y estructura de la célula
Cambio estructurales
Alteraciones de membrana
Cambios en los procesos celulares
Degradación del núcleo
La apoptosis puede ser vista como un proceso estado-dependiente
de su inducción que se divide en apoptosis temprana, intermedia y
tardía. Para distinguir en qué estado se encuentra y diferenciarlo
así de los procesos necróticos, se han desarrollado productos y
métodos específicos.
La etapa de apoptosis temprana

La etapa de apoptosis temprana está representada por cambios y

pérdida final del potencial de membrana mitocondrial. El potencial
de membrana mitocondrial es detectado por JC-1, un marcador
que entra selectivamente en las mitocondrias. En mitocondrias
funcionales, JC-1 forma agregados que muestran una emisión
fluorescente a ~ 590 nm. Con la reducción del potencial de la
membrana el colorante forma monómeros, donde la emisión se
desplaza a ~ 530 nm. Este cambio se utiliza para medir el potencial
de membrana mitocondrial, y la entrada de la célula en apoptosis
temprana.
Identificación de la Apoptosis Intermedia

Otro proceso clave en la apoptosis es la translocación de

fosfatidylserina (PS), una proteína localizada en la membrana
celular. PS en la célula funcional es citosolica pero se transloca a la
porción extracelular de la membrana durante la etapa intermedia
de la apoptosis. La Anexina V se puede usar para detectar PS donde
los marcadores impermeables como el Propidium Iodide o el 7-
AAD tienen que utilizarse como contratinción para diferenciar la
apoptosis temprana de la apoptosis tardía o necrosis.
Identificación de la Apoptosis Tardía

Se puede identificar la etapa tardía de la apoptosis a través de la

fragmentación del DNA. Apo-Direct assay utiliza un método para
detector la multitud de terminación 3’-OH originadas durante esta
etapa final de la apoptosis. Se mide a través de 2 coloraciónes que
utilizan FITC-dUTP para detectar los fragmentos de DNA y el
Ioduro de Propidio como contratinción para el DNA total.
VÍA EXTRÍNSECA

En la vía «extrínseca» hacia la apoptosis, se recibe una señal desde

el exterior de la célula indicándole que cometa la muerte celular
programada. Esto puede ocurrir si la célula ya no es necesaria o si
está enferma.
Como muchas vías para producir cambios complejos en una célula,
la vía extrínseca a la apoptosis implica muchos pasos, cada uno de
los cuales puede ser «regulado por aumento» o «regulado por
disminución» por la expresión génica o por otras moléculas:
VIA EXTRÍNSECA

La vía extrínseca se activa tras la unión de un ligando, polipéptido

de la familia del TNF, a su receptor esto activa a las caspasas
iniciadoras (2, 8, 10).
Una vez activadas, estas caspasas escinden y activan otras
caspasas efectoras (caspasas 3, 6 y 7) que en última instancia
son las responsables de la escisión de proteínas del cito-esqueleto
y proteínas nucleares, lo que conduce a la apoptosis de las células.
VIA EXTRINSECA
Paso 1
Como la mayoría de las señales entre células, la vía extrínseca de la
apoptosis comienza con una molécula de señal que se une a un receptor
en el exterior de la membrana celular.
Dos tipos comunes de mensajeros químicos que desencadenan la vía
extrínseca a la apoptosis son FAS y TRAIL. Estas moléculas pueden ser
excretadas por células vecinas si una célula está dañada o ya no es
necesaria.
Los receptores que se unen a FAS y TRAIL se denominan «FASR» para
«Receptor FAS» o «TRAILR» para «TRAIL Receptor».
Como ocurre con la mayoría de las proteínas receptoras, cuando FASR y
TRAILR se encuentran con su molécula señal, a veces llamada » ligando «,
se unen a ella.
El proceso de unión provoca cambios en el dominio intracelular del
receptor.
Paso 2:

En respuesta a los cambios en el dominio intracelular de TRAILR o

FASR, también cambia una proteína dentro de la célula llamada
FADD.
El nombre de FADD es divertido o aterrador: significa proteína
“Dominio de la muerte asociado a FAS”.
Una vez que la FADD ha sido activada por cambios en el receptor,
interactúa con dos proteínas adicionales, que continúan para
iniciar el proceso de muerte celular.
Paso 3:

La pro-caspasa-8 y la pro-caspasa-10 son proteínas inactivas

hasta que interactúan con un FADD activado. Pero si dos de estas
moléculas encuentran un FADD activado, las partes de las
proteínas que las mantienen inactivas se «escinden» o «cortan».
Las pro-caspasas luego se convierten en caspasa-8 y caspasa-10, a
las que los científicos se han referido románticamente como «el
principio del fin» debido a su papel en el inicio de la apoptosis.
Las caspasas-8 y -10 se dispersan a través del citoplasma y
desencadenan cambios en varias otras moléculas en toda la célula,
incluidos los mensajeros que inician la descomposición del ADN
después de ser activadas por las caspasas.
Paso 4

Otra molécula inactiva llamada BID se transforma en tBID cuando las

caspasas activadas escinden la parte de BID que mantiene inactiva
la molécula.
Después de que BID se transforma en tBID, tBID se mueve a
las mitocondrias. tBID activa las moléculas BAX y BAK.
La activación de BAX y BAK son los primeros pasos compartidos por las
vías extrínseca e intrínseca de la apoptosis.
Los pasos 1-4 enumerados aquí son exclusivos de la vía extrínseca. Pero
una vez que se activan BAX y BAK, los pasos siguientes son los mismos
entre ambas vías.
Como tal, los pasos 3-7 de la vía intrínseca, que se enumeran a
continuación, también son los pasos 5-9 de la vía extrínseca.
VÍA INTRÍNSECA

Un paso clave en la vía intrínseca es la salida de citocromo

c desde la mitocondrial y, por lo tanto la salida de
citocromo c desde la mitocondria está regulada por
miembros de la familia Bcl-2,
alguno de estos miembros son pro-apoptóticos como Bid y
Bax mientras que otros son antiapoptóticos (Bcl-XL y Bcl-
2). Otro mecanismo de apoptosis desencadenada por
estímulos intracelulares se produce por estrés del retículo
endoplásmico. Este proceso está mediado por caspasa 12.
VIA INTRINSECA

Paso 1:
La vía intrínseca a la apoptosis se desencadena por estrés o daño a
la célula. Los tipos de estrés y daño que pueden llevar a la célula a la
apoptosis incluyen daño a su ADN, falta de oxígeno y otros tipos de
estrés que afectan la capacidad de la célula para funcionar.
En respuesta a estos daños o tensiones, la célula «decide» que su
existencia continuada podría ser peligrosa o costosa para el
organismo en su conjunto. Luego activa un conjunto de proteínas
llamadas «proteínas solo BH3».
Paso 2:

Las proteínas solo BH3 son una clase de proteínas que incluye
varias proteínas pro y anti-apoptosis. La apoptosis se puede
estimular o desalentar, dependiendo de qué proteínas solo BH3 se
activen o expresen.
Las proteínas proapoptóticas solo de BH3 activan BAX y BAK, las
mismas proteínas que son activadas por tBID después de que se
crea a través de la vía extrínseca hacia la apoptosis.
Paso 3 y 4
Paso 3:
BAX y BAK activados causan una condición conocida como «MOMP». MOMP significa
«permeabilidad de la membrana externa mitocondrial».
MOMP se considera el «punto sin retorno» de la apoptosis. Los pasos que conducen a
MOMP pueden detenerse en seco mediante moléculas inhibidoras, pero una vez que se
ha logrado MOMP, la célula completará el proceso de muerte.
MOMP juega un papel clave en la apoptosis al permitir la liberación de citocromo C en el
citoplasma.
Etapa 4:
En circunstancias normales, el citocromo C juega un papel clave en la cadena de
transporte de electrones mitocondrial. Sin embargo, durante la MOMP, el citocromo C
puede escapar de las mitocondrias y actuar como una molécula de señalización en el
citoplasma celular.
El citocromo C en el citoplasma celular provoca la formación del “apoptosoma” de
sonido ominoso, un complejo de proteínas que realiza el paso final para comenzar la
degradación celular.
Paso 5 y 6

Paso 5:
El apoptosoma, una vez formado, convierte la pro-caspasa-9 en
caspasa-9.
Al igual que con la activación de las caspasas-8 y -10 en la vía
extrínseca a la apoptosis, la caspasa-9 puede desencadenar
cambios adicionales en toda la célula.
Paso 6:
Caspasa-9 realiza varias funciones para promover la
apoptosis. Entre los más importantes se encuentra la activación de
las caspasas-3 y -7.
Paso 7:

Una vez activadas, las caspasas-3 y -7 comienzan la

descomposición de los materiales celulares. La caspasa-3 se
condensa y descompone el ADN de la célula.
FACTORES QUE INDUCEN
A LA APOPTOSIS
Una mirada al cáncer
desde la perspectiva
molecular
1. El cáncer es una enfermedad multifactorial que afecta el crecimiento y la
proliferación normal de las células, además de producir alteraciones en el
proceso de diferenciación celular, lo que condiciona la formación de un
tumor en un tejido específico. Por ello, el término cáncer implica una
transformación maligna, es decir, una pérdida de las características y
funciones normales de las células en un tejido.
N
M
por Nancy Joaquina Rojas
Moran
El cáncer como un problema de
salud
Diferentes reportes indican que esta enfermedad constituye la segunda causa más común de muerte, después de la
enfermedad cardiovascular, en los Estados Unidos y en muchos otros países. De esta forma, cada año, mueren por cáncer
cerca de 8 millones de personas en todo el mundo y se calcula que esta cifra va en aumento. De igual manera, en Cuba la
mortalidad por cáncer se encuentra entre las primeras cinco causas de muerte. A nivel mundial, los principales tipos de
cáncer que provocan mortalidad son los que afectan pulmones, estómago, colon, recto, hígado y mamas. Otros tipos de
cáncer que llevan a la muerte son los cánceres cervicales, esofágicos, prostáticos y cutáneos.

1 Mortalidad 2 Incidencia 3 Tipos de Cáncer

El cáncer es la segunda causa Se calcula que la cifra de Los tipos de cáncer más
de muerte más común en el muertes por cáncer va en mortales incluyen cáncer de
mundo. aumento. pulmón, estómago, colon, recto,
hígado y mama.
Neoplasias: Benignas y
Malignas
El término neoplasia se refiere a cualquier crecimiento nuevo y anormal de tejido; puede ser de naturaleza
benigna o maligna. El término cáncer, por lo general, se relaciona con tumores malignos. Los tumores
pueden surgir en cualquier órgano del cuerpo y dar lugar a diferentes manifestaciones clínicas,
dependiendo de la ubicación del tumor. Las células cancerosas se caracterizan por ciertas propiedades que
se exponen a continuación.

Tumores Tumores
Benignos
Control disminuido del crecimiento, pero Malignos
Crecimiento descontrolado, invasión de
no invaden tejido local ni se diseminan tejido local y metástasis a otras partes del
hacia otras partes del cuerpo.
Los procesos que condicionan el cáncer están influenciados por alteraciones
genéticas o epigenéticas de numerosos genes que codifican proteínas que
regulan este proceso, contribuyendo a un fenotipo maligno. Asimismo, existen
factores ambientales implicados en la génesis del tumor con una influencia
determinante en algunos tipos de cáncer.
El papel de las alteraciones
genéticas
Los procesos que condicionan el cáncer están influenciados por
alteraciones genéticas o epigenéticas de numerosos genes que
codifican proteínas que regulan este proceso, contribuyendo a un
fenotipo maligno. Asimismo, existen factores ambientales implicados en
la génesis del tumor con una influencia determinante en algunos tipos
de cáncer.

Mutaciones Factores
Genéticas
Alteraciones en genes que Ambientales
Influencia determinante en la
regulan el crecimiento y la génesis de algunos tipos de
diferenciación celular. cáncer.
El ciclo celular en la génesis del
cáncer
La regulación del ciclo celular, mediada por ciclinas y cinasas dependientes de ciclinas (CDK), es crucial en el desarrollo del cáncer.
Las fases del ciclo celular (G1, S, G2, y M) están controladas por puntos de verificación que aseguran condiciones adecuadas para
avanzar. Si las células no progresan, permanecen en fase G0 (quiescentes), pero pueden ser reactivadas por factores de
crecimiento. Las células cancerígenas suelen tener un ciclo más corto y pocas en fase G0, lo que contribuye a su proliferación
rápida.

1 2 3 4

Fase G1 Fase S Fase G2 Fase M

Crecimiento celular y Replicación del ADN. Crecimiento celular y División celular (mitosis).
preparación para la preparación para la
replicación del ADN. mitosis.
 Oncogenes y genes supresores
tumorales
Los oncogenes y los genes supresores tumorales regulan el crecimiento y la muerte celular. En 1910,
_Peyton Rous_ descubrió que un virus, el virus del sarcoma de Rous, podía causar cáncer en pollos. Este
hallazgo llevó al descubrimiento de que un gen viral, el gen SRC, podía transformar células normales en
células cancerosas. Más tarde se descubrió que versiones similares de este gen estaban presentes en
células normales y regulaban la proliferación celular. Estos genes se llaman protooncogenes, y sus
versiones mutadas se conocen como oncogenes. Los oncogenes codifican proteínas que estimulan el
crecimiento celular, mientras que los genes supresores tumorales codifican proteínas que lo inhiben.
Oncogenes Genes supresores tumorales

Estimulan el crecimiento celular. Inhiben el crecimiento celular.

Las mutaciones los activan, llevando a un crecimiento Las mutaciones los inactivan, llevando a un crecimiento
descontrolado. descontrolado.
 Factores de crecimiento y vías de
señalización
Los factores de crecimiento se unen a receptores en la membrana plasmática, iniciando una cascada de señalización que estimula el crecimiento celular. Pueden actuar de manera
endocrina, paracrina o autocrina. Las células tumorales suelen controlar su propio crecimiento de manera autocrina, produciendo factores de crecimiento que actúan sobre
receptores en su propia membrana. Esto les permite crecer independientemente de factores externos. Además, pueden ejercer un control paracrino, liberando factores de
crecimiento que actúan sobre células vecinas.

Unión del factor de

crecimiento
El factor de crecimiento se une a su receptor en la membrana celular.

Activación del
receptor
El receptor se activa, iniciando una cascada de señalización.

Activación de
proteínas
La cascada de señalización activa proteínas que regulan el crecimiento celular.

Proliferación celular
La célula se divide y prolifera.
 El papel de la apoptosis en la transformación
maligna
Las células cancerosas adquieren mutaciones que les permiten evadir la apoptosis, lo que prolonga así su replicación y permite que esta
sea continua, esto se considera como consecuencia de la inactivación de p53 o la activación de genes antiapoptósicos. La alteración de
estímulos pro y antiapoptóticos tanto internos como externos y la aparición de mutaciones en los genes que regulan este proceso llevan
a la progresión tumoral. Entre los factores externos capaces de inducir apoptosis está la disponibilidad limitada de nutrientes, la carencia
de factores de crecimiento, la disminución de oxígeno y la pérdida de las interacciones de matriz extracelular, entre otros. Los estímulos
internos resultan aún más importantes en el desarrollo de algunos tumores al limitar su crecimiento en etapas tempranas o tardías
cuando comienza la metástasis.

Inactivación de p53 Activación de genes Estímulos externos

La inactivación de p53 puede impedir la antiapoptósicos La disponibilidad limitada de nutrientes, la
apoptosis. La activación de genes antiapoptósicos carencia de factores de crecimiento, la
puede inhibir la apoptosis. disminución de oxígeno y la pérdida de las
interacciones de matriz extracelular
pueden inducir la apoptosis.
 Hallmarks of cancer
Hananahan y Weinberg, 2000; 2011, 2022

Los hallmarks del cáncer son un conjunto de

características esenciales que permiten a las células
tumorales crecer y propagarse de manera
descontrolada.
Autosuficiencia en Señales
de Crecimiento
1 Oncogenes 2 Genes Supresores de
Genes que, cuando están Tumores
mutados, promueven el Genes que normalmente

crecimiento descontrolado. inhiben el crecimiento celular,

pero que se pierden o
inactivan en el cáncer.

3 Proliferación Celular
Las células cancerosas crecen sin depender de señales externas.
 Insensibilidad a Señales Anti-Crecimiento

Genes Supresores de Tumores Vías de Señalización Evación de la Inhibición

Pérdida de función de genes como p53 Activación de vías que promueven la Las células cancerosas ignoran las
o Rb, que normalmente detienen el supervivencia celular, como la vía de señales que normalmente inhiben su
crecimiento celular en respuesta a señalización de PI3K/AKT. crecimiento.
señales dañinas.
Evasión de la Apoptosis
Evación de la Apoptosis
Señales Dañinas Las células cancerosas desarrollan mecanismos para evitar la
Estrés, daño al ADN, señales de crecimiento inadecuadas. activación de caspasas.

1 2 3

Activación de Caspasas
Enzimas que degradan proteínas celulares, llevando a la muerte celular
programada.
Potencial Replicativo Ilimitado

Telómeros Envejecimiento Celular

Regiones protectoras al final de El acortamiento de los
los cromosomas que se acortan telómeros lleva al
con cada división celular. envejecimiento celular y la
muerte.

Telomerasa
Enzima que mantiene la longitud de los telómeros, permitiendo a las
células cancerosas dividirse indefinidamente.
Angiogénesis Sostenida
Crecimiento Tumoral
Los tumores necesitan oxígeno y nutrientes para crecer.

Factores Angiogénicos
Los tumores secretan señales que promueven la formación
de nuevos vasos sanguíneos.

Angiogénesis
Formación de nuevos vasos sanguíneos que irrigan al tumor.
Invasión del Tejido y
Metástasis
Invasión Las células cancerosas penetran
en los tejidos adyacentes al
tumor primario.

Metástasis Las células cancerosas se

diseminan a otros órganos a
través del sistema linfático o
sanguíneo.
 Metastase
s
Mèdico Inglès
Propused the Seed&Soil theory to explain
metastases

El Dr. Paget analizó 735 casos fatales de cáncer de

mama y describió que las metástasis no son eventos
aleatorios sino que están impulsadas por el tejido
diana... llamadas SEMILLA a las células metastásicas
y SUELO al tejido diana.

Stephen Paget (1855 – 1926)

Pasos de la metástasis

Degradación de la matriz extracelular

Transición epitelial a mesenquimal (EMT)
Subexpresión de moléculas de adhesión (p. ej., E-cadherina)
Ganancia de resistencia a las alteraciones del tráfico a través de la
vasculatura sanguínea y linfática
Transición mesenquimal a epitelial (MET)Implantación de nicho
REPROGRAMANDO O DESREGULANDO EL METABOLISMO

La REPROGRAMACIÓN METABÓLICA en las

células neoplásicas NO es un simple ajuste
metabólico para sostener los requerimientos
energéticos y anabólicos de las células
proliferantes... ES un COMPONENTE ACTIVO
de la carcinogénesis.

Cell proliferation Carcinogenesis

EFECTO WARBURG
 Desregulación del Metabolismo
Energético

Glucólisis
Las células cancerosas aumentan la glucólisis para obtener energía, incluso en presencia de
oxígeno.

Mitocondria
Las células cancerosas a menudo tienen una menor actividad mitocondrial, lo que puede llevar a
una mayor producción de especies reactivas de oxígeno.

Crecimiento y Proliferación
Las alteraciones metabólicas proporcionan los bloques de construcción y la energía necesarios
para el crecimiento descontrolado.
SOBREVIVIENDO AL SISTEMA
INMUNOLOGICO
Avolaj
e
UNMSM Facultad de
Medicina.
Estudios Generales

Flujo de la información genética. La Replicación,

Transcripción en células. Procesamiento del ARN.
La Traducción. Los ribosomas. El ARNt. Etapas y
mecanismo de traducción. El código genético.
Mecanismos de Control Post-Traduccional:
fosforilación, acetilación, activación proteolítica.
Splicing de proteínas.
Dr. LUIS CLEVER ARIAS CAYCHO
 Los ácidos nucleicos y el ADN como
material genético

Historia sobre la Naturaleza química de los genes

3
27/10/2024
 Los ácidos nucleicos como biomoléculas

¿QUÉ ES UNA BIOMOLÉCULA?

Son sustancias estrechamente relacionadas con los

procesos vitales, presentes en todas las células por lo que
son indispensables para la vida.

¿CUÁLES SON LAS BIOMOLÉCULAS?

Carbohidratos.
Lípidos.
Proteínas.
Ácidos nucleicos.

4
27/10/2024
 ¿CUÁL ES LA FUNCIÓN QUE DESEMPEÑAN ?

Los carbohidratos, lípidos y proteínas, al ser metabolizados producen:

Energía.
Regulación de procesos celulares
Nuevos materiales celulares .

¿QUÉ PASA CON LOS ÁCIDOS NUCLEICOS ?

Nuestro metabolismo no los transforma a energía o a

nuevos materiales.
Participan en la transmisión de los caracteres hereditarios
y en la
Síntesis de proteínas que permiten el control del
metabolismo celular.
5
27/10/2024
 ¿CUÁLES SON LOS ÁCIDOS NUCLEICOS?

Son dos tipos principales de moléculas llamadas:

DNA o ácido desoxirribonucleico.
RNA o ácido ribonucleico.

¿DÓNDE SE ENCUENTRAN ESTAS MOLÉCULAS ?

Se encuentran en el interior de la célula.

El DNA se encuentra principalmente en el núcleo celular y
una pequeña cantidad en las mitocondrias y los
cloroplastos.
El RNA se encuentra en el núcleo y en el citoplasma
celular. El 80% del RNA se encuentra en los ribosomas
6
27/10/2024
 La mayor parte del RNA se
El DNA se encuentra en: encuentra en los ribo- somas
Núcleo celular (fibra de cromatina)

Mitocondrias

DNA

7
27/10/2024
 ¿QUÉ SUCEDE CON EL MATERIAL GENETICO COMO LA
CROMATINA AL MOMENTO DE LA DIVISIÓN CELULAR?

Sufre una serie de enrollamientos y acortamientos

transformándose en pequeñas estructuras llamadas
cromosomas, las cuales se ven dobles o duplicados.

Las células humanas presentan 23 pares de cromosomas. Cada

cromosoma consiste en dos hebras llamadas cromátidas, las
cuales se unen en una región llamada centrómero o cinetocoro.

El DNA queda en el interior de estas estructuras

formando unidades llamadas genes.
Nuestra información está almacenada en unos 25.000
a 35.000 genes, de acuerdo a las investigaciones
derivadas del proyecto genoma humano.
8
27/10/2024
 Cromosomas

Genes

Cinetocoro Cromátida
o s
centrómero

9
27/10/2024
 Papel genético del DNA
en la transmisión de la herencia

APORTES DE DIFERENTES
CIENTIFICOS AL
DESCUBRIMIENTO DEL ADN
COMO MATERIAL GENETICO

10
27/10/2024
 Papel genético del DNA
en la transmisión de la herencia

APORTES DE DIFERENTES
CIENTIFICOS AL
DESCUBRIMIENTO DEL ADN
COMO MATERIAL GENETICO

11
27/10/2024
 ¿CÓMO SE LOGRÓ ESTABLECER LA RELACIÓN DEL DNA
CON LA HERENCIA?

En 1869 se iniciaron los trabajos que permitieron encontrar

“quien” o “que” era el responsable de la herencia.

Para ello se consideraron los siguientes

aspectos:

Los cromosomas están relacionados con

la herencia.
Están formados por proteínas, DNA y RNA.
Alguno de estos tres componentes debe
ser el responsable de la herencia.
Quién resulte responsable, deberá tener
la capacidad de duplicarse a si mismo.

12
27/10/2024
 ¿QUIÉNES COLABORARON EN ESTA
INVESTIGACIÓN?
Para lograr establecer la relación del DNA con la herencia,
fue necesaria la participación de varios investigadores,
entre ellos:
Friedrich Miescher.
Wilhelm Roux
Oscar Hertwing
Robert Feulgen
Fred Griffith.
Avery, McLeod y McCarty.
Phoebus Aaron Levene
Erwin Chargaff.
James Watson y Francis Crick.

13
27/10/2024
 ¿QUE APORTÓ FRIEDRICH MIESCHER?

En 1869 logró aislar, del núcleo de glóbulos blancos, una

sustancia a la que denominó nucleina.

Aun cuando Miescher no pudo establecer la

función de dicha sustancia, en la década de
1880, algunos investigadores la empezaron
a relacionar con la herencia.
Años más tarde, a esta sustancia se le dio el
nombre de ácido nucleico.
Tuvieron que pasar varios años para que
esto fuera un hecho demostrado.
Glóbulos
blancos

14
27/10/2024
 APORTE DE:

Wilhelm Roux:
En 1880 postuló que la información
genética estaba en los cromosomas.

Oscar Hertwing:
En 1884 estableció que la información
genética se encontraba en la cromatina que
conformaba los cromosomas.

Robert Feulgen:
Utilizando un colorante llamado fucsina logra
teñir al DNA, observando que esta sustancia
se encontraba en todos los núcleos de las
células eucarióticas, especialmente en los
cromosomas.
15
27/10/2024
 APORTE DE:

Frederick Griffith
En 1928 trabajó con una bacteria llamada
neumococo.
Esta bacteria está relacionada con una
enfermedad llamada neumonía.
Griffith observó que los neumococos eran
de dos tipos:
Neumococos lisos, los cuales provocaban
la enfermedad (S).
Neumococos rugosos, los cuales no
provocaban la enfermedad (R). neumococos
También observó que los neumococos
rugosos se podían convertir en
neumococos lisos.

16
27/10/2024
 ¿CÓMO EXPLICÓ ESTO GRIFFITH?

¿Cómo es posible que un neumococo “R” que no provoca la

enfermedad se transforme en uno “S” que si la provoca?
Esto lo explicó con ayuda del siguiente experimento:

1. Inyectó neumococos S o capsulados vivos, a un grupo de

ratones, los ratones murieron a causa de la neumonía; al
analizar su sangre encontró neumococos S vivos.

Neumococos S vivos +

17
27/10/2024
 1. Inyectó neumococos Rugosos sin cápsula vivos a un grupo de
ratones, los ratones permanecieron sanos; al analizar su
sangre encontró neumococos R vivos.

Neumococos R vivos +

1. Inyectó neumococos S o capsulados muertos, a un grupo de

ratones, los ratones permanecieron sanos; al analizar su
sangre encontró neumococos S muertos.

Neumococos S muertos +

18
27/10/2024
 1. Inyectó una mezcla de neumococos R sin cápsula vivos y S
encapsulados pero muertos por calor a un grupo de ratones

Neumococos R vivos + S muertos +

1. Los ratones murieron a causa de la neumonía, al analizar su

sangre encontró neumococos S vivos. Los neumococos R se
convirtieron en S.

Griffith concluye diciendo: Los neumococos “S” muertos

transmitieron algún agente a los “R” vivos para transformarlos
a “S” vivos.
A este agente transformador de las bacterias le dio el nombre
de “principio transformador” y no pudo determinar su
naturaleza.

19
27/10/2024
 EL APORTE DE GRIFFITH

20
27/10/2024
 Papel genético del DNA
Nuevos aportes científicos

21
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 RETOMANDO A GRIFFITH?

Frederick Griffith postuló la existencia de un “principio

transformador de las bacterias”.
El no pudo establecer la naturaleza química de dicho principio
transformador; su trabajo lo continuaron tres investigadores:

APORTE DE:

Oswald Avery, Colin McLeod y Maclyn McCarty:

En 1944 lograron aislar el principio transformador que había
porstulado Griffith.
Encontraron que dicho principio era el DNA.
Establecieron que: “el DNA es el material responsable de la
transformación genética de las bacterias”

22 “El DNA es el material de la

herencia”
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 APORTE DE HERSHEY Y
CHASE 1952

Demuestran: con su
experimento con virus, que el
ADN viral era el causante de la
infección y de la transferencia
genética y no las proteínas que
conforman la cápside o
envoltura viral.
Utilizan elementos
radiactivos como P y S
“marcados”.

23“El DNA es el material de la herencia y no las proteínas”

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 NUEVAS INTERROGANTES

A raíz del descubrimiento de Avery, McLeod y McCarty, surgen

nuevas preguntas con respecto al material hereditario:
¿Cómo es el DNA?
¿En que parte tiene la información genética?
¿Cómo se organiza esta información?
¿A qué se refiere la información que tiene el DNA?
¿Cómo se transmite esta información de padres a hijos?

Estos cuestionamientos fueron resueltos por otros investiga-

dores, entre ellos: Levene, Chargaff, Watson y Crick.

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 APORTE DE:

Phoebus Aaron Levene (1920):

Este investigador ruso, estableció que en la composición química
del DNA participaban las siguientes sustancias:

Cuatro bases nitrogenadas: adenina, guanina, citosina y

timina

Una molécula de azúcar: la desoxirribosa

Un grupo fosfato:
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 APORTE DE:

Erwin Chargaff:
Entre 1949-1951, utilizó una nueva técnica para analizar la
composición de bases nitrogenadas de diversas fuentes de DNA,
logrando concluir lo siguiente:

1. En todo tipo de DNA la cantidad de adenina es igual a la de

timina mientras que la cantidad de guanina es igual a la de
citosina.
A=T y G=C

1. El DNA de tejidos diferentes de la misma especie, tiene la

misma composición de bases nitrogenadas.
1. La composición de bases en el DNA, varía de una especie a
otra.
1. La composición del DNA de una especie no cambia con la
edad o nutrición.
26 Fuentes de DNA: hombre, ternera, oveja, rata, gallina, staphylococcus aureus y levadura
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 APORTE DE WATSON Y CRICK

En 1953, Watson y Crick postularon un modelo

tridimensional para explicar la estructura del
DNA.
Se apoyaron en los trabajos de:
Cristalografía de rayos X de Maurice Wilkins y
Roslind Franklin
Leyes de equivalencias de bases nitrogenadas de Erwin
Chargaff.

Otros aportes de Watson y Crick:

Establecieron un modelo para explicar la
autoduplicación del DNA
Participaron en el desciframiento del código del
DNA o código genético.
“La doble
hélice”
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 WATSON Y CRICK :
LOS DESCUBRIDORES DEL MODELO DEL ADN

“La doble hélice”

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 Estructura de los ácidos nucleicos:
DNA y RNA

Nucleótidos
Polinucleótidos

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 ¿CUÁL FUE EL APORTE DE LEVENE ?

En 1920, Phoebus Aaron Levene, estableció que la unidad

básica de la estructura de los ácidos nucleicos era el
nucleótido.

¿CÓMO ESTÁ FORMADO UN NUCLEÓTIDO ?

El nucleótido tiene tres componentes:

a. Una base nitrogenada: Derivada de las purinas o de las

pirimidinas.

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 a. Una molécula de azúcar: Ribosa o desoxirribosa.

a. Un grupo fosfato: Derivado del ácido fosfórico.

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 ¿CÓMO SE UNEN PARA FORMAR EL NUCLEÓTIDO?

Si tomamos a la molécula de azúcar como el punto de

referencia, podemos decir lo siguiente:

El grupo fosfato se
une al carbono 5 de la
molécula de azúcar.

La base nitrogenada
se une al carbono 1 de
la molécula de azúcar.

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 ¿CUÁNTOS NUCLEÓTIDOS ESTÁN PRESENTES EN LOS
ÁCIDOS NUCLEICOS?

Los nucleótidos reciben el nombre de la base nitrogenada

que aparece en su estructura.
Así que tendremos 5 nucleótidos diferentes en los ácidos
nucleicos:

Nucleótido de adenina.
Nucleótido de guanina.

Nucleótido de citosina.
Nucleótido de timina.
Nucleótido de uracilo.
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 ¿QUÉ ES UN POLINUCLEÓTIDO?

La unión de varios nucleótidos forma un polinucleótido.

Esto es característico de los ácidos nucleicos.
Los principales polinucleótidos son el DNA y el RNA.

¿CÓMO SE UNEN ENTRE SI LOS NUCLEÓTIDOS?

La unión es en dirección 3’ – 5’.

Esto significa que el enlace se inicia en el carbono 3’ de la
molécula de azúcar del primer nucleótido y termina en el
carbono 5’ de la molécula de azúcar del siguiente
nucleótido.

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 Con fórmulas Con figuras
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 ¿QUÉ NUCLEÓTIDOS PARTICIPAN EN EL DNA?

En el DNA, la molécula de azúcar

es la desoxirribosa.

Los nucleótidos son: adenina,

guanina, citosina y timina.

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 ¿QUÉ NUCLEÓTIDOS PARTICIPAN EN EL RNA?

En el RNA, la molécula de azúcar es

la ribosa.

Los nucleótidos son: adenina,

guanina, citosina y uracilo.

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 Estructura de los ácidos nucleicos

Estructura del DNA

Replicación del
DNA
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40
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 ¿QUÉ SE ACEPTABA SOBRE EL DNA?

Para 1952 se aceptaban las siguientes ideas sobre el DNA:

Transporta la información genética.

La información está almacenada a lo largo de las cadenas
de polinucleótidos.
La secuencia de nucleótidos determina la informa- ción
del DNA.
El nucleótido de adenina se aparea con timina, mientras
que el nucleótido de guanina se aparea con citosina.

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 ¿QUIÉN ESTABLECIÓ LA ESTRUCTURA QUÍMICA DEL DNA?

Para comprobar todo lo anterior, era necesario conocer la

estructura tridimensional del DNA.
Esto se logró en 1953 con el trabajo de James Watson y
Francis Crick.

James Dewey Watson Francis Harry

6-Abril-1928 Crick
8-Junio-1916
Estos dos investigadores, utilizaron la técnica de
difracción de rayos X para establecer la estructura del
DNA, a la que llamaron: “la doble hélice”.
Se apoyaron en los trabajos de Erwin Chargaff y el equipo
formado por Rosalind Franklin y Maurice Wilkins.
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 ¿QUÉ ES LA DOBLE HÉLICE?

De acuerdo con Watson y Crick, la estructura del DNA

tiene las siguientes características:

Es una doble cadena de polinucleótidos; las cadenas

son antiparalelas; el extremo 5’ de una de las cadenas
se enfrenta al 3’ de la otra cadena
El nucleótido de adenina se une al de timina a través de
dos puentes de hidrógeno.

El nucleótido de guanina se une al de citosina a tra-vés

de tres puentes de hidrógeno.
Las bases nitrogenadas se unen por enlace covalente al
azúcar.
El grupo fosfato se enlaza a los azúcares adyacentes
43 por medio de enlace fosfodiéster.
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 Con fórmulas Con figuras
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 OTRAS CARACTERÍSTICAS SON

La cadena es helicoidal,
semejante a una escalera de
caracol.

La hélice tiene un diámetro de

2.0 nm; se forma una vuelta
cada 3.4 nm.

Cada vuelta tiene diez

nucleótidos; la distancia entre
cada nucleótido es de 0.34 nm.

1 nm = 10 –9 m.

45 La Doble Hélice

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R
E ¿DÓNDE SE ALMACENA LA INFORMACIÓN EN EL DNA?
P
L
I La información genética se encuentra almacenada en la
C secuencia de nucleótidos.
A Esta información debe permanecer inalterada todas las
C veces que la célula se reproduzca o divida.
I La información debe pasar tal cual a la descendencia.
Ó
N
¿CÓMO SE LOGRA LO ANTERIOR?
D
E
L De acuerdo con Watson y Crick, el DNA forma réplicas de
si mismo.
D Para explicar la forma en que el DNA se duplica,
N propusieron el siguiente mecanismo:
A
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 ¿CÓMO EXPLICAN LA REPLICACIÓN DEL DNA?

1. Por acción enzimática se rompen los puentes de

hidrógeno.
1. La doble cadena se abre a manera de una horquilla,
quedando las bases nitrogenadas expuestas al medio
celular.
1. Las bases expuestas se aparean con los nucleótidos
complementarios que se encuentran libres en el medio
celular.
4. Al finalizar el proceso se observan dos moléculas de
DNA idénticas.

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 Clic para continuar
duplicación
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 La replicación del DNA es semiconservativa, ya que
49en cada cadena existe una sección nueva y otra vieja.
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 EXPERIMENTO DE MESELSON Y STAHL

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 EXPERIMENTO DE MESELSON Y STAHL

Meselson y Stahl probaron la hipótesis de la

52 replicación del ADN. Ellos diseñaron un experimento
en el que marcaban el ADN de la bacteria E. coli con
Nitrógeno pesado N¹⁵,REEPLICACIÓN
SEMICONSERVATIVA. 27/10/2024
 En la replicación del DNA participan varias enzimas,
esta duplicación se manifiesta en una cadena en forma
53contínua y en la otra en forma discontínua ( fragmentos
de Okasaky.
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ETAPAS DE LA REPLICACIÓN
 ADN

FINALIZACIÓN DE LA REPLICACION

La replicación termina
cuando se unen todos los
fragmentos de Okazaki de
la hebra retardada.
 Replicación :
Es el proceso que permite la formación de nuevas
copias de la información genética a partir de una
molécula patrón.

Cada copia de ADN es idéntica a la otra en cantidad y

calidad de información genética.

La replicación requiere de la separación de las 2

cadenas de la doble hélice, esto se logra a través de
una Girasa ( o Topoisomerasa, la cual rompe el giro de
la hélice) y la enzima ADN helicasa (que rompe la unión
de las bases complementarias). Se forma la horquilla de
replicación.

Después actúan las proteínas desestabilizadoras de la

58hélice (estiran la hebra y evitan que se vuelvan a unir
las bases complementarias). 27/10/2024
Cada cadena de polinucleótidos sirve de molde para la
síntesis de una nueva molécula de ADN. La replicación
sigue la regla del apareamiento de bases.

El ADN es sintetizado por enzimas denominadas ADN

polimerasa III ( siempre une el nucleótido en el C3´) que son
necesarias no solo para la replicación del ADN, sino que
también para su reparación.

Esta ADN polimerasa sintetizan ADN sólo en el sentido 5' a

3', lo cual crea un problema porque las 2 cadenas del ADN
son antiparalelas.

Aquella hebra que se enfrenta a la ADN polimerasa con un

extremo 3¨ libre, sintetiza una larga cadena complementaria
continua en la dirección 5' a 3' (se le llama hebra
59
conductora o lider).
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 La otra cadena o hebra que se denomina retardada, la
replicación se efectúa de manera discontinua,
sintetizándose cortos fragmentos de ADN, (siempre en
dirección 5' a 3') que después son unidos por una
ADN ligasa.

Para que la ADN polimerasa actúe en la hebra

retardada se requieren ARN cebador.

Okasaki fue quien descubrió estos segmentos cortos

de ADN (fragmentos de Okasaki) y como era que se
sintetizaban.

El ARN cebador es fabricado por una enzima llamada

primasa y posteriormente degradado por una
ribonucleasa.
60
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 Este ARN cebador posteriormente es retirado por una
Endonucleasa, el espacio es llenado por una ADN
polimerasa que adiciona los nucleótidos de ADN y
terminan de unirse por una ADN ligasa.

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62
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Desde el gen a la proteína
 Transcripción del ADN

https://www.youtube.com/watch?v=KPsnmH666cI
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 ARN POLIMERASA

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 TIPOS DE ARN POLIMERASA

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69
27/10/2024
 TERMINACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN

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 CADENA MOLDE / CADENA CODIFICANTE

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73
27/10/2024
 QUE SUCEDE EN LOS PROCARIOTAS

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 QUE SUCEDE EN LOS EUCARIOTAS

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76
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77
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78
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79
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 ASI SALE EL ARN DEL NUCLEO EN
EUCARIOTAS

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 TIPOS DE RNA

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 RIBOSOMAS: RNA Ribosomal

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 RNA de TRANSFRENCIA

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84
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 RNA DE TRANSFERENCIA EN EL
CITOPLASMA

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 TRADUCCIÓN

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 El código genético descifrado

UAA UGA
UAG

AUG
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90
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91
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92
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93
27/10/2024
 Polisomas

https://youtu.be/MrRh1m0vmFE?si=psDwE-XHYJn2J55t
Destinos para las proteínas
recién traducidas
Modificaciones post-
traduccionales
 UNMSM Facultad de
Medicina.
Estudios Generales

Mecanismos de Regulación de la Expresión

Génica:
En Procariotes y Eucariotes: Elementos de
Regulación a nivel del DNA. Modelos de expresión
génica. Modelo del operon lactosa. Modelo de
Britten y Davidson.
REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN
GENÉTICA
Objetivo general
El alumno identificará los diferentes
mecanismos que operan en la regulación de la
expresión genética en procariontes y
eucariontes
1. REGULACIÓN DE LA
EXPRESIÓN
GENÉTICA
EN PROCARIOTES
 La regulación de la expresión de los genes se
establece de la necesidad de controlar la actividad
de las enzimas o de las proteínas en general, en
momentos precisos de la vida de la célula

POSITIVO O NEGATIVO
ALOSTERISMO POR PRODUCTO,
RETROALIMENTACIÓN

a) MODIFICACIONES POST-
REGULACIÓN TRADUCCIONALES
REGULACIÓN COVALENTE
DE LA b) ZIMÓGENOS
ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA
CELULAR ISOENZIMAS

SÍNTESIS
CANTIDAD DE
ENZIMA
DEGRADACIÓN
 Regulación a nivel
de:
Transcripció
n
Traducción

DNA

Transcripción

mRNA Traducción
PROTEÍN
 Los genes se expresan con diferente
eficiencia y se regulan por distintos
mecanismos

Aumenta el
número de
transcritos

Resultando
en un
aumento
en la Regulación transcripcional
cantidad
de proteína
 Los genes se expresan con diferente
eficiencia y se regulan por distintos
mecanismos

A B B B B B
B B B B B

Regulación traduccional B B B B B
B
En bacterias, el principal nivel de
regulación es el transcripcional

GENE CON GENE CON

Regulación negativa (-)

Regulación positiva (+)

El gene “se apaga”

El gene “se enciende”
(no se transcribe o se
(se empieza a transcribir o se transcribe menos)
transcribe más)
El modelo del Operón lac

F. Jacob J. Monod A. Lwoff

Expresión inducible
La lactosa es hidrolizada por la
-galactosidasa para generar
glucosa y galactosa

Alolactosa
La  galactosidasa
también convierte parte
de la lactosa en
alolactosa
La síntesis de la -galactosidasa se
induce cuando hay lactosa en el medio

La -galactosidasa
se encuentra en
niveles muy bajos
dentro de la célula
si no hay lactosa
en el medio.

Su producción se
induce cuando se
agrega lactosa al
medio y se elimina
la glucosa de éste.
En bacterias los genes están organizados
en operones por lo que la expresión es
coordinada

DNA
RNA polimerasa
 Componentes de un operón

DNA
RNA polimerasa

P: promotor de los genes estructurales E1, E2, E3 y E4

R: gen regulador (codifica una proteína represora que
regula la transcripción de los genes estructurales)
O: operador (secuencia reconocida por la proteína
represora que impide la transcripción)

Un operón es un conjunto de genes, localizados contiguamente en el

DNA, que obedece a las mismas señales de encendido o apagado.
Los operones están formados por genes
estructurales y una región de control

Galactosidasa Permeasa Transacetilasa

 El represor unido al sito operador
previene la transcripción de los
genes z, y, a

Cuando no hay lactosa en el medio, el

operón lac está apagado
 Cuando hay lactosa en el medio, el
represor se disocia del operador y los
genes z, y, a pueden ser transcritos

El inductor se une al represor y éste

ya no se une al DNA. La RNA
polimerasa reconoce al promotor y
transcribe los genes estructurales
 El represor unido al sito operador
Operón previene la transcripción de los genes z,
reprimido y, a

Operón
inducido
 Galactosidasa Permeasa Transacetilasa

El inductor se une al represor y

entonces éste ya no se une al DNA,
permitiendo la transcripción
El Operon lac se activa para poder
utilizar a la lactosa como fuente de
carbono
Genes estructurales

Gen regulador
 Normalmente, hay una expresión baja del
operón lac lo que permite que haya un poco
de -galactosidasa en la célula
La lactosa es convertida a alolactosa
por la  galactosidasa. La alolactosa
es el inductor del operón lac.
Aún en ausencia del represor, la activación del operón lac
requiere la pariticipación de un activador: CRP o CAP

Activador CRP. cAMP receptor protein CRP une cAMP

También se le llama CAP: Catabolite Activator Protein.

Este activador regula la expresión con base en los niveles de

glucosa presentes en el sistema

Si los niveles de glucosa son altos, hay poco cAMP.

Si los niveles de glucosa son

bajos, hay mucho cAMP.
Cuando los niveles de cAMP se incrementan, éste
se une a la CRP

El complejo CRP-cAMP se une al promotor del operón de lactosa

y causa un giro en el DNA que facilita la unión de la RNA
polimerasa al promotor, activándolo.
El complejo CRP-cAMP se une al promotor del operón de
lactosa facilitando la unión de la RNA polimerasa al
promotor e incrementando 50 veces la transcripción
¿Cómo se regula el operón lac cuando hay
glucosa en el medio?
+ glucosa
– lactosa

Represor

RNApol

No se transcribe Regulación
negativa
Regulación del operón de lactosa
Regulación Negativa

Cuando hay glucosa y no hay lactosa, el represor está activo

y el operón está apagado, no hay transcripción y no hay 
galactosidasa
 ¿Qué le pasa al operón lac en
presencia de lactosa aún cuando
exista glucosa?

+ glucosa
inductor (lactosa)
+ lactosa

RNApol

Debido a la presencia de lactosa el represor se inactiva, por lo que el

operón se transcribe, aunque a un nivel bajo (transcripción basal).

La célula prefiere usar la glucosa que otro azúcar

Cuando hay lactosa y hay glucosa los niveles de cAMP son bajos.
La síntesis del mRNA lac es pobre.
¿Qué le pasa al operón lac cuando
hay lactosa en el medio y no hay
glucosa?
- glucosa
Activador + lactosa

Regulación
positiva
La transcripción es alta
Regulación positiva.
Inducción.

Cuando hay lactosa y la glucosa es baja, los niveles de cAMP

son altos. El cAMP se une con la CRP que activa a la RNApol
para transcribir al operón lac. Por lo tanto, se sintetiza mucho
mRNA lac.
¿Qué le pasa al operón lac cuando no
hay glucosa ni tampoco lactosa?
glucosa
Como el represor está unido al promotor lactosa

RNApol

¡No hay transcripción!

Aunque los niveles de cAMP sean

altos y el activador esté presente....
 Regulación negativa

En
presencia
de glucosa y
ausencia de
lactosa

En
presencia
de lactosa y
ausencia de
glucosa
Regulación positiva

+ lactosa

[glucosa]

[AMPc]
Represión por catabolito del operón lac
(Elección del mejor azúcar a metabolizar)

CAP= Catabolite activator protein

Activación del operón lac

El operador actúa en cis y regula a los genes que
están ligados al lado de éste
 El gen I actúa en trans

La proteína codificada por el gen I actúa reconociendo

al operador, por lo que el gen I no necesita estar al
lado de un operador para regularlo.
Secuencia del operador lac al que se une el
represor I

Sitio del promotor lac al que se une CAP

El operón lac es un ejemplo de operón inducible, es decir aquel en el
cual la presencia de una sustancia específica (en este caso la lactosa)
induce la transcripción de los genes estructurales.

El operón lac también se encuentra bajo control positivo. Cuando en el

medio hay glucosa, la bacteria metaboliza este monosacárido
ignorando cualquier otra fuente de carbono disponible. Cuanto menor
es la concentración de glucosa en el medio, mayor es la concentración
de cAMP, el cual tiene influencia en la activación del operón lac.

El cAMP actúa uniéndose a una proteína fijadora de cAMP denominada

CAP (proteína activadora de catabolitos). Cuando la concentración de
este complejo es alta (poca glucosa), el CAP-cAMP se fija a un sitio
específico del promotor lac, aumentando la afinidad de la región
promotora para la RNA polimerasa, lo que estimula la transcripción del
operón.

Para que se exprese el operón lac deben darse dos condiciones

en el medio: que esté presente la lactosa y que la concentración
intracelular de glucosa sea baja.
 Operón de triptófano
Este operón incluye cinco genes de enzimas involucradas en la
biosíntesis de triptófano. Bajo control del promotor (Ptrp) y del
operador (Otrp)
El represor se une a triptófano y este complejo se une al operador
reduciendo la transcripción 70 veces aproximadamente.
 El Operón Trp

Sin triptófano
en el medio

De manera normal, Escherichia coli está expresando su

operón Trp. En este caso el represor codificado por el gen
regulador, es inactivo.
¿Qué ocurre cuando hay triptófano en
el medio?

Complejo Represor-Corepresor
+ Triptófano
en el medio

El triptófano (correpresor) se une al represor, activándolo. Ahora el

represor se puede unir al operador impidiendo la transcripción del
operón trp.
Regulación negativa
Comparación entre Operón Lac y Operón Trp

OPERÓN Lac OPERÓN Trp

Operón inducible, se expresa en Operón reprimible, se expresa en

presencia de lactosa. ausencia de triptófano.

La lactosa es el inductor El triptófano es el co-represor

El represor se sintetiza en forma

El represor se sintetiza en forma
inactiva. Actúa en presencia del co-
activa. Actúa solo.
represor.

Sus enzimas participan en un vía Sus enzimas participan en una vía

catabólica anabólica
Regulación de la expresión
genética a nivel traduccional
 Atenuación del operón Trp

Se basa en la existencia de secuencias específicas en el mRNA

policistrónico Trp, en la región 5’ del mRNA, que al ser
traducidas por el ribosoma y dependiendo de la presencia de
tRNATrp, pueden controlar la transcripción .
 En el operón de triptófano hay una región
atenuadora en la que dos codones para Trp se
encuentran muy juntos

Cuando los niveles de Trp son altos, el ribosoma traduce rápidamente el

mRNA incluyendo los dos codones de Trp. Esto favorece la formación de
un tallo-asa que provoca la terminación de la transcripción.
Cuando los niveles de Trp son bajos, el ribosoma se detiene en los
codones de Trp, por lo que no se forma el tallo-asa y la transcripción
continua.
 Mecanismo de atenuación
Se basa en la presencia de 4 secuencias invertidas repetidas
en el mRNA capaces de formar tallos-asa que pueden pausar
la traducción y la transcripción.

+ triptófano tRNA-Trp El ribosoma NO se detiene

En presencia de trp hay

mucho tRNAᵗʳᵖ por lo
que la traducción es
rápida, esto hace que
se forme un tallo-asa en
la región 3-4 que
bloquea la transcripción.

Se inhibe la transcripción y traducción del resto del operón

 Mecanismo de atenuación

– triptófano tRNA-Trp El ribosoma SE DETIENE

En ausencia de trp hay

poco tRNAᵗʳᵖ por lo que
la traducción es lenta.
Esto hace que se forme
un pasador en la región
2-3 que permite que la
transcripción del resto
del operón continúe.

La transcripción y traducción del resto del operón se lleva a cabo

Regulación del operón trp
 Regulación por posición del gen en el
operón

Traducción más eficiente Traducción menos eficiente

Regulación por Shine-Dalgarno

Traducción
más eficiente

Traducción menos
eficiente
 EXPRESION DE LOS
GENES
Regulación precisa y oportuna ( activar y desactivar
Genes)

Permite:

A. A las células responder eficazmente a los entornos

cambiantes (sobrevivir en ambientes complejos)

B. Diferenciación celular y cooperación intercelular (

organismos multicelulares)

C. Velocidad de trascripción.
 TIPOS DE REGULACION
GENETICA
a. Regulación positiva: Cuando la expresión de la información genética
(trascripción) inicia o se incrementa en forma cuantitativa por la
presencia de un elemento regulador especifico (regulador positivo o
activador).

b. Regulación negativa: Cuando la expresión de la regulación genética esta

disminuida por la presencia de un elemento regulador especifico
(regulador negativo o represor)

c. Regulación doble – negativa: (desrepresion) actúa como regulación

positiva .- un efector que inhibe la función de un regulador negativo.
TIPOS DE RESPUESTA TEMPORAL (TASA DE
EXPRESION) A UNA SEÑAL REGULADORA
1. Respuesta tipo A:
Se caracteriza por un
aumento de la tasa de
expresión génica que depende
de la presencia continua de la
señal inductora (
procariotas; cambio repentino
de la concentración
intracelular de un nutriente )
eucariotas (hormonas y
factores de crecimiento).
TIPOS DE RESPUESTA TEMPORAL (TASA DE
EXPRESION) A UNA SEÑAL REGULADORA.
2. Respuesta B:
Elevada tasa de la expresión
génica que es temporal aun
con la presencia continua de
la señal reguladora
fenómeno de respuesta:
desensibilizacion –
recuperación ( aparición
temporal de un producto
génico especifico)
TIPOS DE RESPUESTA TEMPORAL (TASA DE
EXPRESION) A UNA SEÑAL REGULADORA
1. Respuesta C:
Se observa en presencia de la
señal reguladora como una tasa
elevada de la expresión génica
que persiste de manera
indefinida aun después de la
terminación de la señal :

a. Alteración irreversible y
hereditaria
b. Desarrollo de la función
diferenciada en un tejido u
órgano
REGULACION DE LA EXPRESION
GENICA
Aunque el control de la expresión génica
puede producirse en múltiples pasos,
muchos fenómenos reguladores ocurren
en la transcripción.
El inicio y la regulación de la transcripción
requiere de la colaboración de un grupo de
proteínas que en conjunto se conocen
como factores de transcripción
 EXPRESION DE LOS
GENES
Las mayoría de los mecanismos
que utilizan los seres vivos para
regular la expresión de los genes
requiere interacciones DNA –
proteína.

Numerosos contactos (frecuencia

alrededor de 20 o mas) con
participación de interacciones
hidrófobas, enlaces de hidrogeno
y enlaces iónicos entre los
aminoácidos y la base de los
nucleótidos dan lugar a una unión
muy especifica DNA- proteína.
 FAMILIAS DE LAS PROTEINAS
ESPECIFICAS (REGULADORAS)
DEL DNA (FACTORES DE
TRANSCRICCION)
a. Hélice – vuelta – hélice

b. Hélice – lazo – hélice

c. Cremallera de leucina

d. Dedo de zinc

Agentes singulares
regula- dores de los
genes
 EXPRESION DE LOS GENES EUCARIOTAS

Se regula en los siguientes niveles (mecanismos):

a. Control genómico.

b. Reordenamiento génico.

c. Procesamiento del RNA.

d. Empalme alternativo del RNA.

e. Transporte del RNA desde el núcleo al citoplasma.

f. Regulación de estabilidad del mRNA.

Se mide por las variaciones de las cantidades y actividades de los

productos De los genes producidos
 CONTROL GENOMICO
Solo una fracción de los genes se llega a expresar en cada una de las diversas clases de células.

Expresión se ve afectada por cambios de la organización estructural del genoma ; metilación

del DNA, los residuos de desoxicitidina (silencia la expresión) y la acetilación de las histomas
(impulsa la expresión de los genes ) la desacetilacion efecto contrario (residuo de licina)

Proteínas que afectan la expresión tiene actividad acetilasa o desacetilasa.

La cromatina condensada ; interviene en las modificaciones covalentes de las histonas.

Ejemplos menos frecuentes;

a. Reordenamiento; se transcribe el gen que se ha creado, eliminando varias secuencias de

DNA que separan la información que es necesaria para la síntesis del producto génico

b. Amplificación de los genes; amplificación selectiva de los genes que codifican la síntesis de
un producto génico (primeras fases del desarrollo)
 PROCESAMIENTO DEL
RNA
El corte y empalme alternativo : la unión de
diferentes combinaciones de exones da lugar a la
formación de mRNA de diferentes proteínas

Edición del RNA: algunas células cambian las

propiedades codificantes de las moléculas de mRNA
recién sintetizadas (modificación química: se pierde
o se añaden determinadas bases)
 TRANSPORTE DE
RNA
Los eucariotas regulan el trafico
molecular dentro y fuera del
núcleo.

La exportación de las moléculas

procesadas requiere la unión del
extremo 5´ del mRNA dentro del
hnRNA a la proteína de unión a la
caperuza ( CBP) y la presencia de
determinadas proteínas que
componen una señal nuclear de
exportación.
 CONTROL DE LA
TRADUCCION
Las células pueden responder a diversos estímulos
alterando de forma selectiva la síntesis de proteínas

La modificación covalente de diversos factores de

traducción ( proteínas no ribosómicas que ayudan
en el proceso) alteran la tasa global de síntesis de
proteínas y/o potencian la traducción de mRNA
especifico.
TRANSDUCCION DE SEÑAL Y EXPRESION DE
LOS GENES
En los organismos multicelulares la proliferación de
las células esta regulada por
una elaborada red de moléculas señalizadoras:

1. Cada tipo de señal puede activar una o varias rutas

2. Las rutas de transducción de señal pueden ser

convergentes o divergentes
Regulación de la expresión génica en
eucariotas
Regulación transcripción:
Interacción elementos cis y factores trans
Elementos cis: promotores, intensificadores (enhancers) y
silenciadores
Factores trans: factores de transcripción con dos dominios. Unión
DNA e Inicio transcripción (algunos deben unirse antes a la RNA pol)
Dominios unión al DNA (diferentes clases)
Motivo dedo de zinc
Motivo hélice-giro-hélice
Motivo cremallera de leucina
Motivo puños de cobre

Hormonas esteroides

Remodelamiento de la cromatina por proteínas y activación génica

Metilación del DNA

Regulación
postranscripcional
Procesamiento alternativo 67
Patrones de
expresión de genes
herramientas

68
Regulación de la expresión génica en eucariotas

Regulación transcripción:
Interacción
elementos
cis y factores trans

69
Regulación de la expresión génica en
eucariotas
Regulación transcripción:
Interacción elementos cis y factores trans
Elementos cis: promotores, intensificadores (enhancers)
y silenciadores

70
Regulación de la expresión génica en
eucariotas
Regulación transcripción:
Interacción elementos cis y factores trans
Factores trans: factores de transcripción con dos dominios. Unión DNA
e Inicio transcripción (algunos deben unirse antes a la RNA pol)
Dominios unión al DNA (diferentes clases)
Motivo dedo de zinc Motivo hélice-giro-hélice
Motivo cremallera de leucina Motivo puños de cobre

71
Regulación de la expresión génica en
eucariotas

72
Regulación de la expresión génica en
eucariotas
Regulación transcripción:
Interacción elementos cis y factores trans
Factores trans: factores de transcripción con dos dominios.
Unión DNA e Inicio transcripción (algunos deben unirse
antes a la RNA pol)

Hormonas esteroides

73
Regulación de la expresión génica en
eucariotas

Regulación transcripción:
Remodelamiento de la cromatina por
proteínas y activación génica: código de
las histonas (colas de histonas cuyos
residuos de lisina pueden modicarse
mediante la unión de grupos acetilo y
metilo)

74
Regulación de la expresión génica en
eucariotas
Regulación transcripción:
Metilación del DNA en las regiones reguladoras de un gen que
se hereda (herencia epigenética)-> Impronta parental (Parental
imprinting)

Metiltransferasa

Citosina Metil-Citosina

75
Regulación de la expresión génica en
eucariotas

Regulación transcripción:
Regulación postranscripcional
Procesamiento alternativo

RNA interference, microRNAs (miRNA)

Procesamiento alternativo

76
Regulación de la expresión génica en
eucariotas
Regulación transcripción:
Regulación postranscripcional
Procesamiento alternativo
RNA interference, microRNAs
(miRNA)

microRNAs

77
Referencias Bibliograficas

https://youtu.be/3OTVaV_0Vv8?si=HX71GevER2aCe-zH
https://youtu.be/gyNQ_gZfJJ0?si=gRKOuvjU1Hhwz6xN
 UNMSM Facultad de
Medicina.
Estudios Generales

Técnicas en biología molecular:

Tecnología del ADN recombinante y clonaje de genes. Bibliotecas
genómicas. Ingeniería genética. Los cultivos genéticamente
modificados, beneficios y riesgos. Terapia génica.

Dra. Nancy Rojas Morán

nrojasm@unmsm.edu.pe
COMPETENCIAS:
Al finalizar la
clase el alumno

• 1. Explica el proceso de
clonación.
• 2. Explica los distintos tipos de
vectores utilizados en la
clonación.
• 3. da ejemplos de las
aplicaciones prácticas de la
tecnología del ADN
recombinante.
BIOTECNOLOGÍA
• Tecnología que usa sistema biológicos (organismos vivos o parte de
estos) para desarrollar o crear diferentes productos u organismos
modificando el genoma de estos.
• 1960s-1970s Biologia Molecular Recombinante(rADN) Organismos
Geneticamente Modificados Transgènicos

• 2000s :Edición Genética, CRISPS-Cas9 (tijeras genéticas)

Ingenieria Genetica
 La ingeniería genética (también denominada modificación genética)
es un proceso que emplea tecnologías de laboratorio para alterar la
composición del ADN de un organismo. Eso puede incluir un cambio
en un único par de bases (A-T o C-G), la deleción de una región del
DNA o la adición de un nuevo segmento de ADN. Por ejemplo,
mediante ingeniería genética se puede agregar un gen de una
especie a un organismo de otra especie para producir un rasgo
deseado. En su uso en la investigación y la industria, la ingeniería
genética se ha aplicado a la producción de terapias contra el cáncer,
la elaboración de levaduras, y plantas y ganado modificados
genéticamente, producción de vacunas entre otros usos.
 ADN RECOMBINANTE
 El ADN recombinante (rADN) es una tecnología que utiliza enzimas
para cortar y unir secuencias de ADN de interés. Las secuencias de
ADN recombinado se pueden colocar en unos vehículos llamados
vectores que transportan el ADN hacia el lugar adecuado de la
célula huésped donde puede ser copiado o expresado.
 Trozos de ADN, como ADN humano, pueden ser diseñados
sintéticamente de manera que puedan ser copiados, o replicados
en bacterias o levaduras. Este proceso implica incorporar los
elementos adecuados en una secuencia de ADN, y luego
trasladarlos a una célula bacteriana o a una levadura, con los
elementos que dan las instrucciones a la célula bacteriana o de
levadura para copiar este ADN al mismo tiempo que copian la suya
propia. Este proceso se conoce como clonación de ADN y resulta
en ADN clonado que a menudo se llama ADN recombinante.
PLASMIDO
• Un plásmido es una molécula
pequeña de ADN circular que se
encuentra en las bacterias y algunos
otros organismos microscópicos.
• Los plásmidos están separados
físicamente del ADN cromosómico y
se replican de manera
independiente.
• Habitualmente tienen un número
reducido de genes (cabe señalar,
algunos asociados a la resistencia a
los antibióticos), se pueden
transmitir de una célula a otra.

• Los científicos utilizan métodos de

ADN recombinante para insertar en
un plásmido genes que desean
estudiar. Cuando el plásmido se copia
a sí mismo, también hace copias del
gen insertado.
 VECTOR
• Un vector, en lo que se
relaciona a la biología
molecular, es una molécula
de ADN (con frecuencia un
plásmido o virus) que se
utiliza como vehículo para
transportar un segmento
particular de ADN al interior
de la célula huésped como
parte de una técnica de
clonación o ADN
recombinante.
• El vector habitualmente
ayuda en la replicacióno
expresión de la secuencia de
ADN insertado en el interior
de la célula huésped.
Vector
• Por lo general es un vehiculo para transportar una secuencia de ADN, e introducirlo en otro lugar. Entonces, lo
que hace un vector es permitir que el ADN de interés se propague en el organismo que se ha elegido para el
estudio.
• Este procedimiento ha dado origen de la tecnología del ADN recombinante: en donde se hacen copias del
ADN, y este se inserta en lo que se conoce como plásmidos.
• Los plásmidos son una especie de mini-cromosomas bacterianos. Ellos tienen su propia manera de replicarse,
y lo que hace que funcione es que también llevan uno o dos genes en los que los hacen resistentes a
antibióticos específicos.
• Así que si usted puede insertar el gen que le interesa en un plásmido, se pueden seleccionar para las bacterias
que han incluido estos plásmidos y haciéndolas crecer con un antibiótico que, si no lo han tomado, los
matarían. De modo que es un vector plasmídico para integrar una determinada secuencia de ADN en una
bacteria.
• Asi se puede aislar una colonia de bacterias y clonarlas, luego hacerlas crecer y así es como se propagan. Hay
otros vectores que son más grandes y tienen múltiples lugares de orígenes de replicación, y estos se conocen
como cromosomas artificiales bacterianos, que pueden manejar piezas mucho más grandes de ADN. Hay
cromosomas artificiales de levadura que permiten fragmentos muy grandes de ADN que se cultivan en células
de levadura.
• Y recientemente, cromosomas artificiales humanos han sido desarrollados para permitir introducir enormes
trozos de ADN en las células humanas. Así un vector es realmente sólo un medio para tomar un pedazo de
ADN que le interesa e insertarlo, seleccionarlo, e identificarlo en el organismo donde se desea propagar.
. Corte del ADN

• Enzimas de restricción: Estas enzimas reconocen secuencias específicas

de ADN y cortan la doble hélice en puntos precisos, generando
extremos cohesivos o romos.
• Generación de fragmentos: El ADN genómico y el vector de clonación
son cortados con las mismas enzimas de restricción para generar
extremos compatibles.
Unión del ADN al vectorADN ligasa
• Unión del ADN al vectorADN ligasa: Esta enzima une los
extremos cohesivos o romos de los fragmentos de ADN,
formando una molécula de ADN recombinante.
• Vector de clonación: Suele ser un plásmido bacteriano que
contiene un origen de replicación, un gen de resistencia a
antibióticos (como marcador de selección) y un sitio de
clonación múltiple (MCS) donde se insertan los fragmentos
de ADN.
Transformación
• Introducción del ADN recombinante en la célula huésped
Transformación: El ADN recombinante se introduce en células
bacterianas competentes mediante un proceso llamado
transformación.
• Competencia: Las células bacterianas se hacen competentes para la
transformación mediante tratamientos químicos o físicos que
aumentan la permeabilidad de la membrana celular.
Selección de las células transformadas

• Medios de cultivo selectivos: Se utilizan medios de cultivo

que contienen el antibiótico correspondiente al gen de
resistencia presente en el vector. Solo las bacterias que han
incorporado el plásmido con el gen de resistencia
sobrevivirán.
• Confirmación: La presencia del ADN recombinante en las
colonias bacterianas se puede confirmar mediante técnicas
como la PCR o el análisis de restricción.
Amplificación del ADN clonado

• Cultivo bacteriano: Las células bacterianas

transformadas se cultivan en un medio líquido o
sólido para obtener un gran número de copias del
ADN recombinante.
They are circular DNA molecules that
replicate separately from the host
chromosome.

Size: Up to 20 kbp
Universidad de Piura
pBR322 plasmid
 Important features
of the pBR322
plasmid:

1.- A replication source.

2.- Two antibiotic
resistance genes (tetR
and ampR).
3.- Several unique
sequences of
recognition of
restriction enzymes.
4.- Small size (4361bp).
Universidad de Piura
 Important features:
1.- About 1/3 of the phage genome λ is
not essential and can be replaced with
foreign DNA.
2.- DNA is packaged in infectious phage
particles only if they are between
~40 and ~53Kb in length.
Bibliotecas genómicas

Universidad de Piura
Cosmido

Universidad de Piura
BAC (Bacterial Artificial Chromosome)

Useful for cloning very large DNA fragments (between 100 to

300 Kb).
YAC (Yeast Artificial Chromosome)

1.- An origin of replication.

2.- Two selection markers.
3.- Specialized sequences (derived from centromeres and
telomeres , chromosome regions necessary for stability
and proper segregation during cell división).
REACCIÓN EN CADENA
DE LA POLIMERASA
PCR
 ¿Qué es la PCR?
• La Reacción en Cadena de la
Polimerasa (PCR)
• La PCR es una técnica de laboratorio
que permite amplificar (crear
muchas copias) de una secuencia
específica de ADN. Es como hacer
fotocopias de un pequeño párrafo
dentro de un libro, pero a nivel
molecular. Gracias a la PCR,
podemos estudiar genes específicos,
diagnosticar enfermedades y realizar
muchas otras aplicaciones en
biología molecular.
 ¿Cómo funciona?
• La PCR se basa en un ciclo térmico que se
repite muchas veces. Cada ciclo consta de
tres etapas:
• Desnaturalización: Se calienta la muestra
para separar las dos hebras de ADN.
• Hibridación o annealing: Se enfría la
muestra para que los cebadores (pequeños
fragmentos de ADN complementarios a la
secuencia que queremos amplificar) se
unan a las hebras de ADN.
• Extensión: Se eleva la temperatura y una
enzima llamada ADN polimerasa comienza
a sintetizar nuevas hebras de ADN a partir
de los cebadores.
¿Para qué sirve la PCR?

• La PCR tiene muchas aplicaciones, entre las que destacan:

• Diagnóstico de enfermedades: Detección de virus, bacterias y
enfermedades genéticas.
• Análisis forense: Identificación de personas a partir de muestras de
ADN.
• Investigación científica: Estudio de genes, evolución y biodiversidad.
• Biotecnología: Producción de proteínas, creación de organismos
modificados genéticamente.
https://youtu.be/mpRy8CSAISs?si=Qs4WeYcn26F0UdPO
ELECTROFORESIS
BIBLIOTECA GENOMICA
¿Qué es una biblioteca genómica?

• Una biblioteca genómica es una colección de fragmentos

de ADN clonados, provenientes del genoma completo de
un organismo. Estos fragmentos se insertan en vectores
(como plásmidos o bacteriófagos) y se transforman en
células huésped (generalmente bacterias).
• Cada célula huésped contiene un fragmento de ADN
diferente, y el conjunto de todas las células constituye la
biblioteca.
¿Para qué sirven las bibliotecas genómicas?
• Aislamiento de genes específicos: Si queremos estudiar un gen en
particular, podemos buscarlo dentro de la biblioteca utilizando sondas
moleculares o técnicas de PCR.
• Análisis de la estructura y función de los genes: Al tener fragmentos
de todo el genoma, podemos estudiar la organización de los genes, los
elementos reguladores y las secuencias repetitivas.
• Estudios evolutivos: Comparando bibliotecas genómicas de diferentes
organismos, podemos inferir relaciones evolutivas y estudiar los
mecanismos de la evolución molecular.
• Producción de proteínas recombinantes: Los genes de interés pueden
ser expresados en sistemas heterólogos para producir proteínas en
grandes cantidades.
¿Cómo se construye una biblioteca genómica?

• Extracción del ADN genómico: Se extrae el ADN de las células de un

organismo.
• Fragmentación del ADN: El ADN se fragmenta en trozos de un
tamaño adecuado para ser clonados.
• Ligación al vector: Los fragmentos de ADN se ligan a vectores que
contienen un origen de replicación y un marcador de selección.
• Transformación de células huésped: Los vectores recombinantes se
introducen en células huésped (generalmente bacterias).
• Amplificación de la biblioteca: Las células transformadas se cultivan
en medios selectivos para obtener un gran número de clones, cada
uno conteniendo un fragmento de ADN diferente.
¿Qué es la biblioteca de ADNc?

• La biblioteca de ADNc se construye seleccionando un tipo de tejido o

célula. Luego, el ARNm se aísla de esa célula o tejido. Se hace una
copia de ADN de la molécula de ARNm utilizando enzima
transcriptasa inversa de enzima específica. Entonces, la biblioteca de
ADNc contiene ese ADN particular que está presente en el ARNm. En
esta biblioteca no hay intrones ni secuencias de ADN. En esta
biblioteca, todos los clones son completos. Además, es necesario un
clon de ADNc para seccionar células para la producción de proteínas o
para ensayos basados ​en células.
 Biblioteca genómica Biblioteca de ADNc

Una biblioteca genómica es una

colección del ADN genómico total Una biblioteca de CDNA es una
combinación de fragmentos de
de un solo organismo. El ADN se CDNA clonados insertados en una
Definición almacena en una población de colección de células huésped, que
vectores similares, cada uno de juntas forman una parte del
los cuales contiene un inserto de transcriptoma del organismo.
ADN diferente.

Expresión Genoma completo Solo genes específicos.

Talla Más grande Menor
Intrones Presente Ausente

Utiliza plásmidos, cósmidos, fagos No tiene intrones, por lo que

Vector lambda, YAC y BAC para la utiliza plásmidos, fagémidos, fagos
acomodación de grandes lambda para acomodar pequeños
fragmentos. fragmentos.
Aplicaciones Medicas
INSULINA
HORMONA DE CRECIMIENTO
 BIBLIOGRAFÍA SUGERIDA:

Alberts B, Johnson A, Lewis J, Morgan D, Raff J, Roberts M, Walter P. Biología Celular y

Molecular. 6a ed. Barcelona: Ediciones Omega; 2016.

De Robertis E, Hib J. Biología Celular y Molecular. 16a ed. Buenos Aires: Editorial Promed
Hipocrático; 2012.

Cooper Geoffrey M. y Hausman Robert E. La célula . 5a ed. Marban Ed. 2011

Lodish H, Berk A, Matsudaira P, Kaiser C, Krieger M, Scott M, Zipursky L, Darnell J. Biología

molecular y celular. 5a ed. Médica Panamericana; 2005

Todas las figuras, gifs, videos han sido recopilados de la web con fines netamente
educativos.

62
Ciclo Celular – Control del Ciclo.
Mitosis y Meiosis - Etapas
El Ciclo Celular: Un
Viaje por la Vida de
una Célula
El ciclo celular es el proceso fundamental de
la vida celular. Comprende una serie de
eventos que llevan a la división y
reproducción celular. Puede durar pocas
horas o requerir varios dias, dependera del
tipo de célula y los factores internos. Su
NM

importancia radica en el crecimiento,

desarrollo y reparación de tejidos en los
organismos.
Importancia del Ciclo
Celular
Crecimiento y Reparación de
Desarrollo Tejidos
Las células se dividen
El ciclo celular permite para reemplazar
el aumento del número células dañadas o
de células en muertas en tejidos
organismos en lesionados.
crecimiento.

Reproducción
Celular
Asegura la continuidad de la vida al producir nuevas
células para la siguiente generación.
Fases del Ciclo Celular

1 Fase G1
La célula crece y se prepara para la división.
Sintetiza proteínas y organelos.

2 Fase S
Se replica el ADN. Cada cromosoma se
duplica para formar cromátidas hermanas.

3 Fase G2
La célula continúa creciendo y se prepara
para la mitosis.

4 Fase M
Ocurre la mitosis y la citocinesis. La célula se
divide en dos células hijas.
Fase GAP 1- G1
 Fase G0

Células madres o progenitoras

Células musculares, neuronas, adipocitos,
fibroblastos, condrocitos
Fase S o de Síntesis
Fase G2
FASE M
DIVISIÓN CELULAR
DIVISIÓN Celular
 Muchas actividades características de la
célula siguen ocurriendo durante todo el
ciclo celular
En todo momento, la célula está:
1. Sintetizando algunas
macromoléculas y degradando
otras
2. Regulando la entrada de algunas
sustancias y la salida de otras.
3. Controlando su movimiento interno
4. Respondiendo a una variedad de
estímulos
CONTROL DEL CICLO CELULAR
Puntos de Control del Ciclo
Celular

1 G1/S 2 G2/M
Verifica si la célula está lista Asegura que la replicación
para entrar en fase S. Evalúa del ADN se ha completado
el tamaño celular y las correctamente antes de la
condiciones ambientales. mitosis.

3 Metafase
Confirma que todos los cromosomas están correctamente unidos al
huso mitótico antes de la anafase.
REGULACIÓN DEL CICLO CELULAR
FACTORES QUE REGULAN EL CICLO
CELULAR
REGULACIÓN DEL CICLO
CELULAR

FACTOR PROMOTOR DE LA MADURACIÓN FPM

FACTOR PROMOTOR DE LA MADURACIÓN FPM
 Ciclinas y CDKs: Los Directores del Ciclo
Ciclinas CDKs Complejos Ciclina-
CDK
Proteínas reguladoras cuya Quinasas dependientes de Actúan como interruptores
concentración varía ciclinas. Son enzimas que moleculares que controlan la
cíclicamente durante el ciclo fosforilan otras proteínas progresión del ciclo celular.
celular. Se unen a las CDKs para regular su actividad.
para activarlas.
En mamíferos, cuatro clases diferentes de ciclinas se han
definido sobre la base de la etapa del ciclo celular

Complejo CDK que

Ciclina
Ciclina-CDK acompaña

G₁-CDK ciclina D* CDK4, CDK6

G₁/S-CDK ciclina E CDK2

S-CDK ciclina A CDK2

M-CDK ciclina B CDK1**

*Tres ciclinas D en mamíferos: D1, D2, and D3

**CDK1 es el mismo que cdc2 en la levadura de fisión y cdc28
levadura en gemación
¿Quiénes son los sustratos de los FPMs?

Factores de transcripción (FTs)

Estimulan la expresión de genes requeridos
para la duplicación del DNA en fase S.
Proteínas nucleares: Histona H₁
Su fosforilación ayuda a compactar los
cromosomas.
Láminas nucleares
Al fosforilarse conduce al desensamblado de
la envoltura nuclear
Proteínas citoplasmáticas
Especialmente aquellas que intervienen en la
organización del citoesqueleto
REGULACION DEL CICLO
CELULAR
Regulación del ciclo celular por
ciclinas y CDKs
 2001 Premio Nóbel en Fisiología y Medicina

Paul Nurse and Timothy Hunt

Leland Hartwell
Científicos premiados por sus descubrimientos concernientes al control del ciclo
celular.
Leland Hartwell (62) del Fred Hutchinson Cancer Research Centre, Seattle,
United States.
Timothy Hunt (58) and Paul Nurse (52) del Imperial Cancer Research Fund,
London.
Esos investigadores fueron capaces de comprender a nivel molecular cómo la
célula es dirigida desde una fase a otra fase durante la división.
PUNTO DE CONTROL G1
Punto de restricción
(final de G1): Este es
quizás el punto de
control más
importante. Si la célula
supera este punto, se
compromete a
completar el ciclo
celular y dividirse. Aquí
se evalúa: Si hay
suficientes nutrientes y
factores de
crecimiento.
Si el ADN está dañado.
Si hay señales externas
que indiquen que la
célula debe dividirse.
 PUNTO DE CONTROL G1

Función Normal de p53 Consecuencias de la

Disfunción

Detección de daño en ADN Acumulación de mutaciones

Reparación del ADN Inestabilidad genómica

La proteína p53 es crucial para
mantener la integridad genética de Inducción de apoptosis Supervivencia de células
nuestras células. Conocida como "el anormales
guardián del genoma", desempeña un
papel vital en la prevención del cáncer.
Control del ciclo celular Proliferación descontrolada
 Frenos a la división celular
Otras importantes proteínas
reguladoras de la proliferación
celular:

Rb (por tumor de retina

denominado retinoblastoma).
Deriva del gen Rb, que también es
supresor de tumores.
pRb y reparación del ADN
Detección de daño Parada del ciclo Coordinación de reparación
La pRb interactúa con proteínas La activación de pRb detiene el ciclo La pRb recluta factores de reparación
sensoras de daño en el ADN. Esto celular. Proporciona tiempo para la al sitio dañado. Facilita la corrección
activa vías de reparación genética. reparación del ADN dañado. eficiente de lesiones genéticas.
 pRB (Proteína del
Característica p53
Retinoblastoma)
Sensor de daño en el
Función principal Freno del ciclo celular
ADN
Activa genes que
Inhibe factores de
regulan la respuesta al
transcripción (E2F) que
daño en el ADN
Mecanismo de acción promueven la
(reparación, detención
progresión del ciclo
del ciclo celular,
celular
apoptosis)
Inactiva cuando está
fosforilada, activa Activa en respuesta a
Estado activo/inactivo
cuando está daño en el ADN
desfosforilada
Mutaciones frecuentes
Pérdida de función
en muchos tipos de
asociada con
Papel en el cáncer cáncer, permitiendo la
proliferación celular
proliferación de células
descontrolada
con daño en el ADN
Otros nombres Producto del gen RB Guardián del genoma
 (E2F) (E2F)

Ciclina D

Complejo ciclina D (Ciclina A, E, Cdk2)

/quinasa

Punto R de la fase G1 (momento en el que célula

decide si debe o no avanzar en etapas del ciclo).
Conmutador molecular que pasa de "apagado" a
"encendido".
PUNTO DE CONTROL G2

Punto de control G2/M:

Antes de entrar en
mitosis, la célula
verifica: Si la
replicación del ADN se
ha completado sin
errores. Si el ADN está
dañado. Si la célula
tiene el tamaño
adecuado.
 Activación División Celular
Para que célula Cuando
abandone G1 e concentración
ingrese a fase S, de ciclina
ciclina G1 aumenta
su concentración a decrece, cdk2
partir del punto R y se libera y
activa la cdk2. complejo FPR
Ambas moléculas se desactiva.
proteicas conforman
un FACTOR Niveles de
PROMOTOR DE LA cdk2 son
REPLICACIÓN (FPR)
que activa la síntesis constantes
del ADN. todo el ciclo.
PUNTOS DE CONTROL EN M
 Activación División Celular
FPM que encarga de
fosforilar proteínas
Al final de fase G2,
con funciones
aumenta
esenciales durante la
concentración de
mitosis.
ciclina mitótica y
Cuando todos los
se une a cdk2
cinetocoros se han
componiendo el
ligado a las fibras del
FACTOR
huso, se desactiva
PROMOTOR DE
este complejo.
LA MITOSIS (FPM)
DNA dañado p53 hace que
se expresen
otros genes
de proteínas
reguladoras:
p21
Este gen
bloquea
actividad
ciclina-cdk2.
Células, al no
replicar su
DNA se
estabilizan en
fase G1.
 Frenos a la división celular

Otras acciones de gen p53:

Proteínas p15 y Proteína
p16 bloquean p21, actúa a
actividad del lo largo de
complejo CDK- todo el ciclo
ciclina D celular.
(quinasa que La p21 está
activa la pRB) e bajo el
impiden que control de
ciclo progrese de p53.
G1 a S.
 Posible Aplicación en Medicina
Fármacos anticancerígenos que actúan
alterando, de alguna manera, la replicación
correcta del DNA, requieren para su completa
efectividad, una p53 funcionante.

Si esto se cumple, pueden desencadenar la

apoptosis de células cancerosas alteradas por
fármaco.
 Múltiples interacciones
moleculares en el curso del
ciclo celular
MITOSIS
 MITOSIS

Proceso que permite que los cromosomas duplicados se

separen con gran precisión en dos núcleos con igual carga
genética.
Está acoplado a una citocinesis.
 Profase Temprana
Formación de cromosomas mitóticos
Ensamblaje del huso mitótico
Citoesqueleto y envoltura nuclear inician
desmontaje

Interfase Profase temprana

HUSO MITOTICO
 Centrosoma
Estructura que Centrosoma
contiene los
centriolos. Se
mueven hacia los
polos en sentido
contrario.
cinetocoro
Actúa como el
centro organizador Cromátides hermanas
del crecimiento de
microtúbulos del
citoesqueleto que
se irradian a partir microtúbulos
del mismo
mediante una
disposición
Centrosoma
estrellada llamada
áster.
 CENTROSOMA

Centriolo hijo

Fase G1 temprana Fase S

Un solo centrosoma

Mitosis
 Las plantas no tienen
centrosomas y tampoco
centriolos.

En plantas la estructura
Huso mitótico
del huso mitótico consiste
de cientos de
microtúbulos y de
proteínas que se asocian
a éstos.

Estos husos sin centríolo

se llaman husos
anastrales y están menos
centrados en los polos
Estructura Cromosoma Mitótico

Cinetocoro
Microtúbulos del
huso mitótico están Prometafase
libres.
Envoltura nuclear
completamente rota
Es hora de entrar a
región nuclear y
contactar con el
cuerpo del
cinetocoro.
Desplazamiento de
algunos cromosomas
a lo largo de
superficie lateral del
microtúbulo.
Cromosomas se Metafase
dirigen hacia placa
metafásica.
Cromosomas
alcanzaron su máximo
grado de
compactación.
Microtúbulos del huso se
dividen en tres grupos:
Astrales (áster)
Cromosómicos
(cinetocoro)
Polares.
 Huso mitótico: Microtúbulos sintetizados a partir de
monómeros de tubulina en el citoplasma, en forma de
Aster
áster o flama solar, alrededor de cada centrosoma

Centrosoma

Microtúbulo
polar

Microtúbulo
del cinetocoro Par de centriolos
Cinetocoro
 Anafase Temprana
Cromosomas
alineadas en
placa metafásica
Comienzan a
migrar a los
polos
Cromátides
hermanas
comienzan a
“despegarse”
 ¿Cómo se despegan?
Separación de cromátides depende de
degradación de cohesinas (proteína
pegamento de cromátides).
Degradación de cohesinas, causada por
proteasa, separasa (o separina).
Separasa se mantiene inactiva hasta la
fase de metafase tardía por una chaperona,
securina.
Anafase comienza cuando complejo
promotor de anafase (APC) destruye a
securina terminando con inhibición de
separasa, la que degradará a cohesina.
 ANAFASE : COMPLEJO PROMOTOR DE
ANAFASE

Factor de
especificidad Securina
Cdc20

Separasa
inactiva

Ubiquitilación y degradación
de securina
APC inactivo APC activo

Separasa
activa Clivaje y disociación de
Complejo
cohesina
cohesina

G₂ Metafas Anafase
 Anafase Tardía
Proceso rápido de
pocos minutos.

Cuando cromosomas
han migrado
completamente a los
polos, túbulos del
cinetocoro comienzan
a desaparecer,
aunque los
microtúbulos polares
continúen alargados.
 Telofase
Cromosomas una vez
ubicados en los polos, se
reúnen en una sola masa.
El proceso de citocinesis,
se hace visible.
Envoltura nuclear se
restituye.
Células Hijas
Citocinesis
División del citoplasma que
acompaña a división de los núcleos,
dando lugar a dos células hijas.
Comienza en anafase y continua a
través de la telofase.
Las dos células hijas reciben aprox.
la misma cantidad de orgánulos.
En células con muchas mitocondrias
o cloroplastos, estos orgánulos se
reparten equitativamente.
Comp. Golgi y retículo endoplásmico
se fragmenta para repartirse
equitativamente.
 Citocinesis

Plantas
Formación de placa
celular en una región
central (fragmoplasto)
Consta de
microtúbulos
entrelazados
orientados
perpendicularmente y
vesículas del aparato
de Golgi
Citocinesis
Animales.
“Teoría del anillo contráctil.”

Cordón de filamento
de actina y miosina
situados por debajo
del surco de una
célula en división,
genera una fuerza
suficiente para
separar una célula
de otra.
 Control de la Citocinesis
Obedece a un programa de tiempo que se
dispara al comenzar profase y que se
llevará a cabo en el momento que
corresponde a telofase.
Independiente de la fase cromosómica
alcanzada.
Si el ciclo se bloquea en profase, citocinesis
se llevará a cabo en el tiempo en que
normalmente dicha célula se encontraría en
telofase.
Cafeína inhibe la citocinesis.
Meiosis – Etapas
Proceso por el cual el número de cromosomas se reduce.
Características de la Meiosis
Fase S premeiótica más larga que fase S
premitótica.
Profase I mucho más larga que una profase
mitótica.
En profase I ocurre el apareamiento de
cromosomas homólogos.
Cada núcleo diploide se divide en dos produciendo
un total de cuatro núcleos, sin embargo, los
cromosomas se duplican sólo una vez antes de
primera división.
 Características de la Meiosis

Durante meiosis se recombina el material

genético de progenitores.
Meiosis ocurre sólo en células con un nº diploide
(o poliploide) de cromosomas.
C/u de los cuatros núcleos contiene la mitad del
nº de cromosomas presentes en el núcleo
original.
Garantiza la fase haploide en el ciclo de vida.
Etapas de la Meiosis
Meiosis I (reduccional):
Profase I: Leptonema, cigonema, paquinema,
diplonema, diacinesis
Metafase I
Anafase I
Telofase I
Meiosis II (ecuacional):
Profase II
Metafase II
Anafase II
Telofase II
 LEPTONEMA : (del griego leptos: delgado y
nema: filamento) o LEPTOTENO.

Núcleo aumenta de
tamaño.
Cromosomas comienzan a
visualizarse, sin embargo
son diferentes a los de
una mitosis ya que son
delgados, a pesar de
duplicación de DNA
durante la fase S.
C/crom. poseen 2
cromátidas
 CIGONEMA: (del griego zygon: pareja)
Cromosomas
homólogos replicados
se alinean mediante
proceso de sinapsis.

Estructura resultante,
tétrada, por estar
Complejo
formado por las dos sinaptonémico
cromátide cada
cromosoma.
Tétrada
La sinapsis resulta de s
formación del
complejo
sinaptonémico entre
Complejo
los cromosomas sinaptonémico
homólogos.
 Complejo Sinaptonémico
Dos componentes
laterales de proteínas Cromátides
hermanas
básicas y un paternas
componente central
que tiene además
ARN.

La sinapsis se realiza
a través de filamentos
transversales y la red
longitudinal del
componente central.

También aparecen
estructuras
elipsoidales densas Proteín
denominadas nódulos a
de recombinación. Cromátide
s
hermanas
maternas
 PAQUINEMA: (del griego pachys:
grueso)

Cromosomas se
acortan y se
completa el
apareamiento de los
homólogos. Quiasm
a
Ocurre fenómeno de
entrecruzamiento o
crossing-over.

Presencia del fenómeno

de entrecruzamiento se
visualiza en estructura
especial llamada
quiasma
 a
)

a) Par crom. homólogos antes

de la meiosis. Un par proviene
de un progenitor y el otro
proviene del otro progenitor.
Cada crom. está duplicado.
b
b) Durante Profase I crom. )
homólogos se aparean

c) Cromosomas comienzan a
separarse. Cromátides hermanas
de cada homólogo ya no son
completamente idénticas. Ha
ocurrido una recombinación c
genética de los dos homólogos )
 DIPLONEMA: (del griego diploos:
doble)
Cromosomas homólogos se
separan, aunque todavía
permanecen unidos a nivel de
los quiasmas (del griego
khiasma: cruz).
Quiasma
Complejo sinaptonémico se
desintegra.

En la mujer este periodo es

tan largo que va desde el 7º
mes de vida intrauterina hasta
la pubertad, como mínimo. A
este estado de latencia se le
denomina dictioteno
 DIPLONEMA

Se ha señalado la posición de los quiasmas en (M7),

con dos quiasmas (M4) y en un tercero que presenta
cuatro (L1).
 DIACINESIS
Condensación de
cromosomas se
acentúa aún más.

El nucléolo se
disuelve.

Desaparece
membrana
nuclear.

Se forma el huso
meiótico.
 Cromatina se condensa
Cromosomas visibles al M.
óptico
Microtúbulos del huso
meiótico se organizan y
Profase I, salen radialmente de los
fi l polos de la célula
Se produjo el apareamiento
y entrecruzamiento de
crom. homólogos.
Nucléolo y envoltura
nuclear desaparecen
 Crom. homólogos se
dirigen a la placa
metafásica (o placa
ecuatorial)
Región del centrómero se
duplica hacia el final de
Metafase I metafase
Fibras del huso meiótico
se asocian con el
cinetocoro.
Sólo en cél. animal está
presente además,
centriolo y ásteres
 Crom.
Crom. homólogos
homólogos están
se dispuestos
separan, en cada polo
sin celular
embargo, Cromosomas
las Anafase Telofas son
cromátides I I diferentes de
hermanas cualquiera de
de c/ los que
homólogo estaban
presente en
la célula
i i l
 Llamada también intercinesis
Es de corta duración
Hay dispersión cromosómica
Dependiendo de la especie,
puede o no formarse
envoltura nuclear, y la
citocinesis puede ocurrir o
Interfase no.
II Tiene un nº haploide de
cromosomas pero, una
cantidad diploide de DNA
nuclear (par de cromátides
unidas).
Profase II Metafase
II
Anafase II Telofase II
Citocinesis
 CONSECUENCIAS DE MEIOSIS

1. Obtención de células especializadas para

intervenir en la reproducción sexual.
2. Reduce a la mitad número de cromosomas, así
al unirse las dos células sexuales, vuelve a
restablecerse el número cromosómico de la
especie.
3. Se produce una recombinación de la
información genética.
4. Origina variedad de gametos genéticamente,
debido al entrecruzamiento de segmentos de
los cromosomas homólogos.
ESPERMATOGÉNESIS
No disyunción Meiótica
 No disyunciones

Consideremos 10.000 concepciones elegidas al azar.

Alrededor de 800 presentarán anormalidades cromosómicas

De estas 800:
Como mínimo 140 serán 45, X.
Como mínimo 110 serán 47, +16
Como mínimo 100 serán triploides
Como mínimo 40 serán 47, +21
Como mínimo 20 serán 47, +18
El resto presentarán anormalidades varias
De las 800 concepciones, alrededor de 750 abortarán espontaneamente:
139 de las 140 que sean 45, X.
Todas las 47, +16
99 de las 100 triploides. El superviviente tendrá una esperanza de vida muy corta
35 de los 40 que sean 47, +21. Los supervivientes tendrán síndrome de Down
19 de las 20 que sean 47, +18. El superviviente tendrá una esperanza de vida muy corta
La mayor parte de las que presenten anormalidades varias
Enlaces de interes

https://youtu.be/gqD58khSAu8?si=uuyaXpjtYKC3bo58
https://youtu.be/oj2dFmuFcFk?si=rEMsB9eWexexNlDk
https://youtu.be/RHLFKhl9g_4?si=GzKKDgr_IFh_Ym4g
GRACIAS
GENOMICA NUTRICIONAL
Dieta personalizada???
 GENOMICA NUTRICIONAL
• La información para los procesos fisiológicos involucrados
en el metabolismo, se encuentra en el genoma, y determina
qué nutrientes y en qué cantidades son necesarios para las
respuestas homeostáticas, teniendo como determinante de
su expresión final la interacción con la dieta.
• La genómica nutricional establece como principal objetivo
aportar el conocimiento que permita hacer un diagnóstico y
establecer un tratamiento nutricional basado en el genotipo
individual de cada persona, mediante 2 ramas principales:
LA NUTRIGENÉTICA Y LA NUTRIGENÓMICA
Conceptos
GENOMICA NUTRICIONAL
Alimento nutrigenomico
Restricción calórica & longevidad
 GENOMICA NUTRICIONAL
Concepto
• La genómica nutricional es una ciencia que estudia la relación entre el genoma
humano, la nutrición y la salud. Se puede dividir en dos disciplinas:
• Nutrigenómica: estudia el efecto de los nutrientes en la salud mediante la alteración del
genoma, proteoma, metaboloma y los cambios resultantes en la fisiología.
• Nutrigenética: estudia el efecto de las variaciones genéticas en la interacción entre la
dieta y la salud con implicaciones para los subgrupos susceptibles.[1]
• Más específicamente, la nutrigenómica estudia cómo las diferencias individuales en los
genes influyen en la respuesta del cuerpo a la dieta y la nutrición. Por ejemplo, las
personas con una deficiencia enzimática causada por mutaciones en la enzima
fenilalanina hidroxilasa no pueden metabolizar los alimentos que contienen el
aminoácido fenilalanina y deben modificar su dieta para minimizar su consumo.
• Con datos genómicos modernos, se están explorando mutaciones genéticas graves
con efectos menos graves para determinar si las prácticas dietéticas pueden
personalizarse más estrechamente según los perfiles genéticos individuales. Sin
embargo, se han realizado pocos estudios validados sobre este tipo de efectos de
mutación genética clásica.[2]
 1. NUTRIGENETICA
Concepto
• La nutrigenética es una ciencia aplicada marcada por los paradigmas de la
farmacología nutricional en relación con los polimorfismos y la experiencia
clínica. Así como la farmacogenética busca mejorar el diseño de fármacos,
según la influencia de las variaciones genéticas en el metabolismo de los
xenobióticos y en las dianas de fármacos en el paciente, la nutrigenética
ofrece la posibilidad de personalizar la nutrición de acuerdo con la
constitución genética de los consumidores, teniendo en cuenta el
conocimiento de las variantes genéticas que afectan al metabolismo de los
nutrientes y a las dianas de éstos. En definitiva, la nutrigenética hace
referencia al análisis de variaciones genéticas entre individuos y su
respuesta clínica a nutrientes específicos.
• Un ejemplo serían los individuos con diferentes valores de colesterol
sérico y presión arterial por variaciones genéticas, aun con dieta estándar
 2. NUTRIGENOMICA
Concepto
• La nutrigenómica es una rama de la genómica que
pretende proporcionar un conocimiento molecular
(genético) en los componentes de la dieta que
contribuyen a la salud mediante la alteración de la
expresión y/o estructuras, según la constitución
genética individual.
• Así, por ejemplo, la nutrigenómica estudia el papel
de los ácidos grasos poliinsaturados en la expresión
genética de su oxidación y utilización de energía
 Genoma & Epigenoma
• El genoma se define como el contenido total de información
genética que posee un organismo. El epigenoma está formado por
modificaciones del ADN y la estructura de las histonas que influyen
en la expresión genética. Las modificaciones epigenómicas incluyen
la metilación del ADN, la modificación postraduccional de histonas y
la remodelación de la cromatina (Rajender et al., 2011).
• Amplias investigaciones han demostrado relaciones entre la
expresión genética y las modificaciones epigenómicas. Por ejemplo,
la hipermetilación del ADN se asocia con la supresión de la
expresión genética, mientras que la hipometilación del ADN se
correlaciona con la expresión genética (Biermann y Steger, 2007).
Además, la acetilación de histonas está estrechamente relacionada
con un aumento de la transcripción genética (Berger, 2002).
 EPIGENETICA
Concepto
• La epigenética es el estudio de modificaciones en la expresión de genes que no
obedecen a una alteración de la secuencia del ADN y que son heredables.
• Una de las fuentes de mayores modificaciones de los genes es el factor ambiental
y puede afectar a uno o varios genes con múltiples funciones. Por medio de la
regulación epigenética se puede observar cómo es la adaptación al medio
ambiente dada por la plasticidad del genoma, la cual tiene como resultado la
formación de distintos fenotipos según el medio ambiente al que sea expuesto el
organismo.
• Estas modificaciones presentan un alto grado de estabilidad y, al ser heredables,
se puedan mantener en un linaje celular por muchas generaciones.
• Esto es importante ya que cuando hay errores en las modificaciones se pueden
generar enfermedades que perduren en una familia por mucho tiempo.
• Modificación por el entorno: edad, dieta, tabaco…
 EPIGENÉTICA
Mecanismos
silenciadores

Comprende:

Metilación de DNA
Modificación de
histonas:
Deacetilación
Metilación
RNA de interferencia
 Metilación
• Investigaciones recientes sugieren que los desequilibrios nutricionales que
ocurren en etapas críticas de la vida pueden tener una influencia duradera en la
expresión de varios genes, incluidos algunos de los que se cree que influyen en la
epidemia de obesidad occidental. Esto forma parte de una rama de la ciencia
llamada epigenética que se ocupa de cómo nuestro entorno puede cambiar la
forma en que se expresan nuestros genes, independientemente de nuestra
secuencia de ADN.
• Durante el transcurso de la vida existen muchos tipos de modificaciones que
mantienen los genes reprimidos o activos, pero la mejor estudiada es la
metilación del ADN. Durante este proceso, un grupo de cuatro átomos llamado
grupo metilo se une a un gen en un punto específico y altera su función. El grupo
metilo silencia el gen o reduce su expresión dentro de una célula determinada,
pero en realidad no cambia el gen. Este efecto se denomina "epigenético"
porque se produce más allá de la secuencia genética sin alterar ninguna de las
letras del código genético de cuatro unidades. Lo interesante es que los patrones
de metilación del ADN responden a factores ambientales como la nutrición a lo
largo de la vida.
• Muchos micronutrientes y vitaminas son fundamentales para la
síntesis/reparación del ADN y el mantenimiento de los patrones de metilación del
ADN. El folato ha sido investigado más ampliamente a este respecto debido a su
función única como donante de metilo para la síntesis de nucleótidos y la
metilación del ADN. La terapia con folato es un método común para reducir la
hiperhomocisteinemia, restaurar la metilación del ADN a niveles normales y
corregir los patrones de expresión genética19. Los grupos metilo se derivan en
última instancia de la metionina. Por lo tanto, se podría esperar que una ingesta
elevada de metionina en la dieta corrija la metilación del ADN. Sin embargo,
Waterland afirma que la ingesta excesiva de metionina, como a través de
suplementos, en realidad puede alterar la metilación del ADN al inhibir la
remetilación de la homocisteína. Sostiene que esto podría conducir a una
hipermetilación de determinadas secciones del ADN, lo que podría tener
consecuencias nocivas20. Es factible sugerir que tanto una madre con bajo peso y
desnutrida como una madre sobrealimentada pero desnutrida podrían carecer del
equilibrio adecuado de nutrientes metilantes. Por lo tanto, el uso preventivo de
una dieta y suplementos para equilibrar los procesos de metilación puede ayudar
en algunos casos a corregir deficiencias epigenéticas de base genética.
Nutrientes & Metilación
 Desnutrición: hipometilación
• Más recientemente, los investigadores han comenzado a dar
seguimiento a estas observaciones y están comenzando a
surgir vínculos causales. En un estudio, se descubrió que
alimentar a ratas preñadas con una dieta restringida en
proteínas inducía la hipometilación de los promotores del
receptor de glucocorticoides (GR) y del receptor alfa activado
por el proliferador de peroxisomas (PPARα) en sus crías8. GR y
PPARα son factores de transcripción que desempeñan
funciones clave en la acción de los corticosteroides y en el
metabolismo de la glucosa y las grasas. La sobreexpresión de
estos factores debido a la hipometilación induce dislipidemia,
obesidad, hipertensión, hiperinsulinemia e hiperleptinemia en
la descendencia..
• Lo que los investigadores descubrieron fue que alimentar con
una dieta restringida en proteínas durante el embarazo resultó
en una reducción en la actividad de las enzimas que mantienen
la metilación llamadas ADN metiltransferasas. Esto respalda la
hipótesis de que la hipometilación puede deberse a una falta de
mantenimiento de los patrones de metilación del ADN durante
el desarrollo. Curiosamente, la suplementación de la dieta
restringida en proteínas con ácido fólico, un cofactor donante de
metilo, evitó cambios en el estado de metilación de los
promotores GR y PPARα y condujo a la normalización de la
actividad de GR, PPARα y ADN metiltransferasa. Esto encaja muy
bien con la comprensión nutricional actual sobre la importancia
del ácido fólico y el aminoácido metionina en el equilibrio de los
procesos de metilación.
 Leche materna
• Un estudio reciente de más de 15.000 niños, realizado por
Mayer-Davis y sus colegas, encontró que la lactancia materna
protegía contra la obesidad infantil independientemente del
IMC materno. Las posibles vías que pueden estar implicadas
incluyen un aumento de peso posnatal temprano
relativamente reducido, una autorregulación mejor aprendida
de la ingesta de alimentos, una mayor saciedad o
potencialmente la aparición de factores presentes en la leche
materna pero no en la fórmula infantil, como la hormona de
la saciedad, la leptina. En condiciones normales, la leptina
actúa a nivel central, principalmente en el hipotálamo, para
inhibir la alimentación y promover el gasto energético.
Además, reduce la deposición de grasas y ayuda a mantener
la sensibilidad a la glucosa.
• Las dietas maternas ricas en ácidos grasos
poliinsaturados (PUFA) tuvieron efectos
beneficiosos sobre el control de la glucosa
de la descendencia.
• La alta proporción de
carbohidratos:proteínas en la dieta
materna también puede estar relacionada
con un aumento de la presión arterial y
una alteración de la homeostasis de la
glucosa en la descendencia.
 Adaptación a desnutrición:
humanos
• La adaptación a dietas bajas en nutrientes se reconoce desde hace
mucho tiempo. Los animales responden a la restricción de
nutrientes aumentando las tasas de absorción y la eficiencia de
utilización, lo que disminuye la excreción de los nutrientes
restringidos. La capacidad de los seres humanos para adaptarse a
una dieta baja en Ca fue reconocida en los años cincuenta. En ese
momento, la Junta de Alimentos y Nutrición (1948) recomendó
una cantidad diaria de Ca para adultos de 800 mg/día.
• Sin embargo, Hegsted et al. (1952) encontraron que los peruanos
adultos, que habían vivido con dietas bajas en Ca durante largos
períodos, sólo necesitaban de 100 a 200 mg Ca/día para mantener
el equilibrio. Es obvio que estos peruanos, que crecieron bajo
restricción de Ca, pudieron utilizar mejor el Ca.
 UNMSM Facultad de
Medicina.
Estudios Generales

Cromosomas:
Morfología, características, tipos. Cariotipo
humano normal. Anomalías cromosómicas.
Mutaciones cromosómicas numéricas y
estructurales.
Dr. Clever Arias Caycho/Dra. Nancy Rojas Morán
 LOGRO DE LA SESIÓN

• Al finalizar la
clase, el alumno será
capaz de:
• Explicar como está organizado el
material genético en el núcleo
• Explicar la estructura de los
cromosomas y la función de cada
una de sus partes
• Distinguir un cariotipo y
• Explicar los tipos de
mutaciones
 AGENDA
Cromosomas:
Morfología, características, tipos. Cariotipo
humano normal. Anomalías cromosómicas.
Mutaciones cromosómicas numéricas y
estructurales.

https://www.youtube.com/watch?v=i_nfg1KxMW0
 NUCLEO CELULAR

Cromatina
Asociación supramolecular formada por ADN y •Eucromatina: Región de la
proteínas relacionadas que configura los cromatina ligeramente compacta.
cromosomas. Presencia de genes codificantes,
transcripcional mente activos.

•Heterocromatina: Región de la
cromatina más compacta. Poca o
ninguna actividad transcripcional.
El ADN se encuentra metilado y las
histonas hipoacetiladas.
Constitutiva: Presente en
telómeros y centrómeros,
genéticamente inactiva.
Facultativa: Inactiva de manera
específica durante ciertas fases
de la vida o en ciertos tipos de
células diferenciadas.
NIVELES DE ORGANIZACIÓN DE LA
CROMATINA
 NUCLEO CELULAR

Nucleosoma
Nucleosoma: Unidad básica estructural de la cromatina que contiene
146 pb de ADN enrollado alrededor de un disco de ocho histonas
(octómero de histona).

Proteínas histonas

Nucleosoma

Cromatosoma:
contiene 166 pares de bases
sujetas por una molécula de
H1.

Proteínas con un contenido alto

de arginina-lisina. Se dividen en
cinco clases: H1, H2A, H2B, H3,
H4.
 NUCLEO CELULAR

Niveles de organización de la cromatina

Doble cadena de ADN

Nucleosoma

Fibra de 30 nm

Bucles o asas superenrolladas

Dominio funcional o unidad de replicación

Cromosoma
• Hoffmeister,
1848 los
observó por
primera en
células madres
de grano de
polen
• Waldeyer 1888,
les dio el
nombre de
cromosomas
• Nº
cromosomas
depende de la
especie
 ¿Cuándo observamos la cromatina en
la forma de CROMOSOMAS?

• En metafase
mitótica.
• Los cromosomas
ya han pasado
por un periodo de
síntesis de DNA
 NUCLEO CELULAR

Cromosomas humanos
Estructura del cromosoma
Número:

Células somáticas :
Brazo “p”
• Diploide 2(n) = 46
cromosomas
• 44 autosomas y 2 sexuales
• 46,XX o 46,XY
Brazo “q”
Células sexuales:
• Haploide (n) = 23
cromosomas
• 22 autosomas y 1 sexuales
• Espermatozoide: 23,X o 23,Y
Cada cromosoma presenta: • Ovulo : 23,X

Dos cromátides iguales separadas por el centrómero

que contiene el cinetocoro
 Morfología de los
cromosomas

submetacéntrico

acrocéntrico

metacéntrico Submetacéntrico
con zona satélite telocéntrico
 Cromátides
hermanas

Cromátide

Cada cromátide posee dos brazos de igual o

diferente longitud; a veces casi inexistente.
Los brazos NO representan una unidad
funcional sino morfológica, que facilita su
clasificación.
Cromátide: unidad funcional
 Centrómero

 Es la constricción
primaria del
cromosoma.

Constituídos por
heterocromatina
constitutiva.
 Centrómero

 En humanos tienen
una secuencia de casi
170 nucleótidos de
largo (denominado
DNA  satélite)
dispuestos en serie y
repetidos  2,000 a
30,000 veces por
cada centrómero.
CINETOCORO

• Partes laterales
del centrómero cinetocoro
donde se
conectan los
microtúbulos del
huso mitótico.
• Constituído por
un complejo
proteico y RNA.
• Carece de DNA.
 CINETOCORO
• Existe 2 tipos de
cinetócoro:
1.- Trilaminar Tres
discos adosados,
presente en
células animales.
2. Esférico: Común
en vegetales,
constituido por
material fibrilar
laxo.
 ORGANIZADOR
NUCLEOLAR
 Constricción secundaria,
que en interfase formará
nucleolo.
 Aparece en cromosoma
metafásico como una región
de fibrillas poco densas,
más laxas que las de la
cromatina adyacente.
 Empaquetada de forma
diferente a las del resto del
cromosomas.
 En cariotipo humano crom.
13-14-15, 21-22 poseen
organizador nucleolar.
 TELÓMERO

Secuencia repetitiva
de DNA, que asegura
que el cromosoma se
replique entero.

 No codifica
proteínas
 Se repiten
muchas veces.
 Telómero
 En el ser humano presenta la
siguiente secuencia altamente
repetitiva:2,500 veces
5’-TTAGGG-3’
3’-AATCCC-5’
Esta secuencia también presente
en todos los vertebrados
 Funciones de los
telómeros

1. Se requieren para la duplicación

completa del cromosoma.

2. Protege a los cromosomas contra

las nucleasas y otras influencias
desestabilizadoras.

3. Evitan que los extremos de los

cromosomas se fusionen entre sí.
  DNA telomérico puede alargarse por medio de
una enzima: TELOMERASA.

Ribonucleoproteína
con capacidad
catalítica. Extiende
nuevas unidades
repetitivas en
extremo 3’ de
cadena rica en G
RNA de telomerasa
sirve de molde para
añadir la secuencia
Telomerasa alarga telomérica a la
específicamente el OH 3’ terminación 3’ del
extremo cromosoma
 Acción
de la Telomerasa
 Telomerasa

• En humanos, células germinales

poseen esta enzima bastante
activa; ausente en las células
somáticas.

 Células tumorales la tienen

bastante activa
 Telomerasa
 Ausencia de actividad telomerasa
podría contribuir al fenómeno
conocido como envejecimiento.

 Acortamiento progresivo de los

extremos de los cromosomas y la
pérdida de información genética
resultante, se ha asociado con
muerte celular.
 Cariotipo humano

La clasificación básica de
los cromosomas humanos
en metafase, fue derivada
de conferencias en Denver
(1960), Londres (1963) y
Chicago (1966).

Se acordó numerar los

autosomas en pares del 1 al
22 de acuerdo al tamaño y
posición del centrómero
principalmente. SE ORDENAN
EN FORMA DECRECIENTE.
 NUCLEO CELULAR

Tipos y ordenamiento de los

cromosomas
Tipos de cromosomas:
1. Tamaño del cromosoma: grandes,
medianos y pequeños.
2. Posición del centrómero:
metacéntrico, submetacéntrico y
acrocéntrico.

Cariotipo:
46,XY
¿Cómo se obtienen cromosomas
para elaborar un cariotipo?

Mayoría de los estudios citogenéticos

se realizan a partir de linfocitos de
sangre periférica.

La división de estas células se induce

in vitro mediante mitógenos como la
fitohemaglutinina.
 ¿Cómo se obtienen cromosomas
para elaborar un cariotipo?

Las células deben pararse en prometafase,

empleando colchicina 0.02%, que
interfiere en la polimerización de los
microtúbulos del huso mitótico.

Para conseguir una buena separación

cromosómica, las células deben someterse
a choque osmótico. Para ello, se emplea un
medio hipotónico (0,0375M KCl), que
ocasiona el aumento de volumen de las
células.
Los grupos que comprende el cariotipo humano
son los siguientes:

Cromosomas grandes
Grupo A, (cromosomas 1, 2 y 3), meta y
submetacéntricos
Grupo B, (cromosomas 4 y 5), submetacéntricos

Cromosomas medianos
Grupo C, (cromosomas 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 y los
cromosomas X), submetacéntricos
Grupo D, (cromosomas 13, 14 y 15) acrocéntricos.

- Cromosomas pequeños
Grupo E, (cromosomas 16, 17 y 18) submetacéntricos
Grupo F, (cromosomas 19 y 20) metacéntricos
Grupo G, (cromosomas 21 y 22) acrocéntricos
 Cariotipo
A B

D F

Los crom. sexuales X e Y se separan de sus grupos

correspondientes y se ponen juntos aparte al final del
cariotipo
 Idiograma

Para lograr la identificación individual

de los cromosomas es necesario
recurrir a otros métodos como
autorradiografía o tinciones y
tratamientos especiales que producen
un patrón de bandas específico a lo
largo de cada cromosoma.

Tales métodos incluyen el uso de

colorantes fluorescentes, enzimas
proteolíticas, detergentes ,soluciones
hipertónicas, calor, etc
 Idiograma
Tratamiento
con tripsina y
posteriormente
tinción con
Giemsa para
obtener un
bandeo G.
En el bando G, se
marcan las
regiones del
cromosoma que
contienen una
alta cantidad de
ADN rico en
guanina y
citosina (GC). s.
 El bandeo G
• El bando G es una técnica de tinción cromosómica que utiliza un
colorante llamado Giemsa. Esta técnica permite visualizar las diferentes
regiones del cromosoma con distintos niveles de intensidad.
Características del bando G:
1. Regionas ricas en GC: se tiñen de oscuro (bandas G+).
2. Regionas ricas en AT: se tiñen de claro (bandas G-).
3. Centromeros y telómeros: suelen ser G+.4.
4. Regionas heterocromáticas: suelen ser G+.
El bando G es útil para:
1. Identificar cromosomas y regiones específicas.
2.Detectar aberraciones cromosómicas (translocaciones, deleciones, etc.).
3. Estudiar la estructura y organización de los cromosoma
https://view.genially.com/6273458f72c4e10012e8b555/horizontal-
infographic-review-mutaciones-cromosomicas
 Mutaciones del
ADN

Pueden producirse mutaciones en células de línea germinal o células somáticas.

Las mutaciones de la línea germinal ocurren en las células reproductivas (espermatozoides u óvulos)
y se transmiten a la descendencia de un organismo durante la reproducción sexual. Las mutaciones
somáticas ocurren en células no reproductivas; Se transmiten a las células hijas durante Universidad
la mitosis, de Piura

pero no a la descendencia durante la reproducción sexual.

© 2014 Educación para la Naturaleza Adaptado de Pierce, Benjamin. Genética: Un enfoque
conceptual, 2ª ed. Todos los derechos
 Mutaciones del ADN

https://www.nature.com/scitable/topicpage/genetic-mutation-441/ Clases y tipos de Mutaciones

y su Impacto
Tipo de Mutación Consecuencias
Descripción Ejemplo
Cromosómica Potenciales
Aumento de la dosis génica,
Duplicación de un segmento Duplicación del cromosoma que puede llevar a
Duplicación
del cromosoma. X sobredosis de proteínas
específicas.
Pérdida de genes esenciales,
Pérdida de un segmento del
Deleción Síndrome de Cri du Chat lo que puede causar defectos
cromosoma.
graves en el desarrollo.
Puede alterar la función de
Un segmento de ADN se
genes importantes o
Insersión inserta en un lugar no Inserción en cromosoma 8
interrumpir la regulación
habitual del cromosoma.
génica.
Puede interferir con el
Un segmento del
Inversión pericéntrica emparejamiento durante
Inversión cromosoma se invierte
en cromosoma 9 la meiosis, generando
(rota 180 grados).
gametos anómalos.
Intercambio de Puede dar lugar a
segmentos entre Translocación problemas de fertilidad
Translocación
cromosomas no Robertsoniana o enfermedades como la
homólogos. leucemia.

Número anormal de Alteración del equilibrio

cromosomas debido a la Síndrome de Down génico, causando síndromes
Aneuploidía
ganancia o pérdida de (trisomía 21) con diversas
cromosomas completos. manifestaciones clínicas.
 Síndrome de Down, se escribe así:
47,XX,+21.

La clave de la
descripción de
cariotipo es:

47: el número
total de
cromosomas (46
es lo normal).
XX: los
cromosomas
sexuales
(femeninos).
+21: indica que el
cromosoma extra
es un 21.
 Nomenclatura citogenética
• El ISCN (Sistema Internacional de Nomenclatura en Citogenética Humana) es
un instructivo universal para designar la nomenclatura de los cariogramas, se
sustenta en la
utilización del patrón de bandas G característico de cada cromosoma.
• Incluye: número total de cromosomas, constitución de los cromosomas
sexuales y anomalías. Ejemplo:
- Células normales: Primero se escribe el número total de cromosomas,
seguido de una coma, se escribe los cromosomas sexuales observados y si es el
caso entre corchetes se coloca el número de metafases analizadas: 46,XX[20]
(Mujer normal) 46,XY[20] (Varón normal)
- Células aneuploides: Primero se escribe el número total de cromosomas,
seguido de una coma, se escribe los cromosomas sexuales, seguido de otra
coma, se escribe un signo o abreviatura de la anomalía numérica o estructural
de modo ascendente y finalmente, si es el caso, entre corchetes se coloca el
número de metafases analizadas: 46,XX,+21[30] (Síndrome Down), 45,X[30]
(Síndrome Turner)
 SINDROME DOWN

47,XY,+21
SINDROME TURNER
45,X
 SINDROME KLINEFELTER

47,XXY
 SINDROME DE PATAU

Características clínicas:- Anomalías craneofaciales

(ojos pequeños, nariz ancha)- Anomalías cardíacas
47, XY,+13 (Trisomia 13) (defectos septales, estenosis pulmonar)- Anomalías
renales (hidronefrosis, anomalías del riñón)-
Anomalías neurológicas (epilepsia, retraso mental)-
Problemas de crecimiento y desarrollo- Anomalías de
los dedos y pies
PARA ANALIZAR