Introdução à Bioquímica Clínica

Disciplina: Bioquímica Clínica

Centro Universitário São Camilo – ES
Docente: Edilene Marin
E-mail: edilenemarin@saocamilo-es.br
“Bioquímica é o estudo da vida no seu nível
molecular.”
VOET, 2013, p. 21

“A Bioquímica nada mais é do que a química da vida, e

claro, a vida pode ser investigada, analisada e
compreendida”.
NELSON, 2019, p. 74
Objetivo da Bioquímica Clínica

Entender os processos biológicos usando conhecimentos agregados de química, fisiologia

e biologia. Devemos lembrar de reações, vias metabólicas, moléculas, etc.

É uma parte da medicina laboratorial que usa testes químicos para auxiliar no
estabelecimento de diagnósticos e acompanhamento de patologias. É de extrema
importância para a medicina hospitalar, utilizando os resultados destes testes para
direcionar a conduta médica mais adequado para cada paciente.
Tudo o que acontece no corpo humano começa dentro das nossas células, em nível molecular,
envolvendo uma complexa interação entre a célula e o ambiente externo.

Figura 1: Produção de melanina

Radiação UV

Pele Bronzeado

Fonte: (Adaptado DALPAI, 2018, p 11).

 Figura 2: Orquestra

Fonte: (Adaptado Google Imagens, 2023).

 Propriedade dos organismos
vivos

Complexidade química e de Capacidade para se autorreplicar

organização microscópica. e se automontar com
precisão.

Sistemas para extrair, Mecanismos para sentir e

transformar e utilizar a responder a alterações no
energia do ambiente. ambiente.

Componentes com funções bem

determinadas e as interações
entre si são reguladas.
 5 FUNDAMENTOS DA BIQUÍMICA

FUNDAMENTOS CELULARES

FUNDAMENTOS QUÍMICOS

FUNDAMENTOS FÍSICOS

FUNDAMENTOS GENÉTICOS

FUNDAMENTOS EVOLUTIVOS
FUNDAMENTOS CELULARES

✓ Todas as células são delimitadas por uma membrana plasmática, têm um citosol contendo metabólitos,
coenzimas, íons inorgânicos e enzimas e um conjunto de genes contidos dentro de um nucleóide (bactérias
e arqueias) ou de um núcleo (eucariotos).

✓ Organismos necessitam de uma fonte de energia para realizar trabalho celular. Os organismos fototróficos
obtêm energia da luz solar; os quimiotróficos oxidam combustíveis químicos, transferindo elétrons para
bons aceptores: compostos inorgânicos, compostos orgânicos ou oxigênio molecular.

✓ As proteínas do citoesqueleto organizam-se em longos filamentos que dão forma e rigidez às células e
servem como trilhos ao longo dos quais as organelas se deslocam por toda a célula.

✓ Uma das questões centrais da bioquímica é como são formadas as estruturas biológicas. As unidades
monoméricas das macromoléculas são obtidas diretamente pela célula como nutrientes ou sintetizadas
enzimaticamente a partir substancias simples. As macromoléculas são sintetizadas a partir de precursores
monoméricos por processos complexos mediados enzimaticamente.
Figura 3: Estrutura da célula eucariótica – Animal e Vegetal

Fonte: (NELSON, 2019, p 8).

Figura 4: Organização hierárquica das estruturas biológicas

Figura 5: Hierarquia estrutural na organização molecular das células

Fonte: (NELSON, 2019, p 11).

Fonte: (VOET, 2013, p 16).

FUNDAMENTOS QUÍMICOS

✓ Os quatro elementos químicos mais abundantes nos organismos vivos, em termos de porcentagem do
total de número de átomos, são hidrogênio, oxigênio, nitrogênio e carbono, que, juntos, constituem
mais de 99% da massa das células.

✓ Proteínas e ácidos nucleicos são polímeros lineares feitos de subunidades monoméricas simples; suas
sequências contêm as informações que dão a cada molécula sua estrutura tridimensional e funções
biológicas específicas.
Figura 6: Vários grupos funcionais comuns em uma única biomolécula.

✓ Devido à versatilidade das ligações que pode

fazer, o carbono pode produzir um conjunto
enorme de estruturas carbono-carbono com
uma grande variedade de grupos funcionais;
esses grupos conferem às biomoléculas as
suas propriedades químicas e biológicas.

Fonte: (NELSON, 2019, p 15).

 Figura 7: Geometria das ligações de carbono.

Fonte: (NELSON, 2019, p 13).

✓ Quando biomoléculas interagem, o "encaixe" entre elas tem de ser estereoquimicamente correto. A
estrutura de biomoléculas grandes e pequenas (a combinação de configuração e conformação) é de
máxima importância para as interações biológicas: um reagente com a respectiva enzima, um hormônio
com seu receptor na superfície da célula e um antígeno com seu anticorpo específico,
FUNDAMENTOS FÍSICOS

✓ Células e organismos vivos precisam realizar trabalho para se manterem vivos e se reproduzirem. As
reações de síntese que ocorrem dentro das células, da mesma maneira que os processos de síntese em
uma fábrica, exigem consumo de energia.

✓ A maioria das reações biológicas faz parte de rotas metabólicas, elas fazem parte de uma sequência de
reações que gera um ou mais produtos específicos. O metabolismo é dividido em duas grandes categorias;

✓ Catabolismo/degradação, no qual os nutrientes e os constituintes celulares são degradados para

recuperar seus componentes e/ou para gerar energia, (ex: nutrientes energéticos, carboidratos,
gorduras, proteínas).
✓ Anabolismo/biossíntese, no qual biomoléculas são sintetizadas a partir de componentes mais
simples, (ex: macromoléculas celulares, proteínas, polissacarídeos, lipídeos, ácidos nucléicos,
etc.)

Anabolismo

Catabolismo
 Figura 7: Anabolismo x catabolismo

Catabolismo Anabolismo
São as reações responsáveis São as reações responsáveis pela síntese
pela quebra de macromoléculas de todos os compostos necessários para
para liberação de energia e a reprodução, o crescimento e a
moléculas menores. manutenção da célula.

Fonte: (NELSON, 2019, p 28).

FUNDAMENTOS GENÉTICOS

✓ Talvez a propriedade mais extraordinária dos organismos e das células seja a capacidade de se reproduzir por
incontáveis gerações mantendo uma fidelidade quase perfeita. A capacidade que os seres vivos têm de preservar
seu material genético e duplicá-lo para a próxima geração deve-se a essa complementaridade entre as duas fitas
da molécula de DNA.
Figura 8: Fitas de DNA

✓ A unidade básica do DNA é um polímero linear de quatro subunidades

monoméricas diferentes, desoxirribonucleotídeos, arranjados em uma sequência
linear precisa. Duas dessas fitas poliméricas estão torcidas uma em torno da outra,
formando a dupla-hélice de DNA, na qual cada desoxirribonucleotídeo em uma fita
pareia especificamente com um desoxirribonucleotídeo complementar na fita
oposta.

✓ Embora as sequências de aminoácidos das proteínas carreguem toda a informação

necessária para chegar até a conformação nativa da proteína, o enovelamento
preciso e a automontagem também necessitam do ambiente celular adequado -
pH, força iônica, concentrações de íons metálicos, e assim por diante. Portanto, a
sequência de DNA sozinha não é suficiente para formar e manter uma célula
completamente funcional.
Fonte: (NELSON, 2019, p 31).
FUNDAMENTOS EVOLUTIVOS

✓ Mutações herdadas geram organismos mais adaptados para sobreviver e se reproduzir em um dado nicho
ecológico e, assim, os seus descendentes passam a predominar na população presente nesse nicho. Esse
processo de mutação e seleção é a base da evolução darwiniana, que vai desde a primeira célula até todos os
organismos atuais. O grande número de genes compartilhados por todos os seres vivos explica as semelhanças
fundamentais entre todos eles.
✓ A célula mutada e suas descendentes irão sobreviver e prosperar no novo ambiente, ao passo
que as células do tipo selvagem irão definhar e ser eliminadas. Isso é o que Darwin denominou
seleção natural ou como sobrevivência do mais adaptado.

✓ Mutações no DNA ,presentes nas células reprodutivas podem ser danosas ou mesmo letais ao novo organismo
ou célula. (Ex. Pode ser a causa da síntese de uma enzima defeituosa incapaz de catalisar uma reação
metabólica essencial).

✓ Uma mutação dá melhores condições para que um organismo ou uma célula sobreviva em um dado ambiente.
(Ex. Uma enzima mutante pode ter adquirido, uma especificidade que a torna agora capaz de usar um composto
que previamente a célula não tinha capacidade de metabolizar).
✓ Células eucarióticas adquiriram a capacidade de realizar a fotossíntese e a fosforilação oxidativa a partir de
bactérias endossimbióticas.

Figura 9: Evolução de células eucariontes.

Fonte: (NELSON, 2019, p 38).

As bases bioquímicas de muitas doenças são conhecidas há muito tempo, e a
pesquisa nessa área fornece cada vez mais descrições de processos
patológicos e explicações em nível molecular para as doenças.

Como resultado da aplicação dos princípios e técnicas bioquímicas para a

análise de fluidos e tecidos corporais, cada vez mais os médicos dispõem de
diversos tipos de investigações bioquímicas das quais podem lançar mão para
sustentar suas decisões clínicas.
 Diagnóstico

Conduta

✓ Avaliação da gravidade da doença

✓ Prognóstico
✓ Monitoramento do progresso da doença
UTILIZAÇÃO DOS TESTES
BIOQUÍMICOS Rastreamento

✓ Rastreamento populacional
✓ Rastreamento seletivo
✓ Rastreamento individual

Pesquisa
 Avaliação Perfil
Glicêmico

Avaliação Perfil
Avaliação Urinálise
Lipídico

Setores da
Bioquímica
Clínica Avaliação compostos
Avaliação Proteína nitrogenados não proteicos:
Total e Frações uréia, creatinina e ácido úrico

Avaliação distúrbios Avaliação Função hepática e

hormonais Trato Biliar
Principais equipamentos do setor bioquímica

➢ Analisadores bioquímicos, semiautomáticos ou automáticos = Espectrofotômetro

➢ Banho – Maria

➢ Centrífuga

➢ Pipetas volumétricas (manuais e automáticas)

Espectrofotometria
Parte da ciência que estuda o fenômeno relacionado à
interação da matéria com a luz eletromagnética.

É uma técnica muito usual, identificando e

determinando a concentração das substâncias,
conforme estas interagem com a luz.

É amplamente utilizada para determinar a concentração

de soluções de cor e os métodos que se baseiam nesse
princípio são denominados métodos colorimétricos.
Espectrofotômetro
Equipamento utilizado em laboratórios com a função de
medir a quantidade de luz (radiação eletromagnéticas)
absorvida por uma determinada solução e assim
determinar sua concentração.

O espectrofotômetro mede a quantidade de luz

absorvida por uma solução teste em comparação à uma
solução de referência.
1 – Fonte de energia elétrica – fornecedora de energia regulada, constante e apropriada para a operação do
instrumento.
2 – Fonte de energia radiante – normalmente uma lâmpada de deutério que emite radiação UV e/ou uma
lâmpada de tungstênio que emite luz visível)
3 – Fenda de entrada da luz.
4 – Monocromador – utilizado para isolamento da porção desejada do espectro.
5 – Fenda de saída da luz.
6 – Cubeta - recipiente que recebe o líquido da reação a ser medido podem ser de vidro, acrílico ou quartzo,
preferencialmente.
7 – Detector – utilizado para receber a energia radiante transmitida através da solução e transformá-la em
energia elétrica.
8 – Circuito medidor – recebe a energia elétrica emitida pelo detector apresentando-a ao operador sob uma
forma útil de medida: absorbância ou concentração.
Figura 1: Componentes do espectrofotômetro.

Fonte: BASQUES, 2016, p 04.

 Figura 2: Esquema de funcionamento interno do espectrofotômetro.

Io I

Fonte: Adaptado google imagens, 2023.

Io= Intensidade da luz incidente

I= Intensidade da luz transmitida
O espectro de absorção é característico para cada espécie química, sendo possível a identificação de uma
espécie química através do seu espectro de absorção. O espectro de energia radiante é dividido em várias
regiões e a espectrometria pode ser realizada nas regiões ultravioleta (UV) ou de luz visível.

A região do espectro do ultravioleta é na faixa de 200 a 400 nm e a da luz visível é entre 400 e 700 nm.

Figura 3: Diferentes tipos de radiação eletromagnéticas

Fonte: Adaptado google imagens, 2023.

Espectrofotometria de absorção UV-visível: radiação eletromagnética (ou simplesmente “luz”), em virtude
de sua natureza dualística se propaga numa velocidade constante, mas depende do índice de refração meio
que atravessa, ou seja, tem um comportamento de campos elétricos e magnéticos oscilantes. O que
possibilita a análise de soluções coloridas ou incolores é que a radiação absorvida é uma característica da
amostra absorvente.

Figura 4: Onda eletromagnética.

✓ O comprimento de onda (λ) é distancia em metros, de um

pico ao outro da onda;
✓ A frequência (v) é o grau de oscilação das ondas, em função
da velocidade da luz no vácuo que é representada pela
constante c (c=2, 998x108m. s-1).

De modo que: λ .v = c Fonte: RODRIGUES, 2017, p 27.

 Lei de Lambert-Beer

As leis de Lambert e Beer, são o fundamento da espectrofotometria pois relacionam a absorção de luz
com as propriedades (espessura e concentração), aborda simultaneamente a absorbância e a
transmitância da luz que atravessa uma amostra.

TRANSMITÂNCIA ABSORBÂNCIA
A fração da energia luminosa Exprime a fração da energia
que consegue atravessar uma luminosa que é absorvida por
determinada espessura de um uma determinada espessura de
material, sem ser absorvida. um material. Ou seja, a
Ou seja, a capacidade capacidade de absorver a luz.
de transmitir a luz.
As leis de Lambert e Beer podem ser expressas matematicamente e, em conjunto, estabelecem que a
quantidade de luz absorvida ou transmitida por uma determinada solução depende da concentração do soluto
e da espessura da solução.

Figura 5: Relação Absorbância x transmitância

Fonte: BASQUES, 2016, p 09.

"A intensidade da luz emitida decresce exponencialmente a medida que a espessura do meio absorvente aumenta
aritmeticamente " (Lambert).

“A intensidade de um feixe de luz monocromático decresce exponencialmente a medida que a concentração da

substância absorvente aumenta aritmeticamente " (Beer).

“A quantidade de luz absorvida ou transmitida por uma determinada solução depende da concentração do soluto e
da espessura da solução” .

“A absorbância é diretamente proporcional a concentração da solução de amostra”.

 Aplicações em diferentes áreas das
ciências farmacêuticas

Rápido Resultados precisos

Vantagens
e
aplicações
Método analítico Baixo custo
sensível
“Faça o teu melhor nas condições que você tem, enquanto
você não tem condições para fazer melhor ainda”.
Mario Sérgio Cortella

Obrigada!