Jurnal Veteriner
pISSN: 1411-8327; eISSN: 2477-5665
Terakreditasi Nasional SK. No. 15/XI/Dirjen Dikti/2011
Juni 2016 Vol. 17 No. 2 : 235-245
DOI: 10.19087/jveteriner.2016.17.2.235
online pada http://ojs.unud.ac.id/php.index/jvet
Cemaran Escherichia coli pada Tepung Telur
yang Diimpor Melalui Pelabuhan Tanjung Priok,
dan Resistensinya Terhadap Antibiotik
(ESCHERICHIA COLI CONTAMINATION ON EGG POWDER
IMPORTED THROUGH PORT OF TANJUNG PRIOK
AND ITS RESISTANCE AGAINST ANTIBIOTICS)
Kamil Riski Sidik1,3, Denny Widaya Lukman2,
I Wayan Teguh Wibawan2
1
Program Studi Kesehatan Masyarakat Veteriner,
Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor
2
Departemen Ilmu Penyakit Hewan dan Kesehatan Masyarakat Veteriner,
Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor
3
Balai Besar Karantina Pertanian Tanjung Priok,
Badan Karantina Pertanian, Kementrian Pertanian,
Jl. Enggano No. 17 Tanjung Priok, Jakarta Utara 14310,
Telp: (021) 43931549, 43800150 (hunting),
Fax: (021) 43931061, e-mail: kamilsidik@yahoo.com
Abstrak
Ditemukan adanya cemaran bakteri Eschericia coli pada tepung telur impor yang dimasukan melalui
Pelabuhan Tanjung Priok Jakarta, saat dilakukan pengujian terhadap cemaran Salmonella. Penelitian
ini bertujuan memberikan gambaran kejadian cemaran dan resistensi antimikrob bakteri E. coli yang
ditemukan pada produk tepung telur impor. Sebanyak 100 sampel tepung telur impor dikoleksi selama
bulan Agustus 2014 dari dua negara asal, yaitu Ukraina dan India berupa whole egg powder (Ukraina
n=30, India n=40) dan egg yolk powder (India n=30). Pengujian yang dilakukan terhadap sampel berupa
pemeriksaan fisik kemasan dan label produk tepung telur dilanjutkan dengan pengambilan sampel dan
pengujian cemaran bakteri menggunakan pengujian cepat (rapid test) dan metode pengujian konvensional
berupa isolasi dan identifikasi. Isolat E. coli yang berhasil dideteksi dan diidentifikasi kemudian diuji
resistensinya terhadap preparat antibiotik. Berdasarkan hasil pengujian, ditemukan empat sampel positif
E. coli. Isolat E. coli menunjukkan resistensi terhadap enam jenis antibiotik dengan 75% isolat memiliki
resistensi terhadap minimal tiga jenis antibiotik. Kondisi tersebut membutuhkan perhatian khusus
karena timbulnya resistensi antibiotik pada bakteri E. coli memberikan dampak negatif terhadap
kesehatan manusia, hewan, dan lingkungan.
Kata-kata kunci: resistensi antibiotik, E. coli, tepung telur impor
Abstract
Eschericia coli contamination was found on egg powder imported to Indonesia during microbial
examination. The study was conducted to describe the presence of E. coli and its resistance to antibiotics
in egg powder imported to Indonesia through The port of Tanjung Priok. Samples was determined using
cross sectional study and the sample size was calculated based on assumption of confidence level of 95%
with margin of error of 10% and predicted prevalence of 50%. Total of 100 egg powder samples was
collected in August 2014 from two exporting countries, Ukraine (whole egg powder, n=30) and India (whole
egg powder, n=40 and egg yolk powder, n=30). Examination was performed by packaging and label inspection
of the product followed by samples collection and testing for bacterial contamination using rapid test and
conventional isolation and identification methods. Detected E. coli was isolated and then tested for
antibiotic resistance. Examination results showed that 4 samples were positive to E. coli. E. coli isolates
showed resistance against 6 types of antibiotics and 75% of the isolates had resistance against minimum
of 3 types of antibiotics. These conditions should be taken into consideration since antibiotic resistance in
E. coli would cause negative impacts on human, animal and environmental health.
Key words: antibiotic resistance, egg powder, E. coli
235
Kamil Riski Sidik, et al
Jurnal Veteriner
PENDAHULUAN
Telur adalah bahan pangan asal hewan
yang memiliki kandungan nutrisi yang
dibutuhkan oleh manusia. Bahan pangan
tersebut menjadi salah satu pilihan untuk
dikonsumsi sebagai sumber protein hewani
selain daging, susu, dan ikan. Kandungan
nutrisi yang dimiliki telur sangat baik bagi
manusia, tetapi juga menjadi media yang baik
bagi pertumbuhan mikroorganisme. Kontaminasi mikrob pada telur menjadi masalah yang
telah diketahui secara luas, dan memiliki
dampak secara ekonomi pada industri
perunggasan (Jin et al., 2008).
Potensi terjadinya kontaminasi mikroorganisme pada telur membuat adanya
rekomendasi untuk terlebih dulu memberikan
perlakuan pada telur berupa pasteurisasi
sebelum dikonsumsi atau dalam proses produksi
pangan olahan. Kondisi tersebut memungkinkan jika jumlah telur yang digunakan relatif
kecil. Meskipun demikian, kebutuhan akan
pemanfaatan telur tidak hanya pada tingkat
konsumsi individu atau skala kecil. Terdapat
kebutuhan akan telur dalam jumlah besar pada
skala industri. Kondisi tersebut mengakibatkan
perlakuan berupa pasteurisasi setiap kali telur
digunakan sebagai bahan baku bukan menjadi
pilihan yang efisien dan ekonomis. Solusi bagi
pihak industri yang membutuhkan telur sebagai
bahan baku tersedia dalam bentuk olahan telur
yang telah melalui proses pasteurisasi dan dibuat
dalam bentuk tepung telur. Berdasarkan data
laporan tahunan Balai Besar Karantina
Pertanian Tanjung Priok (BBKP Tanjung
Priok), sepanjang tahun 2013 dilakukan
importasi tepung telur sebesar 1.711.854 kg
melalui 135 kali pemasukan dengan negara
pengekspor adalah India (91,2%), Ukraina
(7,3%), dan Amerika Serikat (1,5%) (BBKP
Tanjung Priok, 2014).
Escherichia coli telah dilaporkan sebagai
salah satu jenis bakteri yang dapat ditemukan
pada telur meskipun telah dilakukan perlakuan
pemanasan (Botka-Petrak et al., 2000). Bakteri
E. coli adalah mikrob Gram negatif yang secara
alami berada pada saluran pencernaan, feses
hewan, dan manusia (de Verdier et al., 2012).
Namun demikian, beberapa galur bakteri
tersebut dapat menyebabkan kejadian penyakit
yang berakibat fatal pada manusia dan hewan
(Bonnet et al., 2009; de Verdier et al., 2012;
Murray et al., 2013). Kejadian cemaran E. coli
pada telur telah banyak dilaporkan baik pada
tingkat peternakan, pada telur konsumsi,
maupun pada produk olahan yang menggunakan telur sebagai bahan baku (Botka-Petrak et
al., 2000; Oh et al., 2011; Jones et al., 2012:
Grizard et al., 2014).
Bakteri E. coli menarik minat para peneliti
akibat cemaran dan patogenesisnya pada hewan
dan manusia yang ditimbulkannya. Kemampuan bakteri tersebut bersifat resisten terhadap
penggunaan senyawa antibiotik telah banyak
dilaporkan (Dhanarani et al., 2009; De Jong et
al., 2012; Tadesse et al., 2012). Potensi bakteri
tersebut untuk menyebarkan kemampuan
resistensinya kepada bakteri lainnya telah pula
banyak dikaji (Machado et al., 2008; Trobos et
al., 2009; Venturini et al., 2010; Fortini et al.,
2011; Kluytmans et al., 2013; Liebana et al.,
2013; Shakya et al., 2013). Munculnya
kemampuan bakteri, khususnya E. coli untuk
bersifat resisten terhadap penggunaan senyawa
antibiotik tentunya menimbulkan masalah yang
besar bagi manusia, hewan, dan lingkungan
(Diarra et al., 2007; Machado et al., 2008;
Venturini et al., 2010; Sahoo et al., 2012).
Penelitian ini bertujuan memberikan
gambaran kejadian cemaran dan resistensi
antimikrob E. coli yang ditemukan pada produk
tepung telur impor yang dimasukan melalui
Pelabuhan Tanjung Priok, Jakarta. Isolat E. coli
yang diuji berasal dari temuan pada proses
pemeriksaan cemaran bakteri terhadap sampel
tepung telur terkait tindakan karantina yang
dilakukan.
METODE PENELITIAN
Pengujian terhadap sampel tepung telur
(whole egg powder dan egg yolk powder),
dilakukan pada bulan Agustus sampai dengan
November 2014. Pengambilan sampel dilakukan
di Instalasi Tempat Pemeriksaan Karantina
Hewan, BBKP Tanjung Priok, Jakarta. Pengujian secara laboratorium dilakukan di Laboratorium Kesehatan Masyarakat Veteriner, Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian
Bogor. Uji konfirmasi terhadap isolat bakteri
yang berhasil ditemukan dilakukan di Balai
Pengujian Mutu dan Sertifikasi Produk Hewan
(BPMSPH), Bogor.
Jenis antibiotik yang digunakan dalam
pengujian kepekaan mikroorganisme terhadap
bahan antimikrob (antibiotik) berasal dari lima
golongan antibiotik. Antibiotik dari golongan βlactam yang digunakan adalah preparat
236
Jurnal Veteriner
Juni 2016 Vol. 17 No. 2 : 242-252
ampisilin 10 µg (AMP; OXOID CT0003B),
amoxicillin-clavulanic acid 30 µg (AMC; OXOID
CT0223B) dan oxacillin 5 µg (OX; OXOID
CT0040B). Antibiotik dari golongan aminoglikosida yang digunakan adalah preparat
gentamicin 10 µg (CN; OXOID CT0024B) dan
kanamicin 30 µg (K; OXOID CT0026B).
Antibiotik dari golongan sefalosporin yang
digunakan adalah preparat cephalotin 30 µg (KF;
OXOID CT0010B), cefoxitin 30 µg (FOX;
OXOID), cefotaxime 30 µg (CTX; OXOID
CT0166B). Antibiotik dari golongan quinolon
yang digunakan adalah preparat nalidixic acid
30 µg (NA; OXOID CT0031B) dan dari golongan
tetrasiklin yang digunakan adalah preparat
tetrasiklin 30 µg (T; OXOID CT0031B). Dalam
setiap pengujian digunakan pula cakram tanpa
kandungan bahan antimikrob (blank disc;
OXOID CT0998B) sebagai kontrol negatif.
Dalam setiap pengujian laboratorium yang
dilakukan, digunakan kontrol cemaran bakteri
berupa isolat bakteri komersial. Isolat bakteri
yang digunakan sebagai kontrol adalah
Salmonella typhimurium ATCC 14028 dan E.
Coli ATCC 25922.
Pengambilan Sampel dan Besaran Sampel
Besaran sampel tepung telur yang diambil,
dihitung dengan menggunakan rumus
pendugaan prevalensi berdasarkan kajian lintas
seksional. Besaran sampel ditentukan pada
tingkat kepercayaan 95% dihitung menggunakan persamaan menurut Budiharta (2002).
Pengambilan sampel difokuskan pada importasi
tepung telur yang masuk melalui Pelabuhan
Tanjung Priok, Jakarta selama bulan Agustus
2014. Rumus penghitungan besaran sampel
menurut Budiharta (2002):
4 PQ
n=
(L2)
Keterangan: n=besaran sampel; P = asumsi
prevalensi; Q = 1 – P dan L = besaran
galat yang diinginkan
Besaran sampel yang diperoleh dengan
asumsi prevalensi 50% dan galat sebesar 10%
pada tingkat kepercayaan 95% yaitu sejumlah
100 sampel. Pengambilan sampel dilakukan
secara acak sederhana (simple random
sampling). Besaran sampel yang diambil pada
setiap tindakan pengambilan sampel dengan
juga mempertimbangkan negara asal, perbedaan
jenis tepung telur, dan batch produksi.
Pengujian Cepat (Rapid Test) terhadap
Sampel Tepung Telur
Sampel tepung telur yang telah dikoleksi
diuji menggunakan perangkat pengujian cepat
(rapid test) komersial Salmonella/Enterobacteriaceae (RIDA ® COUNT Salmonella/
Enterobacteriaceae, r-biopharm, Jerman) untuk
mengetahui ada tidaknya cemaran Salmonella
spp dan bakteri dari kelompok Enterobacteriaceae lainnya. Sampel tepung telur yang
digunakan dalam pengujian ini berasal dari
suspensi sampel pre-enrichment (25 g tepung
telur ditambahkan kedalam 225 mL BPW,
diinkubasi 18-20 jam pada suhu 37°C) diteteskan
pada permukaan lembaran pengujian rapid test
Salmonella/Enterobacteriaceae. Pembacaan
hasil pengujian dilakukan dengan memperhatikan perubahan warna yang timbul pada
lembaran pengujian rapid test Salmonella/
Enterobacteriaceae dan dibandingkan dengan
kontrol dan panduan pembacaan hasil.
Isolasi dan Identifikasi E. coli Menggunakan Metode Kultur
Pemeriksaan cemaran bakteri menggunakan metode kultur dilakukan mengacu
pada Standar Nasional Indonesia (SNI)
2897:2008 tentang metode pengujian cemaran
mikrob dalam daging, telur, dan susu serta hasil
olahannya (BSN 2008). Metode isolasi dan
identifikasi yang dilakukan merujuk pada
prosedur isolasi dan identifikasi yang dilakukan
terkait pengujian cemaran bakteri Salmonella
spp pada bahan pangan. Pengujian cemaran
dilakukan dengan modifikasi pada media yang
digunakan pada tahapan pra-pengayaan.
Medium yang digunakan pada tahapan prapengayaan diubah menggunakan buffered
peptone water 0,1% (Musgrove et al., 2006).
Prosedur yang dilakukan tetap dapat memungkinkan bakteri dari kelompok Enterobacteriaceae lainnya untuk tumbuh. Penentuan jenis
bakteri secara presumptif didasarkan pada
karakterisasi pertumbuhan bakteri pada media
biakan selektif. Adapun pengujian yang
dilakukan sebagai berikut: sebanyak 25 g
sampel ditambahkan ke dalam 225 mL media
pra-pengayaan BPW 0,1%, selanjutnya
diinkubasikan pada suhu 37°C selama 18-20 jam.
Sebanyak 1 mL larutan tersebut kemudian
diambil untuk ditambahkan ke dalam 10 mL
media selective enrichment RappaportVassiliadis (RV) dan selanjutnya diinkubasikan
pada suhu 42°C selama 24 jam. Sebanyak satu
ose inokulum dari sampel yang telah diinkubasi
237
Kamil Riski Sidik, et al
Jurnal Veteriner
dalam media RV kemudian diinokulasikan pada
media padat xylose lysine deoxycholate agar
(XLD) dan diinkubasi pada suhu 37°C selama
24 jam. Koloni yang tumbuh pada media XLD
kemudian dikarakterisasi penampakan
pertumbuhannya. Koloni yang tumbuh
kemudian diisolasi dan diidentifikasi terhadap
Salmonella dan E. coli berdasarkan reaksi
biokimiawi pada media agar miring triple sugar
iron agar (TSIA) dan lysine iron agar (LIA).
Pengujian biokimiawi yang dilakukan kemudian
dilanjutkan dengan pengujian untuk melihat
gambaran pola reaksi IMViC (Indole, MethylRed, Voges–Proskauer, and Citrate test).
Pengujian IMViC dilakukan mengacu pada
Standar Nasional Indonesia (SNI) 2897:2008
tentang metode pengujian cemaran mikrob
dalam daging, telur, dan susu serta hasil
olahannya (BSN 2008). Sebelum dilakukan
pengujian, koloni yang diduga sebagai E. coli
terlebih dulu diinokulasikan pada media NA
miring. Inokulum pada NA miring diinkubasi
pada temperatur 35°C selama 18-24 jam
sebelum dilakukannya uji biokimia. Uji indole
dilakukan dengan menginokulasikan koloni dari
tabung NA pada media TB. Inokulum kemudian
diinkubasi pada temperatur 35°C selama 24±2
jam. Setelah masa inkubasi selesai, dilakukan
penambahan 0,2 mL reagen Kovac. Hasil reaksi
positif ditandai dengan terbentuknya cincin
merah pada lapisan atas media. Hasil reaksi
negatif ditandai dengan terbentuknya cincin
kuning pada lapisan atas media.
Uji Methyl-Red dilakukan dengan
menginokulasikan koloni dari tabung NA ke
tabung yang berisi 10 mL media MR-VP.
Inokulum kemudian diinkubasi pada temperatur
35°C selama 48±2 jam. Setelah masa inkubasi
selesai, 2-5 tetes larutan indikator MR
ditambahkan ke dalam tabung. Hasil reaksi
positif ditandai dengan terbentuknya warna
merah muda eosin dalam kurun waktu
maksimal dua jam. Uji Voges-Praskeur
dilakukan dengan menginokulasikan koloni dari
tabung NA ke tabung yang berisi 10 mL media
MR-VP. Inokulum kemudian diinkubasi pada
temperatur 35°C selama 48±2 jam. Setelah
masa inkubasi selesai, 5 mL media MR-VP
dipindahkan ke dalam tabung reaksi baru dan
ditambahkan 0,6 mL larutan β-naphtol dan 0,2
mL KOH 40% kemudian digoyang-goyang.
Hasil reaksi positif ditandai dengan
terbentuknya warna merah muda eosin dalam
kurun waktu maksimal dua jam.
Uji sitrat dilakukan dengan menginokulasi
koloni dari tabung NA pada media SCA.
Inokulum kemudian diinkubasi pada temperatur
35°C selama 48±2 jam. Hasil reaksi positif
ditandai dengan berubahnya warna media SCA
dari hijau menjadi biru setelah masa inkubasi.
Interpretasi hasil pengujian biokimia sebagai
peneguhan identifikasi E. coli melalui pola hasil
reaksi IMViC yang dihasilkan. Bakteri E. coli
diklasifikasikan melalui hasil reaksi IMViC
dengan pola + + - - atau - + - - (BSN 2008).
Uji Kepekaan Isolat E. coli terhadap
Antibiotik
Pengujian kepekaan E. coli terhadap
antibiotik dilakukan menggunakan metode
difusi cakram (disc diffusion method) merujuk
pada metode Clinical and Laboratory Standards
Institute (CLSI 2012). Isolat bakteri yang
berhasil diisolasi, diinokulasikan pada media
padat nutrien agar miring. Setelah diperoleh
biakan yang homogen, satu ose dari biakan
tersebut dipindahkan ke dalam Triptic Soy
Broth (TSB), kemudian diinkubasi pada suhu
37°C selama 24 jam hingga menjadi keruh.
Sebanyak 0,1-1,0 mL bakteri yang telah
dibiakan dalam TSB kemudian disuspensikan
ke dalam 9 mL BPW 0,1% dengan
menggunakan vortex hingga kekeruhannya
menyamai dengan 0,5 Mc Farland. Suspensi
bakteri sebanyak 0,1 mL diinokulasikan secara
merata pada Mueller-Hinton agar (MHA) padat
dengan menggunakan hockey stick. Lempeng
cakram kosong (blank disc) dan lempeng cakram
antibiotik kemudian ditempelkan pada
permukaan MHA padat yang sudah diinokulasi
dengan isolat bakteri.
Cawan petri berisi inokulum dan lempeng
cakram pengujian resistensi antibiotik
diinkubasikan pada suhu 37°C selama 24 jam.
Setelah diinkubasikan selama 24 jam, diameter
daerah hambat (DDH) pertumbuhan bakteri
yang terbentuk di sekitar cakram antibiotik
diukur dengan penggaris dalam satuan
millimeter. Isolat bakteri ditentukan
kepekaannya terhadap antimikrob dengan
mengukur zona hambat yang terbentuk.
Penentuan susceptible (S), intermediate (I), dan
resistant (R) ditentukan berdasarkan ukuran
zona hambat yang terbentuk berdasarkan
standar interpretasi diameter zona hambat
antibiotik (CLSI, 2012).
Analisis Data
Hasil pengujian menggunakan perangkat
rapid test dikaji hubungannya dengan hasil
238
Jurnal Veteriner
Juni 2016 Vol. 17 No. 2 : 242-252
yang diperoleh dari pengujian menggunakan
metode kultur. Hasil analisis data disajikan
dalam bentuk tabel dan grafik untuk
menggambarkan kejadian cemaran E. coli serta
tingkat resistensi terhadap antibiotik.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil pengujian menggunakan perangkat
uji cepat Salmonella/Enterobacteriaceae
menunjukkan bahwa tidak terdapat sampel
tepung telur yang menunjukkan reaksi positif
terhadap Salmonella. Perangkat uji cepat yang
digunakan menunjukkan hasil yang baik dalam
mendeteksi adanya cemaran bakteri dari
kelompok Enterobacteriaceae, dalam hal ini
adalah E. coli. Gambaran hasil pengujian
menggunakan perangkat uji cepat Salmonella/
Enterobacteriaceae disajikan pada Gambar 1.
Pertumbuhan koloni yang diduga E. coli pada
media XLD disajikan pada Gambar 1. Koloni
diduga E. coli kemudian diuji konfirmasi
menggunakan uji biokimiawi berdasarkan pola
IMViC. Gambaran hasil pengujian IMViC
disajikan pada Gambar 2.
Pemeriksaan cemaran bakteri menggunakan metode kultur menunjukkan terdapat
empat sampel (4%) positif E. coli. Hasil isolasi
dan identifikasi cemaran E. coli menggunakan
metode kultur secara lengkap disajikan pada
Tabel 1.
Proses produksi bahan olahan yang
bersumber dari telur mencakup penerapan
pemanasan pasteurisasi. Terdapat dua aspek
penting yang ingin dicapai melalui perlakuan
pasteurisasi. Aspek pertama adalah mengeliminasi sebanyak mungkin mikroorganisme yang
mencemari telur. Aspek yang lain adalah
menjaga komponen gizi yang dikandungnya
khususnya protein tetap dalam kondisi yang
baik (Nemeth et al., 2011). Pasteurisasi dalam
proses produksi tepung telur umumnya
dilakukan pada suhu 60-65°C dengan durasi 3–
6 menit. Proses kemudian dilanjutkan dengan
dehidrasi yang dilakukan pada suhu inlet 121–
145°C dan outlet 55–60°C. Perlakuan kemudian
dilanjutkan dengan penyimpanaan pada ruang
khusus dengan suhu hingga 70°C selama
minimum dua jam untuk pasteurisasi produk
olahan yang dihasilkan (MAF 2003). Setelah
proses produksi selesai, masih dapat ditemukan
adanya cemaran bakteri yang dapat bertahan
dari proses pasteurisasi (Nemeth et al., 2011).
Kondisi tersebut menjadi faktor penentu masih
ditemukannya adanya cemaran E. coli pada
tepung telur dalam penelitian ini.
Kualitas mikrobiologi tepung telur sangat
dipengaruhi oleh perlakuan pasteurisasi bahan
baku yang digunakan dan kontrol yang baik
terhadap sanitasi dalam proses produksi. Whole
egg powder dan egg yolk powder umumnya
melalui proses pasteurisasi saat masih dalam
bentuk cair sebelum kemudian dilanjutkan
dengan proses pengeringan. Kombinasi antara
perlakuan pasteurisasi dan pemanasan pada
proses pengeringan membuat tepung telur yang
dihasilkan memiliki cemaran bakteri yang
sangat rendah (Berquist, 1995).
Bakteri E. coli menjadi salah satu
mikroorganisme yang menyebabkan kejadian
gastroenteritis pada manusia (Plym dan Wierup,
2006). Air dan makanan yang terkontaminasi
feses hewan atau manusia karier merupakan
sumber penyebaran bakteri dari kelompok
Enterobacteriaceae termasuk E. coli.
Kontaminasi silang bakteri tersebut pada bahan
pangan terjadi melalui orang yang menangani
makanan, pemrosesan, kontaminasi peralatan,
atau kontaminasi saat penyimpanan (Carraso
et al., 2012; Murray et al., 2013). Terjadinya
cemaran bakteri pada telur diasosiasikan
dengan kondisi telur dengan cangkang yang
retak atau kotor (Gast 2005). Bakteri E. coli
Tabel 1. Hasil pengujian Escherichia coli menggunakan metode kultur berdasarkan negara asal
dan jenis tepung telur
Asal negara
Jenis tepung telur
Jumlah sampel
Jumlah sampel positif
E. coli
Ukraina
India
30
40
30
100
Whole egg powder
Whole egg powder
Egg Yolk Powder
Total
239
1 (3,3%)
2 (5,0%)
1 (3,3%)
4 (4,0%)
Kamil Riski Sidik, et al
Jurnal Veteriner
Gambar 1. Gambaran pengujian cemaran Escherichia coli pada sampel tepung telur.
(a) Gambaran hasil pengujian menggunakan rapid test; (b) Gambaran pertumbuhan
koloni bakteri diduga E. coli pada media xylose lysine deoxycholate agar (XLDA)
Gambar 2. Gambaran hasil pengujian biokimiawi Indole, Methyl-Red, Voges–Proskauer, and Citrate
test (IMViC) pada koloni diduga Escherichia coli. (a) Hasil uji citrate; (b) Hasil uji
indole; (c) Hasil uji methyl-red; dan (d) Hasil uji Voges-Proskauer
Gambar 3. Gambaran hasil pengujian resistensi antibiotik pada isolat E. coli yang diperoleh dari
sampel tepung telur.
240
Jurnal Veteriner
Juni 2016 Vol. 17 No. 2 : 242-252
secara alami merupakan flora normal yang
hidup dalam sistem pencernaan unggas. Bakteri
ini dilaporkan ditemukan pada permukaan
cangkang telur yang belum dibersihkan dan
kemudian dapat terbawa ke dalam proses
produksi pengolahan telur (Furtula et al., 2010;
Oh et al., 2011; Jones et al., 2012).
Pengujian resistensi antibiotik dilakukan
terhadap 10 jenis antibiotik dari lima golongan
yang berbeda. Gambaran hasil pengujian
resistensi antibiotik koloni E. coli yang berhasil
diisolasi disajikan pada Gambar 3. Hasil
pengujian resistensi antibiotik menunjukkan
isolat E. coli yang berhasil dideteksi secara
umum memiliki resistensi terhadap enam jenis
antibiotik dengan 75% isolat memiliki resistensi
terhadap minimal tiga jenis antibiotik. Data
hasil pengujian resistensi antibiotik terhadap
isolat yang berhasil dideteksi dan diisolasi dari
sampel tepung telur impor yang diuji disajikan
pada Tabel 2. Selain menunjukkan hasil
resisten, terdapat isolat bakteri yang
menunjukkan hasil pengujian berupa tingkat
penghambatan intermediet. Pengujian terhadap
isolat E. coli menunjukkan terdapat reaksi
intermediet pada dua isolat (40%) dengan
masing-masing isolat memberikan reaksi
intermediet pada minimal satu jenis antibiotik.
Hasil pengujian resistensi antibiotik terhadap
isolat bakteri yang memberikan hasil
intermediet disajikan pada Tabel 2.
Berdasarkan hasil pengujian yang
dilakukan, secara umum terlihat bahwa isolat
E. coli resisten terhadap antibiotik golongan βlactam. Seluruh isolat E. coli menunjukkan
resistensi terhadap oxacillin. Oxacillin merupakan generasi pertama antibiotik golongan
penicillin dengan spesifikasi khusus memiliki
kemampuan untuk bertahan dari enzim βlactamase yang dapat diproduksi oleh beberapa
jenis bakteri. Penggunaan antibiotik dari
kelompok tersebut diindikasikan pada infeksi
yang terjadi oleh bakteri yang memiliki
kemampuan memproduksi enzim β-lactamase.
Resistensi isolat E. coli dalam pengujian ini
mungkin karena oxacillin memiliki sifat yang
sangat lipophilic sehingga sulit untuk
menembus dinding sel bakteri jenis E. coli
(Tettey, 2011).
Penggunaan antibiotik yang semakin
intensif khususnya dalam bidang peternakan
memunculkan potensi masalah baru yang akan
berdampak sangat besar khususnya dalam hal
resistensi antibiotik (Bywater 2005; Ho et al.,
2011). Berbagai penelitian telah menunjukkan
adanya indikasi terjadinya resistensi antibiotik
pada E. coli baik yang diisolasi dari manusia
maupun yang berasal dari hewan ternak
(Bywater et al., 2004; Nys et al., 2004; Trobos et
al., 2009; Seputiene et al., 2010; Hu et al., 2013).
Terjadinya resistensi antibiotik pada E. coli
mengakibatkan kita tidak mudah dalam
memilih antibiotik yang dapat digunakan dalam
penanganan infeksi akibat E. coli. Keterbatasan
ini tentunya tidak terbatas hanya pada penanganan pada hewan, tetapi juga penanganan
infeksi E. coli pada manusia. Infeksi oleh E. coli
yang bersifat zoonosis, semakin diperparah oleh
adanya kemampuan bakteri tersebut untuk
bertahan terhadap antibiotik yang umum
digunakan (Phillips et al., 2004; Manges dan
Johnson, 2012).
Laporan-laporan penelitian menggambarkan bahwa resistensi yang dihasilkan oleh
E. coli secara konsisten paling tinggi terjadi
pada jenis antibiotik yang telah lama digunakan
pada manusia dan hewan. Pada dua dekade
terakhir telah terjadi peningkatan kejadian dan
penyebaran bakteri yang bersifat resisten
terhadap lebih dari satu jenis antibiotik.
Peningkatan kejadian resistensi juga terjadi
pada jenis antibiotik yang lebih baru seperti
pada golongan fluoroquinolon dan beberapa jenis
dari golongan sefalosporin (Bywater et al., 2004;
Tabel 2. Hasil pengujian bakteri Escherichia coli (n=4) yang resisten terhadap antibiotik dengan
kategori resisten dan intermediet
Jumlah isolat yang resisten berdasarkan jenis antibiotik
Kategori
Resisten
Intermediet
AMP
AMC
OX
CN
K
KF
FOX
CTX
NA
T
2
2
1
1
4
0
0
0
0
0
2
0
3
0
0
0
0
0
2
0
Keterangan: AMP : ampisilin; AMC : amoxicillin-clavulanic acid; OX : oxacillin; CN : gentamicin; K :
kanamycin; KF : cephalotin; FOX : cefoxitin; CTX : cefotaxim; NA : nalidixic acid; T : tetracyclin
241
Kamil Riski Sidik, et al
Jurnal Veteriner
Seputiene et al., 2010; Tadesse et al., 2012).
Gambaran tersebut dapat pula terlihat pada
hasil pengujian resistensi antibiotik yang
ditunjukan oleh isolat E. coli yang diuji. Isolat
E.coli yang diperoleh menunjukkan resistensi
pada seluruh antibiotik golongan β-lactam serta
antibiotik golongan tetrasiklin. Isolat E. coli
yang diperoleh juga menunjukkan resistensi
terhadap jenis antibiotik yang lebih baru yaitu
cephalotin dan cefoxitin dari golongan
sefalosporin.
Salah satu faktor yang berperanan dalam
timbulnya resistensi antibiotik pada bakteri
adalah pemanfaatan senyawa antibiotik sebagai
bahan imbuhan pakan (Roe dan Pillai, 2003;
Bonnet et al., 2009). Praktek penggunaan
senyawa antibiotik sebagai bahan imbuhan
pakan memicu terjadinya perubahan flora
normal dalam saluran pencernaan. Perubahan
yang terjadi termasuk munculnya sifat
resistensi pada mikrob. Penggunaan imbuhan
pakan dalam bentuk senyawa antimikrob pada
akhirnya membuat mikrob yang bersifat resisten
dapat bertahan hidup dan mencemari lingkungan. Kondisi serupa terjadi pada E. coli yang
hidup dalam saluran cerna unggas (Furtula et
al., 2010). Bakteri E. coli yang memiliki
resistensi terhadap senyawa antibiotik akhirnya
dikeluarkan dari tubuh unggas dan mencemari
lingkungan. Bentuk cemarannya di antaranya
adalah kontaminasi pada telur yang diproduksi.
Melalui mekanisme inilah E. coli dengan sifat
resistensi terhadap antibiotik dapat mencemari
telur yang digunakan untuk konsumsi maupun
untuk keperluan produksi bahan pangan.
SIMPULAN
Terdapat cemaran E. coli pada tepung telur
yang diimpor melalui Pelabuhan Tanjung Priok,
Jakarta. Tingkat kejadian cemaran E. coli
mencapai 4% pada sampel tepung telur impor
yang diuji. Isolat E. coli yang berhasil dideteksi
dan diisolasi resisten terhadap beberapa jenis
antibiotik. Isolat E. coli memiliki resistensi
terhadap enam jenis antibiotik dengan 75% isolat
memiliki resistensi terhadap minimal tiga jenis
antibiotik. Isolat E. coli menunjukkan resistensi
intermediet pada dua isolat (40%) dengan
masing-masing isolat memberikan reaksi
intermediet pada minimal satu jenis antibiotik.
SARAN
Pemerintah selayaknya menerbitkan
pedoman dan standar yang akan digunakan
dalam pengawasan sanitasi produk dan tata
laksana impor serta perdagangan produk tepung
telur. Pihak importir harus mempertimbangkan prinsip good manufacturing process dalam
memilih produsen asal tepung telur yang akan
diimpor. Penggunaan produk tepung telur pada
tingkatan industri maupun konsumen
sebaiknya tetap melalui proses pasteurisasi
untuk menekan risiko adanya cemaran bakteri
patogen.
UCAPAN TERIMA KASIH
Terimakasih dan penghargaan penulis
ucapkan kepada: Badan Karantina Pertanian,
atas kesempatan berharga yang telah diberikan.
Kepada Balai Besar Karantina Pertanian
Tanjung Priok dan pihak-pihak terkait dalam
pelaksanan penelitian terkait pengambilan data
dan sampel. Ucapan terima kasih dan
penghargaan juga penulis sampaikan kepada
Laboratorium Kesehatan Masyarakat Veteriner
dan Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas
Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor.
Penulis menyatakan tidak ada konflik
kepentingan dengan pihak-pihak yang terkait
dalam penelitian ini.
DAFTAR PUSTAKA
[BBKP Tanjung Priok] Balai Besar karantina
Pertanian tanjung Priok. 2014. Laporan
Tahunan BBKP Tanjung Priok 2013.
Jakarta (ID): BBKP Tanjung Priok.
Berquist DH. 1995. Egg Dehydration. Di dalam:
Stadelman WJ, Coterril OJ, editor. Egg
Science and Technology, 4th Ed. New York
(US): Food Product Pr. Hlm. 335-376.
Bonnet C, Diarrassouba F, Brousseau R, Masson
L, Topp E, Diarra MS. 2009. Pathotype and
Antibiotic Resistance Gene Distributions of
Escherichia coli Isolates from Broiler
Chickens Raised on AntimicrobialSupplemented Diets. Appl Environ
Microbiol 75(22): 6955-6962.
242
Jurnal Veteriner
Juni 2016 Vol. 17 No. 2 : 242-252
Botka-Petrak K, Petrak T, Medic H, Novakovic
P. 2000. Bacteriological contamination of egg
products after thermal preservation
processes. Acta Aliment Hung 29: 315-322.
[BSN] Badan Standardisasi Nasional. 2008. SNI
2897:2008. Tentang Metode Pengujian
Cemaran Mikrob Dalam Daging, Telur, dan
Susu Serta Hasil Olahannya. Jakarta (ID):
Badan Standardisasi Nasional.
Budiharta S. 2002. Kapita Selecta Epidemiologi
Veteriner. Yogyakarta (ID): Bagian Kesehatan Masyarakat Veteriner FKH UGM.
Bywater RJ. 2005. Identification and surveillance of antimicrobial resistance dissemination in animal production. Poult Sci
84: 644-468.
Bywater R, Deluyker H, Deroover E, de Jong A,
Marion H, McConville M, Rowan T, Shryock
T, Shuster D, Thomas V, Valle M, Walters
J. 2004. A European survey of antimicrobial
susceptibility among zoonotic and commensal bacteria isolated from food-producing
animals. J Antimicrob Chemother 54: 744754.
Carraso E, Morales-Rueda A, García-Gimeno
RM. 2012. Cross-contamination and
recontamination by Salmonella in foods: a
review. Food Res Int 45: 545-556.
[CLSI] Clinical and Laboratory Standards
Institute. 2012. Performance Standarts for
Antimicrobial Susceptibility Testing;
Twenty Second Informational Supplemant.
West Valley (US): Clinical and Laboratory
Standards Institute.
De Jong A, Thomas V, Simjee S, Godinho K,
Schiessl B, Klein U, Butty P, Valle M,
Marion H, Shryock TR. 2012. PanEuropean monitoring of susceptibility to
human-use antimicrobial agents in enteric
bacteria isolated from healthy foodproducing animals. J Antimicrob
Chemother 67: 638-651.
Diarra, MS, Silversides FG, Diarrasouba F,
Pritchard J, Masson L, Brousseau R,
Bonnet C, Delaquis P, Bach S, Skura BJ,
Topp E. 2007. Impact of feed supplementation with antimicrobial agents on growth
performance of broiler chickens, Clostridium perfringens and Enterococcus counts,
and antibiotic resistance phenotypes and
distribution of antimicrobial resistance
determinants in Escherichia coli isolates.
Appl Environ Microbiol 73: 6566–6576.
Fortini D, Fashae K, Garcýa-Fernandez A, Villa
L, Carattoli A. 2011. Plasmid-mediated
quinolone resistance and â-lactamases in
Escherichia coli from healthy animals from
Nigeria. J Antimicrob Chemother 66: 12691272.
Furtula V, Farrell EG, Diarrassouba F, Rempel
H, Pritchard J, Diarra MS. 2010.
Veterinary pharmaceuticals and antibiotic
resistance of Escherichia coli isolates in
poultry litter from commercial farms and
controlled feeding trials. Poult Sci 89: 180188.
Gast RK. 2005. Bacterial Infection of Eggs.
Dalam: GC Mead, editor. Food Safety
Control in The Poultry Industry.
Cambridge (UK): Woodhead Publishing
Ltd. Hlm. 1-20.
Grizard S, Dini-Andreote F, Tieleman BI, Salles
JF. 2014. Dynamics of bacterial and fungal
communities associated with eggshells
during incubation. Ecol Evol 4(7): 11401157.
Ho PL, Chow KH, Lai EL, Lo WU, Yeung MK,
Chan J, Chan PY, Yuen KY. 2011.
Extensive dissemination of CTX-Mproducing Escherichia coli with multidrug
resistance to ‘critically important’ antibiotics
among food animals in Hong Kong, 2008–
10. J Antimicrob Chemother 66: 765-768.
de Verdier K, Nyman A, Greko C, Bengtsson B.
2012. Antimicrobial resistance and virulence
factors in Escherichia coli from Swedish
dairy calves. Acta Vet Scand 54: 2.
Hu GZ, Pan YS, Wu H, Hu H, Xu R, Yuan L,
Liu JH, Feng JK. 2013. Prevalence of
tetracycline resistance genes and
identification of tet(M) in clinical isolates of
Escherichia coli from sick ducks in China.
J Med Microbiol 62: 851-858.
Dhanarani TS, Shankar C, Park J, Dexilin M,
Kumar RR, Thamaraiselvi K. 2009. Study
on acquisition of bacterial antibiotic
resistance determinants in poultry litter.
Poult Sci 88: 1381-1387.
Jin T, Zhang H, Boyd G, Tang J. 2008. Thermal
resistance of Salmonella enteritidis and
Escherichia coli K12 in liquid egg
determined by thermal-death-time disks. J
Food Eng 84: 608-614
243
Kamil Riski Sidik, et al
Jurnal Veteriner
Jones DR, Anderson KE, Guard JY. 2012.
Prevalence of coliforms, Salmonella,
Listeria, and Campylobacter associated with
eggs and the environment of conventional
cage and free-range egg production. Poult
Sci 91: 1195-1202.
Kluytmans JAJW, Overdevest ITMA, Willemsen
I, Kluytmans-van den Bergh MFQ, van der
Zwaluw K, Heck M, Rijnsburger M,
Vandenbroucke-Grauls CMJE, Savelkoul
PHM, Johnston BD, Gordon D, Johnson JR.
2013. Extended-Spectrum â-Lactamase–
Producing Escherichia coli From Retail
Chicken Meat and Humans: Comparison of
Strains, Plasmids, Resistance Genes, and
Virulence Factors. Clin Infect Dis 56(4): 478487.
Liebana E, Carattoli A, Coque TM, Hasman H,
Magiorakos AP, Mevius D, Peixe L, Poirel
L, Schuepbach-Regula G, Torneke K,
Torren-Edo J, Torres C, Threlfall J. 2013.
Public Health Risks of Enterobacterial
Isolates Producing Extended-Spectrum âLactamases or AmpC â-Lactamases in Food
and Food-Producing Animals: An EU
Perspective of Epidemiology, Analytical
Methods, Risk Factors, and Control Options.
Clin Infect Dis 56(7): 1030-1037.
Machado E, Coque TM, Canton R, Sousa JC,
Peixe L. 2008. Antibiotic resistance
integrons and extended-spectrum âlactamases among Enterobacteriaceae
isolates recovered from chickens and swine
in Portugal. J Med Microbiol 62: 296-302.
[MAF] Biosecurity Authority, Ministry of
Agriculture and Forrestry, Wellington, New
Zealand. 2003. Import Risk Analysis: Belovo
Eggs Powder. Wellington (NZ): Ministry of
Agriculture and Forrestry.
Manges AR, Johnson JR. 2012. Food-Borne
origins of Escherichia coli causing
extraintestinal infections. Clin Infect Dis
55(5): 712-9.
Murray D, Feldman C, Lee L, Schuckers C.
2013. An exploratory study of food safety and
food handling: Examining ready-to-eat foods
in independent delicatessen operations. Adv
Biosci Biotechnol 4: 430-436.
Musgrove MT, Jones DR, Northcutt JK, Cox NA,
Harrison MA, Fedorka-Cray PJ, Ladely SR.
2006. Antimicrobial Resistance in
Salmonella and Escherichia coli isolated
from commercial shell eggs. Poult Sci 85:
1665–1669.
Németh C, Mráz B, Friedrich L, Suhajda A,
Janzsó B, Balla C. 2011. Microbiological
measurements for the development of a new
preservation procedure for liquid egg. Czech
J Food Sci 29: 569-574.
Nys N, Okeke IN, Kariuki S, Dinant GJ,
Driessen C, Stobberingh EE. 2004. Antibiotic
resistance of faecal Escherichia coli from
healthy volunteers from eight developing
countries. J Antimicrob Chemother 54: 952955.
Oh JY, Kang MS, Kim JM, An BK, Song EA,
Kim JY, Shin EG, Kim MJ, Kwon JH, Kwon
YK. 2011. Characterization of Escherichia
coli isolates from laying hens with
colibacillosis on 2 commercial egg-producing
farms in Korea. Poult Sci 90: 1948-1954.
Phillips I, Casewell M, Cox T, De Groot B, Friis
C, Jones R, Nightingale C, Preston R
Waddell J. 2004. Does the use of antibiotics
in food animals pose a risk to human
health? A critical review of published data.
J Antimicrob Chemother 53: 28-52
Plym FL, Wierup M. 2006. Salmonella
contamination; a significant challenge to the
global marketing of animal food Products.
Rev Sci Tech Int Epiz 25(2): 541-554.
Roe MT, Pillai SD. 2003. Monitoring and
identifying antibiotic resistance mechanisms in bacteria. Poult Sci 82: 622–626.
Sahoo KC, Tamhankar AJ, Sahoo S, Sahu PS,
Klintz SR, Lundborg CS. 2012. Geographical Variation in Antibiotic-Resistant
Escherichia coli Isolates from Stool, CowDung and Drinking Water. Int J Environ
Res Public Health 9: 746-759.
Seputiene V, Povilonis J, Ruzauskas M, Pavilonis A, Suziedeliene E. 2010. Prevalence of
trimethoprim resistance genes in Escherichia coli isolates of human and animal
origin in Lithuania. J Med Microbiol 59:
315-322.
Shakya P, Barrett P, Diwan V, Marothi Y, Shah
H, Chhari N, Tamhankar AJ, Pathak A,
Lundborg CS. 2013. Antibiotic resistance
among Escherichia coli isolates from stool
samples of children aged 3 to 14 years from
Ujjain, India. BMC Infect Dis 13: 477.
244
Jurnal Veteriner
Juni 2016 Vol. 17 No. 2 : 242-252
Tadesse DA, Zhao S, Tong E, Ayers S, Singh A,
Bartholomew MJ, McDermott PF. 2012.
Antimicrobial Drug Resistance in
Escherichia coli from Humans and Food
Animals, United States, 1950–2002. Emerg
Infect Dis 18(5): 741-749.
Trobos M, Lester CH, Olsen JE, Frimodt-Møller
N, Hammerum AM. 2009. Natural transfer
of sulphonamide and ampicillin resistance
between Escherichia coli residing in the
human intestine. J Antimicrob Chemother
63: 80-86.
Tettey JNA. 2011. Antimicrobial Chemotherapy,
Antibiotics. Dalam: Watson DG, editor.
Pharmaceutical Chemistry. Edinburg (UK).
Churchill-Livingstone, Elsevier. Hlm. 449472.
Venturini C, Beatson SA, Djordjevic SP, Walker
MJ. 2010. Multiple antibiotic resistance gene
recruitment onto the enterohemorrhagic
Escherichia coli virulence plasmid. FASEB
J 24: 1160-1166.
245