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    Anexos Microbiologia

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    Este documento describe varios métodos utilizados para la identificación microbiana, incluyendo métodos basados en criterios morfológicos, tinción diferencial, pruebas bioquímicas, tipificación con fagos, ensayos serológicos y detección molecular. No existe un solo método para identificar todos los microorganismos, sino que se requiere combinar uno o más métodos dependiendo del organismo.

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    Este documento describe varios métodos utilizados para la identificación microbiana, incluyendo métodos basados en criterios morfológicos, tinción diferencial, pruebas bioquímicas, tipificación con fagos, ensayos serológicos y detección molecular. No existe un solo método para identificar todos los microorganismos, sino que se requiere combinar uno o más métodos dependiendo del organismo.

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    anexos microbiologia

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    Este documento describe varios métodos utilizados para la identificación microbiana, incluyendo métodos basados en criterios morfológicos, tinción diferencial, pruebas bioquímicas, tipificación con fagos, ensayos serológicos y detección molecular. No existe un solo método para identificar todos los microorganismos, sino que se requiere combinar uno o más métodos dependiendo del organismo.

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    Este documento describe varios métodos utilizados para la identificación microbiana, incluyendo métodos basados en criterios morfológicos, tinción diferencial, pruebas bioquímicas, tipificación con fagos, ensayos serológicos y detección molecular. No existe un solo método para identificar todos los microorganismos, sino que se requiere combinar uno o más métodos dependiendo del organismo.

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    1.

    Mtodos basados en criterios morfolgicos: Los rasgos morfolgicos (estructurales)


    han ayudado a los taxonomistas por muchos aos a clasificar organismos. Los organismos
    superiores tienen rasgos anatmicos tan diferentes que pueden ser fcilmente utilizados
    en su clasificacin, pero con respecto a los microorganismos, stos lucen bajo el
    microscopio tan similares que se dificulta su clasificacin. Es decir, que estos
    microorganismos que se ven tan parecidos bajo un microscopio, pueden diferir en
    propiedades bioqumicas, fisiolgicas y/o serolgicas. Sin embargo, aun cuando la
    morfologa celular dice poco sobre las relaciones filogen- ticas, sigue siendo til para la
    identificacin bacteriana. Por ejemplo: la presencia de endosporas y su localizacin resulta
    de mucha utilidad en la identificacin de bacilos esporulados.

    2. Mtodos basados en tincin diferencial: Es posible sacar conclusiones en relacin con


    la morfologa de una bacteria, examinando una lmina que fue sometida a un proceso de
    tincin diferencial. Estos criterios morfolgicos encabezan las primeras etapas del proceso
    de identificacin bacteriana. La mayor parte de las bacterias, teidas con Gram, las
    podemos clasificar como gram positivas o gram negativas, otras tinciones diferenciales,
    como la cido resistente, se aplican a otro tipo de bacterias, como por ejemplo
    micobacterias. Un examen microscpico de una lmina teida por medio de gram o de una
    tincin diferencial es til para obtener una informacin rpida sobre la calidad de un
    ambiente clnico. Por otro lado, un mdico tambin puede obtener suficiente informacin
    de un reporte tcnico de laboratorio para comenzar el tratamiento apropiado de un
    paciente

    4. Mtodos basados en pruebas bioqumicas: Las pruebas bioqumicas han sido


    ampliamente utilizadas para diferenciar bacterias. Estas pruebas se fundamentan en
    demostrar si el microorganismo es capaz de fermentar azcares, la presencia de enzimas,
    la degradacin de compuestos, la produccin de compuestos coloreados, etc. Aun
    bacterias fuertemente relacionadas pueden separarse en dos especies diferentes con base
    a pruebas bioqumicas. Por ejemplo, las bacterias entricas gram negativas, forman un
    grupo muy grande y heterogneo cuyo hbitat natural es el tracto gastrointestinal de
    humanos y otros animales. Esta familia, Enterobacteriaceae, incluye a varios patgenos
    que causan sndromes diarreicos. Un gran nmero de ensayos han sido desarrollados de
    manera de identificar rpidamente al pat- geno, para que posteriormente el mdico, con
    base al reporte, indique el tratamiento adecuado, o para que los epidemilogos puedan
    localizar la fuente de la infeccin. Existen flujogramas, como el que se describe a
    continuacin para la identificacin bacteriana, mediante pruebas bioqumicas de
    microorganismos. Por ejemplo, la presencia de un coco bacilo gram negativo, facultativo,
    fermentador de glucosa, oxidasa negativo, nos indica la presencia de una enterobacteria.
    4. Mtodos basados en tipificacin con fagos: La interaccin entre un virus bacteriano (fago) y su
    clula bacteriana sensible es sumamente especfica, ya que el proceso de adsorcin se encuentra
    mediado por receptores especficos tanto en el virus como en la clula bacteriana. A una placa con
    medio de cultivo slido inoculado con un cultivo puro de una determinada bacteria, se le aade
    una alcuota de un fago especfico; ste puede ocasionar la lisis de las bacterias, hecho que se
    evidencia en el cultivo como zonas claras definidas, denominadas placas, que indican que hubo
    infeccin y lisis celular. El uso de fagos especficos permite identificar y subclasificar bacterias
    dentro de una misma especie.

    5. Mtodos basados en ensayos serolgicos: Los mtodos serolgicos, implican la utilizacin de


    preparaciones de inmunoglobulinas especficas provenientes del suero o de un reactivo, y que
    pueden ser de gran utilidad en la identificacin microbiana en muestras puras o en muestras
    biolgicas. Cada uno de los mtodos tiene su fundamento particular, pero en lneas generales,
    todos se basan en la reaccin de un antgeno presente en el agente microbiano con su anticuerpo
    correspondiente. La solucin que contiene los anticuerpos se denomina antisuero

    Estos mtodos son muy tiles en diversas situaciones:

    Si a travs de un sistema miniaturizado basado en pruebas bioqumicas se determin que la


    bacteria causante de la infeccin es un miembro del genero Salmonella, utilizando una batera de
    antisueros contra el antgeno O presente en el lipopolisacarido de las bacterias gram negativas, es
    posible identificar a la Salmonella aislada hasta el nivel de serotipo (poli O, A, B, C, D, etc.).

    La inmunofluorescencia : ha resultado ser sumamente til en casos de infecciones de diferente


    origen. Puede utilizarse para la identificacin del microorganismo aislado o presente en una
    muestra biolgica. En el mtodo directo se fija la muestra problema a una lmina y se pone en
    contacto con el antisuero especfico marcado con una sustancia fluorescente (rodamina o
    fluorescena). Una vez transcurrido el tiempo para que tenga lugar la reaccin antgeno
    anticuerpo, se expone la lmina a la radiacin ultravioleta para visualizar la reaccin. Tambin
    existe la tcnica indirecta, donde en primer lugar se utiliza el anticuerpo especfico no marcado y
    posteriormente se utiliza un anti anticuerpo marcado.
    Mtodos basados en deteccin molecular:

    A travs de procedimientos y reactivos, se pueden detectar determinadas secuencias de


    ADN que son propias de un determinado agente microbiano.

    PCR se aplica generalmente para la identificacin de organismos que no pueden ser


    cultivados por mtodos convencionales

    Ejemplos: Bacterias Vibrio cholerae, helicobacter pylori, Staphylococcus aureus. Shigella


    dysenteriae, Escherichia coli, Mycobacterium tuberculosis.

    Virus: Parvovirus, Rotavirus, Adenovirus Rhinovirus.

    Protozoarios: Toxoplasma gondii, entamoeba histolyticum, Tripanosoma cruzi

    Identificacin microbiana :

    Se entiende por identificacin microbiana al conjunto de tcnicas y procedimientos que se aplican


    para establecer la identidad de un organismo.

    Mtodos utilizados para identificacin microbiana:

    Mtodos basados en criterios morfolgicos.

    Mtodos basados en tincin diferencial.

    Mtodos basados en pruebas bioqumicas.

    Mtodos basados en pruebas serolgicas.

    Mtodos basados en deteccin molecular.

    No todos los organismos se identifican por las mismas tcnicas, ni con base a un solo mtodo,
    sino a la combinacin de uno o ms.

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