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05 - Sem3 Ma Ia 23

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INGENERIA AMBIENTAL

MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

I-UNIDAD
ECOLOGIA Y EVOLUCION
MICROBIANA
LOGRO DE LA UNIDAD
A l finalizar el estudiante presenta un informe fotográfico, empleando las
diversas técnicas de coloración de microorganismos, considerando los
protocolos nacionales e internacionales.
Logro de la Sesión

El estudiante elabora un tríptico informativo de los


diferentes tipos de tinciones para microorganismos.
No todos los microorganismos
tienen un uso clínico medico sino
también pueden ser usados en las
industrias.
Los microorganismos que participan
en el área industrial producen uno o
más productos específicos
(alimentos).
Los microorganismos participan en
la descontaminación de suelos,
aguas.
Las bacterias, levaduras y hongos
filamentosos son utilizados en la agricultura
tanto para su aplicación como fertilizantes o
como fitosanitarios.
IDENTIFICACIÓN DE LOS
MICROORGANISMOS
Ms. Carmen Carolina Cumpa Yupton
IDENTIFICACION DE MICROORGANISMOS

Se entiende por identificación de microorganismos al conjunto de técnicas y procedimientos que


se aplican para establecer la identidad de un microorganismo.

❑ En área de investigación básica es donde se aísla


un determinado microorganismos que debe
identificarse para comprobar si se trata de un
microorganismo conocido o de uno nuevo para
poder clasificarlo.
❑ Es importante conocer los métodos en los cuales
se basa la identificación de los microorganismos.
No todos los microorganismos se identifican por las
mismas técnicas.
ESTRUCTURA DE LOS MICROORGANISMOS

Protozoo

Hongos

Microalga

Bacterias
ESTRUCTURA BACTERIANA
ESTRUCTURA FUNGICA
ESTRUCTURA DE LOS PROTOZOOARIOS
ESTRUCTURA DE LAS MICROALGAS
CLASIFICACION DE LOS METODOS DE IDENTIFICACIÓN

• En la mayoría de los casos la identificación no se realiza con base a un


solo método sino a la combinación de mas de uno.
Ejemplo: identificación de bacterias con base a criterios
morfológicos, tinción diferencias, pruebas bioquímicas y serológicas.
CLASIFICACIÓN DE LOS METODOS DE IDENTIFICACIÓN

1. Métodos basados en criterios morfológicos:


Los rasgos morfológicos (estructurales) han ayudado a los taxonomistas por
muchos años a clasificar organismos.
-Los microorganismos lucen tan similares que se dificulta su clasificación.
-La morfología celular dice poco sobre las relaciones filogenéticas.
CLASIFICACIÓN DE LOS METODOS DE IDENTIFICACIÓN

2. Métodos basados en tinción:


-Es posible sacar conclusiones en relación con la morfología de una
bacteria, examinando una lámina que fue sometida a un proceso de
tinción.
2. Métodos basados en tinción:

-Existen tipos de Tinción: Tinciones simples, tinciones diferenciales y tinción especiales.


TINCIÓN SIMPLES: es una solución acuosa o alcohólica de un colorante básico único.
TINCIÓN DIFERENCIALES: tinción para bacterias, como la tinción GRAM y la tinción de
ácido alcohol resistencia.
TINCIÓN ESPECIALES: Se utilizan para colorear partes de microorganismos como
endosporas, flagelos o cápsulas.
2. Métodos basados en tinción:
2. Métodos basados en tinción:
2. Métodos basados en tinción:
-La mayor parte de las bacterias, teñidas con Gram, las podemos clasificar
como gran positivas o gran negativas.
-Acido resistente.
CLASIFICACIÓN DE LOS METODOS DE IDENTIFICACIÓN

3. Métodos basados en pruebas bioquímicas,


han sido ampliamente utilizadas para diferenciar bacterias. Estas pruebas
se fundamentan en demostrar si el microorganismo es capaz de
fermentar azúcares, la presencia de enzimas, la degradación de
compuestos, la producción de compuestos coloreados, etc.
CLASIFICACIÓN DE LOS METODOS DE IDENTIFICACIÓN

4. Métodos en tipificación de fagos:


-Identificación entre un virus bacteriano (fago) y su célula bacteriana
sensible es sumamente especifica , ya que el proceso de adsorción se
encuentra mediado por receptores específicos tanto en el virus como en la
célula bacteriana.

Se le añade Puede
A una placa
una alícuota ocasionar la
con medio de
de un fago lisis de las
cultivo sólido
especifico bacterias
inoculado.
CLASIFICACIÓN DE LOS METODOS DE IDENTIFICACIÓN

5. Métodos de ensayos serológicos,


-Implican la utilización de preparaciones de inmunoglobulinas especificas
provenientes del suero o de un reactivo y que pueden ser de gran utilidad
en la identificación microbiana en muestras puras o en muestras biológicas.
-Se basan en la reacción de un antígeno presente en el agente microbiano
con su anticuerpo correspondiente.
CLASIFICACIÓN DE LOS METODOS DE IDENTIFICACIÓN

6. Métodos basados en biología molecular,


modernamente adquiere mas importancia el uso de métodos basados en
biología molecular donde a través de procedimientos y reactivos se pueden
detectar determinadas secuencias de ADN que son propias de un
determinado agente microbiano.
CLASIFICACIÓN DE LOS METODOS DE IDENTIFICACIÓN

-PCR identificación de microorganismos que


no pueden ser cultivados por métodos
convencionales.
-Se aumenta la cantidad de ADN hasta niveles
detectables mediante electroforesis o
mediante sondas de ADN.
MORFOLOGIA BACTERIANA
ESTRUCTURA BACTERIANA
FUNDAMENTOS DE LA TINCIÓN GRAM

La tinción de Gram o coloración de Gram es un


tipo de tinción diferencial empleado
en bacteriología para la IDENTIFICACION e
CLASIFICACION de bacterias, sobre todo en
muestras clínicas, hoy en día también para el campo
ambiental y agricultura.
Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología
celular bacteriana, como para poder realizar una
primera aproximación a la diferenciación bacteriana,
considerándose bacterias grampositivas a las que se
visualizan de color morado, y bacterias
gramnegativas a las que se visualizan de color
En 1853 nace Hans Christian Gram, rosado y rojo
bacteriólogo danés que desarrollo la tinción
de Gram, un método de amplio uso en
microbiología que ayuda a clasificar bacterias
y a hacerlas más visibles en el microscopio.
FUNDAMENTOS DE LA TINCIÓN GRAM

Un microorganismo gram positivo debe presentar una pared celular sana.


El mismo microorganismo, si sufre daño de la pared por una u otra causa,
se vuelve gram negativo. Esto indica la importancia de la pared para la
retención o el escape del colorante. Una posible teoría del mecanismo de
tinción es la siguiente:
El colorante básico entra al microorganismo, donde forma con
el yodo una laca insoluble en agua. El alcohol o
la acetona empleados para aclarar, deshidrata las paredes de los
microorganismos gram positivos, tratados con mordiente, y forma
una barrera que la laca no puede atravesar. En las células gram
negativas, los lípidos de la pared (más abundantes que en las
células gram positivas) se disuelven por este tratamiento, lo que
permite el escape del complejo de cristal violeta con yodo. Algunos
autores objetan esta teoría, pero es indudable la importancia general
de la pared celular.
PARED CELULAR
FUNDAMENTOS DE LA TINCIÓN GRAM
GRAM NEGATIVAS/ GRAM POSITIVAS
BACILOS GRAM POSITIVOS
ACTIVIDAD:
-INVESTIGAR 02 ARTICULOS CIENTIFICOS QUE HABLEN
DE BACTERIAS GRAM POSITIVAS Y/O GRAM NEGATIVAS
PARA EL TEMA AMBIENTAL (COCOS/ BACILOS )

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