GUÍA TÉCNICA GTC

COLOMBIANA 171

2008-03-26

MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS Y ALIMENTOS

PARA ANIMALES.
GUÍA PARA LA PREPARACIÓN Y PRODUCCIÓN
DE MEDIOS DE CULTIVO. GUÍA GENERAL PARA
LOS ENSAYOS DE DESEMPEÑO DE MEDIOS DE
CULTIVO

E: MICROBIOLOGY OF FOOD AND ANIMAL FEEDING

STUFFS. GUIDELINES ON PREPARATION AND
PRODUCTION OF CULTURE MEDIA. PRACTICAL
GUIDELINES ON PERFORMANCE TESTING OF CULTURE
MEDIA

CORRESPONDENCIA: esta guía es una adopción modificada

(MOD), respecto al documento de
referencia, la guía ISO/TS 11133-2.

DESCRIPTORES: microbiología; recuento, preparación y

producción de medios de cultivo
recuento de colonias; ensayos de
desempeño de medios de cultivo;
análisis microbiológico.

I.C.S.: 07.100.30

Editada por el Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación (ICONTEC)

Apartado 14237 Bogotá, D.C. - Tel. (571) 6078888 - Fax (571) 2221435

Prohibida su reproducción Editada 2008-04-09

 PRÓLOGO

El Instituto Colombiano de Normas Técnicas y Certificación, ICONTEC, es el organismo

nacional de normalización, según el Decreto 2269 de 1993.

ICONTEC es una entidad de carácter privado, sin ánimo de lucro, cuya Misión es fundamental
para brindar soporte y desarrollo al productor y protección al consumidor. Colabora con el
sector gubernamental y apoya al sector privado del país, para lograr ventajas competitivas en
los mercados interno y externo.

La representación de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalización Técnica

está garantizada por los Comités Técnicos y el período de Consulta Pública, este último
caracterizado por la participación del público en general.

La GTC 171 fue ratificada por el Consejo Directivo de 2008-03-26.

Esta guía está sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en
todo momento a las necesidades y exigencias actuales.

A continuación se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta guía a través
de su participación en el Comité Técnico 25 Microbiología.

ACEGRASAS S.A. FRIGORÍFICOS GUADALUPE S.A.

ALIMENTOS POLAR COLOMBIA S.A. INDEPENDIENTE
ALPINA PRODUCTOS ALIMENTICIOS S.A. INDUSTRIAS ALIMENTICIAS ZENU S.A.
ANNAR DIAGNOSTICA IMPORT LTDA. INSTITUTO DE GENÉTICA UNIVERSIDAD
ARCHIVO DE BOGOTÁ NACIONAL DE COLOMBIA
ASBIOQUIM LTDA. IVONNE BERNIER LABORATORIO LTDA.
ASEBIOL LABORATORIO LTDA. JHONSON DIVERSEY COLOMBIA LTDA.
ASINAL LTDA. KOYOMAD S.A.
ASOCIACIÓN COLOMBIANA DE CIENCIA Y LA CAMPIÑA S.A.
TECNOLOGÍA COSMÉTICA –ACCYTEC- LABCONTROL E.U.
ASOCIACIÓN DE MICROBIÓLOGOS LABFARVE LABORATORIO DE
JAVERIANOS FARMACOLOGÍA VEGETAL
BIANALISIS LABORATORIO DE GENÉTICA Y
BIOCONTROL LTDA. BIOLOGÍA MOLECULAR
BIOMERIEUX COLOMBIA S.A. LABORATORIO EMICAL LTDA.
BIOQUILAB LTDA. LABORATORIO SFC LTDA.
BIOTRENDS LABORATORIOS LTDA. LABORATORIOS GRAM LTDA.
CALIDAD INDUSTRIAL LTDA. LABORATORIOS MICROLAB LTDA.
CARULLA VIVERO S.A. LESNIAK E.U.
COLOMBINA S.A. MERCADEO DE ALIMENTOS DE
COMPAÑÍA NACIONAL DE CHOCOLATES S.A. COLOMBIA S.A.
CONGELAGRO S.A. MERCK S.A.
CREPES & WAFLES S.A. MICROBIÓLOGOS ASOCIADOS LTDA.
DON MAÍZ S.A. NULAB LTDA.
DUPONT QUALICON DE COLOMBIA PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA
ENZIPÁN DE COLOMBIA LTDA. PURIFICACIÓN Y ANÁLISIS DE FLUIDOS
FRIGORÍFICOS COLOMBIANOS S.A. LTDA.
QUIK LTDA. SUIZO S.A.
SECRETARÍA DISTRITAL DE SALUD DE UNIVERSIDAD DE LOS ANDES
BOGOTÁ UNIVERSIDAD MANUELA BELTRÁN
SERVICIOS DE LABORATORIO CLÍNICO UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
LTDA. VILASECA LTDA.
SOLUCIONES INTEGRALES
MICROBIOLÓGICAS E.U. –SIM-

Además de las anteriores, en Consulta Pública el Proyecto se puso a consideración de las

siguientes empresas:

3M COLOMBIA S.A. LA CONSTANCIA COLOMBIA

ALGARRA S.A. LABORATORIO MICROBIOLÓGICO SIS
AQUALAB LABORATOTORIO MICROBIOLÓGICO DE
AVESCO S.A. BARRANQUILLA
BAVARIA S.A. LARKIN
BLANCA USECHE LEVAPÁN S.A.
CASA LUKER S.A. LLOREDA GRASAS S.A.
CENICAÑA MEDIIMPLANTES LTDA.
CENTROAGUAS S.A. E.S.P. MICROLABY LTDA.
CERCAL LTDA. MINISTERIO DE PROTECCIÓN SOCIAL.
CERVECERÍA LEONA NESTLÉ DE COLOMBIA S.A.
COOPERATIVA DE GANADEROS DE PASIFLORA COLOMBIANA S.A.
CARTAGENA LTDA. PRODUCTORA DE CONCENTRADOS Y
EMPRESA DE ACUEDUCTO Y JUGOS DE FRUTA
ALCANTARILLADO DE BOGOTÁ QUALA S.A.
FABRICA DE ESPECIAS Y QUIOS LTDA.
CONDIMENTOS EL REY S.A. REPRESENTACIONES
FRIGORÍFICO GUADALUPE S.A. BIOTECNOLÓGICAS LTDA.
FRUGAL S.A. RICA RONDO, INDUSTRIA NACIONAL DE
HOSPITAL DEPARTAMENTAL DE ALIMENTOS S.A.
VILLAVICENCIO SCHERING COLOMBIANA S.A.
INGENIO PICHICHI S.A. TECNIMICRO LABORATORIO DE
INGENIO RIOPAILA ANÁLISIS
INSTITUTO COLOMBIANO UNIVERSIDAD CATÓLICA INGECAL
AGROPECUARIO ICA UNIVERSIDAD JORGE TADEO LOZANO
INSTITUTO NACIONAL DE SALUD
INVIMA - INSTITUTO NACIONAL DE
VIGILANCIA MÉDICA

ICONTEC cuenta con un Centro de Información que pone a disposición de los interesados
normas internacionales, regionales y nacionales y otros documentos relacionados.

DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN
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CONTENIDO

Página

INTRODUCCIÓN ......................................................................................................................1

1. OBJETO .......................................................................................................................1

2. REFERENCIAS NORMATIVAS ...................................................................................2

3. TÉRMINOS Y DEFINICIONES .....................................................................................2

4. CRITERIOS PARA CONTROL DE CALIDAD DE RUTINA .........................................2

4.1 CRITERIOS DE CALIDAD GENERALES ....................................................................2

4.2 CRITERIOS DE CALIDAD MICROBIOLÓGICA ..........................................................3

4.3 EVALUACIÓN DEL DESEMPEÑO E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS ..........5

5. MÉTODOS PARA USO EN LA DETERMINACIÓN DEL DESEMPEÑO

DE LOS MEDIOS DE CULTIVO ...................................................................................6

5.1 GENERALIDADES .......................................................................................................6

5.2 MICROORGANISMOS DE ENSAYO ...........................................................................6

5.3 MÉTODOS PARA LOS MEDIOS DE CULTIVO SÓLIDOS .........................................7

5.4 MÉTODOS PARA MEDIOS DE CULTIVO LÍQUIDOS ..............................................10

6. DOCUMENTACIÓN DE LOS RESULTADOS DE ENSAYO .....................................13

6.1 INFORMACIÓN SUMINISTRADA POR EL FABRICANTE .......................................13

6.2 TRAZABILIDAD .........................................................................................................14

BIBLIOGRAFÍA ......................................................................................................................39
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Página

DOCUMENTO DE REFERENCIA ..........................................................................................41

ANEXOS

ANEXO A (Informativo)
MÉTODO ECOMÉTRICO SEGÚN MOSSEL .........................................................................15

ANEXO B (Normativo)
ESTANDARIZACIÓN DEL INÓCULO ...................................................................................19

ANEXO C (Informativo)
EJEMPLO DE TARJETA PARA REGISTRO DE RESULTADOS DE ENSAYO DE MEDIOS
DE CULTIVO PREPARADOS POR EL LABORATORIO DEL USUARIO ............................25

ANEXO D (Normativo)
MICROORGANISMOS DE ENSAYO RECOMENDADOS PARA MEDIOS DE CULTIVO
USADOS COMÚNMENTE .....................................................................................................26

FIGURA

Figura 1. Patrón de inoculación por el método de siembra en estría

modificado y ángulo del asa..................................................................................................9
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MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS Y ALIMENTOS PARA ANIMALES.

GUÍA PARA LA PREPARACIÓN Y PRODUCCIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO.
GUÍA GENERAL PARA LOS ENSAYOS DE DESEMPEÑO DE MEDIOS DE CULTIVO

INTRODUCCIÓN

Para llevar a cabo análisis microbiológicos (de los alimentos, aguas y diferentes matrices) en forma
confiable es esencial usar medios de cultivo de calidad comprobada. Para todos los medios
descritos en los medios normalizados, es esencial definir los criterios mínimos de aceptación
requeridos para asegurar la confiabilidad de los medios de cultivo. Se recomienda que en la
determinación de las características de desempeño de un medio de cultivo los ensayos se lleven a
cabo de manera que cumplan lo establecido en la presente guía. Este documento se aplica a:

a) Medios preparados comercialmente listos para uso, o deshidratados.

b) Medios de cultivo preparados de componentes básicos en el laboratorio del usuario.

El establecimiento de criterios de desempeño mínimos aceptados ampliamente para los medios

debería conducir a una calidad más consistente de los productos fabricados comercialmente y
así reducir la extensión de los ensayos necesarios en el laboratorio del usuario.

Además, los criterios mínimos de aceptación medidos por los métodos definidos en la presente
guía pueden ser utilizados por todos los laboratorios microbiológicos para evaluar las
propiedades productivas, selectivas y/o electivas de un medio de cultivo.

En el análisis microbiológico de alimentos para seres humanos y animales, los requisitos de la

presente guía tienen prioridad en la evaluación de la calidad de los medios.

1. OBJETO

La presente guía establece los criterios y métodos para la determinación del desempeño de
medios de cultivo. Esta guía se aplica a:

- Organismos comerciales que producen o distribuyen, o ambos, medios listos para el

uso o semiterminados reconstituidos o deshidratados, a los laboratorios microbiológicos.

- Organismos no comerciales que suministran los medios a terceras partes.

- Laboratorios microbiológicos que preparan medios de cultivo para su propio uso y

evalúan estos medios.

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2. REFERENCIA NORMATIVA

El siguiente documento normativo referenciado es indispensables para la aplicación de este

documento normativo. Para referencias fechadas, se aplica únicamente la edición citada. Para
referencias no fechadas, se aplica la última edición del documento normativo referenciado
(incluida cualquier corrección).

GTC 78, Microbiología de alimentos y alimentos para animales. Guía para la preparación y
producción de medios de cultivo. Guía general para el aseguramiento de la calidad para la
preparación de los medios de cultivo en el laboratorio.

3. TÉRMINOS Y DEFINICIONES

Para los propósitos de este documento se aplican los términos y definiciones del documento
GTC 78.

Técnica ecométrica. Método que permite que sea determinado o evaluado el comportamiento
de un medio de cultivo, es decir, el grado hasta el que permite el crecimiento de los
microorganismos buscados y suprime el crecimiento de la microflora acompañante.

2
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BIBLIOGRAFÍA

[1] NTC 4092, Microbiología de alimentos y de alimentos para animales. Reglas generales
para el análisis microbiológico (ISO 7218).

[2] NTC 4491-1, Microbiología de alimentos y alimentos para animales. Preparación de

muestras para ensayo, suspensión inicial y diluciones decimales para análisis
microbiológico. Parte 1. Reglas generales para la preparación de la suspensión inicial y
de diluciones decimales (ISO 6887-1:1999).

[3] NTC 4491-2, Microbiología de alimentos y alimentos para animales. Preparación de

muestras para ensayo. Suspensión inicial y diluciones decimales para análisis
microbiológico. Parte 2: Reglas especificas para la preparación de carne y productos
cárnicos (ISO 6887-2).

[4] NTC 4491-3, Microbiología de alimentos y alimentos para animales. Preparación de

muestras para ensayo, suspensión inicial y diluciones decimales para análisis
microbiológico. Parte 3: Reglas especificas para preparación de muestras de pescado
y productos de la pesca (ISO 6887-3).

[5] NTC 4491-4, Microbiología de alimentos y alimentos para animales. Preparación de

muestras para ensayo, suspensión inicial y diluciones decimales para análisis
microbiológico. Parte 1: reglas generales para la preparación de la suspensión inicial y
de diluciones decimales (ISO 6887-4).

[6] NTC-ISO 2859-1, Procedimientos de muestreo para inspección por atributos. Parte 1:
planes de muestreo determinados por el nivel aceptable de calidad -NAC- para
inspección lote a lote.

[7] EN-ISO 8261, Milk and Milk Products. General Guidance for the Preparation of the
Test Samples, Initial Suspensions and Decimal Dilutions for Microbiological
Examination (ISO 8261:2001).

[8] Anon. 1998., Int. J. Food Microbiol. 45, 65.

[9] Corry JEL, Curtis GDW, Baird RM, 1995., Culture Media for Food Microbiology.
London: Elsevier Science, Volume 34.

[10] Diane Roberts, William Hooper, Melody Greenwood. Practical Food Microbiology.
Methods for the Examination of Food for Microorganisms of Public Health Significance.
Public Health Laboratory Service. London. 1995.

[11] ESCOBAR DE RICO, MYRIAM. 1998. Fundamentos de Microbiología. Editorial CEJA.

Pp. 183-185.

[12] HERITAGE, J., KILLINGTON, R. AND EVANS. E. 2000. Introductory Microbiology. Ed.
Cambridge University. Pp. 103-105.

[13] Mossel, Da, van Rossem, F. Koopmans, M., Verdouden, M., and Eelderink, I. Quality
Control of Solid Culture Media. A Comparison of the Classic and the Socalled Ecometric
Technique. J. Appl. Bacteriol. 2003.

3
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[14] STANIER, R. 1989. Microbiología. Ed. Reverté. 2ª Edición. Pp. 199-200.

[15] STANIER, R. 1997, Microbiology. Ed. Ward. Adelberg. 2ª Edición. Pp. 320.

[16] STANIER, R. 1989, Microbiología. Ed. Reverté. 2ª Edición. Pp. 199-200.

[15] TORTORA, G., FUNKE, B. AND CASE, C. 1997. Microbiology on Introduction. Ed.
Publishing Company. Pp. 176-177.

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IMPORTANTE

Este resumen no contiene toda la información necesaria para la aplicación del documento normativo original al que se
refiere la portada. ICONTEC lo creo para orientar a su cliente sobre el alcance de cada uno de sus documentos y facilitar
su consulta. Este resumen es de libre distribución y su uso es de total responsabilidad del usuario final.

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DOCUMENTO DE REFERENCIA

INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION. Microbiology of Food and Animal Feeding Stuffs. Guidelines on Preparation and
Production of Culture Media. Part 2: Practical Guidelines on Performance Testing of Culture Media. Geneve: ISO, 2004. 23 p. (ISO/TS 11133-2).